2’-氟-4’-取代-核苷类似物、其合成方法及其应用的制作方法

专利名称：：2’-氟-4’-取代-核苷类似物、其合成方法及其应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及核苷类似物、其制备方法及其应用，尤其涉及2'-氟-4'-取代核苷类似物、其制备方法及应用。
背景技术：
：1981年美国发现第一例艾滋病患者，到1983年科学家即分离鉴定出了艾滋病病毒(HIV)，发现HIV属于逆转录病毒科的慢病毒亚科，仅由9749个核苷酸组成。目前对HIV复制循环过程已经基本搞清，研究发现其繁殖过程大致分为以下步骤吸附、侵入和脱壳、逆转录、整合、病毒RNA和蛋白质的合成、装配、释放和成熟，其中每个环节均可作为筛选HIV药物的靶点，其中蛋白质的合成和病毒基因组核酸复制是最关键的步骤。目前筛选抗HIV药物的焦点集中于寻找这些特异性酶的抑制剂，包括逆转录酶(RT)抑制剂、蛋白质合成酶抑制剂和逆转录酶启动因子抑制剂等。HIV的逆转录酶是一种多功能酶，同时具有依赖RNA的DNA聚合酶、依赖DNA的DNA聚合酶和RhaseH活性。HIV首先以病毒基因组的RNA为模板，以宿主细胞的运转RNA为引物，进行(-)链DNA的合成，然后以同样的方式合成(+)链DNA。当逆转录结束以后，HIV所携带的全部遗传信息从单链RNA转化为双链mDNA。逆转录酶抑制剂可以阻止mDNA的延长，干扰HIV的逆转录过程，从而成为化学治疗艾滋病的药物。根据抑制剂的作用机理不同，可以把它们分为两类1)核苷类逆转录酶抑制剂，其作用于HIVDNA逆转录过程中，通过嵌入到病毒DNA中，促使其成为缺陷DNA而使HIV的宿主细胞的DNA整合后无法复制，从而达到抗HIV的作用，现有药物为齐多夫定(AZT)、去羟肌苷(ddl)、扎西他滨(ddC)、司他夫定(d4T)、拉米夫定(3TC)、阿巴卡韦(Abacavir);2)非核苷类逆转录酶抑制剂，其作用机制是阻止HIVRNA直接连接到RT，不让其编码成DNA。现有药物奈韦拉平(Nevirapine)、Delavirdine禾口Efavirenz。1987年第一个上市的抗HIV药物齐多夫定即为核苷类逆转录酶抑制剂，虽然该药物毒性很大，并且未能治愈一例病人，但是它可以减轻症状，延长患者的生命。隨后又有几个核苷类似物抗HIV药物上巿，因此，核苷类似物是一类重要的可能具有抗HIV活性的化合物。目前这些药物都存在一定的缺陷，一方面是药效有限，另一方面是长期服用有严重的毒副作用，并且会产生抗性。因此，新型核苷类似物的合成依然是一个重要的研究方向。为了发现更有效的核苷类抗病毒药物，人们对核苷进行了各种各样的修饰，其中含有氟的核苷类似物即为其中的一类。(Clark,J.PCTPatentAppl"WO2005003174;Ismaili,H.M.A.PCTPatentAppl.,WO0160315A22001)。研究表明该类化合物都有不同程度的抗病毒活性，是一类新型的具有抗病毒活性的化合物。但是在现有的文献中，迄今尚未见到本发明之含2'-氟-4'-取代-D-和L-核苷类似物的合成，以及将其用于制备抗HIV和抗HBV及HCV病毒药物的相关报道。
发明内容本发明的主要目的在于提供一种含2'-氟-4'-取代核苷类似物；另一目的在于提供该类化合物的合成方法；又一目的在于提供该类化合物在药物方面的应用。为实现本发明目的，技术方案如下实现该本发明2'-氟-4'-取代核苷类似物，具有通式(I)结构OH(I)XX。，XR=CH3，CN，N3，C三CH;R'=H,F;X=F,OH,NH2;Y=H,CH3,F,OH，NH2。其可以通过活性化合物(I)或其潜药或其5'-磷酸酯与有机酸或无机酸反应形成盐，以盐的形式存在。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>本发明含2'-氟-4，-取代-核苷类似物在制备药物中的应用，将其应用于制备抗HBV或抗HCV或抗HIV病毒药物中，所述抗HBV病毒药物为抗乙肝药物;所述抗HCV病毒药物为抗丙肝药物；所述抗HIV病毒药物为抗艾滋病药物。本发明含2'-氟-4'-取代核苷类似物的制备反应，当R-N3时路径如下化合物U的合成将化合物i(D-核糖或L-核糖)溶于HCl/MeOH中，在水浴下保温密闭搅拌，加入吡啶终止反应，减压抽干，得浅黄色糖浆状物质化合物ii;化合物iii的合成将化合物ii溶于干燥的吡啶中，冰盐浴下缓慢滴加苯甲酰氯，室温下搅拌反应，反应完毕后将反应液倒入冰水中，氯仿提取。有机层用冰水、预冷的硫酸、饱和碳酸氢钠依次洗涤至水层呈弱碱性，再用冰水洗至水层呈中性，无水硫酸钠干燥，减压抽干得浅黄色糖浆状物质化合物iii。化合物iv的合成将苯甲酰化物化合物iii溶于氯仿中，加入红磷，冰水浴搅拌下缓慢滴加溴，搅拌30min左右，缓慢滴加冰水，室温搅拌，然后加入碎冰搅融，再将反应液倒入冰水中，氯仿提取。有机层饱和碳酸氢钠洗至水层呈弱碱性，冰水洗至水层呈中性，无水硫酸钠干燥，减压抽干得深黄色糖桨，用硅胶柱分离得白色干糖浆化合物iv。化合物v的合成将化合物iv溶解在干燥的吡啶中，冰水浴下缓慢滴加醋酐，搅拌30min左右，撤去冰水浴，室温搅拌约7h，升温到4(TC保持约lh。加入碎冰搅融后，将反应液倒入冰水中，氯仿提取。有机层用冰水、预冷的硫酸、饱和碳酸氢钠依次洗至水层呈弱碱性，冰水洗至水层呈中性，无水硫酸钠干燥，减压抽干得浅黄色糖浆状化合物V。化合物vi的合成将化合物V溶于干燥的二氯甲垸中，冰水浴下缓慢通入干燥的HC1气体，加入冰水洗涤，分出有机层，用饱和碳酸氢钠洗至水层呈弱碱性，冰水洗至水层呈中性，无水硫酸钠干燥，减压抽干得浅黄色糖浆。重结晶得白色固体化合物Vi。化合物Vii的合成将化合物Vi溶于干燥的二氯甲烷中和干燥的DMF中，-15匸左右搅拌下缓慢加入302(:12，-15°0搅拌30!^11左右，自然升至室温反应，在0t:下分3次加入咪唑，混合液室温搅拌，反应完毕后向反应液加入CH2C12稀释，用冰水洗涤，水层用CH2Cl2提取，有机层合并后用无水硫酸钠干燥，减压抽干溶剂得浅黄色糖浆。用硅胶柱分离纯化得白色固体化合物vii。化合物viii的合成将化合物vii溶于乙酸乙酯中，搅拌下加入Et3N3HF，升温至6(TC左右搅拌约3h，7(TC搅拌约1.5h。加入冰盐水终止反应，然后用二氯甲垸提取，有机层合并后依次用盐水、水、饱和碳酸氢钠洗涤，无水硫酸钠干燥，减压抽干溶剂得深黄色糖浆。纯化得浅黄色糖浆，粗品结晶得白色晶体化合物viii。化合物ix的合成将化合物viii溶解于无水二氯甲烷中，加入HBr-AcOH的混合溶液，室温搅拌反应。反应完毕后将混合物蒸干，用二氯甲烷溶解剩余物，并用碳酸氢钠洗涤二氯甲烷溶液，将二氯甲垸蒸去，得到糖浆状物。同时，将保护过的胞嘧啶和(NH4)2S04在HMDS中氮气保护下回流反应，反应完毕，减压蒸去溶剂，得到甲硅烷基化的胞喷啶。将上述反应中得到的糖桨状物溶于二氯乙垸中，加入到甲硅垸基化的胞嘧啶中，混合物在N2保护下回流反应。用冰终止反应，二氯甲烷萃取，二氯甲烷层依次用饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。干燥后蒸除溶剂，得到白色固体，柱色谱分离纯化，得到化合物ix。化合物x的合成将化合物ix溶于饱和的NH3-CH30H，室温搅拌反应。反应完毕后将溶剂蒸干，所得剩余物通过柱色谱纯化，得到化合物x。化合物xi的合成将化合物x，咪唑、三苯基膦，溶解在四氢呋喃中，向其中缓慢加入溶解有碘的四氢呋喃溶液。室温搅拌反应。反应完毕后蒸除溶剂，向剩余物中加入乙酸乙酯，过滤。蒸除乙酸乙酯，剩余物柱色谱分离得到化合物xi。化合物xii的合成将化合物xi溶解在四氢呋喃中，向其中加入DBU。在6(TC左右搅拌反应。反应完毕后蒸干溶剂，剩余物柱色谱分离得到化合物xii。化合物xiii的合成在0'C左右，将溶有IC1的DMF溶液加入到溶有NaN3的DMF溶液中，冰点搅拌约10分钟，将溶有化合物xii的DMF缓慢加入到上述溶液，继续反应。反应完毕后向混合溶液中加入亚硫酸钠，直到碘的颜色完全消失。减压蒸除溶剂，剩余物用柱色谱分离纯化，得到化合物xii化合物xiv的合成将化合物xiii溶于DMF中，搅拌下加入醋酸银，室温反应，反应完毕后过滤。在减压下移除溶剂，剩余物用柱色谱纯化，得到化合物xivo化合物XV的合成将化合物xiv溶于三乙胺甲醇溶液中，室温搅拌反应，反应结束后蒸除溶剂，剩余物用柱色谱纯化，得到化合物xv。本发明含2'-氟-4'-取代核苷类似物的制备反应，当R=CH3,CN,C=CH时路径如下化合物b的合成取化合物a，加入丙酮，搅拌条件下慢慢加入浓硫酸，室温下搅拌反应，TLC检测反应结束后，用浓氨水调节pH值，过滤，减压蒸去大部分丙酮，在搅拌条件下加入0.4%稀盐酸，在丙酮回流条件下反应，化合物a全部水解成化合物b。用固体NaHC03中和反应液，过滤，滤液在减压下蒸去溶剂，剩余物用二氯甲烷溶解，用无水Na2S04干燥过夜，过滤，蒸去溶剂后，得到黄色粘稠油状物b。化合物c的合成将化合物b和三乙胺溶于二氯甲烷，冰盐浴下慢慢滴加对氯苯甲酰氯，保持O'C以下机械搅拌反应。反应完毕后加入饱和NaHC03水溶液，二氯甲烷层用水、饱和食盐水洗涤，无水MgS04干燥，过滤，减压蒸去溶剂，并重结晶剩余物，得白色晶体化合物c。化合物d的合成化合物c溶解到无水二氯甲烷中，在氮气保护下，加入咪唑和叔丁基二甲基氯化硅(TBDMSC1)。室温反应，反应结束后，用盐酸中和反应，分出两层，有机层分别用水和饱和食盐水洗涤后，用无水Na2S04干燥，蒸除溶剂，剩余物通过柱色谱进行分离纯化，得到化合物d。化合物e的合成化合物d加入到甲醇钠-甲醇的混合物液中，室温反应。反应结束后用稀醋酸中和，过滤，用甲醇洗涤，减压蒸除溶剂，剩余物用柱色谱分离纯化，得化合物e。化合物f的合成在约-6(TC条件下向草酰氯的二氯甲烷溶液中逐滴滴加DMSO，在相同的温度下，搅拌约15分钟后，滴加化合物e的二氯甲烷溶液。在约-65'C搅拌反应约30分钟，加入三乙胺，室温搅拌反应。反应结束后向反应液中加入水，分出有机层，有机层用无水硫酸镁干燥。蒸除溶剂，剩余物用柱色谱分离纯化得化合物f。化合物g的合成在反应瓶中放入氢氧化钠和水，搅拌均匀后，加入甲醛水溶液、95%乙醇，然后再加入化合物f。约35f下搅拌反应。反应结束后，边搅拌边用冰水冷却反应瓶，直至产物完全析出。抽滤，固体用水洗涤至中性并烘干，所得固体溶解到无水甲醇中，再加入硼氢化钠，回流反应，反应结束后用稀盐酸中和反应液，用二氯甲垸萃取反应液，无水Na2S04干燥后蒸除溶剂，得化合物g。化合物h的合成化合物g溶解到甲醇中，加入DowexH+(事先用甲醇洗涤)，室温反应，反应完毕后将树脂过滤除去，并用甲醇反复洗涤树脂，溶液蒸干得固体。将所得固体溶于丙酮中，搅拌条件下慢慢加入浓硫酸(催化量)，室温搅拌反应，用浓氨水调节pH值，过滤，减压蒸去丙酮，得到化合物h。化合物i的合成在约-6(TC下向草酰氯的二氯甲烷溶液中逐滴滴加DMSO，滴完后搅袢约15分钟，滴加化合物h的二氯甲烷溶液，滴完后约-60'C反应约30分钟，加入三乙胺，室温反应约30分钟后加入水终止反应，分出有机层，有机层用无水Na2S04干燥。蒸除溶剂，剩余物用柱色谱分离纯化得固体。将C1CH2P(C6H5)3C1加入到无水四氢呋喃中，冷却到约-78。C，加入n-BuLi的正己垸溶液搅拌反应约lh，然后加入所得固体的干燥四氢呋喃溶液。温度逐渐升高到0'C左右，继续反应。反应完毕后小心滴加饱和的NH4C1溶液，用乙酸乙酯萃取，有机层用盐水洗涤两次，最后用无水MgS04干燥，减压蒸除溶剂，得到的剩余物溶解到无水四氢呋喃中，冷却到-78'C左右，慢慢滴加n-BuLi的正己烷溶液。搅拌反应2h左右，小心地用饱和NH4C1溶液终止反应。有机层用饱和食盐水洗涤，无水MgS04干燥，减压蒸除溶剂，剩余物用快速硅胶柱分离纯化，得化合物i。化合物j的合成将化合物i加入到稀盐酸溶液中，室温搅拌反应，反应完毕后用固体NaHC03中和，过滤，滤液在减压条件下蒸去溶剂，剩余物用二氯甲烷溶解，并用无水Na2S04干燥后过滤，蒸去溶剂，得化合物j。化合物k的合成将化合物j溶解到吡啶中，滴加BzCl，室温反应，反应完毕后蒸干溶剂，剩余物纯化后得化合物k。化合物1的合成将化合物k和2,2,6,6-四甲基哌啶-N-氧溶于二氯甲垸中，冷至0。C左右，将混合的次氯酸钠溶液、NaHC03和水混合溶液加入到反应液，0'C左右反应约30分钟，加入异丙醇，室温搅拌。分出的二氯甲垸层用水洗涤2次，无水MgS04干燥，过滤，蒸去溶剂得到的剩余物进行重结晶，得到化合物1。化合物m的合成将化合物k加入到无水乙醇和乙酸乙酯的混合液中，冷至0'C左右，分批加入硼氢化钠，搅拌反应，反应完毕后用稀醋酸中和，过滤，滤液蒸干，剩余物再用二氯甲烷溶解，然后水洗，二氯甲垸层用无水MgS04干燥，过滤，减压蒸去二氯甲烷，剩余物用二氯甲烷和石油醚的混合溶剂重结晶，得到固体物。将所得固体物溶于吡啶中，在O'C左右滴加BzCl，滴加完毕后，室温反应，反应完毕后蒸除溶剂，剩余物用乙酸乙酯萃取，饱和NaHC03溶液洗涤，无水Na2S04干燥，过滤，蒸去溶剂，剩余物柱色谱分离纯化得化合物m。化合物n的合成将化合物m溶于甲醇中，加入浓盐酸/二氧六环的混合溶液，室温反应，反应完毕后用NaHC03中和反应液，过滤，滤液减压蒸馏除去溶剂，剩余物溶于适量二氯甲烷中，用无水Na2S04干燥过夜，滤液蒸干，用柱色谱分离纯化得化合物n。化合物O的合成化合物n溶解在二氯甲烷中，室温条件下加入DAST搅拌反应，反应完毕后将混合物倒入饱和NaHC03溶液中，分出有机层，并用饱和NaHC03溶液洗涤，无水Na2S04干燥，柱色谱分离纯化得到化合物o。化合物p的合成将化合物o加入到甲酸溶液中，在室温下搅拌反应，反应完毕后减压蒸去溶剂，剩余物与甲苯共蒸得固体物，将所得固体物溶于干燥吡啶和醋酸酐溶液，室温反应，反应完毕后将反应液浓缩，然后与甲苯共蒸，得到化合物p。化合物q的合成化合物p溶于无水二氯甲烷中，将其冷至0'C左右，然后慢慢通HC1气体至饱和，室温下真空蒸去溶剂，剩余物真空干燥得到化合物q。化合物r的合成2,6-二氨基嘌呤与六甲基硅氮烷(HMDS)在(NHU)2S04存在下加热回流至得到透明溶液，真空下蒸去溶剂得到白色固体，将该固体溶于1,2-二氯乙烷中，再加入化合物q的1,2-二氯乙垸溶液及分子筛，在氮气保护下室温搅拌反应，TLC检测反应完全后，在反应液中加入二氯甲烷，并用硅藻土过滤，滤液分别用饱和NaHC03和食盐水洗涤，有机层用无水Na2S04干燥过夜，蒸去溶剂得到的剩余物用减压硅胶柱分离得到化合物r。化合物s的合成将化合物r溶解在NH3-CH30H饱和的溶液中，室温搅拌反应，反应完毕后蒸除溶剂，剩余物通过柱色谱分离纯化得到化合物s。本发明有益效果在于，通过对糖基和碱基的修饰，使该D-和L-核苷类似物含氟基团、炔基、叠氮、氰基等特殊结构弥补目前D-和L-核苷类似物毒副作用大、活性较小的不足；且该合成方法简便可行，收率较高，将其应用于制备抗HBV或抗HCV或抗HIV病毒药物，具有较好的应用价值。具体实施例方式根据本发明通式化合物I的合成路线并结合实施例对发明进行进一步说明，但并非限制本发明的范围。实施例1当碱基为胞嘧啶时化合物15的合成化合物ii的合成将化合物i(D-核糖或L-核糖)(8.66mmol)溶于31.2mlHCl/MeOH(0.2mmol/L)中，在27'C水浴下保温密闭搅拌3h，加入7.8ml吡啶终止反应，减压抽千，得浅黄色糖浆状物质化合物ii(96%);化合物iii的合成将化合物ii(7.92mmol)溶于21ml干燥的吡啶中，冰盐浴下缓慢滴加5.2ml苯甲酰氯(0.0447mo1)，室温下搅拌17h后将反应液倒入39ml冰水中，氯仿提取。有机层用冰水、预冷的3mol/L硫酸、饱和碳酸氢钠依次洗涤至水层呈弱碱性，再用冰水洗至水层呈中性，无水硫酸钠干燥4h以上，减压抽干得浅黄色糖浆状物质化合物iii(80.0%)。NMR(CDC13)Sppm:7.28~8.10(m，15H,OBz),5.87(m，1H，H-3)，5.68(d,1H，H-2),5.16(s,1H,H-1),4.72(m,2H,H-5)，4.52(q，1H,H-4),3.42(s,3H,OCH3)。化合物iv的合成将苯甲酰化物化合物iii(0.0027mmol)溶于13mol氯仿中，加入红磷(390mg，0.0126mol)冰水浴搅拌下缓慢滴加溴(1.3ml，0.025mmol)，搅拌30min后，缓慢滴加冰水1.3ml，室温搅拌4h,然后加入7g碎冰搅融，再将反应液倒入14ml冰水中，氯仿提取。有机层饱和碳酸氢钠洗至水层呈弱碱性，冰水洗至水层呈中性，无水硫酸钠干燥4h以上，减压抽干得深黄色糖浆，用硅胶柱分离(石油醚丙酮梯度洗脱)得白色干糖浆化合物iv(64.2%)。'HNMR(CDC13)Sppm:7.32~8.10(m,15H,OBz)，5.90(m,1H，H-3),5.70(d,1H,H-2),5.63(s，1H,H-l)，4.55~4.79(m，3H，H-5,H-4)。化合物v的合成将化合物iv(2.73mmo1)溶解在5ml干燥的吡啶中，冰水浴下缓慢滴加醋酐(0.0276mol),搅拌30min后，撤去冰水浴，室温搅拌7h,升温到4(TC保持lh。加入6.5g碎冰搅融后，将反应液倒入13ml冰水中，氯仿提取。有机层用冰水、预冷的3mol/L硫酸、饱和碳酸氢钠依次洗至水层呈弱碱性，冰水洗至水层呈中性，无水硫酸钠干燥4h以上，减压抽干得浅黄色糖浆状化合物v(92.1%)。'HNMR(CDCI3)Sppm:7.30~8.10(m,15H,OBz),6.43(s,1H，H-1),5.90(m,1H,H-3),5.80(d,1H，H-2),4.50~4.80(m,2H,H-5),2.00(s，3H，CH3COO-)。化合物vi的合成将化合物v(2.57mmol)溶于26ml干燥的二氯甲烷中，冰水浴下缓慢通入干燥的HC1气体2.5h，加入冰水19.5ml洗涤，分出有机层，用饱和碳酸氢钠洗至水层呈弱碱性，冰水洗至水层呈中性，无水硫酸钠干燥4h以上，减压抽千得浅黄色糖浆。用正己垸、二氯甲烷混合溶剂重结晶得白色固体化合物vi(65.1%)。'HNMR(CDCl3)Sppm:7.36~8.14(m,15H,OBz),6.68(d,J=4.4Hz,IH,H-l),5.59(dd,1H，H-3)，4.64~4.80(m,4H,H-2,H-4andH-5)。M.p.l39140。C。化合物vii的合成将化合物vi(2.81mmol)溶于13ml干燥的二氯甲烷中和3.5ml干燥的DMF中，-15。C搅拌下缓慢加入S02C12(0.0079mmol)，-15。C搅拌30min后，自然升至室温，反应3h，在0'C下分3次加入咪唑(0.0407mmol)，混合液室温搅拌15h，反应液加入CH2Cl2(26ml)稀释，用冰水G5ml)洗涤，水层用CH2Cl2提取，有机层合并后用无水硫酸钠干燥4h以上，减压抽干溶剂得浅黄色糖浆。用硅胶柱分离纯化(石油醚丙酮梯度洗脱)得白色固体化合物vii(76.0%)。'HNMR(CDCl3)S卯m:7.008.10(m,15H,OBz),6.71(d,J^4.4Hz,1H,H-l),5.59(dd,1H,H-3)，5.25(dd,1H,H-2),4.56~4.81(m,3H,H-4,H-5)。M.p.l28129。C。化合物viii的合成将化合物vii(2.2mtno1)溶于乙酸乙酯(54ml)中，搅拌下加入Et3N'3HF(2.08ml，0.013mmo1)，升温至60。C搅拌3h,70。C搅拌1.5h。加入冰盐水UOml)终止反应，然后用二氯甲烷提取，有机层合并后依次用盐水、水、饱和碳酸氢钠洗涤，无水硫酸钠干燥4h以上，减压抽干溶剂得深黄色糖浆。用硅胶漏斗(5cmX5cm)纯化(二氯甲垸洗脱)得浅黄色糖浆(86.8%),粗品在95%的乙醇溶液中结晶得白色晶体化合物viii(66.4%)。'HNMR(CDC13)Sppm:7.31~8.10(m,15H,OBz)，6.71(d,戶9.0Hz,1H,H-l)，5.68(dd,/=19.44Hz,1H,H-3),5.32(d,J:48.2Hz,1H,H-2),4.65~4.77(m,3H,H-4,H-5)。M.p.8082。C。化合物ix的合成将化合物viii(6.0mmo1)溶解于无水二氯甲垸(20ml)中，加入HBr-AcOH(45%，V/V，4.6ml，25mmo1)的混合溶液，室温搅拌反应20h。将混合物蒸干，用二氯甲烷(50ml)溶解剩余物，并用碳酸氢钠(3X30ml)洗涤二氯甲烷溶液，将二氯甲垸蒸去，得到糖浆状物。同时，将保护过的胞嘧啶(15mmol)和(NH4)2S04(O.lg)在HMDS(30ml)中氮气保护下回流反应17h，减压蒸去溶剂，得到甲硅垸基化的胞嘧啶。将上述反应中得到的糖浆状物溶于二氯乙烷(25ml)中，加入到甲硅烷基化的胞嘧啶中，混合物在N2保护下回流反应15h。用冰终止反应，用二氯甲烷(3X45ml)萃取，二氯甲烷层依次用饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。干燥后蒸除溶剂，得到白色固体，柱色谱分离(1%MeOH-CHCl3)纯化，得到化合物ix(71%)。NMR(CDC13)Sppm:8,07(d，J=9.86Hz,IH),7.45(d,J=9.82Hz,IH),7.26~8.10(m,10H,OBz),6.03(d,J=9.0Hz,IH,H-1),5.64(dd，JH9.44Hz，IH,H-3),5.26(d,J=48.2Hz,IH,H-2)，4.65~4.77(m,3H,H-4,H國5)。化合物x的合成将化合物ixG.60mmo1)溶于饱和的NHrCH3OH(30ml)室温搅拌反应15h。将溶剂蒸干，所得剩余物通过柱色谱(15:lCHCl3-MeOH)纯化，得到化合物x(800/。)。'HNMR(CDC13)Sppm:8.10(d,J=9.86Hz,IH),7.40(d，J=9.82Hz,1H)，6.03(d,J^9.0Hz，1H，H-1),5.64(dd,J=19.44Hz,IH,H-3),5.26(d,J=48.2Hz,IH,H-2),4.50(m,1H，H-4),3.70~3.77(m,2H,H-5)。化合物xi的合成将化合物x(9.46mmol)，咪唑U8.93mmo1)、三苯基膦U4.19mmo1)，溶解在四氢呋喃(50ml)中，向其中缓慢加入溶解有碘(14.18mmo1)的四氢呋喃溶液15ml。室温搅拌反应3h。蒸除溶剂，向剩余物中加入乙酸乙酯(100ml)，过滤。蒸除乙酸乙酯，剩余物柱色谱分离得到化合物xi(83.9%)。'HNMR(CDC13)Sppm:8.06(d,J=9.86Hz,1H),7.43(d,J-9.82Hz,1H)，6.01(d,7=9.0Hz,1H,H-l),5.66(dd,J-19.44Hz,1H，H-3)，5.22(d,J-48.2Hz,1H,H-2),4.57(m,1H,H-4),3.5S3.69(m,2H,H-5)。化合物xii的合成将化合物xi(5.88mmo1)溶解在四氢呋喃(50ml)中，向其中加入DBU(6.44mmo1)。在60'C搅拌3h。蒸干溶剂，剩余物柱色谱分离得到化合物xii(75.1%)。直接用于下一步反应。化合物xiii的合成在0°C，将溶有ICl(13.9mmol)的15mlDMF溶液加入到溶有NaN3(9.75mmol)的DMF(15ml)溶液中，(TC搅拌10分钟，将溶有化合物xii(6.8mmo1)的DMF(20ml)缓慢加入到上述溶液。(TC反应1小时。向混合溶液中加入亚硫酸钠，直到碘的颜色完全消失。减压蒸除溶剂，剩余物用柱色谱分离纯化，得到化合物xii(77.6%)。直接用于下一步反应。化合物xiv的合成将化合物xiii(5mmo1)溶于DMF(15ml)中，搅拌下加入醋酸银(6mmo1),室温反应8h，过滤。在减压下移除溶剂(5(TC以下)，剩余物用柱色谱纯化，得到化合物xiv(71.3°/。)。'HNMR(DMSO-6/6，300MHz)5:8,12(d，1H)，7.40(d，1H)，7.26(br,2H)，6.12(dd,1H),5.87(d,1H),5.09(t,1H),4.90(dt,1H),4.18(dt,1H),3.74-3.87(m，2H)，2.12(s,3H，CH3)。化合物xv的合成将化合物xiv(5mmol)溶于5。/。的三乙胺甲醇溶液(100ml)中，室温搅拌12h，蒸除溶剂，剩余物用柱色谱纯化，得到化合物xv(89.0%)。ESI-MS:287[M+H]。'HNMR(DMSO-c4，300MHz)S:8.14(d,1H),7.32(d,1H)，7.21(br,2H),6.08(dd,1H),5.82(d,1H)，5.11(t，1H),4.92(dt,1H),4.16(dt,1H),3.62-3.69(m,2H)。实施例2当4'-位取代基为炔基，碱基为1,6-二氨基嘌呤时化合物25的合成化合物b的合成取化合物a(60g)，加入丙酮(2L)，搅拌条件下慢慢加入浓硫酸(40ml)，室温下搅拌反应40分钟，TLC检测反应结束，用浓氨水调节pH=7~8，过滤，减压蒸去大部分丙酮，剩余丙酮和水约150ml，在搅拌条件下加入0.4%稀盐酸(150ml),在丙酮回流条件下反应20分钟，化合物a全部水解成化合物b。用固体NaHC03中和反应液至pH=7~8，过滤，滤液在减压下蒸去溶剂，剩余物用二氯甲垸溶解(200ml)，用无水Na2S04干燥过夜，过滤，蒸去溶剂后，得到黄色粘稠油状物b(73g，95%),ESI-MS:191[M+H]。化合物c的合成将化合物b(154g，0.81mol)和三乙胺G39ml，2.43moI)溶于二氯甲烷(1.50L)中，冰盐浴冷至0"，慢慢滴加对氯苯甲酰氯U13ml，0.891mol)，保持(TC以下机械搅拌反应4h，加入饱和NaHC03水溶液(500ml)，二氯甲烷层用水、饱和食盐水洗涤，无水MgS04干燥，过滤，减压蒸去溶剂，并重结晶剩余物，得白色晶体化合物c(196g，74.6%)，ESI-MS:330[M+H]。化合物d的合成化合物c((U14mo1)溶解到无水二氯甲烷(600ml)中，在氮气保护下，加入咪唑(15.5g，0.228mol)和叔丁基二甲基氯化硅(TBDMSCI)(18.9g，(U25mo1)。室温反应3h后，用1N盐酸中和反应，分出两层，有机层分别用水和饱和食盐水洗漆后，用无水Na2S04干燥，蒸除溶剂，剩余物通过柱色谱进行分离纯化，得到化合物d,产率69.2%，ESI-MS:444[M+H〗。化合物e的合成化合物d(0.64mmo1)加入到0.2N甲醇钠-甲醇(15ml)的混合物液中，室温反应4h，用稀醋酸中和，过滤，用甲醇洗涤，减压蒸除溶剂，剩余物用柱色谱分离纯化，得化合物e，产率75%，ESI-MS:305[M+H]。化合物f的合成-60匸下向草酰氯(3.41111，38.7mmo1)的二氯甲烷(80.0ml)溶液中逐滴滴加DMSO(5.5ml，77.5mmoD，在相同的温度下，搅拌15分钟后，滴加化合物e(25.7mmoD的二氯甲院(100ml)溶液。在-65'C搅拌反应30分钟，加入三乙胺(10.9ml，78.2讓o1)，室温搅拌反应30分钟。反应混合物中加入水，分出有机层，有机层用无水硫酸镁干燥。蒸除溶剂，剩余物用柱色谱分离醇化得化合物f，产率94.6%,ESI-MS:303[M+H]。化合物g的合成在反应瓶中放入氢氧化钠(1.3g)和水(11.5ml)，搅拌均匀后加入30%的甲醛水溶液、7.2ml95。/。乙醇，然后加入化合物f(25mmo1)。控制反应温度在3035'C下搅拌2h。反应结束后，边搅拌边用冰水冷却反应瓶，直至产物完全析出。抽滤，固体用水洗涤至中性并烘干，所得固体溶解到无水甲醇中，再加入硼氢化钠(0.925g，25mmo1)，回流反应lh,用稀盐酸中和反应液，二氯甲垸萃取(3X50ml)，加入无水Na2S04干燥，蒸除溶剂，得化合物g，产率90.5%，ESI-MS:335[M+H]。化合物h的合成化合物g(9.7mmo1)溶解到甲醇(260ml)中，加入DowexH+(40ml,事先用甲醇洗涤)，室温反应4h，将树脂过滤除去，并用甲醇反复洗涤树脂，溶液蒸干得固体。将所得固体溶于丙酮(200ml)中，搅袢条件下慢慢加入浓硫酸(催化量，2ml)，室温搅拌反应约0.5h，用浓氨水调节？11=7~8，过滤，减压蒸去大部分丙酮，再加入0.4%稀盐酸(40ml),丙酮回流条件下反应20分钟，用NaHC03中和反应液至pH-78，过滤，减压下蒸除溶剂，剩余物用适量二氯甲垸溶解，用无水Na2S04干燥后，蒸去溶剂，得到化合物h，产率肌2%，ESI-MS:261[M+H]。化合物i的合成-6(TC向草酰氯G.4ml，38.7mmo1)的二氯甲垸(80ml)溶液中逐滴滴加DMSO(5.5ml，77.5mmo1)，滴完搅拌15分钟后，滴加化合物h(25.7mmo1)的二氯甲烷(100ml)溶液，滴完后-60。C反应30分钟，加入三乙胺(10.9ml，78.2mmo1)，室温反应30分钟后加入水终止反应，分出有机层，有机层用无水Na2S04干燥。蒸除溶剂，剩余物用柱色谱分离纯化得固体。将C1CH2P(C6H5)3C1(2.15g，6.19mmo1)加入到无水四氢呋喃(50ml)中，冷却到-78°C，加入n-BuLi的正己烷溶液(1.6M，4.0ml)搅拌反应lh，然后加入所得固体(1.51mmol)的干燥四氢呋喃溶液(50ml)。冷却温度逐渐升高到0°C，继续反应3h。小心滴加饱和的NH4C1溶液(lOml)，用乙酸乙酯萃取(2X100ml),有机层用盐水洗涤两次(2X75ml)，最后用无水MgS04干燥，减压蒸除溶剂，得到的剩余物溶解到无水四氢呋喃U0ml)中，冷却至i」-78'C，慢慢滴加n-BuLi的正己垸溶液(1.6M,20ml)。搅拌反应2h，小心地用饱和NH4C1溶液(20ml)终止反应。有机层用饱和食盐水洗涤，无水MgS04干燥，减压蒸除溶剂，剩余物用快速硅胶柱分离纯化，得化合物i，产率48.5%,ESI-MS:255[M+H〗。化合物j的合成将化合物i(lOmmol)加入到0.2%的盐酸溶液(50ml)中，室温搅拌反应6h，用固体NaHC03中和反应至pH-78,过滤，滤液在减压条件下蒸去溶剂，剩余物用二氯甲垸溶解，并用无水Na2S04干燥后过滤，蒸去溶剂，得化合物j,产率99肌ESI-MS:215[M+H]。化合物k的合成将化合物j(5mmo1)溶解到吡啶(20ml)中，滴加BzCl(5mmo1)，室温反应6h，蒸干，剩余物纯化后得化合物k，产率85.3%，ESI-MS:319[M+H]。化合物1的合成将化合物k(59.3mmo1)和2,2,6,6-四甲基哌啶-N-氧(0.059mmo1)溶于二氯甲烷(99ml)中，冷至(TC，将次氯酸钠溶液(33.6ml，8.5~13.5%有效氯)、NaHC03(11.2g)和水(190ml)混合溶液加入到反应液，0'C反应30分钟，加入异丙醇(1.95ml)，室温反应10分钟，分出的二氯甲垸层用水洗涤2次，无水MgS04干燥，过滤，蒸去溶剂得到的剩余物进行重结晶，得到化合物l，产率87.8%，ESI-MS:317[M+H]。化合物m的合成将化合物k(0.05mol)加入到无水乙醇(60ml)和乙酸乙酯(30ml)的混合液中，冷至0°C，分批加入硼氢化钠(23.3g，612mmol)，然后在O'C搅拌反应lh，用稀醋酸中和至pH-78，过滤，滤液蒸干，剩余物再用二氯甲烷溶解，然后水洗，二氯甲烷层用无水MgS04干燥，过滤，减压蒸去二氯甲烷，剩余物用二氯甲烷和石油醚的混合溶剂重结晶，得到固体物。将所得固体物溶于吡啶中，在0'C条件下，滴加BzCl(50mmo1)，滴加完毕后，室温反应3h，蒸除溶剂，剩余物用乙酸乙酯萃取，饱和NaHC03溶液洗涤，无水Na2S04干燥，过滤，蒸去溶剂，剩余物柱色谱分离纯化得化合物m，产率89.7%，ESI-MS:423[M+H〗。化合物n的合成将化合物m(4mmo1)溶于甲醇(22ml)中，加入4.0M的盐酸/二氧六环混合溶液(20ml)，室温反应10h，用NaHC03中和反应液至pH=7~8，过滤，滤液减压蒸馏除去溶剂，剩余物溶于适量二氯甲烷中，用无水Na2S04干燥过夜，滤液蒸干，用柱色谱分离纯化得化合物n，产率89.5%，ESI-MS:397[M+H]。化合物o的合成化合物n(1.76mmd)溶解在二氯甲烷中，室温条件下加入DAST(0.4ml，3.03mmol)搅拌12h，将混合物倒入10ml饱和NaHC03溶液中，分出有机层，并用饱和NaHC03溶液洗涤，无水Na2SCU干燥，柱色谱分离纯化得到化合物o，产率11.5%，ESI-MS:399[M+H〗。化合物p的合成将化合物o(lOmmol)加入到20ml浓度为80%的甲酸溶液中，在室温下搅拌反应12h，减压蒸去溶剂，剩余物与甲苯共蒸得固体物，将所得固体物溶于干燥吡啶和醋酸酐溶液，室温反应4h，反应液浓縮后与甲苯共蒸，得到化合物p，产率90.3%，ESI-MS:427[M+H]。'HNMR(CDCl3，300MHz)S:2.07(s,3H),2.85(s,1H),4.62-4.77(m,2H)，4.89-5.07(m，3H)，7.32陽8.17(m,10H)。化合物q的合成化合物p(4.76mmo1)溶于无水二氯甲烷(40ml)中，将其冷至0'C，然后慢慢通HC1气体至饱和(约3h)，室温下真空蒸去溶剂，剩余物真空干燥2小时得到化合物q，产率87.P/。，化合物q直接用于下一歩反应。化合物r的合成2,6-二氨基嘌呤(4.78mmo1)与六甲基硅氮烷(HMDS,9ml)在(NH4)2S04(50mg)存在下加热回流至得到透明溶液(约5h)，真空下蒸去溶剂得到白色固体，将该固体溶于1,2-二氯乙烷G5ml)中，再加入化合物q的1，2-二氯乙烷溶液(4.56mmol，30ml)及0.4nm分子筛(2.6g)，在氮气保护下室温搅拌6天，TLC检测反应完全后，在反应液中加入二氯甲烷(80ml)，并且用硅藻土过滤，滤液分别用饱和NaHC03和食盐水洗涤，有机层用无水Na2S04干燥过夜，蒸去溶剂得到的剩余物用减压硅胶柱分离得到化合物r,产率78.5%，ESI掘:517[M+H]。'HNMR(CDC13，300MHz)S:2.85(s,1H)，4.67-4.79(m,2H),4.92-5.13(m,3H)，5.79(br,1H),7.32隱8.17(m,9H),8.35(s,1H)。化合物25的合成将化合物r(3.60mmo1)溶解在饱和的NH3-甲醇溶液(30ml)中，室温搅拌反应15h，蒸除溶剂，剩余物通过柱色谱分离纯化得到化合物25，产率78.9%,ESI-MS:309[M+H]。'HNMR(CDC13，300MHz)5:2.85(s,1H),3.69-3.79(m,2H),4.79-5.07(m,3H),5.60(br,1H),5.79(br,1H),7.32-8.17(m,4H),8.35(s，1H)。本发明体外抗HIV活性实验化合物l、15、19、36、39、46、50、52在细胞培养内的抗HIV-1活性1.材料和方法1.1材料1.1.1药物待试药物化合物l、9、15、19、36、39、46、50、52，无批号，水不溶，DMSO可溶解，实验时用DMSO溶解配成适当浓度后用培养基稀释，立即加入细胞培养。阳性对照药(1)齐多夫定(Zidovudine，AZT)为临床应用的已知核苷类HIV-1逆转录酶抑制剂，为白色粉末，购自上海迪赛诺化学制药有限公司，批号040201b，(2)奈韦拉平(nevir叩ine，NVP)购自南京泽众医化信息研究中心(批号0301001),为临床应用的已知非核苷类逆转录酶抑制剂。1.1.2病毒HIV-1IIIB实验病毒株，为美国MountSinaiMedicalCenter蒋建东博士赠予，在H9细胞中扩增，"96"C冻存。1.1.3细胞传代人T淋巴细胞MT-4,为美国科罗拉多大学医学研究中心张兴权教授赠送，本室传代，496'C保存。细胞培养基RPMIMedium1640培养基，加10%胎牛血清、100IU/ml青霉素、100pg/ml链霉素和卡那霉素及含L-谷氨酰胺。37'C，5%<:02培养箱中培养，每三天传代一次。1.1.4主要试剂RPMIMedium1640培养基为美国GIBCO公司产品；胎牛血清(FetalBovineSerum)为天津市川页生化制品有限公司产品；青霉素和链霉素为华北制药厂产品；卡那霉素为上海旭东海普药业有限公司口广叩5四氮唑蓝(Thiazolylblue,MTT)，梓檬酸为美国Sigma公司产品；TritonX-100为瑞典KEBOABSTOCKHOLM公司产品；N,N二甲基甲酰胺(N,N-DimethylFormamide)为北京化工厂产品；HIV-1P24抗原检测试剂盒用荷兰BioMerieux公司产品。1.1.5主要仪器EmaxTM酶标仪为美国MolICularDevices公司产品；实验在3级生物安全实验室中进行。1.2实验方法96孔培养板，设药物及阳性对照药抑制病毒实验组，每孔加入待测药物的不同浓度DMSO溶液lOOul或阳性对照药AZT和NVP或大鼠口服药物不同剂量组后不同时间取血不同稀释组，每孔lOOul，同时设细胞对照和病毒对照组阳性药AZT和NVP对照组。MT-4细胞用100TCID50HIV-1IIIB感染1.5小时后，用培养基洗涤1次后，配成2xl()s细胞/mr接种于药物抑制病毒实验组和阳性对照药物组及病毒对照组的96孔培养板中。细胞对照组加等量培养液，培养4天后。用显微镜观察细胞病变，同时用MTT染色测定毒性，上清液按说明书方法测定P24抗原。分别计算抑制率、半数有毒浓度(CC5Q)和半数有效浓度(IC50)及SI。2结果2.1化合物1，9，15，19，36，39，46，50，52在MT-4细胞培养内对HIV-1的抑制作用用MTT法测定化合物1，9，15，19，36，39，46，50，52对细胞的毒性和抗HIV-1活性，并比较药物用HIV-1感染细胞和未感染细胞测定细胞毒性对CCm)禾口SI的影响。结果见表l。表1化合物1，9，15,19，36，39，46，50,52及阳性药物AZT和NVP在MT-4细胞培养内抗HIV-1活性<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>由表1和表2可知，新型2'-氟-4'-取代-核苷均具有良好的抗HIV活性，尤其化合物1、化合物15和化合物19具有很好的应用开发前景。该类化合物的开发，将为艾滋病患者带来福音。本发明体外抗HCV活性实验1.材料及方法1.1细胞培养HCV复制细胞(Awa,5)在Dulbecco's改进的包含10%牛胎儿血清和lmg/mL的G418的Eagle介质中培养。293-Sip-L细胞在Dulbecco's改进的含10%牛胎儿血清和250ug/mL的G418及150ug/mL的潮霉素B的Kagle介质中培养。]2HCV感染测定方法(RT-PCR方法)用60mm直径的Petri培养皿中的细胞在包含100yL的HCV阳性的培养基中培育12小时。然后细胞在不包含HCV的新鲜介质中培育并且每天更换一次。细胞在感染7天后检测HCV-RNA时，细胞需要胰蛋白酶化并用离心法用Dulbecco's改进的Eagle介质清洗两次。第二次洗涤的上层部分(作为对照)和洗过的细胞成对收集来进RNA提取和RT-PCR检测。e-肌动蛋白mRNA同时测定以做对照。1.3HCV-RNA的定量检测采用全自动PCR酶联免疫法来定量测定HCV-RNA(2.0版，RocheDiagnostics,Branchburg,NJ)。2.结果.化合物17在6，0.6和0.06ng/mL时有抑制效果(见下表)。HCV-RNA水平用全自动PCR酶联免疫法来测定。<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>由此看来，化合物17对HCV有较强的抑制作用。权利要求1.其具有通式(I)结构的2’-氟-4’-取代-核苷类似物，或其与有机酸或无机酸反应形成的盐或其5’-磷酸酯，其特征在于，通式(I)结构如下其中R＝CH3，CN，N3，C≡CH；X＝F，OH，NH2；Y＝H，CH3，F，OH，NH2。2、如权利要求1所述的2'-氟-4'-取代核苷类似物，其特征在于，所述化合物是以下化合物之一<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>19<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>20<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>21<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>22<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>23<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>24<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>25<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>26<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>27<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>28<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>29<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>30<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>31<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>32<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>33<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>34<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>35<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>36<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>37<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>38<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>39<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>40<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>41<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>423、如权利要求1所述的核苷类似物的制备方法，其特征在于，包括下列步骤-化合物ii的合成将化合物ID-核糖或L-核糖溶于HCl/MeOH中，在水浴下保温密闭搅拌，加入吡啶终止反应，减压抽干，得浅黄色糖浆状物质化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>化合物iii的合成将化合物ii溶于干燥的吡啶中，冰盐浴下缓慢滴加苯甲酰氯，室温下搅拌反应，反应完毕后将反应液倒入冰水中，氯仿提取。有机层用冰水、预冷的硫酸、饱和碳酸氢钠依次洗涤至水层呈弱碱性，再用冰水洗至水层呈中性，无水硫酸钠干燥，减压抽干得浅黄色糖浆状物质化合物Ui;化合物iv的合成将苯甲酰化物化合物iii溶于氯仿中，加入红磷，冰水浴搅拌下缓慢滴加溴，搅拌30min左右，缓慢滴加冰水，室温搅拌，然后加入碎冰搅融，再将反应液倒入冰水中，氯仿提取。有机层饱和碳酸氢钠洗至水层呈弱碱性，冰水洗至水层呈中性，无水硫酸钠干燥，减压抽干得深黄色糖浆，用硅胶柱分离得白色干糖浆化合物iv;化合物V的合成将化合物iv溶解在干燥的吡啶中，冰水浴下缓慢滴加醋酐，搅拌30min左右，撤去冰水浴，室温搅拌约7h，升温到4(TC保持约lh。加入碎冰搅融后，将反应液倒入冰水中，氯仿提取。有机层用冰水、预冷的硫酸、饱和碳酸氢钠依次洗至水层呈弱碱性，冰水洗至水层呈中性，无水硫酸钠干燥，减压抽干得浅黄色糖浆状化合物v;化合物vi的合成将化合物V溶于干燥的二氯甲垸中，冰水浴下缓慢通入干燥的HC1气体，加入冰水洗涤，分出有机层，用饱和碳酸氢钠洗至水层呈弱碱性，冰水洗至水层呈中性，无水硫酸钠干燥，减压抽干得浅黄色糖浆。重结晶得白色固体化合物vi;化合物Vii的合成将化合物Vi溶于干燥的二氯甲烷中和干燥的DMF中，-15"左右搅拌下缓慢加入802<:12，-15"搅拌301^1!左右，自然升至室温反应，在0'C下分3次加入咪唑，混合液室温搅拌，反应完毕后向反应液加入CH2C12稀释，用冰水洗涤，水层用CH2Cl2提取，有机层合并后用无水硫酸钠干燥，减压抽干溶剂得浅黄色糖浆。用硅胶柱分离纯化得白色固体化合物vi;。化合物viii的合成将化合物vii溶于乙酸乙酯中，搅拌下加入Et3N3HF，升温至6(TC左右搅拌约3h，70'C搅拌约1.5h;加入冰盐水终止反应，然后用二氯甲垸提取，有机层合并后依次用盐水、水、饱和碳酸氢钠洗涤，无水硫酸钠干燥，减压抽干溶剂得深黄色糖浆；纯化得浅黄色糖浆，粗品结晶得白色晶体化合物viii;化合物ix的合成将化合物viii溶解于无水二氯甲烷中，加入HBr-AcOH的混合溶液，室温搅拌反应；反应完毕后将混合物蒸干，用二氯甲烷溶解剩余物，并用碳酸氢钠洗涤二氯甲垸溶液，将二氯甲垸蒸去，得到糖浆状物。同时，将保护过的6-氨基嘌呤和(NH4)2S04在HMDS中氮气保护下回流反应，反应完毕，减压蒸去溶剂，得到甲硅烷基化的6-氨基嘌呤。将上述反应中得到的糖浆状物溶于二氯乙烷中，加入到甲硅烷基化的6-氨基嘌呤中，混合物在N2保护下回流反应；用冰终止反应，二氯甲烷萃取，二氯甲烷层依次用饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。干燥后蒸除溶剂，得到白色固体，柱色谱分离纯化，得到化合物ix;化合物x的合成将化合物ix溶于饱和的NHrCH30H,室温搅拌反应，反应完毕后将溶剂蒸干，所得剩余物通过柱色谱纯化，得到化合物x;化合物xi的合成将化合物X，咪唑、三苯基膦，溶解在四氢呋喃中，向其中缓慢加入溶解有碘的四氢呋喃溶液；室温搅拌反应。反应完毕后蒸除溶剂，向剩余物中加入乙酸乙酯，过滤。蒸除乙酸乙酯，剩余物柱色谱分离得到化合物xi;化合物xii的合成将化合物xi溶解在四氢呋喃中，向其中加入DBU;在6(TC左右搅拌反应，反应完毕后蒸干溶剂，剩余物柱色谱分离得到化合物xii;化合物xiii的合成在0'C左右，将溶有IC1的DMF溶液加入到溶有NaN3的DMF溶液中，冰点搅拌约10分钟，将溶有化合物xii的DMF缓慢加入到上述溶液，继续反应；反应完毕后向混合溶液中加入亚硫酸钠，直到碘的颜色完全消失；减压蒸除溶剂，剩余物用柱色谱分离纯化，得到化合物xii;化合物xiv的合成将化合物xiii溶于DMF中，搅拌下加入醋酸银，室温反应，反应完毕后过滤；在减压下移除溶剂，剩余物用柱色谱纯化，得到化合物xiv;化合物XV的合成将化合物xiv溶于三乙胺甲醇溶液中，室温搅拌反应，反应结束后蒸除溶剂，剩余物用柱色谱纯化，得到化合物XV。4、如权利要求1所述的核苷类似物的制备方法，其特征在于，包括下列步骤-PqrsTBDMS=t-butyldimethylsilyl化合物b的合成取化合物a，加入丙酮，搅拌条件下慢慢加入浓硫酸，室温下搅拌反应，TLC检测反应结束后，用浓氨水调节pH值，过滤，减压蒸去大部分丙酮，在搅拌条件下加入0.4%稀盐酸，在丙酮回流条件下反应，化合物a全部水解成化合物b;用固体NaHC03中和反应液，过滤，滤液在减压下蒸去溶剂，剩余物用二氯甲垸溶解，用无水Na2S04干燥过夜，过滤，蒸去溶剂后，得到黄色粘稠油状物b;化合物C的合成将化合物b和三乙胺溶于二氯甲垸，冰盐浴下慢慢滴加对氯苯甲酰氯，保持0°C以下机械搅拌反应；反应完毕后加入饱和NaHC03水溶液，二氯甲烷层用水、饱和食盐水洗涤，无水MgS04干燥，过滤，减压蒸去溶剂，并重结晶剩余物，得白色晶体化合物C;化合物d的合成化合物C溶解到无水二氯甲烷中，在氮气保护下，加入咪唑和叔丁基二甲基氯化硅(TBDMSC1);室温反应，反应结束后，用盐酸中和反应，分出两层，有机层分别用水和饱和食盐水洗涤后，用无水Na2S04干燥，蒸除溶剂，剩余物通过柱色谱进行分离纯化，得到化合物d;化合物e的合成化合物d加入到甲醇钠-甲醇的混合物液中，室温反应；反应结束后用稀醋酸中和，过滤，用甲醇洗涤，减压蒸除溶剂，剩余物用柱色谱分离纯化，得化合物e;化合物f的合成在约-6(TC条件下向草酰氯的二氯甲烷溶液中逐滴滴加DMSO,在相同的温度下，搅拌约15分钟后，滴加化合物e的二氯甲烷溶液；在约-65t:搅拌反应约30分钟，加入三乙胺，室温搅拌反应；反应结束后向反应液中加入水，分出有机层，有机层用无水硫酸镁干燥，蒸除溶剂，剩余物用柱色谱分离纯化得化合物f;化合物g的合成在反应瓶中放入氢氧化钠和水，搅拌均匀后，加入甲醛水溶液、95%乙醇，然后再加入化合物f，35。C下搅拌反应；反应结束后，边搅拌边用冰水冷却反应瓶，直至产物完全析出；抽滤，固体用水洗涤至中性并烘干，所得固体溶解到无水甲醇中，再加入硼氢化钠，回流反应，反应结束后用稀盐酸中和反应液，用二氯甲烷萃取反应液，无水Na2S04干燥后蒸除溶剂，得化合物g;化合物h的合成化合物g溶解到甲醇中，加入DowexH+(事先用甲醇洗涤)，室温反应，反应完毕后将树脂过滤除去，并用甲醇反复洗涤树脂，溶液蒸干得固体；将所得固体溶于丙酮中，搅拌条件下慢慢加入浓硫酸(催化量)，室温搅拌反应，用浓氨水调节pH值，过滤，减压蒸去丙酮，得到化合物h;化合物i的合成在约-6(TC下向草酰氯的二氯甲烷溶液中逐滴滴加DMSO，滴完后搅拌约15分钟，滴加化合物h的二氯甲烷溶液，滴完后约-6(TC反应30分钟，加入三乙胺，室温反应约30分钟后加入水终止反应，分出有机层，有机层用无水Na2S04干燥，蒸除溶剂，剩余物用柱色谱分离纯化得固体；将C1CH2P(C6H5)3C1加入到无水四氢呋喃中，冷却到约-78",加入n-BuLi的正己垸溶液搅拌反应约lh，然后加入所得固体的干燥四氢呋喃溶液，温度逐渐升高到0t:左右，继续反应；反应完毕后小心滴加饱和的NH4C1溶液，用乙酸乙酯萃取，有机层用盐水洗涤两次，最后用无水MgSCU干燥，减压蒸除溶剂，得到的剩余物溶解到无水四氢呋喃中，冷却到-78°C左右，慢慢滴加n-BuLi的正己烷溶液。搅拌反应2h左右，小心地用饱和NH4C1溶液终止反应；有机层用饱和食盐水洗涤，无水MgS04干燥，减压蒸除溶剂，剩余物用快速硅胶柱分离纯化，得化合物i;化合物j的合成将化合物i加入到稀盐酸溶液中，室温搅拌反应，反应完毕后用固体NaHC03中和，过滤，滤液在减压条件下蒸去溶剂，剩余物用二氯甲垸溶解，并用无水Na2S04干燥后过滤，蒸去溶剂，得化合物j;化合物k的合成将化合物j溶解到吡啶中，滴力nBzCl，室温反应，反应完毕后蒸千溶剂，剩余物纯化后得化合物k;化合物1的合成将化合物k和2,2,6,6-四甲基哌啶-N-氧溶于二氯甲烷中，冷至0'C左右，将混合的次氯酸钠溶液、NaHC03和水混合溶液加入到反应液，0。C左右反应约30分钟，加入异丙醇，室温搅拌，分出的二氯甲烷层用水洗涤2次，无水MgS04干燥，过滤，蒸去溶剂得到的剩余物进行重结晶，得到化合物1;化合物m的合成将化合物k加入到无水乙醇和乙酸乙酯的混合液中，冷至0'C左右，分批加入硼氢化钠，搅拌反应，反应完毕后用稀醋酸中和，过滤，滤液蒸干，剩余物再用二氯甲垸溶解，然后水洗，二氯甲烷层用无水MgSCU干燥，过滤，减压蒸去二氯甲烷，剩余物用二氯甲烷和石油醚的混合溶剂重结晶，得到固体物；将所得固体物溶于吡啶中，在0'C左右滴加BzCl，滴加完毕后，室温反应，反应完毕后蒸除溶剂，剩余物用乙酸乙酯萃取，饱和NaHC03溶液洗涤，无水Na2S04干燥，过滤，蒸去溶剂，剩余物柱色谱分离纯化得化合物m;化合物n的合成将化合物m溶于甲醇中，加入浓盐酸/二氧六环的混合溶液，室温反应，反应完毕后用NaHC03中和反应液，过滤，滤液减压蒸馏除去溶剂，剩余物溶于适量二氯甲烷中，用无水Na2S04干燥过夜，滤液蒸干，用柱色谱分离纯化得化合物n;化合物o的合成化合物n溶解在二氯甲烷中，室温条件下加入DAST搅拌反应，反应完毕后将混合物倒入饱和NaHC03溶液中，分出有机层，并用饱和NaHC03溶液洗涤，无水Na2S04干燥，柱色谱分离纯化得到化合物o;化合物p的合成将化合物o加入到甲酸溶液中，在室温下搅拌反应，反应完毕后减压蒸去溶剂，剩余物与甲苯共蒸得固体物，将所得固体物溶于干燥吡锭和醋酸酐溶液，室温反应，反应完毕后将反应液浓縮，然后与甲苯共蒸，得到化合物p;化合物q的合成化合物p溶于无水二氯甲烷中，将其冷至0。C左右，然后慢慢通HC1气体至饱和，室温下真空蒸去溶剂，剩余物真空干燥得到化合物q;化合物r的合成2,6-二氨基嘌呤与六甲基硅氮烷(HMDS)在(NH4)2S04存在下加热回流至得到透明溶液，真空下蒸去溶剂得到白色固体，将该固体溶于,2-二氯乙垸中，再加入化合物q的1，2-二氯乙烷溶液及分子筛，在氮气保护下室温搅拌反应，TLC检测反应完全后，在反应液中加入二氯甲垸，并用硅藻土过滤，滤液分别用饱和NaHC03和食盐水洗涤，有机层用无水Na2S04干燥过夜，蒸去溶剂得到的剩余物用减压硅胶柱分离得到化合物r;化合物s的合成将化合物r溶解在NH3-CH3OH饱和的溶液中，室温搅拌反应，反应完毕后蒸除溶剂，剩余物通过柱色谱分离纯化得到化合物s。5、如权利要求1或2中所述的2'-氟-4'-取代核苷类似物在制备药物中的应用，其特征在于，将其应用于制备抗HBV病毒药物或抗HCV病毒药物或抗HIV病毒药物。6、如权利要求5中所述的2'-氟-4'-取代-核苷类似物在制备药物中的应用，其特征在于，HBV病毒药物为抗乙肝药物，HCV病毒药物为抗丙肝药物，HIV病毒药物为抗艾滋病药物。全文摘要本发明公开了核苷类似物、其制备方法及其应用，具体涉及含2’-氟-4’-取代核苷类似物或其盐或其5’-磷酸酯、其制备方法及其应用，该化合物有如右通式。将其应用于治疗病毒感染，尤其是HBV，HCV或HIV的感染，具有较好的活性。文档编号A61K31/7042GK101434627SQ20081017749公开日2009年5月20日申请日期2007年8月7日优先权日2007年7月16日发明者包新洪,常俊标,威王,强王,祁秀香,郭晓河申请人:郑州大学