专利名称：脂质体制备工艺及制剂的制作方法
脂质体制备工艺及制剂是以脂质体形态形成医药配制品的制备工艺及用该工艺制备的脂质体制剂。
1991年10月23日中国发明的专利申请公开说明书CN1055483A(申请号91101790.0)公开的肽药物的长效脂质体制剂及其制备，是将磷脂成分，必要时和亲脂的添加剂一起溶解在合适的有机溶剂中，去除此溶剂得到的脂质基体在添加肽的水性溶液后溶解形成脂质体;或者将磷脂成分，必要时和亲脂的添加剂，以及肽一起溶解在合适的有机溶剂中，去除此溶剂，用水性介质溶解得到的脂质体;或者将磷脂成分，必要时和亲脂的添加剂一起溶解在挥发性的有机溶剂中，加入水性的，与有机相不能混合的肽溶液，在磷脂成分的相转变温度以上经均化作用，使得到的两相系统转化成一种稳定的乳状液，去除有机溶剂则生成脂质体。其脂质体基质与有机溶剂溶解成的溶液与水溶性的肽(药物)混合，要先形成乳液后，才能去除有和溶剂，形成脂质体。要经均化过程，工艺比较复杂。形成脂质基体后再添加肽的水性溶液而溶解形成脂质体，包裹率低，大部分肽(药物)溶解在脂质体外的溶液。特别是此制备过程中，去除有机溶制是采用旋转蒸发器，要有较大的旋转蒸发设备，去除溶剂设备复杂。去除有机溶剂，浸泡脂质膜及振荡形成脂质体都在旋转蒸发的大容器中进行，并且而后才分装到注射瓶中。药液转换过程多，与菌接触的机会较多，操作也比较复杂繁索。旋转蒸发形成的一层层的脂质基体，上下各成份含量不均匀。先后形成的脂质体形式及大小也不均匀。上述工艺过程只适用于试验室或小规模的试验生产，不适于大规模连续的生产过程。试验的条件不利大规模生产的需要。其包裹(包封)率较低，只有20%。
本发明的目的在于提供一种便于操作，适于大规模连续生产的、并能就得较高的包封率和成囊率的脂质体制备工艺及用这种工艺生产的脂质体药物。
本发明的脂质体制备工艺是将脂质体基质、脂溶性药物溶于有机溶媒而成的脂溶液。其特点是将脂溶液装于安瓶，进行真空干燥去除有机溶媒，同时可以回收有机溶媒(有机溶剂);去除有机溶媒后充氮气，并向安瓶加分散液后封口。这样经过长时间浸泡分散就可形成脂质体注射液。分散液与已有的分散液一样，一般是水、葡萄糖、盐水还有其他缓冲液等。特别是在真空干燥前，将水溶性药液也加入安瓶。或者加入少量的分散液如水、葡萄糖溶液、盐酸溶液等。这样再进入真空干燥，在去除有机溶媒形成脂质体基体的同时，水溶性药液或水等就浸入脂质体基体，加速脂质体的浸胀。加入的水溶液性药液和少量水等，还可以防止干燥脂质基体粘在安瓶底及壁。而后加入分散液后封口浸泡分散形成脂质体就更快。这样水溶性药物包封率也就较高。水溶性药液的浓度越高越好，最好是近于或等于饱和浓度，更能增加对水溶性药物的包封率。本发明还可以只将脂质体基质溶于有机溶媒成脂溶液，而将脂溶液和水溶性药液都装于安瓶，进行真空干燥，去除有机溶媒，可回收有机溶媒。去除有机溶媒后，充入氮气并向安瓶加入注射液后封口，形成只包裹水溶性药物的脂质体。水溶性药液也是浓度越高越好，最好是近于或等于饱和溶液，有利于形成较高的包封率。本发明的真空干燥去除有机溶媒、对脂质基体浸胀(包括包裹水溶性药物)、脂质体的形成都是在同一个容器内-安瓶瓶中进行，减少了药液制作过程与外界的接触，适合于生产操作。制备过程只需将排列的安瓶可多可少地置于真空室内，不需大型的旋转设备，可以很方便地进行大规模的连续生产。特别是对于在安瓶试验的工艺步骤条件和配比能直接用在众多的大生产安瓶中，能在工艺条件、操作过程及配比不变的情况下保证生产的质量及稳定性。在安瓶中靠真空使有机溶媒迅速蒸发去除，得到的较均匀的快状脂质基体，易形成多层脂质体(MLV)，脂质体空腔较多，包裹脂溶性药物及水溶性药物量较高，特别是大大提高了水溶性药物的包封率。脂质体是在封口后的安瓶内形成的，形成的脂质体不可能被氧化变质，也不会因为分装及其他操作过程所破坏。本发明的脂质体制备工艺对于耐高温的药物，可以在封口后，没有形成脂质体前就进行高温灭菌，以防在形成脂质体后再高温灭菌而破坏脂质体囊，或因温度高使药液溢出脂质体的现象，保证有较高的包封口率和成囊率。
本发明的脂质体注射液是由脂质体包裹的脂溶性药物或水溶性药物或同时包裹着脂溶性药物和水溶性药物。其特点是脂质体是处于注射用水里，并且脂质体是脂溶性药液或脂溶性溶液和水溶性溶液共存，在安瓶内经真空去除有机溶媒、充氮并加入注射用水封口后形成的。由于脂质体直接在安瓶中形成，药物包裹率较高，分散在注射液里脂质体外的极少，所采用的水作为分散液，大大减少了脂质体注射液的药物刺激性，并保证了脂质体的稳定性。
作为本发明的卡氮芥脂质体注射液，是由脂质体包裹的脂溶性的卡氮芥并处于安瓶内的注射用水里，其是由卡氮芥和脂质体基质溶解于有机溶媒形成脂溶液，将脂溶液分装于安瓶内，经真空干燥，充氮并加入注射用水后封口而形成的。本操作在4-10℃无菌条件下进行。
本发明的榄香烯脂体注射液是由脂质体包裹的脂溶性的榄香烯并处于安瓶内的注射用水而构成的。其是由榄香烯和脂质体其质溶于有机溶媒成脂溶液，脂溶液装于安瓶内经真空干燥，充氮并加入注射用水后封口而形成的。如为了加速脂质体的形成，可进行振摇。本操作在常温无菌条件下进行。
本发明的人参皂甙脂质体注射液是由脂质体包裹的水溶性人参皂甙溶液并处于安瓶内的注射用水而构成的。其是由脂质体基体有机溶液和人参皂甙水溶液都装于安瓶，经真空干燥去除有机溶媒并充氮，加入注射用水后封口而形成的。
卡氮芥脂质体注射液是由卡氮芥、卵磷脂、脑磷脂、胆固醇溶于乙醚，形成卡氮芥的脂溶液，分装到安瓶。将装有卡氮芥脂溶液的安瓶置于真空干燥器内经真空干燥，蒸发去除乙醚。向真空干燥室及安瓶内充氮气，并向安瓶加入注射用水后，将安瓶封口。这就由卡氮芥、卵磷脂、脑磷脂、胆固醇形成的脂质体分散于注射用水，组成卡氮芥脂质体注射液。
榄香烯脂质体注射液是由榄香烯、大豆磷脂、胆固醇或榄香烯、卵磷脂、脑磷脂、胆固醇溶于乙醚，分装到安瓶。再向安瓶加入相近或等量的注射用水。经真空干燥去除乙醚，充入氮气并向安瓶加入注射用水后封口。由榄香烯、大豆磷脂、胆固醇或者榄香烯、卵磷脂、脑磷脂、胆固醇形成的脂质体分散于注射用水而形成榄香烯脂质体注射液。
人参皂甙脂质体注射液，由人参皂甙溶于水成近似于饱和的水溶液，再由大豆磷脂、脑磷脂、胆固醇或卵磷脂、脑磷脂、胆固用乙醚溶成脂溶液。将人参皂甙水溶液和脂溶液都相近等量分层加入安瓶，将装有人参皂甙水溶液和脂溶液的安瓶放到真空干燥器内，经真空干燥去除乙醚，充入氮气并向安瓶加入注射用水后封口。由人参皂甙水溶液、大豆磷脂、脑磷脂、胆固醇或者人参皂甙水溶液、卵磷脂、脑磷脂、胆固醇形成的脂质体分散于注射用水而构成人参皂甙脂质体注射液。
本发明的脂质体制备工艺及制剂与已有的技术相比，脂质体在安瓶内经真空干燥及浸胀分散而形成，形成过程不与外界接触，简化了操作过程，减少了污染的机会。形成的脂质体不易被破坏。小试验的工艺条件可以直接扩大到大生产中去，适于大规模的连续生产。由于真空干燥后形成的脂质块比较均匀，形成的脂质体也比较均匀，而且是多层脂质体，形成的脂质体不会因受激烈冲击而破坏或被氧化，所以具有较高的包封率和成囊率。如在真空干燥前同脂溶液一起加入水溶性药物水溶液或水，则更能加快脂质体的浸胀和形成，提高对水溶性药物的包裹率。操作过程即可在常温下进行，也便于在低温条件下进行。封口以后还可以进行高温灭菌，而后才是脂质体的分散成形，不会因高温灭菌而破坏脂质体，克服了脂质体难以灭菌除热源的缺点。形成的脂质体注射液，脂质体包封药物的比率较高。处在注射用水分散媒的脂质体稳定性好，对人体刺激性较小。
下面结合实例进一步说明本发明的脂质体制备工艺及制剂。
例1取0.5-1.5g的卡氮芥A，1.5-6g的卵磷脂B，0-6g的脑磷脂C，0-6g的胆固醇D，5-200ml的乙醚E，5-200ml的注射用水F。在4-10℃条件下，将卡氮芥A和脂质体基质B、C、D溶于有机溶媒乙醚E。形成的溶液经聚偏氟乙烯膜过滤，并分装于并列的5ml安瓶中，在安瓶加入量为1ml。将安瓶置入真空干燥器中，蒸发乙醚并将其回收，真空度达到1.00mpa保持2分钟后充高纯氮气，并加入5ml的注射用水，分别将安瓶封口。经放置漫漫浸胀分散成卡氮芥脂质体，并悬于注射用水中形成卡氮芥脂质体注射液。如为加速形成脂质体，在放置浸胀12-24小时后经振摇分散10-24小时，还可用超声整形。
例2取0.25-1g榄香烯a，0.5-3g大豆磷脂b，0.5-6g的卵磷脂C，0-6g脑磷脂D，0-6g的胆固醇E，5-100ml的乙醚F，5-200ml的注射用水。取a、b、e或a、b、e或a、c、d、e置于容器内以F溶解至澄明溶液。以0.45μmF型滤膜过滤灭菌分装在10ml安瓶中，每个安瓶加入量为1ml，并可加入1ml的注射用水。将安瓶放入真空干燥器进行真空干燥去除并回收乙醚。真空度在0.08-0.1mpa范围内。充入高纯氮气，以排除残余的乙醚，再向每个安瓶注入10ml的注射用水，将安瓶封口。经高温灭菌后(100℃左右)放到4-6℃温度下贮存浸胀，浸胀24小时后，振摇成形。也可长时间贮存浸胀、自然成形。榄香烯包封率达85%以上。
例3取大豆磷脂1.5g，脑磷脂1.5g，胆固醇0.6g，用10ml乙醚溶解成澄明脂质体基质溶液，并用滤膜过滤。取2.5g人参皂甙用注射水并加热溶解成近于饱和的水溶液。将饱和水溶液每安瓶加入0.5ml，再在每个安瓶中加入脂质基质溶液0.5ml。将安瓶排列放入真空干燥器中去除并回收乙醚，真空度达到0.1mpa时保持5分钟，充入高纯氮气，并注入注射用水到5ml后封口。通过蒸汽加热灭菌。在4-6℃下浸胀24小时后，经间隙振摇、超声分散整形。人参皂甙包封率达70%以上。
例4取人参皂甙2.5g放入玻璃容器，加入水并加热50-80℃溶解成饱和水溶液并经过滤。再取榄香烯0.5g，卵磷脂2.25g，脑磷脂0.75g，胆固醇0.3g，加入到10ml的乙醚中溶解至澄明脂溶液，放置24小时。取数只10ml的安瓶，将人参皂甙饱和水溶液每只安瓶加入1ml的量，再向每只安瓶加入1ml的榄香烯的脂溶液。将安瓶排列置于真空干燥器中以0.09mpa真空度干燥排除并回收乙醚。而后充入无热源过滤的高纯氮气，并向安瓶内加入注射用水10ml。将安瓶封口后放到蒸汽加热灭菌箱内加热100℃左右30分钟。放到4-6℃条件下贮存，浸胀12-24小时后，间断振摇和超声整形。形成一瓶瓶的榄香烯和人参皂甙的脂质体注射液。
权利要求
1.脂质体制备工艺是将脂溶性药物及脂质体基质溶于有机溶媒成脂溶液，其特征在于脂溶液装于安瓶，进行真空干燥去除有机溶媒，再充入氮气并向安瓶注入分散液水后封口。
2.如权利要求1所说的脂质体制备工艺，其特征在于脂溶液分装于安瓶的前后或同时加入水溶性药液或部分分散液，再进行真空干燥。
3.如权利要求2所说的脂质体制备工艺，其特征在于水溶性药液为接近于饱和或饱和的药溶液。
4.如权利要求1或2或3所说的脂质体制备工艺，其特征在于安瓶封口后，进行高温灭菌。
5.脂质体制备工艺是将脂质体基质溶于有机溶媒成脂溶液，基特征在于脂溶液和水溶性药液先后都装于安瓶，进行真空干燥去除有机溶媒，再充入氮气并向安瓶加入分散液后封口。
6.如权利要求5所说的脂质体制备工艺，其特征在于水溶性药液为浓溶液或饱和溶液。
7.如权利要求5或6所溶的脂质体制备工艺，其特征在于安瓶封口后进行高温灭菌。
8.卡氮芥脂质体注射液，其特征在于卡氮芥、卵磷脂、脑磷脂、胆固醇于乙醚，分装到安装，经真空干燥去除乙醚，充入氮气并向安瓶加入注射用水后封口，由卡氮芥、卵磷脂、脑磷脂、胆固醇形成的脂质体分散于注射用水而形成。
9.榄香烯脂质体注射液，其特征在于榄香烯、大豆磷脂、胆固醇或榄香烯、卵磷脂、脑磷脂、胆固醇溶于乙醚，分装到安瓶，并向安瓶加入相近或等量的注射用水，经真空干燥去除乙醚，充入氮气并向安瓶加入注射用水后封口，由榄香烯、大豆磷脂、胆固醇或者榄香烯、卵磷脂、脑磷脂、胆固醇形成的脂质体分散于注射用水而组成。
10.人参皂甙脂质体注射液，其特征在于人参皂甙溶于水成近似于饱和水溶液，分装到安瓶，取大豆磷脂、脑磷脂、胆固醇或卵磷脂、脑磷脂、胆固醇用乙醚溶解成脂溶液，分装到有水溶液的安瓶，经真空干燥去除乙醚，充入氮气并向安瓶加入注射用水后封口，由人参皂甙水溶液、大豆磷脂、脑磷脂、胆固醇或人参皂甙水溶液、卵磷脂、脑磷脂、胆固醇形成的脂质体分散于注射水而成。
全文摘要
脂质体制备工艺及制剂是以脂质体形态形成药配制品的制备工艺及用该工艺制备的卡氮芥、榄香烯、人参皂甙药物的脂质体注射液。其工艺是将脂溶性药物及脂质体基质溶于有机溶媒成脂溶液，或只将脂质体基质溶于有机溶媒成脂溶液，脂溶液装于安瓿，同时可加入水溶性药液，进行真空干燥去除有机溶媒，再充入氮气并向安瓿注入分散液后封口。放置或振荡分散成脂质体药液，工艺简单，可适于大规模连续生产。
文档编号A61K9/127GK1110134SQ94112420
公开日1995年10月18日 申请日期1994年7月30日 优先权日1994年7月30日
发明者马淑贤, 宿明先, 王海波, 丁玉玲 申请人:大连市医药科学研究所