专利名称：具有靶向性溶血栓活性的寡肽、其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及了通式6a_f代表的具有靶向性溶血栓活性的寡肽及其制备方法，进一步涉及它们在大鼠动静脉旁路插管血栓模型上的溶血栓和抗血栓作用及应用，本发明属于生物医药领域。
背景技术：
P6A(ARPAK)为纤维蛋白β链降解产物之一，具有溶血栓活性。在Ρ6Α的代谢研究中发现了代谢产物ΡΑΚ。在大鼠动静脉旁路插管溶血栓模型上，PAK的溶血栓活性比母体 Ρ6Α强。按照一般的认识，多肽在体内都会迅速降解。通过PAK的结构修饰延缓体内降解速率和提高溶血栓活性，是寡肽溶血栓药物研究的重要途径。通过RGD的结构修饰延缓体内降解速率和提高抗血栓活性，是寡肽抗血栓药物研究的重要途径。通过PAK和RGD相结合的结构修饰延缓体内降解速率和提高溶血栓活性，是具有溶血栓和抗血栓双重作用的寡肽药物研究的重要途径。按照一般的认识，含多肽的两亲性分子，例如脂肪醇链修饰的多肽， 在适当的条件下通过分子间非共价键相互作用可发生自组装，形成纳米结构。借助纳米结构可改善多肽在体内的输送、延缓多肽在体内的降解速率和提高多肽的体内活性。根据这些认识，发明人提出了本发明。
发明内容
本发明的一个目的是提供具有靶向性溶血栓活性的寡肽。为了达到上述目的，本发明采用如下技术方案本发明提供一类具有靶向性溶血栓活性的寡肽，如通式6a_f所示
权利要求
1.一类具有靶向性溶血栓活性的寡肽，如通式6a_f所示
2.一种制备权利要求1所述的具有靶向性溶血栓活性的寡肽的方法，包括如下步骤1)按照现有液相合成技术，逐步接肽合成B0c-Pr0-Ala-Lys(Z)；2)Boc-Asp (OBzl)与饱和脂肪醇缩合后再脱去侧链保护基得到Boc-Asp-OCH2 (CH2) nCH3，其中 η = 6、8、10、12、14 或 16 ；3)按照现有液相合成技术，逐步接肽合成Arg(NO2)-Gly-Asp (OBzl)-Phe-OBzl ；4)将Boc-Asp-OCH2 (CH2) nCH3 与 Arg (NO2)-Gly-Asp (Cffizl)-Phe-Cffizl 缩合反应后脱去 N 端保护基得到 Asp [Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Phe-OBz 1] -OCH2 (CH2) nCH3 ；5)Boc-Pro-Ala-Lys (Z)与 Asp [Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Phe-OBz 1] -OCH2 (CH2) nCH3 缩合反应后，依次脱去C端保护基、侧链保护基和N端保护基得到目标化合物。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其中缩合反应是在二环己基碳二亚胺(DCC)存在下于无水THF中进行；脱去N端保护基如Boc是在含氯化氢的乙酸乙酯中进行；脱去C端保护基如OBzl是在甲醇中进行皂化；脱去侧链保护基如Z、0Bzl、N02是在甲醇中发生氢解。
4.根据权利要求2所述的制备方法，包括如下步骤1)在DCC存在下Boc-Pro在无水THF中HONp脱水形成Boc-Pro-ONp；2)在含水的二氧六环中Boc-Pro-ONp与L-Ala缩合为Boc-Pro-Ala；3)在DCC和HOBt存在下Boc-Pro-Ala在无水THF中与Lys(Z)-OBzl缩合为 Boc-Pro-Ala-Lys(Z)-OBzl ；4)在甲醇中将Boc-Pro-Ala-Lys (Z)-OBzl 皂化为 Boc-Pro-Ala-Lys(Z)；5)在DCC存在下BoC-ASp(0Bzl)在无水THF中与饱和脂肪醇缩合为 Boc-Asp (OBzl) -OCH2 (CH2) nCH3 ；6)在甲醇中Boc-Asp (OBzl) -OCH2 (CH2) nCH3 氢解为 Boc_Asp-0CH2 (CH2) nCH3 ；7)在DCC和HOBt存在下Boc-Arg(NO2)在无水THF中与Gly-OBzl缩合为 Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl ；8)在甲醇中将Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 皂化为 Boc-Arg(NO2)-Gly ；9)在DCC和HOBt存在下Boc-Asp(OBzl)在无水THF中与Phe-OBzl缩合为 Boc-Asp(OBzl)-Phe-OBzl ；10)在含氯化氢的乙酸乙酯中Boc-Asp(OBzl)-Phe-OBzl脱除Boc生成 Asp (OBzl)-Phe-OBzl ；11)在DCC 和 HOBt 存在下 Boc-Arg (NO2) -Gly 在无水 THF 中与 Asp (OBzl) -Phe-OBzl 缩合为 Boc-Arg (NO2)-Gly-Asp (OBzl)-Phe-OBzl ；12)在含氯化氢的乙酸乙酯中Boc-Arg(NO2)-Gly-Asp (OBzl)-Phe-OBzl脱除Boc生成 Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Phe-OBzl ；13)在DCC 和 HOBt 存在下 Boc-Asp-OCH2 (CH2) nCH3 在无水 THF 中与Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Phe-OBzl 缩合为 Boc-Asp [Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Phe-OBz 1] -OCH2 (CH2) nCH3 ；14)在含氯化氢的乙酸乙酯中Boc-Asp [Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Phe-OBzl]-OCH2 (C H2) nCH3 脱除 Boc 生成 Asp [Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Phe-OBz 1] -OCH2 (CH2) nCH3 ；15)在DCC 和 HOBt 存在下 Boc-Pro-Ala-Lys (Z)在无水 THF 中与 Asp [Arg (NO2) -Gly-A sp (OBzl) -Phe-OBzl] -OCH2 (CH2) nCH3 缩合为 Boc-Pro-Ala-Lys (Z) -Asp [Arg (NO2) -Gly-Asp ( OBzl)-Phe-OBzl]-OCH2(CH2)nCH3 ；16)在甲醇中Boc-Pro-Ala-Lys (Z) -Asp [Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Phe-OBzl]-OCH2 (C H2) nCH3 氢解为 Boc-Pro-Ala-Lys-Asp (Arg-Gly-Asp-Phe) -OCH2 (CH2) n_CH3 ；17)在含氯化氢的乙酸乙酯中Boc-Pro-Ala-Lys-Asp (Arg-Gly-Asp-Phe) -OCH2 (CH2) nCH3 脱 Boc 生成 Pro-Ala-Lys-Asp (Arg-Gly-Asp-Phe) -OCH2 (CH2) n_CH3。
5.权利要求1所述的具有靶向性溶血栓活性的寡肽在制备抗血栓药物中的应用。
全文摘要
本发明提供了通式6a-f(式中n＝6、8、10、12、14和16)代表的6种靶向性溶血栓寡肽，提供了它们的制备方法，进一步提供了它们在大鼠颈动静脉旁路插管血栓模型上的溶血栓、抗血栓作用，以及自主装性能。结果表明这6种新型化合物不但具有优秀的溶血栓作用，而且在相同剂量下具有抗血栓活性，这说明本发明中的化合物在溶解血栓的同时有预防新血栓形成的作用优势，从而提示6a-f代表的6种寡肽在临床应用中具有更好的前景。
文档编号C07K1/06GK102485748SQ20101057639
公开日2012年6月6日 申请日期2010年12月1日 优先权日2010年12月1日
发明者彭师奇, 秦天霞, 赵明 申请人:首都医科大学