Il-22二聚体在制备静脉注射药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物和医药技术领域。更具体地，本发明涉及IL-22二聚体在制备静 脉注射药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 白介素-22(IL_22)是一种由被激活的T细胞和自然杀伤细胞（NK细胞）表达 并分泌的糖蛋白，又称为白介素-10相关的由T细胞衍生的可诱导因子（IL-lOrelatedT cell-derivedinduciblefactor，IL-TIF)。激活的T细胞主要是CD4+细胞，特别是CD28 途径中激活的Thl细胞、Thl7细胞和Th22细胞。最初在经IL-9刺激的小鼠T细胞和肥 大细胞中发现IL_22mRNA的表达。在伴刀豆球蛋白A(ConA)的刺激下，脾细胞也可产生 IL-22(Dumoutier等，J.Immunology, 164:1814-1819,2000)。人IL-22 的mRNA主要由被抗 ⑶3抗体或ConA刺激的外周T细胞表达。Feng等报道了IL-22对cerulein诱导的小鼠 胰腺炎具有改善作用（Int.J.Biol.Sci, 8 (2)，249-257, 2012)。
[0003] 发明概沭
[0004] 本发明的目的是提供IL-22二聚体在制备静脉注射药物中的用途。
[0005] 在本发明的第一方面中，提供了一种白介素-22(IL_22)二聚体的用途，用于制备 静脉注射药物。
[0006] 在一些实施方式中，所述药物可用于制备治疗如下疾病的药物：代谢性疾病、脂肪 肝、病毒性肝炎、MODS、神经障碍、和胰腺炎。
[0007] 在一些实施方式中，所述的白介素-22二聚体是式I所示的白介素-22二聚体，
[0008]M1-L-M2 式I [0009]式中，
[0010]Ml是白介素-22的第一单体；
[0011]M2是白介素-22的第二单体；
[0012] L是位于所述的第一单体和第二单体之间的，将所述第一单体和第二单体连接在 一起的接头元件。
[0013] 在一些实施方式中，所述的白介素-22二聚体保持了白介素22的生物活性，并且 其血清半衰期是所述第一单体或第二单体的血清半衰期的2倍以上。
[0014] 在一些实施方式中，所述的IL-22二聚体的血清半衰期是所述第一单体和/或第 二单体的血清半衰期的3倍以上、5倍以上或10倍以上。
[0015] 在一些实施方式中，所述的接头元件L选自下组：
[0016] (i) 3-50个氨基酸的短肽；
[0017] (ii)式II所示的多肽元件：
[0018] -Z-Y-Z-式II
[0019]式中，
[0020]Y为载体蛋白；
[0021] Z为无、或1-30个氨基酸的短肽；
[0022] 为化学键或共价键。
[0023] 在一些实施方式中，为肽键。
[0024]在一些实施方式中，Z是5-50个氨基酸。
[0025] 在一些实施方式中，Z包含如SEQIDNO: 1或SEQIDNO.:10所示的序列。
[0026] 在一些实施方式中，Z为如SEQIDNO: 1或SEQIDNO.:10所示的序列。
[0027] 在一些实施方式中，所述的载体蛋白包含至少两个能形成分子间二硫键的半胱氨 酸。
[0028] 在一些实施方式中，所述的载体蛋白在IL-22单体的N端。
[0029] 在一些实施方式中，所述的载体蛋白在IL-22单体的C端。
[0030] 在一些实施方式中，所述的载体蛋白是白蛋白或人IgG的Fc片段。
[0031] 在一些实施方式中，Fc片段包含CH2和CH3区域。
[0032] 在一些实施方式中，Fc片段包含如SEQIDNO:2或SEQIDNO.:9所示的序列。
[0033] 在一些实施方式中，Fc片段为如SEQIDNO:2或SEQIDNO.:9所示的序列。
[0034] 在一些实施方式中，所述二聚体由两个单体亚基构成，每一个所述的单体亚基包 含IL-22区域、二聚化区域以及连接所述IL-22区域和二聚化区域的连接序列。
[0035] 在一些实施方式中，所述IL-22区域为IL-22单体；所述二聚化区域包括人IgG2 的Fe片段；所述连接序列为连接所述IL-22单体和所述Fe片段的肽；且所述二聚体由两个 所述二聚化区域（如Fe片段）的通过一个或多个二硫键配对形成。
[0036] 在一些实施方式中，所述二硫键的数量为2或4。
[0037] 在一些实施方式中，所述单体亚基包含一段选自如SEQIDNO:4和SEQIDNO:6-8 所示的氨基酸序列。
[0038] 在一些实施方式中，所述的第一单体和第二单体是相同的。
[0039] 在一些实施方式中，所述二聚体具有选自下组的一种或多种生物活性：
[0040] (a)在体内降低淀粉酶和/或脂肪酶；
[0041] (b)在体内减轻胰腺水肿；
[0042] (C)在体内抑制胰腺腺泡细胞和/或脂肪细胞的坏死；
[0043] (d)在体内减轻制胰腺中炎症细胞的浸润。
[0044] 在一些实施方式中，所述药物按如下方式给药：按述二聚体的给药剂量为大约 2Ug/kg至大约200iig/kg给药；较佳地，按述二聚体的给药剂量为大约5iig/kg至大约 80iig/kg给药；更佳地，按述二聚体的给药剂量为大约10iig/kg至大约45iig/kg给药。
[0045] 在本发明的第二方面中，提供了一种对个体施用IL-22二聚体的方法，包括对 个体静脉给予有效量的IL-22二聚体，其中，IL-22二聚体的剂量为大约g/kg至大约 200yg/kg。
[0046] 在本发明的第三方面中，提供了一种治疗个体疾病的方法，包括通过对个体静脉 给予有效量的IL-22二聚体，其中，IL-22二聚体的剂量为大约2iig/kg至大约200iig/kg。
[0047] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体的施用剂量为大约5iig/kg至大约80iig/ kg。
[0048] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体的施用剂量为大约IOiig/kg至大约45iig/ kg。
[0049] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体的给药不多于大约每周一次。
[0050] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体的给药不多于大约每月一次。
[0051] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体的给药不多于大约每三个月一次。
[0052] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体包含两个单体亚基，其中每个单体亚基包 含一个IL-22区域和二聚化区域。
[0053] 在一些实施方式中，每个单体亚基包含一个通过连接序列连接于一个二聚化区域 的IL-22区域。
[0054] 在一些实施方式中，所述连接序列大约是6-30个氨基酸。
[0055] 在一些实施方式中，所述连接序列包含如SEQIDNO: 1所述的序列。
[0056] 在一些实施方式中，所述连接序列具有如SEQIDNO:1所述的序列。
[0057] 在一些实施方式中，所述二聚化区域包含至少两个能形成分子间二硫键的半胱氨 酸。
[0058] 在一些实施方式中，所述二聚化区域包含至少一个Fc区域的一部分。
[0059] 在一些实施方式中，所述Fc区域包含CH2和CH3区域。
[0060] 在一些实施方式中，所述Fc区域包含如SEQIDNO: 2所示的序列。
[0061] 在一些实施方式中，所述Fc区域具有如SEQIDN0:2所示的序列。
[0062] 在一些实施方式中，每个单体亚基的IL-22区域具有如SEQIDNO: 3所示的序列。
[0063] 在一些实施方式中，每个单体亚基具有一段选自如SEQIDNO:4和SEQIDNO:6-8 所示的序列。
[0064] 在一些实施方式中，所述疾病选自包含代谢性疾病、脂肪肝、病毒性肝炎、MODS、神 经障碍、和胰腺炎的组中。
[0065] 在一些实施方式中，所述个体为人类。
[0066] 应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文（如实施例）中具 体描述的各技术特征可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再 累述。
【附图说明】
[0067] 图1显示了本发明一种IL-22二聚体的示意图。其中，表示连接肽，标记为 "IL-22"的椭圆形表示IL-22单体。该IL-22二聚体的一种序列如SEQIDN0:5所示，其 中第1-146位为IL-22,第147-162位为连接肽，第163-308位为另一IL-22。
[0068] 图2A和图2B显示了本发明IL-22二聚体的示意图。其中，表示氨基酸连接 肽，标记为"IL-22"的椭圆形表示IL-22单体，图2A中标记为"C"的椭圆形表示载体蛋白， 并且IL-22区域位于载体蛋白的N-末端，图2B中标记为"Fc"的半椭圆形表示Fc片段（一 种二聚化区域），显示二个Fc片段通过二硫键配对形成二聚体。
[0069] 一种用于构成该IL-22二聚体的、带有Fc片段的IL-22单体的序列如SEQIDNO: 4所示，其中第1-146位为IL-22,第147-162位为连接肽，第163-385位为人IgG2的Fc片 段。二个带有Fc片段的IL-22单体，通过Fc的配对作用构成二聚体。
[0070] -种用于构成该IL-22二聚体的、带有Fc片段的IL-22单体的序列如SEQIDNO: 6所示，其中第1-146位为IL-22,第147-152位为连接肽，第153-375位为人IgG2的Fe片 段。二个带有Fe片段的IL-22单体，通过Fe的配对作用构成二聚体。
[0071]图3A和3B显示了本发明IL-22二聚体的示意图。其中，表示氨基酸连接肽， 标记为"IL-22"的椭圆形表示IL-22区域，图3A中，标记为"C"的椭圆形表示载体蛋白，并 且IL-22区域位于载体蛋白的C-末端，图3B中标记为"Fc"的半椭圆