凝血酶受体拮抗剂的制作方法

专利名称：凝血酶受体拮抗剂的制作方法
背景技术：
本发明涉及取代的三环凝血酶受体拮抗剂，含有其的药物组合物及其在治疗与血栓形成有关的疾病、动脉硬化、再狭窄、高血压、心绞痛、心律不齐、心脏衰竭、脑局部缺血和癌症中的用途。
已知凝血酶对不同的细胞类型具有多种活性，而又已知凝血酶受体存在于这些类型的细胞中，如人血小板、血管平滑肌细胞、内皮细胞和成纤维细胞。因此，预计凝血酶受体拮抗剂会用于治疗血栓形成性、炎性、动脉硬化性及纤维增生性疾病、以及凝血酶及其受体在病理中起作用的其它疾病。
根据包括对凝血酶受体上氨基酸取代的结构-活性研究，已鉴定凝血酶受体拮抗剂肽。在Bernatowicz等，J．Med．Chem39(1996)，p．4879-4887中公开了四及五肽，它们是潜在的凝血酶受体拮抗剂，例如N-反式-肉桂酰基-对-氟Phe-对-胍基Phe-Leu-Arg-NH2和N-反式-肉桂酰基-对-氟Phe-对-胍基Phe-Leu-Arg-Arg-NH2。肽凝血酶受体拮抗剂还公开于WO94／03479，其
公开日为1994年2月17日。
喜巴辛，一种下式的哌啶生物碱，已被确定为毒蕈硷受体激动剂。(+)-喜巴辛的全合成公开于Chackalamannil等，J．Am．ChemSoc118(1966)，p．9812-9813。 发明概述本发明涉及式Ⅰ或其药用盐表示的凝血酶受体拮抗剂， 其中单虚线表示选择性存在的双键；双虚线表示选择性存在的单键；n是0-2；Q是 其中n1和n2独立地为0-2；或当双键不存在时，Q也是稠合的R-取代的芳基或R-取代的杂芳基；R是独立地选自H、C1-C6烷基、卤素、羟基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、(C1-C6)二烷基氨基、(C1-C6)烷氧基、-COR16、-COOR17、-SOR16、-SO2R16、-NR16COR16a、-NR16COOR16a、-NR16CONR4R5、氟-(C1-C6)烷基、二氟(C1-C6)烷基、三氟(C1-C6)烷基、C3-C6环烷基、C2-C6链烯基、芳基(C1-C6)烷基、芳基(C2-C6)链烯基、杂芳基(C1-C6)烷基、杂芳基(C2-C6)链烯基、羟基(C1-C6)烷基、氨基(C1-C6)烷基、芳基和硫代(C1-C6)烷基的1至3个取代基；R1和R2独立地选自H、G1-C6烷基、氟(C1-C6)烷基、二氟(C1-C6)烷基、三氟(C1-C6)烷基、C3-C6环烷基、C2-C6链烯基、芳基(C1-C6)烷基、芳基(C2-C6)链烯基、杂芳基(C1-C6)烷基、杂芳基(C2-C6)链烯基、羟基(C1-C6)烷基、氨基(C1-C6)烷基、芳基和硫代(C1-C6)烷基；或R1和R2一起形成=O基团；R3是H、羟基、(C1-C6)烷氧基、-SOR16、-SO2R17、-C(O)OR17、-C(O)NR18R19、C1-C6烷基、卤素、氟(C1-C6)烷基、二氟(C1-C6)烷基、三氟(C1-C6)烷基、C3-C6环烷基、C2-C6链烯基、芳基(C1-C6)烷基、芳基(C2-C6)链烯基、杂芳基(C1-C6)烷基、杂芳基(C2-C6)链烯基、羟基(C1-C6)烷基、氨基(C1-C6)烷基、芳基和硫代(C1-C6)烷基；Het是5至14个原子的单、二或三环杂芳基，其中含有1至13个碳原子和1至4个杂原子，杂原子独立地选自N、O和S，其中环氮原子可以形成N-氧化物或与C1-C4烷基形成季铵基团，其中Het通过环碳原子与B连接，且其中Het基团被1至4个取代基W取代，该取代基独立地选自H；C1-C6烷基；氟(C1-C6)烷基；二氟(C1-C6)烷基；三氟(C1-C6)烷基；C3-C6环烷基；杂环烷基；被C1-C6烷基或C2-C6链烯基取代的杂环烷基；C2-C6链烯基；R21-芳基(C1-C6)烷基；R21-芳基-(C2-C6)链烯基；杂芳基(C1-C6)烷基；杂芳基(C2-C6)链烯基；羟基(C1-C6)烷基；二羟基(C1-C6)烷基；氨基(C1-C6)烷基；(C1-C6)烷基氨基-(C1-C6)烷基；二-((C1-C6)烷基)-氨基(C1-C6)烷基；硫代(C1-C6)烷基；C1-C6烷氧基；C2-C6链烯基氧基；卤素；-NR4R5；-CN；-OH；-COOR17；-COR16；-OSO2CF3；-CH2OCH2CF3；(C1-C6)烷硫基；-C(O)NR4R5；-OCHR6-苯基；苯氧基-(C1-C6)烷基；-NHCOR16；-NHSO2R16；联苯基；-OC(R6)2COOR7；-OC(R6)2C(O)R4R5；(C1-C6)烷氧基；C1-C6烷氧基，其被(C1-C6)烷基、氨基、-OH、-COOR17、-NHCOOR17、-CONR4R5、芳基、被独立地选自卤素、-CF3、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和-COOR17的1至3个取代基取代的芳基、其中相邻的碳原子与亚甲二氧基形成环的芳基、-C(O)NR4R5及杂芳基取代；R21-芳基；其中相邻的碳原子与亚甲二氧基形成环的芳基；杂芳基；被选自卤素、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基、(C1-C6)烷基氨基、二-((C1-C6)烷基)氨基、-OCF3、-NO2、羟基(C1-C6)烷基、-CHO和苯基的1至4个取代基取代的杂芳基，其中相邻的碳原子与C3-C5亚烷基或亚甲二氧基形成环的杂芳基；R4和R5独立地选自H、C1-C6烷基、苯基、苄基和C3-C6环烷基，或者R4和R5一起为-(CH2)4-、-(CH2)5-或-(CH2)2NR7-(CH2)2-并与它们连接的氮原子形成环；R6独立地选自H、C1-C6烷基或苯基；R7是H或(C1-C6)烷基；
R8、R10和R11独立地选自基团R1及-OR1，其条件是当选择性的双键存在时，R10不存在，而当环Q是芳香环时，R10和R11不存在；R9是H、OH、C1-C6烷氧基、卤素或卤代(C1-C6)烷基；B是-(CH2)n3-、-CH2-O-、-CH2S-、-CH2-NR6-、-C(O)NR6-、-NR6C(O)-、 顺或反式-(CH2)n4CR12=CR12a(CH2)n5或-(CH2)n4C≡C(CH2)n5-，其中n3是0-5，n4和n5独立地是0-2，而R12和R12a独立地选自H、C1-C6烷基和卤素；当双虚线表示单键时X是-O-或-NR6-，或当此键不存在时，X是-OH或-NHR20；当双虚线表示单键时Y是=O、=S、(H，H)、(H，OH)或(H，C1-C6烷氧基)，或当此键不存在时，Y是=O、(H，H)、(H，OH)、(H，SH)或(H，C1-C6烷氧基)；当双虚线表示单键时R15不存在，而当此键不存在时，R15是H、C1-C6烷基、-NR18R19或-OR17；或Y是 而R15是H或C1-C6烷基；R16和R16a独立地选自C1-C6低级烷基、苯基或苄基；R17、R18和R19独立地选自H、C1-C6烷基、苯基或苄基；R20是H、C1-C6烷基、苯基、苄基、-C(O)R6或-SO2R6；R21是选自-CF3、-OCF3、卤素、-NO2、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、(C1-C6)烷基氨基、二-((C1-C6)烷基)-氨基、氨基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基、二-(C1-C6)烷基-氨基(C1-C6)烷基、羟基-(C1-C6)烷基、-COOR17、-COR17、-NHCOR16、-NHSO2R16及-NHSO2CH2CF3；Z是-CH2-、-O-、-S(O)0-2-、NR22-、-C(O)-、-C(=NOR17)-或-C(R13R14)-，其中R13和R14与它们连接的碳原子一起形成含3至6个碳原子的螺环烷基，或3至6元螺杂环烷基，其中含有2至5个碳原子及1或2个选自O、S和N的杂原子；而R22是H、C1-C6烷基、苯基、苄基、-COR16或-CONR18R19。
优选的一组化合物是下式IA 其中X、Y、R、R1、R2、R3、R8、R9、R10、R11、B和Het定义如上。
优选的第二组化合物是下式IB 其中X、Y、R、R1、R2、R3、R8、R9、R11、B和Het定义如上。
优选的第三组化合物是下式IC 其中X、Y、R、R1、R2、R3、R8、R9、B和Het定义如上。
R2、R8、R10和R11各优选是氢原子。R3优选是氢原子或低级烷基。变量n优选是O。R9优选是H、OH或烷氧基。R1优选C1-C6烷基，更优选甲基。双虚线优选表示单键；X优选-O-而Y优选=O或(H，-OH)。Z优选-CH2-、-C(O)-或-C(=NOR17)-。环Q优选R-取代的环己基或R-取代的苯基。R优选是氢原子、氟、羟基、烷氧基或烷基。B优选是反式-CH=CH-。Het优选吡啶基、取代的吡啶基、喹啉基、取代的喹啉基。Het上的优选的取代基(W)是芳基、取代的芳基、杂芳基或烷基。更优选的是其中Het是其5位被芳基、取代的芳基、杂芳基或烷基取代的2-吡啶基的化合物，或是其中Het是其6位被烷基取代的2-吡啶基的化合物。
本发明的凝血酶受体拮抗剂化合物具有抗血栓形成、抗血小板凝集、抗动脉硬化、抗再狭窄及抗凝血活性。由本发明化合物治疗的与血栓形成有关的疾病为血栓形成、动脉硬化、再狭窄、高血压、心绞痛、心律不齐、心脏衰竭、心肌梗塞、肾小球性肾炎、栓塞性和血栓栓塞性中风、外周血管疾病、其它心血管疾病、脑局部缺血、炎性紊乱及癌症、以及凝血酶及其受体起病理作用的其它疾病。
因此，本发明还涉及式Ⅰ的化合物在需要此治疗的哺乳动物中作为抗血栓形成、抗血小板凝集、抗凝或抗癌剂的用途。
另一方面，本发明涉及含式Ⅰ化合物及药用载体的药物组合物。发明详述除非另外说明，术语“烷基”或“低级烷基”指含1至6个碳原子的直链或支链烷基，而“烷氧基”类似地指含1至6个碳原子的烷氧基。
氟烷基、二氟烷基及三氟烷基指末端碳原子被1、2或3个氟原子取代的烷基链，例如，-CF3、-CH2CF3、-CH2CHF2或-CH2CH2F。卤代烷基指被1至3个卤原子取代的烷基链。
“链烯基”指含1至6个碳原子、链中含一或多个双键的、共轭或非共轭的直链或支链碳链。类似地，“链炔基”至含1至6个碳原子、链中含一或多个三键的直链或支链碳链。当烷基、链烯基或链炔基链与其它两个变量结合并因此为二价时，使用术语亚烷基、亚烯基及亚炔基。
“环烷基”指含3至6个碳原子的饱和碳环，而“亚环烷基”指相应的二价环，其中其与其它基团的连接点包括所有的位置及立体异构体。
Het上的取代基“杂环烷基”指4至7元个原子的饱和环，其中含有3至4个碳原子和1至3个杂原子，杂原子选自-O-、-S-和-NR7-，其通过碳原子与该分子的其它部分连接。杂环烷基的实例为2-氮杂环丁烷基、2-吡咯烷基、四氢噻吩-2-基、四氢-2-呋喃基、4-哌啶基、2-哌嗪基、四氢-4-吡喃基、2-吗啉基和2-硫代吗啉基。
“卤素”指氟、氯、溴或碘原子基团。
当R4和R5与它们连接的氮原子一起形成环时，所形成的环为1-吡咯烷基、1-哌啶基和1-哌嗪基，其中哌嗪基环也可以在4位氮原子上取代有R7基团。
“二羟基(C1-C6)烷基”指在两个不同的碳原子上被两个羟基取代的烷基链。
“芳基”指苯基、萘基、茚基、四氢萘基或2，3-二氢化茚基。
“杂芳基”指单环、二环或苯并稠合的5至10元杂芳基，其中含2至9个碳原子和1至4个独立地选自N、O和S的杂原子，条件是该环不包括相邻的氧原子和／或硫原子。还包括环氮原子的N-氧化物，以及环氮原子被C1-C4烷基取代形成季胺的化合物。单环杂芳基的实例包括吡啶基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、咪唑基、吡唑基、四唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基和三唑基。二环杂芳基的实例为萘啶基(例如，1，5或1，7-二氮杂萘基)、咪唑并吡啶基、吡啶并[2，3]咪唑基、吡啶并嘧啶基和7-氮杂吲哚基。苯并稠合的杂芳基的实例为吲哚基、喹啉基、异喹啉基、酞嗪基、苯并噻吩基(即硫杂萘基)、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噁唑基和苯并呋咱基。包括所有的位置异构体，例如，1-吡啶基、2-吡啶基、3-吡啶基和4-吡啶基。W取代的杂芳基指其中可取代的环碳原子具有上述的取代基、或其中相邻的碳原子与亚烷基或亚甲二氧基形成环的基团。
术语“Het”是如上所述的单环、二环和苯并稠合的杂芳基、及三环基团如苯并喹啉基(例如1，4或7，8)或非洛啉基(如1，7；1，10；或4，7)。Het基团通过环碳原子与基团B连接，例如，Het是2-吡啶基、3-吡啶基或2-喹啉基。
其中相邻碳原子与亚烷基形成环的杂芳基的示例为2，3-环戊并吡啶、2，3-环己并吡啶和2，3-环庚并吡啶。
术语“选择性双键”指式Ⅰ所示结构的中间环中的单虚线所示的键。术语“选择性单键”指X和碳原子之间的双虚线所示的键，Y和R15通过该碳原子与式Ⅰ的结构连接。该键不存在的化合物见，例如，实施例6。
在上述陈述中，例如，所谓R4和R5独立地选自取代基组的基团，指R4和R5是独立地选择，且在分子中R4或R5的变量出现一次以上，这些取代基的出现是独立选择的。本领域技术人员会意识到取代基(一个或多个)的大小和性质会影响可以存在的取代基的数量。
本发明的化合物具有至少一个不对称碳原子，因此所有的异构体，包括非对映异构体和内旋异构体被视为本发明的一部分。本发明包括以纯的形式和混合物包括外消旋混合物形式存在的(+)-和(-)-异构体。可以用常规技术制备异构体，即通过采用光学纯的或富光学纯的起始物进行反应或通过将式Ⅰ化合物的异构体分离。
本发明的其中Q是饱和环的典型优选化合物，具有如下立体化学 其中具有绝对立体化学的化合物是更优选的。本发明的其中Q是芳香环的典型优选化合物，具有如下立体化学，其中Q以苯环为例 其中具有绝对立体化学的化合物是更优选的。
本领域技术人员会领会，对于式Ⅰ的一些化合物，某种异构体比其它异构体会显示更大药学活性。
带碱性基团的本发明化合物可以与有机酸和无机酸形成药用盐。用于形成盐的适宜的酸的实例为盐酸、硫酸、磷酸、乙酸、枸橼酸、草酸、丙二酸、水杨酸、苹果酸、富马酸、瑚珀酸、抗坏血酸、马来酸、甲磺酸以及其它本领域技术人员熟知的无机酸和羧酸。通过该游离碱与足量的所需酸接触来制备此盐。通过用适宜的稀碱水溶液如稀碳酸氢钠水溶液处理该盐可以再生此游离碱形式。在某些物理性质方面，如在极性溶剂中的溶解性，此游离碱形式与其相应的盐形式有某种程度上的不同，但是就本发明的目的而言该盐等价于其相应的游离碱形式。
本发明的某些化合物是酸性的(例如，具有羧基的那些化合物)。这些化合物与无机碱或有机碱形成药用盐。这些盐的实例为钠、钾、钙、铝、锂、金和银盐。还包括与药用胺如氨、烷基胺、羟基烷基胺、N-甲基葡糖胺等形成的盐。
本发明的化合物一般通过本领域已知的方法制备，例如通过下述方法。
在方案1中，给出了制备式Ⅰ化合物的方法，其中n是0，选择性双键不存在，Q形成环己基环，单键存在于X和Y连接的碳原子之间，X是-O-，Y是=O，B是-CH=CH-，Het是W取代的吡啶基，R2是甲基，而R1、R3、R8、R9、R10和R11各为氢原子。但是，可以采用类似的方法制备含其它选择性取代的Het基团的化合物。本领域技术人员还会意识到该方法同样适用于制备光学活性或外消旋化合物。
方案1 在催化量的对甲苯磺酸的存在下，用二氢吡喃处理商购的(R)-3-丁炔-2-醇，以便以四氢吡喃基醚的形式进行O-保护，得到中间体1a。用正丁基锂在-78℃处理1a的THF溶液，随后用氯代甲酸苄基酯停止反应，并接着脱保护得到中间体2，采用标准条件用二烯酸3将2酯化得到酯4。用Lindlar催化剂在氢气氛下将4的三键选择性还原，得到中间体5，其在200-210℃下热环合，然后用碱处理得到三环中间体6。在氧化铂的存在下将酯6进行氢化得到饱和羧酸中间体，将其用SOCl2处理得到相应的酰氯，通过在Pd(O)的存在下用三丁基氢化锡还原将其转变为三环醛7。在THF中将由磷酸酯8产生的阴离子与醛7缩合得到烯烃9(终产物)。
其中W是芳基或R21-芳基的式8中间体，可以通过类似于下述制备三氟甲基-苯基-取代的化合物8a的方法制备。 用三氟甲磺酸酐将商购的羟基吡啶衍生物转变为相应的三氟甲磺酸盐，然后在Pd(O)的存在下在Suzuki条件下将其与商购的硼酸(boronic acid)偶联。通过用叔丁基锂处理随后用氯代磷酸二乙酯停止反应将所得产物转变为磷酸酯。
或者，其中W是选择性取代的芳基的式9化合物，可以用三氟甲磺酸酯中间体从其中W是-OH的式9化合物制备。例如，用三异丙基甲硅烷基氯处理3-羟基-6-甲基吡啶，并按照上述制备中间体8的方法，将所得羟基被保护的化合物转变为磷酸酯。然后此三异丙基甲硅烷基保护的中间体与三环中间体7反应并在标准条件下将此保护基除去。所得其中W是OH的式9化合物再用三氟甲磺酸酐在室温下在溶剂如二氯甲烷中处理；然后，在溶剂如甲苯中，在Pd(PPh3)4和碱如碳酸钾的存在下，在升高的温度并在惰性气体氛中，使此三氟甲磺酸酯与选择性取代的芳基硼酸如选择性取代的苯基硼酸反应。
其中W是取代的羟基(如苄氧基)的式9化合物，可以通过将其中W是羟基的式9化合物，与卤代化合物如选择性取代的苄基溴，在碱如碳酸钾的存在下，在适当的溶剂如丙酮中回流来制备。
其中Het是被W通过碳原子取代的(例如，其中W是烷基、链烯基或芳烷基)或通过氮原子取代的(即，-NR4R5)的式Ⅰ化合物，可以用其中W是氯代烷基的式Ⅰ化合物作为中间体来制备。式Ⅰ化合物，其中W是极性基团如羟基烷基、二羟基烷基、-COOH、二甲基氨基和-COH，可以如方案1B所示制备，其中起始物是其中W为链烯基的式Ⅰ化合物。下列方案1A和1B显示了制备不同W-取代的化合物的公知反应条件，其中Q是环己基、X是-O-、Y是=O、R15不存在、R1是甲基、R2、R3、R9、R10和R11各为H、B是-CH=CH-，而Het是2-吡啶基。 本领域技术人员会领会只要存在的取代基不受上述反应条件影响，可在式Ⅰ的其它化合物中进行与上述表中所述类似的反应。
式Ⅰ化合物，其中Q是非芳香性环，选择性单键(由双虚线表示)不存在，X是OH，Y是OH，R15是H而其余变量如上所述，可以通过用还原剂如LAH处理相应的化合物制备，该化合物中选择性单键存在，X是-O-，Y是=O而R15不存在。
式Ⅰ的化合物，其中选择性单键存在，X是-O-，Y是(H，OH)而R15不存在，其余变量如上定义，可以通过用试剂如DIBAL处理相应的化合物制备，该化合物中选择性单键不存在，X是-O-，Y是=O而R15不存在。所得Y是(H，OH)的化合物可以转变为相应的Y是(H，烷氧基)的化合物，该转化是通过将该羟基化合物与适当的烷醇在试剂如BF3·OEt2的存在下反应实现的。Y是(H，OH)的化合物还可以转变为相应的Y是(H，H)的化合物，该转化是通过用BF3·OEt2和Et3SiH在惰性溶剂如二氯甲烷中在低温下处理该羟基化合物实现的。
R9是氢的式Ⅰ化合物，可以通过与氧化剂如SeO2一起加热，转变为R9是羟基的相应化合物。
在方案2中，给出了制备如下式Ⅰ的化合物的方法，其中n是0，选择性双键存在，Q形成环己基环，X是-O-，Y是=O，R2，R3，R8，R9和R11各为氢，R1是甲基，R10不存在，B是-CH=CH-，而Het是W-取代的吡啶基。但是，类似的方法可以用来制备含其它选择性取代的Het基团的化合物。
方案2 通过用TBDMS氯化物处理将醇1进行O-保护，成为TBDMS醚。用碘溶液将从1b产生阴离子的反应停止，得到相应的炔基碘化物，用二(环己基)硼烷将其还原得到顺式-乙烯基碘化物10。在Cu(I)和Pd(O)的存在下，将乙烯基碘化物10与三甲基硅烷基乙炔偶联，用三氟乙酸在甲醇中除去保护基后得到中间体11。用酸3将11酯化得到中间体酯12，其在185-195℃下热环合，用DBU简单处理后得到前体13。将炔属衍生物13脱甲硅烷基化，然后在AIBN的存在下用三丁基氢化锡进行锡氢化作用得到乙烯基锡烷衍生物15，其与卤代吡啶衍生物16偶联得到终产物17。
方案2A提供了另一种方法 钯介导乙炔1b与反式-碘代乙烯基吡啶28偶联，然后将此三键选择性还原得到中间体二烯醇29，将其用二烯酸3酯化得到30。将30在190-210℃下热环合，然后用碱处理得到17。通过在钯的存在下，(2-氯-6-甲基)吡啶与(三甲硅烷基)乙炔偶联，然后用氟阴离子将此甲硅烷基脱保护，并用三丁基氢化锡处理分离后的产物，随后用碘处理，制得中间体28。
在方案3中，给出了制备式Ⅰ化合物的方法，其中n是O，选择性双键不存在，Q形成苯环，X是-O-，Y是=O，R1，R2，R3，R8和R9各是氢，R10和R11不存在，B是-CH=CH-，而Het是甲氧基取代的喹啉基。但是，可以用类似的方法制备含其它选择性取代的Het基团的化合物。
方案3 通过用正丁基锂在THF中处理，随后用氯甲酸苄基酯停止反应，将商购的乙炔基衍生物18转变为相应的酯19。除去THP基团，接着用反式-肉桂酰氯在标准条件下酯化得到酯21，将其在190℃下热环合得到三环酯22。用氧化铂将22氢化得到羧酸23，将其在标准条件下转变为相应的酰氯。用Pd(O)和三丁基氢化锡将得自23的酰氯还原，得到醛24，将其与得自磷酸酯25的阴离子缩合，得到终产物26。
R3是烷基的化合物可以由R3是氢原子的相应化合物制备。例如，用LDA处理化合物26，接着用CH3I处理，制得R3是甲基的相应的化合物27 式Ⅰ化合物的酰胺、内酰胺和酰亚胺衍生物，其中Q是芳香环，可以由X是-O-和Y是=O的化合物用下列方法制备，其中给出了部分结构式 用胺处理此内酯以形成开环的酰胺。 用试剂如SOCl2处理此酰胺以将此酰胺环合为内酰胺。 此酰胺的羟基取代部分可以通过用试剂如Jones试剂处理转变为羧酸，并将所得产物以与生产内酰胺相同的方式环合形成酰亚胺。
在方案4中，给出了制备式Ⅰ化合物的方法，其中n是0，选择性双键不存在，Q是6位被亚乙二氧基取代的(即Z是-C(R13R14))的环己基环，X是-O-，Y是=O，R1，R3，R8，R9，R10和R11各是氢，R2是甲基，R15不存在，B是-CH=CH-，而Het是吡啶基且W是三氟甲基-苯基。但是，可以用类似的方法制备含其它选择性取代的Het基团的化合物。
方案4 将1，4-环己烷二酮单亚乙基缩酮28和2，6-二-叔丁基-4-甲基吡啶用三氟甲磺酸酐处理，得到烯醇三氟甲磺酸酯29。在溶剂如DMF中，在碱如三乙胺和催化剂如Pd(PPh3)2Cl2的存在下，用丙烯酸甲酯处理将化合物29转变为化合物30，而30通过标准方法，例如用碱如氢氧化钠处理，转变为相应的酸31。然后，酸31与外消旋体2反应，并按照方案1所述环合，得到外消旋混合物形式的产物36。
缩酮如化合物36可以通过用酸如Hcl处理，转变为相应的酮。接着，用试剂如硼氢化钠或K-Seletride处理，可以还原为相应的羟基化合物。
在方案4A中，给出了制备类似于方案4、但是其中Z是亚乙二氧基且在环己基环的7位的化合物的方法。
方案4A 在碱如三乙胺和催化剂Pd(PPh3)2Cl2的存在下，用丙烯酸甲酯处理缩酮44在溶剂如DMF中的溶液，并通过标准方法，例如，通过用碱如氢氧化钠处理将所得酯45转变为相应的酸46。然后，酸46与化合物43反应并环合得到47，再通过标准方法将其转变为相应的酸。用方案1中所述的方法将中间体49与-B-Het基团偶联得到化合物50。
通过用酸如HCl处理将缩酮如化合物50转变为相应的酮。接着，用试剂如硼氢化钠或K-Seletride处理，可以还原为相应的羟基化合物。用试剂如CH3MgBr处理可以将此酮转变为相应的7-羟基-7-甲基化合物。
在方案5中，给出了制备式Ⅰ化合物的方法，其中n是0，选择性双键不存在，Q形成环己基环，X是-O-，Y是=O，R1，R3，R8，R9，R10和R11各是氢原子，R2是甲基，R15不存在，B是-CH=CH-，而Het是吡啶基，W是三氟甲基-苯基而R是羟基。但是，可以用类似的方法制备含其它选择性取代的Het基团的化合物。
方案5
方案1中的中间体6被氧化得到中间体醇37A和37B。将醇37A氢化得到38，随后将其转变为乙酸酯39。以与方案1中相同的方式将乙酸酯39转变为中间体40。将中间体40水解得到41A。用类似的方法，但在第二步中以37B代之，得到式41B的化合物。
B是-C(O)NH-的式Ⅰ化合物可以由上述酰氯(见方案3)与适当的胺缩合制备。
上述方法中的起始物可商购，或是本领域已知的，或可以通过本领域熟知的方法制备。
不参与上述反应的反应性基团可以在反应期间用常规的保护基保护，这些保护基在反应后可以通过标准方法除去。下表A给出了一些典型的保护基表A 本发明还涉及含本发明式Ⅰ化合物和药用载体的药物组合物。式Ⅰ的化合物可以以任何常规口服剂型给药，如胶囊、片剂、散剂、扁囊剂、混悬剂或溶液剂。可以用常规药用赋形剂和添加剂并使用常规技术制备这些制剂和药物组合物。这些药用赋形剂和添加剂包括无毒的相容填充剂，粘合剂、崩解剂、缓冲剂、防腐剂、抗氧剂、润滑剂、矫味剂、增稠剂、着色剂、乳化剂等。
治疗上述疾病或病症的式Ⅰ化合物的日剂量为约O．001至约1O0mg／kg体重每天，优选约0．001至约10mg／kg。对于平均体重70kg的患者，剂量水平就是每天约0．1至约700mg的药物，以单剂量或2-4个可分的剂量给药。但是，准确的剂量有医生决定并依赖于所用化合物的效力、患者的年龄、体重、状况和反应。
以下是制备式Ⅰ化合物的实施例。
实施例1[[2-[(E)-2-(3R，3aS，4S，8aS，9aR-十二氢-3-甲基-1-氧代-萘并[2，3-c]呋喃-4-基)乙烯基]-6-喹啉基]氧基]乙酸 步骤1 在0℃下，搅拌(R)-3-丁炔-2-醇(15ml，0．204mol)和3，4-二氢-2H-吡喃(26．1ml，1当量)。加入对甲苯磺酸(水合物)(0．38g，5mol％)，并将此混合物进一步搅拌2小时。加入乙酸乙酯(319ml)和碳酸氢钠(1．6g)，并在1小时后将此混合物过滤并浓缩。进行色谱(二氧化硅，19∶1己烷／乙酸乙酯)得到31．49g(100％)所需产物，为非对映异构体的混合物。1NMR主要的非对映异构体(CDCl3)δ1．54(d，J=7．5Hz，3H)，1．55-2．0(m，6H)，2．42(s，1H)，3．56(m，1H)，3．88(m，1H)，4．60(br q，J=7．5Hz，1H)，5．00(t，J=5．0Hz，1H)。
步骤2 将步骤1的产物(31．49g，0．204mol)溶解于THF(1L)中，并在搅拌下冷却至-78℃。滴加正丁基锂(97．8ml的2．5M溶液，1．2当量)。搅拌20分钟后，加入氯甲酸苄基酯(35．1ml，1．2当量)并将此反应在-78℃下搅拌2小时。让此混合物升温至室温(RT)，加入氯化铵(饱和)溶液，并用乙酸乙酯萃取此混合物。将此有机萃取物干燥(硫酸镁)，浓缩并再溶解于甲醇(2L)中，加入DOWEX 50WX8-100离子交换树脂(60g，先用甲醇洗涤)并在室温下将此混合物搅拌过夜。将此混合物过滤、浓缩并进行色谱(二氧化硅，9∶1-4∶1己烷／乙酸乙酯)得到29．9g(71％)的所需产物。
1H NMR(CDCl3)δ1．55(d，J=7．5Hz，3H)，4．70(q，J=7．5Hz，1H)，5．27(s，2H)，7．44(brs，5H)。
步骤3 在0℃下，搅拌存在于二氯甲烷(100ml)中的反式-3-(1-环己烯基)丙烯酸(4．13g，0．0273mol)和4-吡咯烷并吡啶(0．4g，10mol％)。加入1，3-二环己基碳二亚胺(5．63g，1当量)并将此混合物搅拌10分钟。滴加步骤2产物(5．58g，0．0273mol)的二氯甲烷(40ml)溶液。将所得混合物搅拌2小时，过滤，浓缩并进行色谱(二氧化硅，97∶3己烷／乙酸乙酯)得到5．82g(63％)所需产物。
1H NMR(CDCl3)δ1．61(d，J=7．0Hz，3H)，1．66(m，2H)，1．74(m，2H)，2．18(m，2H)，2．27(m，2H)，5．25(s，2H)，5．67(m，1H)，5．80(d，J=15．0Hz，1H)，6．26(br s，1H)，7．37(d，J=15．0Hz，1H)，7．42(s，5H)。
步骤4 将步骤3的产物(5．82g，0．017mol)和三乙胺(0．112ml)溶解于THF(32ml)中。加入Lindlar催化剂(0．58g)并在1atm氢气压下将此混合物搅拌16小时。将此混合物过滤，浓缩，溶解于邻二甲苯中，并在氮气流下脱气。将脱气后的混合物密封于耐压管中并在210℃加热6小时。冷却至室温后，减压除去二甲苯并将所得混合物进行色谱(二氧化硅，19∶1-9∶1己烷／乙酸乙酯)得到3．81g(66％)所需产物。
1H NMR(CDCl3)δ0．94(m，1H)，1．20(d，J=7．0Hz，3H)，1．31(m，1H)，1．50(m，1H)，1．82(m，2H)，2．00(m，1H)，2．20(m，1H)，2．39(br d，J=15．0Hz，1H)，2．51(m，1H)，2．62(m，1H)，2．73(m，1H)，3．35(m，1H)，4．53(m，1H)，5．22(AB quartet，J=12．5Hz，2H)，5．34(br s，1H)，7．42(br s，5H)。
步骤5 将步骤4的产物(3．81g，0．011mol)溶解于甲醇(100ml)中。加入氧化铂(Ⅳ)(0．38g)并将此混合物在氢气氛(60psi)下摇动16小时。将此混合物过滤，浓缩并重结晶(二氯甲烷／己烷)得到2．12g(75％)所需产物。
1H NMR(CDCl3)δ0．90-1．0(m，1H)，1．05-1．20(m，2H)，2．21-1．55(m，7H)，1．75-1．92(m，4H)，1．92-2．00(m，1H)，2．52-2．64(m，2H)，2．74(m，1H)，4．76(m，1H)。
步骤6 将步骤5的产物(2．3g，9．66mmol)悬浮于甲苯(20ml)中，加入SOCl2(4ml)，并在80℃下将此混合物加热16小时。冷却至室温后，减压除去挥发物并将所得胶溶解于新鲜的甲苯(23ml)中。加入四(三苯基膦)钯(0)(800mg，8mol％)并将此混合物冷却至0℃。滴加三丁基氢化锡(3．24ml，1．2当量)并将此混合物搅拌30分钟，此后TLC显示了约66％的转化率。加入三丁基氢化锡(1．35ml，0．5当量)并将此混合物再搅拌1小时。然后将此混合物进行色谱(二氧化硅，4∶1己烷／乙酸乙酯)得到1．9g(88％)所需产物。
1H NMR(CDCl3)δ0．88-1．05(m，1H)，1．10-1．20(m，2H)，1．22-1．50(m，5H)，1．55-1．70(m，2H)，1．75-1．90(m，4H)，1．98(dd，J=12．5，7．0Hz，1H)2．53(m，1H)，2．63(m，1H)，2．73(m，1H)，4．73(m，1H)，9．80(d，J=5．0Hz，1H)。
步骤7 将6-羟基喹哪啶(1．97g，0．0123mol)和咪唑(0．85g，0．0124mol)溶解于DMF(20ml)中，并在搅拌下冷却至0℃。加入三异丙基甲硅烷基氯(2．7ml，1．05当量)并将此混合物搅拌30分钟。加入氯化铵溶液(饱和)并用乙酸乙酯萃取此混合物。将此有机萃取物干燥(硫酸镁)，浓缩并进行色谱(二氧化硅，4∶1-1∶1己烷／乙酸乙酯)得到3．39g(88％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3)δ1．12(d，J=8．5Hz，18H)，1．30(heptet，J=8．5Hz，3H)，2．05(s，3H)，7．13(br s，1H)，7．22(d，J=9．0Hz，1H)，7．31(d，J=11．0Hz)，7．89(m，2H)。
步骤8 将步骤6的产物(3．39g，0．0108mol)和二异丙基胺(1．66ml，1当量)溶解于THF(54ml)中并在搅拌下冷却至-78℃。滴加正丁基锂(9ml的2．5M己烷溶液，2．1当量)并在20分钟后加入磷酰氯二乙酯(1．7ml，1．1当量)。再过20分钟后，让此混合物升温至室温。加入氯化铵溶液(饱和)并用乙酸乙酯萃取此混合物。将此有机萃取物干燥(硫酸镁)，浓缩并进行色谱(二氧化硅，1∶1己烷／乙酸乙酯至100％乙酸乙酯)得到4g(82％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3)δ1．12(d，J=8．0Hz，18H)，1．25(t，J=7．5Hz，6H)，1．3(heptet，J=8．0Hz，3H)，3．55(d，J=22Hz，2H)，4．08(q，J=7．5Hz，4H)，7．14(s，1H)，7．32(d，J=9．5Hz，1H)，7．44(d，J=7．4Hz，1H)，7．90(d，J=7．4Hz，1H)，7．95(d，J=9．5Hz，1H)。
步骤9 将步骤8产物(4g，8．86mmol)的THF(20ml)溶液搅拌下冷却至0℃。滴加正丁基锂(3．5ml的2．5M己烷溶液，1当量)。在0℃，将所得溶液再搅拌10分钟并向此溶液中加入步骤6产物(1．9g，8．05mol)的THF(20ml)溶液。1小时后，加入氯化铵溶液(饱和)并用乙酸乙酯萃取此混合物。将此有机萃取物干燥(硫酸镁)，浓缩并进行色谱(二氧化硅，1∶5-1∶3己烷／乙酸乙酯)得到2．8g(65％)标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ1．12(d，J=8．0Hz，18H)，1．0-1．5(m，11H)，1．43(d，J=6．0Hz，3H)，1．73(br d，J=9．5Hz，2H)，1．84(m，1H)，1．92(dd，J=9．2，7．0Hz，1H)，2．40(m，2H)，2．71(q，J=6．0Hz，1H)，4．77(m，1H)，6．46(dd，J=15．8，9．6Hz，1H)，6．69(d，J=15．8Hz，1H)，7．13(s，1H)，7．31(d，J=6．5Hz，1H)，7．43(d，J=8．5Hz，1H)，7．90(d，J=9．0Hz，1H)，7．94(d，J=8．5Hz，1H)。
步骤10 在0℃，搅拌步骤9产物(2．8g，5．25mmol)在THF(72ml)中的溶液。滴加四丁基氟化铵(5．3ml的1M THF溶液，1当量)，TLC(5分钟)显示转化彻底。加入氯化铵溶液(饱和)并用乙酸乙酯萃取此混合物。将此有机萃取物干燥(硫酸镁)，浓缩并进行色谱(二氧化硅，1∶2-1∶1己烷／乙酸乙酯)得到1．96g(99％)标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ1．0-1．4(m，8H)，1．45(d，J=6Hz，3H)，1．7-1．9(m，3H)，1．97(m，1H)，2．43(m，2H)，2．72(q，J=6．5Hz，1H)，4．78(m，1H)，6．50(dd，J=15．9，9．5Hz，1H)，6．78(d，J=15．9Hz，1H)，7．17(s，1H)，7．34(d，J=9．0Hz，1H)，7．53(d，J=8．5Hz，1H)，8．01(m，2H)；MS m／z 378(M+)，332，264，236HRMScalcd for C24H28NO3(MH+)378．2069，found 378．2060．Anal．Calcd forC24H27NO3·HCl·0．5H2OC，68．16H，6．91N，3．31．FoundC，68．21H，7．64N，3．36。
HRMS C24H28NO3(MH+)理论值378．2069，实测值378．2060。C24H27NO3·HCl·0．5H2O元素分析，理论值C，68．16；H，6．91；N，3．31。实测值C，68．21；H，7．64；N，3．36。
步骤11 将氢化钠(33mg的60％矿物油分散液，0．825mmol)加入到步骤10产物(75mg，0．2mmol)的DMF(1ml)溶液中。搅拌10分钟后，加入溴代乙酸甲酯(166mg，8当量)，并再过10分钟后，TLC指示反应彻底。加入氯化铵溶液(饱和)并用乙酸乙酯萃取此混合物。将此有机萃取物干燥(硫酸镁)，浓缩并进行色谱(二氧化硅，1∶4-1∶2己烷／乙酸乙酯)得到60mg(68％)的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ0．8-1．4(m，8H)，1．48(d，J=6．0Hz，3H)，1．79(br d，J=9．0Hz，2H)，1．89(d，J=10．5Hz，1H)，1．98(dd，J=13．5，6．0Hz，1H)，2．46(m，2H)，2．75(q，J=6．5Hz，1H)，3．89(s，3H)，4．82(br s，3H)，6．55(dd，J=15．7，9．5Hz，1H)，6．58(d，J=9．5Hz，1H)，7．06(s，1H)，7．48(d，J=6．5Hz，1H)，7．51(d，J=8．5Hz，1H)，8．03(t，J=9．0Hz，2H)。HRMS calcd for C27H32NO5(MH+)450．2280，found450．2282。
HRMS C27H32NO5(MH+)理论值450．2280，实测值450．2282。
步骤12将步骤11产物(60mg，0．136mmol)溶解于4∶1甲醇／水(6．5ml)中。加入氢氧化锂(0．25ml的1M水溶液，2当量)并将此混合物搅拌2小时。加入水并用乙酸乙酯萃取。将此水层酸化并用乙酸乙酯萃取(×3)，将这些萃取物干燥(硫酸镁)并浓缩得到30mg的标题化合物(50％)。
1H NMR(CD3OD)δ0．9-1．5(m，8H)，1．42(d，J=6．0Hz，3H)，1．80(m，3H)，1．92(m，1H)，2．50(m，1H)，2．64(m，1H)，2．83(q，J=6．5Hz，1H)，4．95(m，3H)，6．89(d，J=15．8Hz，1H)，7．16(dd，J=15．8，10．0Hz，1H)，7．56(d，J=2．5Hz，1H)，7．76(dd，J=9．5，2．5Hz，1H)，8．08(d，J=9．5Hz，1H)，8．16(d，J=9．0Hz，1H)，8．71(d，J=9．0Hz，1H)；MS m／z 420(18)，392(100)，302(2)，117(8)；Anal．Calc’d for C26H29NO5·HCl·2H2OC，61．47H，6．75N，2．76。FoundC，61．02H，6．45N，2．91。
C26H29NO5·HCl·2H2O元素分析，理论值C，61．47；H，6．75；N，2．76。实测值C，61．02；H，6．45；N，2．91。
用实施例1的方法，使用本领域已知的或按照类似于下列实施例中描述的方法制备的起始物，制备下表1所示的化合物，其中各变量在表中定义
实施例2 步骤1在氩气氛下，将化合物1b(4．532g，24．6mmol)的THF(15ml)溶液冷却至0℃，向其中加入正丁基锂溶液(1．6M在环己烷中，17ml，27mmol)。在0℃搅拌40分钟后，加入I2(6．24g，24．6mmol)的THF(10ml)溶液，并将此反应混合物再搅拌15分钟。加入水(25ml)停止反应并用己烷(50ml)稀释。用己烷(3×50ml)萃取水相。用5％硫代硫酸钠溶液(2×50ml)洗涤合并的有机相，用硫酸镁干燥并真空蒸发，得到炔基碘1c，为桔黄色油状物(7．281g，95％)。[α]D23-48．8(c 1．23，CHCl3)；IR(CH2Cl2)2200cm-1；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0．11(s，3H)，0．12(s，3H)，0．90(s，9H，C(CH3)3)，1．40(d，J=6．5Hz，3H，CH3)，4．63(q，J=6．4Hz，1H，CH(OTBS))；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ-4．65，-0．31，18．21，25．35，25．76，60．50， 96．98。
步骤2向在0℃氩气氛下搅拌的环己烯(6．8ml，67mmol)的无水戊烷(50ml)溶液中，加入硼烷-二甲硫醚复合物(2M在THF中，16．7ml，33．4mmol)。将此溶液升温至室温并搅拌1小时，得到絮状悬浮液，向其中加入炔基碘1c(8．446g，27．2mmol)。将所得清澈溶液在室温下搅拌80分钟，并加入冰醋酸(5ml，87．3mmol)。将此反应混合物搅拌20分钟后，加入乙醇胺(5．2ml，86．2mmol)，并继续搅拌15分钟。用乙酸乙酯(300ml)稀释此混合物，用水(2×100ml)和盐水(100ml)洗涤。用无水硫酸镁干燥此有机相并真空浓缩得到粗品，为黄色油状物。在硅胶上(己烷)进行柱色谱纯化得到顺式-乙烯基碘化物10，为无色油状物(7．167g，84％)。[α]D23+68．1(c 0．79，CHCl3)；IR(KBr pellet)1610cm-1；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0．13(s，3H)，0．16(s，3H)，0．95(s，9H，C(CH3)3)，1．27(d，J=6．4，3H，CH3)，4．56(dq，J=6．4，6．2Hz，1H，OCH)，6．18(d，J=7．6Hz，1H，HC=CHI)，6．28(dd，J=7．6，7．6Hz，1H，CH=CHI)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ-5．15，-4．95，17．80，22．37，25．29，71．63，78．25，145．09。
步骤3向PdCl2(PhCN)2(58．1mg，0．15mmol)和CuI(58．8mg，0．31mmol)的哌啶(3ml)溶液中，加入顺式-乙烯基碘化物10(303mg，0．97mmol)的无水THF(3ml)溶液。随后加入(三甲基甲硅烷基)乙炔(0．35ml，2．48mmol)，在5分钟内其发生颜色变化，由暗绿色变为淡绿色，然后变为黑色。在氩气氛下将此溶液室温下搅拌18小时。真空除去溶剂并通过闪式色谱在硅胶上(己烷，随后于己烷中的5％乙酸乙酯)纯化，得到产物11，为黄色油状物(267mg，98％)。[α]D25+128．7(c 0．745，CHCl3)；IR(CH2Cl2)2151，1252cm-1；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0．12(s，3H)，0．15(s，3H)，0．25(s，9H，Si(CH3)3)，0．95(s，9H，C(CH3)3)，1．29(d，J=6．2Hz，3H，CH3)，4．89(dq，J=8．5，6．3Hz，1H，OCH)，5．46(d，J=11．0Hz，1H，CH=C)，5．97(dd，J=8．5，11．0Hz，1H，C=CH)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ-4．88，-4．58，1．08，18．21，23．61，25．91，67．03，99．53，101．13，107．40，148．86；MS(Cl／CH4)283(MH+)，267，225。
步骤4
向被保护的烯炔11(1．744g，10．38mmol)的甲醇(30ml)溶液中，加入TFA(0．6ml)。将此反应混合物室温下搅拌2小时。真空除去溶剂并用乙醚(40ml)和水(40ml)稀释此残余物。用乙醚(3×40ml)萃取水相，用盐水(50ml)洗涤合并的有机相，用硫酸镁干燥，并浓缩。在高真空下除去最后残留的溶剂。
向上述脱保护的烯炔的无水二氯甲烷(30ml)溶液中，加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(4．412g，23．01mmol)、二甲基氨基吡啶(DMAP)(2．836g，23．2mmol)、TEMPO(1mg)和二烯酸3(2．414g，15．9mmol)。将此反应混合物在氩气氛下室温下搅拌18小时。除去溶剂并用乙酸乙酯(300ml)稀释此混合物。将此有机相用水(150ml)、0．5N HCl溶液(2×100ml)和盐水(100ml)洗涤，并用无水硫酸镁干燥。减压蒸发得到酯12，为棕色油状物(2．601g，83％)。在硅胶上(5％乙酸乙酯在己烷中)进一步进行色谱制备分析用样品。[α]D25+190．7(c 1．04，CHCl3)；IR(CH2Cl2)2151，1715cm-1；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0．20(s，9H，C(CH3)3)，1．40(d，J=6．4Hz，3H，CH3)，1．58-1．66(m，2H，CH2)，1．66-1．73(m，2H，CH2)，2．10-2．18(m，2H，CH2)，2．23-2．30(m，2H，CH2)，5．57(dd，J=11．0，1．1Hz，1H，C=CH)，5．76(d，J=15．6Hz，1H，CH=C)，5．86(dq，J=6．44，7．56Hz，1H，CH=C)，5．97(dd，J=7．8，11．0Hz，1H，CH=C)，6．22(t(宽)，J=4．0Hz，CH=C)，7．31(s，1H，CH=C)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ-0．203，19．81，21．98，22．01，24．07，26．40，69．02，100．20，101．51，110．35，114．55，134．85，138．77，143．55，148．21，166．65；HRMS(FAB)理论值C18H27O2Si(M+)m／e302．1702，实测值m／e 302．1695。
步骤5向中间体12(2．125g，7．03mmol)在无水的、脱气甲苯(25ml)中的溶液中，加入TEMPO(1mg)。在密封管中将此溶液在185℃下加热2．5小时。将此反应混合物冷却至室温，加入DBU(1ml)并搅拌30分钟。将此混合物用乙酸乙酯(300ml)稀释并用水(100ml)、0．5N HCl溶液(2×100ml)和盐水(100ml)洗涤。将此有机相用无水硫酸镁干燥，过滤并蒸发，得到黄色油状粗品(2．290g)。在硅胶上(8％乙酸乙酯在己烷中)进行色谱纯化得到三环衍生物13b，为淡黄色油状物(1．541g，73％)。[α]D21+115．6(c 1．01，CHCl3)；IR(CH2Cl2)2170，1768cm-1；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0．21(s，9H，Si(CH3)3)，0．98(dddd，J=12．0，10．5，10．5，3．5Hz，1H，C5Hax)，0．92-1．04(m，1H，CH)，1．23-1．36(m，1H)，1．40-1．54(m，1H)，1．66(d，J=6．1Hz，3H，CH3)，1．78-1．94(m，2H)，1．96-2．15(m，2H)，2．31-2．44(m，2H)，2．54-2．68(m，2H)，3．23-3．29(m，1H，C(O)CH)，4．52-4．62(m，1H，OCH(CH3)，5．35(d，J=2．2Hz，1H，C=CH)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ-0．10，21．29，25．80，26．79，32．94，33．18，34．87，38．16，43．49，44．73，77．67，88．22，107．05，113．12，142．13，175．75；HRMS(FAB)理论值C18H27O2Si(MH+)m／e 303．1780，实测值m／e 303．1775。
步骤6 将13b用碳酸钾在甲醇中进行脱甲硅烷基作用得到的炔14(1g)，在三丁基氢化锡(1．75ml)和AIBN(100mg)存在下溶解于甲苯(20ml)中，并将此混合物在120℃下加热2小时。将此溶液加入硅胶柱上，并用乙酸乙酯-己烷(5∶95)洗脱所需的产物。1H-NMR(CDCl3)δ0．8-0．9(m，9H)；1．2-1．6(m)；3．2(m，1H)；4．5(m，1H)；5．3(s，1H)；5．75(dd，J=8．3，18Hz，1H)；6．05(d，J=18Hz，1H)。
步骤7在耐压管中，在120℃下，将15(224mg)、6-溴甲基吡啶(356mg)和Pd(PPh3)4(50mg)的甲苯(4ml)溶液加热过夜。将所得溶液倒入硅胶柱上并用乙酸乙酯-己烷(5∶95至10∶90)混合物洗脱标题化合物。1H-NMR(CDCl3)δ1．35(d，6Hz，3H)；2．46(s，3H)；3．2(m，1H)；4．5(m，1H)；5．3(s，1H)；6．5(m，2H)；6．9(d，1H)；7．1(d，1H)；7．5(t，1H)。
用类似的方法，制备下列结构的化合物，其中变量在下表2中定义
实施例3 下列步骤中使用的化合物序号相应于上述反应方案3。
步骤1将THF-醚18(2．8g，20mmol)的无水THF(100ml)溶液冷却至-78℃，并滴加正丁基锂(25mmol，10ml，2．5N在己烷中)。在此温度下保持15分钟后，滴加氯甲酸苄基酯(3．75ml，25mmol，纯度95％)。将所得溶液在-78℃搅拌2小时并通过加入氯化铵(饱和溶液)停止反应。到达室温后，将此反应混合物用乙醚(50ml)稀释并用盐水洗涤。将此有机相干燥(硫酸镁)并在旋转蒸发器中除去溶剂，得到7．0g粗品酯19。
1H NMR(CDCl3)δ1．3-2．0(m，6H)，3．6-3．9(m，2H)，4．45(s，2H)，5．27(s，2H)，7．40(m，5H)。
步骤2将粗品THP-醚19(7．0g)溶解于甲醇(15ml)中并在室温下加入催化量的PTSA(250mg)。15分钟后，将此溶液用乙醚和盐水稀释，并用碳酸氢钠(饱和溶液)和盐水洗涤此有机相，并干燥(硫酸钠)。在旋转蒸发器中除去溶剂，得到4．6g粗品醇20。
1H NMR(CDCl3)δ4．45(s，2H)，5．27(s，2H)，7．40(m，5H)。
步骤3在0℃，将粗品醇20(4．6g)溶解于含DMAP(催化量)和三乙胺(3ml)的二氯甲烷(50ml)中。加入肉桂酰基氯(3．3g，20mmol)，并将此混合物在0℃下搅拌30分钟。将所得悬浮液用乙醚和水稀释，并用氢氧化钠(10％，50ml)、HCl(2N，50ml)和盐水依次洗涤此有机相，干燥(硫酸镁)并在旋转蒸发器中除去溶剂，得到粗品酯21(7．2g)。
1H NMR(CDCl3)δ5．0(s，2H)，5．27(s，2H)，6．50(d，J=16Hz，1H)，7．40-7．70(m，10H)，7．80(d，J=16Hz，1H)。
步骤4将肉桂酸酯21(7．2g)在邻二甲苯(50ml)中的溶液，用氩气脱气，并在耐压管中在190℃加热18小时。将此化合物冷却，并在旋转蒸发器中除去溶剂。进行色谱纯化后，得到内酯22(3．0g，从醚18计收率44％)。
1H NMR(CDCl3)δ3．62(m，1H)，3．78)d，J=15．2Hz，1H)，4．08(t，J=8．8Hz，1H)，4．68(t，J=8．8Hz，1H)，5．34(d，J=12．0Hz，1H)，5．42(d，J=12Hz，1H)，7．2-7．5(m，10H)。
步骤5将内酯22(0．9g)溶解于甲醇(40ml)并在PtO2(150mg)存在下在总压力60psi下氢化14小时。用硅藻土板滤出催化剂，并在旋转蒸发器中除去溶剂。用乙酸乙酯和己烷将酸23结晶(270mg，41％)。
1H-NMR(CDCl3)δ2．93(dd，3．2；15．3Hz，1H)，3．52(dd，J=7．8；15．3Hz，1H)，3．23(m，1H)，3．55(m，1H)，3．61(d，J=3．2Hz，1H)，3．7(dd，J=5．5；9．5Hz，1H)，4．44(t，J=9．2Hz，1H)，7．1-7．2(m，4H)。
步骤6在氮气氛下，室温下，将羧酸23(0．18g)悬浮于含(COCl)2(0．15ml)的二氯甲烷(5ml)中。加入一滴DMF，并将所得混合物室温下搅拌1小时。在旋转蒸发器中除去溶剂，并用甲苯将所得粗品固体洗涤两次，在旋转蒸发器中除去溶剂。得到白色固体，将其在0℃下用含催化量的Pd(PPh3)4的甲苯(5ml)和三丁基氢化锡(0．3ml)的溶液处理。2小时后，用乙醚稀释此混合物，并用盐水洗涤此有机相。进行色谱纯化得到固体醛24(95mg，收率56％)。
1H-NMR(CDCl3)δ2．75(ddd，1．0；7．1；15．5Hz，1H)，3．52(dd，J=2．3；15．5Hz，1H)，3．5(m，1H)，3．64(d，J=1．8Hz，1H)，3．78(m，1H)，3．83(dd，J=4．7；9．2Hz，1H)，4．55(t，J=9．1Hz，1H)，7．2-7．4(m，4H)；9．56(s，1H)。
步骤7在0℃下，将磷酸酯25(125mg，0．45mmol)的THF(10ml)溶液用正丁基锂(0．2ml，0．5mmol，2．5N在己烷中)处理。15分钟后，加入醛24(95mg)的无水THF溶液。将所得溶液室温下搅拌30分钟，并用乙醚和盐水稀释。用盐水洗涤此有机相，并干燥(硫酸镁)。在旋转蒸发器中除去溶剂，并进行色谱纯化得到标题化合物(50mg，32％)。1H-NMR(CDCl3)δ8．35(d，J=8．5Hz，1H)；8．0(d，J=9．4Hz，1H)；7．54(d，J=8．6Hz，1H)；7．42(dd，J=2．9；9．2，1H)；7．28-7．36(m，4H)；7．11(d，J=2．8Hz，1H)；6．94(dd，J=7．6；15．9Hz，1H)；6．78(d，J=15．9Hz，1H)；4．56(dd，J=8．3；9．4Hz，1H)；4．18(dd，J=4．4；9．4Hz，1H)；4．0(s，3H)；3．6(t，J=7．3Hz，1H)。13C-NMR(CDCl3)179．4；157．6；152．5；143．9；137．3；135．2；135．1；133．9；133．6；130．5；128．3；127．5；127．3；126．9；122．3；119．3；105．0；71．5；55．4；45．6；39．0；38．4；28．7。
用类似的方法，制备下列结构式的化合物，其中变量在表中定义。
用类似的方法，制备如下化合物3M HRMS(MH+)实测值346．1445。
实施例4(+)-(3R，3aS，4S，4aR，8aS，9aR)-十氢-4-[(E)-2[5-[3-(三氟甲基)苯基]-2-吡啶基]乙烯基]-3-甲基萘并[2，3-c]呋喃-1(3H)-酮 步骤1 在0℃下，将三氟甲磺酸酐(46ml，0．275mol)滴加到搅拌的、3-羟基-6-甲基吡啶(10g，0．092mol)的吡啶(200ml)溶液中，并在0℃至室温下搅拌16小时。将此混合物倒入冰水(300ml)中并用乙醚萃取。将此乙醚层用水(2×150ml)和盐水洗涤，干燥(硫酸镁)，并真空浓缩得到所需产物(18．7g，83％)，为棕色油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2．67(s，3H)，7．32(d，1H，J=8．5Hz)，7．57(dd，1H，J=8．6，2．8Hz)，8．53(d，1H，J=2．8Hz)。MS(ESI)m／z242(MH+)，100％)；Anal．calc′d forC7H6F3NO3SC，34．86；H，2．51；N，5．81．FoundC，35．24；H，2．48；N，5．54。
步骤2 向步骤1产物(8．5g，34．5mmol)和3-三氟甲基苯基硼酸(10g，55mmol)的甲苯(100ml)溶液中，加入乙醇(25ml)、于水(50ml)中的碳酸钾(14．3g，104mmol)和Pd(PPh3)4(400mg，0．345mmol)。将此混合物在密闭耐压管中在氩气氛下于120℃加热16小时。用乙酸乙酯稀释此混合物，用5％氢氧化钠和盐水洗涤，干燥(硫酸镁)并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯己烷(10∶90，然后20∶80)洗脱进行闪式色谱，得到所需产物(6．7g，82％)，为黄色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2．68(s，3H)，7．32(d，1H，J=8Hz)，7．62-7．90(m，5H)，8．79(d，1H，J=2Hz)。
C13H10F3N·0．10H2O元素分析，理论值C，65．32；H，4．30；N，5．86。实测值C，65．27；H，4．44；N，5．78。
步骤3 用类似于实施例1步骤8的方法，处理步骤2的产物得到所需的产物(8．84g，85％)，为褐色油。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1．36(t，6H，J=7Hz)，3．56(d，2H，J=22Hz)，4．19(dq，4H，J=7，7Hz)，7．58-7．96(m，6H)，8．84(d，1H，J=2Hz)；MS(FAB)m／z374(MH+，100％)；Anal．calc′d forC17H19F3NO3P·0．25 H2OC，54．04；H，5．20；N，3．71．FoundC，54．22；H，5．54；N，3．93。
C17H19F3NO3P·0．25H2O元素分析，理论值C，54．04；H，5，20；N，3．71。实测值C，54．22；H，5．54；N，3．93。
步骤4用类似于实施例1步骤9的方法，处理步骤3的产物，得到此标题化合物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0．83-2．03(m，12H)，1．49(d，3H，J=6Hz)，2．38-2．51(m，2H)，2．72-2．81(m，1H)，4．79-4．88(m，1H)，6．57-6．73(m，2H)，7．30-7．95(m，6H)，8．85(d，1H，J=2Hz)；MS(FAB)m／z456(MH+，100％)。
盐酸盐米色固体；[α]22D=+17．0°(c0．33，甲醇)；C27H28F3NO2·HCl·0．5H2O元素分析，理论值C，64．73；H，6．04；N，2．80。实测值C，64．57；H，6．32；N，2．94。
实施例4的产物按照如下处理得到实施例4A、4B和4C的化合物 4A室温下，将实施例4的产物(21mg，0．050mmol)在氢气(1atm)中在Pd／C(30mg)上在甲醇(10ml)中搅拌8小时。将此混合物过滤并真空浓缩滤液得到4A(52mg，88％)，为半固体。[α]22D=-35．1°(c0．69，甲醇)；MS(FAB)m／z 458(MH+，100％)。
4B室温下，向实施例4产物(20mg，0．044mmol)的二氯甲烷(1ml)溶液中，加入m-CPBA(11mg，0．066mmol)。将此混合物室温下搅拌16小时。用二氯甲烷稀释此混合物，用碳酸氢钠(饱和)洗涤，干燥(硫酸镁)，并真空浓缩。用二氯甲烷甲醇(95∶5)作为洗脱剂对此残余物进行制备TLC分离，得到4B(19mg，91％)，为米色固体。[α]24D=+23．3°(c0．43，甲醇)；MS(ESI)m／z 472(MH+，100％)。
4C在1，4-二噁烷(2ml)中，将实施例4的产物(21mg，0．050mmol)和SeO2(0．2mg，0．23mmol)加热回流40分钟。将此混合物真空浓缩。将此残余物用乙酸乙酯己烷(40∶60)作为洗脱剂进行制备TLC分离，得到4C(17mg，80％)，为白色固体。[α]20D=+42．8°(c0．65，甲醇)；MS(FAB)m／z 472(MH+，100％)。
按照如下处理实施例4的产物，得到实施例4D和4E的化合物
4D在-78℃下，将LiN(TMS)2(0．6ml，0．60mmol)加入到实施例4产物(227mg，0．50mmol)的无水THF(5ml)溶液中，并在-78℃下搅拌30分钟。在室温下搅拌1小时。在-78℃，加入(10-樟脑磺酰基)氧杂氮丙啶(oxaziridine)(137mg，0．60mmol)的无水THF(2ml)溶液，并在-78℃下搅拌30分钟。并在室温下搅拌2小时。用饱和氯化铵溶液中和此混合物并用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机层，干燥并真空浓缩。在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(40∶60)作为洗脱剂对此残余物进行闪式色谱，得到4D(100mg)。MS472(MH+)。
4E在-78℃下，将LiN(TMS)2(0．6ml，0．60mmol)加入到实施例4产物(227mg，0．50mmol)的无水THF(5ml)溶液中，并在-78℃下搅拌30分钟。在室温下搅拌1小时。在-78℃，加入低聚甲醛(225mg，2．5mmol)在无水THF(2ml)中的混合物，并在-78℃下搅拌30分钟。并在室温下搅拌2天。用饱和氯化铵溶液中和此混合物并用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机层，干燥并真空浓缩。在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(40∶60)作为洗脱剂对此残余物进行闪式色谱，得到4E(30mg)。MS486(MH+)。
实施例5 步骤1 向1，4-环己烷二酮单亚乙基缩酮(10g，64mmol)和2，6-二-叔丁基-4-甲基吡啶(21g，102mmol)的二氯甲烷(350ml)溶液中，室温下加入三氟甲磺酸酐(16ml，96mmol)，并将此混合物搅拌16小时。将此混合物用碳酸氢钠(饱和)洗涤。将有机层干燥(硫酸镁)并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(5∶95，然后10∶90)作为洗脱剂进行闪式色谱，得到所需产物(13．4g，72％)，为清澈油状物。
步骤2 向步骤1产物(13g，46mmol)的DMF(150ml)溶液中，加入丙烯酸甲酯(8．4ml，92mmol)、三乙胺(19ml，138mmol)和Pd(PPh3)4(1．62g，2．3mmol)。将此混合物在75℃下搅拌10小时。用氯化铵(饱和)稀释此混合物并用乙醚萃取。将此有机层用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(15∶85)作为洗脱剂进行闪式色谱，得到所需产物(9．15g，89％)，为清澈油状物。
步骤3； 向步骤2产物(9．15g，40mmol)的THF甲醇(450ml，1∶1)溶液中，加入氢氧化钠(225ml，10％)。将此混合物室温下搅拌3小时。用水稀释此混合物，用二氯甲烷洗涤，用10％HCl酸化，并用乙酸乙酯萃取。将此有机层用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)，并真空浓缩，得到所需化合物(8．00g，95％)，为淡黄色固体。
步骤4用类似于实施例1步骤3至6及9所述方法处理步骤3的产物，得到标题化合物(外消旋体)，为米色固体；MS(ESI)m／z 514(MH+，100％)。
将实施例5的产物按照如下处理得到实施例5A、5B和5C的化合物 5A将实施例5的化合物(65mg，0．13mmol)和HCl(2ml，5％)在丙酮(2ml)中的混合物，在回流温度下搅拌16小时。用碳酸氢钠(饱和)中和此混合物并用乙酸乙酯萃取。将此有机层用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)并真空浓缩。将此残余物用乙酸乙酯∶己烷(40∶60)作为洗脱剂进行制备TLC分离，得到5A(42mg，71％)，此盐酸盐为白色固体。MS(FAB)m／z 470(MH+，100％)。
5B向5A(70mg，0．15mmol)的THF甲醇(10ml，1∶1)溶液中，加入硼氢化钠(11mg，0．30mmol)。室温下将此混合物搅拌10分钟。将此混合物用氯化铵(饱和)稀释并用乙酸乙酯萃取。将此有机层用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)并真空浓缩。将此残余物用乙酸乙酯∶己烷(60∶40)作为洗脱剂进行制备TLC分离，得到5B(39mg，55％)，此盐酸盐为白色固体。MS(FAB)m／z 472(MH+，100％)。
5C向5A(70mg，0．15mmol)的无水THF(5ml)溶液中，在-78℃下，加入K-Selectride(0．23ml，0．23mmol，1．0Mz THF中)。将此混合物在-78℃下搅拌1．5小时。用氯化铵(饱和)稀释此混合物并用乙酸乙酯萃取。将此有机层用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)并真空浓缩。将此残余物用乙酸乙酯∶己烷(60∶40)作为洗脱剂进行制备TLC分离，得到5C(45mg，63％)，此盐酸盐，为白色固体。MS(FAB)m／z 472(MH+，100％)。
按照类似于上述实施例5A-5C的方法，用对映体纯的起始物制备化合物5D、5E和5F 5DMS470(MH+)；5EMS472(MH+)；5FMS472(MH+)。
通过本领域技术人员已知的常规方法，由5D制备下列化合物5G和5H 5GMS485(MH+)；5HMS485(MH+)。
实施例6、6A、6B、6C 6向搅拌的、实施例1AB(0．91g，2．3mmol)的无水THF(20ml)溶液中，室温下分批加入LAH(0．18g，4．6mmol)。将此混合物室温下搅拌30分钟。滴加氢氧化钠(10％，0．50ml)，然后加入乙酸乙酯(50ml)和硫酸镁粉。将此混合物剧烈搅拌10分钟并过滤。真空浓缩此滤液得到标题化合物(0．88g，96％)，为白色固体。MS(FAB)m／z 396(MH+，100％)。 6A向实施例1AB(0．200g，0．511mmol)的无水甲苯(10ml)溶液中，-78℃下滴加DIBAL(0．76ml，0．77mmol，1．0M在甲苯中)，并将此混合物在-78℃下甲苯1．5小时。加入乙酸乙酯并搅拌至室温。加入水并剧烈搅拌1小时。分离此有机层并用乙酸乙酯萃取水层。将合并的有机层干燥(硫酸镁)并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(30∶70)作为洗脱剂进行闪式色谱，得到标题化合物(0．100g，50％)，为白色固体。MS(FAB)m／z 394(MH+，100％)。 6B向实施例6A(60mg，0．13mmol)的甲醇(20ml)溶液中，在0℃滴加BF3·OEt2(31ml，0．26mmol)，并将此混合物在0℃至室温下搅拌3小时。真空浓缩甲醇。将此残余物在乙酸乙酯和碳酸氢钠(饱和)之间分配。将此有机层干燥(硫酸镁)并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(20∶80)作为洗脱剂进行闪式色谱，得到标题化合物(30mg)。盐酸盐米色固体。MS(FAB)m／z 408(MH+，100％)。 6C向实施例6A(50mg，0．13mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中，在-78℃下加入BF3·OEt2(31ml，0．26mmol)和Et3SiH(0．24ml，1．3mmol)。将此混合物在-78℃至室温下搅拌3小时。将此混合物在乙酸乙酯和碳酸氢钠(饱和)之间分配。将此有机层干燥(硫酸镁)并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(20∶80)作为洗脱剂进行闪式色谱，得到标题化合物(38mg)。盐酸盐∶米色固体。MS(FAB)m／z 378(MH+，100％)。
实施例7、7A、7B 7．将按照类似于实施例3制备的内酯(75mg，0．17mmol)溶解于2．0M CH3NH2的甲醇(3．0ml)溶液中，并在氮气氛下室温下搅拌1小时。此时，TLC显示无起始物存在，并出现了极性更大的点。将此溶液溶解于乙醚(30ml)中并用盐水(30ml×2)萃取，干燥(硫酸钠)并在旋转蒸发器中除去溶剂。得到标题化合物(实施例7)，为白色固体(70mg，86％)。
1H-NMR(CDCl3)δ2．5(m，1H)；2．82(d，J=4．6Hz，3H)；3．0(dd，J=5．4；16．8Hz，1H)；3．07(m，1H)；3．25(dd，J=10．1；16．8Hz，1H)；3．67(dd，J=5．5；11．6Hz，1H)；3．79(m，1H)；3．89(dd，J=8．0；11．4，1H)；6．33(d，J=15．6Hz，1H)；6．49(m，1H)；6．95(dd，J=7．0；15．6Hz，1H)；7．2(m，4H)；7．25(d，J=8．2Hz，1H)；7．64(t，J=7．6Hz，1H)；7．70(d，J=7．9，1H)；7．78(d，J=7．6，1H)；7．82(m，2H)；8．73(d，J=1．8Hz，1H)。13C-NMR(CDCl3)175．93；154．80；147．57；139．59；138．22；134．93；134．79；134．24；133．43；130．81；130．57；130．07；129．58；129．11；126．74；126．30；124．68；123．50；121．74；62．52；44．54；42．89；39．58；28．66；26．40。MS467(M+1)。HRMS467．1947(理论值467．1946)， 7A在氮气氛下，将实施例7的产物(40mg)溶解于无水二氯甲烷(3ml)中，并通过注射器滴加SOCl2(0．1ml)。将此溶液室温下搅拌1小时。通过加入碳酸氢钠(饱和溶液，15ml)停止反应。将此水悬浮液用乙醚(3×30ml)萃取。合并有机部分并用盐水洗涤，干燥(硫酸钠)并在旋转蒸发器中蒸发至干。得到标题化合物(35mg，91％)，为白色固体。
1H-NMR(CDCl3)δ2．82(m，1H)；3．0(dd，J=6．4；14．7Hz，1H)；3．04(s，3H)；3．23(m，1H)；3．30(dd，J=8．2；14，7Hz，1H)；3．48(t，7．9Hz，1H)；4．20(dd，J=4．4；9．3Hz，1H)，4．48(dd，J=7．8；9．2Hz，1H)；6．70(d，J=15．6Hz，1H)；7．0(dd，J=8．4；15．6Hz，1H)；7．25-7．35(m，4H)；7．43(d，J=7．7Hz，1H)；7．64(t，J=7．6Hz，1H)；7．72(d，J=7．6，1H)；7．83(d，J=7．4，1H)；7．88(s，宽，1H)；8．73(dd，J=2．4；8．1Hz，1H)；8．84(d，J=1．8Hz，1H)。13C-NMR(CDCl3)167．21；154．36；148．03；138．42；138．18；136．28；135．01；134．89；133．77；132．32；130．15；129．63；128．26；127．07；126．88；126．56；124．74；124．70；123．72；123．68；121．84；73．17；45．12；40．88；39．01；34．18；30．79。MS449(M+1)。HRMS449．1842(理论值449．1841)。 7B在0℃氮气氛下，将实施例7的粗品(45mg)溶解于丙酮(2ml)中。滴加Jones试剂至其红色持续不变。通过滴加乙醇至红色彻底消失来停止该反应。将所得绿色悬浮液用乙醚和水稀释，并用盐水洗涤此有机相，干燥(硫酸镁)并在旋转蒸发器中除去溶剂。将此粗品酸在氮气氛下溶解于无水二氯甲烷(5ml)中，并通过注射器滴加SOCl2(0．1ml)。将此溶液室温下搅拌1小时。通过加入碳酸氢钠(饱和溶液，15ml)停止反应。将此水悬浮液用乙醚(3×30ml)萃取。合并有机部分并用盐水洗涤，干燥(硫酸钠)并在旋转蒸发器中蒸发至干。经闪式色谱(30％乙酸乙酯在己烷中)得到所需的酰亚胺(35mg，77％)。1H-NMR(CDCl3)δ2．86(s，3H)；3．20(m，2H)；3．5(m，1H)；3．58(dd，J=1．8；9．2Hz，1H)；4．4(m，1H)；6．38(dd，J=1．2；15．6Hz，1H)；7．10(dd，J=5．2；15．6Hz，1H)；7．2-7．4(m，5H)；7．65(t，J=7．7Hz，1H)；7．72(d，J=7．6，1H)；7．8(d，J=7．6，1H)；7．86(s，1H)；7．92(d，J=8．2Hz，1H)；8．86(s，1H)。MS463(M+1)。HRMS463．1634(理论值463．1633)。
实施例8(+)-(3R，3aS，4S，4aR，8aS，9aR)-十氢-4-[(E)-2-(6-乙基-2-吡啶基)乙烯基]-3-甲基萘并[2，3-c]呋喃-1(3H)-酮 步骤1制备 用类似于实施例1步骤8的方法，用磷酰氯二乙酯处理2-氯-6-甲基吡啶得到清澈的油状物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1．34(t，6H，J=7Hz)，3．43(d，2H，J=22Hz)，4．15(dq，4H，J=7，7Hz)，7．27(dd，1H，J=8，2Hz)，7．38(dd，1H，J=8，2Hz)，7．66(t，1H，J=8Hz)；MS(FAB)m／z 264(MH+，100％)。
步骤2制备 向步骤1产物(5．24g，19．9mol)的无水THF(100ml)溶液中，加入Pd(PPh3)4(1．2g，1．0mmol)和乙烯基三丁基锡(8．72ml，29．9mmol)。将此混合物在密封的耐压管中在氩气氛下在120℃加热16小时。用10％氢氧化钠和碳酸氢钠固体中和水层，并用二氯甲烷萃取。将此有机层干燥(硫酸镁)并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(40∶60，然后80∶20)作为洗脱剂进行闪式色谱，得到所需产物(3．66g，72％)，清澈油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1．32(t，6H，J=7Hz)，3．48(d，2H，J=22Hz)，4．15(dq，4H，J=7，7Hz)，5．52(d，1H，J=11Hz)，6．26(d，1H，J=17Hz)，6．85(dd，1H，J=17，11Hz)，7．26-7．34(m，2H)，7．66(t，1H，J=8Hz)；MS(Cl)m／z256(MH+，100％)；C12H18NO3P·0．5H2O元素分析，理论值C，54．54；H，7．25；N，5．30；P，11．72。实测值C，54．80；H，7．21；N，5．34；P，11．87。
步骤3制备 向步骤2产物(3．58g，14．0mmol)的搅拌的甲醇(100ml)溶液中，加入5％Pd／C(0．36g)。将此混合物室温下在氢气(1atm)中搅拌16小时。将此混合物用乙酸乙酯稀释并用10％盐酸萃取。滤出固体并用甲醇洗涤。合并滤液和洗涤液并真空浓缩，得到所需产物(3．56g，99％)，为清澈的油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1．32(t，6H，J=7Hz)，1．34(t，3H，J=7．6Hz)，2．84(q，2H，J=7．6Hz)，3．44(d，2H，J=22Hz)，4．13(dq，4H，J=7，7Hz)，7．08(d，1H，J=7．6Hz)，7．25(d，1H，J=7．6Hz)，7．59(t，1H，J=7．6Hz)；MS(Cl)m／z258(MH+，100％)；C12H20NO3P·0．5H2O元素分析，理论值C，54．13；H，7．95；N，5．26；P，11．63。实测值C，54．19；H，7．95；N，5．25；P，11．65。
步骤4用类似于实施例1步骤9的方法，将步骤3的产物与实施例1步骤6的产物混合，得到标题化合物，为白色胶状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0．78-2．01(m，12H)，1．36(t，3H，J=7．6Hz)，1．49(d，3H，J=6Hz)，2．36-2．43(m，2H)，2．70-2．78(m，1H)，2．86(q，2H，J=7．6Hz)，4．77-4．85(m，1H)，6．47-6．58(m，2H)，7．06(d，1H，J=7．6Hz)，7．11(d，1H，J=7．6Hz)，7．59(t，1H，J=7．6Hz)。
盐酸盐米色固体；[α]22D=+21．3°(c0．41，甲醇)；MS(ESI)m／z340(MH+，100％)。C22H29NO2·HCl·1．50H2O元素分析，理论值C，65．58；H，8．25；N，3．48。实测值C，65．54；H，8．40；N，3．68。
实施例9、9A和9B 实施例9，步骤1用类似于实施例1步骤7的方法，用三异丙基甲硅烷基氯处理3-羟基-6-甲基吡啶。
步骤2用类似于实施例步骤8的方法，用磷酰氯二乙酯处理步骤1的产物。
步骤3 用类似于实施例1步骤9的方法，将步骤3的产物和实施例1步骤6的产物混合，得到所需产物(Tips是三异丙基甲硅烷基)，为白色固体；MS(FAB)m／z 484(MH+，100％)。
步骤4按照实施例1步骤10的描述处理步骤3的产物，得到实施例9的产物。盐酸盐，为米色固体；MS(CI)m／z 342(MH+，100％)。
实施例9A，步骤1 向实施例9产物(30mg，0．092mmol)和三乙胺(64ml，0．46mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中，室温下加入三氟甲磺酸酐(46ml，0．28mmol)，并将此混合物搅拌10分钟，然后用水洗涤。将此有机层干燥(硫酸镁)并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(40∶60)作为洗脱剂进行闪式色谱，得到所需的三氟甲磺酸酯(42mg，100％)。盐酸盐，淡黄色固体。MS(FAB)m／z 460(MH+，100％)。
步骤2向步骤1产物(37mg，0．081mmol)和对甲氧基苯基硼酸(24mg，0．16mmol)的甲苯(2ml)溶液中，加入乙醇(0．5ml)、存在于水(1ml)中的碳酸钾(44mg，0．32mmol)和Pd(PPh3)4(9mg，0．008mmol)。将此混合物在密闭的耐压管中在氩气氛下在120℃加热16小时。将此混合物用乙酸乙酯稀释，用5％氢氧化钠和盐水洗涤，干燥(硫酸镁)并真空浓缩。将此残余物用乙酸乙酯∶己烷(40∶60)作为洗脱剂进行制备TLC分离，得到9A(24mg，71％)。盐酸盐为白色固体。MS(CI)m／z418(MH+，100％)。
实施例9B将实施例9产物(33mg，0．10mmol)、4-(三氟甲基)苄基溴(36mg，0．15mmol)和碳酸钾(42mg，0．30mmol)在丙酮(2ml)中的混合物，在回流温度下搅拌3小时。滤出固体并用乙酸乙酯洗涤。将此滤液和洗涤液合并并真空浓缩。将此残余物用乙酸乙酯∶己烷(40∶60)作为洗脱剂进行制备TLC分离，得到9B(41mg，85％)。盐酸盐为米色固体。MS(CI)m／z 486(MH+，100％)。
实施例10、10A、10B
实施例9偶合方法的另一种选择方法A 在密闭耐压管中，在氮气氛下，在80℃，将10(a)(类似于实施例9A步骤1，用适当的起始物制备，460mg，1．00mmol)、二硼频哪醇酯(305mg，1．20mmol)、醋酸钾(294mg，3．00mmol)、1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁(55mg，0．10mmol)和二氯[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(Ⅱ)二氯甲烷加成物(82mg，0．10mmol)在1，4-二噁烷(5ml)中的混合物，加热2小时。将此混合物冷却至室温。向此混合物中加入1-溴-3-氯-苯(235μL，2．00mmol)、磷酸钾(636mg，3．00mmol)、二氯[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(Ⅱ)二氯甲烷加成物(41mg，0．050mmol)和1，4-二噁烷(5ml)。将此混合物在密闭的耐压管中在氮气氛下在80℃加热16小时。将此混合物在氯化铵(饱和)和乙酸乙酯之间分配。将有机层用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(20∶80，然后25∶75)作为洗脱剂进行闪式色谱，得到(+)-实施例10化合物(360mg，85％)，为米色固体。盐酸盐米色固体；MS(FAB)m／z 422(MH+，100％)。
方法B10A在密闭的耐压管中，在氮气氛下，在120℃，将10(a)(46mg，0．10mmol)、2-三丁基甲锡烷基噻唑(112mg，0．30mmol)和四(三苯基膦)钯(12mg，0．010mmol)在N-甲基吡咯烷酮(1ml)中的混合物，加热20小时。将此混合物在水和乙醚之间分配。将此有机层用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(30∶70)作为洗脱剂进行制备TLC分离，得到实施例10A化合物(17mg)。MS395(MH+)。
10B用类似的方法制备实施例10B化合物MS392(MH+)。
实施例11 向实施例1L(20mg，0．058mmol)和苯基硼酸(14mg，0．12mmol)的甲苯(2ml)溶液中，加入乙醇(0．5ml)、在水(1ml)中的碳酸钾(32mg，0．23mmol)和Pd(PPh3)4(7mg，0．006mmol)。将此混合物在密闭的耐压管中在氩气氛下在120℃加热16小时。将此混合物用乙酸乙酯稀释，用5％氢氧化钠和盐水洗涤，干燥(硫酸镁)并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(20∶80)作为洗脱剂进行制备TLC分离，得到标题化合物(10mg，71％)。盐酸盐，为米色固体。MS(CI)m／z 388(MH+，100％)。
实施例12 在密封的耐压管中，在氩气氛下，在120℃，将实施例1L(333mg，0．963mmol)与乙烯基三正丁基锡(424μL，1．44mmol)和Pd(PPh3)4(62mg，0．05mmol)在THF(10ml)中加热16小时。将此混合物用乙酸乙酯稀释，用氯化铵(饱和)和盐水洗涤，干燥(硫酸镁)并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(20∶80)作为洗脱剂进行闪式色谱，得到标题化合物(281mg，86％)，为白色固体。MS(CI)m／z 338(MH+，100％)。
实施例13 向ZnCl2(0．96ml，0．5M在THF中)的溶液中，在-78℃下，加入异丁基氯化镁(0．22ml，2．0M在乙醚中)。将此混合物在-78℃至室温下搅拌1小时。向所得混合物中加入实施例1L(30mg)和Pd(PPh3)4(10mg)。在密封的耐压管中，在氩气氛下，在120℃，将此混合物加热2．5小时。将此混合物用乙酸乙酯稀释，用氯化铵(饱和)洗涤，干燥(硫酸镁)并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(20∶80)作为洗脱剂进行制备TLC分离，得到标题化合物(16mg)，为盐酸盐，是白色固体。MS(FAB)m／z 368(MH+，100％)。
实施例14 在密封的耐压管中，在氩气氛下，在190℃，将实施例1L(20mg，0．058mmol)和哌啶(0．5ml)加热13小时。将此混合物用乙酸乙酯稀释，用碳酸氢钠(饱和)和盐水洗涤，干燥(硫酸镁)并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(30∶70)作为洗脱剂进行制备TLC分离，得到标题化合物(15mg，66％)。盐酸盐，为白色固体。MS(CI)m／z395(MH+，100％)。
实施例15 向ZnCl2(0．95ml，0．44mmol，0．5M在THF中)的溶液中，在-78℃下，加入苄基氯化镁(0．44ml，0．44mmol，1．0M在乙醚中)。将此混合物在-78℃至室温下搅拌1小时。向所得混合物中加入实施例9A步骤1的产物(40mg，0．087mmol)和Pd(PPh3)4(10mg，0．009mmol)。在密封的耐压管中，在氩气氛下，在120℃，将此混合物加热16小时。将此混合物用乙酸乙酯稀释，用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(30∶70)作为洗脱剂进行制备TLC分离，得到标题化合物(34mg，97％)。盐酸盐，是米色固体。MS(FAB)m／z 402(MH+，100％)。
实施例16、16A、16B和16C
步骤1 将6(3．15g)和SeO2(3．10g)在1，4-二噁烷(50ml)和吡啶(5ml)中的混合物，在密封耐压管中，在100℃下，加热1小时。将此混合物冷却至室温，过滤，并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(30∶70)作为洗脱剂进行闪式色谱，得到37B(950mg)和37A(1．05g)。
步骤2 将37A(1．05g)和PtO2(250mg)在乙酸乙酯(70ml)中的混合物，在氢气氛下，在室温下搅拌16小时。将此混合物过滤并真空浓缩滤液得到所需产物(670mg，85％)。
步骤3 将步骤2产物(670mg)和AC2O(2ml)在吡啶(5ml)中的混合物，室温下搅拌16小时。将此混合物倒入稀盐酸溶液和冰的混合物中，并搅拌1小时。将所得混合物用乙醚萃取。用盐水洗涤此有机层，干燥，并真空浓缩得到所需产物(700mg)。
步骤4 按照类似于实施例1步骤6和9所述的方法，用适当的磷酸酯处理上述步骤3的产物，得到所需化合物。
步骤5将步骤4产物(100mg)、氢氧化钠(10％，2ml)和甲醇(2ml)在THF中的混合物，在0℃下搅拌3小时。用饱和氯化铵溶液中和此混合物并用乙醚萃取。用盐水洗涤此有机层，干燥并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(45∶55，然后50∶50)作为洗脱剂进行闪式色谱，得到标题产物(25mg)。MS(FAB)m／z 472(MH+，100％)。
按照实施例16步骤4-5的方法，使用适当的磷酸酯制备化合物16A和16B 16AMS(ESI)m／z 438(MH+，100)；16BMS(ESI)m／z 438(MH+，100)。
用实施例16步骤2-5的方法，使用起始物37B，制备了如下化合物16C 16CMS(FAB)m／z 472(MH+，100)。
实施例17和17A 室温下，将Jones试剂加入到实施例16产物的盐酸盐(20mg)的丙酮(5ml)溶液中，直到红色持续不变。用乙醇停止反应并用乙醚萃取。用盐水洗涤此有机层，干燥并真空浓缩得到标题化合物(20mg)。MS(FAB)m／z 470(MH+，100)。
通过本领域技术人员已知的方法，由实施例17的化合物可以制备如下化合物 通过本领域技术人员已知的方法，由17A可以制备如下化合物 实施例18、18A、18B、18C和18D 在0℃，将DAST(二乙基氨基三氟化硫)(2-3滴)加入到实施例16产物(12mg)的二氯甲烷(2ml)溶液中，并将此混合物升温至室温。将此混合物用碳酸氢钠溶液(饱和)和盐水洗涤，干燥并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(35∶65)作为洗脱剂进行闪式色谱，得到标题产物(8mg)。MS(ESI)m／z 474(MH+，100)。
用实施例18的方法，用实施例16C的产物作为起始物，制备化合物18A；类似地，用适当的起始物，也可以制备化合物18B、18C和18D 18AMS(FAB)m／z454(MH+，100)。
18BMS(ESI)m／z440(MH+，100)。
18CMS(ESI)m／z474(MH+，100)。
18DMS(ESI)m／z440(MH+，100)。
实施例19 将DAST(250ml)加入到实施例17产物(60mg)的二氯甲烷(5ml)溶液中，并在室温下将此混合物搅拌3天。将此混合物用饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，干燥并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(35∶65)作为洗脱剂进行闪式色谱，得到标题产物。MS(FAB)m／z 492(MH+，100)。
实施例20、20A和20B 步骤1 在-78℃，将DAST加入到化合物37B(180mg)的二氯甲烷溶液中，并搅拌15分钟。将此混合物用饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，干燥并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(10∶90)作为洗脱剂进行闪式色谱，得到所需产物(100mg)。
按照类似于实施例16步骤2和4描述的方法处理步骤1的产物，得到标题化合物。MS(ESI)m／z 474(MH+，100)。
在上述方法中，用适当的磷酸酯制备20A；用4C的方法，由实施例18的产物制备化合物20B 20AMS(CI)m／z440(MH+，100)。
20BMS(ESI)m／z490(MH+，100)。
实施例21 将实施例16的产物(30mg，0．063mmol)在SOCl2(1ml)中回流3小时。将此混合物真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(30∶70)作为洗脱剂进行制备TLC，得到标题产物(13mg)。MS(FAB)m／z 490(MH+，100)。
实施例22、22A 22将MeMgBr(0．1ml，1．4M)加入到实施例17产物(50mg)的无水THF(3ml)溶液中，并在室温下搅拌几分钟。用饱和氯化铵溶液中和此混合物并用乙醚萃取。用盐水洗涤此有机层，干燥并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(40∶60)作为洗脱剂进行闪式色谱，得到标题产物(10mg)。MS(FAB)m／z 486(MH+，100)。
22A以类似于22A的方法，用实施例4产物制备22A。
MS(FAB)m／z454(MH+，100)。
实施例23、23A、23B 在-78℃下，将正丁基锂(0．15ml，0．22mmol)加入到二异丙基胺(0．060ml，0．22mmol)的无水THF溶液中，并搅拌几分钟。在-78℃下，加入实施例17产物(40mg，0．10mmol)的无水THF(2ml)溶液，并搅拌15分钟。在-78℃下，加入(10-樟脑磺酰基)氧杂氮丙啶(46mg，0．20mmol)的无水THF(2ml)溶液，并搅拌至室温(2小时)。用饱和氯化铵溶液中和此混合物并用乙醚萃取。将此有机层用盐水洗涤，干燥并真空浓缩。将此残余物在硅胶柱上用乙酸乙酯∶己烷(60∶40，然后70∶30)作为洗脱剂进行闪式色谱，得到标题产物(10mg)。MS(ESI)m／z 486(MH+，100)。
按照类似于实施例5B描述的方法处理实施例23的产物，得到如下化合物 23AMS(FAB)m／z488(MH+，100)。
23BMS(FAB)m／z488(MH+，100)。
实施例24 步骤1 见J．Organomettallic Chem．，521(1996)pp203-210；J．Org．Chem．，47(1982)，pp2825-2832。
步骤2 将步骤1的产物(27．5g，0．1255mol)溶解于DMF(400ml)中，并依次加入丙烯酸甲酯(23ml，0．251mol)、三乙胺(52．25ml，0．3765mol)和Pd(PPh3)4(4．37g，5mol％)。将此混合物在75℃下加热16小时。将此反应混合物与氯化铵(饱和)混合，用乙醚萃取并干燥(硫酸镁)。将此萃取物真空浓缩并将此残余物进行色谱(9∶1-4∶1己烷／乙酸乙酯)，得到20g(71％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3)δ1．78(t，J=6．5Hz，2H)，2．38(s，2H)，2．44(m，2H)，3．74(s，3H)，4．0(s，4H)，5．73(d，J=15Hz，1H)，6．17(br s，1H)，7．36(d，J=15Hz，1H)。
步骤3 将步骤2产物(20g，0．089mol)溶解于THF／甲醇的1∶1混合物(共520ml)中。缓慢加入1M氢氧化钠溶液(260ml)。将此混合物搅拌4小时并加入水。将此混合物用乙醚洗涤，将此水层酸化至pH为1，并用乙酸乙酯(×3)萃取，将合并的萃取物干燥(硫酸镁)并将此溶液真空浓缩，得到19g(99％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3)δ1．79(t，J=6．5Hz，2H)，2．40(s，2H)，2．46(m，2H)，4．01(m，4H)，5．73(d，J=15．7Hz，1H)，6．23(s，1H)、7．41(d，J=15．7Hz，1H)。
步骤4 将实施例1步骤2的产物(23．28g，0．114mol)溶解于THF(232ml)中并加入Lindlar′s氢化催化剂(3．48g)。将此混合物置于1 atm氢气压下并搅拌2．5小时。将此混合物过滤并真空浓缩得到所需化合物(22g，93％)。
1H NMR(CDCl3)δ1．32(d，J=6．5Hz，3H)，5．09(m，1H)，5．17(s，2H)，5．86(d，J=11．7Hz，1H)，6．30(dd，J=11．7，7．0Hz，1H)，7．38(s，5H)。
步骤5 将步骤3产物(18g，0．0856mol)溶解于二氯甲烷(350ml)并冷却至0℃。加入1，3-二环己基碳二亚胺(23．23g，0．112mol)，随后加入4-吡咯烷基吡啶(1．39g，9．4mmol)。搅拌5分钟后，在10分钟内，加入步骤4产物(22g，0．1067mol)的二氯甲烷(127ml)溶液。将此混合物在0℃搅拌2小时并在室温下搅拌1小时。然后，将此混合物过滤，真空浓缩，并将此残余物进行柱色谱(9∶1-4∶1己烷／乙酸乙酯作为洗脱剂)，得到27g油状物。将此产物溶解于二甲苯(300ml)中，并在215℃下加热7小时。进行柱色谱(9∶1-4∶1-2∶1己烷／乙酸乙酯作为洗脱剂)，得到13．2g油状物。将此油状物溶解于THF(264ml)中并加入DBU(4．9ml，0．033mol)。将此混合物搅拌1小时，用乙酸乙酯(500ml)稀释，用氯化铵(饱和)洗涤，干燥(硫酸镁)，真空浓缩，通过二氧化硅垫(1英寸)过滤(用乙酸乙酯洗脱)，并真空浓缩得到所需化合物(13g，38％)。
1H NMR(CDCl3)δ1．10(d，J=6．0Hz，3H)，1．2(m，1H)，1．65-1．85(m，2H)，1．92(m，1H)，2．35(m，1H)，2．47(m，1H)，2．59(dd，J=10．75，4．0Hz，1H)，2．70(m，1H)，(q，J=2．5Hz，1H)，3．85-4．0(m，5H)，4．45(m，1H)，5．15(AB quartet，J=12．0，10．5Hz，2H)，5．36(br s，1H)，7．35(s，5H)。
步骤6
将步骤5产物(4．92g，0．0123mol)溶解于乙酸乙酯(250ml)中，加入10％钯／碳(492mg)并将此混合物在1atm氢气压下搅拌1小时。将此混合物通过硅藻土板过滤，向此滤液中加入Pt2O(492mg)，并将此混合物在1atm氢气压下搅拌16小时。然后将此混合物过滤并真空浓缩，得到3．81g(99％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3)δ1．25(m，2H)，1．35(d，J=6．5Hz，3H)，1．3-1．5(m，3H)，1．6(m，1H)，1．7-1．95(m，3H)，2．5(m，1H)，2．58(m，1H)，2．68(m，1H)，3．95(m，5H)，4．69(m，1H)。
步骤7 将步骤6产物(1g，3．2mmol)溶解于甲苯(20ml)中，加入SOCl2(1．25ml)，并将此混合物在80℃下加热16小时。将此混合物真空浓缩，溶解于新鲜的甲苯(16ml)中并冷却至0℃。加入Pd(PPh3)4(186mg)，随后加入三丁基氢化锡(1．3ml，4．8mmol)。将此混合物搅拌3小时，然后进行色谱(4∶1-2．5∶1己烷∶乙酸乙酯)得到450mg(48％)所需化合物。
1H NMR(CDCl3)δ1．24(d，J=6．5Hz，3H)，1．0-1．9(m，10H)，2．48(m，1H)，2．6-2．7(m，2H)，3．87(m，4H)，4．54(m，1H)，9．70(br s，1H)。
步骤8将实施例4步骤3的产物(1．14g，3．0mmol)溶解于THF(10ml)中，并冷却至0℃。加入正丁基锂(1．9ml的2．5M己烷溶液，2．9mmol)，并将此混合物搅拌10分钟。然后在0℃将此溶液加入到步骤7产物(450mg，1．53mmol)的THF(10ml)溶液中。将此混合物搅拌2小时，然后加入氯化铵(饱和)。将此混合物萃取(乙酸乙酯)，干燥(硫酸镁)，真空浓缩，并再进行色谱(60∶40己烷∶乙酸乙酯)得到650mg(83％)的标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ1．12-1．55(m，6H)，1．43(d，J=6Hz，3H)，1．78(m，2H)，1．79(m，1H)，1．96(dd，J=6．5，3．0Hz，1H)，2．9(m，2H)，2．70(quintet，J=6．5Hz，1H)，3．95(m，4H)，4．76(m，1H)，6．55(d，J=155Hz，1H)，6．65(m，1H)，7．29(d，J=8．0Hz，1H)，7．60(t，J=7．5Hz，1H)，7．66(d，J=7．5Hz，1H)，7．75(d，J=7．5Hz，1H)，7．80(s，1H)，7．86(d，J=8．0Hz，1H)，8．79(s，1H)。
按照如下方法处理实施例24的产物得到实施例24A、24B-1、24B-2和24C 24A将实施例24的产物(650mg，1．26mmol)溶解于丙酮(7．5ml)，并加入HCl(7．5ml的1M溶液)。将此混合物在50℃加热16小时。加入碳酸氢钠(饱和)并用乙酸乙酯萃取此混合物。将合并的萃取物干燥(硫酸镁)，真空浓缩并进行色谱(1∶1己烷∶乙酸乙酯)得到590mg(99％)化合物24A。
1H NMR(CDCl3)δ1．2-1．5(m，2H)，1．47(d，J=7．0Hz，3H)，1．65(m，2H)，2．08(m，2H)，2．10(m，2H)，2．3-2．5(m，4H)，2．74(quintet，J=6．5Hz，1H)，4．80(m，1H)，6．59(d，J=6．5Hz，1H)，6．72(m，1H)，7．28(d，J=8．0Hz，1H)，7．61(t，J=7．5Hz，1H)，7．66(d，J=7．5Hz，1H)，7．76(d，J=7．5Hz，1H)，7．81(s，1H)，7．87(d，J=8．0Hz，1H)，8．80(s，1H)。
24B-1和24B-2将实施例24A产物(100mg，0．213mmol)溶解于乙醇(8ml)中并加入硼氢化钠(30mg)。5分钟后，加入碳酸氢钠(饱和)并用乙酸乙酯萃取此混合物。将萃取物干燥(硫酸镁)并真空浓缩。通过制备TLC纯化(47．5∶47．5∶5己烷∶乙酸乙酯∶甲醇)得到极性最小的异构体。
24B-1(15mg，15％)1H NMR(CDCl3)δ1．15-1．4(m，4H)，1．43(d，J=6．0Hz，3H)，1．5-1．7(m，3H)，1．75-1．95(m，3H)，2．35-2．5(m，2H)，2．72(quintet，J=6．6Hz，1H)，4．16(br s，1H)，4．75(m，1H)，5．46，J=15．5Hz，1H)，6．65(m，1H)，7．29(d，J=8．0Hz，1H)，7．60(t，J=8Hz，1H)，7．66(d，J=7．5Hz，1H)，7．76(d，J=7．5Hz，1H)，7．80(s，1H)，7．85(d，J=8．0Hz，1H)，8．79(s，1H)；and the most polarisomer，24B-2(70mg，70％)1H NMR(CDCl3)δ0．93(m，1H)，1．06-1．4(m，5H)，1．43(d，J=6．0Hz，3H)，1．85-2．05(m，4H)，2．40(m，2H)，2．70(quintet，J=6．5Hz，1H)，3．64(m，1H)，4．75(m，1H)，6．55(d，J=15．5Hz，1H)，6．64(m，1H)，7．29(d，J=8．0Hz，1H)，7．60(t，J=7．75Hz，1H)，7．65(d，J=7．5Hz，1H)，7．75(d，J=7．5Hz，1H)，7．80(s，1H)，7．85(d，J=8．0Hz，1H)，8．79(s，1H)。
24C将24A产物(30mg，0．0638mmol)溶解于THF(1ml)中。加入CH3MgBr(150μL的1M溶液)。TLC显示出更具极性的化合物。加入氯化铵(饱和)并用乙酸乙酯萃取此混合物。将萃取物干燥(硫酸镁)并真空浓缩。将此残余物通过制备TLC(30∶70己烷∶乙酸乙酯)纯化得到6mg的所需化合物。MS(FAB)m／z 486(100)。
用类似的方法，制备下列结构式的化合物，其中变量在表中定义
下列制剂例举了本发明的一些剂型。其中术语“活性化合物”指式Ⅰ的某种化合物。
实施例A-片剂序号组分 mg／片 mg／片1 活性化合物 1005002乳糖USP 1221133玉米淀粉，食品级，30 40为纯水的10％糊4玉米淀粉，食品级 45 405 硬脂酸镁 3 7共 300700制备方法在适当的混合器中将1和2混合10-15分钟。用3将此混合物制粒。如果需要，通过粗筛(例如，1／4″，0．63cm)将此湿颗粒磨碎。将此湿颗粒干燥。如果需要将干燥的颗粒过筛并与4混合，并混合10-15分钟。将5加入并混合1-3分钟。用适当的制片机将此混合物压制到适当的大小和重量。
实施例B-胶囊序号组分mg／片mg／片1活性化合物 100 5002乳糖USP 106 1233玉米淀粉，食品级40704硬脂酸镁NF 4 7共 250 700制备方法将1、2和3在适当的掺合机中混合10-15分钟。加入4并混合1-3分钟。用适当的制胶囊机将此混合物填入适当的两片硬明胶胶囊中。
式Ⅰ的化合物的活性可以通过下列方法确定。
凝血酶受体拮抗剂的体外实验方法制备[3H]haTRAP将A(pF-F)R(ChA)(hR)(I2-Y)-NH2(1．03mg)和10％钯／碳(5．07mg)悬浮于DMF(250μL)和二异丙基乙胺(10μl)中。将此容器与氚线连接，在液氮中冷冻并抽空。然后向此瓶中加入氚气(342mCi)，将其室温下搅拌2小时。反应完毕后，除去过量的氚并用DMF(0．5ml)稀释反应后的肽溶液并过滤除去催化剂。所收集的粗肽的DMF溶液用水稀释并冻干除去不稳定的氚。将此固体肽再溶解于水中并重复上述冻干方法。将氚化的肽([3H]haTRAP)溶解于0．5ml TFA的0．1％水溶液，并用下述条件通过HPLC纯化柱，Vydac C18，25cm x 9．4mmI．D．；流动相，(A)0．1％TFA水溶液，(B)0．1％TFA乙腈溶液；梯度，在30分钟内(A／B)由100／0至40／60；流速，5ml／分钟；检测，215nm UV。通过HPLC分析[3H]haTRAP的放射化学纯度为99％。在18．4Ci／mmol的特异活性上得到14．9mCi的一批。
制备血小板膜用改良的NataRajan等人的方法(NataRajan等，Int．J．Peptide Protein Res．45145-151(1995))，由得自North Jersey血液中心(East Orange，NJ)的20单位的血小板浓缩物制备血小板膜，该血小板浓缩物是在48小时内采集的。所有步骤在4℃下在允许的生物危害安全条件下进行。在4℃，将血小板以100×g离心20分钟除去红细胞。倾析上清液并以3000×g离心15分钟使血小板成丸。将血小板再悬浮于10mM Tris-HCl，pH 7．5、150mM氯化钠、5mM EDTA，总体积为200ml，并以4400×g离心10分钟。将此步骤再重复两次。将血小板再悬浮于5mM Tris-HCl，pH 7．5、5mM EDTA至最终体积为约30ml，并在Dounce均浆器中以20冲程均化。以41000×g将膜成丸，再悬浮于40-50ml的20mM Tria-HCl，pH 7．5、1mM EDTA、0．1mM二硫苏糖醇，并每10ml一份在液氮中冷冻并在-80℃下保存。为了完成膜制备，将各份解冻，收集，并用Dounce均浆器均化5个过程。将膜成丸并在10mM三乙醇胺-HCl，pH 7．4、5mM EDTA中洗涤3次，并再悬浮于20-25ml的50mM Tris-HCl，pH 7．5、10mM氯化镁、1mMEGTA和1％DMSO中。将等份的膜在液氮中冷冻并保存于-80℃。膜在至少3个月内是稳定的。20单位的血小板浓缩物一般得到250mg的膜蛋白。通过Lowry检测(Lowry等，J．Biol．Chem．，193265-275(1951))检测蛋白浓度。
高流通量凝血酶受体放射配体结合实验用改良的Ahn等的凝血酶受体放射配体结合检测方法(Ahn等，Mol．Pharmacol．，51350-356(1997))来筛选凝血酶受体拮抗剂。此实验在96孔Nunc板(批号269620)中以最终检测体积200μl进行。在结合缓冲液(50mM Tris-HCl，pH 7．5、10mM氯化镁、1mM EGTA、0．1％BSA)中将血小板膜和[3H]haTRAP分别稀释至0．4mg／ml和22．2nM。将被测化合物的贮存液(10mM在100％DMSO中)在100％DMSO中进一步稀释。除非另外说明，将10μl的稀释后化合物溶液和90μl放射配体(在5％DMSO中最终浓度为10nM)加入到每个孔中，并通过加入100μl膜(40μg蛋白／孔)开始反应。该结合不被5％DMSO显著抑制。化合物的检测浓度有三个(0．1、1和10μM)。室温下，将板盖上并在Lab-Line滴定板振摇器(Titer Plate Shaker)上轻轻旋涡式混合。在0．1％聚乙撑亚胺中将Packard UniFilter GF／C过滤器板浸泡至少1小时。用Packard FilterMate Universal收集器收集孵育后的膜，并用300μl冰冷的50mM Tris-HCl，pH 7．5、10mM氯化镁、1mM EGTA快速洗涤四次。向每个孔中加入MicroScint 20闪烁混合物(25μl)，并在Packard TopCount微量板闪烁计数器中将这些板计数。将特异性结合定义为总结合减去在过量的(50μM)未标记haTRAP存在下观察到的非特异性结合。化合物[3H]haTRAP结合凝血酶受体的抑制百分率由下列关系计算％抑制=[(总结合-在被测化合物存在下的结合)／(总结合-非特异性结合)]×100材料
A(pF-F)R(ChA)(hR)Y-NH2和A(pF-F)R(ChA)(hR)(I2-Y)-NH2，由AnaSpec Inc．(San Jose，CA)常规合成。这些肽的纯度大于95％。氚气(97％)购自EG&G Mound，Miamisburg Ohio。将此气体随后载到并保存在IN／US Stystems Inc．Trisorber上。MicroScint 20闪烁混合物得自Packard Instrument Co．。
弥猴全血的间接体内血小板凝集的原始记录给药和采血让清醒的坐着的弥猴平衡30分钟。将细导管插入臂静脉以输注被测药物。将另一个细导管插入另一个臂或隐静脉并用于采集血样。在混合物是口服给药的实验中，只使用一个插管。将基线血样(1-2ml)收集于含凝血酶抑制剂CVS 2139(100μg／0．1ml生理盐水)作为抗凝剂的负压管中。然后，在30分钟内静脉输注药物。在5、10、20、30分钟并在给药结束后30、60、90分钟采集血样(1ml)。在PO实验中，用管饲插管给动物用药。给药后第0、30、60、90、120、180、240、300、360分钟采集血样。将0．5ml血液用于全血凝集而另外的0．5ml血液用于检测药物或其代谢物的血浆浓度。在血样采集后立即如下所述进行凝集实验。
全血凝集将0．5ml血样加入到0．5生理盐水中并在Chronolog全血凝集检测器中升温至37℃。同时，在生理盐水中将阻抗电极升温至37℃。将带有搅拌棒的血样置于加热井中，将阻抗电极置于此血样中并开始收集软件。此软件运行至基线稳定，然后进行20Ω校准检测。20Ω相当于计算机软件所制图像中的4个条框。通过可调体积加样器(5-25μl)加入激动剂(haTRAP)，并记录凝集曲线10分钟。激动剂使用后6分钟达到了最大凝集值。
体外血小板凝集方法按照Bednar等的方法(Bednar，B．，Condra，C．，Gould，R．J．和Connolly，T．M．，Throm．Res．，77=453-463(1995))进行血小板凝集研究。通过静脉穿刺用ACD作抗凝剂，采集健康人的血液，他们至少7天没有服用阿斯匹林。通过在15℃以100×g离心15分钟制备血小板富集的血浆。以3000×g沉淀血小板，并在含1mM EGTA和20μg／ml腺苷三磷酸双磷酸酶的缓冲盐水洗涤两次以抑制凝集。在补充了0．2mg／ml人纤维蛋白原的缓冲盐水中室温下进行凝集。在96孔平底板中将被测化合物和血小板预孵育60分钟。通过加入0．3μMhaTRAP或0．1U／ml凝血酶引起凝集并用Lab Line滴定板振摇器(速度7)快速旋转式摇动此混合物。在Spectromax滴定板读数器中以405nm处透光度的增加来监控凝集百分率。
体内抗肿瘤方法在裸鼠的人乳腺癌模型中，按照S．Even-Ram等，NatureMedicine，4，8(1988)，p．909-914中报告的方法进行实验。
用上述体外凝血酶受体拮抗剂实验中的检测方法，发现本发明化合物的IC50(即，凝血酶受体50％抑制的浓度)为约4至2000nM，其中优选的化合物具有IC50值为约4至100nM。
在体外血小板凝集抑制(PAI)实验中，发现被测化合物具有的IC50值为67至1000nM。在间接体内弥猴全血PAI中，一个被测化合物在3mpk显示了100％凝集(以β-羟丙基环糊精作为共溶剂口服)，而另一个化合物在10mpk(在30分钟内静脉输注，存在于5％葡萄糖中)显示了100％凝集。
权利要求
1．下式所示化合物或其药用盐， 其中单虚线表示选择性存在的双键；双虚线表示选择性存在的单键；n是0-2；Q是 其中n1和n2独立地为0-2；或当双键不存在时，Q也是稠合的R-取代的芳基或R-取代的杂芳基；R是独立地选自H、C1-C6烷基、卤素、羟基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、(C1-C6)二烷基氨基、(C1-C6)烷氧基、-COR16、-COOR17、-SOR16、-SO2R16、-NR16COR16a、-NR16COOR16a、-NR16CONR4R5、氟-(C1-C6)烷基、二氟(C1-C6)烷基、三氟(C1-C6)烷基、C3-C6环烷基、C2-C6链烯基、芳基(C1-C6)烷基、芳基(C2-C6)链烯基、杂芳基(C1-C6)烷基、杂芳基(C2-C6)链烯基、羟基(C1-C6)烷基、氨基(C1-C6)烷基、芳基和硫代(C1-C6)烷基的1至3个取代基；R1和R2独立地选自H、C1-C6烷基、氟(C1-C6)烷基、二氟(C1-C6)烷基、三氟(C1-C6)烷基、C3-C6环烷基、C2-C6链烯基、芳基(C1-C6)烷基、芳基(C2-C6)链烯基、杂芳基(C1-C6)烷基、杂芳基(C2-C6)链烯基、羟基(C1-C6)烷基、氨基(C1-C6)烷基、芳基和硫代(C1-C6)烷基；或R1和R2一起形成=O基团；R3是H、羟基、(C1-C6)烷氧基、-SOR16、-SO2R17、-C(O)OR17、-C(O)NR18R19、C1-C6烷基、卤素、氟(C1-C6)烷基、二氟(C1-C6)烷基、三氟(C1-C6)烷基、C3-C6环烷基、C2-C6链烯基、芳基(C1-C6)烷基、芳基(C2-C6)链烯基、杂芳基(C1-C6)烷基、杂芳基(C2-C6)链烯基、羟基(C1-C6)烷基、氨基(C1-C6)烷基、芳基和硫代(C1-C6)烷基；Het是5至14个原子的单、二或三环杂芳基，其中含有1至13个碳原子和1至4个杂原子，杂原子独立地选自N、O和S，其中环氮原子可以形成N-氧化物或与C1-C4烷基形成季铵基团，其中Het通过环碳原子与B连接，且其中Het基团被1至4个取代基W取代，该取代基独立地选自H；C1-C6烷基；氟(C1-C6)烷基；二氟(C1-C6)烷基；三氟(C1-C6)烷基；C3-C6环烷基；杂环烷基；被C1-C6烷基或C2-C6链烯基取代的杂环烷基；C2-C6链烯基；R21-芳基(C1-C6)烷基；R21-芳基-(C2-C6)链烯基；杂芳基(C1-C6)烷基；杂芳基(C2-C6)链烯基；羟基(C1-C6)烷基；二羟基(C1-C6)烷基；氨基(C1-C6)烷基；(C1-C6)烷基氨基-(C1-C6)烷基；二-((C1-C6)烷基)-氨基(C1-C6)烷基；硫代(C1-C6)烷基；C1-C6烷氧基；C2-C6链烯基氧基；卤素；-NR4R5；-CN；-OH；-COOR17；-COR16；-OSO2CF3；-CH2OCH2CF3；(C1-C6)烷硫基；-C(O)NR4R5；-OCHR6-苯基；苯氧基-(C1-C6)烷基；-NHCOR16；-NHSO2R16；联苯基；-OC(R6)2COOR7；-OC(R6)2C(O)R4R5；(C1-C6)烷氧基；C1-C6烷氧基，其被(C1-C6)烷基、氨基、-OH、-COOR17、-NHCOOR17、-CONR4R5、芳基、被独立地选自卤素、-CF3、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和-COOR17的1至3个取代基取代的芳基、其中相邻的碳原子与亚甲二氧基形成环的芳基、-C(O)NR4R5及杂芳基取代；R21-芳基；芳基，其中相邻的碳原子与亚甲二氧基形成环的芳基；杂芳基；杂芳基，其被选自卤素、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基、(C1-C6)烷基氨基、二-((C1-C6)烷基)氨基、-OCF3、-NO2、羟基(C1-C6)烷基、-CHO和苯基的1至4个取代基取代；杂芳基，其中相邻的碳原子与C3-C5亚烷基或亚甲二氧基形成环；R4和R5独立地选自H、C1-C6烷基、苯基、苄基和C3-C6环烷基，或者R4和R5一起为-(CH2)4-、-(CH2)5-或-(CH2)2NR7-(CH2)2-并与它们连接的氮原子形成环；R6独立地选自H、C1-C6烷基或苯基；R7是H或(C1-C6)烷基；R8、R10和R11独立地选自基团R1及-OR1，其条件是当选择性的双键存在时，R10不存在，而当环Q是芳香环时，R10和R11不存在；R9是H、OH、C1-C6烷氧基、卤素或卤代(C1-C6)烷基；B是-(CH2)n3-、-CH2-O-、-CH2S-、-CH2-NR6-、-C(O)NR6-、-NR6C(O)-、 顺或反式-(CH2)n4CR12=CR12a(CH2)n5或-(CH2)n4C≡C(CH2)n5-，其中n3是0-5，n4和n5独立地是0-2，而R12和R12a独立地选自H、C1-C6烷基和卤素；当双虚线表示单键时X是-O-或-NR6-，或当此键不存在时，X是-OH或-NHR20；当双虚线表示单键时Y是=O、=S、(H，H)、(H，OH)或(H，C1-C6烷氧基)，或当此键不存在时，Y是=O、(H，H)、(H，OH)、(H，SH)或(H，C1-C6烷氧基)；当双虚线表示单键时R15不存在，而当此键不存在时，R15是H、C1-C6烷基、-NR18R19或-OR17；或Y是 而R16是H或C1-C6烷基；R16和R16a独立地选自C1-C6低级烷基、苯基或苄基；R17、R18和R19独立地选自H、C1-C6烷基、苯基或苄基；R20是H、C1-C6烷基、苯基、苄基、-C(O)R6或-SO2R6；R21是选自-CF3、-OCF3、卤素、-NO2、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、(C1-C6)烷基氨基、二-((C1-C6)烷基)-氨基、氨基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基、二-(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基、羟基-(C1-C6)烷基、-COOR17、-COR17、-NHCOR16、-NHSO2R16及-NHSO2CH2CF3；Z是-CH2-、-O-、-S(O)0-2-、NR22-、-C(O)-、-C(=NOR17)-或-C(R13R14)-，其中R13和R14与它们连接的碳原子一起形成含3至6个碳原子的螺环烷基，或3至6元螺杂环烷基，其中含有2至5个碳原子及1或2个选自O、S和N的杂原子；而R22是H、C1-C6烷基、苯基、苄基、-COR16或-CONR18R19。
2．权利要求1的化合物，其中Z是O。
3．权利要求1或2任一项的化合物，其中双虚线表示单键，X是-O-而Y是=O。
4．权利要求1、2或3任一项的化合物，其中R2和R8各是氢原子；R3是氢原子或C1-C6烷基；而R9是H、OH或C1-C6烷氧基。
5．权利要求1、2、3或4任一项的化合物，其中R1是C1-C6烷基。
6．权利要求1、2、3、4或5任一项的化合物，其中Q是R-取代的环己基或R-取代的苯基。
7．权利要求1、2、3、4、5或6任一项的化合物，其中R是H、氟、OH、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或-COOR17。
8．权利要求1、2、3、4、5、6或7任一项的化合物，其中B是-CH=CH-。
9．权利要求1、2、3、4、5、6、7或8的化合物，其中Het是吡啶基、W-取代的吡啶基、喹啉基或W-取代的喹啉基。
10．权利要求9的化合物，其中W是C1-C6烷基、芳基、R21-芳基或杂芳基。
11．权利要求1的化合物，其选自如下化合物
12．一种药物组合物，其中含有有效量的权利要求1的化合物及药用载体。
13．一种抑制凝血酶受体的方法，其中包括给需要此治疗的哺乳动物有效量的权利要求1的化合物。
14．治疗血栓形成、动脉硬化、再狭窄、高血压、心绞痛、心律不齐、心脏衰竭、心肌梗塞、肾小球性肾炎、栓塞性中风、血栓栓塞性中风、外周血管疾病、炎性紊乱、脑局部缺血及癌症的方法，其中包括给需要此治疗的哺乳动物使用有效量的权利要求1的化合物。
全文摘要
公开了式(Ⅰ)的杂环取代的三环化合物或其药用盐,其中:单虚线表示选择性存在的双键;双虚线表示选择性存在的单键;n是0—2;Q是选择性取代的环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基;Het是选择性取代的单、二或三环杂芳基;B是－(CH
文档编号A61K31/497GK1290265SQ98813307
公开日2001年4月4日 申请日期1998年11月23日 优先权日1997年11月25日
发明者S·查卡拉曼尼尔, T·阿斯贝洛姆, Y·夏, D·多勒, M·C·克拉斯拜, M·F·查尼基 申请人:先灵公司