一种葡萄糖/光双响应性核壳微球及其制备方法和应用_3

文档序号:9426106阅读:来源:国知局
50mg肉桂酸改性右旋糖酐(分子量为20kDa)的5ml 二氯甲烷中,滴加到0.5% PVA中以5000rpm剪切分散5min,然后迅速倒入2倍体积的0.4% PVA溶液中,继续以750rpm搅拌至二氯甲烷完全挥发。离心,水洗,冻干即得葡萄糖/光双响应性核壳微球。
[0070]实施例2
[0071]在本实施例中,提供一种葡萄糖/光双响应性核壳微球的具体制备方法,所述方法具体包含以下步骤:
[0072]I) Con A 活化:将 30mg Con A 溶于 3mL 含有 0.1M KCl, 0.1mM CaCl2,0.1mM MnCl2的pH7.8的三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲溶液中于4度冰箱中放置6h以上。
[0073]2)将0.6g的甲基丙烯酸酐改性右旋糖酐(分子量10kDa)溶解于2mL去离子水,然后将该溶液与3mL的10mg/mL的活化后的Con A溶液混合,并低速搅拌5h,使二者充分接触,最后加入交联剂PEGDMA (与甲基丙烯酸酐改性右旋糖酐的质量比为0.1:1)得到澄清混合溶液①。
[0074]3)在10mL的圆底烧瓶中加入50mL环己烧并混合0.5g乳化剂司班60,高速乳化机以20000rpm转速搅拌Imin以保证稳定剂的充分分散。将搅拌好的混合溶液①滴加到烧杯中并保持相同转速继续搅拌Imin得到乳白色分散液。接着依次加入过硫酸铵/亚硫酸氢钠溶液(二者质量和与甲基丙烯酸酐改性右旋糖酐质量比为0.01:1,过硫酸铵与亚硫酸钠质量比为1:1.5)继续搅拌5min来引发双键的交联反应,之后迅速转移到单口烧瓶中,以750rpm转速搅拌,并保持反应36h。反应结束后先将混合液静置2h,去除上层油相,下层用异丙醇沉淀并离心洗涤3?5次得到核层微球。
[0075]4)将250mg核层微球分散于溶解有2500mg甲氧基肉桂酸改性右旋糖酐(分子量为10kDa)的5ml 二氯甲烷中,滴加到3% PVA中以23000rpm剪切分散lmin,然后迅速倒入5倍体积的0.9% PVA溶液中,继续以750rpm搅拌至二氯甲烷完全挥发。离心,水洗,冻干即得葡萄糖/光双响应性核壳微球。
[0076]实施例3
[0077]在本实施例中,提供一种葡萄糖/光双响应性核壳微球的具体制备方法,所述方法具体包含以下步骤:
[0078]I) Con A 活化:将 20mg Con A 溶于 ImL 含有 0.1M KCl, 0.1mM CaCl2,0.1mM MnCl2的pH7.4的磷酸盐-柠檬酸缓冲溶液中于4度冰箱中放置6h以上。
[0079]2)将0.1g的丙烯酸酐改性右旋糖酐(分子量50kDa)溶解于ImL去离子水,然后将该溶液与ImL的20mg/mL的活化后的Con A溶液混合,并低速搅拌3h,使二者充分接触,最后加入交联剂PEGDMA(与甲基丙烯酸酐改性右旋糖酐的质量比为0.008:1)得到澄清混合溶液①。
[0080]3)在10mL的圆底烧瓶中加入50mL环己烷并混合0.75g乳化剂吐温85,高速乳化机以1000rpm转速搅拌3min以保证稳定剂的充分分散。将搅拌好的混合溶液①滴加到烧杯中并保持相同转速继续搅拌3min得到乳白色分散液。接着依次加入过硫酸铵/亚硫酸氢钠溶液(二者质量和与丙烯酸酐改性右旋糖酐质量比为0.0075:1,过硫酸铵与亚硫酸钠质量比为1: 1.25)继续搅拌12min来引发双键的交联反应,之后迅速转移到单口烧瓶中,以750rpm转速搅拌,并保持反应24h。反应结束后先将混合液静置1.5h,去除上层油相,下层用异丙醇沉淀并离心洗涤3?5次得到核层微球。
[0081 ] 4)将500mg核层微球分散于溶解有100mg 4-羧基香豆素改性右旋糖酐(分子量为50kDa)的5ml 二氯甲烷中,滴加到I % PVA中以1000rpm剪切分散3min,然后迅速倒入3倍体积的0.5% PVA溶液中,继续以750rpm搅拌至二氯甲烷完全挥发。离心,水洗,冻干即得葡萄糖/光双响应性核壳微球。
[0082]实施例4
[0083]在本实施例中,提供一种葡萄糖/光双响应性核壳微球的具体制备方法,所述方法具体包含以下步骤:
[0084]I) Con A 活化:将 15mg Con A 溶于 ImL 含有 0.1M KCl,0.ImM CaCl2,0.1mM MnCl2的ρΗ7.4的磷酸盐缓冲溶液中于4度冰箱中放置6h以上。
[0085]2)将0.12g的甲基丙烯酸酐改性右旋糖酐(分子量40kDa)溶解于ImL去离子水,然后将该溶液与ImL的15mg/mL的活化后的Con A溶液混合,并低速搅拌4h,使二者充分接触,最后加入交联剂PEGDMA (与甲基丙烯酸酐改性右旋糖酐的质量比为0.006:1)得到澄清混合溶液①。
[0086]3)在10mL的圆底烧瓶中加入50mL环己烷并混合0.7g乳化剂吐温80,高速乳化机以15000rpm转速搅拌2min以保证稳定剂的充分分散。将搅拌好的混合溶液①滴加到烧杯中并保持相同转速继续搅拌2min得到乳白色分散液。接着依次加入过硫酸铵/亚硫酸氢钠溶液(二者质量和与丙烯酸酐改性右旋糖酐质量比为0.008:1,过硫酸铵与亚硫酸钠质量比为1: 1.35)继续搅拌15min来引发双键的交联反应,之后迅速转移到单口烧瓶中,以750rpm转速搅拌,并保持反应30h。反应结束后先将混合液静置1.5h,去除上层油相,下层用异丙醇沉淀并离心洗涤3?5次得到核层微球。
[0087]4)将450mg核层微球分散于溶解有1500mg肉桂酸改性右旋糖酐(分子量40kDa)的5ml 二氯甲烷中,滴加到1.5% PVA中以15000rpm剪切分散2min,然后迅速倒入4倍体积的0.9% PVA溶液中,继续以750rpm搅拌至二氯甲烷完全挥发。离心,水洗,冻干即得葡萄糖/光双响应性核壳微球。
[0088]实施例5
[0089]在本实施例中,提供一种葡萄糖/光双响应性核壳微球的具体制备方法,所述方法具体包含以下步骤:
[0090]I) Con A 活化:将 50mg Con A 溶于 3mL 含有 0.1M KCl, 0.1mM CaCl2,0.1mM MnCl2的pH7.0的磷酸盐缓冲溶液中于4度冰箱中放置6h以上。
[0091]2)将0.15g的甲基丙烯酸酐改性右旋糖酐(分子量70kDa)溶解于2mL去离子水,然后将该溶液与ImL的15mg/mL的活化后的Con A溶液混合,并低速搅拌3h,使二者充分接触,最后加入交联剂PEGDMA (与甲基丙烯酸酐改性右旋糖酐的质量比为0.008:1)得到澄清混合溶液①。
[0092]3)在10mL的圆底烧瓶中加入50mL环己烧并混合0.7g乳化剂司班80,高速乳化机以18000rpm转速搅拌2min以保证稳定剂的充分分散。将搅拌好的混合溶液①滴加到烧杯中并保持相同转速继续搅拌2min得到乳白色分散液。接着依次加入过硫酸铵/亚硫酸氢钠溶液(二者质量和与丙烯酸酐改性右旋糖酐质量比为0.009:1,过硫酸铵与亚硫酸钠质量比为1: 1.45)继续搅拌12min来引发双键的交联反应,之后迅速转移到单口烧瓶中,以750rpm转速搅拌,并保持反应24h。反应结束后先将混合液静置2h,去除上层油相,下层用异丙醇沉淀并离心洗涤3?5次得到核层微球。
[0093]4)将400mg核层微球微球分散于溶解有500mg肉桂酸改性右旋糖酐(分子量70kDa)的5ml 二氯甲烷中,滴加到2% PVA中以18000rpm剪切分散2min,然后迅速倒入2.5倍体积的0.8% PVA溶液中,继续以750rpm搅拌至二氯甲烷完全挥发。离心,水洗,冻干即得葡萄糖/光双响应性核壳微球。
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