一种药物组合物及其应用的制作方法

本发明涉及药物技术领域，尤其涉及一种药物组合物及其应用。

背景技术：

目前,全球癌症负担不断加重,未来20年每年新发癌症病例将达到2200万,同期癌症死亡数将上升到1300万例。受人口增长和老龄化影响,发展中国家的癌症数量不断攀升,全球60％的病例发生在非洲、亚洲和中美洲及南美洲地区,并且占全世界癌症死亡数的70％。2014年，世界卫生组织(who)报告预测癌症病例由2012年的1400万人逐渐递增至2025年的1900万，到2035年，将有可能达到2400万人。在我国，卫生部不久前召开的肿瘤防治宣传通报会上,来自卫生部、医学科学院的专家披露：目前我国年均癌症发病人数约180万-200万,死亡人数约150万，如不加强环境保护和防控,今后20年内,我国癌症患病和死亡人数将翻一番。

前列腺癌是男性患癌风险较高的癌症之一，2008年全球前列腺癌标化发病率28.5/10万，标化死亡率为7.5/10万，居男性常见肿瘤第二位，1998—2008年我国前列腺癌粗发病率为2.98/10万—7.69/10万；1998—2008年我国前列腺癌病死率为0.7/10万—4.9/10万

我国前列腺癌发病率与死亡率远低于美国、加拿大、法国、英国等发达国家。但是，我国前列腺癌粗发病率总体呈增长趋势，如上海浦东新区前列腺癌粗发病率从2000年的11.4/10万上升至2005年的17.69/10万，增加55.18％；我国前列腺癌发病率最高的上海地区与西班牙、意大利上世纪90年代的发病水平接近。与亚洲国家相比，我国前列腺癌发病率低于日本但死亡率与日本接近。

未经治疗的前列腺癌为雄激素依赖性，通过内分泌治疗或去势治疗阻断雄激素促使雄激素依赖性癌细胞凋亡，从而达到治疗目的，虽然内分泌治疗或去势治疗可以使大多数患者的病情得到控制和改善，但在经过缓解期后，绝大多数患者会发展为激素抵抗性前列腺癌，激素抵抗性前列腺癌患者的生存率较低。

药物联用治疗癌症显示出了良好的前景与应用价值，专利cn104906583公开了一种复方抗癌药物，具体公开了他汀类药物与异硫氰酸酯类药物的联合应用。其通过试验发现5μm的阿托伐他丁和5μm的peitc联用对前列腺癌细胞的增殖具有较好的抑制作用，显示了良好的治疗效果。随着激素抵抗性前列腺癌的发病率越来越高，开发一种使用浓度更低，对激素抵抗性前列腺癌治疗效果更显著的药物刻不容缓。

恩杂鲁胺(enzalutamide)，化学式为4-[3-[4-氰基-3-(三氟甲基)苯基]-5,5-二甲基-4-氧代-2-硫酮-1-咪唑烷基]-2-氟-n-甲基苯甲酰胺，于2012年8月31日经美国食品药品管理局(fda)批准用于治疗已扩散或复发的晚期男性去势耐受前列腺癌(castration-resistantprostatecancer)。是一种雄激素受体拮抗剂，其阻断雄激素结合雄激素受体并防止配体-受体复合物的核移位和共激活剂募集。

卡巴他塞是一种化学半合成紫杉烷类小分子化合物，为sanofi-aventis公司研发的前列腺癌的二线药物，用于二线治疗转移性激素不应性前列腺癌。能够与微管蛋白相结合对微管双聚体装配为微管具有重要作用，而且可以避免去多聚化有效控制对微管的分解，确保微管更具有稳定性。

目前，并没有关于将恩杂鲁胺和卡巴他塞联用用于治疗前列腺癌的研究，将二者联用用于治疗激素抵抗性前列腺癌具有良好的前景与应用价值。

技术实现要素：

有鉴于此，本发明目的在于提供一种药物组合物及其应用。本发明提供的药物组合物包括恩杂鲁胺和卡巴他赛，二者联用用于治疗前列腺癌可产生协同增效作用，使用浓度低、治疗效果显著。

本发明提供了一种药物组合物，包括：恩杂鲁胺和卡巴他赛。

作为优选，本发明提供的药物组合物中，恩杂鲁胺与卡巴他赛的摩尔比为(250～500):(0.05～0.5)。

在本发明提供的具体实施例中，以nm为单位，恩杂鲁胺与卡巴他赛的摩尔比优选为500:0.05、500:0.5、500:0.25、500:0.125或250:0.125。

本发明提供了上述药物组合物在制备前列腺癌细胞株pc-3增殖的药物中的应用。

本发明提供了药物组合物在制备抑制前列腺癌细胞株lncap增殖的药物中的应用。

本发明还提供了药物组合物在治疗制备前列腺癌的药物中的应用。

本发明通过mtt法实验，发现相比单独给予恩杂鲁胺和卡巴他赛，恩杂鲁胺与卡巴他赛联用对前列腺癌lncap细胞和pc-3细胞的增殖有显著的抑制作用(p<0.01)，表明本发明提供的药物组合物能够用于制备治疗前列腺癌的药物。

本发明还提供了一种治疗前列腺癌的药物，包括本发明提供的药物组合物及药学上可接受的辅料。

作为优选，本发明提供的治疗治疗前列腺癌的药物为口服制剂。

优选的，口服制剂为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、汤剂、膏剂、露剂、口服液剂、滴丸剂或糖浆剂。

更优选的，口服制剂为片剂。

作为优选，药学上可接受的辅料为赋形剂、填充剂和润滑剂。

优选的，赋形剂为阿拉伯胶；填充剂为淀粉；润滑剂为微粉硅胶。

本发明提供了一种药物组合物，包括：恩杂鲁胺和卡巴他赛。二者联用可产生协同增效作用。本发明通过实验证明，与单独给予恩杂鲁胺、卡巴他赛相比，恩杂鲁胺和卡巴他赛联用对前列腺癌lncap细胞和pc-3细胞的增殖有显著的抑制作用(p<0.01)，因此，本发明还提供了该药物组合物用于制备治疗列腺癌的药物。

附图说明

图1示不同浓度恩杂鲁胺对前列腺癌pc-3细胞活性的影响；

图2示不同浓度卡巴他赛对前列腺癌pc-3细胞活性的影响；

图3示不同浓度卡巴他赛和恩杂鲁胺组合对前列腺癌pc-3细胞活性的影响；

图4示不同浓度恩杂鲁胺对前列腺癌lncap细胞活性的影响；

图5示不同浓度卡巴他赛对前列腺癌lncap细胞活性的影响；

图6示不同浓度的卡巴他赛和恩杂鲁胺组合对前列腺癌lncap细胞活性的影响。

具体实施方式

本发明提供了一种药物组合物及其应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

本发明采用的仪器、试剂皆为普通市售品，皆可于市场购得。

下面结合实施例，进一步阐述本发明：

实施例1本发明提供的药物组合物对前列腺癌pc-3细胞的影响

(一)通过mtt试验测定单独使用卡巴他赛(cabazitaxel)、恩杂鲁胺(enzalutamide)对前列腺癌pc-3细胞存活率的影响，方法如下：

取前列腺癌pc-3细胞以密度为0.2×105cells/ml接200μl于96孔板中，放置于37℃、5％的培养箱中培养24h，然后将不同浓度的卡巴他赛(cabazitaxel)和恩杂鲁胺(enzalutamide)处理72h，加入0.5mg/ml的mtt放入培养箱孵育2h，加入100μl的dmso孵育10min后，于570nm波长条件下测定吸光值，计算细胞存活率，试验重复3次，取平均值。其中，卡巴他赛(cabazitaxel)的浓度为0nm、0.25nm、0.5nm、1nm、2nm，恩杂鲁胺(enzalutamide)的浓度为0.5μm、1μm、2μm、5μm、8μm、10μm、15μm、20μm。结果如图1～2。

(二)通过mtt试验测定卡巴他赛和恩杂鲁胺联用对前列腺癌pc-3细胞活性。

卡巴他赛和恩杂鲁胺的组合为：卡巴他赛0.05nm+恩杂鲁胺0.25μm，卡巴他赛0.05nm+恩杂鲁胺0.5μm，卡巴他赛0.125nm+恩杂鲁胺0.25μm，卡巴他赛0.125nm+恩杂鲁胺0.5μm。按照上述方法检测以上卡巴他赛和恩杂鲁胺组合物对前列腺癌pc-3细胞存活率的影响，结果如图3所示。

由图1～2可知，恩杂鲁胺在0-20μm浓度范围内，随着药物浓度增加，pc-3细胞存活率降低。卡巴他赛在0-2.5nm浓度范围内，随着药物浓度增加，pc-3细胞存活率降低。

由图1～3可知，相比单独用药，卡巴他赛与恩杂鲁胺联能够显著降低前列腺癌pc-3细胞的存活率(p<0.01)，表明卡巴他赛与恩杂鲁胺联用产生了协同增效作用。其中，卡巴他赛0.125nm+恩杂鲁胺0.25μm对前列腺癌pc-3细胞的抑制作用最强，协同增效作用最佳。

实施例2本发明提供的药物组合物对前列腺癌lncap细胞的影响

(一)通过mtt试验测定单独使用卡巴他赛、恩杂鲁胺对前列腺癌lncap细胞存活率的影响。测定方法同实施例1，卡巴他赛的浓度为0.1nm、0.25nm、0.5nm、1nm、2nm、4nm、8nm、10nm，恩杂鲁胺的浓度为0.5μm、1μm、2μm、5μm、8μm、10μm、15μm、20μm。测定结果如图4～5所示。

(二)通过mtt试验测定卡巴他赛、恩杂鲁胺联用对前列腺癌lncap细胞存活率的影响，测定方法同实施例1，卡巴他赛与恩杂鲁胺组合方案为：卡巴他赛0.05nm+恩杂鲁胺0.5μm，卡巴他赛0.125nm+恩杂鲁胺0.5μm，卡巴他赛0.25nm+恩杂鲁胺0.5μm，卡巴他赛0.5nm+恩杂鲁胺0.5μm，测定结果如图6所示。

由图4～5可知，恩杂鲁胺(enzalutamide)在0-25μm浓度范围内，随着药物浓度增加，lncap细胞存活率降低。卡巴他赛(cabazitaxel)在0-12nm浓度范围内，随着药物浓度增加，lncap细胞存活率降低。

由图4～6可知，相比单独用药，卡巴他赛与恩杂鲁胺联能够显著降低前列腺癌lncap细胞的存活率(p<0.01)，表明卡巴他赛与恩杂鲁胺联用产生产生了协同增效作用。其中，卡巴他赛0.5nm+恩杂鲁胺0.5μm对前列腺癌lncap细胞的抑制作用最强，协同增效作用最佳。

实施例3本发明所述药物的制备

称取恩杂鲁胺0.116毫克、卡巴他赛0.104微克、辅料(甘露醇0.07克、淀粉0.04克、硬脂酸镁0.08克、微粉硅胶0.9克)充分混合，加入适量蒸馏水搅拌制粒，过20目筛，干燥，压片，每片约0.3g。

实施例4本发明所述药物的制备

称取恩杂鲁胺0.232毫克、卡巴他赛0.418微克、辅料(甘露醇0.07克、淀粉0.04克、硬脂酸镁0.08克、微粉硅胶0.9克)充分混合，加入适量蒸馏水搅拌制粒，过20目筛，干燥，压片，每片约0.3g。

以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。