专利名称：细胞培养基容器组件的制作方法
技术领域：
本发明关于细胞培养基领域，更具体地说，关于具有收縮包装 光保护标签(shrink-wrap light protection label)以用于储存细胞培养基 的细胞培养基容器。
背景技术：
细胞培养基用于在生物体外，通常在实验室中(术语是体外； 拉丁语为"玻璃中")维持细胞的存活。其由无菌的营养系统组成；通 常是有机和无机物质的复杂的混合物。通常加入蛋白生长因子促进细 胞生长或其它具体的行为。加入添加物以保护细胞抵御微生物或稳定 环境。细胞培养基一般储存在有螺旋盖的的透明塑料或玻璃瓶中，或 在一些情况下，储存于袋子中。标记通常由粘贴纸或塑料基标签构成， 它们覆盖容器有限的面积(一般小于容器表面积的25%)。
培养基以液体的形式被加入到细胞。当活细胞代谢培养基的组 分时，耗尽关键组分并产生废物，这需要经常替换培养基。
作为液体，培养基应该在冰箱的温度下储存，并且遮蔽光照。 低温减慢蛋白变性的正常速度，蛋白变性能够耗尽关键的培养基组分。 防止可见光是必要的，因为光曝露导致涉及核黄素、硫醇、金属离子 和其它的组分的光反应，光反应能够通过各种机制降解组分和产生损 伤细胞的活性氧物质(ROS)(参见Grzelak等人，"Light-dependent generation of reactive oxygen species in cell culture media", Free radic. Biol. Med. 12:1418-1425;200r)，从而导致DNA的修饰或突变。己经发
现房间的荧光灯产生光毒性产物，包括过氧化氢(参见Stoien等人， "Effect of near-ultraviolet and visible light on mammalian cell in culture II.
Formation of toxic photoproducts in tissue culture medium by blacklight"， Proc. Natl. Acad. Sci. USA.71:3961-3955;1974; Wang等人，"Effect of room fluorescence light on the deterioration of tissue culture medium", In Vitro. 12:19-22;1976;禾口 Wang等人，"Identification of hydrogen peroxide as photoproduct toxic to human cells in tissue-culture medium irradiated with "daylight" fluorescent light", In Vitro. 14:715-722;1978)。普通的培养 基组分如色氨酸、酪氨酸、吡眵素和叶酸能够增强这些反应(参见 Gmzdak等人，见上)。培养基中血清的存在已经在过去减小了由光产 生的ROS造成的问题。然而，在当今通常用于哺乳动物细胞培养的不 含血清或低血清的确定成分培养基中，ROS产生的细胞毒性更加普遍。
培养基在37"C下被用于哺乳动物细胞，以给细胞代谢的发生提 供期望的环境。在太低的环境下使用培养基会使细胞休克，造成代谢 抑制或生存力降低。为了避免这些问题，在用于细胞前，细胞培养基 通常被加热。 一般地，细胞培养基通常在水浴中加热，通过将含有培 养基的容器浸入预加热到预定温度的"水浴"中的水中。如果需要小 体积的培养基，技术人员将部分培养基从原始的容器转移到另外一个 灭菌的容器中(利用无菌技术)或者通过在水浴中加热整个原始瓶子。目 前，对细胞培养技术人员来说，通常的实践是估计容器内的培养基何 时达到合适的温度。这通常通过定时或通过触摸容器的外面来确定是 否它已"感觉"到合适的温度。如果技术人员错误地估计培养基的温 度，细胞代谢可能被抑制，生存力降低，或在极端的情况下由于短时 间内培养基温度的巨大变化造成休克缘故，细胞死亡。
在培养基加热过程中，因为培养基容器被直接暴露于水浴中没 有灭菌的水中，污染可能会发生。存在于水浴中的非无菌水中的细菌、 霉菌、酵母和其它的微生物留在培养基容器中的外部，并可能从培养 基容器的外部被带到无菌的环境中，如生物安全柜，在此，加热的培 养基被转移到细胞培养物中。技术人员通常通过用杀菌液如70%的异 丙醇洗涤培养基瓶的外部使这种危害最小。所需要的是储存和操作细胞培养基的方法，以避免上面所述的 问题。
发明概述本发明公开了细胞培养基容器组件，其具有独特的收縮包装光 保护标签，该标签用作保护培养基免受光损伤的光屏障。
公开了具有携带可移动盖子的容器的光敏培养基容器组件，其被 配置为容纳光敏培养基和具有一个或多个窗口的收缩包装标签。收縮 标签被配置成覆盖容器的外部和阻挡有害的光，以便保护光敏培养基。
公开了光敏培养基包装试剂盒，其具有光敏培养基、配置成容 纳光敏培养基的容器、具有一个或多个窗口的收縮包装标签和在所述 收缩包装标签下面紧邻容器的温度计，通过所述窗中的一个可以观察。 收縮包装标签被配置为覆盖容器的外部以阻断有害的光，保护光敏培 养基。公开了制备光敏培养基包装试剂盒的方法，所述方法包括提 供光敏培养基，向容器中装填光敏培养基，将温度计粘附到容器上， 收到光敏培养基的订单，产生对应于订单的粘贴标签(stick-on label)， 将所述粘贴标签粘附到容器上，将收縮包装标签贴到容器上，其中所 述收缩包装标签具有与粘贴标签排成直线的标签窗，和加热收縮包装 标签以覆盖所述容器。公开了与细胞培养基容器一起使用的收縮包装标签，所述收縮 包装标签包括具有阻挡光的性质的收缩包装材料，所述收縮包装材料 能够覆盖所述细胞培养基容器，和在所述收縮包装材料上的一个或以 上的视窗。
附图简要说明下面对本发明的详细描述参照附图进行，附图形成说明的一部 分，其中通过图解的方式，说明了本发明可被实施的具体方实施式。 这些实施方式被充分详细地描述，以使本技术领域普通技术人员能够 实施本发明。可以利用其它的实施方式并可以做出变化，而不偏离本 发明的范围。
图1是根据本发明的一个实施方式的细胞培养基容器组件的正
视图，其具有收縮包装光保护标签，在盖子区域周围有穿孔；图2是图1的细胞培养基容器的细胞培养基容器组件的正视图， 其中收縮包装标签的穿孔盖部分被去除；图3是图2的细胞培养基容器组件的正视图，显示了在收縮包 装标签中用于观察下面的标签的标签窗；图4是图2的细胞培养基容器组件的侧视图，显示了在收缩包 装标签中用于观察容器内容物的内容窗(contentwindow)(或"T窗")， 和监控温度的温度计；图5是图2的细胞培养基容器组件的后视图，显示了印在收縮 包装标签上的语言或说明书；图6是图2的细胞培养基容器组件的侧视图，显示了在收縮包
装标签上用于记载关于细胞培养基容器信息的空间；图7是收縮包装标签的一个实施方式的平面图；图8和9是水浴袋的视图，水浴袋与图1的细胞培养基容器组
件一起使用；和图10是图2的细胞培养基容器组件的视图，所述细胞培养基容 器组件位于图8和9中的水浴袋中。透过水浴袋，温度计和内容物是 可见的。
发明详述除非另外明确表示，此处所用的所有的技术和科学术语具有本
发明所属技术领域的普通技术人员通常所理解的相同的意思。虽然与
本文所述的那些相似的或等同的方法和材料能够用于实施本发明或测
试本发明，然而下面描述了合适的方法和材料。本文所述的所有出版
物、专利申请、专利和其它参考文献通过引用其全部内容被并入本文。
如果发生冲突，以本说明书——包括定义，为准。而且，所述材料、
方法和实施例只是说明性的，而非意欲限定性的。本文表明和描述的具体的实施是为了说明本发明和其最佳方
式，不是意欲在其它方面以任何方式限定发明的范围。实际上，为了
简洁起见，本文没有详细描述许多有关收縮包装、细胞培养基、洁净
室制造的常规技术和示例性实施方式的其它方面。本发明对常规的光敏培养基包装提供了显著的改进。这些改进
包括
'独特的收縮包装标签，其用作光屏障，保护培养基免受光的损 伤(一个或以上的视窗可以微染颜色，以减少光的穿透)。
方便的内置培养基温度计，其有助于无菌培养基的加热。
所述收縮包装标签被设计为包括充足的空间，用于书写重要的信息。
收縮包装标签设计包括小的内容视窗，以检查容器内剩余的体积。
当将培养基容器组件放在水浴中时，使用特定的保护性水浴袋/ 套。所述套保护瓶子抵御水浴中发现的污染物。图1-6显示了根据本发明的一个实施方式所述的细胞培养基容 器组件100，其具有容器105和盖子106，该容器用收縮包装光保护标 签110覆盖。所述收縮包装标签110罩在容器105上以保护容器的内 容物，如光敏培养基以抵御任何有害光。所述收縮包装标签110包括 一个或更多的视窗，下面将详细说明。所述培养基容器组件100被设计为保护许多类型的光敏培养 基。例子包括含有核黄素的任何培养基；RPMI1640; Dulbecco极限 必需培养基(DMEM); Ham's F-12; Waymouth，s; William's E; MEM; EMEM;培养基199; MCDB131; McCoys 5A; Leibovita，s L-15; Iscove，s; 改良的Dulbecco培养基；Glasgow MEM; DMEM-F12;含有巯基或金 属离子(如铁离子或胱氨酸)的培养基；含有这样的化合物和化学品的培 养基，当曝露于光时，这些化合物和化学品直接或通过与培养基中的 其它组分的中间反应，产生细胞毒性自由基、化学品或化合物。
容器105可以是任何合适的形状和大小，并且可以由PETG(聚 对苯二甲酸乙二酯共聚物)、PET(聚对苯二甲酸乙二酯)、玻璃、聚碳酸 酯或与培养基相容的其它材料制成。合适的容器的一个例子是由 Nalgene Nunc International, Rochester, NY, U.S.A.生产的 Nalgene Labware500ml瓶子，2019型无菌培养基方瓶。在一个实施方式中，粘贴标签115被直接粘贴到容器105上。 所述粘贴标签115可以包括关于内容物容器105的信息。这是重要的， 因为如果使用者去除了收縮包装标签110，那么粘贴标签115保留在产 品上，这样预防了无标记的液体造成的不确定性。所述收縮包装标签
110覆盖粘贴标签ll5。所述收縮包装标签110上的标签窗120允许使 用者在组装后阅读粘贴标签115。所述标签窗120可以是透明的或具有 光保护色。在另一个实施方式中，所述粘贴标签115可以贴到收縮包装标 签的顶部。所述粘贴标签115可以包括关于内容物容器105的信息。 在该实施方式中，所述收縮包装标签110可以没有标签窗120。如果所 述收缩包装标签110有标签窗120，那么粘贴标签115可以放在窗上以 遮挡光。收縮包装标签110中的内容窗125允许使用者看到容器105的 内容物和其剩余的量。所述内容窗125可以具有倒置的"T"形状，其 允许观察到培养基方瓶容器的底角。如果容器105具有液位标记，内 容窗125可以放在其上面以观察。内容窗125应当具有光保护色以保 护内容抵御有害的光。温度计130可以位于容器105上，在收縮包装标签110下面， 在内容窗125中。温度计130的一个实施方式给出了可逆的颜色变化， 这意味着当达到合适的温度时，颜色变得明显一但是当温度改变时， 颜色消失。这个过程可反复发生。所述技术使用微囊化液晶颜色变化 墨，其由TMC LLC(http:〃www.t-m-c.com/our product.htm)制造，由Dry
Pak Industries (Studio City, CA www.drypak.com)酉己销给我们。该产品被 称为16-事件可逆温度标签90-120。F(短切形式(chopped version))(见 http:〃www. t-m-c.com/16 level vertical.html)。在一个实施方式中，温度 计130测量在32-40。C之间范围的温度。在另一个实施方式中，温度计 130测量0-8"C之间范围的温度。图7显示了收縮包装标签110的平面图，其显示了标签窗120 和内容窗125(在图中显示为125a和125b)。倒置的"T"部分沿着收縮 包装标签110的底部分布，以允许观察容器105的底部。收縮包装标 签110的材料可以是任何合适的收缩包装材料，如聚烯烃收缩膜，包 括PETG材料和具有收縮性质的其它材料。收縮材料的厚度可以为1 到5mm，优选地为2mm厚。所述收縮包装标签可以以单独切割的圆 柱形套、片或巻出现。收縮包装标签110也可以包括沿着顶部的穿孔135。所述穿孔
135对应于容器105的盖子区，优选地应当是"V"形，但可以是其它 的形状，与沿着帽子底部的水平穿孔垂直。所述收縮包装标签应该覆 盖在盖子的顶部(在其收縮后)，以便提供显损密封(tamper-evident seal), 它的破坏将提供在收到之前所述产品已经被打开过的证据。收縮包装 标签110包括许多用于书写信息的区域，如公司信息155、关于细胞培 养基容器的说明或记录性信息160。被用于印在收縮包装标签110上的 墨不应当含有能够浸透塑料的化学品(没有酚类)。
本发明的另一个实施方式使用了水浴袋140，如图8-10所示。 水浴袋140被设计为"直立"的袋(pouch)，具有封闭的低端145和 用于将细胞培养基容器组件100插入的开口上端150，如图10所示。 所述水浴袋140由任何合适的塑料材料如75规格PET或尼龙制成，其 是透明的，用于观察细胞培养基容器组件100。重要的是温度计可以透 过袋被看到。上端150可以能够用拉链(如拉链锁)封闭，用于储存或运 输细胞培养基容器组件100。水浴袋140中也可以印有如公司信息、说 明或警告。下面是细胞培养基容器组件100的组件和用光敏培养基装填所 述容器以产生光敏培养基包装试剂盒的一个实施方式。
1. 制备光敏培养基。
2. 用光敏培养基装填容器，如容器105。将合适的温度计如温度 计130连接到容器的特定位置(这样，当所述收縮包装标签覆盖容器时， 能观察它)。可以用自动标签机器或用简单的用作放置辅助器件的模板 手工完成该操作。
3. 光敏培养基的订单到达。
4. 计算机产生粘贴标签，如粘贴标签115，具有所预定产品(即， 光敏培养基)的产品特定信息，这样的信息为产品名称、部件号、批号、 制造日期、失效日期、体积、应用、客户名称、储存温度和其它这样 的产品特定信息。这些信息被载入到计算机化的标签机器中，该机器 在标签上打印并将它们贴到容器上的特定位置，或在第一步中在印刷 贴标签上打印和在第二步中手工粘附所述标签，手工完成该过程。
5. 收縮包装标签，如收縮包装套标签110，接着被覆盖在已经标 记有粘贴标签的培养基容器上。收縮包装标签必须准确地被放置，这
样粘贴标签透过标签窗显示并且产品的特定信息是可见的。注意如果 收缩包装标签被错误地移除，粘贴标签保留在容器上，这样产品仍然 贴着标签。该步骤可以用自动化机器或手工完成。
6. 将具有收縮包装标签的培养基容器放入加热的环境中，其被小 心控制以在合适的时间里施用合适量的热，这样允许收縮包装均匀地 和适当地收縮在容器上。该过程可以通过几个方式完成
a. 贴标签的容器可以被放到旋转的"转盘"上，人可以用加 热枪手工将热空气吹到旋转的容器上，以将收缩包装标签收缩到容器 上。
b. 贴有标签的容器可以被放到传送带上并导入加热的"收縮 隧道"中。 一旦进入加热的隧道，贴标签的容器就受到高水平的热和 湍流的气流，从而使得标签收縮到容器上。
C.干热或蒸汽可被用作热源。
7. 贴标签的产品接着可以被立即载运或储存起来它日载运。尽管在有限数目的实施方式的上下文中，对发明进行了描述和
举例说明，但是本发明可以以多种方式体现，而不偏离本发明基本特 征的精神。所述说明性的和描述性的实施方式，包括在公开内容的摘 要中所述的内容，因此被认为是在所有方面是说明性的而不是限定性 的。本发明的范围由所附的权利要求而不是由上述描述表明，在所述 权利要求的意思和等同的范围内的所有变化都意欲被包含在该范围 内。
权利要求
1.光敏培养基容器组件，其包括具有可移动的盖子的容器，其被配置为容纳光敏培养基；和具有一个或多个窗的收缩包装标签，所述收缩包装标签被配置为覆盖所述容器的外部，并阻断有害光以保护所述光敏培养基。
2. 权利要求1所述的组件，其进一步包括在所述收縮包装标签下 方，紧贴所述容器的温度计，其透过所述窗的一个可被观察。
3. 权利要求2所述的组件，其中所述温度计被配置为测量大约32-4(TC之间的温度。
4. 权利要求2所述的组件，其中所述温度计被配置为测量大约0-8 'C之间的温度。
5. 权利要求l所述的组件，其中所述窗的一个被配置为允许观察 所述容器的内容物。
6. 权利要求1所述的组件，进一步包括粘贴标签。
7. 权利要求6所述的组件，其中所述粘贴标签被贴到所述容器上， 在所述收缩包装标签的下方，所述粘贴标签透过所述窗的一个是可观 察的。
8. 权利要求6所述的组件，其中所述粘贴标签被粘贴到所述容器 上，在所述收縮包装标签的上面。
9. 权利要求l所述的组件，其中所述窗的一个是倒置的"T"形。
10. 权利要求1所述的组件，其中所述的收縮包装标签由PETG制成。
11. 光敏培养基包装试剂盒，包括 光敏培养基；容器，其被配置为容纳所述光敏培养基；收缩包装标签，其具有一个或多个窗，所述收缩包装标签被配置 为覆盖所述容器的外部以阻断有害光，从而保护所述光敏培养基；和温度计，其紧贴所述容器，在所述收縮包装标签的下方，并且透 过所述窗的一个是可观察的。
12. 权利要求11所述的试剂盒，进一步包括具有印刷信息的粘贴 标签，其中所述信息包括识别所述容器内的所述光敏培养基的信息。
13. 权利要求11所述的试剂盒，进一步包括被配置为容纳所述容 器的水浴袋。
14. 权利要求13所述的试剂盒，其中所述水浴袋是透明的，并且 所述温度计透过所述水浴袋是可见的。
15. 权利要求11所述的试剂盒，其中所述光敏培养基选自含有核黄素的任何培养基；RPMI 1640; Dulbecco极限必需培养基(DMEM); Ham,sF-12; Waymouth，s; William'sE; MEM; EMEM;培养基199; MCDB131; McCoys 5A; Leibovita's L-l5; Iscove，s;改良的Dulbecco 培养基；Glasgow MEM; DMEM-F12;含有巯基或金属离子(如铁离子 或胱氨酸)的培养基；含有化合物和化学品的培养基，所述化合物和化 学品当曝露于光时，直接或通过与培养基中的其它组分的中间反应， 产生细胞毒性自由基、化学品或化合物。
16. 制备光敏培养基包装试剂盒的方法，其包括(a) 提供光敏培养基；(b) 用所述光敏培养基装填容器；(c) 将温度计粘附到所述容器上； Cd)收到所述光敏培养基的订单；(e) 产生对应于所述订单的粘贴标签；(f) 将所述粘贴标签粘附到所述容器上；(g) 将所述收縮包装标签应用到所述容器上，所述收缩标签具有与 所述粘贴标签直线排列的标签窗；(h) 将所述收缩包装标签加热，以覆盖所述容器。
17. 与细胞培养基容器组件一起使用的收縮包装标签，其包括具有光阻断性质的收縮包装材料，所述收縮包装材料能够覆盖所述细胞培养基容器；和在所述收缩包装材料中的一个或多个视窗。
18. 权利要求17所述的收缩包装标签，进一步包括在所述收縮包 装材料中，对应于所述容器上的盖子区的穿孔。
19. 权利要求17所述的收縮包装标签，其中所述窗的一个是标签窗。
20. 权利要求17所述的收縮包装标签，其中所述窗的一个是内容窗。
21. 权利要求17所述的收縮包装标签，其中所述收缩包装材料是 PETG。
全文摘要
光敏培养基包装，具有独特的收缩包装光保护标签，其用作保护培养基免受光损伤的光屏障。
文档编号B32B33/00GK101360609SQ200680051370
公开日2009年2月4日 申请日期2006年12月5日 优先权日2005年12月5日
发明者J·D·杰纳斯 申请人:生命线细胞技术公司