以组合P2Y2受体激动剂和透明质酸或其盐为特征的干眼症治疗剂的制作方法

技术领域：
本发明涉及一种干眼症治疗剂，其特征在于，是将治疗有效浓度的P2Y2受体激动剂和治疗有效浓度的透明质酸或其盐组合得到，剂型为眼科用剂。另外，本发明还涉及使用这种P2Y2受体激动剂和透明质酸或其盐的干眼症的治疗方法。另外，本发明还涉及用于在干眼症的治疗中使用的P2Y2受体激动剂和透明质酸或其盐。进而，本发明还涉及这种P2Y2受体激动剂和透明质酸或其盐在制造干眼症治疗剂中的应用。
背景技术：
：干眼症是以眼睛发干、干涩等不适感程度的症状为开始，一旦发生恶化，则会给日常生活带来巨大障碍的疾病。干眼症患者数量随着老龄化社会的到来和个人电脑等的VDT(videodisplayterminal，视频显示终端)操作的增多而年年增加，据说美国国内的推测患者数为1,000万人以上、日本也有800万人以上。虽然对于干眼症的病情还不完全清楚，但认为以泪液分泌的减少、泪液蒸发的亢进等为原因的角结膜上的泪液量减少是其主要病因。即，伴随泪液量减少的角结膜的干燥引起了眼睛不适感、眼睛干燥感、眼睛疲劳感、充血、角结膜上皮病等疾病的症状和/或观察结果。当这些症状和/或观察结果发展时，最终发生视觉异常，因此早期且恰当地治疗干眼症极为重要。作为干眼症的治疗方法最令人期待的事情认为是促进干眼症患者的泪液分泌，但到目前为止还不知道具有这种作用的干眼症治疗剂。因此，在以往的干眼症治疗中，通常选择人工泪液滴眼、利用泪点塞的泪液排出抑制等的治疗法。另外，作为干眼症治疗剂还广泛使用含透明质酸的滴眼液。透明质酸虽然没有泪液分泌促进作用，但在Cornea，12(5)，433-436(1993)(非专利文献1)中公开了透明质酸通过在其分子内保持多个水分子、显示优异的保水性。虽然在利用含透明质酸的滴眼液进行干眼症治疗的作用机理中有各种说法，但认为这种透明质酸的保水作用缓和了角结膜的干燥。另一方面，P2Y2受体是作为嘌呤受体的P2Y受体的亚型之一，认为与控制氯化物离子的分泌等密切相关。P2Y受体的配体被认为是生物体内核苷酸，在CurrentMedicinalChemistry，13(3)，289-312(2006)(非专利文献2)中记载了尿苷-5’-三磷酸(UTP)、腺苷-5’-三磷酸(ATP)和它们的衍生物所代表的核苷酸、P1，P4-双(5’-尿苷基)四磷酸(也被称作“地夸磷索(Diquafosol)”或“INS-365”)所代表的二核苷酸等作为P2Y2受体的兴奋剂发挥功能。最近，已经清楚这些P2Y2受体激动剂具有促进泪液分泌的作用，作为新型的干眼症治疗剂备受关注。例如，在CurrentEyeResearch，21(4)，782-787(2000)(非专利文献3)中公开了UTP和ATP在兔子中促进泪液分泌，暗示了通过刺激P2Y2受体来促进泪液分泌。另外，在Cornea，23(8)，784-792(2004)(非专利文献4)中报道了在临床试验中，含有所述地夸磷索的滴眼液促进泪液分泌、且改善角结膜上皮病。但是，还存在即便使用这些干眼症治疗剂也无法充分治疗的严重干眼症患者，期待开发出具有更强的泪液分泌促进作用的干眼症治疗剂。然而，在日本特表2001-504858号公报(专利文献1)中暗示了可以在含有活化嘌呤受体(P2Y2受体)的化合物的泪液分泌促进剂中添加透明质酸作为添加剂。但是，如医药品添加物辞典，220(2007)(非专利文献5)所记载那样，在眼科用剂中可作为添加剂使用的透明质酸的最大量为0.2mg/g(0.02％(w/w))，对于组合治疗有效浓度(作为滴眼浓度为0.1％(w/v)以上)的透明质酸和P2Y2受体激动剂进行滴眼的情况，完全没有记载或者暗示。如上所示，对于组合P2Y2受体激动剂和治疗有效浓度的透明质酸时起到何种效果完全不清楚。专利文献1：日本特表2001-504858号公报非专利文献1：Cornea，12(5)，433-436(1993)非专利文献2：CurrentMedicinalChemistry，13(3)，289-312(2006)非专利文献3：CurrentEyeResearch，21(4)，782-787(2000)非专利文献4：Cornea，23(8)，784-792(2004)非专利文献5：医药品添加物辞典，220(2007)技术实现要素：因此，探索具有更强有力的泪液分泌促进作用的新型干眼症治疗剂是意义重大的课题。本发明人等为了探索新型的干眼症治疗剂进行了深入研究，结果发现在组合P2Y2受体激动剂和治疗有效浓度(0.1％和0.3％)的透明质酸或其盐进行滴眼时，在正常兔子中观察到显著的泪液分泌的促进，从而完成了本发明。进而，在组合P2Y2受体激动剂和治疗有效浓度的透明质酸或其盐进行滴眼时，在干眼症模型中确认了显著的角膜上皮病改善作用。另一方面，鉴于在组合P2Y2受体激动剂和添加物浓度(0.002％)的透明质酸或其盐进行滴眼时未确认到所述的泪液分泌促进作用，这是令人惊讶的结果。即，本发明提供一种干眼症治疗剂，其特征在于，是将治疗有效浓度的P2Y2受体激动剂和治疗有效浓度的透明质酸或其盐组合得到，剂型为眼科用剂(以下也称作“该治疗剂”)。另外，本发明的干眼症治疗剂中的P2Y2受体激动剂优选为下述通式[I]所示的化合物(以下将它们总称为“该化合物”)或其盐。[式中，X1表示羟基、巯基、X2表示氧原子、-NH-或-CR1R2-；X3表示A表示Y表示CO、CS或CHSR6，R1、R2、R3、R4、R5和R6相同或不同，表示氢原子、卤原子或烷基，n表示0～4的整数。]另外，本发明的干眼症治疗剂中的P2Y2受体激动剂优选为P1，P4-双(5’-尿苷基)四磷酸(以下也称作“地夸磷索”)、尿苷5’-三磷酸(UTP)、腺苷5’-三磷酸(ATP)或它们的盐。另外，本发明的干眼症治疗剂的眼科用剂的剂型优选为滴眼剂或眼软膏。本发明还提供一种干眼症治疗用滴眼剂，其特征在于，是将1～5％(w/v)的地夸磷索或其盐和0.05～0.5％(w/v)浓度的透明质酸或其盐组合得到。本发明还提供一种干眼症治疗用滴眼剂，其特征在于，是将3％(w/v)的地夸磷索或其盐和0.1～0.5％(w/v)浓度的透明质酸或其盐组合得到。本发明还提供一种干眼症的治疗方法，所述方法包括对患者组合给予治疗有效浓度的P2Y2受体激动剂和治疗有效浓度的透明质酸或其盐，其中，给予剂型为眼科用剂。本发明的干眼症的治疗方法中，P2Y2受体激动剂优选为上述该化合物。在本发明的干眼症的治疗方法中，P2Y2受体激动剂优选为P1，P4-双(5’-尿苷基)四磷酸、尿苷5’-三磷酸、腺苷5’-三磷酸或它们的盐。本发明的干眼症的治疗方法中，优选眼科用剂为滴眼剂或眼软膏。本发明还提供一种干眼症的治疗方法，所述方法包括对患者组合给予1～5％(w/v)浓度的P1，P4-双(5’-尿苷基)四磷酸或其盐和0.05～0.5％(w/v)浓度的透明质酸或其盐，其中，给予剂型为滴眼剂。本发明还提供一种干眼症的治疗方法，所述方法包括对患者组合给予3％(w/v)浓度的P1，P4-双(5’-尿苷基)四磷酸或其盐和0.1～0.5％(w/v)浓度的透明质酸或其盐，其中，给予剂型为滴眼剂。另外，本发明还提供P2Y2受体激动剂和透明质酸或其盐，用于组合给予治疗有效浓度的P2Y2受体激动剂和治疗有效浓度的透明质酸或其盐的干眼症治疗中，其中，给予剂型为眼科用剂。本发明的P2Y2受体激动剂和透明质酸或其盐中，也优选P2Y2受体激动剂为上述该化合物。另外，本发明的P2Y2受体激动剂和透明质酸或其盐中，优选P2Y2受体激动剂为P1，P4-双(5’-尿苷基)四磷酸、尿苷5’-三磷酸、腺苷5’-三磷酸或它们的盐。本发明的P2Y2受体激动剂和透明质酸或其盐中，优选眼科用剂为滴眼剂或眼软膏。本发明还提供P1，P4-双(5’-尿苷基)四磷酸或其盐和透明质酸或其盐，用于组合给予1～5％(w/v)浓度的P1，P4-双(5’-尿苷基)四磷酸或其盐和0.05～0.5％(w/v)浓度的透明质酸或其盐的干眼症治疗，其中，给予剂型为滴眼剂。本发明还提供P1，P4-双(5’-尿苷基)四磷酸或其盐和透明质酸或其盐，用于组合给予3％(w/v)浓度的P1，P4-双(5’-尿苷基)四磷酸或其盐和0.1～0.5％(w/v)浓度的透明质酸或其盐的干眼症治疗，其中，给予剂型为滴眼剂。本发明还提供P2Y2受体激动剂和透明质酸或其盐在制造含有治疗有效浓度的P2Y2受体激动剂和治疗有效浓度的透明质酸或其盐的干眼症治疗剂中的应用，其中，干眼症治疗剂的剂型为眼科用剂。本发明的应用中，也优选P2Y2受体激动剂为上述该化合物。本发明的应用中，在P2Y2受体激动剂和透明质酸或其盐中，也优选P2Y2受体激动剂为P1，P4-双(5’-尿苷基)四磷酸、尿苷5’-三磷酸、腺苷5’-三磷酸或它们的盐。本发明的应用中，也优选眼科用剂为滴眼剂或眼软膏。本发明还提供P1，P4-双(5’-尿苷基)四磷酸或其盐和透明质酸或其盐在制造含有1～5％(w/v)浓度的P1，P4-双(5’-尿苷基)四磷酸或其盐和0.05～0.5％(w/v)浓度的透明质酸或其盐的干眼症治疗用滴眼剂中的应用。本发明还提供P1，P4-双(5’-尿苷基)四磷酸或其盐和透明质酸或其盐在制造含有3％(w/v)浓度的P1，P4-双(5’-尿苷基)四磷酸或其盐和0.1～0.5％(w/v)浓度的透明质酸或其盐的干眼症治疗用滴眼剂中的应用。如后所述，该治疗剂在显著促进泪液分泌的同时、还显著改善角膜上皮病，因此期待其成为新型的干眼症治疗剂。另外，还提供使用P2Y2受体激动剂和透明质酸或其盐的干眼症的治疗方法、用于在干眼症的治疗中使用的P2Y2受体激动剂和透明质酸或其盐、以及P2Y2受体激动剂和透明质酸或其盐在制造干眼症治疗剂中的应用。附图说明[图1]为表示被测药滴眼后的泪河弯曲面的面积值的经时变化的图表。[图2]为表示被测药滴眼前后的角膜的荧光素染色评分变化的图表。具体实施方式本发明的干眼症治疗剂的一大特征为以分别的治疗有效浓度组合P2Y2受体激动剂和透明质酸或其盐。另外，通过本发明还提供组合使用P2Y2受体激动剂和透明质酸或其盐的干眼症的治疗方法、用于在干眼症治疗的P2Y2受体激动剂和透明质酸或其盐、以及P2Y2受体激动剂和透明质酸或其盐在制造干眼症治疗剂中的应用。本发明的“P2Y2受体激动剂”只要是与P2Y2受体结合、活化其下游的信号传导通路的化合物即可，没有特别限定。需要说明的是，P2Y2受体激动剂可根据Bioorg.Med.Chem.Lett.11(2)，157-160(2001)等所公开的方法容易地进行筛选。作为本发明的P2Y2受体激动剂，优选上述通式[I]所示的该化合物或其盐。这里，该化合物中，卤原子表示氟、氯、溴或碘。另外，在该化合物中，烷基对于其碳原子数并无特别限定，例如优选为甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、异丙基、异丁基、异戊基、异己基、叔丁基、3，3-二甲基丁基等具有1～6个碳原子的直链或支链的烷基。作为(a)该化合物的优选例，可举出通式[I]所示的化合物中各基团为下述所示基团的化合物。(a1)X1表示(a2)X2表示氧原子；(a3)X3表示(a4)A表示(a5)Y表示CO、CS或CHSR6；(a6)R3和R6相同或不同，表示氢原子、卤原子或烷基；(a7)n表示0～4的整数。(b)作为该化合物的其他优选例子，可举出通式[I]所示的化合物中各基团为下述所示基团的化合物。(b1)X1表示(b2)X2表示氧原子；(b3)X3表示(b4)A表示(b5)R4和R5相同或不同，表示氢原子、卤原子或烷基；(b6)n表示1。(c)作为该化合物的其他优选的例子，可举出通式[I]所示的化合物中各基团为下述所示基团的化合物。(c1)X1表示羟基或巯基；(c2)X2表示氧原子、-NH-或-CR1R2-；(c3)X3表示(a4)A表示(c5)Y表示CO、CS或CHSR6；(c6)R1、R2、R3、R4、R5和R6相同或不同，表示氢原子、卤原子或烷基。作为该化合物的优选具体例子，可举出下述化合物或它们的盐。·P1，P3-双(5’-尿苷基)三磷酸[Up3U]·P1，P4-双(5’-尿苷基)四磷酸[地夸磷索]·P1-(尿苷5’)-P4-(2’-脱氧胞苷5’)四磷酸[Denufosol]·P1，P5-双(5’-尿苷基)五磷酸[Up5U]·P1，P6-双(5’-尿苷基)六磷酸[Up6U]·P1，P7-双(5’-尿苷基)七磷酸[Up7U]·P1，P4-双(5’-腺苷基)四磷酸[Ap4A]·尿苷5’-三磷酸[UTP]·尿苷5’-O-(3-硫代三磷酸)[UTPγS]·尿苷5’-(β，γ-酰亚胺)三磷酸[β，γ-酰亚胺-UTP]·尿苷5’-(β，γ-亚甲基)三磷酸[β，γ-亚甲基-UTP]·尿苷5’-(β，γ-二氟亚甲基)三磷酸[β，γ-二氟亚甲基-UTP]·(N)-Methanocarba-UTP·L-α-苏式呋喃糖基-UTP[MRS-2488]·5-溴尿苷5’-三磷酸[5-Br-UTP]·5-乙基尿苷5’-三磷酸[5-Ethyl-UTP]·4-硫代尿苷5’-三磷酸[4-Thio-UTP]·4-己基硫代尿苷5’-三磷酸[4-己基硫代-UTP]·腺苷5’-三磷酸[ATP]·腺苷5’-O-(3-硫代三磷酸)[ATPγS]·腺苷5’-(β，γ-酰亚胺)三磷酸[β，γ-Imido-ATP]·(N)-Methanocarba-ATP·2-氯腺苷5’-三磷酸[2-氯-ATP]·8-溴腺苷5’-三磷酸[8-溴-ATP]作为本发明的P2Y2受体激动剂，特别优选为地夸磷索、UTP、ATP或它们的盐。作为本发明的P2Y2受体激动剂，最优选为地夸磷索或其盐。该化合物可根据有机合成化学领域中的通常方法进行制造，例如也可根据Nucleicacidsresearch，15(8)，3573-3580(1987)、Bioorg.Med.Chem.Lett.11(2)，157-160(2001)等所记载的方法进行制造，另外也可使用由Sigma公司等出售的市售品。该化合物中，特别是地夸磷索及其盐可通过日本特表2001-510484号公报所公开的方法进行制造。另外，UTP的钠盐(目录号：U6625)、ATP的钠盐(目录号：A7699)、ATPγS的锂盐(目录号：A1388)等由Sigma公司出售。另外，本发明的干眼症治疗剂中使用的透明质酸为下述通式[II]所示的化合物。[式中，m表示自然数]作为本发明的“透明质酸”，优选为平均分子量50万～390万的透明质酸，更优选为平均分子量50万～120万的透明质酸。作为该化合物或透明质酸的盐，只要是作为药用允许的盐即可，无特别限定，可举出与盐酸、溴化氢酸、碘化氢酸、硝酸、硫酸、磷酸等无机酸形成的盐；与醋酸、富马酸、马来酸、琥珀酸、柠檬酸、酒石酸、己二酸、葡糖酸、葡庚糖酸、葡萄糖醛酸、对苯二甲酸、甲磺酸、乳酸、马尿酸、1，2-乙烷二磺酸、羟乙基磺酸、乳糖酸、油酸、双羟萘酸、多聚半乳糖醛酸、硬脂酸、鞣酸、三氟甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、硫酸月桂基酯、硫酸甲酯、萘磺酸、磺基水杨酸等有机酸形成的盐；与溴化甲酯、碘化甲酯等形成的季铵盐；与溴离子、氯离子、碘离子等卤素离子形成的盐；与锂、钠、钾等碱金属形成的盐；与钙、镁等碱土类金属形成的盐；与铁、锌等形成的金属盐；与氨形成的盐；与三亚乙基二胺、2-氨基乙醇、2，2-亚氨基双(乙醇)、1-脱氧-1-(甲基氨基)-2-D-山梨糖醇、2-氨基-2-(羟基甲基)-1，3-丙二醇、普鲁卡因、N，N-双(苯基甲基)-1，2-乙二胺等有机胺形成的盐等。作为该化合物或透明质酸的盐，优选钠盐。特别是当该化合物为地夸磷索时，优选下述式所示的地夸磷索的四钠盐(以下也简称为“地夸磷索钠”)。另外，作为透明质酸的钠盐，特别优选下述通式[III]所示的钠盐(以下也称作“透明质酸钠”)。[式中，n表示自然数]另外，该化合物、透明质酸或它们的盐还可采用水合物或溶剂合物的形态。当该化合物或透明质酸存在几何异构体或光学异构体时，该异构体或它们的盐也包含在本发明的范围内。另外，当该化合物或透明质酸存在质子互变异构体时，该互变异构体或它们的盐也包含在本发明的范围内。当该化合物、透明质酸或它们的盐、水合物或者溶剂合物存在同质多晶和同质多晶组(同质多晶系统)时，这些同质多晶体和同质多晶组(同质多晶系统)也包含在本发明的范围内。这里，同质多晶组(同质多晶系统)是指由于这些结晶的制造、结晶、保存等条件和状态(需要说明的是，本状态也包含进行了制剂化的状态)，结晶型发生变化时的各阶段的各个结晶型及其整个过程。透明质酸及其盐还可根据有机合成化学领域的通常方法进行制造，还可根据日本特开平1-115902号公报所记载的方法进行制造。另外，本发明的透明质酸和它们的盐可使用由Sigma公司等出售的市售品，例如透明质酸的钠盐(目录号：H5388)由Sigma公司出售。本发明中“其特征在于，将治疗有效浓度的P2Y2受体激动剂和治疗有效浓度的透明质酸或其盐组合得到”，是指不仅限于一次给予含有治疗有效浓度的P2Y2受体激动剂和治疗有效浓度的透明质酸或其盐的配合眼科用剂，还包括分别且连续地给予含有治疗有效浓度的P2Y2受体激动剂的眼科用剂和含有治疗有效浓度的透明质酸或其盐的眼科用剂。本发明中“治疗有效浓度”是指在进行眼局部给予时，该药物可在眼局部发挥药理作用的浓度。本发明中，P2Y2受体激动剂的具体的“治疗有效浓度”根据作为P2Y2受体激动剂所选择的化合物的种类、该治疗剂的剂型等而不同，例如对于当P2Y2受体激动剂是地夸磷索或其盐时的治疗有效浓度，在选择滴眼剂作为剂型时为0.01～20％(w/v)、优选为0.3～10％(w/v)、更优选为1～5％(w/v)，在选择眼软膏作为剂型时为0.01～20％(w/w)、优选为0.3～10％(w/w)、更优选为1～5％(w/w)、更加优选为3％(w/w)。另外，对于P2Y2受体激动剂为UTP、ATP或它们的盐时的治疗有效浓度，在选择滴眼剂作为剂型时为0.01～30％(w/v)、优选为0.3～20％(w/v)、更优选为1～10％(w/v)，在选择眼软膏作为剂型时为0.1～30％(w/w)、优选为0.3～20％(w/w)、更优选为1～10％(w/w)。本发明中，对于透明质酸或其盐的具体的“治疗有效浓度”，在选择滴眼剂作为剂型时为0.05～5％(w/v)、优选为0.05～1％(w/v)、更优选为0.05～0.5％(w/v)、进一步优选为0.1～0.5％(w/v)，在选择眼软膏作为剂型时为0.05～10％(w/w)、优选为0.05～5％(w/w)、更优选为0.05～1％(w/w)、进一步优选为0.1～0.5％(w/w)。需要说明的是，本发明的“地夸磷索或其盐”、“UTP或其盐”“ATP或其盐”和“透明质酸或其盐”的浓度可以是地夸磷索、UTP、ATP或透明质酸的游离体的浓度，也可以是它们的盐的浓度。本发明中，“干眼症”的定义为“由于各种原因引起的泪液和角结膜上皮的慢性疾病、伴有眼睛不适感或视觉异常的疾病”。本发明的干眼症包括干性角结膜炎(KCS)，另外还包括泪液分泌减少型和泪液蒸发亢进型的任一种类型的干眼症。泪液分泌减少型干眼症分类为伴有舍格伦综合征的干眼症和非舍格伦综合征型的干眼症。作为舍格伦综合征型的干眼症，可举出伴有先天性无泪腺症、肉状瘤病、由骨髓移植所导致的移植物抗宿主病(GVHD：GraftVersusHostDisease)等泪腺疾病的情况；伴有以眼天疱疮、斯-约二氏综合征、沙眼等为原因的泪器堵塞的情况；伴有以糖尿病、角膜屈光矫正手术(LASIK：Laser(-assisted)inSituKeratomileusis，激光辅助的原位角膜磨镶术)等为原因的反射性分泌降低的情况等。另外，泪液蒸发亢进型干眼症可举出伴有以睑板腺机能不全、眼睑炎等为原因的油层减少的情况；伴有以眼球突出、兔眼等为原因的瞬目不全或闭睑不全的情况；伴有由于佩戴隐形眼镜所导致的泪液稳定性下降的情况；伴有由胚细胞的粘蛋白分泌降低的情况；伴有VDT操作的情况等。本发明中，“干眼症治疗”的定义为介由泪液分泌促进作用等对伴随干眼症的全部疾病的症状和/或观察结果进行改善，不仅意味着改善伴随干眼症的眼睛干燥感、眼睛不适感、眼睛疲劳服、迟钝感、羞明感、眼痛、视力模糊(朦胧视觉)等自觉症状，还包括改善伴随干眼症的充血、角结膜上皮病等。该治疗剂还可将P2Y2受体激动剂、透明质酸或其盐和作为药物可允许的添加剂混合，使用常用的技术作为配合眼科用剂进行制剂化，另外还可在P2Y2受体激动剂或透明质酸或其盐中分别添加作为药物可允许的添加剂，使用广泛使用的技术作为单独眼科用剂进行制剂化。需要说明的是，仅以地夸磷索或其盐为有效成分的滴眼剂可以根据日本特表2003-160491号公报所公开的方法进行制备。另外，在日本市售有仅含0.3％(w/v)浓度的地夸磷索钠作为有效成分的“diquas(注册商标)滴眼液3％”。进而，在日本市售有仅含0.1％(w/v)浓度的透明质酸钠作为有效成分的“hyalein(注册商标)滴眼液0.1％”、仅含0.3％(w/v)浓度的透明质酸钠作为有效成分的“hyalein(注册商标)迷你滴眼液0.3％”等含透明质酸或其盐的滴眼剂。本发明中，该治疗剂被给予至眼局部。作为该治疗剂的给予方式，例如可举出滴眼给予(也包括点入眼软膏)、结膜下给予、结膜囊内给予、特氏囊下给予等，特别优选滴眼给予。本发明中，“眼科用剂”只要是在眼局部给予中使用的剂型即可，无特别限定，例如可举出滴眼剂、眼软膏、注射剂、贴布剂、凝胶、插入剂等，其中优选滴眼剂或眼软膏。需要说明的是，这些物质还可使用该领域中广泛使用的通常技术进行制备。进而，该治疗剂除了这些制剂之外，还可制成眼内植入用制剂或微球等经DDS(药物释放系统)化的制剂。滴眼剂可根据需要从下述添加剂中选择使用，进行制备，所述添加剂为氯化钠、氯化钾、浓甘油等张度剂；磷酸钠、醋酸钠、ε-氨基己酸等缓冲剂；聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯、聚氧乙烯(40)硬脂酸酯、聚氧乙烯氢化蓖麻油等表面活性剂；柠檬酸钠、乙二胺四乙酸钠等稳定化剂；苯扎氯铵、尼泊金等防腐剂等，pH只要在眼科制剂所允许的范围内即可，通常优选4～8的范围内。眼软膏可使用白色凡士林、液体石蜡等常用的基质进行制备。注射剂可根据需要从氯化钠等张度剂；磷酸钠等缓冲剂；聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯等表面活性剂；甲基纤维素等增粘剂等中选择使用，进行制备。插入剂可通过将生物可降解性聚合物、例如羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧乙烯基聚合物、聚丙烯酸等生物可降解性聚合物与该化合物一起粉碎混合，对该粉末进行压缩成型，从而制备，还可根据需要使用赋形剂、粘合剂、稳定化剂、pH调节剂等。眼部植入用制剂可以使用生物可降解性聚合物、例如聚乳酸、聚乙醇酸、乳酸·乙醇酸共聚物、羟丙基纤维素等生物可降解性聚合物进行制备。本发明中，该治疗剂的用法可以根据剂型、应给予的患者的症状的轻重、年龄、体重、医生的判断等适当进行改变，例如选择滴眼剂或眼软膏作为剂型时，可以分为1日1～10次、优选为1日2～8次、更优选为1日4～6次给予至眼局部。需要说明的是，该用法不仅是指含有治疗有效浓度的P2Y2受体激动剂和透明质酸或其盐的配合眼科用剂的用法，还指分别且连续给予含有治疗有效浓度的P2Y2受体激动剂的眼科用剂和含有治疗有效浓度的透明质酸或其盐的眼科用剂时的用法。以下给出药理试验和制剂例的结果，但这些例子仅是为了更好地理解本发明，并非限定本发明的范围。实施例[药理试验1]泪液储存量的变化可通过测定由荧光素溶液进行染色的泪河弯曲面的面积值来进行评价(Exp.Eye.Res.，78(3)，399-407(2004))。因此，根据Murakami等的方法(OphthalmicRes.，34，371-374(2002))，使用正常雄性白色兔子评价作为P2Y2受体激动剂的地夸磷索钠和透明质酸钠连续滴眼后的泪河弯曲面的面积值的经时变化。(药物制备方法)使地夸磷索钠30mg溶解在磷酸缓冲液中，添加氯化钾、氯化钠、苯扎氯铵和pH调节剂，从而制备等渗且中性的水溶液1mL，将其作为3％地夸磷索钠滴眼液用于本试验。需要说明的是，作为人工泪液，使用参天制药株式会社制的“softsantear”，作为0.1％透明质酸钠滴眼液，使用参天制药株式会社制的“hyalein(注册商标)滴眼液0.1％”。(试验方法和药物给予方法)在正常雄性白色兔子(共计20只40眼)的下眼睑泪河弯曲面上滴加0.1％荧光素溶液3μL，对储存在眼睑中的被荧光素染色的泪河弯曲面拍摄照片。使用图像分析软件计算照片图像中经染色的泪河弯曲面部分的面积，将其作为前值。接着，如下给予人工泪液、3％地夸磷索钠滴眼液和0.1％透明质酸滴眼液。·人工泪液单独给予组：1次滴加人工泪液(50μL)(一组4只8眼)、·地夸磷索单独给予组：1次滴加3％地夸磷索钠滴眼液(50μL)(一组4只8眼)、·透明质酸单独给予组：1次滴加0.1％透明质酸钠滴眼液(50μL)(一组4只8眼)、·地夸磷索/人工泪液并用给予组：滴加3％地夸磷索钠滴眼液(50μL)5分钟后，滴加人工泪液(50μL)(一组4只8眼)、·地夸磷索/透明质酸并用给予组：滴加3％地夸磷索钠滴眼液(50μL)5分钟后，滴加0.1％透明质酸钠滴眼液(50μL)(一组4只8眼)。对于人工泪液单独给予组、地夸磷索单独给予组和透明质酸单独给予组而言，在滴眼10分钟和35分钟后，将0.1％荧光素溶液3μL滴加在下眼睑泪河弯曲面上，对储存在眼睑中的被荧光素染色的泪河弯曲面拍摄照片。另一方面，对于地夸磷索/人工泪液并用给予组和地夸磷索/透明质酸并用给予组而言，在距离第1剂滴眼的10分钟和35分钟后，进行与上述单独给予组相同的操作。(评价方法)计算药物滴眼前后的泪河弯曲面面积的变化作为“Δ泪河弯曲面面积值”。图1表示各测定值的Δ泪河弯曲面面积值。各值为8例的平均值±标准误差。(结果)在地夸磷索单独给予组中，在滴眼10分钟后和35分钟后均观察到泪河弯曲面面积值的上升，但在透明质酸单独给予组中，仅在滴眼10分钟后观察到一些上升，在滴眼35分钟后没有确认到泪河弯曲面面积值的上升。另一方面，对于地夸磷索/透明质酸并用给予组而言，在滴眼10和35分钟后(即距离第2剂的滴眼5分钟后和30分钟后)均观察到超过上述地夸磷索单独给予组或透明质酸单独给予组的泪河弯曲面面积值的上升。需要说明的是，对于地夸磷索/人工泪液并用给予组而言，仅确认到与地夸磷索单独给予组基本同等的泪河弯曲面面积值的上升。(讨论)如在
背景技术：
一项中所述那样，透明质酸没有泪液分泌促进作用，实际上0.1％透明质酸滴眼液在滴眼35分钟后完全没有提高泪河弯曲面面积值。尽管如此，当并用给予3％地夸磷索钠滴眼液和0.1％透明质酸钠滴眼液时，令人吃惊的是，从第1剂的滴眼10分钟后开始至35分钟后观察到远远超过单独给予各滴眼液时的泪河弯曲面面积值的上升。即，可以认为通过组合给予3％地夸磷索钠滴眼液和0.1％透明质酸钠滴眼液，观察到远远超过通过单独给予各滴眼液所获得效果之总和的显著的泪液分泌促进。以上说明，通过组合给予治疗有效浓度的P2Y2受体激动剂和治疗有效浓度的透明质酸或其盐，可获得显著的泪液分泌促进作用。[药理试验2]大鼠眼窝外泪腺摘除模型作为评价以干眼症为原因的角膜上皮病的治疗效果的模型被广泛使用。另外，也作为评价P2Y2受体激动剂的治疗效果的模型被利用(Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.，42(1)，96-100(2001))。使用对该模型施与送风的干眼症模型，研究通过组合给予治疗有效浓度的P2Y2受体激动剂和透明质酸或其盐，能否获得角膜上皮病的改善效果。(干眼症模型的制作方法)使用雄性SD大鼠，根据Fujihara等的方法(Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.，42(1)，96-100(2001))制作大鼠眼窝外泪腺摘除模型。即，给予戊巴比妥实施全身麻醉后，将眼窝外泪腺摘除，进而施与送风(8周)诱发角膜上皮病。(药物制备方法)与上述药理试验1同样地制备3％地夸磷索钠滴眼液。另外，作为人工泪液，使用参天制药株式会社制的“softsantear”，作为0.1％透明质酸钠滴眼液，使用参天制药株式会社制的“hyalein(注册商标)滴眼液0.1％”。(试验方法和药物给予方法)对诱发了上述角膜上皮病的大鼠如下给予人工泪液、3％地夸磷索钠滴眼液和0.1％透明质酸滴眼液。·人工泪液单独给予组：将人工泪液(5μL)滴入两眼，1日6次、滴眼6周(一组4只8眼)、·透明质酸单独给予组：将0.1％透明质酸钠滴眼液(5μL)滴入两眼，1日6次、滴眼6周(一组4只8眼)、·地夸磷索单独给予组：将3％地夸磷索钠滴眼液(5μL)滴入两眼，1日6次、滴眼6周(一组4只8眼)、·人工泪液/透明质酸并用给予组：将人工泪液和0.1％透明质酸钠滴眼液(各5μL)滴入两眼，1日6次、滴眼6周(一组3只6眼)、·地夸磷索/透明质酸并用给予组：将3％地夸磷索钠滴眼液和0.1％透明质酸钠滴眼液滴入两眼，1日6次、滴眼6周(一组4只8眼)。需要说明的是，在诱发了上述角膜上皮病的大鼠中，将6周无滴眼者作为无滴眼组(一组4只8眼)。在开始滴眼6周后，使用荧光素对角膜的患部进行染色，根据村上等人的方法(新眼科，21(1)，87-90(2004))判定角膜上皮病。即，对于角膜的上部、中间部和下部分别根据下述标准对利用荧光素的染色程度进行评分判定，计算这些评分总和的平均值。需要说明的是，在0、1、2和3的各评分之间设置0.5作为中间值。(判定标准)0：未被染色，1：染色稀松，各点状的染色部分分离，2：染色为中等程度，点状的染色部分的一部分相邻，3：染色紧密，各点状的染色部分相邻。(结果)将对所计算的各组的荧光素染色评分进行图表化的图示于图2中。需要说明的是，评分为各6例或各8例的平均值±标准误差。由图2可知，在透明质酸单独给予组和地夸磷索单独给予组中，虽然观察到荧光素染色评分改善的倾向，但并不是可称之为统计学上有意义的荧光素染色评分的改善。而在地夸磷索/透明质酸并用给予组中，观察到显著的荧光素染色评分的改善，该改善效果在统计学上有意义(p＜0.05、Tukey的多组检验(与无滴眼组的比较))。(讨论)由以上可知，通过组合给予3％地夸磷索钠滴眼液和0.1％透明质酸钠滴眼液，可以改善通过各滴眼液的单独给予无法治疗的严重的角膜上皮病。即，通过组合给予治疗有效浓度的P2Y2受体激动剂和治疗有效浓度的透明质酸或其盐，也可期待对于伴有重度的角膜上皮病的干眼症优异的治疗效果。[药理试验3]为了研究在组合治疗有效浓度的P2Y2受体激动剂和用作添加剂的浓度的透明质酸或其盐时是否观察到泪河弯曲面面积值的上升，利用与药理试验1相同的方法对3％地夸磷索钠和0.002％透明质酸钠连续滴眼后的泪河弯曲面的面积值的经时变化进行评价。(药物制备方法)与所述药理试验1同样地制备3％地夸磷索钠滴眼液。用生理盐水稀释参天制药株式会社制的“hyalein(注册商标)滴眼液0.3％”制备0.002％透明质酸钠滴眼液。(试验方法和药物给予方法)利用与药理试验1相同的方法，对正常雄性白色兔子(共计12只24眼)进行药物滴眼前的泪河弯曲面的照片拍摄。接着，如下给予3％地夸磷索钠滴眼液和0.002％透明质酸滴眼液，35分钟后再次进行泪河弯曲面的照片拍摄。·地夸磷索单独给予组：1次滴加3％地夸磷索钠滴眼液(50μL)(一组4只8眼)、·透明质酸单独给予组：1次滴加0.002％透明质酸钠滴眼液(50μL)(一组4只8眼)、·地夸磷索/透明质酸并用给予组：滴加3％地夸磷索钠滴眼液(50μL)5分钟后，滴加0.002％透明质酸钠滴眼液(50μL)(一组4只8眼)。(结果)计算药物滴眼前后的泪河弯曲面面积的变化作为“Δ泪河弯曲面面积值”。结果示于表1。[表1]组Δ泪河弯曲面面积值(mm2)透明质酸单独给予组-0.497地夸磷索单独给予组1.127地夸磷索/透明质酸并用给予组0.928(讨论)由表1可知，在地夸磷索/透明质酸并用给予组中虽然观察到超过透明质酸单独并用给予组的泪河弯曲面面积值的上升，但该作用与地夸磷索单独给予组同等或者更差。即，0.002％透明质酸钠滴眼液完全未促进3％地夸磷索钠滴眼液的泪液分泌作用。以上表明，组合给予治疗有效浓度的P2Y2受体激动剂和治疗有效浓度的透明质酸或其盐时，获得了显著的泪液分泌促进作用(参照药理试验1)，另一方面，在组合给予治疗有效浓度的P2Y2受体激动剂和用作添加物的浓度的透明质酸或其盐时，未观察到该作用。[药理试验4]利用与药理试验1相同的方法，评价3％地夸磷索钠和0.3％透明质酸钠连续滴眼后的泪河弯曲面的面积值的经时变化。(药物制备方法)与所述药理试验1同样地制备3％地夸磷索钠滴眼液。另外，作为0.3％透明质酸钠滴眼液，使用参天制药株式会社制的“hyalein(注册商标)滴眼液0.3％”。(试验方法和药物给予方法)利用与药理试验1相同的方法，对正常雄性白色兔子(共计9只18眼)进行药物滴眼前的泪河弯曲面的照片拍摄。接着，如下给予3％地夸磷索钠滴眼液和0.3％透明质酸滴眼液，在35分钟后，再次进行泪河弯曲面的照片拍摄。·地夸磷索单独给予组：1次滴加3％地夸磷索钠滴眼液(50μL)(一组3只6眼)、·透明质酸单独给予组：1次滴加0.3％透明质酸钠滴眼液(50μL)(一组3只6眼)、·地夸磷索/透明质酸并用给予组：滴加3％地夸磷索钠滴眼液(50μL)5分钟后，滴加0.3％透明质酸钠滴眼液(50μL)(一组3只6眼)。(结果)计算药物滴眼前后的泪河弯曲面面积的变化作为“Δ泪河弯曲面面积值”。结果示于表2。[表2]组Δ泪河弯曲面面积值(mm2)透明质酸单独给予组0.559地夸磷索单独给予组1.434地夸磷索/透明质酸并用给予组3.373(讨论)由表2可知，在地夸磷索/透明质酸并用给予组中确认到远远超过在透明质酸单独给予组或地夸磷索单独给予组中观察到的“Δ泪河弯曲面面积值”之总和的效果。即，0.3％透明质酸钠滴眼液与0.1％透明质酸钠滴眼液同样地显著促进了3％地夸磷索钠滴眼液的泪液分泌作用。由以上内容再次确认，在组合给予治疗有效浓度的P2Y2受体激动剂和治疗有效浓度的透明质酸或其盐时，获得了显著的泪液分泌促进作用。[制剂例]举出制剂例进一步具体地说明本发明的药剂，但本发明并不仅限定于这些制剂例。(处方例1；滴眼剂(地夸磷索钠浓度：3％(w/v)，透明质酸钠浓度：0.1％(w/v))100ml中在灭菌精制水中添加地夸磷索钠、透明质酸钠和其他的上述成分，将它们充分地混合制备滴眼液。通过改变地夸磷索钠和透明质酸钠的添加量，可制备地夸磷索钠的浓度为0.5％(w/v)、1％(w/v)或5％(w/v)、透明质酸钠的浓度为0.3％(w/v)或0.5％(w/v)的滴眼剂。(处方例2；眼软膏(地夸磷索钠浓度：3％(w/w)，透明质酸钠浓度：0.1％(w/w))100g中在均匀熔融的白色凡士林和液体石蜡中添加地夸磷索钠和透明质酸钠，将它们充分地混合后，缓慢冷却，从而制备眼软膏。通过改变地夸磷索钠和透明质酸钠的添加量，可制备地夸磷索钠的浓度为0.5％(w/v)、1％(w/v)或5％(w/v)、透明质酸钠的浓度为0.3％(w/v)或0.5％(w/v)的眼软膏。产业上的可利用性本发明的干眼症治疗剂，其特征在于，是将治疗有效浓度的P2Y2受体激动剂和治疗有效浓度的透明质酸或其盐组合得到，剂型为眼科用剂，所述干眼症治疗剂由于在显著促进泪液分泌的同时，还显著改善角膜上皮病，因此期待其成为新型的干眼症治疗剂。当前第1页1 2 3