专利名称：一种假虎刺酮的制备方法
一种假虎刺酮的制备方法技术领域
本发明属于天然药物化学领域，特别是涉及一种假虎刺酮的制备方法。
背景技术：
假虎刺酮(Carissone)，CAS号 473_10_9，mp.78_79 °C，分子式 C15H24O2，分子量236.36，结构式为 CH3 ο I η Γ η CH3CH3
假虎刺酮来源于夹竹桃科(Apocynaceae)埃及假虎刺Carissa edulis Vahl的根。研究表明，假虎刺酮具有抗真菌作用。在lmg/ml剂量琼脂培养42天后，对黑曲霉UA —172 -1和烟曲霉ATCC的抑制率分别为60%和100% 通过文献检索，国内尚未见从埃及假虎刺的根中制备假虎刺酮的方法。发明内容
本发明的目的是提供一种假虎刺酮的制备方法，工艺简单、提取率高，整个过程具有安全、无毒等优点。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现的: (1)取枝花阿克尼茄树叶粉碎，加入超临界萃取釜中，95%-100%乙醇溶液为夹带剂，通入液态CO2萃取，解析得萃取物； (2)上述萃取物用甲醇溶解，加少量中性氧化镁拌样，挥干溶剂，干法上氧化镁柱，石油醚-丙酮混合溶剂梯度洗脱，收集洗脱液减压浓缩得粗提物； (3 )上述粗提物采用高速逆流色谱分离，紫外检测器监测，收集目标成分，冷藏结晶，得假虎刺酮。
步骤(I)中所述萃取压力25-35MPa、温度40-55°C，萃取时间为50_90min，解析压力 7.5-9MPa、温度 32-40 °C。
步骤(I)中所述CO2流量为2.5-5ml/g生药/min。
步骤(I)中所述夹带剂用量为总萃取溶剂的12-18%。
步骤(2)中 所述中性氧化镁粒径为200-300目。
步骤(2)中所述石油醚-丙酮体积比为23-2:3。
步骤(3)中所述高速逆流色谱的溶剂系统为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水组合，比例为5-7:5-8:6-8:4-7，下相为流动相，上相为固定相。
本发明的积极效果是:1.采用超临界CO2萃取，高效无溶剂残留，对环境无污染； 2.采用柱层析纯化，操作简单，处理量大； 3.采用高速逆流色谱分离，分离速度快，样品无损失，溶剂可以循环使用，适合连续制备。
具体实施方式
下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明。
实施例1: 枝花阿克尼茄树叶粉碎，取Ikg加入超临界萃取釜中，通入液态CO2,设置萃取压力25MPa、温度40°C， 达到上述参数后，调整液态CO2流量为4ml/g生药/min，95%乙醇溶液为夹带剂，夹带剂用量为总萃取溶剂的15%，动态萃取50min，在压力7.5MPa、温度40°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化镁拌样，挥干溶剂，干法上氧化镁柱，石油醚-丙酮23:3、15:3、5:3、2:3混合溶剂梯度洗脱，收集洗脱液减压浓缩得粗提物。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水按6:8:7:5混合，混合充分分层后，取上相注满高速逆流色谱柱，同时开转主机850rpm,泵入下相做流动相,待系统平衡后，流速调节为3.5ml/min,同时用固定相溶解粗提物，由进样阀进样，紫外检测器监测，收集目标流分，连续制备，冷藏流分，得结晶物，经HPLC检测，纯度98.2%。
实施例2: 枝花阿克尼茄树叶粉碎，取2kg加入超临界萃取釜中，通入液态CO2,设置萃取压力35MPa、温度50°C，达到上述参数后，调整液态CO2流量为5ml/g生药/min，99%乙醇溶液为夹带剂，夹带剂用量为总萃取溶剂的18%，动态萃取70min，在压力9MPa、温度32°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化镁拌样，挥干溶剂，干法上氧化镁柱，石油醚-丙酮21:3、12:3、5:3、2:3混合溶剂梯度洗脱，收集洗脱液减压浓缩得粗提物。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水按7:5:6:4混合，混合充分分层后，取上相注满高速逆流色谱柱，同时开转主机950rpm,泵入下相做流动相，待系统平衡后，流速调节为3ml/min,同时用固定相溶解粗提物，由进样阀进样，紫外检测器监测，收集目标流分，连续制备，冷藏流分，得结晶物，经HPLC检测，纯度97.1%。
实施例3: 枝花阿克尼茄树叶粉碎，取2kg加入超临界萃取釜中，通入液态CO2,设置萃取压力30MPa、温度55°C，达到上述参数后，调整液态CO2流量为2.5ml/g生药/min，100%乙醇溶液为夹带剂，夹带剂用量为总萃取溶剂的12%，动态萃取90min，在压力8MPa、温度35°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化镁拌样，挥干溶剂，干法上氧化镁柱，石油醚-丙酮18:3、9:3、2:3混合溶剂梯度洗脱，收集洗脱液减压浓缩得粗提物。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水按5:7:8:7混合，混合充分分层后，取上相注满高速逆流色谱柱，同时开转主机900rpm,泵入下相做流动相，待系统平衡后，流速调节为3ml/min,同时用固定相溶解粗提物，由进样阀进样，紫外检测器监测，收集目标流分，连续制备，冷藏流分，得结晶物，经HPLC检测，纯度97.4%。
权利要求
1.一种假虎刺酮的制备方法，其特征在于以下步骤: (1)取枝花阿克尼茄树叶粉碎，加入超临界萃取釜中，95%-100%乙醇溶液为夹带剂，通入液态CO2萃取，解析得萃取物； (2)上述萃取物用甲醇溶解，加少量中性氧化镁拌样，挥干溶剂，干法上氧化镁柱，石油醚-丙酮混合溶剂梯度洗脱，收集洗脱液减压浓缩得粗提物； (3 )上述粗提物采用高速逆流色谱分离，紫外检测器监测，收集目标成分，冷藏结晶，得假虎刺酮。
2.根据权利要求1所述假虎刺酮的制备方法，其特征在于步骤(I)中所述萃取压力25-35MPa、温度 40_55°C，萃取时间为 50_90min，解析压力 7.5_9MPa、温度 32_40°C。
3.根据权利要求1所述假虎刺酮的制备方法，其特征在于步骤(I)中所述CO2流量为2.5_5ml/g 生药 /min。
4.根据权利要求1所述假虎刺酮的制备方法，其特征在于步骤(I)中所述夹带剂用量为总萃取溶剂的12-18%。
5.根据权利要求1所述假虎刺酮的制备方法，其特征在于步骤(2)中所述中性氧化镁粒径为200-300目。
6.根据权利要求1所述假虎刺酮的制备方法，其特征在于步骤(2)中所述石油醚-丙酮体积比为23-2:3。
7.根据权利要求1所述假虎刺酮的制备方法，其特征在于步骤(3)中所述高速逆流色谱的溶剂系统为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水组合，比例为5-7:5-8:6-8:4-7，下相为流动相，上相为固定相。·
全文摘要
本发明公开了一种假虎刺酮的制备方法。方法步骤如下a.取枝花阿克尼茄树叶粉碎，加入超临界萃取釜中，乙醇为夹带剂进行超临界CO2萃取；b.萃取物采用中性氧化镁柱层析进行纯化，石油醚-丙酮混合溶剂梯度洗脱，收集洗脱液减压浓缩得粗提物；c.粗提物采用高速逆流色谱分离，紫外检测器监测，收集目标成分，冷藏结晶，得假虎刺酮无色结晶。采用本发明制备假虎刺酮，工艺简单、效率高，所得产品含量高，适合工业化生产。
文档编号C07C45/79GK103232335SQ20131019602
公开日2013年8月7日 申请日期2013年5月24日 优先权日2013年5月24日
发明者苏刘花, 万冬梅 申请人:南京泽朗农业发展有限公司