专利名称：皮肤用表皮生长因子纳米脂质载体制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种纳米脂质载体制剂，更具体而言，涉及一种含有表皮生
长因子(EGF)的皮肤用纳米脂质载体制剂及其制备方法。
背景技术：
人体的肌肤易受到自然界环境、大气、辐射等多种因素的作用而受到损 伤，因此，皮肤特别需要保护和对受伤害的皮肤进行修复。
传统的皮肤护理仅局限于油膜履盖或保持水份等物理的方法。如今，随 着生命科学的发展，人们已经掌握了表皮细胞衰老及其生化过程。因此，护 肤理念开始转向细胞水平的护理。与此同时，随着生物学、皮肤生理学的发 展，人们发现了许多具有延緩或抑制皮肤的衰老和恢复或修复皮肤创伤等功 能的天然高活性物质，如超氧化物歧化酶(SOD)、透明质酸(HA)、表皮生长 因子(Epidermal Growth Factor,简称EGF)等。这种在细胞层次的仿生护理 给表皮细胞额外的营养或刺激，通过细胞本身新陈代谢从根本上保持肌肤自 然健康，开创了生物护肤的新概念。
1975年首次从人尿液中提取得到人表皮生长因子(hEGF)。卯年代采 用生物工程技术基因重组，即通过选择生产菌抹，进行工程菌发酵，再经纯 化、冻干后制得hEGF,称为基因重组人表皮生长因子。hEGF作为一种强 有力的细胞分裂促进因子，具有多种生物活性，它可以加速角膜、皮肤等表 皮创伤的修复，促进人皮肤上皮细胞、角膜上皮细胞和哺乳动物上皮细胞生 长，增强表皮细胞的蛋白质、DNA、 RNA的合成与细胞代谢等作用。皮肤 外用制剂中添加hEGF可修复皮肤受损细胞，促进皮肤新细胞的产生，同时增加其他内源性生长因子的含量，促进细胞分泌透明质酸和糖蛋白，合理调 整皮肤结构，延緩皮肤衰老，减少皱紋，并具有增白、保持皮肤润泽、柔软
与富有弹性等作用。由于hEGF是目前发现的热、酸稳定性最高的生物活 性多肽之一，且半衰期较长，因此，含hEGF的皮肤外用制剂具有广阔的 市场潜力。
目前，有文献报道，将hEGF做成水凝胶、水溶液、普通乳剂等剂型， 但是由于hEGF分子量较大，这些剂型中的hEGF稳定性差，并且分 质 无明显的吸收促进作用，造成制剂透皮效果不佳，有效成分的吸收利用度很 低。
为了克服上述缺点，本发明将表皮生长因子制备成皮肤用纳米脂质载体 制剂。纳米脂质载体是近年来继固体脂质纳米粒发M来的第二代亚微粒载 药系统，其作为皮肤用药物载体，具有物理稳定性高、緩释性等特点。而且 由于脂类本身结构与人类皮肤脂质有高度的相似性，故其具有增加皮肤角质 层通透性、组织亲和力强、生物降解性好、无毒性等优点，所以纳米脂质栽 体已被越来越广泛地用于皮肤载体给药系统的研究中。
发明内容
本发明的目的在于提供一种皮肤用表皮生长因子纳米脂质载体制剂，该 制剂在储存时EGF可长期稳定地存在于其中，而使用时在短时间内有效而 稳定地使EGF吸收入皮肤内。
本发明的另 一 目的在于提供一种上述皮肤用表皮生长因子纳米脂质栽 体制剂的制备方法。
为达到上述目的，本发明采用如下技术方案
本发明的皮肤用表皮生长因子纳米脂质载体制剂，以lOOmL纳米脂质载 体制剂计，其组成为为:
表皮生长因子
脂质材料
乳化剂
抗氧剂
抑菌剂
透皮吸收促进剂
润湿剂
余量为纯水。
0.02 ~ 5 mg 2~20g 0.5~ 10g 0.01 ~2g 0.01 ~ 1.5 g 0.02 ~ 5 g 0.3~ 15g
在本发明优选的实施方案中，以100mL纳米脂质载体制剂计，其组成
表皮生长因子
脂质材料
乳化剂
抗氧剂
抑菌剂
透皮吸收促进剂
润湿剂
余量为水。
0.05 ~ 2 mg 2~15g l~8g 0.01 ~ 0.5 g 0.01 ~ 0.5 g 0.05 ~ 3 g 0.5~10g
其中，所述的表皮生长因子选自人表皮生长因子、鼠表皮生长因子、兔 表皮生长因子和猪表皮生长因子之中，并优选人表皮生长因子。
所述的脂质材料为可皮肤外用的天然或合成脂质，可以为如下脂质材料 中的一种或多种脂肪酸甘油酯，例如棕榈酸甘油酯，硬脂酸甘油酯，二十二酸单、双、三甘油酯混合物，棕榈酸硬脂酸甘油酯，链长在CrCuj之间的 脂肪酸甘油酯(简称MCT);脂肪酸，例如硬脂酸、棕榈酸、油酸、亚油酸； 蜡质，例如十六醇、十八醇、鯨蜡醇十六酸酯、凡士林、石蜡；固醇，例如 胆固醇；天然植物油，例如大豆油、蓖麻油、红花油、橄榄油；维生素，例 如维生素E、维生素A、维生素酯的一种及其混合物。
所述的乳化剂可以为如下乳化剂中的一种或多种磷脂，如大豆磷脂、 卵磷脂、氢化磷脂；聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物，如泊洛沙姆；脂肪酸山梨坦； 聚山梨酯，如吐温(Tween)60、吐温80;聚氧乙烯脂肪酸酯；聚氧乙烯脂肪 醇醚；聚氧乙烯蓖麻油；失水山梨醇脂肪酸酯；和羊毛醇。其中乳化剂优选 为磷脂、吐温80和聚氧乙烯蓖麻油中的一种或多种。
所述的抗氧剂可以为生育酚、维生素C、叔丁基羟基苯甲醚、2,5-二 叔丁基对甲酚、去曱二氢愈创酸、没食子酸丙酯等常用的皮肤外用抗氧剂中 的一种或其混合物。
所述的抑菌剂为苯扎氯胺、苯扎溴铵、尼泊金曱酯、尼泊金乙酯、尼泊 金丙酯、三氯叔丁醇和山梨酸中的一种或几种的混合物。
所述的润湿剂为甘油、丙二醇、透明质酸及其钠盐和壳聚糖中的一种或 多种的混合物。
所述的透皮吸收促进剂可以为如下化合物中的一种或多种有机溶剂， 例如乙醇、丙二醇、乙酸乙酯及二曱基酰胺等；月桂氮卓酮及其同系物；角 质保湿与软化剂，如尿素、水杨酸及吡咯酮；薛烯，如薄荷醇、樟脑、柠檬 烯。其中，所述透皮吸收促进剂优选为丙二醇、月桂氮卓酮、尿素、水杨酸 和薄荷醇中的一种或多种。
本发明皮肤用表皮生长因子纳米脂质载体制剂的制备方法如下
步骤l:将EGF溶于一定量的纯水中形成水相，在水相中可以任选加入乳化剂与润湿剂；将脂质材料和乳化剂溶解于乙酸乙酯或二氯曱烷中形成油相， 在油相中可以4壬选加入抗氧剂和透皮吸收促进剂；
步骤2:在高剪切条件下，将含EGF的水相緩緩加入油相中，用高剪切均质 机搅拌成初乳；
步骤3:将初乳置旋转蒸发器中减压去除乙酸乙酯或二氯曱烷；
步骤4:进行高压均质，加入抑菌剂以及剩余组分，得到皮肤用EGF纳米脂 质载体。
根据本发明，本发明的皮肤用表皮生长因子纳米脂质栽体制剂，为便于 运输和储存，可以进一步通过喷雾干燥或冷冻干燥，得到粉体或冻干品。这 样得到的粉体或冻干品在使用时，采用生理盐水配制成合适的浓度，即可涂 抹到皮肤上。
本发明的优点在于
(1) 本发明提供的纳米脂质载体可将EGF包裹其中，避免外界环境对EGF 的影响，提高EGF的放置稳定性。
(2) 纳米脂质载体中的脂质材料与皮肤具有较好的生理相容性，且粒径较小
(约200nm)，可通过与角质层的融合、穿透等机制，将EGF传递入皮 肤内，使EGF有效发挥对皮肤细胞的修复作用。
(3) 纳米脂质载体本身具有良好的皮肤保湿、活化皮肤细胞的作用。
图1为对照品溶液(A)及实施例5荧光素钠标记的hEGF纳米脂质载 体(B)离体透皮照片。
图2为实施例2的hEGF纳米脂质载体及hEGF生理盐水溶液在4°C的 放置稳定性实验结果图。
具体实施例方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步的阐述，但本发明不局限于这些 实施例。
在下面实施例中，所使用的人表皮生长因子购于四川华迈科技发展有限 公司，鼠表皮生长因子购于上海西唐生物科技有限公司。
实施例1
表1给出了实施例1-4的皮肤用表皮生长因子纳米脂质载体制剂的成分
及其含量，并给出了制剂的包封率、粒度测定结果。
表l实施例l-4制剂的成分及其含量、包封率、粒度测定结果
实施例1实施例2实施例3实施例4
EGFhEGF 0.2mghEGF 0.5mg鼠EGF l.OmghEGF 0.05mg
脂质材料棕榈酸硬脂酸甘MCT: 2g油酸2.5g胆固醇2g
油酯4g三棕榈酸甘油酯 6g硬脂酸6 十六醇2g橄榄油lg
乳化剂聚氧乙烯硬脂酸 酯1.5g 大豆磷脂2g聚氧乙烯(35)蓖 麻油3.5g 泊洛沙姆188: 2gTween80: 3g 卵磷脂1.5g大豆磷脂5g 聚氧乙烯(35)蓖 麻油0.5g
抗氧剂生育酚0.05g维生素C: O.lg去甲二氢愈创酸 O.Olg叔丁基羟基苯甲 醚O.Olg
抑菌剂苯扎氯胺O.Olg三氯叔丁醇 O.Olg山梨酸0.03g尼泊金甲酯O.lg
透皮吸收促进剂水杨酸0.5g尿素O.lg月桂氮卓酮lg薄荷醇O.lg
润湿剂甘油2g透明质酸钠0.3g壳聚糖0.5g透明质酸0.8g
纯化水至100mL至100mL至100mL至100mL
含量卯.3%95.4%67.6%86.2%
包封率94.2%82.3%61.7%83.6%
粒径200.3nm232.7nm469.4nm237.2nm
粒度分布0.2010.2050.3460.238①hEGF纳米脂质栽体的制备
按照表1中给出实施例1的组成，称取hEGF 0.2mg溶于500pL纯水中， 得到水相l;将聚氧乙烯硬脂酸酯(S-40) 1.5g、甘油2g溶于余量纯水中， 得到水相2;将脂质材料棕榈酸硬脂酸甘油酯4g、大豆磷脂2g、生育酚0.05g 溶于3mL 二氯曱烷中，得到油相；在高剪切条件下将7jC相1和水相2緩緩 加入油相中，搅拌lmin成初乳；将初乳置旋转蒸发器中，30。C减压除去二 氯曱烷；然后，采用均质机以500bar的压力均质，加入苯扎氯胺O.Olg,水 杨酸0.5g,得到皮肤用hEGF纳米脂质载体制剂；后进行冷冻干燥得冻干品。
②含量测定取hEGF纳米脂质载体冻干品适量，加入生理盐水复溶， 以曲拉通X-100破乳，经适当稀释后采用hEGF试剂盒以双抗体夹心酶联免 疫法进行测定。即分别按说明书加入待测样品、 一抗、酶标抗体、酶作用底 物及终止液，并用酶标仪在450nm处测定吸收度，通过绘制标准曲线计算得 出待测样品中EGF浓度。
③ 包封率测定采用超滤法测定hEGF纳米脂质载体的包封率。取hEGF 纳米脂质载体冻干品适量加入生理盐水复溶，置超滤管中(mw10，000)， 4500rpm离心15min,取超滤液经适当稀释后釆用hEGF试剂盒以酶联免疫法 测定游离hEGF的浓度。另取hEGF纳米脂质栽体按含量测定方法项下操作， 测定hEGF在纳米脂质载体中的总浓度。按以下公式计算包封率
包封率％ = C总:,C游离x 100%
C总hEGF在纳米脂质栽体中的总浓度 C游离超滤液中hEGF的游离浓度
④ 粒度及粒度分布测定取hEGF纳米脂质载体冻干品适量加入生理盐 水复溶，平均粒径及粒度分布(以多分散系数表示)采用动态光散射原理的粒度测定仪测定。
含量、包封率、平均粒径及粒度分布的测定结果如表1所示。结果表明，
本发明制备的hEGF纳米脂质载体含量较高，即几乎没有破坏hEGF的三维 结构；包封率高，可有效将hEGF包裹于纳米粒的脂质核心中；粒度适宜且 分布均匀，有利于纳米脂质载体经皮吸收。
⑤稳定性研究一加速试验取hEGF纳米脂质载体冻干品，于温度为 40°C，相对湿度为75%的恒温恒湿箱中放置6个月，分别于0、 1、 2、 3、 6 月取样检测。考察试验样品前后的性状、含量、包封率、粒径、粒度分布等 指标的变化情况，结果见表2。结果表明，实施例1制备的hEGF纳米脂质 栽体冻干品在6个月加速试验放置过程中各指标均无明显变化，说明此样品 稳定。
表2实施例l样品加速试验结果
标01236
白色疏松白色疏松白色疏松白色疏松白色疏松
性状
粉末粉末粉末粉末粉末
含量(％)90.389.289.088.785.3
包封率(％)94.293.192.892.4卯.O
粒径(nm)200.3221.0217.6224.2237.8
粒度分布0.2010.1760.2190.2140.231
实施例2
按照表1中给出实施例2的组成，称取hEGF 0.5mg溶于500nL纯水中， 得到水相l;将透明质酸钠0.3g,泊洛沙姆188 2g溶于余量纯水中，得到水 相2;将脂质材料三棕榈酸甘油酯6g、 MCT2g，聚氧乙烯(35 )蓖麻油3.5g 溶于3mL 二氯曱烷中，得到油相；在高剪切条件下将水相1和水相2緩緩
12加入油相中，搅拌lmin成初乳；将初乳置旋转蒸发器中，30。C减压除去二 氯曱烷；然后，采用均质机以500bar的压力均质，加入三氯叔丁醇O.Olg、 尿素O.lg、维生素C O.lg得到皮肤用hEGF纳米脂质载体制剂。
制得hEGF纳米脂质载体的含量、包封率、平均粒径及粒度分布的测定 结果如表1所示。
稳定性研究取实施例2的hEGF纳米脂质载体，于4-C放置'，另取hEGF 原料粉末适量，以生理盐水溶解稀释为含hEGF浓度与纳米脂质载体相同的 溶液，4'C放置。取样检测，考察试验样品含量的变化情况，结果见图2。结 果表明，hEGF生理盐水溶液的稳定性较差，fC放置60天后，含量仅为8.7%; 实施例2制备的纳米脂质载体由于可将hEGF包裹于纳米粒的脂质核心中， 可有效提高hEGF的稳定性。
实施例3
按照表1中给出实施例3的组成，称取鼠EGF l.Omg溶于500|iL纯水 中，得到7jc相l;将壳聚糖溶于含乙酸1.5%的余量水中，得到水相2;将脂 质材料油酸2.5g,硬脂酸6g,十六醇2g， Tween80 3g，卵磷脂1.5g，月桂氮 卓酮lg溶于3mL二氯曱烷中，得到油相；在高剪切条件下将水相1和水相 2緩緩加入油相中，搅拌lmin成初乳；将初乳置旋转蒸发器中，30。C减压 除去二氯曱烷；然后进行高压均质，加入去曱二氬愈创酸、山梨酸，得到皮 肤用鼠EGF纳米脂质载体制剂；后进行喷雾干燥得喷干粉末。
制得鼠EGF纳米脂质载体喷干粉末经生理盐水复溶后测得的含量、包 封率、平均粒径及粒度分布的测定结果如表1所示。
实施例4
按照表1中给出实施例4的组成，称取hEGF 0.05mg溶于500^L纯水中，得到7K相1;将透明质酸0.8g溶于余量纯水中，得到水相2;将脂质材料胆 固醇2g,橄榄油lg，大豆磷脂5g，聚氧乙烯(35)蓖麻油0.5g溶于3mL 二氯曱烷中，得到油相；在高剪切条件下将水相1和水相2緩緩加入油相中， 搅拌lmin成初乳；将初乳置旋转蒸发器中，3(TC减压除去二氯曱烷；然后 进行高压均质，加入叔丁基羟基苯曱醚，尼泊金曱酯，薄荷醇得到皮肤用 hEGF纳米脂质载体制剂；后进行冷冻干燥得冻千品。
制得hEGF纳米脂质栽体冻干品经生理盐水复溶后测得的含量、包封率、 平均粒径及粒度分布的测定结果如表1所示。
实施例5
① 制备荧光标记的hEGF纳米脂质载体
按照表3中给出实施例5的组成，称取hEGF 0.3mg,荧光素钠2g溶于 lmL纯水中，得到水相1;将聚氧乙烯硬脂酸酯(S-40) 1.5g、透明质酸钠 0.6g溶于余量纯水中，得到水相2;将脂质材料棕榈酸硬脂酸甘油酯3g、橄 榄油0.5g、大豆磷脂3g、月桂氮卓酮lg溶于3mL二氯曱烷中，得到油相； 在高剪切条件下将水相1和水相2緩緩加入油相中，搅拌lmin成初乳；将 初乳置旋转蒸发器中，30。C减压除去二氯甲烷；进行高压均质，加入维生素 C、尼泊金丙酯得到皮肤用hEGF纳米脂质载体制剂；后进行冷冻干燥得冻
干品o
② 制得hEGF纳米脂质载体冻干品经生理盐水复溶后测得的含量、包封 率、平均粒径及粒度分布的测定结果如表3所示。表3实施例5-6制剂的成分及其含量、包封率、粒度测定结果
实施例5实施例6
hEGF0.3mg0.3mg
荧光素荧光素钠2g
脂质材料棕榈酸硬脂酸甘油酯3g棕榈酸硬脂酸甘油酯3g
橄榄油0.5g橄榄油0.5g
乳化剂聚氧乙烯硬脂酸酯1.5g聚氧乙烯硬脂酸酯1.5g
大豆磷脂3g大豆磷脂3g
抗氧剂维生素C: 0.05g维生素C: 0.05g
抑菌剂尼泊金丙酯0.15g尼泊金丙酯0.15g
透皮吸收促进剂月桂氮卓酮lg月桂氮卓酮lg
润湿剂透明质酸钠0.6g透明质酸钠0.6g
纯化水至100mL至100mL
含量97.6%98.1 %
包封率90.1%91.3%
粒径188證179nm
粒度分布0.2200.208
③hEGF纳米脂质载体离体透皮试验
对照液配制取焚光素钠及hEGF适量，以生理等渗的pH7.5磷酸盐緩 沖液(PBS)溶解稀释为含荧光素钠2wt。/。、含hEGF 3吗/mL的溶液，作为 对照液。
供试液配制取实施例5制备的hEGF纳米脂质载体冻干品适量，以生 理等渗的pH7.5 PBS溶液稀释为含hEGF 3pg/mL的纳米脂质载体胶体溶液， 作为供试液。BALB/c-nu/nu棵小鼠以75%酒精擦拭，剖离腹部皮肤，经皮吸收试验 在剖离皮肤后2h内开始。将皮肤切为1.5cmxl.5cm大小，放到用PBS浸湿 的滤纸上，在皮肤表面置一块滤纸，分别取对照品及供试品溶液滴在皮肤表 面滤纸上。试验在具盖培养皿中进行，室温避光环境下静置。
取出静置2h的皮肤，取下表面滤纸，以PBS沖洗掉未吸收的荧光素钠。 用手术刀从皮肤中央切开，以冷冻包埋剂包裹好后，用冰冻切片机制成冰冻 切片，切片置焚光倒置显微镜下观察，拍摄放大40倍的照片。
实验结果如图1所示，图1为对照品溶液(A)及实施例5荧光素钠标 记的hEGF纳米脂质载体(B)离体透皮照片。结果表明，对照品溶液置棵 鼠皮肤2h后，仅有表皮角质层有荧光；含荧光素钠标记的hEGF纳米脂质 栽体的供试液置棵鼠皮肤表面2h后，表皮角质层及真皮层均出现荧光；实 验结果说明纳米脂质载体具有增强被包裹药物皮肤吸收的作用，是hEGF的 理想载体。
实施例6:
按照表3中给出实施例6的组成，称取hEGF 0.3mg溶于lmL纯水中， 得到水相1;将聚氧乙烯硬脂酸酯(S-40) 1.5g、透明质酸钠0.6g溶于余量 纯水中，得到水相2;将脂质材料棕榈酸硬脂酸甘油酯3g、橄榄油0.5g、大 豆磷脂3g、月桂氮卓酮lg溶于3mL二氯曱烷中，得到油相；在高剪切条件 下将水相1和水相2緩緩加入油相中，搅拌lmin成初乳；将初乳置旋转蒸 发器中，30。C减压除去二氯曱烷；进行高压均质，加入维生素C、尼泊金丙 酯得到皮肤用hEGF纳米脂质载体制剂。
制得hEGF纳米脂质载体的含量、包封率、平均粒径及粒度分布的测定 结果如表3所示。
多次皮肤刺激性研究以家兔为动物才莫型，随^/L分为2组，每组4只。试验前将家兔背部脊柱两侧背毛剪掉，去毛范围各为3cmx3cm。
供试样品配制取实施例6的hEGF纳米脂质栽体制剂适量，以生理盐 水稀释为含hEGF 3pg/mL的纳米脂质载体胶体溶液。
给药区脱毛后24小时取0.5mL供试液涂抹在一侧皮肤上，另一侧涂抹 生理盐水溶液，每天涂:沐l次，连续14d。从第二天开始，每次涂抹前应剪 毛，并用生理盐水清除残留样品。每次涂抹lh后以给药部位红斑、水肿评 分考察hEGF纳米脂质载体对皮肤的刺激性。结果见表4。
结果表明，hEGF納米脂质载体对皮肤无刺激性，且供试品组家兔皮肤 光滑度较对照组好，皮肤刺激性强度评份低于生理盐水组，说明hEGF纳米 脂质载体对皮肤具有主动修护作用，可有效防止水分蒸发、机械力等环境因 素引起的皮肤粗糙现象。表4实施例6样品对家兔多次皮肤刺激性试验结果
涂抹动物数刺激反应积分
天数(只)红斑样品 水肿总分红斑对照 水肿总分
14000000
24000000
34000000
440000.2500.25
540000.2500.25
640000.500.5
740000.2500
840.2500.250.2500.25
940.2500.25000
1040000.2500.25
1140000.500.5
1240.2500.250.2500.25
134000000
1440000.2500.25
每天每只动物 积分均值0.050.18
18
权利要求
1、一种皮肤用表皮生长因子纳米脂质载体制剂，以100mL纳米脂质载体制剂计，其组成为表皮生长因子 0.02～5mg脂质材料 2～20g乳化剂0.5～10g抗氧剂0.01～2g抑菌剂0.01～1.5g透皮吸收促进剂0.02～5g润湿剂0.3～15g余量为纯水。
2、 根据权利要求1所述的皮肤用表皮生长因子纳米脂质载体制剂，其 特征是，以lOOmL纳米脂质载体制剂计，其组成为表皮生长因子 0.05 ~ 2 mg脂质材料 2~15g 乳化剂 1 ~ 8 g抗氧剂 0.01 ~ 0.5 g才中菌剂 0.01 —0.5 g透皮吸收促进剂 0.05 ~ 3 g润湿剂 0.5~10g 余量为水。
3、 根据权利要求1或2所述的皮肤用表皮生长因子纳米脂质载体制剂， 其特征是，所述的表皮生长因子选自人表皮生长因子、鼠表皮生长因子、兔 表皮生长因子和猪表皮生长因子之中。
4、 根据权利要求3所述的皮肤用表皮生长因子纳米脂质载体制剂，其 特征是，所述的表皮生长因子为人表皮生长因子。
5、 根据权利要求l、 2或4所述的皮肤用表皮生长因子纳米脂质载体制 剂，其特征是，所述的脂质材料选自脂肪酸甘油酯、脂肪酸、蜡质、固醇、 天然植物油和维生素中的一种或多种。
6、 根据权利要求5所述的皮肤用表皮生长因子纳米脂质载体制剂，其 特征是，所述的脂肪酸甘油酯为棕榈酸甘油酯，硬脂酸甘油酯，二十二酸 单、双、三甘油酯混合物，棕榈酸硬脂酸甘油酯，或者链长在Cs-Cu)之间的 脂肪酸甘油酯；所述脂肪酸为硬脂酸、棕榈酸、油酸或亚油酸； 所述蜡质为十六醇、十八醇、鯨蜡醇十六酸酯、凡士林或石蜡； 所述固醇为胆固醇；所述天然植物油为大豆油、蓖麻油、红花油或橄榄油； 所述维生素为维生素E、维生素A、维生素酯的一种或其混合物。
7、 根据权利要求1、 2、 4或6所述的皮肤用表皮生长因子纳米脂质载 体制剂，其特征是，所述的乳化剂可以为如下乳化剂中的一种或多种磷脂， 所述磷脂包括大豆磷脂、卵磷脂和氢化磷脂；聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物，所 述聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物为泊洛沙姆；脂肪酸山梨坦；聚山梨酯，所述聚 山梨酯包括吐温60和吐温80;聚氧乙烯脂肪酸酯；聚氧乙烯脂肪醇醚；聚 氧乙烯蓖麻油；失水山梨醇脂肪酸酯；和羊毛醇；所述的抗氧剂为生育酚、维生素C、叔丁基羟基苯曱醚、2,5-二叔丁基 对曱酚、去曱二氩愈创酸和没食子酸丙酯中的 一种或其混合物；所述的抑菌剂为苯扎氯胺、苯扎溴铵、尼泊金曱酯、尼泊金乙酯、尼泊 金丙酯、三氯ik丁醇和山梨酸中的一种或其混合物；所述的润湿剂为甘油、丙二醇、透明质酸及其钠盐和壳聚糖中的一种或多种的混合物；所述的透皮吸收促进剂选自如下化合物中的一种或多种有机溶剂，所 述有机溶剂包括乙醇、丙二醇、乙酸乙酯和二曱基酰胺；月桂氮卓酮及其同 系物；角质保湿与软化剂，所述角质保湿与软化剂包括尿素、水杨酸和吡咯 酮；薛烯，所述碎烯包括薄荷醇、樟脑和柠檬烯。
8、 根据权利要求7所述的皮肤用表皮生长因子纳米脂质载体制剂，其 特征是，所述的乳化剂选自磷脂、吐温80和聚氧乙烯蓖麻油中的一种或多 种0
9、 根据权利要求7所述的皮肤用表皮生长因子纳米脂质载体制剂，其 特征是，所述的透皮吸收促进剂为丙二醇、月桂氮卓酮、尿素、水杨酸和薄 荷醇中的一种或多种。
10、 一种权利要求1-9中任一项所述的皮肤用表皮生长因子纳米脂质载 体制剂的制备方法，该方法步骤如下步骤l:将表皮生长因子溶于一定量的纯水中形成水相，在水相中可以任选 加入乳化剂与润湿剂；将脂质材料和乳化剂溶解于乙酸乙酯或二氯 曱烷中形成油相，在油相中可以任选加入抗氧剂和透皮吸收促进剂；步骤2:在高剪切条件下，将含表皮生长因子的水相緩緩加入油相中，用高 剪切均质机搅拌成初乳；步骤3:将初乳置旋转蒸发器中减压去除乙酸乙酯或二氯甲烷；步骤4:进行高压均质，加入抑菌剂以及剩余组分，得到皮肤用表皮生长因 子纳米脂质载体。
全文摘要
本发明涉及一种纳米脂质载体制剂，更具体而言，涉及一种含有表皮生长因子的皮肤用纳米脂质载体制剂及其制备方法。本发明的皮肤用表皮生长因子纳米脂质载体制剂，以100mL纳米脂质载体制剂计，其组成为表皮生长因子0.02～5mg，脂质材料2～20g，乳化剂0.5～10g，抗氧剂0.01～2g，抑菌剂0.01～1.5g，透皮吸收促进剂0.02～5g，润湿剂0.3～15g，余量为纯水。本发明的表皮生长因子纳米脂质载体制剂具有良好的皮肤生理相容性，可提高表皮生长因子的放置稳定性，并且可有效促进表皮生长因子的经皮吸收，提高表皮生长因子对皮肤的修护作用。
文档编号A61K9/127GK101474153SQ20091004485
公开日2009年7月8日 申请日期2009年1月4日 优先权日2009年1月4日
发明者张馨欣, 朱春柳, 勇 甘, 莉 甘 申请人:中国科学院上海药物研究所