专利名称：：二乙酰化黄芩素在制备解热剂中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及化合物医药用途，具体地说是二乙酰化黄芩素在制药领域中的应用。
背景技术：
：二乙酰化黄芩素为黄芩苷的衍生物。黄芩苷(Baicalin)是从黄芩根中提取分离出来的一种黄酮类化合物，具有抑菌、利尿、抗炎、抗变态及解痉作用。临床上也有采用黄芩素用于治疗上呼吸道感染的，但临床医师反映其解热镇痛效果不够理想。由于黄芩类药物具有安全、可靠的特点，因此，人们一直希望获得更多更好的黄芩类治疗药物。
发明内容本发明的目的就是要提供一种比黄芩素效果更好的同类药物，以期为临床用药提供更多的选择。本发明的目的是这样实现的本发明研究发现，二乙酰化黄芩素具有更好的解热效果。故首次提出将二乙酰化黄芩素在制备解热剂中进行应用。本发明使二乙酰化黄芩素可以制备成解热剂，因此本发明提供了一种比黄芩素解热效果更好的药物，同时为临床治疗发烧、发热，尤其是上呼吸道感染所致发热提供了一种新的用药选择。本发明所述的二乙酰化黄芩素，其化学结构如下OHO其制备方法包括有以下步骤a、以黄芩苷为原料，加葡萄糖醛酸水解酶，在10-8(TC条件下，保温l-4天；过滤，沉淀物用水洗涤、干燥，得黄芩素；其中葡萄醛酸水解酶的用量最好为原料量的0.1-10倍。b、以黄芩素为原料，加醋酐乙酰化，沉淀物用水洗涤、干燥，得二乙酰化黄芩素。本发明所述二乙酰化黄芩素可用于治疗上呼吸道感染以及各种类型的发烧、发热。本发明所述二乙酰化黄芩素在用于治疗上呼吸道感染以及各种类型的发烧、发热时，可经口服或不经口服给药。给药量也因剂型不同而各有不同。对成年人来说，口服用药3每天200-900mg比较适宜。肌注或静脉注射用药每天50-100mg比较适宜。本发明的有益效果通过以下实验得到了验证。实验材料及受试动物二乙酰基黄芩素的制备(1)将100克黄芩素加入1000毫升醋酐中，在摄氏50度下搅拌3小时，过滤，收集沉淀，水洗，得白色粉末产品112克。(2)将1.5千克黄芩素溶解在5升吡啶中，再加入5升醋酐，室温下搅拌10小时，反应液浓縮后加入10升冰水中，过滤，收集沉淀，水洗，得白色粉末产品1.8千克。白色粉末产品的化学结构鉴定数据质谱EI-MS:m/z354[M]+，312，270。核磁共振氢谱1H-NMR(CDC13):12.90(1H，s，5-0H)，7.88(2H，d，J=6.OHz，H_2，，6，)，7.52(3H，m，H_3，，4，，5，)，6.95(1H，s，H_3)，6.72(1H，s，H_8)，2.35(3H，s，-CH3)，2.33(3H，s，-CH3)。核磁共振碳谱13C-NMR(CDC13):182.9(C_4)，167.7(_C=0)，167.5(_C=0)，165.1(C_7)，153.4(C_2)，153.3(C_5)，148.3(C_9)，132.3(C_6)，130.8(C-l')，129.2(C_3，，4，，5，)，126.4(C_2，，6，，)，109.5(C_10)，105.7(C_3)，101.6(C_8)，20.7(-CH3)，20.2(-CH3)。经上述波谱学方法鉴定，白色粉末产品为二乙酰基黄芩素，纯度高于98%。且该数据与文献报道的二乙酰基黄芩素一致。药理实验材料及受试动物动物1、大耳白家兔，一级，雌雄各半，2.0±0.lkg购自中国兽药监察所，京动许字(1999)第004号，监动质字(2000)第292号。2、SD大鼠，二级，购自北京市维通利华实验动物有限公司，合格证号SCXK11-00-0008。主要试剂1、二乙酰基黄吝素用时以0.5%羧甲基纤维素钠(0.5%CMC-Na)配成混悬液。2、黄吝素(外购)用时以0.5%羧甲基纤维素钠(0.5%CMC-Na)配成混悬液。3、阿司匹林原料药，白色粉末，山东新华制药股份有限公司，批号9907653，用时以0.5%羧甲基纤维素钠(CMC_Na)配成混悬液。4、大肠杆菌内毒素:0111B4，lml/支，批号960301.购自中国药品生物制品检定所。用注射用生理盐水溶解稀释，本实验用250ng/kg.，lml/kg新鲜配制。5、干酵母外购，酵母悬液制备称取干酵母10克，置于乳钵中，逐渐加入蒸馏水磨为均匀的悬浆，最后定容为50ml(20%)，此液体需于临用前配制。仪器1、精密电子分析天平EB-280M-22型日本KYOTO公司。2、0MR0N电子数字式体温计MC_3，欧姆龙大连有限公司制造。方法与结果二乙酰基黄芩素的解热作用—、二乙酰基黄芩素对内毒素所致家兔发热的解热作用(1)、家兔的选择选择健康大耳白家兔数十只，每日早晚用电子体温计测体温1次，连续2日，使家兔适应测体温操作，选择体温范围38.6-39.5°C，且体温波动在0.3°C以内者，备用。(2)、正式实验取体温合格家兔48只，按基础体温随机分为6组，药前测两次基础体温(每30分钟一次)。第1组空白对照组口服给予等容量0.5%CMC-Na;第2组阳性药组阿司匹林100mg/kg;第3组黄吝素100mg/kg组；第4组二乙酰基黄吝素160mg/kg组；第5组二乙酰基黄芩素lOOmg/kg组；第6组二乙酰基黄芩素40mg/kg组；以上各组均于注射内毒素后立即灌胃给药。每只家兔均耳缘静脉注射大肠杆菌内毒素250ng/kg(lml/kg)，随即灌胃给药，并于内毒素攻击后1、2、3、4、5、6小时各测体温1次，结果见表1。并将各组之间在相应时间点进行t检验。结果如表l:家兔口服给予二乙酰基黄吝素40mg/kg、100mg/kg、160mg/kg，对内毒素引起的发热模型具有明显的解热作用，与空白对照组比较有显著性差异(P<0.05-0.001);二乙酰基黄芩素160mg/kg组与阳性药比较解热作用无显著性差异。二乙酰基黄芩素与黄芩素同剂量组相比，解热作用明显且持久。表1二乙酰基黄芩素对内毒素致热家兔体温的影响G±s，n=8)5<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注与模型组相比*p<0.05**p<0.01***p<0.001二、二乙酰基黄吝素对干酵母所致大鼠发热的解热作用1.大鼠准备取200-250克雄性大鼠数十只，于实验室环境适应3_4日，用电子体温计从肛内测体温2次，连续2天，实验当日每小时测体温1次，连续2次，选取体温变化不超过o.3t:的动物供实验用。2.正式实验取200-250克雄性合格大鼠60只，随机均分6组，第1组空白对照组，给等容量.0.5%CMC-Na;第2组阳性药阿司匹林150mg/kg;第3组黄芩素组100mg/kg;第4组二乙酰基黄芩素高剂量组200mg/kg;第5组二乙酰基黄芩素中剂量组lOOmg/kg;第6组二乙酰基黄芩素低剂量组50mg/kg。各鼠于背部皮下注入10%酵母悬液10ml/kg，于给酵母后第5小时开始给药.并于给药后的1、2、3、4、5小时各测大鼠体温一次。结果如表2:大鼠口服给药二乙酰基黄吝素200mg/kg、100mg/kg、50mg/kg，对干酵母诱发的大鼠发热模型具有明显的解热作用，与空白对照组比较，有显著性差异(P<0.05-0.001);二乙酰基黄芩素组与黄芩素组相比，解热作用明显且持久。表2.二乙酰黄芩素对酵母菌致热大鼠体温的影响(n二10，；±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注与同时间点模型组比较:*p<0.05，**p<0.01，微p<0.001综上所述，实验结果显示二乙酰基黄芩素口服给药对内毒素诱发家兔的发热模型和对干酵母诱发大鼠的发热模型，具有明显的解热作用。其无论是大剂量组还是小剂量组其解热效果均优于黄芩素组，且解热作用持续时间也均优于黄芩素组。以上各项试验显示出明显的量效关系。由此可见，二乙酰化黄吝素具有良好的解热作用，可在制备解热剂药物中得到应用。本发明所述二乙酰化黄芩素与常规的药用辅剂如赋形剂、崩解剂、黏合剂、润滑剂、抗氧化剂、包衣剂、着色剂、芳香剂、表面活性剂等混合，可将其制成颗粒剂、胶囊剂、片剂的等口服制剂。也可按照采用常规制剂技术制备成注射液、输液剂等制剂。具体实施例方式下面的制剂实施例可更详细地说明二乙酰化黄芩素在制备解热剂药物中的应用，但不以任何形式限制本发明。实施例1:二乙酰化黄芩素的制备(a).黄芩素的制备黄芩苷一公斤，溶于升30升水中，加入葡萄糖醛酸水解酶0.3公斤，在5(TC保温搅拌4天，过滤，沉淀用水洗涤后干燥，得黄芩素(0.6公斤)。黄吝素的鉴定质谱EI-MS:m/z270[M]+;紫外光谱max(MeOH)nm:277，315;mp.273-275.核磁共振氢谱1H-NMR(dmso-d6):12.64(1H，s，5-0H)，10.55(1H，7-0Hs)，8.80(1H，s，6-0H)，8.04(2H，d，J=6.OHz，H—2，，6')，7.56(3H，m，H-3，，4，，5')，6.92(1H，s，H-3)，6.61(lH，s，H-8).核磁共振碳谱13C-NMR(dmso-d6):182.1(C—4)，162.8(C—2)，153.6(C—7)，149.8(C-9)，147.0(C-5)，131.7(C_4，)，131.O(C-l')，129.3(C-6)，129.0(C-2，，6')，126.2(C—3，，5，)，104.4(C—3)，104.2(C—10)，94.0(C—8)。这些数据与文献(滇黄芩化学成分的分离与鉴定；沈阳药科大学学报，Vol.20，No.3，pp.181-183,2003)报道的黄吝素数据一致，证明在实施例1(a)中得到的化合物为黄芩素。(b).二乙酰化黄芩素的制备黄芩素10g，加入100ml乙酸酐中，搅拌，反应温度50°C，3小时后终止反应。水洗，抽滤，沉淀干燥后得二乙酰化黄芩素产品12g。二乙酰化黄吝素的鉴定质谱EI-MS:EI-MSm/z(rel.int.%):270(100)，312(23)，241(8)，168(16)，139(10)，69(28)，43(45);紫外光i普max(MeOH)nm:269，丄HNMR(300MHz)and13CNMR(75MHz)data(CDC13)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>这些数据与文献(J.Med.Chem.，2004,47:5555-5566)报道的二乙酰化黄吝素数据一致，证明在实施例1(b).中得到的化合物为二乙酰化黄芩素。实施例2:二乙酰化黄芩素口服液将5000mg二乙酰化黄吝素，溶于1000ml水中，制成0.5%浓度的水溶液，调节pH至66.5，加热溶解，混合均匀，装入20ml药瓶中，封口、消毒。服用方法口服，每日服用二乙酰化黄芩素100-300mg。实施例3:二乙酰化黄芩素注射液取二乙酰化黄芩素2000mg，溶于1000ml水中，制成水溶液，调节pH至66.5，加热溶解，混合均匀，分装成20mg/10ml/支的注射液，蒸汽流通灭菌30分钟。用法用量肌注或静脉注射，每日50-100mg。实施例4:二乙酰化黄芩素片剂取二乙酰化黄芩素2000g，按公知片剂制备方法，加入淀粉，糊精、硬酯酸镁等，混合制成湿粒，机器冲压成片，每片含二乙酰化黄芩素lOOmg。用法用量口服，每日2-3次，每次100mg-300mg。本发明在制药领域中的应用，完全不局限于此，例如二乙酰化黄芩素还可引入药学上可以接受的盐类，如二乙酰化黄芩素磷酸盐，二乙酰化黄芩素盐酸盐，二乙酰化黄芩素硫酸盐等等。本发明的药物剂型也完全不限于此，它可以制备成更多的剂型，如滴丸、胶囊剂、软胶囊剂、缓控释制剂等等。权利要求二乙酰化黄芩素在制备解热剂药物中的应用。全文摘要本发明公开了一种比黄芩素效果更好的同类药物，同时为临床治疗上呼吸道感染引起的发热以及各种发烧、发热提供了更多的用药选择。本发明使二乙酰化黄芩素在制备解热剂药物中的应用得以实现。文档编号A61P29/00GK101744804SQ20081008005公开日2010年6月23日申请日期2008年12月11日优先权日2008年12月11日发明者车庆明申请人:车庆明