碳代青霉烯衍生物和其制备方法

专利名称：：碳代青霉烯衍生物和其制备方法
技术领域：
：本发明涉及新颖的碳代青霉烯(3-吡咯烷基硫基-1-氮杂双环[3.2.0]庚-2-烯-7-酮-2-羧酸化合物)衍生物，其制备方法和含有此类化合物为活性成分的抗菌剂。Streptomycescattleya是由土壤中分离出的一种放线菌，由此菌种发酵分离出来的硫霉素(J.Am.Chem.Soc.Vol.100，P6491(1978))对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在很大范围内有良好的抗菌谱和强抗菌活性。最近研究了具有不同β-内酰胺环的碳代青霉烯衍生物的结构，此结构不同于具有常规β-内酰胺环的青霉素衍生物和头孢菌素的结构。硫霉素有强的抗菌活性，但是硫霉素本身是化学不稳定的，有报告说它在体内会被某些酶，如肾的脱氢肽酶I(此文中称作DHPI)分解，因而减小了抗菌活性，尿恢复率低(Antimicrob.AgentChem-other.，Vol.22，P62(1982)，同上，Vol.23，P330(1983))。为了达到保持硫霉素良好的抗菌活性，同时又获得化学稳定性的目的，Merck&Co.Inc.已经合成了许多硫霉素的类似物。结果，由硫霉素的氨基亚胺基化(formimidation)得到的亚胺硫霉素(imi-penem)经过实际研究成为药用产品(USP4194047)。但是，同硫霉素一样，亚胺硫霉素在人体肾脏中同样可被DHP-I分解。因此它不能用于治疗泌尿生殖系统感染。另外，由于分解产物对肾有毒性，因此，亚胺硫霉素不能单独用药，而是需要和诸如Cilastatin(Antimicrob.AgentsChemother.，Vol.12(suppl.D)，P1(1983))的DHP-I抑制剂结合使用。但在二十世纪80年代，随着对有足够高稳定性的碳代青霉烯化合物不断增长的需求，对各种有1β-甲基碳代青霉烯基本骨架的碳代青霉烯化合物进行了研究。SumitomoCo.合成了meropenem，它对DHP-I比亚胺硫霉素更稳定，并有宽的抗菌谱(EP126587;AntimicrobialAgentsandChemotherapy，Vol.33，No.7，P1009(1989);JournalofAntibiotics，Vol.43，No.5，P519(1990))。另外，Lederle合成了L.J.C.10627，它显示出更好的抗菌活性和对DHP-I的稳定性。和本发明接近的现有技术，已知的有EP182213，EP243686，EP411664。公开了在吡咯烷的2′-位上有脒基烷基、ureiren烷基、氨基甲酰基烷基、烷氧基亚氨基烷基和亚氨基烷基的碳代青霉烯衍生物，吡咯烷的4′位通过S(硫)连接于碳代青霉烯骨架上。本发明提供了在吡咯烷2′-位上有烷氧基亚氨基、羟基亚氨基或亚肼基基团的碳代青霉烯衍生物，这在相关
技术领域：
中从未公开过。β-内酰胺抗菌剂显示出选择性的抗菌活性，并且对动物体细胞无大的毒性作用，因此它们作为常用药物广泛应用于治疗由细菌引起的传染病。特别是碳代青霉烯化合物，它对革兰氏阳性和革兰氏阴性菌有宽的抗菌谱，并且比其它抗菌剂的毒性更低。但是，人们仍然希望能够改进它的抗菌活性和对DHP-I的稳定性，以便能减小其对肾脏的毒性和对中枢神经系统的副作用。为了能提供对革兰氏阳性和革兰氏阴性菌具有良好的抗菌活性，特别是同时又对DHP-I具有高稳定性的新的碳代青霉烯化合物，本发明人进行了广泛的研究并完成了本发明。本发明提供了式(Ⅰ)化合物其中R1是氢原子或甲基，R2是氢原子、金属或非金属盐基团，或者是羧基保护基。通式(Ⅰ)的金属或非金属盐基团表示碱金属盐，如钠盐或钾盐;碱土金属盐，如镁盐或钙盐;铵盐;脂族盐，如三乙胺盐、吡啶盐、甲基吡啶盐、乙醇胺盐、三乙醇胺盐、二环己胺盐、N′，N′-二苄基亚乙胺盐、二苄基胺盐;酸加成盐，例如无机盐如盐酸化物、氢溴化物、硫酸盐、磷酸盐;有机酸盐如甲酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐;或分子内的四价盐。羧基保护基可以是，例如低级烷基或是下文提及的酯化羧基。上文提到的酯基包括至少一个适当的取代基，例如低级链烷酰氧基(低级)烷基，如乙酰氧基甲基、丙酰氧基甲基、丁酰氧基甲基、戊酰氧基甲基、新戊酰氧基甲基、己酰氧基甲基;低级烷基磺酰基(低级)烷基，如2-甲基乙基;一(或二，或三)卤代(低级)烷基，如2-碘甲基、2，2，2-三氯乙基;低级烷氧羰氧基(低级)烷基，如甲氧羰氧基甲基、乙氧羰氧基甲基、丙氧羰氧基甲基、叔丁氧羰氧基甲基、1-(或2-)甲氧羰氧基乙基、1-(或2)-乙氧羰氧基乙基;可以有2-苯并[c]呋喃酮亚基(低级)烷基[Phthalidentl(lower)alkylgroup]的低级烷基，如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基;低级链烯基，如乙烯基、烯丙基、异丙烯基;低级炔基，例如乙炔基、丙炔基;可以有至少一个以上取代基的芳基低级烷基，例如苄基、4-甲氧基苄基、4-硝基苄基、2-硝基苄基、三苯甲游基、二苯甲基、双(甲氧基苯基)甲基、3，4-二甲氧基苄基、4-羟基-3，5-二叔丁基苄基;可以有至少一个以上取代基的芳基，如苯基、4-氯苯基、甲苯基、叔丁基苯基、二甲苯基、菜基、脒基;2-苯并[c]呋喃酮基。“低级”是指碳数为1-6，“低级烷基”包括直链或支链烷基，如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、戊基、己基。“低级烷氧基”包括直链或支链烷氧基，如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基。R3表示氢原子或亚胺基保护基或药学上可接受的盐。适当的亚胺基保护基可以是氨基甲酰基、脂族酰基、芳族酰基、杂环酰基、芳基取代的脂族酰基、杂环基取代的脂族酰基、所有这些都是由羧酯、碳酯、磺酸、氨基甲酸衍生而来的。脂族酰基包括饱和或非饱和的非环或环状酰基，例如，低级链烷酰基，如甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基;低级烷基磺酰基，如甲磺酰基、乙磺酰基、丙磺酰基、异丙磺酰基、丁磺酰基、异丁磺酰基、戊磺酰基、己磺酰基;氨基甲酰基;N-烷基氨基甲酰基，如甲基氨基甲酰基、乙基氨基甲酰基;低级烷氧羰基，如甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、丁氧羰基、叔丁氧羰基;低级链烯氧羰基，如乙烯氧羰基、烯丙氧羰基、异丙烯氧基羰基;低级链烯酰基，如丙烯酰基、甲基丙烯酰基、巴豆酰基;(低级)环烷基羰基，如环丙烷基羰基、环戊烷基羰基、环己烷基羰基。芳族酰基包括芳酰基，如苯甲酰基、甲苯甲酰基、二甲苯甲酰基;N-芳基氨基甲酰基，如N-苯基氨基甲酰基、N-甲苯基氨基甲酰基、N-萘基氨基甲酰基;芳基磺酰基，如苯磺酰基、甲苯磺酰基。杂环酰基包括杂环酰基，如Proyl、烟酰基、异烟酰基、噻唑基羰基、噻二唑基羰基、四唑基羰基、tetrazolyrbonyl。芳族基团取代的脂族酰基包括芳烷酰基，例如苯基(低级)烷酰基，如苯乙酰基、苯丙酰基、苯己酰基;芳烷氧羰基，例如苯基(低级)烷氧羰基，如苄氧羰基、penetyloxycarbonyl;芳氧基链烷酰基，例如苯氧基(低级)链烷酰基，如苯氧基乙酰基、苯氧基丙酰基。由杂环基取代的脂族酰基包括杂环基(低级)链烷酰基，例如杂环(低级)链烷酰基，如噻吩基乙酰基、咪唑基乙酰基、呋喃基乙酰基、四唑基乙酰基、噻唑基乙酰基、噻二唑乙酰基、噻吩基丙酰基、噻二唑基丙酰基。上述酰基可被一个或一个以上选自下述基团的取代基取代低级烷基，如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、戊基、己基;卤素，如氯、溴、碘、氟;低级烷氧基，如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、戊氧基、己氧基;低级烷硫基，如甲硫基、乙硫基、丙硫基、异丙硫基、丁硫基、戊硫基、己硫基;硝基。所有这些取代基的优选酰基有选自下述基团的取代基一(或二，或三)卤代链烷酰基，如氯乙酰基、溴乙酰基、二氯乙酰基、三氟乙酰基;一(或二，或三)卤代烷氧羰基，如氯甲氧羰基、二氯甲氧羰基、2，2，2-三氯乙氧羰基;硝基(或卤代，或低级烷氧基);芳烷氧羰基，如硝基苄氧基羰基、氯代苄氧基羰基、甲氧基苄氧基羰基;一(或二，或三)卤代低级烷基磺酰基，如氟代甲磺酰基、二氟甲磺酰基、三氟甲磺酰基、三氯甲磺酰基。“亚氨基保护基”优选(C2-C4)链烯氧羰基、苯基(C1-C4)烷氧羰基、邻硝基(或间硝基，或对硝基)苄氧基羰基、邻甲氧基(或间甲氧基，或对甲氧基)苄氧基羰基。R4表示氢原子、低级烷基、羟基、氰基、卤素基团如氯、溴、碘、氟。R5表示羟基、低级烷氧基、保护或未保护的氨基，或下述通式(1)-(4)之一其中R6和R7各自独立地是氢原子或低级烷基。R8是羟基、氰基、卤原子如氯、溴、碘、氟，或者是可被适当取代基选择性地取代的含有1-4个杂原子的5或6节杂环基团，保护或未保护的氨基，或下面通式其中R9是低级烷基磺酰基如甲磺酰基，卤代(C1-C4)烷基磺酰基，苯基(C1-C4)烷基磺酰基如对甲苯磺酰基，N，N-二(低级)烷基氨磺酰如N，N-二甲基氨磺酰。其中R6与上文定义相同。其中R6、R7与上文定义相同。其中R6与上述定义相同，R10是低级烷基、低级烷基磺酰基、卤代低级烷基磺酰基、苯基(C1-C4)烷基磺酰基、N-(低级)烷基氨磺酰基、N，N-二(低级)烷基氨磺酰基、可由适当取代基选择性取代的含1-4个杂原子的5或6节杂环、保护或未保护的氨基，或下面通式其中R11是卤原子、羟基、氰基，这些基团是在苯基的邻-、间-或对-位之一的位置上取代，R6、R7与上文定义相同。“含有1-4个杂原子的5或6节杂环基团”包括含有1-4个氮原子的不饱和5或6节单环杂环基团，例如吡咯基、吡咯啉基(pyrrol-idiyl)、咪唑基(如2-咪唑基)、咪唑啉基(如2-咪唑啉基)、吡唑基、吡唑啉基、吡啶基、吡啶N-氧化物、pyridinio、二氢吡啶基、四氢吡啶基(如1，2，3，6-四氢吡啶基)、嘧啶基、pyrimidinio、吡嗪基、pyrazinio、哒嗪基(如1，3，5-三嗪基、1，2，4-三嗪基和1，2，3-三嗪基)、四氢三嗪基(如1，2，5，6-四氢-1，2，4-三嗪基、1，4，5，6-四氢-1，2，4-三嗪基)、triazinio、三唑基(如1H-1，2，4-三唑基、1H-1，2，3-三唑基、2H-1，2，3，-三唑基)、triazolio、四嗪基、tetrazinio、四唑基(如1H-四唑基、2H-四唑基)、tetrazolio;含有1-3个氮原子和1-2个硫原子的不饱和5或6节单杂环基，例如噻唑基、异噻唑基、噻二唑基(如1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基)、thiadiazolio、噻唑啉基(如2-噻唑啉基)、二氢噻嗪基，含1-2个氧原子和1-3个氮原子的不饱和5或6节单环杂环基，例如噁二唑基(如、1，2，4-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、1，2，5-噁二唑基);含有1-4个氧原子的饱和5或6节单环杂环基，例如二氧戊环基(如1，3-二氧戊环基)、二噁烷基(如1，3-二噁烷基、1，4-二噁烷基);含1-4个硫原子的饱和5或6节单环杂环基，例如二硫戊环基(如1，3-二硫戊环基)、二噻烷基(如1，3-二噻烷基、1，4-二噻烷基);以及上文提到的含氮原子的5或6节不饱和单环杂环基的“季铵化”的基团。上述杂环基可被1-3个选自下述基团的取代基取代氨基;与上述定义的亚胺基保护基相同的氨基保护基;低级烷氨基(如甲氨基、乙氨基、丙氨基、异丙氨基、丁氨基、己氨基);脲基(低级)烷基(如脲基甲基、脲基乙基、脲基丙基、脲基己基);氨基甲酰基;上文定义的低级烷基;氨基(低级)烷基(如氨甲基、氨乙基、氨丙基、氨丁基、氨己基);羟基(低级)烷基和保护的羟基(低级)烷基;叠氮基(低级)烷基(如叠氮基甲基、叠氮基乙基、叠氮基己基);卤代(低级)烷基(如氯甲基、溴甲基、碘乙基、溴丙基、溴己基)。“保护的羟基(低级)烷基”包括带有硝基的苯基(C1-C4)烷氧羰氧基(C1-C4)烷基;带有硝基的三苯基(C1-C4)烷氧(C1-C4)烷基;带有硝基的三(C1-C4)烷基甲硅烷氧基(C1-C4)烷基。如果上述杂环基是在2-位上有氨基或保护的氨基的噻唑基，或是在3-位上有氨基或保护的氨基的1，2，4-噁二唑基时，上述杂环基有如下式所述的“互变异构体”其中R12是氨基或保护的氨基，R13是亚氨基或保护的亚氨基。本发明的范围包括了所有上述互变异构体。但是，含有“互变异构体”的目的产物和中间体，例如2-氨基(或保护的氨基)-噻唑基为方便起见用下式表示3-氨基(或保护的氨基)-1，2，4-噁二唑基用下式表示其中“被保护的氨基”包括有例如下述基团之一连接于氨基上的氨基基团C1-C4烷氧羰基，如叔丁氧羰基;卤代(C1-C3)烷氧羰基，如2-碘代乙氧羰基、2，2，2-三氯乙氧基羰基;取代或未取代的芳(低级)烷氧羰基[al(lower)alkyloxycarbonyl];取代或未取代的苯基(C1-C3)烷氧羰基，如苄氧羰基、对甲氧基苄氧羰基、邻硝基苄氧羰基、对硝基苄氧羰基;三(C1-C4)烷基甲硅烷基，如三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基。n是1至4的整数。本发明还提供了制备下面化合物(Ⅳ)的方法其中R1、R2、R3、R4、R5和R14与上文定义相同，该方法是使式(Ⅱ)化合物其中R1和R2与上文定义相同，R14是氢或羟基保护基，与下面式(Ⅲ)化合物进行反应其中R3、R4和R5与上文定义相同。本发明还提供了合成上文式(Ⅲ)化合物的有用步骤。另外，本发明证明了通式(Ⅰ)化合物显示出有效的抗菌活性和低毒性(表1、2、3)。本发明化合物具有下面的基本结构按照系统命名它被称作是7-氧代-1-氮杂双环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸或1-氮杂双环[3.2.0]庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。为方便起见，在本说明书中以常用的下式碳代青霉烯为基础编号，上述基本结构被称作1-碳代青霉-2-烯-3-羧酸;本发明包括了以碳代青霉烯结构的1-、5-、6-和8-位的不对称碳为基础的光学异构体。在这些异构体中优选(5R，6R，8R)构型的化合物，即与硫霉素有相同立体构型(5R，5S)(5，6-反式)并且其中8-位上的碳原子为R-构型，或在1-位上有甲基的情况下的(1R，5S，6S，8R)构型的化合物。相应地，在式(Ⅰ)化合物中，具有优选立体构型的一组化合物用式(Ⅰ-a)表示其中R1、R2、R3、R4和R5如上文定义。2′-(N-取代)吡咯烷-4′-硫基基团也包括了以吡咯烷结构2-和4-位不对称碳为基础的所有可能的异构体。在这些异构体中，优选的是(2′S，4′S)构型和(2′R，4′S)构型的化合物。在式(Ⅰ-a)化合物中，下面一组化合物有特别好的抗菌活性R1是甲基，R5是低级烷氧基或基团，其中R6是氢原子或(低级)烷基，R10是(低级)烷基或(低级)烷基磺酰基、苯基(C1-C4)烷基磺酰基或基团(其中R11和上文定义相同)。另外，就2-(N-取代亚氨基)基团的双键而言，存在着顺式(Z)和反式(E)的几何异构体。这些异构体也包括于本发明之中。在这些异构体中，(E)-异构体有特别好的抗菌活性。在与式(Ⅲ)反应之前，式(Ⅱ)化合物必须转化为它的活性衍生物。这就是要把式(Ⅱ)化合物加入到惰性有机溶剂中使其在碱性条件下与活化试剂进行反应得到式(Ⅱ-a)的活性衍生物。其中R1、R2、R14与上文定义相同，A是离去基团。反应所用活性试剂可以是例如酸酐，如甲磺酸酐、三氟甲磺酸酐、对甲苯磺酸酐、三氟乙酸酐;或酰氯，如甲磺酰氯、对-甲苯磺酰氯或氯代磷酸二苯基酯。特别优选的是氯代磷酸二苯基酯。在式(Ⅱ-a)中，A是离去基团，如三氟乙酰氧基、甲磺酰氧基、三氟甲磺酰氧基、对甲苯磺酰氧基或二苯氧基磷酰氧基。特别优选的是二苯氧基磷酰氧基。反应所用的惰性有机溶剂可以是例如氯甲烷、氯仿、四氯化碳、二氯乙烷、三氯乙烯、乙醚、四氢呋喃、二噁烷、苯、甲苯、氯苯、丙酮、乙酸乙酯、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺、六甲基磷酰三胺或这些溶剂的混合物。特别优选的是乙腈、苯、甲苯或甲苯和苯的混合物，或是甲苯和乙酸乙酯的混合物。反应所用的碱可以是例如三甲胺、三乙胺、N，N-二异丙基乙胺、N-甲基吗啉、N-甲基吡咯烷、N-甲基哌啶、N，N-二甲基苯胺、1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)或1，5-二氮杂双环[4.3.0]壬-5-烯(DBN)，或吡啶、4-二甲氨基吡啶、甲基吡啶、二甲基吡啶、喹啉或异喹啉。特别优选的是N，N-二异丙基乙胺和三乙胺。关于式(Ⅱ)化合物，已知下式(Ⅱ)的3，7-二氧代-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷环系与3-羟基-7-氧代-1-氮杂双环[3.2.0]庚-2-烯环系是互变异构关系，这二种环系本质上是一致的。对上述反应，每摩尔式(Ⅱ)化合物用1-3mol，优选1-1.5mol碱和1-1.3mol活性试剂。反应温度不重要，反应通常在-40至50℃，优选-20至20℃范围内进行，并且在0.5至3小时一般可定量地完成反应。反应完成后，用常规方法处理反应产物，以定量地得到活性衍生物(Ⅱ-a)。式(Ⅱ-a)化合物可不经分离就与式(Ⅲ)化合物反应。反应用上文提到的惰性有机溶剂和碱进行反应，每摩尔式(Ⅱ-a)化合物用1-2mol，优选1-1.5mol的碱和0.8-1.2mol的式(Ⅲ)化合物。反应通常在-40至50℃，优选于-20至20℃的温度范围内进行，一般在0.5至75小时可定量地完成反应。另外，式(Ⅳ)化合物可由式(Ⅱ)化合物进行一锅反应制得，也就是说，可以不把式(Ⅱ-a)的活性衍生物分离出来。在此情况下，每摩尔式(Ⅱ)化合物使用2-5mol，优选2.5-3.8mol碱。反应完成后，进行常规处理得到式(Ⅳ)粗品，使其不经纯化进行反应以脱除保护基。但是，最好是用结晶或是例如用硅胶柱色谱法纯化粗产品(Ⅳ)。必要时，由式(Ⅳ)化合物除去羟基、亚氨基和羧基的保护基可得到式(Ⅰ)化合物。为了去除保护基团，使用的方法可随保护基类型不同而改变。但可用常规方法进行。例如，加入分解溶剂;用胺盐、诸如锌汞齐、铬化合物(如氯化亚铬、甲酸亚铬)的金属和下述有机或无机酸一起进行化学还原乙酸、丙酸、盐酸、氢硫酸;或用铂或钯化合物进行催化氢化。例如，当上述式(Ⅳ)中羟基、氨基或亚氨基的保护基是芳烷氧羰基，如苄氧羰基或对硝基苄氧羰基，羧基的保护基是芳烷基，如苄基、对硝基苄基或二苯甲基时，这些保护基可用铂催化剂或钯催化剂催化氢化除去，铂催化剂如氧化铂、铂丝或铂黑，钯催化剂如钯黑、氧化钯、钯碳或氢氧化钯-碳(Pearlman催化剂)。当羧基保护基是烯丙基、烯丙基异丙烯基时，这些保护基可用钯配位体复合物催化剂催化氢化除去，这些催化剂如钯-碳、钯黑、氢氧化钯-碳、氯化钯(Ⅱ)、四(三苯膦)钯(O)、双(二亚苄基乙酮(acton)钯(O)、二[1，2-双(二苯膦)乙烷]钯、四(三苯膦)钯(O)。用于催化氢化作用的溶剂包括，例如水、甲醇、乙醇、丙醇、四氢呋喃、二噁烷、乙腈、乙酸及含水的上述有机溶剂、磷酸盐缓冲液(pH6.5至7.0)或3-(N-吗啉代)丙磺酸(MOPS)溶液(pH6.5至7.2)。在1-3atm.的氢气流中，0至40℃温度范围内进行反应，反应可在0.5至8小时内完成。当上式(Ⅳ)中的羟基、氨基、亚氨基保护基是烯丙氧羰基，羧基保护基是烯丙基时，这些保护基可在含有烯丙基俘获剂的惰性有机溶剂中通过有机可溶性钯配位体复合物催化剂的反应消除(J.Org.Chem.，Vol.47，587，1982)。可用于该反应的溶剂包括，例如丙酮、乙醚、四氢呋喃、二噁烷、乙酸乙酯、乙腈、二氯甲烷、氯仿和它们的混合物。烯丙基俘获剂可以是例如2-乙基己酸钠、2-乙基己酸钾、吡啶、哌啶。反应通常在-10℃至50℃，优选在0℃至30℃温度范围内进行，对1mol式(Ⅳ)化合物用0.01至0.5mol钯配位体复合物催化剂和0.5至5mol亲核试剂，反应一般在0.5至5小时内完成。在消除保护基的反应完成以后，式(Ⅰ)化合物可用常用处理方法，例如载于硅胶上的柱色谱法或吸附树脂如DiaionHP-29或冷冰干燥或结晶的方法分离。起始物式(Ⅱ)化合物，当其中R1是氢原子时，可由Salzmann方法获得(J.Am.Chem.Soc.，Vol.102，6161-6163，1980)，在R1是甲基的情况下，可用Shih方法(Hetercycles，Vol.21，29-40，1984)或EP272，455的方法获得。起始物式(Ⅲ)化合物可由下面流程1和流程2获得。流程1的化合物(6)和流程2的化合物(13)是已知的，其制备方法在EP182213，EP243686，和USP4，921，352中描述。式(Ⅲ)或(Ⅲ-a)的硫醇衍生物由化合物(6)或(13)得到，其制备方法在下面的实施例中叙述。Ac乙酰基Boc叔丁氧羰基Cbz苄氧羰基Et乙基Me甲基Ms甲磺酰基PMB对甲氧基苄基PNB对硝基苄基PNZ对硝基苄氧羰基TBDMS叔丁基二甲基甲硅烷基Ts对甲苯磺酰基Ph苯基E反式Z顺式Ⅰ.抗菌试验按照日本化学治疗协会(JapanSocietyofChemotherapy)的标准方法[Chemotherapy，Vol.29，76-79(1981)]，用琼脂稀释法试验抗菌活性，亚胺硫霉素用作内标物。把10mlMuellerHintonBroth倾入无菌试管，每种试验微生物用一铂接种环接种并在37℃孵育过夜。但金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)是在Tryt-icaseSoyBroth中而不是在MuellerHintonBroth中培育。把5mg各种抗菌剂溶于无菌蒸馏水中制成抗菌剂溶液，使其浓度为1mg/ml，进行一系列成倍稀释至0.25μg/ml。把1ml各种抗菌溶液倾入各培养皿并灭菌之后，加入经过灭菌和冷却的9mlMuellerHinton琼脂基质，充分混合;使之固化以制备用于最小抑制浓度(MIC)试验的琼脂片基质。把0.11ml细胞培养物倾入含有10ml缓冲型盐水明胶(BSG)溶液的无菌试管中，并使之充分混合之后，含有抗菌剂的琼脂片借助器具(stamp)用细胞悬浮液接种，在37℃下培养18小时。在观察到细胞生长后，MIC被认为是无细胞生长的最低药物浓度。结果列于下表。注Staphylococcusaureus金黄色葡萄球菌Escherichiacoil大肠杆菌Klebsiellapneumoniae肺炎杆菌Enterobactercloacae泄殖肠杆菌Serratiamarcescens沙雷氏菌Citrobacterfreundii弗氏柠檬酸菌Proteusmirabilis奇异变形杆菌Proteusvulgaris普通变形杆菌Pseudomonasaeruginoas绿脓杆菌Ⅱ.对猪的肾脱氢肽酶-Ⅰ的稳定性把300g猪肾均化并悬浮于三羟甲基氨基甲烷缓冲液(Trisbuffer)(100mMTris，50mMNaCl，0.01mMZnCl2，pH8.0)加入10%TritonX-100，在4℃搅拌24小时，以萃取DHP-Ⅰ。把上述萃取液在186，000×g超速离心1小时制得的上清液二次过滤(dia-filtered)，去除TritonX-100，加入75%饱和硫酸铵得到沉淀物。把上述沉淀物溶解于Tris缓冲液，将其快速流动负载于DEAE-Sepharose，用阴离子交换色谱法得到猪的DHP-Ⅰ。将上述DHP-Ⅰ分成1ml一份，浓度为1单位/ml，将其贮于0-70℃。用甘氨酰基脱氢苯基氨基丙酸(GDP)和亚胺硫霉素作对照化合物。按照Campbell的方法(MethodsEngymol.，19722-729，1970)，由酶的反应可观察到吸收率的降低，并测定最大水解速度。对DHP-Ⅰ的稳定性用相对于GDP水解速度的比较水解速度来表示。表2对猪肾的脱氢肽酶－I的稳定性III.毒性实验把300mg各种抗菌剂溶于无菌盐水中，浓度为200mg/ml，以4倍稀释系列在无菌试管中制备抗菌剂溶液，直至0.781mg/ml。给体重20±1g的4-5周龄ICR小鼠通过tale静脉用药0.2ml抗菌剂溶液，观察二周后，确认存活的小鼠并用概率分析方法测定LD50。雄性和雌性的数目各为5只。表3LD50(mg/Kg)</tables>本发明化合物对多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌具有良好的抗菌活性，被用作治疗和预防人体由此类细菌引起的传染病。由于本发明化合物有宽抗菌谱，它们可用作动物饲料添加剂、防腐剂，以及工业用和医用的其它灭菌剂和消毒剂。本发明的化合物可以适于非口服用药、口服用药、外用药的药物制剂形式使用。液体制剂如注射液、糖浆或乳剂;固体制剂如片剂、胶囊或粒剂;外用制剂如软膏或栓剂。剂量随患者的症状、体重、年龄、性别、制剂的类型、用药时间和次数而变化。通常对成年人来说活性成分的优选日剂量大约为5-50mg/kg，对儿童来说优选的日剂量在大约5-25mg/kg范围内，优选每日一次或一日多次用药。本发明的化合物可与DHP-Ⅰ抑制剂如Cilastatin一起用药。现在将进一步详述本发明的实施例和参考实施例。然而，应该明白这些特定的实施例决不限制本发明。在实施例及参考实施例中，对于薄层色谱，采用硅胶60F254(Merck)作为薄层板，采用紫外检测器或茚三酮色显现法、KMnO4颜色显现法作为检测方法。对于柱色谱的硅胶，采用硅胶60(Merck)，并用UV分光光度计DMS100S(Varian)测定紫外吸收。对于高速液相色谱，采用M-352(ACS)型仪器。NMR谱是在氘代二甲亚砜-d6或氘代氯仿-d1溶液中测量的，采用四甲基硅烷(TMS)作为内标物，而当在氧化氘溶液中测量时，采用2，2-二甲基-2-硅杂戊烷-5-磺酸酯(DSS)。测量是用Ac200P(200MHzBruker)型仪器进行的，所有的δ值都用ppm表示。NMR测量中所用缩写的含义表示如下s单峰DMSO-d6二甲亚砜-d6d双峰CDCl3氯仿-d1t三重峰D2O氧化氘q四重峰J偶合值br宽峰Hz赫兹dd双重双峰Acetone-d6丙酮-d6m多重峰参考实施例1(4R，5R，6S，8R)-对硝基苄基-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯参考实施例1-1向正己烷/乙酸乙酯(1/3)的100ml混合溶液中加入0.982g(2.51mmol)的(3S，4R)-3-[(1R)-(1-羟基乙基)]-4-[(R)-1-甲基-3-重氮基-3-对硝基苄氧羰基-2-氧代-丙基]-氮杂环丁烷-2-酮，加入乙酸铑(Ⅱ)二聚体为催化剂，并回流2小时。反应后，使混合物溶液减压浓缩以蒸除有机溶剂，所得浆状物质真空干燥得到0.867g(95%)(4R，5R，6S，8R)-对硝基苄基-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯。该化合物不稳定，最好立即使用。NMR(CDCl3)δ1.10(d，3H)，1.32(d，3H)，2.80(m，1H)，3.22(dd，1H)，4.20(dd，1H)，4.25(m，1H)，4.70(s，1H)，5.25(m，2H)，7.50(d，2H)，8.20(d，2H)参考实施例1-2向甲苯/乙酸乙酯(1/1)的100ml混合溶液中，加入0.982g(2.51mmol)的(3S，4R)-3-[(1R)-(1-羟基乙基)]-4-[(R)-1-甲基-3-重氮基-3-对硝基苄氧羰基-2-氧代-丙基]-氮杂环丁烷-2-酮以及作为催化剂的乙酸铑(Ⅱ)二聚体，并回流1.5小时。反应后，反应混合物采用参考实施例1-1同样的操作处理，得到0.611g(67%)(4R，5R，6S，8R)对硝基苄基-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯。参考实施例2(4R，5R，6S，8R)-烯丙基-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯参考实施例2-1向正己烷/乙酸乙酯(1/3)的120ml混合物溶液中加入0.982g(2.51mmol)的(3S，4R)-3-[(1R)-(1-羟基乙基)]-4-[(R)-1-甲基-3-重氮基-3-烯丙氧羰基-2-氧代-丙基]-氮杂环丁烷-2-酮及作为催化剂的乙酸铑(Ⅱ)二聚体，并回流2.5小时。反应后，混合物溶液减压浓缩以蒸除有机溶剂，所得的浆状形式的物质真空干燥得到0.632g(87.3%)(4R，5R，6S，8R)-烯丙基-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯。该化合物也不稳定，最好在制得后立即使用。NMR(CDCl3)δ1.10(d，3H)，1.32(d，3H)，2.81(m，1H)，3.21(dd，1H)，4.21(dd，1H)，4.23(m，1H)，4.66(d，2H)，4.69(s，1H)，5.29-6.20(m，3H)参考实施例3(5R，6S，8R)-对硝基苄基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯参考实施例3-1向140ml苯中加入7g(18.6mmol)(3S，4R)-3-[(1R)-(1-羟基乙基)]-4-[3-重氮基-3-(对硝基苄氧羰基)-2-氧代-丙基]-氮杂环丁烷-2-酮以及作为催化剂的乙酸铑(Ⅱ)二聚体，并回流2小时。反应后，混合物溶液减压浓缩以蒸除有机溶剂，向所得的残留物中加入小体积的二氯甲烷并在室温下搅拌使之溶解。随后向反应混合物中滴加入二乙醚结晶并搅拌15分钟。产生的所需物质经过滤和真空干燥后得到3.95g(61.0%)(5R，6S，8R)-对硝基苄基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯。因为该化合物不稳定，最好立即用于后续步骤。NMR(CDCl3)δ1.35(d，3H，J＝6.1Hz)，2.44(m，1H)，2.92(m，1H)，3.19(dd，1H，J＝2.0Hz，J＝7.0Hz)，4.15(m，1H)，4.30(m，1H)，4.75(s，1H)，5.28(m，2H)，7.48(d，2H，J＝8.7Hz)，8.20(d，2H，J＝8.9Hz)优选实施方案的详细描述实施例1(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[(2-甲氧亚氨基吡咯烷)-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸的(E)和(Z)异构体实施例1-1把参考实施例1中得到的1.197g(3.3mmol)(4R，5R，6S，8R)-对硝基苄基-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯加入100ml无水乙腈中，在室温下搅拌并用冰浴冷却到0℃。同样温度下，滴加750μl(4.3mmol)N，N-二异丙基乙胺，加入830μl(4.0mmol)氯代磷酸二苯基酯并搅拌1小时。然后加入750μl(4.3mmol)N，N-二异丙基乙胺，并向反应混合物中滴加实施例18-5中得到的1.36g(4.0mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲氧亚氨基-4-巯基吡咯烷的20ml无水乙腈溶液。添加后，移去冰浴，反应混合物在室温下搅拌5小时。反应后，反应混合物减压浓缩，向残留物中加入乙酸乙酯提取产物。提取液依次用水及饱和氯化钠水溶液洗涤，有机层用无水硫酸镁干燥。过滤后，将滤液减压浓缩并蒸除溶剂得到2.2g粗品。粗品用硅胶柱色谱处理(用正己烷乙酸乙酯＝14洗脱)并纯化得到0.236g(10.4%)(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲氧亚氨基吡咯烷)-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯，0.202g(8.9%)(E)-(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲氧亚氨基吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯以及0.570g(25.2%)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲氧亚氨基吡咯烷)-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的混合物。(1)Z型δ1.12(dd，6H)，2.01(m，1H)，2.80(m，1H)，3.32(dd，J＝2.4Hz，J＝6.4Hz)，3.55-3.80(m，2H)，3.75(s，3H)，3.95-4.32(m，2H)，4.35(m，1H)，4.60(m，1H)，5.20-5.60(m，5H)，7.43(d，1H，J＝6.6Hz)，7.63(d，2H，J＝8.4Hz)，7.79(d，2H，J＝8.5Hz)，8.20(dd，4H)(2)E型δ1.23(d，3H，J＝5.9Hz)，1.26(d，3H，j＝7.2Hz)，2.01(m，1H)，2.80(m，1H)，3.33(dd，1H)，3.55-3.80(m，2H)，3.81(s，3H)，3.95-4.32(m，3H)，4.31(m，1H)，4.80-5.05(m，1H)，5.20-5.60(m，4H)，6.90(m，1H)，7.65(d，2H，J＝8.5Hz)，7.80(d，2H，J＝8.9Hz)，8.20(dd，4H)实施例1-2向10ml四氢呋喃及10ml0.1M4-吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物中加入实施例1-1中得到的0.316g(0.462mmol)(E)-(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲氧亚氨基吡咯烷)-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯，并搅拌到溶解。加入0.594g10%钯/碳催化剂并在氢气流中室温下搅拌3小时。反应后滤除催化剂，滤液减压浓缩以蒸除有机溶剂。残留物用乙酸乙酯洗涤，分离，水层在10-20℃减压浓缩并过滤除去提取出的杂质。澄清的滤液经过聚合物色谱(DiaionHP-20树脂预先用甲醇和水洗涤)。在色谱过程中，首先用水洗脱除去4-吗啉丙磺酸，然后用5%含水丙酮溶液洗脱收集含所需产物的馏份。馏份合并后在10-20℃减压浓缩。残留物冻干后得到0.101g(59.2%)(E)-(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[(2-甲氧亚氨基吡咯烷)-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。NMR(D2O)δ0.96(d，3H，J＝7.2Hz)，1.08(d，3H，J＝6.3Hz)，1.60(m，1H)，2.45(m，1H)，2.92(m，1H)，3.21(m，3H)，3.63(s，3H)，3.24(m，1H)，4.02(m，2H)，4.42(m，1H)，6.83-7.40(dd，1H，J＝5.3Hz，J＝5.9Hz)实施例1-3向17ml四氢呋喃及17ml0.1M4-吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物中，加入0.521g(0.764mmol)实施例1-1中得到的(Z)-(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲氧亚氨基吡咯烷)-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯并搅拌到溶解。加入0.980g10%钯/碳催化剂并于氢气气流中室温下搅拌3小时。反应后滤除催化剂并将滤液于减压下浓缩以滤除有机溶剂。残留物用乙酸乙酯洗涤后，分离，水层在10-20℃减压浓缩，提取出的杂质过滤除去。澄清的滤液按照实施例1-2中同样的方法处理得到0.135g(47.8%)(Z)-(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[(2-甲氧亚氨基吡咯烷)-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。NMR(D2O)δ0.98(d，3H，J＝7.2Hz)，1.08(d，3H，J＝6.3Hz)，1.65(m，1H)，2.53(m，1H)，3.01-3.42(m，4H)，3.70(d，6H)，4.02(m，3H)，4.40(m，1H)，6.90and7.40(dd，1H，J＝5.2Hz，J＝5.5Hz)实施例2(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[(2-乙氧羰基甲氧亚氨基吡咯烷)-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸实施例2-1把参考实施例1中得到的1.39g(3.84mmol)(4R，5R，6S，8R)-对硝基苄基-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯加到80ml无水乙腈中，于室温下搅拌并用冰浴冷却到0℃。在同样的温度下，滴加入803μl(4.61mmol)N，N-二异丙基乙胺，加入916μl(4.42mmol)氯代磷酸二苯基酯并搅拌1小时，然后加入803μl(4.61mmol)N，N-二异丙基乙胺，再向混合物溶液中滴加入实施例19-5得到的1.58g(3.84mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-乙氧羰基甲氧亚氨基-4-巯基吡咯烷的20ml无水乙腈溶液。添加完后，移去冰浴，反应混合物在室温下搅拌4小时。反应后，将反应混合物减压浓缩，向残留物中加入乙酸乙酯以提取产物。提取物依次用水和饱和氯化钠水溶液洗涤，有机层用无水硫酸镁干燥。过滤后，滤液减压浓缩并蒸除溶剂得到2.55g粗品。粗产物进行硅胶柱色谱处理(用氯仿甲醇＝401洗脱)和纯化得到1.32g(45.5%)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-乙氧羰基羧甲氧亚氨基吡咯烷)-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的(E)及(Z)混合物。NMR(CDCl3)δ1.10(m，9H)，2.10(m，1H)，2.70(m，1H)，3.20(m，1H)，3.21(m，1H)，4.01(m，1H)，4.20(m，5H)，4.56(m，2H)，5.10-5.50(m，5H)，7.51(d，2H，J＝8.3Hz)，7.62(d，2H，J＝8.5Hz)，8.20(d，4H，J＝8.7Hz)实施例2-2向14ml四氢呋喃及14ml0.1M4-吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物中加入0.439g(0.581mmol)实施例2-1所得到的(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-乙氧羰基甲氧亚氨基吡咯烷)-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的(E)及(Z)的混合物并搅拌到溶解。加入0.280g10%钯/碳催化剂并在氢气气流中室温下搅拌3小时。反应后，滤除催化剂，滤液减压浓缩以蒸除有机溶剂。残留物用乙酸乙酯洗涤后，分离，水层于10-20℃减压浓缩，然后滤除提取出的杂质。澄清的滤液用聚合物色谱分离(DiaionHP-20树脂，预先用甲醇和水洗涤)。在色谱过程中，先用水洗脱除去4-吗啉丙磺酸然后用5%含水丙酮溶液洗脱，收集含目的产物的馏份。合并各馏份于10-20℃减压浓缩。残留物冻干后得到0.125g(48.8%)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[(2-乙氧羰基甲氧亚氨基吡咯烷)-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸的(E)和(Z)混合物。NMR(D2O)δ1.10(m，9H)，1.70(m，1H)，2.53(m，1H)，3.05-3.60(m，3H)，3.60-4.00(m，2H)，4.20(m，2H)，4.30-4.80(m，5H)，6.99-7.55(m，2H)实施例3(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N，N-二甲基氨基羰基甲氧亚氨基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸实施例3-1把参考实施例1中所得到的0.696g(1.92mmol)(4R，5S，6S，8R)-对硝基苄基-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯加到40ml无水乙腈中，于室温下搅拌并用冰浴冷却到0℃。在同样温度下，滴加入402μl(2.31mmol)N，N-二异丙基乙胺，加入458μl(2.21mmol)氯代磷酸二苯基酯并搅拌1小时。然后加入402μl(2.31mmol)N，N-二异丙基乙胺，再向混合物溶液中滴加入实施例20-5中所得的0.866g(2.11mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二甲基氨基羰基甲氧亚氨基)甲基-4-巯基吡咯烷的20ml无水乙腈溶液。添加完后，移去冰浴，反应混合物在室温下搅拌5小时。反应后，反应混合物减压浓缩，向残留物中加入乙酸乙酯以提取产物。提取物按实施例1-1同样的操作处理得到1.4g粗品。粗品用硅胶柱色谱分离(用氯仿甲醇＝401洗脱)和纯化得到0.825g(56.9%)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二甲氨基羰基甲氧亚氨基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的(E)和(Z)的混合物。NMR(Acetone-d6)δ1.20(dd，6H)，1.25(m，1H)，2.25(m，1H)，2.85(s，3H)，3.01(s，3H)，3.32(dd，1H，J＝2.6Hz，J＝6.4Hz)，3.60(m，2H)，4.01-4.40(m，3H)，4.70(m，3H)，4.80-5.20(m，1H)，5.20-5.56(m，4H)，7.46(d，2H，J＝8.5Hz)，7.80(d，2H，J＝8.6Hz)，8.20(m，4H)实施例3-2向10ml四氢呋喃及10ml0.1M4-吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物中加入0.520g(0.689mmol)实施例3-1所得的(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二甲氨基羰基甲氧亚氨基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯混合物，并搅拌到溶解。加入0.320g10%钯/碳催化剂并在氢气气流中、室温下搅拌3小时。反应后滤除催化剂，滤液减压浓缩以蒸去有机溶剂。残留物按实施例2-2同样的操作处理得到0.162g(53.5%)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N，N-二甲氨基羰基甲氧亚氨基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸的混合物。NMR(DMSO-d6)δ1.10(d，3H，J＝6.5Hz)，1.12(d，3H，J＝6.2Hz)，1.40(m，1H)，2.40(m，1H)，2.80(s，3H)，2.90(s，3H)，2.90-3.40(m，4H)，3.80-4.10(m，3H)，4.64(s，2H)，4.90(m，1H)实施例4(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[(2-羧甲氧亚氨基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸实施例4-1把参考实施例1中得到的0.627g(1.71mmol)(4R，5S，6S，8R)-对硝基苄基-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯加到70ml无水乙腈中，在室温搅拌并用冰浴冷却到0℃。在同样的温度下，滴加入320μl(1.82mmol)N，N-二异丙基乙胺，加入377μl(1.82mmol)氯代磷酸二苯基酯并搅拌1小时。然后加入320μl(1.82mmol)N，N-二异丙基乙胺，再向混合物溶液中滴加实施例21-2中得到的0.755g(1.5mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(对甲氧苄氧羰基甲氧亚氨基)甲基-4-巯基吡咯烷的20ml无水乙腈的溶液。添加完后，移去冰浴，反应混合物在室温下搅拌5小时。反应后，反应混合物减压浓缩，向残留物中加入乙酸乙酯以提取产物。提取物用实施例1-1同样的操作处理得到1.02g粗品。粗品用硅胶柱色谱分离(用氯仿甲醇＝401洗脱)和纯化得到0.647g(44.1%)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-对硝基苄氧羰基)-2-(对甲氧基苄氧羰基甲氧亚氨基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的混合物。NMR(Acetone-d6)δ1.22(dd，6H)，2.05(m，1H)，2.80(m，1H)，3.32(dd，1H，J＝2.5Hz，J＝6.4Hz)，3.60(m，1H)，3.65(s，3H)，4.01-4.20(m，4H)，4.30(m，1H)，4.60(s，2H)，5.21-5.54(m，7H)，7.60-7.80(m，6H)，8.20(m，6H)实施例4-2向12ml四氢呋喃和12ml0.1M4-吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物中，加入实施例4-1中所得的0.410g(0.484mmol)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(对甲氧苄氧羰基甲氧亚氨基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的混合物并搅拌到溶解。加入0.2g10%钯/碳催化剂并在氢气气流中室温下搅拌3小时。反应后滤除催化剂，滤液减压浓缩以蒸除有机溶剂。残留物按实施例2-2同样的操作处理得到0.09g(45%)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[(2-羧甲氧亚氨基吡咯烷)-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸的混合物。NMR(DMSO-d6)δ1.12(d，3H，J＝7.2Hz)，1.15(d，3H，J＝6.2Hz)，1.42(m，1H)，2.30(m，1H)，2.62(m，1H)，3.10(m，1H)，3.11(dd，1H，J＝2.3Hz，J＝6.3Hz)，3.20-4.20(m，4H)，4.40(m，3H)实施例5(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[(2-氨基羰基甲氧亚氨基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸实施例5-1把参考实施例1中所得到的0.714g(1.97mmol)(4R，5R，6S，8R)-对硝基苄基-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯加到40ml无水乙腈中，在室温下搅拌并用冰浴冷却到0℃。在同样的温度下，滴加入390μl(3.24mmol)N，N-二异丙基乙胺，加入445μl(2.15mmol)氯代磷酸二苯基酯并搅拌1小时。然后加入390μl(3.24mmol)N，N-二异丙基乙胺，再向混合物溶液中滴加实施例22-4中所得的0.782g(2.05mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-氨基羰基甲氧亚氨基-4-巯基吡咯烷的20ml无水乙腈溶液。添加完后，移去冰浴，反应混合物在室温下搅拌5小时。在反应后，反应混合物减压浓缩，向残留物中加入乙酸乙酯以提取产物。提取物按实施例1-1中同样的操作处理得到1.25g粗品。粗品用硅胶柱色谱(用氯仿∶甲醇＝40∶1洗脱)分离和纯化得到0.8g(56%)(E)和(Z)，(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-氨基羰基甲氧亚氨基吡咯烷)-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的混合物。NMR(CDCl3)δ1.12(d，3H，J-7.2Hz)，1.15(d，3H，J＝6.1Hz)，1.80(m，1H)，2.60(m，1H)，3.23(dd，1H，J＝2.5Hz，J＝6.4Hz)，3.50(m，2H)，3.90(m，2H)，4.22(m，1H)，4.50(m，3H)，5.10-5.45(m，5H)，5.50-6.20(m，2H)，6.80-7.05(m，1H)，7.40-7.64(m，4H)，8.20(dd，4H)实施例5-2向18ml四氢呋喃及18ml0.1M4-吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物中加入实施例5-1中所得的0.515g(0.71mmol)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-氨基羰基甲氧亚氨基吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的(E)及(Z)的混合物并搅拌到溶解。加入0.31g10%钯/碳催化剂并在氢气气流中、室温下搅拌3小时。反应后，滤除催化剂，滤液减压浓缩以蒸除有机溶剂。残留物按实施例2-2同样的操作处理得到0.17g(58.2%)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[(2-氨基羰基甲氧亚氨基吡咯烷)-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸的混合物。NMR(D2O)δ1.05(d，3H，J＝7.2Hz)，1.08(d，3H，J＝6.2Hz)，1.60(m，1H)，2.40(m，1H)，2.95(m，1H)，3.05-3.40(m，3H)，3.70-4.10(m，3H)，4.40(m，1H)，4.64(s，2H)实施例6(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N-甲氨基羰基甲氧亚氨基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸实施例6-1把参考实施例1中得到的0.601g(1.66mmol)(4R，5R，6S，8R)-对硝基苄基-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯加到40ml无水乙腈中，在室温下搅拌并用冰浴冷却到0℃。在同样温度下，滴加入348μl(2.00mmol)N，N-二异丙基乙胺，加入396μl(1.91mmol)氯代磷酸二苯基酯并搅拌1小时。然后加入348μl(2.00mmol)N，N-二异丙基乙胺，再向混合物溶液中滴加入实施例23-2中所得的0.723g(1.83mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲氨基羰基甲氧亚氨基)甲基-4-巯基吡咯烷的15ml无水乙腈溶液。添加完后，移去冰浴，反应混合物于室温下搅拌6小时。反应后，反应混合物减压浓缩，向残留物中加入乙酸乙酯以提取产物。提取物按实施例1-1同样的操作处理得到1.15g粗品。粗品用硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝40∶1洗脱)和纯化得到0.706g(57.7%)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲氨基羰基甲氧亚氨基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的(E)及(Z)混合物。NMR(CDCl3)δ1.11(d，3H，J＝7.2Hz)，1.15(d，3H，J＝6.3Hz)，1.80(m，1H)，2.60(m，1H)，2.80(d，3H)，3.22(dd，1H，J＝2.4Hz，J＝6.4Hz)，3.45(m，2H)，3.80(m，2H)，4.22(m，1H)，4.50(m，3H)，5.10-5.50(m，5H)，7.44(d，2H，J＝8.4Hz)，7.60(d，2H，J＝8.5Hz)，8.20(dd，4H)实施例6-2向17ml四氢呋喃及17ml0.1M吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物中，加入实施例6-1中所得的0.490g(0.662mmol)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲氨基羰基甲氧亚氨基吡咯烷)-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的(E)及(Z)混合物，并搅拌到溶解。加入0.30g10%钯/碳催化剂并在氢气气流中于室温下搅拌4小时。反应后滤除催化剂，滤液减压浓缩以蒸除有机溶剂。残留物按实施例2-2同样的操作处理，得到0.173g(61.3%)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N-甲氨基羰基甲氧亚氨基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸的(E)及(Z)混合物。NMR(DMSO-d6)δ1.03(d，3H，J＝7.3Hz)，1.05(d，3H，J＝6.1Hz)，1.42(m，1H)，2.42(m，1H)，2.81(d，3H)，2.91-3.39(m，4H)，3.81-4.11(m，3H)，4.65(d，2H)，4.91(m，1H)实施例7(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[(2-羟基亚氨基吡咯烷)-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸实施例7-1把参考实施例1中所得的0.975g(2.69mmol)(4R，5R，6S，8R)-对硝基苄基-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯加到80ml无水乙腈中，在室温下搅拌并用冰浴冷却到0℃。在同样的温度下，滴加入550μl(3.08mmol)N，N-二异丙基乙胺，加入613μl(2.96mmol)氯代磷酸二苯基酯并搅拌1小时。然后加入550μl(3.08mmol)N，N-二异丙基乙胺，再向混合物溶液中滴加入实施例24-6中所得的0.878g(2.70mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-羟基亚氨基-4-巯基吡咯烷的20ml无水乙腈溶液。添加完后，移去冰浴，反应混合物在室温下搅拌5小时。反应后，反应混合物减压浓缩，向残留物中加入乙酸乙酯以提取产物。提取物按实施例1-1中同样的操作处理得到0.987g粗品。粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝35∶1洗脱)和纯化得到0.756g(42.0%)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-羟基亚氨基吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的(E)和(Z)混合物。NMR(DMSO-d6)δ1.10(d，3H，J＝7.2Hz)，1.12(d，3H，J＝6.2Hz)，1.90(m，1H)，1.65(m，1H)，3.30(dd，1H)，3.52(m，1H)，3.95(m，3H)，4.22(m，1H)，4.49(m，1H)，5.01-5.50(m，5H)，7.60(d，2H，J＝8.7Hz)，7.72(d，2H，J＝8.7Hz)，8.20(d，4H)，10.8-11.2(brs，1H)实施例7-2向15ml四氢呋喃及15ml0.1M吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物中，加入实施例7-1中所得的0.470g(0.720mmol)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-羟基亚氨基吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的(E)及(Z)混合物并搅拌到溶解。加入0.240g(10%)钯/碳催化剂并在常压氢气下，于室温搅拌3小时。反应后滤除催化剂，滤液减压浓缩以蒸除有机溶剂。残留物按实施例2-2同样的操作处理，得到0.132g(52.8%)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[(2-羟基亚氨基吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸的(E)和(Z)混合物。NMR(DMSO-d6)δ1.05(d，3H，J＝7.2Hz)，1.08(d，3H，J＝6.2Hz)，1.40(m，1H)，2.40(m，1H)，2.70(m，1H)，3.10-3.30(m，3H)，3.40-3.80(m，2H)，3.80-4.10(m，2H)，10.63(brs，1H)实施例8(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸实施例8-1把参考实施例1中所得的0.804g(2.22mol)(4R，5R，6S，8R)-对硝基苄基-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯加到100ml无水乙腈中，在室温下搅拌并用冰浴冷却到0℃。在同样温度下，滴加入520μl(2.98mmol)N，N-二异丙基乙胺，加入600μl(2.89mmol)氯代磷酸二苯基酯并搅拌2小时。然后加入520μl(2.98mmol)N，N-二异丙基乙胺，再向混合物溶液中滴加入实施例25-5中所得的1.0g(2.40mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲基磺酰基)-N-(甲基亚肼基)甲基-4-巯基吡咯烷的25ml无水乙腈溶液。添加完后，移去冰浴，反应混合物在室温下搅拌72小时。反应后，反应混合物减压浓缩，向残留物中加入二氯甲烷以提取产物。提取物用水及饱和氯化钠水溶液洗涤，有机层用无水硫酸镁干燥。过滤后，滤液减压浓缩并蒸除溶剂得到1.32g粗品。粗品用硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝20∶1洗脱)和纯化得到0.88g(52.1%)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲基磺酰基-N-甲基亚肼基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的(E)和(Z)混合物。NMR(CDCl3)δ1.23(d，3H，J＝7.4Hz)，1.31(d，3H，J＝6.2Hz)，2.35(m，1H)，2.64(m，1H)，3.01(s，3H)，3.10(s，3H)，3.30(dd，1H，J＝2.6Hz，J＝6.7Hz)，3.32(m，1H)，3.50(m，1H)，3.80-4.10(m，2H)，4.24(m，2H)，4.73(m，1H)，5.13-5.22(m，4H)，7.10(m，1H)，7.43(d，2H，J＝8.5Hz)，7.60(d，2H，J＝8.7Hz)，8.20(dd，4H)实施例8-2实施例8-1所得的1.76g(2.31mmol)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的(E)及(Z)的混合物，用硅胶60F-254进行制备性薄层色谱分离(用氯仿∶甲醇＝20∶1洗脱)以分离异构体并纯化，得到0.22g(12.5%)(E)-(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯以及0.088g(5.0%)(Z)-(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯。NMR(CDCl3)δ(E)1.23(d，2H，J＝7.3Hz)，1.37(d，2H，J＝6.3Hz)，2.35(m，1H)，2.64(m，1H)，3.01(s，3H)，3.20(s，3H)，3.30(dd，1H，J＝2.7Hz，J＝6.8Hz)，3.31(m，1H)，3.51(m，1H)，4.90(m，2H)，4.23(m，2H)，4.72(m，1H)，5.10-5.50(m，2H)，7.50(d，2H，J＝8.5Hz)，7.60(d，2H，J＝8.7Hz)，8.20(d，2H，J＝8.7Hz)(Z)1.24(d，2H，J＝7.2Hz)，1.36(d，2H，J＝6.3Hz)，2.37(m，1H)，2.65(m，1H)，3.03(s，3H)，3.21(s，3H)，3.29(dd，1H，J＝2.8Hz，J＝6.9Hz)，3.40(m，2H)，4.29(m，3H)，4.89(m，2H)，5.11-5.51(m，2H)，7.50(d，2H，J＝8.5Hz)，7.61(d，2H，J＝8.7Hz)，8.21(d，2H，J＝8.6Hz)实施例8-3向12ml四氢呋喃及12ml0.1M吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物中，加入实施例8-2中所得的0.37g(0.486mmol)(E)-(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯并搅拌至溶解。加入0.27g10%钯/碳催化剂并在氢气气流中于室温搅拌15小时。反应后滤除催化剂，滤液减压浓缩以蒸除有机溶剂。残留物用乙酸乙酯洗涤后分离，水层在10-20℃减压浓缩，然后滤除提取出的杂质。澄清的滤液进行聚合物色谱分离(DiaionHP-20树脂，预先用甲醇和水洗涤)。在此过程中，先用水洗脱以除去4-吗啉丙磺酸，再用5%含水丙酮溶液洗脱，收集含所需产品的馏份。合并馏份并使其在10-20℃减压浓缩，残留物冻干后得到0.140g(64.5%)(E)-(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。NMR(DMSO-d6)δ(E)1.10(dd，6H)，1.64(m，1H)，2.45(m，1H)，2.90(m，1H)，2.99(s，3H)，3.08(s，3H)，3.20(dd，1H，J＝2.4Hz，J＝6.4Hz)，3.32(m，2H)，3.63(m，1H)，3.90(m，2H)，4.10(m，1H)实施例8-4向11ml四氢呋喃及11ml0.1M吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物中，加入实施例8-2中所得到的0.33g(0.434mmol)(Z)-(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯并搅拌到溶解。加入0.23g10%钯/碳催化剂并在氢气气流中于室温搅拌17小时。反应后滤除催化剂，滤液减压浓缩以蒸除有机溶剂。残留物用乙酸乙酯洗涤后分离，水层于10-20℃减压浓缩，然后滤除提取出的杂质。澄清的滤液按实施例8-3同样的操作处理，得到0.116g(59.8%)(Z)-(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[(2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。NMR(DMSO-d6)δ(Z)1.09(dd，6H)，1.64(m，1H)，2.46(m，1H)，2.91(m，1H)，2.98(s，3H)，3.05(s，3H)，3.19(dd，1H，J＝2.3Hz，J＝6.4Hz)，3.31(m，2H)，3.62(m，1H)，3.89(m，2H)，4.08(m，1H)实施例8-5向20ml四氢呋喃及20ml0.1M吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物中，加入实施例8-1中所得的0.88g(1.16mmol)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸的(E)和(Z)的混合物并搅拌到溶解。加入0.5g10%钯/碳催化剂并在氢气气流中于室温搅拌22小时。反应后滤除催化剂，滤液减压浓缩以蒸除有机溶剂。残留物用乙酸乙酯洗涤后分离，水层于10-20℃减压浓缩，然后滤除形成的杂质。澄清的滤液进行聚合物色谱分离(DiaionHP-20树脂，预先用甲醇及水洗涤)。在色谱过程中，首先用水洗脱以除去4-吗啉丙磺酸，再用5%含水丙酮溶液洗脱以收集含目的产物的馏份。合并馏份，在10-20℃减压浓缩。残留物冻干后得到0.30g(58.0%)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸的(E)和(Z)混合物。NMR(DMSO-d6)δ1.11(d，3H，J＝7.1Hz)，1.13(d，3H，J＝6.1Hz)，1.63(m，1H)，2.20(m，1H)，3.75(m，2H)，2.93(s，3H)，3.05(s，3H)，3.15(dd，1H)，3.30(m，2H)，3.60-3.90(m，2H)，4.10(m，1H)实施例9(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(2-吡啶基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸实施例9-1将参考实施例1中所得到的1.81g(5.0mmol)(4R，5R，6S，8R)-对硝基苄基-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯加到110ml无水乙腈中。在室温下搅拌并用冰浴冷却到0℃。在同样的温度下，滴加入1.1ml(6.31mmol)N，N-二异丙基乙胺，加入1.2ml(5.79mmol)氯代磷酸二苯基酯并搅拌2小时。然后加入1.1ml(6.31mmol)N，N-二异丙基乙胺，再向混合物溶液中滴加入实施例26-5中所得的1.9g(4.73mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(2-吡啶基亚肼基)甲基-4-巯基-吡咯烷的30ml无水乙腈溶液。添加完后，移去冰浴，反应混合物在室温下搅拌5小时。反应后，把反应混合物减压浓缩，向残留物中加入二氯甲烷以提取产物。提取物按实施例8-1同样操作处理得到2.5g粗品。粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿甲醇/＝201洗脱)和纯化，得到2.08g(55.8%)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(2-(吡啶基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的混合物。NMR(CDCl3)δ1.31(d，3H，J＝7.3Hz)，1.38(d，3H，J＝6.2Hz)，2.10(m，1H)，2.64(m，1H)，2.7(dd，1H，J＝2.6Hz，J＝6.8Hz)，3.50(m，5H)，3.75(m，1H)，4.01(m，1H)，4.12(m，2H)，4.62(m，1H)，5.05-5.50(m，5H)，6.75(m，1H)，7.10(m，2H)，7.30-7.65(m，5H)，7.90-8.35(m，5H)实施例9-2向25ml四氢呋喃及25ml0.1M吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物中，加入实施例9-1中所得的1.3g(1.82mmol)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(2-吡啶基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸的(E)和(Z)混合物并搅拌到溶解。加入0.5g10%钯/碳催化剂，并在常压氢气下于室温搅拌5小时。反应后滤除催化剂，滤液减压浓缩以蒸除有机溶剂。残留物用乙酸乙酯洗涤后分离，水层于10-20℃减压浓缩。然后通过过滤除去形成的杂质。澄清的滤液按实施例8-5同样的操作处理，得到0.422g(53.6%)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(2-吡啶基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸的混合物。NMR(DMSO-d6)δ1.04(d，3H，J＝7.2Hz)，1.06(d，3H，J＝6.2Hz)，1.64(m，1H)，2.50(m，1H)，2.90(m，1H)，3.19(dd，1H，J＝2.5Hz，J＝6.7Hz)，3.10-3.60(m，1H)，3.80(m，2H)，4.10(dd，1H)，6.70(m，1H)，7.05(d，1H，J＝8.3Hz)，7.33(d，1H，J＝5.4Hz)，7.56(m，1H)，8.03(m，1H)实施例10(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(对羧基苯基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸实施例10-1把参考实施例1中所得的0.672g(1.85mmol)(4R，5R，6S，8R)-对硝基苄基-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯加到100ml无水乙腈中，在室温下搅拌并用冰浴冷却到0℃。在同样的温度下，滴加入0.38ml(2.30mmol)N，N-二异丙基乙胺，加入0.44ml(2.12mmol)氯代磷酸二苯基酯并搅拌2小时。然后加入0.38ml(2.30mmol)N，N-二异丙基乙胺，再向混合物溶液中滴加入实施例27-3中所得的1.0g(1.77mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(对甲氧基苄氧羰基苯基亚肼基)甲基-4-巯基吡咯烷的15ml无水乙腈溶液。添加完后，移去冰浴，反应混合物在室温下搅拌10小时。反应后，反应混合物减压浓缩，向残留物中加入二氯甲烷以提取产物。提取物按实施例8-1中同样的操作处理得1.42g粗品。粗品用硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝20∶1洗脱)和纯化，得到0.855g(50.7%)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(对甲氧基苄氧羰基苯基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的混合物。NMR(CDCl3)δ1.23(d，3H，J＝7.4Hz)，1.27(d，3H，J＝6.2Hz)，2.05(m，1H)，2.70(m，1H)，3.22(dd，1H，J＝2.5Hz，J＝6.7Hz)，3.40(m，2H)，3.78(s，3H)，4.01(m，1H)，4.22(m，2H)，4.64(m，1H)，5.05-5.45(m，7H)，6.91(d，2H，J＝8.7Hz)，6.93(d，2H，J＝8.2Hz)，7.33(d，2H，J＝8.5Hz)，7.45(m，1H)，7.90(m，4H)，8.20(d，4H，J＝8.7Hz)实施例10-2向10ml四氢呋喃及10ml0.1M吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物溶液中，加入实施例10-1中所得的0.38g(0.418mmol)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(对甲氧基苄氧羰基苯基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸的混合物并搅拌到溶解。加入0.15g10%钯/碳催化剂，并在常压氢气下于室温搅拌6小时。反应后，滤除催化剂，滤液减压浓缩以蒸除有机溶剂。残留物用乙酸乙酯洗涤后分离，水层于10-20℃减压浓缩，然后滤除提取出的杂质。澄清的滤液按实施例8-5同样的操作处理，得到0.102g(51.5%)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(对羧基苯基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸的混合物。NMR(D6O)δ1.22(d，3H，J＝7.2Hz)，1.28(d，3H，J＝6.3Hz)，1.43(m，1H)，2.35(m，1H)，2.80(m，2H)，3.15(dd，1H，J＝2.5Hz，J＝6.5Hz)，3.30(m，2H)，3.61-3.85(m，2H)，4.10(m，1H)，6.90(d，2H，8.5Hz)，7.30(d，2H，8.3Hz)实施例11(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸实施例11-1把参考实施例1中所得的1.16g(3.20mmol)(4R，5R，6S，8R)-对硝基苄基-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯加到120ml无水乙腈中，在室温下搅拌并用冰浴冷却到0℃。在同样温度下，滴加入0.66ml(3.78mmol)N，N-二异丙基乙胺，加入0.72ml(3.49mmol)氯代磷酸二苯基酯并搅拌2小时。然后加入0.66ml(3.78mmol)N，N-二异丙基乙胺，再向反应混合物溶液中滴加入实施例28-4中所得的1.51g(2.91mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-(对硝基苄氧羰基)-N-甲基亚肼基甲基]-4-巯基吡咯烷的20ml无水乙腈溶液。添加后，移去冰浴，反应混合物在室温下搅拌72小时。反应后，反应混合物溶液减压浓缩，向残留物中加入二氯甲烷以提取产物。提取物按实施例8-1同样的操作处理得到2.45g粗品。粗品用硅胶柱色谱分离(用氯仿甲醇＝201洗脱)和纯化，得到1.6g(58%)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-(对硝基苄氧羰基)-N-甲基亚肼基甲基]吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸的混合物。NMR(CDCl3)δ1.12(d，3H，J＝7.3Hz)，1.18(d，3H，J＝6.3Hz)，2.10(m，1H)，2.70(m，1H)，3.10(m，4H)，3.40(m，2H)，3.75(m，1H)，4.01(m，1H)，4.22(m，1H)，4.70(m，1H)，5.05-5.45(m，6H)，7.50(d，2H，J＝8.7Hz)，7.60(d，2H，J＝8.9Hz)，8.15(d，4H)实施例11-2向30ml四氢呋喃及30ml0.1M吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物中，加入实施例11-1中所得的1.6g(1.85mmol)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-(对硝基苄氧羰基)-N-甲基亚肼基甲基]吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的混合物并搅拌到溶解。加入0.8g10%钯/碳催化剂并在常压氢气下于室温搅拌5小时。反应后，滤除催化剂，滤液减压浓缩以蒸除有机溶剂。残留物用乙酸乙酯洗涤后分离，水层于10-20℃减压浓缩，然后滤除提取出的杂质。澄清的滤液按实施例8-5同样的操作处理，得到0.325g(51.5%)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸的混合物。NMR(DMSO-d6)δ1.07(d，2H，J＝6.1Hz)，1.09(d，2H，7.2Hz)，1.62(m，1H)，2.19(m，1H)，3.05(br，s，3H)，3.15(dd，1H，J＝2.3Hz，J＝6.4Hz)，3.30(m，2H)，3.61-3.85(m，2H)，3.75(m，2H)，4.05(m，1H)实施例12(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N，N-二甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸实施例12-1把参考实施例1中所得的2.83g(7.91mmol)(4R，5R，6S，8R)-对硝基苄基-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯加到260ml无水乙腈中，在室温下搅拌并用冰浴冷却到0℃。在同样温度下，滴加入1.61ml(9.22mmol)N，N-二异丙基乙胺，加入1.76ml(8.50mmol)氯代磷酸二苯基酯并搅拌2小时。然后加入1.61ml(9.22mmol)N，N-二异丙基乙胺，再向反应混合物溶液中滴加实施例29-2中所得的2.7g(7.66mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二甲基亚肼基)甲基-4-巯基吡咯烷的35ml无水乙腈溶液。添加完后，移去冰浴，反应混合物溶液在室温下搅拌7小时。反应后，将反应混合物溶液减压浓缩，向残留物中加入二氯甲烷以提取产物。提取物按实施例8-1同样的操作处理得到3.5g粗品。粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿丙酮＝201洗脱)和纯化，得到3.2g(58.8%)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的混合物。NMR(CDCl3)δ1.13(d，3H，J＝7.3Hz)，1.17(d，3H，J＝6.3Hz)，2.01(m，1H)，2.60(m，1H)，2.75(s，6H)，3.23(dd，1H，J＝2.7Hz，J＝6.8Hz)，3.27(m，1H)，3.64(m，1H)，4.01(m，1H)，4.22(m，2H)，4.55(m，1H)，5.10-5.50(m，4H)，7.55(d，2H，J＝8.8Hz)，7.62(d，2H，J＝8.7Hz)，8.20(m，4H)实施例12-2向30ml四氢呋喃及20ml0.1M吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物中，加入实施例12-1中所得的1.0g(1.43mmol)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的混合物并搅拌到溶解。加入0.45g10%钯/碳催化剂并在常压氢气下于室温搅拌6小时。反应后，滤除催化剂，滤液减压浓缩以蒸除有机溶剂。残留物用乙酸乙酯洗涤后分离，水层于10-20℃减压浓缩，然后滤除提取出的杂质。澄清的滤液按实施例8-5中同样的操作处理，得到0.22g(40.0%)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N，N-二甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸的混合物。NMR(DMSO-d6)δ1.01(m，6H)，1.59(m，1H)，2.10(m，1H)，2.40(m，1H)，2.64(m，1H)，2.70(s，6H)，2.84(m，1H)，3.10-3.40(m，3H)，3.60-4.13(m，3H)实施例13(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N，N-二乙基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸实施例13-1把参考实施例1中所得的1.12g(3.09mmol)(4R，5R，6S，8R)-对硝基苄基-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯加到100ml无水乙腈中，在室温下搅拌并用冰浴冷却到0℃。在同样温度下，滴加入0.74ml(4.25mmol)N，N-二异丙基乙胺，加入0.70ml(3.4mmol)氯代磷酸二苯基酯并搅拌2小时。然后加入0.74ml(4.25mmol)N，N-二异丙基乙胺，再向混合物溶液中滴加入实施例30-2中所得的1.24g(3.26mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二乙基亚肼基)甲基-4-巯基吡咯烷的20ml无水乙腈溶液。添加完后，移去冰浴，反应混合物在室温下搅拌5小时。反应后，将反应混合物减压浓缩，向残留物中加入二氯甲烷以提取产物。提取物按实施例8-1同样的操作处理得到2.5g粗品。粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿丙酮＝201洗脱)和纯化得到1.35g(60.2%)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二乙基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的混合物。NMR(CDCl3)δ1.00(t，6H)，1.24(d，3H，J＝7.3Hz)，1.32(d，3H，H＝6.3Hz)，2.01(m，1H)，2.58(m，1H)，3.10(q，4H)，3.23(dd，1H，J＝2.6Hz，J＝6.8Hz)，3.37(m，2H)，3.63(m，1H)，4.01(m，1H)，4.20(m，2H)，4.33(m，1H)，5.10-5.30(m，4H)，7.50(d，2H，J＝8.8Hz)，7.61(d，2H，J＝8.8Hz)，8.20(m，4H)实施例13-2向30ml四氢呋喃及20ml0.1M吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物中，加入实施例13-1中所得的1.0g(1.38mmol)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二乙基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的(E)和(Z)混合物并搅拌到溶解。加入0.4g10%钯/碳催化剂，并在常压氢气下于室温搅拌2小时。反应后滤除催化剂，滤液减压浓缩以蒸除有机溶剂。残留物按实施例12-2同样的操作处理得到0.26g(46%)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N，N-二乙基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸的混合物。NMR(DMSO-d6)δ0.93(t，6H)，1.13(m，6H)，1.53(m，1H)，2.10(m，1H)，2.40(m，1H)，2.64(m，1H)，2.84(m，1H)，3.01(q，4H)，3.10-3.35(m，3H)，3.61-4.15(m，3H)实施例14(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-[N-甲基-N-(N′，N′-二甲基氨磺酰基)亚肼基甲基]吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸实施例14-1把参考实施例1中所得的0.468g(1.29mmol)(4R，5R，6S，8R)-对硝基苄基-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯加到50ml无水乙腈中，室温下搅拌并用冰浴冷却到0℃。在同样的温度下，滴加入0.271ml(1.55mmol)N，N-二异丙基乙胺，加入0.30ml(1.45mmol)氯代磷酸二苯基酯并搅拌2小时。然后加入0.271ml(1.55mmol)N，N-二异丙基乙胺，再向混合物溶液中滴加实施例31-4中所得的0.69g(1.55mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-甲基-N-(N′，N′-二甲基氨磺酰基亚肼基]甲基-4-巯基吡咯烷的10ml无水乙腈溶液。添加完后，移去冰浴，反应混合物在室温下搅拌36小时。反应后，将反应混合物减压浓缩，向残留物中加入乙酸乙酯以提取产物。提取物按实施例8-1同样的操作处理得到1.2g粗品。粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿甲醇＝401洗脱)和纯化，得到0.152g(50.2%)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-甲基-N-(N′，N′-二甲基氨磺酰基)亚肼基甲基]吡咯烷-4-基-硫基-4-]甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的混合物。NMR(CDCl3)δ1.12(d，3H，J＝7.4Hz)，1.31(d，3H，J＝6.3Hz)，2.10(m，1H)，2.70(m，1H)，2.90(s，6H)，3.10(s，3H)，3.23(dd，1H，J＝2.6Hz，J＝6.9Hz)，3.37(m，2H)，3.63(m，1H)，4.20(m，2H)，4.70(m，1H)，5.10-5.30(m，4H)，7.50(m，2H)，7.59(d，2H，J＝8.7Hz)，8.20(m，4H)实施例14-2向15ml四氢呋喃及10ml0.1M吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物中，加入实施例14-1中所得的0.5g(0.63mmol)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-甲基-N-(N′，N′-二甲基氨磺酰基)亚肼基甲基]吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的混合物并搅拌到溶解。加入0.25g10%钯/碳催化剂并在常压氢气下于室温搅拌3小时。反应后滤除催化剂，滤液减压浓缩以蒸除有机溶剂。残留物按实施例12-2同样的操作处理后得到0.16g(53.1%)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[(2-[N-甲基-N-(N′，N′-二甲基氨磺酰基)亚肼基甲基]吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸的(E)及(Z)混合物。NMR(D6O)δ1.01(dd，6H)，1.59(m，1H)，2.10(m，1H)，2.40(m，1H)，2.60(m，1H)，2.84(m，1H)，2.90(s，6H)，3.10(s，3H)，3.10-3.40(m，3H)，3.60-4.10(m，3H)实施例15(5R，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸实施例15-1把参考实施例3-1中所得的3.49g(10.0mmol)(5R，6S，8R)-对硝基苄基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯加到200ml无水乙腈中，在室温下搅拌并用冰浴冷却到0℃。在同样的温度下，滴加入2.26ml(14.0mmol)N，N-二异丙基乙胺，加入2.49ml(12.0mmol)氯代磷酸二苯基酯并搅拌2小时。然后向反应混合物溶液中滴加入实施例25-5中所得的4.65g(11.1mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基)甲基-4-巯基吡咯烷的80ml无水乙腈溶液，并加入2.26ml(13.0mmol)N，N-二异丙基乙胺。添加完后，移去冰浴，反应混合物在室温下搅拌20小时。反应后，反应混合物冷却到0℃并搅拌，过滤沉淀并用水和少量丙酮洗涤。沉淀在真空干燥器中干燥，得到5.0g(67.0%)(E)和(Z)(5R，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的混合物。NMR(DMSO-d6)δ1.10(d，3H，J＝6.3Hz)，2.03(m，1H)，2.64(m，1H)，3.01(s，3H)，3.28(s，3H)，3.32(m，3H)，3.82-4.20(m，4H)，4.58(m，1H)，5.02-5.50(m，3H)，7.62(m，4H)，8.20(m，4H)实施例15-2把实施例15-1中所得的5.0g(6.70mmol)(5R，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的(E)及(Z)混合物经过硅胶制备性薄层色谱处理(用氯仿∶甲醇＝20∶1洗脱)以分离异构体并纯化，得到0.7g(14.0%)(E)-(5R，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯及0.2g(4.0%)(Z)-(5R，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯。NMR(DMSO-d6)δ(E)1.10(d，3H，J＝6.3Hz)，2.03(m，1H)，2.62(m，1H)，3.02(s，3H)，3.29(s，3H)，3.32(s，3H)，3.82-4.19(m，4H)，4.58(m，1H)，5.01-5.48(m，3H)，7.62(m，4H)，8.20(m，4H)(E)1.10(d，3H，J＝6.2Hz)，2.03(m，1H)，2.62(m，1H)，3.02(s，3H)，3.25(s，3H)，3.33(m，3H)，3.82-4.20(m，4H)，4.59(m，1H)，5.02-5.46(m，3H)，7.63(m，4H)，8.21(m，4H)实施例15-3向15ml四氢呋喃及8ml0.1M吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物中，加入实施例15-2中所得的0.5g(0.67mmol)(E)-(5R，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲基磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯并搅拌到溶解。加入0.2g10%钯/碳催化剂并在常压氢气下于室温搅拌5小时。反应后滤除催化剂，滤液减压浓缩以蒸除有机溶剂。滤掉提取出的杂质后，滤液用乙酸乙酯洗涤，水层于10-20℃减压浓缩以彻底蒸除残留的有机溶剂。澄清的滤液进行聚合物色谱处理(DiaionHP-20树脂，预先用甲醇及水洗涤)。在色谱过程中，先用水洗脱以除去4-吗啉丙磺酸，然后用5%含水丙酮溶液洗脱以收集含目的产物的馏份。合并馏份并于10-20℃减压浓缩。残留物冻干后得到0.12g(41.3%)(E)-(5R，6S，8R，2′S，4′S)-3-[(2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。NMR(DMSO-d6)δ1.05(d，2H，J＝6.0Hz)，1.62(m，1H)，2.40(m，1H)，2.65(m，1H)，2.91(s，3H)，2.92(m，1H)，3.04(s，3H)，3.22(m，3H)，3.60(m，1H)，3.82(m，2H)，4.03(m，1H)实施例15-4向8ml四氢呋喃和4ml0.1M吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物中加入实施例15-2中所得的0.2g(0.26mmol)(Z)(5R，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯并搅拌到溶解。加入0.1g10%钯/碳催化剂并在氢气气流中室温搅拌6小时。反应后滤除催化剂，滤液减压浓缩以蒸除有机溶剂。过滤除去提取出的杂质，滤液按实施例15-3同样的操作处理，得到0.08g(35.6%)(Z)-(5R，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。NMR(DMSO-d6)δ1.04(d，2H，J＝6.1Hz)，1.62(m，1H)，2.40(m，1H)，2.64(m，1H)，2.90(s，3H)，3.03(s，3H)，3.21(m，3H)，3.59(m，1H)，3.81(m，2H)，4.01(m，1H)实施例15-5向150ml四氢呋喃及50ml0.1M吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物中，加入实施例15-2中所得的5.0g(6.7mmol)(5R，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯并搅拌到溶解。加入2.0g10%钯/碳催化剂并在常压氢气中于室温搅拌5小时。反应后滤除催化剂，滤液减压浓缩以蒸除有机溶剂。过滤除去提取bm的杂质后，滤液按实施例15-3同样的操作处理，得到1.24g(42.7%)(5R，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。NMR(DMSO-d6)δ1.05(d，2H，J＝6.0Hz)，1.62(m，1H)，2.39(m，1H)，2.64(m，1H)，2.90(s，3H)，3.00(s，3H)，3.25(m，3H)，3.59-3.83(m，3H)，4.02(m，1H)实施例16(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-[1-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基乙基)吡咯烷]-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸实施例16-1把参考实施例中所得的1.520g(4.19mmol)(4R，5R，6S，8R)-对硝基苄基-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯溶于180ml无水乙腈中，在室温下搅拌并用冰浴冷却到0℃。在同样温度下，滴加入0.737ml(4.23mmol)N，N-二异丙基乙胺，加入0.877ml(4.23mmol)氯代磷酸二苯基酯并搅拌2小时。然后在反应混合物中加入0.737ml(4.23mmol)N，N-二异丙基乙胺，并滴加实施例32-5中所得的1.80g(4.18mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[1-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基)甲基]-4-巯基吡咯烷的25ml无水乙腈溶液。添加完后移去冰浴，反应混合物在室温下搅拌24小时。反应后，反应混合物减压浓缩，向残留物中加入乙酸乙酯以提取产物。提取物按实施例8-1同样的操作处理得到3.25g粗品。粗品进行硅胶柱色谱处理(用氯仿∶甲醇＝30∶1洗脱)和纯化，得到1.74g(53.4%)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(1-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基乙基)吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的混合物。NMR(CDCl3)δ1.18(d，3H)，1.30(d，3H)，2.02(s，3H)，2.03(m，1H)，2.65(m，1H)，2.83(m，3H)，3.29(dd，1H，J＝6.8Hz，J＝2.3Hz)，3.38(m，2H)，3.70(m，1H)，4.10(dd，1H，J＝6.8Hz，J＝2.6Hz)，4.15(m，1H)，4.60(t，1H)，5.05-5.50(m，4H)，7.52(d，2H，J＝8.7Hz)，7.60(d，2H，J＝8.7Hz)，8.20(m，4H)实施例16-2向20ml四氢呋喃及25ml0.1M吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物中加入实施例16-1中所得的0.68g(0.878mmol)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-[1-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基乙基)吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯并搅拌到溶解。加入0.3g10%钯/碳催化剂并在常压氢气下于室温搅拌5小时。反应后，滤除催化剂，滤液用少量0.5M吗啉丙磺酸洗涤并减压浓缩以蒸除有机溶剂。残留物用乙酸乙酯洗涤后分离，水层在低于20℃下减压浓缩，然后滤除形成的杂质。澄清的滤液按实施例8-5同样的操作处理，得到0.218g(53.9%)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(1-N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基乙基)吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸的混合物。NMR(CDCl3)δ1.10(m，6H)，1.62(m，1H)，2.01(s，3H)，2.40(m，1H)，2.70(m，1H)，2.80(s，3H)，2.98(s，3H)，3.10(dd，1H，J＝6.4Hz，J＝2.5Hz)，3.12-3.64(m，3H)，3.80-4.02(m，2H)，4.10(dd，1H，J＝9.3Hz，J＝2.4Hz)实施例17(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N-乙磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸实施例17-1把参考实施例1中所得的2.84g(7.83mmol)(4R，5R，6S，8R)-对硝基苄基-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-3，7-二酮-2-羧酸酯加到250ml无水乙腈中，在室温下搅拌并用冰浴冷却到0℃。在同样温度下，滴加入1.38ml(7.92mmol)N，N-二异丙基乙胺，加入1.64ml(7.91mmol)氯代磷酸二苯基酯并搅拌2小时。然后在混合物溶液中加入1.38ml(7.92mmol)N，N-二异丙基乙胺，并滴加实施例33-4中所得的3.3g(7.67mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-乙磺酰基-N-甲基亚肼基)甲基-4-巯基吡咯烷的50ml无水乙腈溶液。添加完后移去冰浴，反应混合物在室温下搅拌48小时。反应后，将反应混合物减压浓缩，向残留物中加入二氯甲烷以提取产物。提取物按实施例8-1同样的操作处理得到5.35g粗品。粗品用硅胶柱色谱分离(氯仿丙酮＝301洗脱)和纯化，得到3.42g(57.5%)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-乙磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸酯的混合物。NMR(CDCl3)δ1.30(m，9H)，2.10(m，1H)，2.70(m，1H)，3.10(m，1H)，3.50(dd，1H，J＝4.4Hz，J＝11Hz)，3.80(m，1H)，4.05(m，1H)，4.12(m，2H)，4.70(m，1H)，5.10-5.50(m，4H)，7.05(m，1H)，7.45(d，2H，J＝8.1Hz)，7.62(d，2H，J＝8.7Hz)，8.20(m，4H)实施例17-2向20ml四氢呋喃及20ml0.5M吗啉丙磺酸缓冲液(pH7.0)的混合物中加入实施例17-1中所得的0.70g(0.90mmol)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-对硝基苄基-3-[1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-乙磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸并搅拌到溶解。加入0.280g10%钯/碳催化剂并在常压氢气下于室温搅拌7小时。反应后滤除催化剂，滤液减压浓缩以蒸除有机溶剂。残留物用乙酸乙酯洗涤后分离，水层于20℃减压浓缩，然后滤除提取出的杂质。澄清的滤液按实施例8-5同样的操作处理，得到0.227g(54.5%)(E)和(Z)(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N-乙磺酰基-N-甲基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基-硫基]-4-甲基-6-(1-羟基乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸的混合物。NMR(DMSO-d6)δ1.10(m，6H)，1.13(m，3H)，1.67(m，1H)，2.44(m，1H)，2.79(m，1H)，3.05(s，3H)，3.15(m，2H)，3.18(dd，1H，J＝2.3Hz，J＝6.3Hz)，3.52(m，2H)，4.10(dd，1H，J＝2.2Hz，J＝9.3Hz)，7.15(d，1H，J＝5.3Hz)实施例18(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲氧亚氨基-4-巯基吡咯烷实施例18-12.6g(31.14mmol)甲氧基胺盐酸盐加到180ml水中并搅拌至溶解后，滴加入1.92g(18.12mmol)碳酸氢钠并在室温下搅拌1小时。反应后，向反应混合物溶液中滴加入10.56g(25.8mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲酰基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-吡咯烷的360ml甲醇溶液。添加完后，将反应混合物溶液搅拌过夜。反应后，混合物溶液减压浓缩以蒸除溶剂，然后用乙酸乙酯提取，提取液用水和饱和氯化钠溶液洗涤几次后，有机层用无水硫酸镁干燥。过滤，然后把滤液减压浓缩得到11.5g残留物。残留物用硅胶柱色谱分离(用正己烷乙酸乙酯＝51洗脱)和纯化，得到7.45g(66.9%)(E)-(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲氧亚氨基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷及1.7g(15%)Z-(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲氧亚氨基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷。NMR(Acetone-d6)(1)E型δ0.03(s，6H)，0.85(s，9H)，2.10(m，2H)，3.50(m，2H)，3.75(s，3H)，4.55(m，2H)，5.22(m，2H)，7.38(d，1H)，7.65(d，2H)，8.21(d，2H)(2)Z型δ0.03(s，6H)，0.85(s，9H)，2.10(m，2H)，3.65(m，2H)，3.85(s，3H)，4.60(m，2H)，5.30(dd，2H)，7.38(d，1H)，7.65(d，2H)，8.21(d，2H)实施例18-2向100ml四氢呋喃中加入实施例18-1中所得的4.85g(11.09mmol)(E)-(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲氧亚氨基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷并在室温下搅拌至溶解。然后滴加入13.2ml(13.2mmol)1M氟化四丁铵(四氢呋喃溶液)并在室温下搅拌30分钟。反应后，把混合物溶液减压浓缩以蒸除溶剂，残留物溶于乙酸乙酯中并依次用水及氯化钠洗涤。分离出有机层后，用无水硫酸镁干燥、过滤，然后浓缩滤液得到5.5g残留物。残留物用硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝10∶1洗脱)和纯化，得到3.36g(93.8%)(E)-(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲氧亚氨基-4-羟基吡咯烷。NMR(Acetone-d6)δ2.03-2.40(m，2H)，3.45-3.73(m，2H)，3.79(s，3H)，4.23(m，1H)，4.43(m，1H)，7.39(d，1H)，7.70(d，2H)，8.23(d，2H)实施例18-3向150ml二氯甲烷中加入由实施例18-2所得的3.36g(11.07mmol)(E)-(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲氧基亚氨基-4-羟基吡咯烷并搅拌溶解。然后加入3.4ml(24.4mmol)三乙胺和1.12ml(14.4mmol)甲磺酰氯并于室温搅拌30分钟。反应后，减压浓缩混合物溶液以蒸去溶剂，并用乙酸乙酯萃取残留物，再依次用水和氯化钠洗涤。分离出有机层后，将其用无水硫酸镁干燥，过滤，然后浓缩滤液，得到5.7g残留物。将残留物进行硅胶柱色谱分离(用正己烷∶乙酸乙酯＝1.5∶1洗脱)并纯化，得到3.96g(94.9%)(E)-(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲氧基亚氨基-4-甲磺酰氧基吡咯烷。NMR(Acetone-d6)δ2.39-2.64(m，2H)，3.19(s，3H)，3.74(m，3H)，3.75-4.05(m，2H)，4.62(m，1H)，5.25(m，3H)，7.41(d，1H)，7.64(d，2H)，8.22(d，2H)实施例18-4将从实施例18-3中得到的3.13g(8.68mmol)(E)-(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲氧基亚氨基-4-甲磺酰氧基吡咯烷溶于200ml二甲基甲酰胺和甲苯(二甲基甲酰胺∶甲苯＝1∶1)的溶液中。加入16.2g(14.2mmol)乙酸钾后回流3小时，减压浓缩反应溶液并将残留物用乙酸乙酯萃取。用水和氯化钠洗涤有机层并用无水硫酸镁干燥分离出的有机层并过滤。减压浓缩滤液，得到3.51g残留物。将残留物进行硅胶柱色谱分离(用正己烷∶乙酸乙酯＝1.5∶1洗脱)并纯化，得到2.4g(72.5%，E∶Z＝3∶2)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲氧基亚氨基-4-乙酰基硫代吡咯烷。NMR(Acetone-d6)δ2.32(s，3H)，2.52-2.82(m，2H)，3.14(m，1H)，3.75(s，3Hx3/5)，3.81(s，3Hx2/5)，3.94-4.10(m，2H)，4.40(m，1H)，5.22(m，2H)，6.82(dd，1Hx2/5)，7.41(d，1Hx3/5)，7.62(d，2H)，8.21(d，2H)实施例18-5将实施例18-4中所得的2.4g(6.29mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲氧基亚氨基-4-乙酰基吡咯烷溶于70ml甲醇中。用冰浴将反应溶液冷至0℃后，滴加入8.4ml2N氢氧化钠水溶液并搅拌3分钟。就在此之后，于同一温度下，用饱和柠檬酸将反应溶液的pH调至4.5并减压浓缩以蒸去有机溶剂。向残留物中加入乙酸乙酯以从溶液中萃取产物，用水和饱和氯化钠洗涤，分离有机层并用无水硫酸镁干燥。过滤后，浓缩滤液，得到3.0g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用正己烷∶乙酸乙酯＝2∶1洗脱)并纯化，得到1.4g(65.6%)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲氧基亚氨基-4-巯基吡咯烷。NMR(Acetone-d6)δ2.01(m，1H)，2.65(m，1H)，3.19-3.62(m，2H)，3.76(s，3Hx3/5)，3.81(s，3Hx2/5)，3.85-4.20(m，1H)，4.40-5.02(m，1H)，5.23(m，2H)，6.90(dd，1Hx2/5)，7.44(d，1Hx3/5)，7.65(d，2H)，8.22(d，2H)实施例19(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-乙氧羰基甲氧基亚氨基-4-巯基吡咯烷实施例19-1当将1.97g(18.58mmol)碳酸氢钠和2.46g(34.4mmol)羟胺氢氯化物盐加入380ml水中后，搅拌溶解(反应液A)。在另一容器中将14g(34.2mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲酰基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷加入400ml甲醇中并溶解(反应液B)。将溶液A加入溶液B中后，将反应混合物于室温搅拌20小时，过滤沉淀物，并减压浓缩滤液。向残留物中加入30%甲醇(aq)后，搅拌20分钟，过滤沉淀物。合并上述两种沉淀物并真空干燥，得到14.18g(98.9%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-羟基亚氨基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷。NMR(Acetone-d6)δ0.10(d，6H)，0.89(m，9H)，2.15-2.40(m，1H)，2.82(m，1H)，3.52(m，2H)，4.55(m，2H)，5.23(m，2H)，6.78(m，1Hx1/3)，7.40(m，1Hx2/3)，7.68(d，2H)，8.21(d，2H)实施例19-2向450ml丙酮中加入由实施例19-1得到的9.38g(22.16mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-羟基亚氨基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷并搅拌溶解。然后加入15.31g(110.8mmol)碳酸钾和4.91ml(44.32mmol)溴乙酸乙酯并于室温回流3天。反应后，减压浓缩混合物溶液以蒸除溶剂，将残留物溶于水和乙酸乙酯并用饱和柠檬酸溶液将反应液调至pH5.5。之后，过量乙酸乙酯加入反应液并摇振，依次用水和氯化钠洗涤混合物溶液，用无水硫酸镁干燥有机层，过滤，然后浓缩滤液，得到13.5g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用正己烷∶乙酸乙酯＝2.5∶1洗脱)并纯化，得到8.83g(78.2%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-乙氧羰基甲氧基亚氨基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷。NMR(Acetone-d6)δ0.03(d，6H)，0.83(s，9H)，1.12(t，3H)，2.07(m，2H)，3.38-3.60(m，2H)，4.20(q，2H)，4.30-4.65(m，3H)，5.22(m，2H)，6.79(m，1Hx1/3)，7.41(d，1Hx2/3)，7.50(m，2H)，8.20(d，2H)实施例19-3向120ml四氢呋喃中加入由实施例19-2所得的8.08g(15.86mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-乙氧羰基甲氧基亚氨基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷并搅拌至溶解。然后滴加入19.8ml(19.8mmol)1M氟化四丁铵(四氢呋喃溶液)并于室温搅拌30分钟。反应后，减压浓缩混合物溶液以蒸除溶剂，用乙酸乙酯萃取残留物并用无水硫酸镁干燥。向反应溶液中滴加5.27ml(39.65mmol)三乙胺和1.85ml(23.9mmol)甲磺酰氯，移去冰浴后，于室温搅拌1小时。反应后，减压浓缩混合物溶液以蒸除溶剂，并用乙酸乙酯萃取残留物。依次用水和饱和氯化钠水溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥有机层，过滤，然后减压浓缩，得到8.4g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1.5洗脱)。过滤后，减压浓缩滤液并将残留物溶于160ml二氯甲烷，用冰浴冷至0℃并纯化，得到5.84g(77.8%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-乙氧羰基甲氧基亚氨基-4-甲磺酰氧基吡咯烷。NMR(Acetone-d6)δ1.10(m，3H)，2.44(m，2H)，2.80(m，2H)，3.20(s，3H)，3.64-4.01(m，2H)，4.12(q，2H)，4.51-4.72(m，3H)，5.21-5.42(m，3H)，7.01(dd，1Hx1/3)，7.58(d，1Hx2/3)，7.63(d，2H)，8.21(d，2H)实施例19-4在300ml乙腈溶液中溶解由实施例19-3得到的3.31g(8.68mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-乙氧羰基甲氧基亚氨基-4-甲磺酰吡咯烷。加入5.64g(49.4mmol)乙酸钾后，回流3小时，减压浓缩反应液并用乙酸乙酯萃取残留物。用水和氯化钠洗涤有机层并用无水硫酸镁干燥分离的有机层并过滤。减压浓缩滤液，得到3.51g残留物。将此残留物进行硅胶柱色谱分离(用正己烷∶乙酸乙酯＝1.5∶1洗脱)并纯化，得到4.16g(72.8%)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-乙氧羰基甲氧基亚氨基-4-乙酰基硫代吡咯烷。NMR(Acetone-d6)δ1.10(m，3H)，2.01(m，1H)，2.30(s，3H)，2.70(m，1H)，3.20-3.62(m，2H)，3.92-4.22(m，4H)，4.50-4.62(m，2H)，5.25(s，2H)，6.92(dd，1Hx1/3)，7.54(d，1Hx2/3)，7.64(d，2H)，8.23(d，2H)实施例19-5将由实施例19-4得到的4.16g(9.18mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-乙氧羰基甲氧基亚氨基-4-乙酰基硫代吡咯烷溶于50ml乙醇中。用冰浴将反应溶液冷至0℃后，滴加入6ml2N氢氧化钠水溶液并于0℃搅拌3分钟。之后，用饱和柠檬酸将反应液的pH调至3.5并减压浓缩以蒸除有机溶剂。用乙酸乙酯萃取残留物，用水和饱和氯化钠洗涤有机层，并用无水硫酸镁干燥。过滤后，减压浓缩滤液，得到5.78g残留物。将残留物进行硅胶柱色谱分离(用正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1洗脱)并纯化，得到3.83g(75%)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-乙氧羰基甲氧基亚氨基-4-巯基吡咯烷。NMR(Acetone-d6)δ1.12(m，3H)，2.03(m，1H)，2.65(m，1H)，3.25-3.75(m，2H)，3.95-4.25(m，2H)，4.43-4.70(m，2H)，5.30(s，2H)，6.98(dd，1Hx1/3)，7.51(d，1Hx2/3)，7.65(d，2H)，8.21(d，2H)实施例20(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二甲基氨基羰基甲氧基亚氨基)甲基-4-巯基吡咯烷实施例20-1将1.85g(3.63mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-乙氧羰基甲氧基亚氨基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷加入30ml丙酮中并搅拌溶解。于室温下，滴加入2.8ml2N氢氧化钠水溶液并搅拌3小时，并于同一温度下，用饱和柠檬酸将溶液的pH值调至2.0。分离后用水和饱和氯化钠洗涤该层数次，用无水硫酸镁干燥有机层，过滤，然后减压浓缩滤液。减压干燥所生成的固体物质1.73g(99%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-羧基甲氧基亚氨基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ0.03(d，6H)，0.81(s，9H)，2.10(m，2H)，3.50(m，2H)，4.38(m，1H)，4.58(m，3H)，5.20(m，2H)，6.80(m，1Hx1/3)，7.40(d，1Hx2/3)，7.50(d，2H)，8.19(d，2H)实施例20-2将实施例20-1所得的4.13g(8.58mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-羧基甲氧基亚氨基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷加入70ml四氢呋喃中并用冰浴冷至0℃。然后滴加入1.56ml(11.19mmol)三乙胺和0.93ml(10.35mmol)氯甲酸乙酯并于同一温度搅拌30分钟。滴加入0.93ml(10.3mmol)50%二甲胺水溶液，移去冰浴并于室温搅拌1小时。反应后，减压浓缩反应混合物，并用乙酸乙酯萃取。依次用水和饱和氯化钠水溶液洗涤有机层。分离后，用无水硫酸镁干燥有机层，过滤并浓缩，得到4.14g(95%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二甲氨基羰基甲氧基亚氨基)甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷粗品。此粗品不需纯化就可用于下一个反应。NMR(CDCl3)δ0.03(s，6H)，0.80(s，9H)，2.03(m，2H)，2.95(d，6H)，3.50(m，2H)，4.30-4.75(m，4H)，5.20(m，2H)，6.80(m，1Hx1/3)，7.50(d，1Hx2/3)，8.19(d，2H)实施例20-3将从实施例20-2所得的4.3g(8.46mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二甲氨基羰基甲氧基亚氨基)甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷加入70ml四氢呋喃中，并滴加入10.5ml(10.5mmol)1M氟化四丁铵(四氢呋喃溶液)于室温搅拌30分钟。反应后，减压浓缩反应混合物，并用乙酸乙酯萃取。用无水硫酸镁干燥有机层并过滤，减压浓缩，得到3.29g粗品。将此粗品溶于70ml二氯甲烷中。用冰浴将反应液温度调至0℃后，滴加入2.9ml(21.02mmol)三乙胺和0.98ml(12.66mmol)甲磺酰氯，移去冰浴，升温至室温。在同一温度下，搅拌1小时后，减压浓缩反应混合物，并用乙酸乙酯萃取。依次用水和饱和氯化钠水溶液洗涤有机层。分离后用无水硫酸镁干燥有机层，并过滤和浓缩，得到5.6g残留物。将此残留物进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝20∶1洗脱)并纯化，得到3.4g(85%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二甲氨基羰基甲氧基亚氨基)甲基-4-甲磺酰氧基吡咯烷。NMR(Acetone-d6)δ1.80-2.20(m，2H)，2.80-3.05(d，6H)，3.09(s，3H)，3.50-3.70(m，2H)，4.50-4.80(m，3H)，5.10(m，1H)，5.20(m，2H)，6.90(dd，1Hx1/3)，7.50(d，1Hx2/3)，7.65(d，2H)，8.21(d，2H)实施例20-4将从实施例20-3中所得的1.55g(32.84mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二甲氨基羰基甲氧基亚氨基)甲基-4-甲磺酰氧基吡咯烷溶于100ml乙腈中。加入1.1g(96.3mmol)硫代乙酸钾并回流4小时后，进行如实施例19-4的同样操作，得到1.2g粗品。减压浓缩此粗品溶液得到3.51g残留物。将残留物进行硅胶柱色谱分离(用丙酮∶乙酸乙酯＝1∶9洗脱)并纯化，得到0.82g(55%)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二甲氨基羰基甲氧基亚氨基)甲基-4-乙酰基硫代吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.05(m，2H)，2.12(s，3H)，2.90(d，6H)，3.55(m，1H)，3.95(m，2H)，4.50-4.80(m，3H)，5.19(s，2H)，6.80(d，1Hx1/3)，7.50(d，1Hx8/3)，8.18(d，2H)实施例20-5将实施例20-4所得的0.68g(0.503mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二甲氨基羰基甲氧基亚氨基)甲基-4-乙酰基吡咯烷溶于30ml甲醇中并用冰浴冷至0℃。滴加入1.5ml2N氢氧化钠水溶液并搅拌3分钟。就在此之后，于同一温度下，用饱和柠檬酸将反应溶液的pH值调至4.2。减压浓缩反应混合物，进行如实施例18-5的同样操作，得到0.82g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝30∶1洗脱)并纯化，得到0.524g(85%)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二甲氨基羰基甲氧基亚氨基)甲基-4-巯基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.0(m，2H)，2.40-2.60(m，2H)，2.82(s，6H)，3.32(m，1H)，3.95(m，2H)，4.44(m，1H)，4.62(m，2H)，5.10(m，2H)，7.42(d，2H，J＝8.6Hz)，8.59(d，2H，J＝8.1Hz)实施例21(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(对甲氧基苄氧羰基甲氧基亚氨基)甲基-4-巯基吡咯烷实施例21-1将6.6g(13.7mmol)实施例20-1所得的(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(羧基甲氧基亚氨基)甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷的150mlN，N-二甲基甲酰胺溶液加入反应混合物中，剧烈搅拌下加入4.9g(35.45mmol)碳酸钾和2.3g(14.7mmol)对甲氧基苄基氯。对同一温度下将反应混合物搅拌1天后，用高真空泵减压浓缩，然后用乙酸乙酯萃取。用水和饱和氯化钠水溶液洗涤该萃取溶液后，用无水硫酸镁干燥有机层并过滤，然后减压浓缩滤液，得到6.04g(73.3%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(对甲氧基苄氧羰基甲氧基亚氨基)甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ0.03(d，6H)，0.80(s，9H)，2.00(m，2H)，3.50(m，2H)，3.80(s，3H)，4.40(m，1H)，4.60(m，3H)，5.10(m，2H)，5.20(m，2H)，6.83(d，1Hx7/3)，7.23(d，2H)，7.50(m，1Hx8/3)，8.19(d，2H)实施例21-2用实施例20的同样操作处理实施例21-1所得的(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(对甲氧基苄氧羰基甲氧基亚氨基)甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷，得到期望的产物(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(对甲氧基苄氧羰基甲氧基亚氨基)甲基-4-巯基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ1.80(t，1H)，2.02(m，2H)，2.39-2.90(m，1H)，3.30-3.70(m，2H)，3.78(s，3H)，4.00(m，1H)，4.42-4.64(m，2H)，4.70-5.05(m，1H)，5.15(m，4H)，7.00(d，1Hx2/3)，7.56(d，1Hx1/3)，8.22(d，4H)实施例22(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-氨基羰基甲氧基亚氨基-4-巯基吡咯烷实施例22-1将实施例20-1中所得的4.29g(8.91mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-羧基甲氧基亚氨基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷溶于100ml四氢呋喃中并用冰浴冷至0℃。然后滴加入1.61ml(11.6mmol)三乙胺和1.02ml(10.7mmol)氯甲酸乙酯并于同一温度搅拌1小时。加入2ml28%氨水，移去冰浴并于室温搅拌1小时。反应后，减压浓缩反应混合物，然后用乙酸乙酯萃取，依次用水和饱和氯化钠水溶液洗涤萃取液后，用无水硫酸镁干燥有机层并过滤，然后减压浓缩滤液，得到6.7g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝20∶1洗脱)并纯化，得到3.25g(76%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-氨基羰基甲氧基亚氨基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ0.03(d，6H)，0.83(s，9H)，1.70-2.15(m，2H)，3.46(m，2H)，4.35-4.65(m，4H)，5.20(m，2H)，6.60(d，1Hx1/3)，7.49(d，1Hx8/3)，4.35-8.20(d，2H)实施例22-2将实施例22-1中所得的2.52g(5.26mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-氨基羰基甲氧基亚氨基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷溶于80ml四氢呋喃。然后滴加入6.29ml(6.29mmol)1M氟化四丁铵(四氢呋喃溶液)并于室温搅拌30分钟。反应后减压浓缩反应混合物，将残留物溶于乙酸乙酯(100ml×3)并用无水硫酸镁干燥。然后减压浓缩。将残留物溶于80ml二氯甲烷并用冰浴冷至0℃，滴加入1.46ml(10.84mmol)三乙胺和0.53ml(6.81mmol)甲磺酰氯，除去冰浴并于室温搅拌1小时。反应后减压浓缩混合物溶液，用乙酸乙酯萃取并依次用水和盐水洗涤。分离出有机层后，将其用无水硫酸镁干燥并过滤，然后浓缩滤液，得到2.8g残留物。将残留物进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝25∶1洗脱)并纯化，得到1.56g(66.9%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-氨基羰基甲氧基亚氨基-4-甲磺酰氧基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.01-2.80(m，2H)，3.03(s，3H)，3.70(m，1H)，4.01(m，1H)，4.42-4.70(m，3H)，5.20(m，3H)，6.62(d，1Hx1/3)，7.49(d，1Hx8/3)，8.20(d，2H)实施例22-3将实施例22-2中所得的1.28g(2.89mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-氨基羰基甲氧基亚氨基-4-甲磺酰氧基吡咯烷溶于100ml乙腈。然后加入0.825g(7.23mmol)乙酸钾并回流4小时。反应后，减压浓缩混合物溶液，并用实施例19-4的同样操作处理残留物，得到2.2g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝25∶1洗脱)并纯化，得到1.0g(81.7%)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-氨基羰基甲氧基亚氨基-4-乙酰基硫代吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.03(m，1H)，2.28(s，3H)，2.60(m，1H)，3.34(m，1H)，3.98(m，2H)，4.43(m，H)，5.19(s，2H)，6.01-6.43(m，2H)，6.70(d，1Hx1/3)，7.50(d，1Hx8/3)，8.19(d，2H)实施例22-4将实施例22-3中所得1g(2.36mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-氨基羰基甲氧基亚氨基-4-乙酰基硫代吡咯烷溶于50ml甲醇和10ml四氢呋喃的混合物中并用冰浴冷至0℃。滴加入2.4ml2N氢氧化钠后搅拌3分钟。用饱和柠檬酸水溶液将反应液的pH调至3.5。减压浓缩反应溶液，用乙酸乙酯萃取残留物，然后用实施例19-1的同样操作处理，得到0.95g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝18∶1洗脱)并纯化，得到0.77g(85.6%)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-氨基羰基甲氧基亚氨基-4-巯基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ1.60-2.00(m，2H)，2.40(m，2H)，3.20-3.60(m，2H)，3.90(m，2H)，4.40(m，2H)，5.09(m，1H)，5.12(s，2H)，5.85-6.80(m，2H)，6.80(d，1Hx1/3)，7.42(d，1Hx8/3)，8.05(d，2H)实施例23(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲基氨基羰基甲氧基亚氨基)甲基-4-巯基吡咯烷实施例23-1向用冰浴冷至0℃的90ml四氢呋喃中加入5.31g(11.03mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-羰基甲氧基亚氨基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷并搅拌溶解。加入2ml(14.36mmol)三乙胺和1.27ml(13.28mmol)氯甲酸乙酯并将反应混合物溶液于同一温度搅拌30分钟。然后移去冰浴加入1.07ml(14.3mmol)40%甲胺水溶液并搅拌1小时。反应后，减压浓缩该混合物溶液，然后用乙酸乙酯萃取。用实施例20-2的同样操作处理萃取液，得到5.3g(97.2%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲基氨基羰基甲氧基亚氨基)甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷。此产物无需纯化即可用于下一个反应。NMR(CDCl3)δ0.03(s，6H)，0.80(s，9H)，2.05(m，2H)，2.92(d，3H)，3.48(m，2H)，4.29-4.72(m，4H)，5.21(m，2H)，6.80(m，1Hx1/3)，7.51(m，1Hx8/3)，8.20(d，2H)实施例23-2用实施例20的同样操作处理实施例23-1所得的(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲基氨基羰基甲氧基亚氨基)甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷，得到(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲基氨基羰基甲氧基亚氨基)甲基-4-巯基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.10(m，1H)，2.55(m，1H)，2.60(d，3H)，3.20-3.70(m，2H)，4.05(m，1H)，4.42(d，2H)，4.50-4.80(m，1H)，5.32(d，2H)，7.01-7.50(m，1H)，7.70(d，2H)，8.22(d，2H)实施例24(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-羟基亚氨基-4-巯基吡咯烷实施例24-1在用冰浴冷至0℃的200ml二氯甲烷中溶解19.9g(61.36mmol)(E)-1-(对硝基苄氧羰基)-4-羟基-L-脯氨酸甲基酯。加入11.12ml(79.78mmol)三乙胺和4.99ml(64.45mmol)甲磺酰氯并移去冰浴，于室温搅拌3小时。反应后，加入200ml水，剧烈振动，从有机层分离出水层。向水层中加入250ml二氯甲烷并剧烈搅拌以萃取产物。将此有机层与先前的有机层合并并依次用水和盐水洗涤。再分离出有机层，用无水硫酸镁干燥并过滤，然后减压浓缩滤液，得到24.45g(99%)粗品(E)-1-(对硝基苄氧羰基)-4-甲磺酰-L-脯氨酸甲酯。此物质无需纯化即可用于下一个反应。NMR(CDCl3)δ2.02(m，1H)，2.35(m，1H)，3.01(s，3H)，3.50-3.70(m，2H)，3.60(s，3H)，4.10(m，1H)，5.20(s，2H)，5.22(m，1H)，7.43(d，2H)，8.15(d，2H)实施例24-2将2.16g(19.46mmol)无水氯化钙加入30ml无水乙醇后，搅拌并分散该混合物溶液，用冰浴冷至0℃，并加入1.07g(28.28mmol)氢硼化钠(溶液A)。在同一温度搅拌后，将实施例24-1所得2.85g(7.08mmol)(E)-1-(对硝基苄氧羰基)-4-甲磺酰基-L-脯氨酸甲酯的11ml无水乙醇溶液滴加入溶液A中。移去冰浴后加入此反应混合物溶液并于室温搅拌3小时，加入饱和柠檬酸溶液以除去过量的氢硼化钠并减压浓缩。用乙酸乙酯萃取残留物并依次用水和盐水洗涤。分离出有机层后，将其用无水硫酸镁干燥和过滤，然后浓缩滤液，得到2.59g(7.7%)几乎是纯的物质(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-羟甲基-4-甲磺酰氧吡咯烷。此物质无需纯化即可用于下一个反应。NMR(CDCl3)δ2.03(m，1H)，2.32(m，1H)，3.02(s，3H)，3.50-4.20(m，5H)，5.19(s，2H)，5.21(m，1H)，7.22(d，2H)，8.15(d，2H)实施例24-3将298μl(3.49mmol)草酰氯溶解在用于冰浴冷至-10℃的10ml无水二氯甲烷中，将反应混合物浴液冷至-78℃。然后滴加入454μl(6.40mmol)无水二甲基亚砜，并于同一温度搅拌10分钟，再滴加入实施例24-2所得的1.09g(2.91mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-羟甲基-4-甲磺酰氧基吡咯烷的5ml无水二氯甲烷溶液。加入后，将溶液于-60℃搅拌30分钟，并加入2.03ml(11.64mmol)二异丙基乙胺，移去干冰浴使自然升温至室温。于室温，将此溶液搅拌1小时，减压浓缩，用乙酸乙酯萃取残留物，依次用水和盐水洗涤。分离有机层后，将其用无水硫酸镁干燥并过滤，然后浓缩滤液，得到1.3g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝40∶1洗脱)并纯化，得到0.95g(87.7%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲酰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.10-2.60(m，2H)，3.01(d，3H)，3.60-4.01(m，2H)，4.45(m，1H)，5.19(m，1H)，5.22(s，2H)，7.43(d，2H)，8.15(d，2H)，9.50(d，1H)实施例24-4向10ml水中加入86.8ml(1.25mmol)碳酸氢钠和164mg(1.55mmol)羟胺氢氯化物盐后，再加入实施例24-3所得442mg(1.19mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲酰基-4-甲磺酰吡咯烷的10ml乙醇溶液，然后于室温搅拌1.5小时。减压浓缩反应溶液并用乙酸乙酯萃取残留物。用水和盐水洗涤有机层并用无水硫酸镁干燥分离的有机层并过滤。减压浓缩640mg所得粗品，得到350mg残留物。将残留物进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝25∶1洗脱)并纯化，得到350mg(75.9%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-羟基-4-甲磺酰氧基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.01-2.90(m，2H)，3.00(d，3H)，3.65(m，1H)，3.95(m，1H)，4.63(m，1H)，5.20(m，3H)，6.80(d，1Hx1/3)，7.15(d，1Hx2/3)，7.50(d，2H)，8.15(d，2H)实施例24-5在10ml乙腈中溶解实施例24-4所得的255mg(0.66mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-羟基亚氨基-4-甲磺酰氧基吡咯烷。当加入188mg(1.65mmol)硫代乙酸钾并于室温回流2小时后，减压浓缩以蒸除有机溶剂。用乙酸乙酯萃取残留物，用水和盐水洗涤，分离有机溶剂并用无水硫酸镁干燥。过滤后，浓缩滤液，得到118mg粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝50∶1洗脱)并纯化，得到87.1mg(36%)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-羟基亚氨基-4-乙酰基硫代吡咯烷。NMR(CDCl3)δ1.80(m，1H)，2.60(m，1H)，3.30(m，1H)，4.0(m，2H)，4.5-5.0(s，1H)，5.20(s，2H)，6.75，7.30(d，dd，1H)，7.60(d，2H)，8.20(d，2H)，10.8-11.0(m，1H)实施例24-6用冰浴将甲醇和2ml四氢呋喃溶液冷至0℃后，将实施例24-5所得100mg(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-羟基亚氨基-4-乙酰基硫代吡咯烷加入其中并搅拌溶解，将0.32ml2N氢氧化钠溶液加入并于同一温度搅拌3分钟，并用饱和柠檬酸将溶液的pH值调至3.5。减压浓缩反应溶液并将残留物用乙酸乙酯萃取。依次用水和盐水洗涤有机层，用无水硫酸镁干燥分离的有机层并过滤。减压浓缩滤液，得到101mg粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶乙酸甲酯＝30∶1洗脱)并纯化，得到79mg(89.3%)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-羟基亚氨基-4-巯基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.01(m，1H)，2.30(d，2H)，2.71(m，2H)，3.21-3.59(m，2H)，4.01(m，1H)，4.91-5.01(m，1H)，5.31(s，2H)，7.71(d，2H)，8.20(d，2H)，10.01(m，1H)实施例25(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲磺酰-N-甲基亚肼基)甲基-4-巯基吡咯烷实施例25-1向200ml二氯甲烷加入8.16g(19.97mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲酰基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷后，加入1.5ml(28.20mmol)甲基肼并搅拌2小时。反应后，用200ml水洗涤混合物溶液并用无水硫酸钠干燥有机层并过滤，然后减压浓缩滤液并进行真空干燥，得到8.7g(99.7%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲基亚肼基)甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ0.02(d，6H)，0.81(s，9H)，1.95-2.10(m，2H)，2.75(s，3H)，3.5(m，2H)，4.39(br，s，1H)，4.59(m，1H)，5.20(m，2H)，7.49(d，2H)，8.16(d，2H)实施例25-2向用冰浴冷至0℃的150ml四氢呋喃中加入由实施例25-1所得的8.7g(19.93mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲基亚肼基)甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷。然后滴加入27ml(27.0mmol)1M氟化四丁基铵(四氢呋喃溶液)并搅拌30分钟。移去冰浴后于室温搅拌1小时，减压浓缩混合物溶液，并将200ml二氯甲烷加入残留物中，再用水和盐水洗涤。分离出有机层后，将其用无水硫酸钠干燥并过滤，然后浓缩滤液，得到7.5g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝10∶1洗脱)并纯化，得到5.8g(90.2%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲基亚肼基)甲基-4-羟基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.10(m，1H)，2.56(m，1H)，2.73(s，3H)，3.58(m，2H)，4.44(brs，1H)，4.62(m，1H)，5.19(m，2H)，7.49(d，2H)，8.18(d，2H)实施例25-3向100ml二氯甲烷中加入实施例25-2所得的5.8g(17.97mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲基亚肼基)甲基-4-羟基吡咯烷并加入5.5ml(39.5mmol)三乙胺和3.17ml(40.96mmol)甲磺酰氯并于室温搅拌6小时。反应后，用水洗涤混合物溶液并用无水硫酸钠干燥，过滤，然后减压浓缩滤液，得到7.6g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝20∶1洗脱)并纯化，得到6.12g(71%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基)甲基-4-甲磺酰氧基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.40(m，2H)，2.83(s，3H)，2.94(s，3H)，3.04(m，3H)，3.63(m，1H)，3.89(m，1H)，4.70(m，2H)，5.19(s，2H)，5.21(m，1H)，7.40(d，2H)，8.16(d，2H)实施例25-4在150ml无水乙腈中溶解实施例25-3所得的5g(10.44mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基)甲基-4-甲磺酰吡咯烷。加入1.67g(4.62mmol)乙酸钾后，回流4小时，减压浓缩反应混合物，加入二氯甲烷并溶解，用无水硫酸钠干燥。减压浓缩滤液，得到7.7g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1.5洗脱)并纯化，得到3.0g(62.6%)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基)甲基-4-乙酰基硫代吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.10(m，1H)，2.64(m，1H)，2.98(s，3H)，3.16(s，3H)，3.42(m，1H)，4.04(m，1H)，4.62(m，2H)，5.23(s，2H)，7.10(m，1H)，7.52(d，2H)，8.11(d，2H)实施例25-5在用冰浴冷至0℃的80ml甲醇中加入实施例25-4所得的1.5g(3.27mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲磺酰-N-甲基亚肼基)甲基-4-乙酰基硫代吡咯烷并搅拌至溶解，滴加入3.3ml2N氢氧化钠并搅拌2分钟。然后于同一温度下，用饱和柠檬酸将反应溶液的pH值调至4.0，减压浓缩以蒸出有机溶剂。将残留物溶于二氯甲烷并萃取，用水洗涤萃取液。用无水硫酸钠干燥有机层。过滤后，减压浓缩滤液，真空干燥产出的结晶，得到1.0g(73.4%)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲磺酰-N-甲基亚肼基)甲基-4-巯基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.05(m，1H)，2.81-3.03(m，6H)，3.41-3.75(m，3H)，4.60-4.80(m，2H)，5.10(m，2H)，7.52(dd，2H)，8.20(m，2H)实施例26(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-N-(2-吡啶基亚肼基)甲基-4-巯基吡咯烷实施例26-1将4.9g(11.99mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲酰基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷加入100ml二氯甲烷后，加入1.37g(12.55mmol)2-亚肼基吡啶并搅拌4小时。反应后，用水洗涤所得的有机层并用无水硫酸钠干燥，过滤，然后减压浓缩滤液，得到6.8g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1洗脱)并纯化，得到4.9g(81.8%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-N-(2-吡啶基亚肼基)甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ0.03(d，6H)，0.83(s，9H)，2.19(m，2H)，3.52(m，2H)，4.42(m，1H)，4.63(m，1H)，5.19(m，2H)，6.72(m，1H)，7.01-7.30(m，2H)，7.31-7.60(m，3H)，7.90-8.20(m，2H)，9.20(brs，1H)实施例26-2向100ml用冰浴冷至0℃的四氢呋喃中加入在实施例26-1中所得的4.9g(9.8mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-N-(2-吡啶基亚肼基)甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷并于室温搅拌至溶解。然后滴加入13.01ml(13.0mmol)1M氟化四丁基铵(四氢呋喃溶液)并搅拌30分钟。移去冰浴后，将混合物溶液于室温搅拌1小时。减压浓缩混合物溶液，加入100ml二氯甲烷并搅拌溶解，然后用实施例25-2的同一操作处理，得到7.1g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝10∶1洗脱)并纯化，得到3.67g(97.1%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-N-(2-吡啶基亚肼基)甲基-4-羟基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.20(m，2H)，3.64(m，2H)，4.39(m，1H)，4.75(m，1H)，5.20(m，2H)，6.72(m，1H)，6.90-7.19(m，2H)，7.15-7.60(m，3H)，7.89-8.14(m，3H)，9.01(br，s，1H)实施例26-3向100ml二氯甲烷中加入由实施例26-2所得的3.67g(9.52mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-N-(2-吡啶基亚肼基)甲基-4-羟基吡咯烷并搅拌溶解。然后加入2.9ml(20.9mmol)三乙胺和0.9ml(11.63mmol)甲磺酰氯并于室温搅拌1小时。反应后，用水洗涤混合物溶液并用无水硫酸钠干燥有机层并过滤，然后浓缩滤液，得到5.1g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝20∶1洗脱)并纯化，得到3.9g(88.4%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-N-(2-吡啶基亚肼基)甲基-4-甲磺酰氧基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.35-2.80(m，2H)，3.75(m，1H)，4.02(m，1H)，4.80(m，1H)，5.22(m，3H)，6.80(m，1H)，7.05(m，2H)，7.40-7.60(m，3H)，7.90-8.42(m，4H)实施例26-4向100ml无水乙腈和5ml二甲基甲酰胺的溶液中加入由实施例26-3中所得的3.9g(8.4mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-N-(2-吡啶基亚肼基)甲基-4-甲磺酰基吡咯烷并搅拌溶解。加入2.11g(18.5mmol)硫代乙酸钾后，回流7小时，减压浓缩反应溶液并加入二氯甲烷至溶解，用无水硫酸钠干燥并过滤。减压浓缩滤液，得到5.3g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用正己烷∶乙酸乙酯＝2∶1洗脱)并纯化，得到2.87g(76.9%)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-N-(2-吡啶基亚肼基)甲基-4-乙酰基硫代吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.05(m，1H)，2.32(s，3H)，3.41(m，1H)，4.05(m，2H)，4.62(m，1H)，5.20(m，2H)，6.74(m，1H)，7.12(m，2H)，7.38-7.62(m，3H)，7.89-8.23(m，3H)，8.98(m，1H)实施例26-5向用冰浴冷至0℃的100ml甲醇中加入由实施例26-4所得的2.8g(6.31mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-N-(2-吡啶基亚肼基)甲基-4-乙酰基硫代吡咯烷并搅拌溶解。滴加入6.31ml2N氢氧化钠并搅拌3分钟。在同一温度下，用饱和柠檬酸将反应液的pH值调至4.2并减压浓缩以蒸除有机溶剂。将残留物溶于二氯甲烷并用水洗涤，分离有机溶剂并用无水硫酸钠干燥。过滤后，减压浓缩滤液，得到4.3g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝30∶1洗脱)并纯化得到1.9g(75%)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-N-(2-吡啶基亚肼基)甲基-4-巯基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ1.70-2.20(m，3H)，3.30-3.90(m，2H)，4.52-5.40(m，4H)，6.59-7.15(m，3H)，7.20-7.62(m，3H)，7.80-8.40(m，4H)实施例27(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-N-(对甲氧基苄氧基羰基苯基亚肼基)甲基-4-巯基吡咯烷实施例27-1将5.16g(12.63mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲酰基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷加入100ml二氯甲烷中并搅拌溶解后，加入2.092g(13.75mmol)4-亚肼基苯甲酸和3.5ml(25.1mmol)三乙胺并于室温搅拌15小时。反应后，用100ml水洗涤混合物溶液，用饱和柠檬酸将有机层的pH值调至5.0。用水和饱和氯化钠水溶液洗涤该混合溶液后，用无水硫酸钠干燥有机层并过滤，然后减压浓缩滤液。干燥混合物溶液直至产出结晶，再真空干燥，得到5.0g(73.0%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-N-(4-羧基苯基亚肼基)甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ0.03(d，6H)，0.82(s，9H)，2.01(m，2H)，3.21(m，2H)，4.39(m，1H)，4.45(m，1H)，5.05(m，2H)，6.75(d，2H)，7.30(m，2H)，7.70(m，3H)，7.98(d，1H)，9.10(d，1H)实施例27-2将由实施例27-1所得的5.0g(9.21mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-N-(4-羧基苯基亚肼基)甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷加入30ml二甲基甲酰胺中并搅拌溶解。然后加入2.54g(18.4mmol)1M碳酸钾和1.729g(11.04mmol)对甲氧基苄基氯并升温至50℃。在同一温度下搅拌混合物溶液4小时，加入150ml二氯甲烷并剧烈振动，用水(100ml×3)洗涤此混合物溶液。分离有机层后，将其用无水硫酸钠干燥并过滤，然后浓缩滤液，得到6.7g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用正己烷∶乙酸乙酯＝2∶1洗脱)并纯化，得到3.8g(62.3%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-N-(4-甲氧基苄氧基羰基苯基亚肼基)甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ0.03(d，6H)，0.82(s，9H)，2.01-2.40(m，2H)，3.50(m，2H)，3.80(s，3H)，4.43(m，1H)，4.64(m，1H)，5.20(m，4H)，6.90(dd，4H)，7.40(dd，4H)，7.90(m，2H)，8.20(m，1H)实施例27-3用实施例25中的同样操作处理由实施例27-2所得酯化合物，得到所要的产物(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-N-(4-甲氧基苄氧基羰基苯基亚肼基)甲基-4-巯基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ1.95-2.10(m，2H)，3.20-3.80(m，2H)，3.80(s，3H)，4.50-4.90(m，2H)，5.20(m，4H)，6.90(m，4H)，7.25-7.50(m，4H)，7.90(m，3H)，8.19(m，2H)实施例28(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-(对硝基苄氧羰基)-N-甲基亚肼基]甲基-4-巯基吡咯烷实施例28-1当实施例25-1所得的8.7g(19.93mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲基亚肼基)甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷加入200ml二氯甲烷中后，再加入4.72g(21.89mmol)氯甲酸4-硝基苄基酯和3.9ml(27.96mmol)三乙胺并于室温搅拌24小时。用水洗涤反应混合物，用无水硫酸钠干燥有机层并过滤，然后减压浓缩滤液。将残留物进行硅胶柱色谱分离(用正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1洗脱)并纯化，得到6.62g(54%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲氧基亚氨基甲基-4-叔丁基甲基甲硅烷氧基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ0.03(d，6H)，0.82(s，9H)，2.07(m，2H)，3.11(d，3H)，3.52(m，2H)，4.40(m，1H)，4.75(m，1H)，5.10-5.40(m，4H)，7.50(m，4H)，8.10(m，4H)实施例28-2向用冰浴冷至0℃的50ml四氢呋喃中加入实施例28-1所得的5.31g(8.62mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-(对硝基苄氧羰基)-N-甲基亚肼基]甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷并搅拌溶解。然后滴加入11.5ml(11.5mmol)1M氟化四丁铵(四氢呋喃溶液)并搅拌30分钟。移去冰浴后，于室温将混合物溶液搅拌1小时。反应后，减压浓缩混合物溶液，并向残留物中加入二氯甲烷。用实施例25-2的同样操作处理反应混合物溶液，得到5.8g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶丙酮＝20∶1洗脱)并纯化，得到2.3g(53.2%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-(对硝基苄氧羰基)-N-甲基亚肼基]甲基-4-羟基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.20(m，2H)，3.29(d，3H)，3.60(m，2H)，4.50(m，1H)，4.80(m，1H)，5.10-5.30(m，4H)，7.20(m，4H)，8.10(m，4H)实施例28-3向100ml二氯甲烷中加入由实施例28-2所得的2.3g(4.58mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-(对硝基苄氧羰基)-N-甲基亚肼基]甲基-4-羟基吡咯烷并搅拌溶解。然后加入1.4ml(10.1mmol)三乙胺和0.4ml(5.55mmol)甲磺酰氯并于室温搅拌1小时。反应后，用实施例25-3的同样操作处理此混合物溶液，得到2.7g粗品。将此粗品溶于100ml无水乙腈中并加入0.732g(6.43mmol)硫代乙酸钾，并回流5小时。反应后，减压浓缩该混合物溶液并加入100ml二氯甲烷，用无水硫酸镁干燥，过滤，然后浓缩滤液，得到2.6g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用正己烷∶乙酸乙酯＝1∶2洗脱)并纯化，得到1.8g(70.3%)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-(对硝基苄氧羰基)-N-甲基亚肼基]甲基-4-乙酰基硫代吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.10(m，1H)，2.30(s，3H)，2.62(m，1H)，3.20(s，3H)，3.40(m，1H)，4.03(m，2H)，4.63(m，1H)，5.20(m，2H)，5.30(s，2H)，7.01(m，1H)，7.44(m，4H)，8.14(m，4H)实施例28-4用冰浴将70ml甲醇和30ml四氢呋喃的混合溶剂冷至0℃并加入由实施例28-3所得的1.8g(3.21mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-(对硝基苄氧羰基)-N-甲基亚肼基]甲基-4-乙酰基硫代吡咯烷并搅拌溶解，再加入3.2ml2N氢氧化钠溶液并搅拌3分钟。然后将反应混合物的pH值调至4.0并减压浓缩。将残留物溶于100ml二氯甲烷中并用水洗涤，用无水硫酸镁干燥有机层并过滤。减压浓缩滤液并真空干燥产出的结晶，得到1.51g(90.7%)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-(对硝基苄氧羰基)-N-甲基亚肼基]甲基-4-巯基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.03(m，2H)，3.12(d，3H)，3.30(m，2H)，4.54(m，2H)，5.20(m，4H)，7.54(m，4H)，8.19(m，4H)实施例29(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二甲基亚肼基)甲基-4-巯基吡咯烷实施例29-1室温下，当5.72g(14.0mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲酰基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷加入150ml二氯甲烷中后，再将4.31ml(30.8mmol)三乙胺和1.22g(16.8mmol)二甲基肼-氢氯化物加入并搅拌3小时。反应后，用水洗涤混合物溶液并用无水硫酸钠干燥有机层，过滤、然后减压浓缩滤液，得到3.2g残留物。向残留物中加入用冰浴冷至0℃的150ml四氢呋喃，再滴加入12.14ml(12.14mmol)1M氟化四丁铵(四氢呋喃溶液)并搅拌40分钟。移去冰浴后，将混合物溶液于室温搅拌1.5小时，用水和饱和氯化钠洗涤，用无水硫酸钠干燥有机层。过滤后，减压浓缩滤液，得到6.8g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶丙酮＝2∶1洗脱)并纯化得到4.21g(89.5%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二甲基亚肼基)甲基-4-羟基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ1.92-2.60(m，2H)，2.70(s，6H)，3.58(m，2H)，4.42(br，s，1H)，4.62(m，1H)，5.19(m，2H)，7.42(d，2H，J＝8.6HZ)，7.17(d，2H，J＝8.5Hz)实施例29-2用实施例26的同一操作处理实施例29-1所得的(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二甲基亚肼基)甲基-4-羟基吡咯烷，得到产物(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二甲基亚肼基)甲基-4-羟基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.01(m，1H)，2.61(m，1H)，2.75(s，6H)，3.40(m，2H)，4.50(m，1H)，5.20(m，3H)，7.40(d，2H，J＝8.7Hz)，8.19(m，2H)实施例30(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二乙基亚肼基)甲基-4-巯基吡咯烷实施例30-1将5.72g(14.00mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲酰基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷加入150ml二氯甲烷中并于室温下搅拌，再加入4.3ml(30.8mol)三乙胺和2.09g(16.8mmol)二乙基肼氢氯化物，搅拌4小时。反应后，减压浓缩混合物溶液，然后用乙酸乙酯萃取。用水和饱和氯化钠水溶液洗涤萃取液数次后，用无水硫酸镁干燥有机层并过滤，然后减压浓缩滤液，得到7.2g残留物。将残留物进行硅胶柱色谱分离(用正己烷∶乙酸乙酯＝2∶1洗脱)并纯化，得到5.6g(83.3%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二乙基亚肼基)甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ0.03(s，6H)，0.80(s，9H)，1.01(t，6H)，1.85-2.15(2，2H)，3.05(q，4H)，3.23(m，2H)，4.40(m，1H)，4.55(m，1H)，5.18(m，2H)，7.44(d，2H，J＝8.9Hz)，8.15(d.2H，J＝8.1Hz)实施例30-2用实施例26的同样分离操作处理由实施例30-1所得的(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二乙基亚肼基)甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷，得到所要的产物(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N，N-二乙基亚肼基)甲基-4-巯基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ1.00(m，6H)，2.01(m，1H)，2.50(m，2H)，3.08(q，4H)，3.20-3.60(m，2H)，4.50(m，1H)，5.20(m，1H)，7.44(m，2H)，8.17(m，2H)实施例31(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-甲基-N-(N′，N′-二甲基氨磺酰)亚肼基]甲基-4-巯基吡咯烷实施例31-1将6.4g(14.66mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-甲基亚肼基)甲基-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷加入80ml二氯甲烷中后，再滴加入5.1ml(36.59mmol)三乙胺和2.3ml(21.42mmol)二甲基氨磺酰氯并回流6小时。反应后，减压浓缩混合物溶液，然后用乙酸乙酯萃取。用水和饱和氯化钠洗涤萃取液后，用无水硫酸镁干燥有机层并过滤，然后减压浓缩滤液，得到8.4g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用正己烷∶乙酸乙酯＝5∶1洗脱)并纯化，得到7.35g(92.2%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-甲基-N-(N′，N′-二甲基氨磺酰)亚肼基]甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ0.02(d，6H)，0.82(5，9H)，2.02(m，1H)，2.85(s.3H)，2.90(5，6H)，3.01(m，1H)，3.41(m，2H)，4.40(m，1H)，4.60(m，1H)，5.20(m，2H)，7.44(d，2H，J＝8.7Hz)，8.20(d，2H，J＝8.6Hz)实施例31-2向120ml四氢呋喃中加入由实施例31-1所得的7.3g(13.43mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-甲基-N-(N′，N′-二甲基氨磺酰亚肼基]甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷，并搅拌溶解，用冰浴冰至0℃。然后滴加入16ml(16.0mmol)1M氟化四丁铵(四氢呋喃溶液)并搅拌20分钟。移去冰浴后，将混合物溶液搅拌30分钟并减压浓缩，将残留物溶于乙酸乙酯中并依次用水和饱和氯化钠水溶液洗涤。分离出有机层后，用无水硫酸镁干燥有机层并过滤，然后浓缩滤液，得到7.5g粗品。将此粗品溶于120ml二氯甲烷中，并加入4.7ml(33.60mmol)三乙胺和1.6ml(20.67mmol)甲磺酰氯并于室温搅拌30分钟。反应后，用水和饱和氯化钠水溶液洗涤反应混合物溶液，用无水硫酸钠干燥有机层并过滤，然后浓缩滤液，得到5.7g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝300∶1洗脱)并纯化，得到4.2g(61.6%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-甲基-N-(N′，N′-二甲基氨磺酰)亚肼基]甲基-4-甲磺酰氧基羟基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.30(m，2H)，2.84(s，6H)，3.02(s，3H)，3.13(s，3H)，3.60-4.01(m，2H)，4.75(m，1H)，5.20(m，3H)，7.50(d，2，J＝8.6Hz)，8.20(d，2H，J＝8.7Hz)实施例31-3向80ml无水乙腈中加入由实施例31-2所得的2.0g(3.94mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-甲基-N-(N′，N′-二甲基氨磺酰)亚肼基]甲基-4-甲磺酰氧基羟基吡咯烷并搅拌溶解。然后加入1.37g(12.0mmol)硫代乙酸钾并回流3小时。反应后，减压浓缩混合物溶液，将残留物溶于乙酸乙酯并依次用水和饱和氯化钠水溶液洗涤。分离出有机层后，将其用无水硫酸镁干燥并过滤，然后浓缩滤液，得到2.5g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝50∶1洗脱)并纯化，得到1.39g(72.4%)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-甲基-N-(N′，N′-二甲基氨磺酰)亚肼基]甲基-4-乙酰基硫代吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.10(m，1H)，2.30(s，3H)，2.60(m，1H)，2.90(s，6H)，3.12(s，3H)，3.40(m，H)，4.00(m，2H)，4.60(m，1H)，5.20(brs，2H)，7.48(d，2H，J＝8.3Hz)，8.20(d，2H，J＝8.7Hz)实施例31-4向50ml甲醇和5ml四氢呋喃的混合溶剂中加入由实施例31-3所得的1.39g(2.85mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-甲基-N-(N′，N′-二甲基氨磺酰)亚肼基]甲基-4-乙酰基硫代吡咯烷并搅拌溶解。然后滴加入3.0ml2N氢氧化钠溶液并搅拌3分钟。反应后，用饱和柠檬酸将溶液的pH调至4.2，并用实施例19-5的同样操作处理所得反应混合物，得到1.1g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1.5洗脱)并纯化，得到0.69g(54.3%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-甲基-N-(N′，N′-二甲基氨磺酰)亚肼基]甲基-4-巯基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ2.05(m，2H)，2.50-2.79(m，2H)，2.83(s，3H)，2.93(s，3H)，3.10(s，3H)，3.30-3.90(m，2H)，5.20(m，2H)，7.40(m，2H)，8.20(m，2H)实施例32(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[1-(N-甲磺酰-N-甲基亚肼基)乙基]-4-巯基吡咯烷实施例32-1将6.91g(16.35mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-乙酰基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷于室温加入100ml二烷甲烷中。并将1.92ml(36.09mmol)甲基肼，2g无水硫酸镁加入并回流5小时。反应后，将混合物溶液冷却并过滤，然后减压浓缩滤液，得到8.47g残留物。将残留物进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝30∶1洗脱)并纯化，得到7.15g(97.0%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(1-N-甲基亚肼基)乙基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ0.02(s，6H)，0.82(s，9H)，1.52(s，1.75H)，1.63(s，1.25H)，1.70-2.10(m，2H)，2.90(s，2H)，3.40-3.80(m，2H)，4.40(m，1H)，4.60(m，1H)，5.03-5.30(m，2H)，7.43(d，2H，J＝8.9Hz)，8.19(d，2H，J＝8.4Hz)实施例32-2向80ml二氯甲烷中加入由实施例32-1所得的6.8g(15.09mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(1-N-甲基亚肼基)甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷并搅拌溶解。冷至0℃。然后加入13.2ml(22.8mmol)三乙胺和1.41ml(18.2mmol)甲磺酰氯并搅拌30分钟。反应后，将反应混合物溶液用饱和柠檬酸和饱和氯化钠水溶液洗涤。用无水硫酸镁干燥有机层并过滤。减压浓缩滤液，并向残留物中加入100ml四氢呋喃并搅拌溶解。然后滴加18ml(18mmol)1M氟化四丁铵(四氢呋喃溶液)并于室温搅拌30分钟。反应后，减压浓缩混合物溶液并将残留物溶于乙酸乙酯并依次地用水和饱和氯化钠水溶液洗涤。分离出有机层后，将其用无水硫酸镁干燥并过滤，然后浓缩滤液，得到6.4g残留物。将残留物进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶丙酮＝2∶1洗脱)并纯化，得到4.56g(72.9%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[1-(N-甲磺酰-N-甲基亚肼基)乙基]-4-羟基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ1.95(s，1.8H)，1.98(m，1，2H)，2.10-2，64(m，2H)，2.74-2.76(s，s，3H)，2.79-2.83(s，s，3H)，3.50-3.80(m，2H)，4.50(s，1H)，4.63(m，1H)，5.10(m，2H)，7.44(d，2H，J＝8.7Hz)，8.18(dd，2H，J＝8.6Hz，J＝8.6Hz)实施例32-3向70ml二氯甲烷中加入由实施例32-2所得的4.5g(10.86mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[1-(N-甲磺酰-N-甲基亚肼基)乙基]-4-羟基吡咯烷并搅拌溶解。用冰浴将反应混合物溶液冷至0℃，并加入2.23ml(16.0mmol)三乙胺和0.95ml(12.3mmol)甲磺酰氯，于同样温度搅拌30分钟。反应后，用水洗涤有机层，并依次用柠檬酸溶液和氯化钠溶液洗涤。过滤后，浓缩滤液，得到4.94g(92.4%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[1-(N-甲磺酰-N-甲基亚肼基)乙基]-4-甲磺酰氧基吡咯烷粗品。此物质本身用于下一个反应。NMR(CDCl3)δ1.99(s，1.6H)，2.05(s，1.4H)，2.20(m，1H)，2.60(m，1H)，2.78-2.79(s，s，3H)，2.80-2.87(s，s，3H)，3.73(m，1H)，4.01(m，1H)，4.68(t，1H)，5.05-9.32(m，3H)，7.42(d，2H，J＝8.2Hz)，8.20(dd，2H，J＝7.2，8.5Hz)实施例32-4向80ml乙腈中加入由实施例32-3所得的4.9g(9.95mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[1-(N-甲磺酰-N-甲基亚肼基)乙基]-4-甲磺酰氧基吡咯烷。加入2.8g(24.52mmol)硫代乙酸钾后，回流5小时，减压浓缩反应溶液并将残留物溶于乙酸乙酯。用水和饱和氯化钠水溶液洗涤有机层并用无水硫酸镁干燥，过滤。减压浓缩滤液，得到5.1g粗品。将残留物进行硅胶柱色谱分离(用正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1洗脱)并纯化，得到3.21g(68.3%)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[1-(N-甲磺酰-N-甲基亚肼基)乙基]-4-乙酰基硫代吡咯烷。NMR(CDCl3)δ1.99-2.02(s，s，3H)，2.30(s，3H)，2.70(m，1H)，2.80-3.01(m，6H)，2.90(m，1H)，3.30(m，1H)，3.95(m，1H)，4.16(m，1H)，4.52(t，3H)，5.12(m，2H)，7.43(d，2H，J＝8.3Hz)8.18(d，2H，J＝5.4Hz)，实施例32-5向60ml甲醇中加入由实施例32-4所得的3.21g(6.79mmol)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[1-(N-甲磺酰-N-甲基亚肼基)乙基]-4-乙酰基硫代吡咯烷并搅拌溶解。用冰浴冷却反应溶液后，滴加入5ml2N氢氧化钠水溶液并搅拌4分钟。此后，用饱和柠檬酸溶液将反应溶液的pH调至3.5并减压浓缩以蒸发有机溶剂。向残留物中加入乙酸乙酯以溶解并依次用水和饱和氯化钠水溶液洗涤，并用无水硫酸镁干燥。过滤后，浓缩滤液，得到3.7g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用正己烷∶乙酸乙酯＝1∶3洗脱)并纯化，得到2.31g(79%)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[1-(N-甲磺酰-N-甲基亚肼基)乙基]-4-巯基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ1.75(d，1H)，2.01(s，1.5H)，2.03(s，1.5H)，2.70(m，2H)，2.80-2.90(m，6H)，3.30(m，1H)，3.70(m，1H)，4.10(m，1H)，4.50(m，1H)，5.09(m，2H)，7.42(d，2H，J＝8.6Hz)，8.19(m，2H)实施例33(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-乙磺酰-N-甲基亚肼基)甲基-4-巯基吡咯烷实施例33-1向120ml二氯甲烷中加入12.26g(30.01mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-甲酰基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷并搅拌溶解。加入2.4ml(45.11mmol)甲基肼和3g无水硫酸镁并于室温搅拌1.5小时，再用冰浴冷至0℃。将8.4ml(60.22mmol)三甲胺和4ml(35.3mmol)乙磺酰氯加入并搅拌2小时，再依次用水和饱和氯化钠水溶液洗涤并用无水硫酸镁干燥有机层和过滤，然后减压浓缩滤液，得到15.8g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝30∶1洗脱)并纯化，得到14.7g(92.7%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-[N-乙磺酰-N-甲基亚肼基)乙基]-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ0.03(d，6H)，1.83(s，9H)，1.13(t，3H)，2.10(m，2H)，3.10(m，5H)，3.50(m，2H)，4.40(m，1H)，4.70(m，1H)，5.10(m，2H)，7.48(d，2H，J＝8.5Hz)，8.20(d，2H，J＝8.6Hz)实施例33-2向160ml四氢呋喃中加入实施例33-1中所得的14.7g(27.80mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-乙磺酰-N-甲基亚肼基)甲基-4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基吡咯烷并搅拌溶解。然后滴加入37ml(3.7mmol)1M氟化四丁铵(四氢呋喃溶液)并于室温搅拌3小时。反应后，减压浓缩混合物溶液，并将残留物溶于二氯甲烷中，依次用水和饱和氯化钠水溶液洗涤。用无水硫酸镁干燥有机层并过滤。减压浓缩滤液并向产出的粗品中加入160ml二氯甲烷，用冰浴冷至0℃，然后滴加入8.53ml(61.2mmol)三乙胺和2.58ml(33.3mmol)甲磺酰氯，并于0℃搅拌1小时。用柠檬酸溶液和饱和氯化钠水溶液依次洗涤反应混合物溶液。分离有机层后，将其用无水硫酸镁干燥并过滤，然后浓缩滤液，得到13.7g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝20∶1洗脱)并纯化，得到12.6g(92.0%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-乙磺酰-N-甲基亚肼基)甲基-4-甲磺酰氧基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ1.14(t，3H)，2.50(m，2H)，3.03(s，3H)，3.10-3.25(m，5H)，3.80(m，2H)，4.80(m，1H)，5.10(m，3H)，7.50(d，2H，J＝8.5Hz)，8.20(d，2H，J＝8.3Hz)实施例33-3向400ml乙腈中加入由实施例33-2所得的12.6g(11.07mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-乙磺酰-N-甲基亚肼基)甲基-4-甲磺酰氧基吡咯烷并搅拌溶解。然后加入4.73g(41.4mmol)硫代乙酸钾并回流5小时。待反应混合物溶液冷至室温后，减压浓缩混合物溶液以蒸去溶剂，将残留物溶于300ml二氯甲烷中，并依次用水和饱和氯化钠水溶液洗涤。分离出有机层后，将其用无水硫酸镁干燥并过滤，然后将滤液浓缩，得到9.8g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝20∶1洗脱)并纯化，得到8.2g(62.9%)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-乙磺酰-N-甲基亚肼基)甲基-4-乙酰基硫代吡咯烷。NMR(CDCl3)δ1.30(m，3H)，2.10(m，1H)，2.30(s，3H)，2.60(m，14)，3.10(m，5H)，4.05(m，2H)，4.65(m，1H)，5.10(s，2H)，7.44(d，2H，J＝8.4Hz)，8.19(d，2H，J＝8.6Hz)实施例33-4向120ml甲醇中加入由实施例33-3所得的7.4g(15.66mmol)(2S，4R)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-乙磺酰-N-甲基亚肼基)甲基-4-乙酰基硫代吡咯烷并搅拌溶解，用冰浴冷却至0℃。当加入11.7ml2N氢氧化钠溶液并搅拌3分钟后，用柠檬酸溶液将反应溶液的pH值调至3.7。减压浓缩该反应溶液并加入200ml乙酸乙酯，再依次用水和饱和氯化钠水溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥分离出的有机层并过滤。减压浓缩滤液，得到5.7g粗品。将此粗品进行硅胶柱色谱分离(用氯仿∶甲醇＝20∶1洗脱)并纯化，得到4.1g(60.8%)(2S，4S)-1-(对硝基苄氧羰基)-2-(N-乙磺酰-N-甲基亚肼基)甲基-4-巯基吡咯烷。NMR(CDCl3)δ1.14(m，3H)，2.10(m，2H)，3.01(s，3H)，3.10(m，5H)，3.50(m，3H)，3.70(m，1H)，4.65(m，1H)，5.10(m，2H)，7.50(m，2H)，8.20(m，2H)权利要求1.式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐或酯其中R1是氢原子或甲基，R2是氢原子、金属或非金属盐基团、或者是羧基保护基，R3是氢原子或亚氨基保护基，以及R4是氢原子、低级烷基、羟基、氰基或卤原子，R5是羟基、低级烷氧基、保护或未保护的氨基，或者是下述式(1)-(4)之一其中R6和R7各自独立地是氢原子或低级烷基，R8是羟基、氰基、卤原子、由适当的取代基任选性取代的含有1-4个杂原子的5或6节杂环基、保护或未保护的氨基或下面通式的基团(其中R9是低级烷基磺酰基、卤代低级烷基磺酰基、苯基(C1-C4)烷基磺酰基或N，N-二低级烷基氨磺酰基)，n是0至4的整数其中R6是氢原子或低级烷基，n是0至4的整数其中R6和R7独立地是氢原子或低级烷基，n是0至4的整数其中R6是氢原子或低级烷基，R10是低级烷基、低级烷基磺酰基、卤代低级烷基磺酰基、苯基(C1-C4)烷基磺酰基、N-(低级)烷基氨磺酰基、N，N-二(低级)烷基氨磺酰基、由适当取代基任选性取代的含1-4个杂原子的5或6节杂环基，或下面通式的基团(其中R11是卤原子、羟基、氰基，R6和R7各自独立地是氢或低级烷基)。2.按照权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R1是甲基，R2是氢原子。3.按照权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R1和R2是氢原子。4.按照权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R1是甲基，和R2和R3都是氢原子。5.按照权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R1、R2和R3都是氢原子。6.按照权利要求4的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是氢原子，R5是羟基或低级烷氧基。7.按照权利要求4的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是氢原子，R5是氨甲酰基或低级烷氧基氨基甲酰基。8.按照权利要求4的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是氢原子，R5是氨基、低级烷基氨基、低级烷基磺酰氨基，或低级烷基氨磺酰氨基。9.按照权利要求4的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是氢原子，R5是咪唑基氨基、嘧啶基氨基或吡啶基氨基。10.按照权利要求4的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是甲基，R5是羟基或低级烷氧基。11.按照权利要求4的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是甲基，R5是氨基甲酰基或低级烷基氨基甲酰基。12.按照权利要求4的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是甲基、R5是氨基、低级烷氨基、低级烷基磺酰氨基或低级氨磺酰氨基。13.按照权利要求4的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是甲基，R5是咪唑基氨基、嘧啶基氨基或吡啶基氨基。14.按照权利要求4的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是羟基，R5是氨基甲酰基或低级烷基氨基甲酰基。15.按照权利要求4的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是羟基，R5是氨基、低级烷氨基、低级烷基磺酰氨基或低级烷基氨磺酰基。16.按照权利要求4的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是羟基，R5是咪唑基氨基、嘧啶基氨基或吡啶基氨基。17.按照权利要求4的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是卤原子，R5是氨基甲酰基或低级烷基氨基甲酰基。18.按照权利要求4的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是卤原子，R5是氨基、低级烷氨基、低级烷基磺酰氨基、低级烷基氨磺酰氨基。19.按照权利要求4的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是卤原子，R5是咪唑基氨基、嘧啶基氨基或吡啶基氨基。20.按照权利要求5的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是氢原子，R5是羟基或低级烷氧基。21.按照权利要求5的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是氢原子，R5是氨基甲酰基或低级烷基氨基甲酰基。22.按照权利要求5的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是氢原子，R5是氨基、低级烷氨基、低级烷基磺酰氨基或低级烷基氨磺酰基氨基。23.按照权利要求5的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是氢原子，R5是咪唑基氨基或嘧啶基氨基。24.按照权利要求5的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是羟基，R5是氨基甲酰基或低级烷基氨基甲酰基。25.按照权利要求5的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是羟基，R5是氨基、低级烷氨基、低级烷基磺酰氨基或低级烷基氨磺酰基。26.按照权利要求5的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是羟基，R5是咪唑基氨基、嘧啶基氨基或吡啶基氨基。27.按照权利要求5的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是卤原子，R5是氨基甲酰基或低级烷基氨基甲酰基。28.按照权利要求5的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是卤原子，R5是氨基、低级烷氨基、低级烷基磺酰氨基或低级烷基氨磺酰氨基。29.按照权利要求5的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中R4是卤原子，R5是咪唑基氨基、嘧啶基氨基或吡啶基氨基。30.按照权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中的三维结构是(5R，6S，8R，2′S，4′S)或(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)。31.按照权利要求1的化合物，其中的化合物是(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-(2-(甲氧亚氨基吡咯烷-4-基硫基)-4-甲基-6-(1-羟乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。32.按照权利要求1的化合物，其中的化合物是(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N，N-二甲氨基羰基甲氧亚氨基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。33.按照权利要求1的化合物，其中的化合物是(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-(2-氨基羰基甲氧亚氨基吡咯烷-4-基硫基)-4-甲基-6-(1-羟乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。34.按照权利要求1的化合物，其中的化合物是(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N-甲氨基羰基甲氧亚氨基)吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。35.按照权利要求1的化合物，其中的化合物是(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基)-吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。36.按照权利要求1的化合物，其中的化合物是(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N-甲磺酰基甲基亚肼基)-吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。37.按照权利要求1的化合物，其中的化合物是(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(2-咪唑基亚肼基甲基)-吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。38.按照权利要求1的化合物，其中的化合物是(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(2-嘧啶基亚肼基甲基)-吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。39.按照权利要求1的化合物，其中的化合物是(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-[N-甲基-N-(N′，N′-二甲基氨磺酰基)亚肼基甲基]-吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。40.按照权利要求1的化合物，其中的化合物是(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-[N-(N′，N′-二甲基氨磺酰基)亚肼基甲基]-吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。41.按照权利要求1的化合物，其中的化合物是(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N-甲基-N-甲基氨磺酰基)亚肼基甲基]-吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。42.按照权利要求1的化合物，其中的化合物是(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(1-N-甲磺酰基-N-甲基亚肼基乙基]-吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。43.按照权利要求1的化合物，其中的化合物是(4R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-[1-N-(N′，N′-二甲基氨磺酰基)-N-甲基亚肼基乙基]吡咯烷-4-基硫基]-4-甲基-6-(1-羟乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。44.按照权利要求1的化合物，其中的化合物是(5R，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(1-N-甲基磺酰基-N-甲基亚肼基)吡咯烷-4-基硫基]-6-(1-羟乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。45.按照权利要求1的化合物，其中的化合物是(5R，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N-甲基磺酰基亚肼基甲基)吡咯烷-4-基硫基]-6-(1-羟乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。46.按照权利要求1的化合物，其中的化合物是(5R，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N-甲基-N-(N′，N′-二甲氨磺酰基)亚肼基)吡咯烷-4-基硫基]-6-(1-羟乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。47.按照权利要求1的化合物，其中的化合物是(5R，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-[N-(N′，N′-二甲氨磺酰基)亚肼基甲基]吡咯烷-4-基硫基]-6-(1-羟乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。48.按照权利要求1的化合物，其中的化合物是(5R，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-甲氧亚氨吡咯烷-4-基硫基]-6-(1-羟乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。49.按照权利要求1的化合物，其中的化合物是(5R，6S，8R，2′S，4′S)-3-(2-氨基羰基甲氧亚氨基吡咯烷-4-基硫基]-6-(1-羟乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。50.按照权利要求1的化合物，其中的化合物是(5R，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N-甲氨基羰基甲氧亚氨基)吡咯烷-4-基硫基]-6-(1-羟乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。51.按照权利要求1的化合物，其中的化合物是(5R，6S，8R，2′S，4′S)-3-[2-(N，N-二甲氨基羰基甲氧亚氨基)吡咯烷-4-基硫基]-6-(1-羟乙基)-1-氮杂双环[3.2.0]-庚-2-烯-7-酮-2-羧酸。52.制备下式(Ⅳ)化合物或其药学上可接受的盐和酯的方法(其中R1、R2、R3、R4、R5和R14与下面定义相同);该方法包括以下步骤使式(Ⅱ)化合物或其活性衍生物(其中R1是氢原子或甲基，R2是氢原子、金属或非金属盐基团、或羧基保护基，R14是氢原子或羟基保护基，)与式(Ⅲ)化合物反应(其中R2是氢原子、亚氨基保护基，R4是氢原子或低级烷基、羟基、氰基、卤原子，R5是羟基、低级烷氧基、保护或未保护氨基、或下面式(1)-(4)之一;其中R6和R7各自独立地是氢原子或低级烷基，R6是羟基、氰基、卤原子、由适当的取代基任选性取代的含有1-4个杂原子的5或6节杂环基、保护或未保护的氨基、或下面通式(其中R9是低级烷基磺酰基、卤代低级烷基磺酰基、苯基(C1-C4)烷基磺酰基或N，N-二低级烷基氨磺酰基)，n是0至4的整数其中R6是氢原子或低级烷基，n是0至4的整数其中R6和R7各自独立地是氢原子或低级烷基，n是0至4的整数其中R6是氢原子或低级烷基，R10是低级烷基、低级烷基磺酰基、卤代低级烷基磺酰基、苯基(C1-C4)烷基磺酰基、N-(低级)烷基氨磺酰基、N，N-二(低级)烷基氨磺酰基或由适当取代基任选性取代的含1-4个杂原子的5或6节杂环基，或下式基团(其中R11是卤原子、羟基或氰基、R6和R7各自独立地是氢或低级烷基);以及必要时消除或引入任意保护基团。53.抗菌剂，含有抗菌有效量的式(Ⅰ)化合物，其药学上可接受的盐或酯以及药学上可接受的载体或赋形剂，其中R1是氢原子或甲基，R2是氢原子、金属或非金属盐基团、或羧基保护基，R3是氢原子或亚氨基保护基，R4是氢原子、低级烷基、羟基、氰基或卤原子，R5是羟基、低级烷氧基、保护或未保护的氨基，或下式(1)-(4)之一的基团;其中R6和R7各自独立地是氢原子或低级烷基，R6是羟基、氰基、卤原子、由适当的取代基任选性取代的含有1-4个杂原子的5或6节杂环基、保护或未保护的氨基、或下面通式基团(其中R9是低级烷基磺酰基、卤代低级烷基磺酰基、苯基(C1-C4)烷基磺酰基或N，N-二低级烷基氨磺酰基)，n是0至4的整数其中R是氢原子或低级烷基，n是0至4的整数其中R6和R7各自独立地是氢原子或低级烷基，n是0至4的整数其中R6是氢原子或低级烷基，R10是低级烷基、低级烷基磺酰基、卤代低级烷基磺酰基、苯基(C1-C4)烷基磺酰基、N-(低级)烷基氨磺酰基、N，N-二(低级)烷基氨磺酰基或由适当取代基任选性取代的含1-4个杂原子的5或6节杂环基，或下式基团(其中R11是卤原子、羟基、氰基、R6和R7各自独立地是氢原子或低级烷基)。54.制备式(Ⅲ)化合物的方法(其是R是氢原子、亚氨基保护基，R4是氢原子或低级烷基、羟基、氰基或卤原子，R5是羟基、低级烷氧基、保护或未保护的氨基，或下式(1)-(4)之一的基团其中R6和R7各自独立地是氢原子、低级烷基，R8是羟基、氰基、卤原子、由适当的取代基任选性取代的含有1-4个杂原子的5或6节杂环基、保护或未保护的氨基、或下面通式(其中R9是低级烷基磺酰基、卤代低级烷基磺酰基、苯基(C1-C4)烷基磺酰基或N，N-二低级烷基氨磺酰基)，n是0至4的整数其中R6是氢原子或低级烷基，n是0至4的整数其中R6和R7各自独立地是氢原子或低级烷基，n是0至4的整数其中R6是氢原子或低级烷基，R10是低级烷基，低级烷基磺酰基、卤代低级烷基磺酰基、苯基(C1-C4)烷基磺酰基、N-(低级)烷基氨磺酰基、N，N-二(低级)烷基氨磺酰基或由适当取代基任选性取代的含1-4个杂原子的5或6节杂环基，或下式基团(其中R11是卤原子、羟基、氰基、R6和R7各自独立地是氢原子或低级烷基)，该方法包括以下步骤使式(Ⅴ)化合物(其中R3、R4、R5与上文定义相同，R15是R16SO2，其中R16是C1-C4低级烷基)，与下式(Ⅵ)化合物反应(其中R16与上文定义相同，M是碱金属、碱土金属)生成下式(Ⅶ)化合物用碱溶液处理得到的产品。55.式(Ⅲ)化合物其中R3选自是氢原子、亚氨基保护基的基团，R4选自氢原子或低级烷基、羟基、氰基或卤原子，R5选自羟基、低级烷氧基、保护或未保护的氨基，或下式(1)-(4)之一;其中R6和R7各选自氢原子、低级烷基，R8选自是羟基、氰基、卤原子、含有1-4个杂原子的5或6节杂环基、保护或未保护的氨基、或下式基团其中R选自低级烷基磺酰基、卤代低级烷基磺酰基、苯基(C1-C4)烷基磺酰基或N，N-二低级烷基氨磺酰基)，n是0至4的整数其中R6选自氢原子或低级烷基，n是0至4的整数其中R6和R7各选自氢原子或低级烷基，n是0至4的整数其中R6选自氢原子或低级烷基，R10是低级烷基、低级烷基磺酰基、卤代低级烷基磺酰基、苯基(C1-C4)烷基磺酰基、N-(低级)烷基氨磺酰基、N，N-二(低级)烷基氨磺酰基或含1-4个杂原子的5或6节杂环基，或下式基团其中R11是卤原子、羟基、氰基、R6和R7各自独立地是氢原子或低级烷基。56.式(Ⅶ)化合物其中R3选自氢原子、亚氨基保护基的基团，R4选自氢原子或低级烷基、羟基、氰基或卤原子，R5选自羟基、低级烷氧基、保护或未保护的氨基，或下式(1)-(4)之一;其中R6和R7各选自独立地是氢原子、低级烷基、R选自羟基、氰基、卤原子、含有1-4个杂原子的5或6节杂环基、保护或未保护的氨基、或下式基团其中R9选自低级烷基磺酰基、卤代低级烷基磺酰基、苯基(C1-C4)烷基磺酰基或N，N-二低级烷基氨磺酰基，n是0至4的整数其中R是氢原子或低级烷基，n是0至4的整数其中R6和R7各选自氢原子或低级烷基，n是0至4的整数其中R6选自氢原子或低级烷基，R10是低级烷基、低级烷基磺酰基、卤代低级烷基磺酰基、苯基(C1-C4)烷基磺酰基、N-(低级)烷基氨磺酰基、N，N-二(低级)烷基氨磺酰基或含1-4个杂原子的5或6节杂环基，或下式基团其中R11选自卤原子、羟基、氰基、R6和R7各自独立地是氢原子或低级烷基，R16是C1-C6低级烷基。全文摘要本发明涉及式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐或酯。式(Ⅰ)中各符号的定义见说明。本发明化合物对各种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌具有良好的抗菌活性，可用作治疗和预防由这些细菌引起的人类传染病的抗菌剂。文档编号A61K31/397GK1090283SQ93119060公开日1994年8月3日申请日期1993年9月2日优先权日1992年9月2日发明者张民善,林重仁,金南植,申熙赞,金启源,金枝永,李在杰,李春宇,任元彬,金东成申请人:东亚制药株式会社