专利名称：脂肪酸类化合物在制备预防和治疗肝癌药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及脂肪酸类化合物，特别涉及脂肪酸类化合物在制备预防和治疗肝癌药物中的应用。
背景技术：
近年来，伴随着药学和生命科学研究的飞速进展，恶性肿瘤细胞内的信号转导、细胞凋亡、血管生成以及细胞与胞外基质的相互作用等各种基本过程正渐被阐明。以一些与肿瘤细胞分化增殖相关的细胞信号转导通路的关键酶(如蛋白酪氨酸激酶)作为药物筛选靶点，发现选择性作用于特定靶位的高效、低毒、特异性强的新型抗肿瘤药，即分子靶向药(molecular targeted drugs)和抗体革巴向药(antibody targeted drugs),已成为当今抗癌药研发的重要方向(1、张石革.肿瘤靶向 治疗药物的进展与临床评价.中国医院用药评价与分析.2009; 9 (I): 4-7)。在癌症的起始和发展过程中，蛋白酪氨酸磷酸化起着非常重要的作用。而蛋白酪氨酸磷酸化水平取决于蛋白酪氨酸激酶(PTKs)和蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)之间的平衡。蛋白酪氨酸激酶(PTKs)是当今公认的肿瘤治疗的重要靶点，在癌症的治疗中起着非常重要的作用。与PTKs的作用相反，PTPs能够促进肿瘤的生长。所以，PTPs抑制剂的发现将对癌症的治疗提供广阔前景(2、Scott LM, Chen Lff, Daniel KG, Brooks WH, GuidaWCj Lawrence HR, et al.Shp2protein tyrosine phosphatase inhibitor activityof estramustine phosphate and its triterpenoid analogs.Bioorg Med ChemLett.2011;21 (2):730-733)。PTP-SHP2，是一种非受体蛋白酪氨酸磷酸酶，它由PTPNll基因编码，在人体内多种器官广泛表达。它由N端的2个SH2结构域，中间的PTP结构域及C末端组成。在癌细胞中，SHP2通常会被一些生长因子受体激活，进而调节下游蛋白的磷酸化，促进细胞生长。在原癌基因引起的恶性肿瘤中，PTP-SHP2通常被激活。总之，PTP-SHP2在细胞信号调节中发挥正调控作用，促进细胞生长。随着癌症的靶点治疗越来越得到大家的认可，PTP-SHP2也成为了大家研究的热点。如今，它已经成为人们公认的寻找抗癌药物的重要革巴标。一些合成的PTP-SHP2特异性抑制剂也已被发现，如phenylhydrazonopyrazolonesulfonate (3、Hellmuth K,Grosskopf S，Lum CT, Wurtele M, Roder N，von Kries JP, etal.Specific inhibitors of the protein tyrosine phosphatase Shp2identified byhigh-throughput docking.Proc Natl Acad Sci U S A.2008;105 (20):7275-7280)和 8_hydroxy-7- (6-sulfonaphthalen-2-yl)diazenyl-quinoline-5-sulfonicacid(NSC-87877)(4、Chen L, Sung SS, Yip ML, Lawrence HR, Ren Y, Guida WC, et al.Discovery of a novelshp2protein tyrosine phosphatase inhibitor.Mol Pharmacol.2006;70(2):562-570)。中国传统中药(TCM)在已有几千年的药用历史，它具有化学成分多样和结构复杂双重优势，是寻找PTP-SHP2特异性抑制剂的良好资源，这是化学合成药无法匹敌的。Caspases是一组存在于胞质溶胶中的结构上相关的半胱氨酸蛋白酶，目前已确定至少存在11种caspase,其中，caspasel和caspasell,以及可能还有caspase4被认为不直接参与凋亡信号的转导，它们主要参与白介素前体的活化；而caspase2，caspase8，caspase9和caspase 10参与细胞凋亡的起始；参与细胞凋亡执行的则是caspase3,caspase6和caspase7,其中caspase3和7具有相近的底物和抑制剂特异性，它们降解PARP, DFF-45 (DNA fragmentation factor-45),导致 DNA 修复的抑制并启动 DNA 的降解。目前认为细胞凋亡的起始者(caspase2，8，9和10)和执行者(caspase3，6，7)之间存在着上下游关系，即起始者活化执行者(5、朱愿，马勇，陈立军.Caspase与细胞凋亡.武警医学院学报.2004; 13 (4): 346-348)。caspase-3在细胞凋亡中起着不可替代的作用，最主要的底物是多聚(ADP-核糖)聚合酶PARP (poly (ADP-ribose) polymerase)，该酶与DNA修复、基因完整性监护有关。在细胞凋亡启动时，116kD的PARP在Asp216-Gly217之间被caspase-3剪切成31kD和85kD两个片段，使PARP中与DNA结合的两个锌指结构与羧基端的催化区域分离，不能发挥正常功能。结果使受PARP负调控影响的Ca2+/Mg2+依赖性核酸内切酶的活性增高，裂解核小体间的DNA，引起细胞凋亡。caspase-8具有FADD样DED结构域，并且能够通过DED结构域与FADD结合，所以caspase-8可以在凋亡过程中间接与细胞膜受体发生联系，从而将细胞膜事件转化为细胞衆事件。caspase-8在死亡受体介导的细胞凋亡中起着重要作用。而caspase_9在线粒体途径中对细胞凋亡有重要作用。
发明内容
本发明的目的在于提供脂肪酸类化合物在制备预防和治疗肝癌药物中的应用。所述肪酸类化合物包括:化合物I，化合物I为油状物，化学名为10Z，13Z-十九碳二烯酸，分子式为C19H34O2,分子量为294,结构式为:`
权利要求
1.脂肪酸类化合物在制备预防和治疗肝癌药物中的应用，其特征在于所述肪酸类化合物包括: 化合物1，化合物I为油状物，化学名为10Z，13Z-十九碳二烯酸，分子式为C19H34O2,分子量为294,结构式为:
2.如权利要求1所述的脂肪酸类化合物在制备预防和治疗肝癌药物中的应用，其特征在于所述脂肪酸类化合物的制备方法，包括以下步骤: 1)使用乙醇对白芷进行煮沸回流，过滤，收集滤液，即得白芷提取液； 2)将所得白芷提取液进行萃取，萃取所得溶液进行真空干燥，即得白芷粗提物； 3)将白芷粗提物进行硅胶柱层析，再进行反相硅胶柱层析，分别得化合物1，化合物2，化合物3。
3.如权利要求2所述的脂肪酸类化合物在制备预防和治疗肝癌药物中的应用，其特征在于在步骤I)中，所述乙醇的浓度为60%，所述乙醇体积与白芷质量的比例为IOL: Ikg,其中乙醇以体积计，白芷以质量计。
4.如权利要求2所述的脂肪酸类化合物在制备预防和治疗肝癌药物中的应用，其特征在于在步骤I)中，所述煮沸回流的时间为2 3h。
5.如权利要求2所述的脂肪酸类化合物在制备预防和治疗肝癌药物中的应用，其特征在于在步骤2)中，所述萃取的溶剂为乙酸乙酯。
6.如权利要求5所述的脂肪酸类化合物在制备预防和治疗肝癌药物中的应用，其特征在于所述萃取的溶剂与白芷提取液的体积之比为1:1。
7.如权利要求2所述的脂肪酸类化合物在制备预防和治疗肝癌药物中的应用，其特征在于在步骤3)中，所述硅胶柱层析的具体步骤:将白芷粗提物，加入硅胶，干燥得到硅胶层析样品；将硅胶层析样品置于硅胶柱顶部，以体积之比为100: 0,99: 1,98: 2,95: 5，10: 1,5: 1,0: 100的氯仿-甲醇溶液为洗脱剂，进行硅胶柱梯度洗脱，收集氯仿-甲醇体积比为99: I和95: 5的洗脱液，蒸干，即得白芷柱层析样品；所得白芷柱层析样品再经硅胶柱色谱和ODS柱色谱即得化合物1，化合物2和化合物3。
8.如权利要求2所述的脂肪酸类化合物在制备预防和治疗肝癌药物中的应用，其特征在于在步骤2)中，所述反相硅胶柱层析的流动相为甲醇-水或乙腈-水溶液。
9.如权利要求8所述的脂肪酸类化合物在制备预防和治疗肝癌药物中的应用，其特征在于所述甲醇-水或乙腈-水的体积比为(0.25 9): I。
10.如权利要求9所述的脂肪酸类化合物在制备预防和治疗肝癌药物中的应用，其特征在于所述甲醇-水或乙腈- 水的体积比为(0.4 4): 1，最好为1.85: I。
全文摘要
脂肪酸类化合物在制备预防和治疗肝癌药物中的应用，涉及脂肪酸类化合物。提供脂肪酸类化合物在制备预防和治疗肝癌药物中的应用。使用乙醇对白芷进行煮沸回流，过滤，收集滤液，即得白芷提取液；将所得白芷提取液进行萃取，萃取所得溶液进行真空干燥，即得白芷粗提物；将白芷粗提物进行硅胶柱层析，再进行反相硅胶柱层析，分别得化合物1，化合物2，化合物3。所述脂肪酸类化合物可制备成PTP-SHP2的特异性抑制剂，通过抑制蛋白酪氨酸磷酸酶从而发挥抗癌以及预防和治疗与蛋白酪氨酸磷酸酶PTP-SHP2相关的人类疾病的作用。所述脂肪酸类化合物在制备预防和治疗癌症药物中具有广泛的应用。
文档编号A61P35/00GK103181918SQ201310112138
公开日2013年7月3日 申请日期2011年5月4日 优先权日2011年5月4日
发明者陈海峰, 吕忠显, 陈全成, 刘东萍, 崔传文, 孔桂萍, 李阳 申请人:厦门大学