一种具有抗恶性肿瘤作用的药物组合及其制备方法

专利名称：：一种具有抗恶性肿瘤作用的药物组合及其制备方法一种具有抗恶性肿瘤作用的药物组合及其制备方法跌术领塽本发明涉及一种治疗恶性肿瘤的药物组合，该组合物含有由中药龙葵中提取的龙葵总生物碱和豆科植物苦豆草的种子苦豆子或豆科植物苦参的根中提取的苦参素，该药物组合物对恶性肿瘤的治疗有明显作用，本发明还提供了该药物组合物的制备方法。肖蹄*现代社会癌症(恶性肿瘤)已成为威胁人类生命健康的主要问题之一，世界卫生组织(WHO)报告表明，根据目前癌症的发病趋势，2020年全世界癌症发病率将比现在增加50%，全球每年新增癌症患者人数将达到1500万人。医疗界迫切需求安全有效的癌症治疗药物。本发明所述的龙葵总生物碱来源于单味药材——龙葵。龙葵为茄科茄属植物，一至数年生草本植物，性寒，味苦，微甘，具有小毒，归肺、胃、膀胱经，有清热解毒、活血散瘀、利水消肿、止咳祛痰的功效。龙葵可全草入药，可内服及外用。作为传统中药的龙葵近年来得到了国内外学者的广泛关注，海内外药学家在原有的中医药理论的基础上对其单味药的化学成分进行了进一步提纯分析，进行了大量的研究，获得了较为客观的信息，尤其是在抗肿瘤方面的研究，无论是单味药还是其复方制剂在基础和临床医学方面作了大量的工作。龙葵全草含苷类甾体生物碱、龙葵多糖、矿物质、维生素、色素、氨基酸等，龙葵浆果中的提取物中还含有酯、羧基化合物、甾醇、酚性化合物(其主要成分为黄色不饱和酯)，此外还含有皂苷。而对肿瘤治疗起关键作用的化学成分主要为龙葵总生物碱(包括澳洲茄碱、澳洲茄边碱等)，其次为多糖。本发明所述的苦参素，是从豆科植物苦豆草(Sophoroal邵ecuroidesL.)的种子苦豆子或豆科植物苦参(SophoroflavescensAtt.)的根中提取的一种生物碱，其中氧化苦参碱含量>98%,是苦参素中的主要成分。在对苦参素大量的药理和临床研究中，发现其有抗炎、抗病毒、抗肝纤维化和保肝降酶、抗癌、升高白细胞、抗心率失常等多种药理作用，且不良反应较少。我们结合文献资料，运用现代科学方法，在制备工艺、质量标准、药效、毒理及稳定性等方面进行了研究，以龙葵总生物碱和苦参素为原料制成药物制剂，用于癌症治疗，具有增效减毒的作用。目前，尚未见有关龙葵总生物碱及其单方、复方制剂应用于在抗肿瘤药物方面的报道，国内尚没有有关龙葵总生物碱的制剂在SFDA注册，国内外专利(中国专利、曰本专利、韩国专利、欧洲专利、美国专利等)均未出现与本发明相近的专利保护内容。鯽赠本发明的目的是提供一种抗恶性肿瘤疗效显著、毒副作用小、使用安全的药物组合及其制备方法。该药物组合以龙葵总生物碱含量大于50%的龙葵提取物与苦参素为原料。本发明是通过如下技术方案实现的①本发明的龙葵提取物中，龙葵总生物碱含量为50.0%以上。龙葵总生物碱的提取步骤如下取龙葵全草与/或果实，加入50%90%乙醇溶液提取23次，每次68倍量，回收乙醇，浓縮至相对密度1.25,浓縮液中加入24倍量的0.lmo1/1酸性溶液，充分搅拌，冷藏，过滤，滤渣用盐酸溶液洗涤13次，合并滤液和洗涤液，以弱极性或中等极性树脂吸附。树脂吸附后先用水冲洗树脂柱/床至流出液近中性；再以O.lmol/1碱性溶液冲洗树脂柱/床至流出液近无色，再以含醇量10%柳％乙醇液冲洗树脂柱庥至流出液近无色。弃去。再以邻90%乙醇进行洗脱，至洗脱液显无色，收集洗脱液，回收乙醇至无醇味，以0.51.5mol/l的碱性溶液调PH值至810，静置，冷藏，收集沉淀。自然晾干，即可得龙葵总生物碱含量大于邻％的龙葵提取物。②将上述龙葵提取物与苦参素以规定比例混合均匀，加入适当辅料，即得本发明所述药物组合。以上所述的碱性溶液选自氢氧化钠、氢氧化钙、氢氧化钾、氢氧化镁和氨水溶液；所述的酸性溶液逸自醋酸、盐酸、硫酸和柠檬酸溶液；所述的洗脱用有机溶剂为甲醇、乙醇、正丁醇、氯仿、苯的一项或者两项或者三项以任意比例形成的混合相。本发明的药物组合中含龙葵总生物碱含量大于50%的龙葵提取物l一重量份、苦参素1~3重量份。其中优选比例为龙葵总生物碱含量大于50%的龙葵提取物3重量份、苦参素2重量份。本发明的药物制剂含有1%99%的龙葵总生物碱含量大于邻％的龙葵提取物与苦参素混合物和99%1%的药用赋形剂(包括其它配伍用的药物)，优选含有45%95%的龙葵总生物碱含量大于50%的龙葵提取物与苦参素混合物和55%5%的药用赋形剂(包括其它配伍用的药物)，最好含有75%90%的龙葵总生物碱含量大于邻％的龙葵提取物与苦参素混合物和25%10%的药用賦形剂(包括其它配伍用的药物)。按药剂学方法，可以将本发明的龙葵总生物碱含量大于50%的龙葵提取物与苦参素组合物制备成多种临床药物剂型作为抗肿瘤药物，包括口服制剂或非肠道给药的剂型。所述口服制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、混悬剂、口服液体制剂等；所述非肠道给药剂型为注射液、输液剂、冻千注射剂、注射乳剂、气雾剂、栓剂等。本发明的抗肿瘤药物组合制剂中的辅料是指常规的赋形剂，如溶剂、崩解剂、矫味剂、粘合剂、着色剂、防腐剂等。本发明抗肿痏药物中的其它配伍用的药物，指的是以有效剂量的龙葵提取物与苦参素组合物为一定的药物原料，再配伍其它已允许合用的中药或化学药品。本发明的龙葵总生物碱含量大于50%的龙葵提取物与苦参素药物组^^及其药物制剂具有抗肿痼作用，是通过以下龙葵总生物碱含量大于邻％的龙葵提取物3重量份与苦参素2童量份的药物组合的药效学实验得到证实的。实验例l龙葵提取物与苦参素药物组合物体外对肿瘤的抑制作用龙葵提取物与苦参素药物组合物(3:2)分为五组剂量(0.5、2.5、12.5、50、l邻將加r1)，分别体外作用于10种肿瘤细胞。从整个实验可以看出，在l邻jig/ml及50jig/iia剂量下，药物组合对于10种肿瘤细胞的均表现出很强的抑制作用，随着药物浓度的降低，肿瘤抑制率逐渐下降，当药物组合浓度降至0.4jig/ml时，肿瘤细胞基本不受影响。该药物组合对各种肿瘤细胞的半数抑制率经计算分别为10.38Hg/ml(SMMC-7721)、15.47pg/ml(BGC-803)、12.45jig/ml(A549)、12.93pg/ml(LOVO)、11.08ng/ml(B16)、5.81將/ml(NCI-H460)、11.26ng/ml(KETR-3)、29.14ng/ml(PC-12)、5.10jig/ml(ECA-109)、120.17fig/ml(S180)。从肿瘤细胞形态上看，在150jig/ml及50jig/ml剂量作用下，肿瘤细胞结构均遭到破坏，细胞数量稀少；随着药物组合剂量的降低，肿瘤细胞形态趋于完整，但数量仍较少；在0.5n『m"剂量下，药物组合对肿瘤的抑制作用消失，细胞形态完整，数量较多。综上所述，龙葵总生物碱含量大于50%的龙葵提取物3重量份与苦参素2重量份的药物组合对于各种肿瘤细胞在体外均有较强的抑制作用，能明显抑制肿癯细胞在体外的生长，改变肿瘤细胞的形态，引起肿瘤细胞的死亡。实验例2龙葵提取物与苦参素药物组合物对Hep肝癌移植性肿瘤的影响实验方法无菌条件下抽取ICR小鼠腹腔内生长8天的腹水癌细胞悬液，癌细胞悬液和灭菌生理盐水按h3稀释，取ICR小鼠70只，早3各半，体重1822g,接种稀释后的癌细胞悬液0.2ml于腋部皮下。24h后随机分为7组，即模型组、5-Fu组(25mg/kg)、华蟾素组(3g/kg)和注射用龙葵提取物与苦参素药物组合小、中、大剂量组(1.2mg/kg、2.4mg/kg、4.8mg/kg)及口服组(2.4mg/kg),每组10只，分别静脉注射给予相应药物(模型组注射等容积生理盐水，口服组灌胃给药)，给药容积均为10ml/kg。给药8天后处死小鼠，剥取肿瘤，称重，按下面公式计算抑瘤率。实验重复2次。对照组平均瘤重一实验组平均瘤重对照组平均瘤蕙实验结果小鼠接种H印肝癌肿瘤后，4天皮下即可触到肿瘤，8天后解剖肿瘤平均重量均大于lg,药物组合三个剂量组小鼠肿瘤浸润范围均小于模型组,瘤体易剥离，肿瘤重量明显减轻(PO.Ol)。药物组合对小鼠体重增长率、胸腺指数、脾指数无明显影响。药物组合静脉注射三个剂量组的抑瘤率均大于口服组。结果见表1~5。表l注射用龙葵提取物与苦参素药物组合对H邻肝痛移植性实体癯抑瘤率的影响(S±S,n-10)组别剂量(班g/kg)第--次第:二次瘤重(g)抑瘤率(％)瘤重(g)抑瘤率(％)模型组一1.S1土(U7—1.58±0.13—5-Fu组2562.90.56±0.23"64.6华螗素组3X1030.94±(US*37.70.88±0.21"44.3小剂量组U0.97±0.32'35.81.0S±0.3S*33.S中剂量组2.442.446.2大剂暈组4.80.64±0.31"57.60.65±0,25"58,9口服组2.41.18±0.3423.81.21±(K3723,4注和模型组相比较，*P<0.05,**P<0.01。表2对H印肝痛移植性实体瘤小鼠体重增长率的影响(第一次实验)(x±S,n=10)组别剂量(mg/kg)给药前体重(g)实验结束时体重(g)体重增长率(％)模型组—2039±0.9727,84±1.7236.55'Fu组2520,41±0.9920.70±2,49"1.4华蠊素组3X10320,45±0*842652±1.5829,7小剂量组1.220,40±0.8926.70±1.6130.9中剂量组2.420.48±0.9127.89±2.1536.2大剂量组4.820.44±1.0127.27±1.然33.4口服组2.420.50±0.8326.34±1.7428.9注和模型组相比较，MP<(W>1,表3对Hep肝痛移植性实体瘤小鼠脚腺指数、脾指数的影响(第一次实验)(x±S)组别剂量(mg/kg)动物数胸腺指数脾指数模型组—100.297±0.0360.911±0.0755^Fu组2S100.559±0.139"华蛾素组3Xlfl3100.279±0.0420.881±0.135小剂量组1.2100.274±0緒0.挑3±0.077中剂量组2.4100.2S8土0.0480.929土0.096大剂量组4,8100302±0厕0.889±0.096口服组2.4100.277±0.0430.908±0.105注-和模型组相比较，"P<0.01。表4对H印肝癌移植性实体癯小鼠体重增长率的影响(第二次实验)(；±S,b-IO)组别剂量(mg/kg)给药前体重(g)实验结束时体重(g)体重增长率(％)模型组—2036±0.紗26.96±1,5932,45-Fu组2520.41±0.9220.47±2.66"03华糖素组3X1032032±0.9026.15±1.7128.7小剂量组1.22037±化8526.11±1.4928.2中剂量组2.420.33±0.9126.65±1.8431.1大剂量组4.820>29土0.8626.84士1.8132.3口服组2.420.26±0.9626.91±1.7232.8注和模型组相比较，"P<0.01。表5对Hep肝痛移植性实体瘤小鼠胸腺指数、脾指数的影响(第二次实验)(x±S)组别剂量(mg/kg〉动物数脚腺指数脾指数模型组—10(U61士0.0320.965±0.114S-Fu组25100.149±0.068"0.612±0.147"华蠊素组3X103100.249±0.0400.913土0,1S2小剂量组1.2100.259±0.0380.933±0,122中剂章组24100.2柳±0.0330.910±0.121大剂量组4.8100J74:fc0.0430.981±0.117口服组2.4100.268±0.0370.884±0.103注和模型组相比较，"P<0.01。实验例3龙葵提取物与苦参素药物组合物对S，移植性实体瘤抑瘤率的影响实验方法无菌条件下抽取ICR小鼠腹腔内生长8天的腹水癌细胞悬液，癌细胞悬液和灭菌生理盐水按1:3稀释，取ICR小鼠70只，芈纟各半，体重1822g,接种稀释后的癌细胞悬液0.21111于腋部皮下。24h后随机分为7组，即模型组、5-Fu组(25mg/kg)、华蟾素组(3g/kg)和注射用龙葵提取物与苦参素药物组合小、中、大剂量组(1.2mg/kg、2.4mg/kg、4.8mg/kg)及口服组(2.4mg/kg)，每组10只，分别静脉注射给予相应药物(模型组注射等容积生理盐水，口服组灌胄给药)，给药容积均为10ml/kg。给药8天后处死小鼠，剥取肿瘤，称重，按下面公式计算抑瘤率。实验重复2次d对瓶组平均癍重—实验组平均瘤重抑瘤率(％)=~~~xioo%对照组平均癯重试验结果小鼠接种S180移植性实体瘤后，3天皮下即可触到胂瘤，8天后解剖肿瘤平均童量均大于lg,注射用药物组合三个剂量组小鼠肿瘤浸润范围均小于模型组，瘤体易剥离，肿瘤重量明显减轻(PO.Ol)。注射用药物组合对小鼠体重增长率、胸腺指数、脾指数无明显影响。注射用药物组合静脉注射三个剂量组的抑瘤率均大于口服组。结果见表6~10。表6注射用龙葵提取物与苦参素药物组合对S刷移植性实体瘤抑瘤率的影响(；*S，n-ld)组别菘r第-一次第二二次瘤重(g)抑瘤率(％)瘤重(g)抑瘤率(％)模型组—l.SS±0.59—1.57士(U1—5"Fn组2S0,56土0.26"63.90.63±0.29"S9.9<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>2.420.38±0.8226.07±1.4227.94.820.19±0.9326.89±1.3033.22.420.31±0.%26.57±1.3230.8注和模型组相比较，PK01。表10对Si抑移植性实体痼小鼠胸腺指数、脾指数的影响(第二次实验)(5±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注和模型组相比较，P<0.01.实验例4龙葵提取物与苦参素药物组合物对Walk枕-256移植性鼠肝癌的影响实验方法将模型大鼠随机分为5组，每组10只。即模型组、华蟾素组(25mg/kg)和注射用龙葵提取物与苦参素药物组合小、中、大剂量组(1.2mg/fcg、2.4mg/kg、《8mg/kg)。各组大鼠分别给予相应受试药物，给药容积为10ml/kg,连续给药10天。给药10日后，脱颈椎处死大鼠，记录重量大小，按照下面公式计算肿瘤体积。肿瘤组织用10%甲醛固定，待做组织病理学观察。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>实验结果注射用龙葵提取物与苦参素药物组合中、大剂量组的肿瘤体积和模型组相比，显著縮小，具有统计学意义(P〈0.05)。病理学捡査评分显示注射用龙葵提取物与苦参素药物组合中、大剂量组可以减小肿瘤体积，抑制肿瘤生长(P〈0.05)。病理检査显示-(1)Walker-2S6癌性腹水种植到肝脏后，在肝脏内形成肿块，肿块内瘤中剂量组大剂量组口服组细胞异型性明显，大小、形态不一，核大、深染、核分裂相易见。肿瘤细胞排列紧密，部分区域有坏死及出血。肿瘤无包胰，向周边部肝细胞呈浸润性生长。(2)应用注射用龙葵提取物与苦参素药物组合后荷瘤大鼠数目减少，形成的肿瘤体积减小，坏死明显。肿瘤周边出现部分结缔组织包膜，并见单个核细胞浸润。上述结果说明注射用龙葵提取物与苦参素药物组合中、大剂量药物对种植性Walker-2S6肝癌有抑制作用。结果见表1112。表11对Walker-2S6移植性鼠肝痛肿癯体积的影响(x±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>注和模型组相比较，"P<0.01。表12对Walker-256移植性鼠肝癌病理评分的影响(5土S〉<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>注和模型组相比较，"P<0,01。实验例5龙葵提取物与苦参素药物组合物对荷H印肝癌小鼠白细胞、血小板的影响实验方法无菌条件下抽取ICR小鼠腹腔内生长8天的腹水癌细胞悬液，癌细胞悬液和灭菌生理盐水按1:3稀释，取ICR小鼠70只，接种稀释后的癌细胞悬液0.2ml于腋部皮下。24h后随机分为7组，即模型组AFii组(2Smg/kg)、华蟾素组(3g/kg)和注射用龙葵提取物与苦参素药物组合小、中、大剂量组(1.2mg/kg、2.4mg/kg、4.8mg/kg)及口服组(2.4mg/kg),每组10只，分别静脉注射给予相应药物(模型组注射等容积生理盐水，口服组灌胄给药)，给药容积均为10ml/kg。给药8天后处死小鼠，剥取肿瘤，称重，按下面公式计算抑瘤率。对照组平均瘤重一实验组平均癍重抑痼率(0/0)=~"X1柳％对照组平均瘤重实验结果小鼠接种Hep肝癌肿瘤后，4天皮下即可触到肿瘤，8天后解剖肿瘤平均重量均大乎lg，注射用龙葵提取物与苦参素药物组合三个剂量组小鼠肿瘤浸润范围均小于模型组，瘤体易剥离，肿瘤重量明显减轻(P《01)。注射用龙葵提取物与苦参素药物组合对小鼠白细胞、血小板、体重增长率、胸腺指数、脾指数无明显影响。注射用龙葵提取物与苦参素药物组合静脉注射三个剂量组的抑瘤率均大于口服组。结果见表1316。表13注射用龙葵提取物与苦参素药物组合对H印肝癌移植性实体瘤抑瘠率的影响(；±S,n-10)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>注-和模型组相比较，*P<0.05，**P<0.01。表14对H印肝癌移植性实体瘤小鼠体重增长率的影响(第一次实验)(S*S,n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>注和模型组相比较，"P<(M>1。表15对Hep肝癌移植性实体癯小鼠脚腺指数、脾指数的影响(第一次实验)(5±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>S-Fu组25100.141±0,079(U60士0.158华維素组3X103100.259±0.0510.848±0.099小剂量组1.2100.245±0.0420.874±0,126中剂量组2.4100.228±0.030"0.817±0.063大剂量组4.8100.290±0.0530.787±0.071口服组2.4100.262士0.0S20.781±0.072注和模型组相比较，"P<0jDl。表16对H邻肝癌移植性实体癍小鼠白细胞、血小板计数的影响(；±S)组别剂量(mg/kg)动物数白细胞血小板模型组一1011.73±7.35848.7±26935-Fu组2S103.16±1.42"776.4±401^8华維素组3X1031011.12±5.321013.6±1407.8小剂量组1.21012^9±5.68IOIS.S土2076.9中剂量组2.41012.64±6.01877.8±252.6大剂量组4.8109.56±3.85806.4±182.6口服组2.4108,47±4.64853.4士298.9注和模型组相比较，"P<0.01。实验例6龙葵提取物与苦参素药物组合物对荷瘤(Hep)小鼠6()C0放疗的增效减毒作用实验方法无菌条件下抽取ICR小鼠腹腔内生长8天的腹水癌细胞悬液，癌细胞悬液和灭菌生理盐水按1:3稀释，取ICR小鼠70只，罕^各半，体重1822g，接种稀释后的癌细胞悬液0.2ml于腋部皮下。24h后随机分为7组，即模型组、放疗组、放疗加华蟾素组(3g/kg)和放疗加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合小、中、大剂量组(1.2mg/kg、2.4mg/kg、4.8mg/kg)及口服组(2.4mg/kg),每组10只，除模型组外，其他各组小鼠接种24h后均用60Co照射一次，照射剂量为邻OCgy，射后2h，放疗加华蟾素组，放疗加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合小、中、大剂量组分别静脉注射给予相应药物，模型组注射等容积生理盐水，口服组灌胃给药。8天后眼眶取血，测定血常规。取血后处死小鼠，剥取肿瘤，称重，按下面公式计算抑瘤率；取胸腺、脾脏，称重，按照下面公式计算胸腺指数和脾指数。抑瘤率(％)=对照组平均癍重一实验组平均癍重胸腺(脾)指数=重脚腺(脾〉重量(g)体重xioo实验结果小鼠接种Hep肝癌移植性实体瘤后，模型组4天皮下即可触到肿癯，8天后解剖肿瘤平均重量大于lg,放疗及放疗加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合三个剂暈组小鼠肿瘤浸润范围均小于模型组，瘤体易剥离，肿瘤重量明显减轻(P^).01)。放疗加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合三个剂量组瘤重均小于放疗组(P〈0力5，P<0.01)，表明注射用龙葵提取物与苦参素药物组合对6eCo放疗具有一定的增效作用。放疗加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合三个剂量组的白细胞和血小板计数均大于放疗组，但无统计学意义。放疗加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合三个剂量组小鼠体重增长率均高于放疗组(P<0.01)，放疗加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合大剂量的胸腺指数高于放疗组(P^).OS)，具有统计学意义。结果见表1720。表17对荷瘤(H邻)小鼠抑癍率的影响(玉土S)组别剂量(mg/kg)动物数瘤重(g)抑瘤率模型组—10一放疗组500cGY101.07±0.38AA29.6放疗+华蟾素500cGY+3X10*100,61±0.37AA'59.9放疗+小剂量组S00cGY+1.2100.62±(U0AA*SSf.2放疗+中剂量组500cGY+2.410(K53±0.2SAA"6S.1放疗+大剂量组邻0cGY+4.8100.35±<U6AA"76.9放疗+口服组500cGY+2.4100.80±0.34AA47.4注和模型组相比较^<0.01;和放疗组相比较，*P<0.05,"><0.01。表18对荷癍(Hep)小鼠白细胞、血小板计数的影响(i±S)组别剂量(mg/kg)动物数白细胞血小板模型组—109.91±1,5，5S8.6±1893放疗组500cGY101.02±0.39AA45J±26.8AA放疗+华搶素SOOcGY+3X103100.88±0.97AA5U±19.7AA放疗+小剂量组500cGY+1.2100.98±0,66AA48.4±31.5AA放疗+中剂量组邻0cGY+2.4101.21±0，75AA71.S±40.9AA放疗+大剂量组SOOeGY+4.8101.42±0.58AA72.9±24.4'放疗+口服组500cGY+2.4100.10±0.32AA67.6±30.1注和模型组相比较，AAP<0.01:放疗组相比较，'P<0.05,表19对荷瘤(H印)小鼠体重增长率的影响(;c±S,n=10)组别剂量(mg/kg)给药前体重(g)实验结束时体重(g)体重增长率(％)模型组一2(K14士0.9925.83±1.2128.2放疗组邻0cGY20.25±1.0218.6S±1.19AA-7.9放疗+华敏素500cGY+3X10320,73±0.8722.22±152**7.2放疗+小剂量组500cGY+1.220.21±1.1021.04±1.27"4.1放疗+中剂量组500cGY+2.419.87土1.08加.92土L36"S.3放疗+大剂暈组邻0cGY+4.819.98±0.9221.54士1.08"7.8放疗+口服组5O0cGY+2.420.32±0.89-3.4注和模型组相比较，AAP<0.01;和放疗组相比较，*P<O.OS,"P<0.01。表20对荷瘤(H印)小鼠f腺指数、脾指数的影响(x±s)组别剂量(mg/kg)动物数胸腺指数脾指数模型组一100.298±0.0S10.9l8±0.104放疗组邻0cGY100.167±0.068AA0.406±0.203AA放疗+华蠊素邻0tGY+3X103100.199±0.0470.467±0.131放疗+小剂量组S0OcGY+1.2100.237±0.0860.461±0.165放疗+中剂量组5柳cGY+2.4100.224±0.0660.482±(U88放疗+大剂量组500cGY+4.8100.249±0.072'(K539±0.237放疗+口服组500cGY+2.4100.401±0.082注和模型组相比较，AAP<0.01;和放疗组比较'P<0.05fl实验例7龙葵提取物与苦参素药物组合物对荷瘤(S，)小鼠CTX化疗的增效减毒作用实验方法无菌条件下抽取ICR小鼠腹腔内生长8天的腹水癌细胞悬液，癌细胞悬液和灭菌生理盐水按h3稀释，取ICR小鼠70只，早S各半，体重lS22g，接种稀释后的癌细胞悬液0.2ml于腋部皮下。24h后随机分为7组，即模型组、CTX组(10mg/kg)、CTX(lOmg/kg)加华蟾素组(3g/kg)和CTX(10mg/kg)加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合小、中、大剂量组(1,2nig/kg、2.4mg/kg、4.8mg/kg)及口服组(2.4mg/kg)，每组10只，分别静脉注射给予相应药物(模型组注射等容积生理盐水，口服组灌胃给药)，8天后眼眶取血，测定血常规。取血后处死小鼠，剥取肿瘤，称重，按下面公式计算抑瘤率；脾脏，称重，按照下面公式计算胸腺指数和脾指数。对照组平均癯重一实验组平均癯重抑癯率(％)=对照组平均癯重x柳％脚腺(脾)指数=胸腺(脾)重量(g)体重Xl柳实验结果小鼠接种S，移植性实体瘤后，3天皮下即可触到肿瘤，8天后解剖肿瘤平均重量均大于lg，CTX及CTX加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合三个剂量组小鼠肿瘤浸润范围均小于模型组，瘤体易剥离，肿瘤重量明显减轻(P^).01)。CTX加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合三个剂量组瘤重均小于CTX组，其中CTX加注射用龙葵总生物碱中、大剂量组和CTX组相比，有统计学意义(PO.OS,P<0.01)。表明注射用龙葵提取物与苦参素药物组合对CTX具有一定的抗肿瘤增效作用。CTX加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合三个剂量组的白细胞和血小板和CTX组相比，无显著差异。CTX加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合大剂量组小鼠的胸腺指数显著高于CTX组(P<0.05)，CTX加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合三个剂量组小鼠的体重增长率均显著高于CTX组(P《(M)5，P<0.01)。结果见表2124。表21对荷癍(S柳)小鼠抑癯率的影响(5±S)组别剂量(mg/kg)动物数癍重(g)抑瘤率模型组—101.52±0.54一CTX组10101力5±0.4130.9CTX+华蟣素CTX+小剂量賴10+3X103MJ+1.210100.76±0.30AA57.2邻.OCTX+中剂量组CTX+大剂量賴10+2.410+4.810100.62±0.29厶厶*(US±0.24AA"S9.276.9CTX+口服组100.89±0.45A41.4注和模型组相比较AAp〈Ml:和CTX组相比较，'P〈0,OS,"P<0.01。<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>注和模型组相比较，AAP<0.01;和CTX组比较、<0.05。实验例8龙葵提取物与苦参素药物组合物对荷瘤(H印)小鼠MMC化疗的增效减毒作用实验方法无菌条件下抽取ICR小鼠腹腔内生长8天的腹水癌细胞悬液，癌细胞悬液和灭菌生理盐水按1:3稀释，取1CR小鼠70只，早悉各半，体重1822g，接种稀释后的癌细胞悬液IUml于腋部皮下。24h后随机分为7组，即模型组、MMC组(lmg/kg)、MMC(lmg/kg)加华蟾素组(3g/kg)和MMC(lmg/kg)加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合小、中、大剂量组(1.2mg/kg、2.4mg/kg、4.8mg/kg)及口服组(2.4mg/kg),每组10只，分别静脉注射给予相应药物(模型组注射等容积生理盐水，口服组灌胃给药)，8天后处死小鼠，剥取肿瘤，称重，按下面公式计算抑瘤率。取胸腺、脾脏，称重，按照下面公式计算胸腺指数和脾指数。对照组平均瘤重一实验组平均瘤重抑癍率(％)=胸腺(脾)指数=对照组平均癯重胸腺(脾)重量(g)体重xioo实验结果小鼠接种H印肝癌移植性实体瘤后，4天皮下即可触到肿瘤，8天后解剖肿瘤平均重量均大于lg,MMC及MMC加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合三个剂量组小鼠肿瘤浸润范围均小于模型组，瘤体易剥离，肿瘤重量明显减轻(P《0.01)。MMC加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合三个剂量组瘤重均小于MMC组，其中MMC加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合中、大剂量组和MMC组相比，有统计学意义，<0.01>。表明注射用龙葵提取物与苦参素药物组合对MMC具有一定的抗肿瘤增效作用。MMC加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合三个剂量组的白细胞、血小板、胸腺指数和脾指数和MMC组相比，无显著差异。MMC加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合三个剂量组小鼠的体重增长率均显著高于MMC组(PO.Ol)。结果见表2528。表25对荷瘤(H邻)小鼠小鼠抑癯率的影响(玉土S)组别剂暈(mg/kg)动物数瘤重(g)抑癍率模型组—10l.S9±0.44一MMC组1101.03±0.42AA3S.2MMC+华糖素1+3X103100.64±032AA*S9.7MMC十小剂量组1+1.2100.71±(K3SAA55.3MMC+中剂量组1+2.410O.S3±030AA"66.7MMC+大剂量组1+4.8100.37±0.24AA"76.7MMC+口脤组1+2.4100.87±0.40AA45.2注和模型组相比较AAp〈(K01:和MMC组相比较，'P<0.05，"P<0.01。表26对荷癯(H邻)小鼠白细胞、血小板计数的影响(JC±S)组别剂量(mg/kg)动物数白细胞血小板模型组—1010.88±5.121007.8±123.4MMC组1101.27±0.98AAMMC+华糖素1+3X103100.98±0.61AA'205.1±73.5厶厶MMC+小剂量组1+1.2101.85±0.92AA214.7±75.9AAMMC+中剂量组1+2.4101.01±0.63AA287.4±104.6AAMMC+大剂量组1+4.8101.13士0,67厶a237.1±88.6AAMMC+口服组1+2.4101.35±0.67AA253.6±66.9AA注-和模型组相比较，aap<o.o:l:和MMC组比较'P<0.05,表27对荷癯(H印)小鼠体重增长率的影响(S±S,n=10)组别剂量(mg/kg)给药前体重实验结束时体重体重增长率(％)模型组—19.75士0.8724.98±0.9226.5MMC组119.92土0.8918.68±1.95AA■6.2MMC+华螗素1+3X10319.47±0.8121.59±1.86"10.9MMC+小剂量组1+1.219.97士1.0222.21±2.07"11.2MMC+中剂量组1+2.419.58±0.9311,0MMC+大剂量组1+4.819.74±0.9522.32±2.0广13.1MMC+口服组1+2.419.88±0.9121.57士2.18'8.S注和模型组相比较，AAP<0.01;和MMC组比较，'F<O.OS,"P<0.01。表28对荷瘤(H印)小鼠胸腺指数、脾指数的影响(x±S,n-10)组别剂量(mg/kg)胸腺(g)胸腺指数脾指数模型组一100.338±0.0810.859±0,165MMC组1100.219±0.112A0.617±0.214AMMC+华艙素1+3X103100.237±0.0910.622±0.116MMC+小剂量组1+1.2100.248±0.1770.661±0.140MMC+中剂量组1+2.4100.262±0.1430.678±0.075MMC+大剂量组1+4.8100,271±0.1050.701±0.088MMC+口服组1+2.2100.209±0.0930.587±0.203注和模型组相比较，aap<0.01;和MMC组比较'p<0.05。实验例9龙葵提取物与苦参素药物组合物对荷瘤(H印)小鼠5-Fu化疗的增效减毒作用实验方法无菌条件下抽取ICR小鼠腹腔内生长8天的腹水癌细胞悬液，癌细胞悬液和灭菌生理盐水按1:3稀释，取ICR小鼠70只，早S各半，体重1822g,接种稀释后的癌细胞悬液0.2ml于腋部皮下。24h后随机分为7组，即模型组、5-Fu组(15mg/kg)、5-Fu(15mg/kg)加华蟾素组(3g/kg)和5-Fu(15mg/kg)加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合小、中、大剂量组(1.2mg/kg、2.4mg/kg、4.8mg/kg)和口服组(2.4mg/kg)，每组10只，分别静脉注射给予相应药物(模型组注射等容积生理盐水，5-Fii组隔日注射一次)，8天后处死小鼠，剥取肿瘤，称重，按下面公式计算抑瘤率。抑癍率(%)=_对磨均癯重—实验组平均癍重_X1TO%1^对照组平均瘤重实验结果小鼠接种Hep肝癌移植性实体瘤后，4天皮下即可触到肿瘤，8天后解剖肿瘤平均重量均大于lg,5-Fu及5>Fu加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合三个剂量组小鼠肿瘤浸润范围均小于模型组，瘤体易剥离，肿瘤重量明显减轻(PO.01)。5-Fu加注射用龙葵总生物碱三个剂量组瘤重均小于5-Fn组，其中5-Fu加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合大剂量组和5-Fu组相比，有统计学意义(PO.Ol)。表明注射用龙葵提取物与苦参素药物组合对5-Fu具有一定的抗肿瘤增效作用。5-Fu加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合三个剂量组的白细胞、血小板、脾指数和5"Fu组相比，无显著差异。5-Fu加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合大剂量组小鼠的胸腺指数显著高于5-Fu组(PO.0S)，5-Fu加注射用龙葵提取物与苦参素药物组合三个剂量组小鼠的体重增长率均显著高于5-Fu组(P0.05)。结果见表2932。表29对荷瘤(H印)小鼠抑癍率的影响(5±S)组别剂量(mg/kg)动物数癍重(g)抑瘤率模型组一10一5"Fu组1S100.92±0.41AA36.65-Fu+华搶素15+3X10310O.S9±0.37AAS-Fu+小剂量5-Fu+中剂量15+1.2100.73±0.43AA49.715+2.4100.56±0.32AA61.45~Fu+大刑霣如15+4.81076.65-Fu+口服组15+2.4100.85±0.40AA41.4注和模型组相比较AAp〈0.01:和CTX组相比较，'P<0.05,"P<0.01,表30对荷癯(H印)小鼠白细胞、血小板计数的影响(；±S)组别剂量(mg/kg)动物数白细胞血小板模型组一1010.00士2.72795.8士10S.35"Fu组15103.42±1.05AA747.1土148.9S-Fn+华螗素5-Fu+小剂量賴5-Fu+中剂量5-Fu+大剂量賴15+3X10315+1.21S+2.415+4.8101010103.19±1.18AA4.02±1.99AA5.28±2.84厶厶4.99±3.31厶&677.9±162.4719.4±151.7841.6±138.9673.7土72.55-Fu+口服组15+2.4103.13±1.17AAS9L9士115.8注和模型组相比较，AAP<0.01。表31对荷瘤(H印)小鼠体重增长率的影响(jc±S,n-10)组别剂量(mg/kg)给药前体重实验结束时体重体重增长率(％)模型组—加.14±1.1526.54±1.2331.85-Fu组152037±1.2119.88±1.74AA-2.45"Fu+华蠊素15+3X10320,28±1.1921.74±1.38'7.25-Fu+小剂量组15+1.220.45±1.0923.19±2.09'13.4S-Fu+中剂量组1S+2.42ft.ll±0.9822.22±1.95'10.55-Fu+大剂量组15+4.820.09±1.0122.92±1.92'9.15-Fu+口服组15+2.420.26±1.2420.88±1363.1注和模型组相比较，AAP<0.01;和5"Fu组比较，'P<0.OS,"P<0.01。表32对荷瘤(H印)小鼠胸腺指数、脾措数的影响(；±S,n=10)组别剂量(mg/kg)脚腺(g)胸腺指数脾指数模型组一100.325±0.062化932土0.0915-Fu组15100.211±0.067AA0.564±0.192AA5-Fu+华錄素1S+3X103100.223±0.0650，±0.144S"Fm+小剂量组15+1.2100JS1±0.0760.593±0.1765-Fu+中剂量组15+2.4100.239±0.1110,611±0,158S-Fu+大剂量组1S+4.8100.278±0.068*0.621±0.1855-Fu+口服组1S+2.4100.22S士0.0750.577±0.166注和模型组相比较，AAP<0.01:和5-Fu组比较*P<0.05.实验例10龙葵提取物与苦参素药物组合物对荷瘤小鼠TNF-ci，IL-2的影响实验方法无菌条件下抽取ICR小鼠腹腔内生长8天的腹水癌细胞悬液，癌细胞悬液和灭菌生理盐水按1:3稀释，取ICR小鼠70只，早$各半，体重1822g,接种稀释后的癌细胞悬液0.2ml于腋部皮下。24h后随机分为7组，即模型组、S-Fu组(25mg/kg)、华蟾素组(3g/kg)和注射用龙葵提取物与苦参素药物组合小、中、大剂量组(1.2mg/kg、2.4mg/kg、4.8mg/kg)及口服组(2.4mg/kg)，每组10只，另取10只小鼠作为正常对照组。分别静脉注射给予相应药物(正常对照组和模型组注射等容积生理盐水，口服组灌胃给药)。给药容积均为10ml/kg。给药8天后，眼眶取血，常规分离血清，-20t:保存，待测TNF-d和IL-2;脱颈椎处死小鼠，剥取肿瘤，称重，按照下面公式计算抑瘤率；取胸腺、脾脏，称重，按下面公式计算胸腺指数和脾指数。对照组平均癍重一实验组平均瘤重抑瘤率(％>=脚腺(脾)指数-对照组平均瘤重胸腺(脾)重量(g)体重xioo实验结果小鼠接种S180移植性实体瘤后，3天皮下即可触到肿瘤，8天后解剖肿瘤平均重量均大于lg，注射用龙葵提取物与苦参素药物组合三个剂量组小鼠肿瘤浸润范围均小于模型组，瘤体易剥离，肿瘤重量明显减轻(<0.01)。模型组小鼠血清TNF-d、IL-2含量均低于正常对照组，注射用龙葵提取物与苦参素药物组合各组均可以升高血清TNF-a、IL-2含量，其中注射用龙葵提取物与苦参素药物组合中、大剂量组和模型组相比，具有统计学意义(P^.05,PO.Ol)。结果见表3335。表33注射用龙葵提取物与苦参素药物组合对S鹏移植性实体癍抑癯率的影响(5±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>口服组2.4101.22±0.3317.6注和模型组相比较，*P<0.05,**P<0.01。表34注射用龙葵提取物与苦参素药物组合对S,助移植性实体瘤小鼠胸腺指数、脾指数的影响(S±S)组别剂量(mg/kg)动物数胸腺指数脾指数正常对照组—100.2S2±0.0560.878±0.192模型组一100.253±0.0570.871±(U055-Fu组25100.131±0.054**0.S91±0.212*华鳙素组3X103100.223±0,0620.779±0.256小剂量组1.2100.242±0.0750.879±0.294中剂量组2.4100.231±0細0.822±0.197大剂量组4.8100.263±0.0620.915±0.186口服组2.4100.225±0.0510.787±0.210注-和正常对照组组相比较，*P<O.OS,**P<0.01。表3S对S,抑移植性实体癍小鼠血清TNF-a和1L"2含量的影响(；±S)组别剂量(mg/kg)动物数TNF-a(ng/ml)IL-2(ng/ml)正常对照组—101.42±0.281.25士0.75模型组一101.01±0.30AA1.01±0.48S-Fu组25101.08±0.410.94±0.31华蟾素组3X103101.07±0.321.49±1.38小剂量组1.2101.26±0.321.37±1.07中剂量组2.4101.33±0.25'2.08±1.39'大剂量组4.810"0±0.18**2.19土1,S1'口服组2.410!25±0.34124±1.11注和正常对照组相比较，AAP<0.01;和模型组比较><0.05,"P<0.01。实验例11龙葵提取物与苦参素药物组合物对小鼠血清溶血素量的影响实验方法ICR小鼠70只，体重2(K24g，雌雄各半。然后随机分为7组，每组10只，即正常对照组、模型组、黄芪注射液组(6.7g/kg)和注射用龙葵提取物与苦参素药物组合小、中、大剂量组(1.2mg/kg、2.4mg/kg、4.8mg/kg)和口服组(2.4mg/kg)。各组小鼠静脉注射给予相应受试药物(正常对照组和模型组静脉注射给予等容积生理盐水，口服组灌胃给药)，给药容积为10ml/kg,连续给7日。给药后第4、6日，除正常对照组其余各组分别腹腔注射30mg/kg环磷酰胺，正常对照组注射等容积生理盐水。各组小鼠从第3日开始分别腹腔注射5%绵羊红细胞生理盐水悬液0.2ml进行免疫，共4日。末次灌胃给药后30min，小鼠眼眶取血，分离血清邻jil,用生理盐水稀释500倍。取稀释血清lml，加入5%绵羊红细胞0.5ml以及10%补体(新鲜豚鼠混合血清经SRBC<10:1>于4°C吸收30min后置于-20。C备用)1ml，混匀后置于37°C恒温水浴中30min，然后移至冰浴中终止反应。1500rpm离心5min，取上清液lml，加都氏试剂(碳酸氢钠1.0g、高铁氰化钾0.2g、氰化钾0.05g加入蒸馏水1000ml)3ml，放置10min后，于540nm处测吸收度值。SRBC半数溶血时的吸收度值取S%SRBC(U5ml加都氏液至4ml，放置10mill后，比色读取吸收光度值。按下面公式计算每只小鼠样品的半数溶血值(HC邻)。样品的吸收度值SRBC半数溶血时的吸收度值X稀释倍数实验结果造模后小鼠血清溶血素量下降，模型组与正常对照组比较有显著性差异(p<0.05)，表明小鼠经造模后血清血溶素水平明显下降；注射用龙葵提取物与苦参素药物组合三个剂量组均能明显升高小鼠血清血溶素量水平，与模型组比较有显著性差异(p<0.05)。结果见表36。表36对小鼠血清溶血素的影响(；±S)组别剂量(mg/kg)动物数半数溶血值(HCso)正常对照组—3幼.12±30.56模型组一10149.47±33.14AA黄芪注射液1X10410228.9S±54.87**小剂量组1.210202.14±50.55*中剂量组2.410230.73±S3.26"大剂暈组4.810232.24±64.75**口瓶组2.410181.21±43.48注和正常对照组相比，AAP<0.01;和模型组相比较，'P<O.OS,"P<0.01。实验例12龙葵提取物与苦参素药物组合物对小鼠炭粒廓清的影响实验方法ICR小鼠卯只，体重1822g,雌雄各半。然后随机分为6组，每组15只，即正常对照组、黄芪注射液组(6.7g/kg)和注射用龙葵提取物与苦参素药物组合小、中、大剂量组(1.2mg/kg、2.4mg/kg、4.8mg/kg)和口服组(2mg/kg)。静脉注射给予相应受试药物(正常对照组和模型组静脉注射给予等容积生理盐水，口服组灌胃给药)，给药容积为10ml/kg,连续给5日。末次给药后30min,尾静脉注射25%的印度墨汁0.1ml/10g,于2min和10min分别眼眶取血20jil，加入盛有2ml的碳酸钠溶液(浓度1mg/ml)试管中，在6柳nm出测吸光度值0D2min和OD10min,将采完血液的小鼠处死，取肝、重。按下列公式计算廓清指数k及吞噬指数a。结果进行组间t检验。X稀释倍数a=体重(g)肝脾(g)1/3实验结果和正常对照组相比，注射用龙葵提取物与苦参素药物组合中、大剂量组均可以增加小鼠的碳粒廓清指数及吞噬指数，具有统计学意义(P<0.05，P<0,01)，表明注射用龙葵提取物与苦参素药物组合可以增强小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能。结果见表37。表37对小鼠碳粒:廓清率的影响(x±S,n-15)组别剂量(mg/kg)动物数(只〉廓清指数k吞噬指数a正常对照组一150.040^0.0106.298±0.629黄芪注射液1X104150.052±0.014*6.887±0.818*小剂量组1.2150.048±0.012'6.825±1.292中剂量组2.4150.054±0.015*7.034±1.126*大剂量组4.8157.075±1.223'口脤组2.4150.043±0雄AAp<0.01,与空白对照组比较:p<0.05,**1<0.01与模型组|^,实施4龙葵提取物与苦参素药物组合的制备(1)取龙葵全草与/或果实加入80%乙醇溶液提取3次，每次8倍量，回收乙醇，浓縮至相对密度1.25，浓縮液中加入3倍量的0.lmo1/1盐酸溶液，充分搅拌，冷藏，过滤，滤渣用盐酸溶液洗涤2次，合并滤液和洗涤液，以弱极性或中等极性树脂吸附。树脂吸附后先用水冲洗树脂柱/床至流出液近中性；再以O.lraol/I氨水溶液冲洗树脂柱/床至流出液近无色，再以含醇量20/。乙醇液冲洗树脂柱/床至流出液近无色。弃去。再以70%乙醇进行洗脱，至洗脱液显无色，收集洗脱液，回收乙醇至无醇味，以l.Omoi/1的氢氧化钠溶液调PH值至9,静置，冷藏，收集沉淀。自然晾干，即可得龙葵总生物碱含量大于50%的龙葵提将上述龙葵提取物3重量份与苦参素2重量份以混合均匀，即得本发明所述药物组合①。以上所述的碱性溶液选自氢氧化钠、氢氧化钙、氢氧化钾、氢氧化镁和氨水溶液；所述的酸性溶液选自醋酸、盐酸、硫酸和拧檬酸溶液；所述的洗脱用有机溶剂为甲醇、乙醇、正丁醇、氯仿、苯的一项或者两项或者三项以任意比例形成的混合相p(2)取龙葵全草与/或泉实加入70%乙醇溶液提取3次，每次7倍量，回收乙醇，浓缩至相对密度1.15,浓缩液中加入2.5倍量的0.lmol/1盐酸溶液，充分搅拌，冷藏，过滤，滤渣用盐酸溶液洗涤3次，合并滤液和洗涤液，以弱极性或中等极性树脂吸附。树脂吸附后先用水冲洗树脂柱/床至流出液近中性；再以0.1mol/i氢氧化钠溶液冲洗树脂掛床至流出液近无色，再以含醇暈30%乙醇液冲洗树脂柱/床至流出液近无色。弃去。再以75%乙醇进行洗脱，至洗脱液显无色，收集洗脱液，回收乙醇至无醇味，以l.Omol/l的氢氧化钠溶液调PH值至9，静置，冷藏，收集沉淀。自然晾干，即可得龙葵总生物碱含量大于50%的龙葵提取物提取物。将上述龙葵提取物2重量份与苦参素1重量份以混合均匀，即得本发明所述药物组合②。以上所述的碱性溶液选自氢氧化钠、氢氧化钙、氢氧化钾、氢氧化镁和氨水溶液；所述的酸性溶液选自醋酸、盐酸、硫酸和柠檬酸溶液；所述的洗脱用有机溶剂为甲醇、乙醇、正丁醇、氯仿、苯的一项或者两项或者三项以任意比例形成的混合相。(3)取龙葵全草与/或果实加入75%乙醇溶液提取2次，每次8倍量，回收乙醇，浓缩至相对密度1.10，浓縮液中加入3倍量的0.15mol/l盐酸溶液，充分搅拌，冷藏，过滤，滤渣用盐酸溶液洗涤3次，合并滤液和洗涤液，以弱极性或中等极性树脂吸附。树脂吸附后先用水冲洗树脂柱/床至流出液近中性；再以O.lmol/I氨水溶液冲洗树脂柱/床至流出液近无色，再以含醇量20%乙醇液冲洗树脂掛床至流出液近无色。弃去。再以70%乙醇进行洗脱，至洗脱液显无色，收集洗脱液，回收乙醇至无醇味，以l.Omol/l的氢氧化镁溶液调PH值至10,静置，冷藏，收集沉淀。自然晾干，即可得龙葵总生物碱含量大于邻％的龙葵提取物提取物。将上述龙葵提取物1重量份与苦参素1重量份以混合均匀，即得本发明所述药物组合③。以上所述的碱性溶液选自氢氧化钠、氢氧化钙、氢氧化钾、氫氧化镁和氨水溶液；所述的酸性溶液选自醋酸、盐酸、硫酸和柠檬酸溶液；所述的洗脱用有机溶剂为甲醇、乙醇、正丁醇、氯仿、苯的一项或者两项或者三项以任意比例形成的混合相。实施例2注射剂的制备(1)龙葵总生物碱含量大于50%的龙葵提取物与苦参素药物组合的制备方法同实施例l。(2)水针剂的制备称取龙葵总生物碱含量在50%以上的龙葵提取物与苦参素药物组合物10g，用注射用水溶解，调PH值至7，过滤，灭菌，检验，包装，得水针剂1000支。(3)输液剂的制备称取龙葵总生物碱含量在50%以上的龙葵提取物与苦参素药物组合物10g，用适量法射用水溶解后，以O.lmol/1的盐酸调节PH值至67,搅拌30分钟，加入一定活性炭，继续搅拌半个小时，过滤，过(U2iim滤膜后，加入适量注射用水，搅拌灌装，即得输液剂。(4)冻干粉针剂的制备称取龙葵总生物碱含量在50%以上的龙葵提取物与苦参素药物组合物10g,加10(M)ml注射用水，柳X:90'C保温搅拌，完全溶解后，加入100g的甘露醇，搅拌使溶解；调节pH值至67，无菌精滤，定量分装于管制玻璃瓶中，冷冻干燥，即得。实施例3固体制剂的制备(1)龙葵总生物碱含量大于50%的龙葵提取物与苦参素药物组合的制备方法同实施例l。(2)片剂的制备龙葵总生物碱含量大于50%的龙葵提取物与苦参素药物组合10克，药用辅料淀粉、硬脂酸镁100克。混合均匀，粉碎，过筛，制粒，干燥,压片，检验，包装，得片剂10000片。(3)胶囊剂的制备称取龙葵总生物碱含量在50%以上的龙葵提取物与苦参素药物组合物100g,药用淀粉1000g，混合均匀，装入2号胶囊，每粒含药物组合物100mg。(4)散剂的制备称取龙葵总生物碱含量在50%以上的龙葵提取物与苦参素药物组合物1000g,淀粉1000g，混合均匀，分装，使每袋含药物组合物100mg即得。权利要求1、一种药物组合，其特征在于由龙葵提取物与苦参素组成。2、根据权利要求1所述的药物组合物，龙葵提取物中龙葵总生物碱的含量大于50%。3、根据权利要求1所述的药物组合物，其制备方法如下①龙葵总生物碱的提取步骤如下取龙葵全草与/或果实，加入50%90%乙醇溶液提取23次，每次68倍量，回收乙醇，浓縮至相对密度1.25,浓縮液中加入24倍量的0.lmol/1酸性溶液，充分搅拌，冷藏，过滤，滤渣用盐酸溶液洗涤13次，合并滤液和洗涤液，以弱极性或中等极性树脂吸附。树脂吸附后先用水冲洗树脂柱/床至流出液近中性；再以0.1mol/l碱性溶液冲洗树脂柱/床至流出液近无色，再以含醇量10%40%乙醇液冲洗树脂柱/床至流出液近无色。弃去。再以50卯％2醇进行洗脱，至洗脱液显无色，收集洗脱液，回收乙醇至无醇味，以0.5l,5iml/l的碱性溶液调PH值至810,静置，冷藏，收集沉淀。自然晾干，即可得龙葵总碱含量大于50%的龙葵提取物。②将上述龙葵提取物与苦参素以规定比例混合均匀，加入适当辅料，即得本发明所述药物组合。以上所述的碱性溶液选自氢氧化钠、氢氧化钙、氢氧化钾、氢氧化镁和氨水溶液；所述的酸性溶液选自醋酸、盐酸、硫酸和柠檬酸溶液；所述的洗脱用有机溶剂为甲醇、乙醇、正丁醇、氯仿、苯的一项或者两项或者三项以任意比例形成的混合相。4、根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于含龙葵总生物碱含量大于邻^的龙葵提取物14重量份、苦参素13重量份。5、根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于优选比例为龙葵总碱含量大于50%的龙葵提取物3重量份、苦参素2重量份。6、根据权利要求1和3所述的药物组合，其特征在于该药物组合和一种或几种药用赋形剂，或可与该药物组合组方的其他药物制备成抗肿瘤的口服药物制剂或非肠道药物制剂。7、根据权利要求6所述的药物制剂，其特征在于含有1"%99%的龙葵总生物碱含量大于50%的龙葵提取物与苦参素混合物和99%1%的药用赋形剂(包括其它配伍用的药物)。8、根据权利要求7所述的药物制剂，其特征在于优选含有45%95%的龙葵总生物碱含量大于50%的龙葵提取物与苦参素混合物和55%5%的药用赋形剂(包括其它配伍用的药物)。9、根据权利要求8所述的药物制剂，其特征在于最好含有75%90%的龙葵总生物碱含量大于邻％的龙葵提取物与苦参素混合物和25%10%的药用赋形剂(包括其它配伍用的药物)。10、根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于所述口服药物制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、混悬剂、口服液体制剂等所述非肠道给药剂型为注射液、输液剂、冻千注射剂、注射乳剂、气雾剂、栓剂等；所述药用赋形剂为溶剂、崩解剂、矫味剂、粘合剂、着色剂、防腐剂等；所述的其它配伍用的药物，指的是以有效剂量的含龙葵总生物碱不少于邻％的龙葵提取物与苦参素药物组合为一定的药物原料，再配伍其它已允许合用的中药或化学药品。全文摘要本发明公开了一种抗恶性肿瘤疗效显著、毒副作用小、使用安全的药物组合。该组合物由中药材龙葵的提取物和豆科植物苦豆草的种子苦豆子或豆科植物苦参的根中提取的苦参素组成。该药物组合中龙葵提取物的龙葵总生物碱含量大于50％。本发明的药物组合中含龙葵总碱含量大于50％的龙葵提取物1～4重量份、苦参素1～3重量份。其中优选比例为龙葵总碱含量大于50％的龙葵提取物3重量份、苦参素2重量份。本发明还公开了该药物组合的制备方法。文档编号A61K9/08GK101411780SQ20071005616公开日2009年4月22日申请日期2007年10月15日优先权日2007年10月15日发明者李明慧,石杨申请人:刘阳