一种丹参组合物及其制备方法和检测方法以及应用的制作方法

专利名称：：一种丹参组合物及其制备方法和检测方法以及应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种中药提取物及其制备方法和检测方法以及应用，具体的涉及一种丹参组合物及其制备方法和检测方法以及应用。
背景技术：
：中风、冠心病、心绞痛等心脑血管疾病严重危害人类的生命和健康。上世纪80年代以来我国心脑血管疾病患病率直线上升，目前13亿人口中心脑血管疾病患者已超过了4000万，每年死于心脑血管疾病人数达250万300万人，其中心脑血管疾病各占一半，心血管病医疗费用每年超过1300亿人民币。因此治疗心脑血管疾病的药物研究非常必要，一直是国内外药物研究的热点。丹参为常用中药材，具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦之功效，被《神农本草经》列为上品。自上世纪70年代开始，活血化瘀类中药丹参已被广泛应用于临床来治疗心脑血管疾病。丹参中具有活血化瘀作用的水溶性成分主要为酚酸类化合物，其中包括丹酚酸A、丹酚酸B、迷迭香酸、紫草酸、丹参素、咖啡酸、原儿茶酸、异阿魏酸、丹酚酸C、丹酚酸K、丹酚酸I、迷迭香酸甲酯、丹参迷迭香苷等，丹参酚酸类成分在药材中含量达5%以上，其中又以丹参酚酸B的含量最高、活性最强。2005版《中国药典》已将丹酚酸B作为质量评价指标，因此采用传统中医药理论结合现代制药技术来提取、富集丹参酚酸类成分并控制其含量，保证丹参制剂更为安全、有效、可控，使其符合我们安全用药的要求。随着丹参水溶性酚酸类成分新用途不断发现，现有文献和专利对丹参酚酸类化合物的提取、分离、纯化、制剂研究也在不断增加。现举例如下，专利CN1315495C:采用水加热提取、大孔树脂纯化得到含有丹参素、原儿茶醛、丹参酚酸B的有效部位并制成注射液，由于丹参酚酸B遇酸、碱、热易发生降解，因此采用水加热提取使得总丹参酚酸中被公认含量最高、活性最强的丹参酚酸B降解而导致其含量较低；专利CN1305866C:是以丹酚酸A和B配比制成冻干粉针，但由于丹酚酸A和B的分离、纯化采用的是制备色谱柱，成本高且不适合于大生产；专利CN1425430A:通过有机溶剂渗漉、大孔树脂吸附、20%乙醇洗脱得到丹参酚酸B含量达50y。以上的有效部位；专利CN1164582C:通过水提后酸化、柱层析得到丹参酚酸B含量达90%以上的提取物。虽然专利CN1425430A和专利CN1164582C考虑到了丹参酚酸B的含量及作用，但是却忽略了总丹参酚酸中其他有效成分的协同作用，偏离了中药疗效是由多种有效成分整体作用的理论和实践基础。
发明内容本发明所要解决的技术问题是为了避免现有的丹参提取方法易造成有效成分丹参酚酸B降解的缺陷，以及制得的丹参组合物中总丹参酚酸成分不全面的缺陷，进而提供一种有效成分全面，药效作用更佳的丹参组合物及其制备方法和检测方法，以及其在医药领域中的应用。本发明的丹参组合物含有紫草酸1.52.1%，迷迭香酸2.53.8%，丹参酚酸B54.075.0X，丹参酚酸A0.21.5%，其中丹参酚酸共计为59.5%，以上百分比均为占总固体物的重量百分比。本发明的制备方法工艺简单、成本低、能耗小，易应用于工业化。本发明还涉及所述的丹参组合物的制备方法，其包括如下步骤将丹参用CH:2的低级醇或丙酮的水溶液渗漉提取，将渗漉液于温度456(TC内，真空度在26710000Pa内减压浓縮，浓縮液离心，上清液过大孔树脂柱，用水洗脱并弃去水洗液，之后用梯度乙醇水溶液洗脱，合并洗脱液，温度在456(TC内，真空度在26710000Pa内减压浓縮洗脱液，最后冷冻干燥即可。其中，所述的QC2的低级醇或丙酮的水溶液的较佳浓度为体积百分比6080%,较佳的用量为丹参药材质量的10倍15倍。所述的浓縮提取液较佳的为浓縮至提取液原体积的1/81/12为止，更佳的为1/10。所述的较佳的离心转速为400016000rpm。所述的减压浓縮提取液时，较佳的回收C广C2的低级醇或丙酮以循环利用；所述的减压浓縮洗脱液时，较佳的回收乙醇以循环利用。其中，所述的大孔树脂类型为苯乙烯骨架型非极性大孔树脂，较佳的材料为天津正天成澄清技术有限公司的商品代号为AB-8的大孔树脂、日本三菱化学公司的商品代号为HP-20的大孔树脂、天津欧瑞生物科技公司的商品代号为ME-2的大孔树脂、南开大学化工厂的商品代号为D6的大孔树脂和美国罗门哈斯(Rohm&Haas)公司的商品代号为XAD-4的大孔树脂。其中，所述的用水洗脱的步骤中水的较佳用量为洗脱柱体积的35倍。所述的用梯度乙醇水溶液洗脱的较佳的梯度顺序为先用体积百分比20%的乙醇水溶液洗脱，之后用体积百分比40%的乙醇水溶液洗脱。所述的体积百分比20%或40%的乙醇水溶液的较佳用量为洗脱柱体积的812倍。合并梯度洗脱液，低温减压浓縮，冷冻干燥得到丹参组合物。本发明还涉及对本发明的丹参组合物进行定性定量检测的方法，其采用液相色谱方法进行检测，色谱条件为十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂，流动相为450:8:542的甲醇冰醋酸水，柱温为室温，流速为1ml/min，检测波长为280證。根据治疗目的，可将本发明的丹参组合物可与药学上各种常用辅料(如填充剂、崩解剂、赋形剂、粘合剂等)制成各种药物剂型，如片剂、胶囊剂、粉针剂、丸剂、颗粒剂、栓剂等。为了使片剂成型，可使用本领域任何已知的并广泛使用的赋形剂。例如，填充剂，如乳糖、淀粉、糊精、结晶性纤维素等；粘合剂，如糖浆、淀粉浆、明胶浆、阿拉伯胶浆、西黄蓍胶浆、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂，如淀粉、羧甲基淀粉钠、羟丙基淀粉、改良淀粉、微晶纤维素等；崩解抑制剂，如甘油三硬脂酸酯、椰子油和氢化油；润湿剂，如水、乙醇、甘油等；以及助流剂，如改良淀粉、滑石粉，硬脂酸盐、硼酸粉、聚乙二醇等。如果需要的话，可采用通常的包衣材料进行包衣，制成为糖衣片、薄膜衣片剂。为了使滴丸剂成型，可使用本领域任何已知的并广泛使用的赋形剂，例如，基质，如硬脂酸、虫蜡、氢化油、聚乙二醇类、甘油明胶等；冷凝液，如液状石蜡、植物油、甲基硅油、水等。为了使栓剂成形，可使用本领域任何已知并广泛使用的基质，例如，可可豆脂、单合成脂肪酸酯、甘油明胶、聚乙二醇类等。为了使粉针剂成型，可使用本领域任何已知的并广泛使用的赋形剂，如蔗糖、乳糖、肌醇、脱脂乳、水解蛋白、葡聚糖、山梨醇、甘露醇、聚乙烯吡咯烷酮所述的药物制剂中所含本发明的丹参组合物的含量无特殊限制，可在很宽的范围内进行选择，通常含丹参酚酸重量百分比可为59.581.1%。本发明中，所述的药物制剂的给药方法没有特殊限制。可根据病人年龄、性别和其它条件及症状，选择各种剂型给药。例如，片剂、丸剂、颗粒剂和胶囊是口服给药；粉针剂可以和注射用输送液(如生理盐水、葡萄糖溶液及氨基酸溶液)混合进行静脉注射；栓剂为直肠给药。本发明中，可以根据服药方法、病人年龄、性别和其它条件以及症状适当地选择用药剂量。通常注射与口服的临床推荐剂量可为约(丹参组合物)0.55mg/kg/天。本发明进一步涉及丹参组合物在制备治疗心血淤阻所致缺血性疾病药物中的应用。所述的心血淤阻所致缺血性疾病尤其指冠心病胸闷、中风、心绞痛、心肌缺血或脑缺血。本发明的丹参组合物在常温下采用C,C2的低级醇或丙酮的水溶液提取制得，因此避免了丹参酚酸类成分遇酸、碱、热发生水解、聚合、氧化，并且其制备过程中采用了梯度乙醇洗脱，使得其所含水溶性有效成分，尤其是总丹参酚酸类成分全面，药效优于现有的丹参组合物。其药理实验结果如下述本发明的丹参组合物与专利CN1425430A中总丹参酚酸提取物的药效比较及急性毒性药理实验证明一、制备方法取丹参药材20kg，用70%丙酮水溶液渗漉提取，使用量为丹参药材量的10倍。于55。C、10000Pa条件下减压浓縮至原体积的1/10左右，16000rpm离心。上清液分成相同体积的两份，分别过大孔树脂柱吸附，均4BV(4倍柱体积)水洗脱弃去后。一份梯度乙醇洗脱，先10BV的20%乙醇水溶液洗脱，再10BV的40%乙醇水溶液洗脱，合并洗脱液，于55。C、10000Pa条件下减压回收乙醇至尽、冷冻干燥，得到本发明的丹参组合物(以下简称多流份提取物)。另一份只用10BV的20%乙醇水溶液洗脱，于55。C、10000Pa条件下减压回收乙醇至尽、冷冻干燥，得到单流份提取物(按专利CN1425430A中方法制备总丹参酚酸部位)。二、药效学比较——对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用1、试验目的通过本试验，比较本发明丹参组合物组(多流份提取物)和单流份提取物组静脉注射给药对SD大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响。2、受试动物种属、品系SD大鼠；性别雄性；体重250300克；数量60只，随机分成6组，每组10只。3、实验方法(1)动物手术和冠状动脉结扎法雄性SD大鼠，戊巴比妥钠(45mg/kg腹腔注射)麻醉，仰卧位固定。以心电图机记录II导联心电图检测心脏情况。颈前正中切开，行气管插管，接人工呼吸机，频率为55次/分，潮气量20ml/kg。分离一侧股静脉供给药用。在胸左侧第五肋间处切开胸壁并沿胸骨左缘2mm处切断第四和第五肋骨，剪开心包膜，暴露心脏，于左冠状动脉前降支下穿1根0/3号缝合线，稳定10min(稳定后心电图不正常者弃去)，将两个线头穿过一小段细硅胶管，在另一小段细硅胶管上打结作为缺血结扎(无ST段及T波改变者淘汰)，缺血10min后从股静脉缓慢注射给药，40min后剪断结扎线，使前降支再灌注30min。(2)肌酸磷酸激酶的测定再灌注结束后，腹主动脉取血，NADPH紫外分光法测定血清CPK活性。(3)心肌梗塞范围测定法在冠脉结扎线下，平行于冠状沟，等厚地将心室肌横切成5片，将5片心肌置于硝基四氮唑蓝(N—BT)染液中，振摇染色15min后取出，正常心肌染为暗蓝色，梗塞区心肌则不着色为浅黄色。在解剖镜下分离梗塞区，分别称重，以梗塞区心肌重量占心肌重量的百分比(％)作为衡量梗塞范围的指标。(4)分组及给药实验分6组，每组10只大鼠。本品拟推荐临床剂量为30mg/次静脉注射，按60公斤体重计算，为0.5mg/kg。按大鼠体表面积折算，相应剂量为2.71mg/kg，故取中剂量10mg/kg。①假手术组冠脉下穿线不结扎，生理盐水lml/kg②缺血再灌注模型组生理盐水lml/kg③单流份提取物、多流份提取物低剂量组3mg/kg④单流份提取物、多流份提取物中剂量组10mg/kg各组冠脉结扎完毕缺血10min后股静脉给药。给药体积与缺血再灌注模型组给生理盐水量一致。给药途径静脉注射给药。给药次数均单次给药。数据及统计学处理各组数据以^士S表示，用方差分析进行显著性检验。观察指标及观察时间观察大鼠心肌梗塞范围和血清肌酸磷酸激酶(CPK)的检测，观察时间为给药后030分钟。(5)试验结果心肌缺血再灌注后，血清CPK活性明显增加，心肌梗塞区重量明显增加，与假手术对照组比较有非常显著性差异(PO.01);单流份提取物组和多流份提取物组10mg/kg静脉注射给药后CPK活性、心肌梗塞区重量明显低于模型组(PO.01);单流份提取物组和多流份提取物组10mg/kg静脉注射给药后CPK活性、心肌梗塞区重量相比有显著性差异(PO.05);3ml/kg剂量组相比，在CPK活性、心肌梗塞区重量指标上，多流份提取物组均优于单流份提取物组。(表l)结论多流份提取物组静脉注射对缺血再灌注所致SD大鼠心肌损伤有保护作用，可明显抑制缺血再灌注所致大鼠心肌损伤时CPK溢出，降低血清CPK活性，縮小心肌梗塞区重量，并有一定的量效关系且优于单流份提取物组。表l单流份提取物组、多流份提取物组对缺血再灌注大鼠血清CPK活性、心肌梗塞程度的影响(x±s，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>注***p<0.01与生理盐水组比较###P<0.01生理盐水与假手术组比较&&PO.05多流份提取物组与单流份提取物组比较三、急性毒性试验本实验通过给小鼠一次性静脉注射本发明丹参组合物(多流份提取物组)，观察其对小鼠的急性毒性反应。试验发现，经尾静脉注射给药30分钟内，眼球突出，流涎，呼吸抑制，小便失禁，并有部分死亡，死后四肢松软。根据实验结果计算得出本发明提取物给小鼠单次静脉注射的半数致死量1220.56mg/kg，95%可信区间为1117.97mg/kg。本发明所用试剂及原辅料均市售可得。图1为丹酚酸A的液相色谱图。图2为丹酚酸B的液相色谱图。图3为紫草酸的液相色谱图。图4为迷迭香酸的液相色谱图。图5为实施例4的丹参组合物的液相色谱图。具体实施例方式下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。实施例1本发明的丹参组合物的制备取丹参药材10kg，用体积百分比70%丙酮渗漉提取，使用量为丹参药材量的10倍。温度在60°C、真空度在10000Pa条件下减压浓縮至原体积的1/10左右，16000rpm离心。上清液过大孔树脂柱(日本三菱化学公司的商品代号为HP-20的大孔树脂)吸附，4BV(4倍柱体积)的水洗脱弃去，然后梯度乙醇洗脱，先12BV的20X乙醇洗脱，再8BV的40X乙醇洗脱，合并梯度乙醇洗脱液，温度在6(TC、真空度在10000Pa条件下减压回收乙醇至尽、冷冻干燥。测得丹参组合物含紫草酸2.1%，迷迭香酸3.8。％，丹参酚酸B75.0X，丹参酚酸A0.2X，含丹参酚酸共计为81.1%。检测方法采用高效液相色谱方法进行检测，色谱条件为十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂，流动相为450:8:542的甲醇冰醋酸水，柱温为室温，流速为1ml/min，检测波长为280nm。对照品溶液的制备精密称取迷迭香酸、丹参酚酸B，分别加水配成0.2mg/ml的溶液；精密称取紫草酸，加水配成0.5mg/ml的溶液；精密称取丹参酚酸A，加50%乙醇配成0.2mg/ml的溶液。供试品溶液的制备取本发明的丹参组合物6mg，精密称定，加水定容至10ml溶液，微滤，即得。测定法分别精密吸取上述对照品溶液及供试品溶液各2(^1，注入液相色谱仪，记录30分钟色谱图。实施例2本发明的丹参组合物的制备取丹参药材10kg，用体积百分比70%乙醇渗漉提取，使用量为丹参药材量的12倍。温度在60°C、真空度在lOOOOPa条件下减压浓縮至原体积的1/10左右，14000rpm管道离心。上清液过大孔树脂柱(天津欧瑞生物科技公司的商品代号为ME-2的大孔树脂)吸附，3BV的水洗脱弃去，然后梯度乙醇洗脱，先8BV的20%乙醇洗脱，再12BV的40X乙醇洗脱，合并梯度乙醇洗脱液，温度在60°C、真空度在10000Pa条件下减压回收乙醇至尽、冷冻干燥。测得丹参组合物含紫草酸1.5%,迷迭香酸2.5%，丹参酚酸B54.0X，丹参酚酸A1.5X，含丹参酚酸共计为59.5%。检测方法同上。实施例3本发明的丹参组合物的制备取丹参药材10kg，用体积百分比80%乙醇渗漉提取，使用量为丹参药材量的15倍。温度在55°C、真空度在267Pa条件下减压浓縮至原体积的1/10左右，15000rpm管道离心。上清液过大孔树脂柱(天津正天成澄清技术有限公司的商品代号为AB-8的大孔树脂)吸附，3BV水洗脱弃去，然后梯度乙醇洗脱，先10BV的20%乙醇洗脱，再12BV的40%乙醇洗脱，合并梯度乙醇洗脱液，温度在55。C、真空度在267Pa条件下减压回收乙醇至尽、冷冻干燥。测得丹参组合物含紫草酸1.8%，迷迭香酸2.7%，丹参酚酸B62.6X，丹参酚酸A1.4X，含丹参酚酸共计为68.5%。检测方法同上。实施例4本发明的丹参组合物的制备取丹参药材lkg，用体积百分比60%甲醇渗漉提取，使用量为丹参药材量的12倍。温度在45°C、真空度在5000Pa条件下减压浓縮至原体积的1/8左右，4000rpm台式离心。上清液过大孔树脂柱(南开大学化工厂的商品代号为D6的大孔树脂)吸附，5BV水洗脱弃去，然后梯度乙醇洗脱，先10BV的20%乙醇洗脱，再10BV的40%乙醇洗脱，合并梯度乙醇洗脱液，温度在45°C、真空度在5000Pa条件下减压回收乙醇至尽、冷冻干燥。测得丹参组合物含紫草酸1.6%，迷迭香酸2.5%，丹参酚酸B56.4X，丹参酚酸A0.3X，含丹参酚酸共计为60.8%。检测方法同上。实施例5本发明的丹参组合物的制备取丹参药材10kg,用体积百分比60%乙醇渗漉提取，使用量为丹参药材量的12倍。温度在5CTC、真空度在10000Pa条件下减压浓縮至原体积的1/12左右，15000rpm管道离心。上清液过大孔树脂柱(美国罗门哈斯公司的商品代号为XAD-4的大孔树脂)吸附，5BV水洗脱弃去，然后梯度乙醇洗脱，先12BV的20%乙醇洗脱，再10BV的40X乙醇洗脱，合并梯度乙醇洗脱液，温度在5(TC、真空度在10000Pa条件下减压回收乙醇至尽、冷冻干燥。测得丹参组合物含紫草酸2.0%，迷迭香酸3.1%，丹参酚酸B64.7X，丹参酚酸A0.4X，含丹参酚酸共计为70.2%。检测方法同上。实施例6含有本发明的丹参组合物的缓释胶囊的制备取实施例1所得丹参组合物与辅料均过80目筛，混合均匀，加入适量润湿剂，以18目筛制粒，5(TC烘干、整粒，装入1号胶囊。照2005版药典二部附录XD释放度测定法测定体外释放度，体外释放度在lh释放20-40%，4h释放45-70°/。，10h累积释放大于90。/0。表2丹参组合物缓释胶囊的处方<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>实施例7含有本发明的丹参组合物的分散片的制备取实施例1所得丹参组合物与辅料均过80目筛，混合均匀(硬脂酸镁除外)，加入适量润湿剂，过40目筛制粒，于60。C条件下干燥2小时，40目筛整粒。加入硬脂酸镁，混合均匀后压片。每片重0.3g。表3丹参组合物分散片的处方<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>实施例8含有本发明的丹参组合物的滴丸的制备称取30gPEG6000，于水浴中边加热边搅拌，待全部溶化后加实施例1所得丹参组合物10g，搅匀，再滴加适量PEG400，搅拌使其三者充分混匀。在809CTC保温条件下滴入二甲基硅油冷凝液中(冷凝液温度约为04°C)，滴制成丸。表4丹参组合物滴丸的处方成分投料量(g)丹参组合物10PEG600030PEG400适量实施例9含有本发明的丹参组合物的冻干粉针的制备将丹参组合物30g、山梨醇30g,置于灭菌容器中，加灭菌注射用水至约800ml，搅拌溶解，再加灭菌注射用水至1000ml，药液用0.22nm微孔滤膜滤过，滤液过10000分子量超滤膜，灌装于7ml西林瓶，每瓶lml，冻干。表5丹参组合物冻干粉针的处方<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>权利要求1.一种丹参组合物，其特征在于含有紫草酸1.5～2.1％，迷迭香酸2.5～3.8％，丹参酚酸B54.0～75.0％，丹参酚酸A0.2～1.5％，其中丹参酚酸总计为59.5～81.1％，以上百分比均为占总固体物的重量百分比。2.如权利要求1所述的丹参组合物的制备方法，其特征在于包括如下步骤将丹参用C广C2的低级醇或丙酮的水溶液渗漉提取，温度在4560'C内，真空度在26710000Pa内减压浓縮提取液，之后离心，将上清液过大孔树脂柱，用水洗脱并弃去水洗液，之后用梯度乙醇水溶液洗脱，合并洗脱液，温度在4560'C内，真空度在26710000Pa内减压浓縮洗脱液，最后冷冻干燥即可。3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述的C广C2的低级醇或丙酮的水溶液的浓度为体积百分比6080%。4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述的C广C2的低级醇或丙酮的水溶液的用量为丹参药材质量的1015倍。5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述的浓縮提取液为浓縮至原体积的1/81/12。6.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述的减压浓縮提取液时，回收C广C2的低级醇或丙酮以循环利用；所述的减压浓縮洗脱液时，回收乙醇以循环利用。7.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述的离心的转速为400016000rpm。8.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述的大孔树脂为苯乙烯骨架型非极性大孔树脂。9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于所述的苯乙烯骨架型非极性大孔树脂选自天津正天成澄清技术有限公司的商品代号为AB-8的大孔树脂、日本三菱化学公司的商品代号为HP-20的大孔树脂、天津欧瑞生物科技公司的商品代号为ME-2的大孔树脂、南开大学化工厂的商品代号为D6的大孔树脂和美国罗门哈斯公司的商品代号为XAD-4的大孔树脂。10.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述的用水洗脱中，水的用量为柱体积的35倍。11.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述的用梯度乙醇水溶液洗脱为先用体积百分比20%的乙醇水溶液洗脱，之后用体积百分比40%的乙醇水溶液洗脱。12.如权利要求11所述的制备方法，其特征在于所述的体积百分比20%的乙醇水溶液或所述的体积百分比40%的乙醇水溶液的用量为洗脱柱体积的812倍。13.—种含有如权利要求1所述的丹参组合物的药物制剂。14.如权利要求13所述的药物制剂，其特征在于所述的药物制剂为片剂、胶囊剂、粉针剂、丸剂、颗粒剂或栓剂。15.—种对如权利要求1所述的丹参组合物进行定性定量检测的方法，其特征在于采用高效液相色谱方法进行检测，色谱条件为十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为450:8:542的甲醇冰醋酸水，柱温为室温，流速为1ml/min,检测波长为280nm。16.如权利要求1所述的丹参组合物在制备治疗心血淤阻所致缺血性疾病药物中的应用。17.如权利要求16所述的应用，其特征在于所述的心血淤阻所致缺血性疾病为冠心病胸闷、中风、心绞痛、心肌缺血或脑缺血。全文摘要本发明公开了一种丹参组合物，其含有紫草酸1.5～2.1％，迷迭香酸2.5～3.8％，丹参酚酸B54.0～75.0％，丹参酚酸A0.2～1.5％，其中丹参酚酸共计为59.5～81.1％，以上百分比均为重量百分比。本发明还公开了其制备方法将丹参用C₁～C₂的低级醇或丙酮的水溶液渗漉提取，温度在45～60℃内，真空度在267～10000Pa内减压浓缩提取液，之后离心，将上清液过大孔树脂柱，用水洗脱弃去，之后用梯度乙醇水溶液洗脱，合并洗脱液，温度在45～60℃内，真空度在267～10000Pa内减压浓缩洗脱液，最后冷冻干燥即可。本发明还进一步公开了其检测方法以及其在制备治疗心血淤阻所致缺血性疾病药物中的应用。本发明的丹参组合物所含水溶性有效成分，尤其是总丹参酚酸成分全面，药效优于现有技术，且本发明的制备方法简单、成本低、能耗小，易应用于工业化。文档编号A61K9/02GK101433583SQ20071017050公开日2009年5月20日申请日期2007年11月16日优先权日2007年11月16日发明者周国伟,崎宋,樊敏伟,冰王,谢家骏,谢德隆,钱佳华,马能溢申请人:上海雷允上科技发展有限公司;上海市中药研究所