18次，以获得平均粒径为80nm，且粒径分布指数为0. 07 的脂质体悬浮液。
[0080] 本发明的第三较佳实施例的制备脂质体悬浮液的系统，如图4所示，进一步依序 包括与挤压装置40相连接的药物包载装置50、与药物包载装置50相连接的过滤装置60以 及与过滤装置60相连接的收集装置70。
[0081] 药物包载装置50通过第四通道51与挤压装置40相连接，且包含透析器52、药物 包载室53以及连接透析器52及药物包载室53的第五通道54 ;其中透析器52与第四通道 51相对于挤压器42连接的另一端相连接；药物包载室53通过第五通道54与透析器52相 连通。
[0082] 过滤装置60通过第六通道61与药物包载装置50相连接，且包含滤器62,其通过 第六通道61相对于药物包载装置50的药物包载室53相接的另一端相连接，且过滤器62 包括第二滤膜621，第二滤膜621的孔径为200nm。
[0083] 收集装置70通过第七通道71与过滤装置60的过滤器62相连接，且收集装置70 包含收集器72,收集器72可通过第七通道71与过滤装置60的过滤器62相连通，以收集由 过滤器62所获得的已过滤的含药脂质体悬浮液。
[0084] 本发明的第三较佳实施例的系统于使用时，如图4所示，将于挤压装置40内的脂 质体悬浮液经由药物包载装置50的第四通道51流入透析器52内，透析器52中含有9wt% 蔗糖溶液，可用以置换脂质体悬浮液中的醇类溶剂及水相溶液以形成已透析的脂质体悬浮 液；已透析的脂质体悬浮液流经第五通道54以进入药物包载室53,药物包载室53内含有 含组氨酸的9wt%蔗糖溶液以将已透析的脂质体悬浮液与药物混合并将药物装载于已透析 的脂质体悬浮液，以形成含药脂质体悬浮液。含药脂质体悬浮液经由过滤装置60的第六通 道61流入过滤器62内，并经由孔径为200nm的第二过滤膜621以过滤形成无菌脂质体悬 浮液，无菌过滤的脂质体悬浮液再流经第七通道71以进入收集装置70的收集器72,以获得 单层、单一粒径分布且药物包覆率达95%以上的含药脂质体悬浮液。
[0085] 实施例1注入流速对于脂质体粒径大小的影响
[0086] 取33克（g)硫酸铵溶于水中并定量至1升（L)，加热至60°C备用。将4.8g氢化大 豆磷脂质（hydrogenatedsoybeanphosphatidylcholine，HSPC)、1.6g甲氧基聚乙二醇磷 脂酰乙醇胺（methoxypolyethyleneglycol2000,MPEG-DSPE2000)、I. 6g胆固醇与 75 毫 升（mL)乙醇于60°C下搅拌溶解，以形成均匀混合液。将混合液以一注入装置注入以磁力持 续搅拌的硫酸铵水溶液中，其中搅拌速率为200rpm，注入装置选用18号注射针，并以蠕动 泵控制注入流速分别为 25ml/min、100ml/min、150ml/min、200ml/min、250ml/min及 300ml/ min以比较流速对于粒径大小的影响；持续搅拌10分钟后，以形成脂质体悬浮液。以粒径 分析仪（particlesizeanalyzer)(型号为BeckmanCoulter公司的DelsaNano)分析脂 质体粒径。
[0087] 表1注入流速对于脂质体粒径大小的影响
[0088]
【主权项】
1. 一种脂质体悬浮液的制备方法，其特征在于，其包含下列步骤： 提供组合物，该组合物是由磷脂化合物、胆固醇或其衍生的盐类、聚乙二醇衍生物所组 成的，其中磷脂化合物、胆固醇或其衍生的盐类、聚乙二醇衍生物的摩尔比例为3~50 :1~ 50 ：1 ； 将所述的组合物与醇类溶剂混合以形成混合物，且所述的组合物于醇类溶剂的摩尔浓 度介于2mM至300mM ;以及， 将所述的混合物以注入装置注入于热状态的水相溶液中，并混合搅拌混合物与水相 溶液，以形成脂质体悬浮液，其中所述的混合物与所述的水相溶液的体积比介于1 :2至1 : 500 〇
2. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，将所述的混合物以注入装置注入于 热状态的水相溶液的步骤中，所述的注入装置包含至少一注入通道以及可控制流速的推进 装置。
3. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的至少一注入通道的孔径不大 于10毫米。
4. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的推进装置选自于由泵、气动推 进装置及其他具推进功能装置所组成的群组。
5. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的热状态是指40°C至80°C。
6. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的水相溶液为离子溶液，且离子 溶液中溶质的摩尔浓度介于ImM至1M。
7. 根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述的离子溶液中的溶质选自由氯 化钠、聚丙烯酸及其盐类、硫酸软骨素A及其盐类、聚乙烯硫酸及其盐类、磷酸及其盐类、焦 磷酸及其盐类、硫酸及其盐类、柠檬酸及其盐类、酒石酸及其盐类、腈基三乙酸及其盐类、乙 烯二胺四醋酸及其盐类、二乙烯三胺五乙酸及其盐类，以及它们的组合所组成的群组。
8. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的混合物与水相溶液的体积比 介于1 :2至1 :100。
9. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的混合搅拌混合物与水相溶液 的揽拌转速介于IOOrpm至500rpm。
10. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，将所述的混合物以注入装置注入于 热状态的水相溶液的步骤中，所述的注入装置的注入流速为每分钟10毫升至1000毫升。
11. 根据权利要求1至10中任一项所述的脂质体悬浮液的制备方法，其还包括令所得 的脂质体悬浮液经孔挤压步骤，所述的孔挤压步骤是将含有脂质体悬浮液经过孔径不大于 100纳米的挤压器。
12. 根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，所述的孔挤压步骤是将含有脂质 体悬浮液经过孔径介于IOnm至SOnm的挤压器。
13. 根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，所述的孔挤压步骤的压力介于 30psi 至 80psi。
14. 根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于，所述的孔挤压步骤的速率介于2L/ min 至 10L/min〇
15. -种根据权利要求1至14中任一项所述的制备方法所得的脂质体悬浮液，其特征 在于，所述的脂质体悬浮液的脂质体的平均粒径介于IOnm至200nm，且粒径分布指数介于 0. 01 至 0. 5。
16. -种根据权利要求15所述的脂质体悬浮液用于包载药物的方法，其包含下列步 骤： 准备药物； 以透析方式去除脂质体悬浮液的溶剂，以获得多数脂质体；以及， 将所述的药物与各脂质体相混合并使所述的药物被包载于脂质体内。
17. 根据权利要求16所述的方法，其特征在于，所述的药物选自于由盐酸阿霉素、柔红 霉素、吉西他滨、奥沙尼喹、氟康唑、伊曲康唑、酮康唑、咪康唑、伊立替康以及长春瑞滨所组 成的群组。
18. -种含有含药单层脂质体的悬浮液，其特征在于，其是以权利要求16或17所述的 方法所制得，且所述的悬浮液所含的含药单层脂质体的平均粒径小于200nm。
【专利摘要】本发明关于一种脂质体悬浮液的制备方法，其包括：提供组合物，该组合物是由磷脂化合物、胆固醇(cholesterol)或其衍生的盐类、聚乙二醇衍生物所组成的；将所述的组合物与醇类溶剂混合以形成混合物；以及，将所述的混合物以注入装置注入于热状态的水相溶液中，并混合搅拌混合物与水相溶液，以形成脂质体悬浮液。本发明通过调整注入装置的特定参数以控制脂质体的粒径(粒径小于200nm)，再经由单一孔径的滤膜进行挤压即可有效地缩小脂质体的粒径及分布，以提高脂质体用于大规模制造以及应用的可行性。
【IPC分类】A61P35-00, A61K45-00, A61K9-127
【公开号】CN104721139
【申请号】CN201410779590
【发明人】程美玲, 黄尧焜
【申请人】万菱药品科技股份有限公司
【公开日】2015年6月24日
【申请日】2014年12月16日
【公告号】US20150174070