人免疫缺陷病毒复制的抑制剂相关申请的交叉引用本申请要求2013年3月13日提交的美国临时专利申请系列号61/779,589的优先权，其全文经此引用并入本文。发明背景本公开大体上涉及用于治疗人免疫缺陷病毒（HIV）感染的化合物、组合物和方法。本公开提供HIV的新型抑制剂、含有此类化合物的药物组合物和使用这些化合物治疗HIV感染的方法。人免疫缺陷病毒（HIV）已被确认为是造成获得性免疫缺陷综合征（AIDS）（一种以免疫系统破坏和不能对抗威胁生命的机会性感染为特征的绝症）的病原体。最近的统计数据表明全球多达三千三百三十万人感染该病毒（UNAIDSReportontheGlobalAIDSEpidemic2010）。除大量已感染的个体外，该病毒还在继续传播。来自1998年的估算指出仅该年就有接近6百万新感染。同年与HIV和AIDS相关的死亡病例有大约两百五十万起。目前有许多抗病毒药物可用于对抗该感染。这些药物可基于它们靶向的病毒蛋白质或它们的作用模式分类。特别地，沙奎那韦、茚地那韦、利托那韦、奈非那韦、阿扎那韦、地瑞那韦、安普那韦、福沙那韦、洛匹那韦和替拉那韦是HIV表达的天冬氨酰蛋白酶的竞争性抑制剂。齐多夫定、去羟肌苷、司他夫定、拉米夫定、扎西他滨、恩曲他滨、替诺福韦和阿巴卡韦是表现为底物模拟物以终止病毒cDNA合成的核苷（核苷酸）逆转录酶抑制剂。非核苷逆转录酶抑制剂奈韦拉平、地拉韦定、依法韦仑和依曲韦林通过非竞争（或无竞争）机制抑制病毒cDNA的合成。恩夫韦地和马拉韦罗抑制病毒进入宿主细胞。HIV整合酶抑制剂雷特格韦（MK-0518,Isentress®）也已被批准用于有治疗经验的患者，并且清楚的是，这种类型的抑制剂作为含有不同种类的HIV抑制剂的联合方案的一部分非常有效。独自使用时，这些药物有效减少病毒复制：但是，该效果只是暂时的，因为病毒容易对用作单一疗法的所有已知试剂产生耐药性。另一方面，联合治疗在许多患者中已证实对减少病毒和抑制耐药性的出现都非常有效。在联合治疗广泛普及的美国，HIV相关死亡的数量已急剧下降（Palella,F.J.；Delany,K.M.；Moorman,A.C.；Loveless,M.O.；Furher,J.；Satten,G.A.；Aschman,D.J.；Holmberg,S.D.N.Engl.J.Med.1998,338,853-860）。遗憾地，并非所有患者都有响应并且许多对这种治疗无效。实际上，最初的研究表明，该抑制性联合治疗中的至少一种药物最终对大约30-50%的患者无效。治疗失败在大多数情况下由病毒耐药性的出现造成。病毒耐药性又由HIV-1在感染过程中的复制速率以及与病毒聚合酶有关的相对较高的病毒突变速率和HIV感染个体在服用他们的处方药物时缺乏依从性造成。显然需要优选对已耐受目前批准药物的病毒具有活性的新抗病毒剂。其它重要的因素包括与许多目前批准药物相比改进的安全性和更方便的给药方案。已经公开了抑制HIV复制的化合物。参见WO2007131350、WO2009062285、WO2009062288、WO2009062289、WO2009062308、WO2010130034、WO2010130842、WO2011015641、WO2011076765、WO2012003497、WO2012003498、WO2012033735、WO2012065963和WO2012066442。本发明提供技术优点，例如，该化合物新颖并可用于治疗HIV。另外，该化合物例如在它们的作用机制、结合力、抑制效力、靶选择性、可溶性、安全性或生物利用率的一个或多个方面提供药用优点。发明描述本发明包含式I化合物，包括可药用盐，其药物组合物，及其抑制HIV整合酶和治疗HIV或AIDS感染的用途。本发明的一方面是式I的化合物或其可药用盐其中：R1是氢或烷基；R2是氢或烷基；R3是氢、烷基或卤素；X1是吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、咪唑基、噁唑基或噻唑基；X2是苄基，其中所述苄基可被0-3个选自卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基和卤代烷氧基的取代基取代；X3是O或不存在；X4是亚烷基或亚烯基；X5是O或不存在；且X6是氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、高哌啶基、高哌嗪基或高吗啉基，并且被0-3个卤素或烷基取代基取代。本发明的另一方面是式I的化合物或其可药用盐，其中R1是烷基；R2是烷基；R3是是氢；X1是吡唑基、噁唑基或噻唑基；X2不存在或是苄基，其中所述苄基可被0-3个选自卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基和卤代烷氧基的取代基取代；X3是O或不存在；X4是亚烷基或亚烯基；X5是O或不存在；且X6是氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、高哌啶基、高哌嗪基或高吗啉基，并且被0-3个卤素或烷基取代基取代。本发明的另一方面是式I的化合物，其中R1是烷基，R2是烷基且R3是氢。本发明的另一方面是式I的化合物，其中X1是吡唑基。本发明的另一方面是式I的化合物，其中X1是噁唑基。本发明的另一方面是式I的化合物，其中X1是噻唑基。本发明的另一方面是式I的化合物，其中X4是亚丙基、亚丙烯基、亚丁基、亚丁烯基、亚戊基、亚戊烯基、亚己基或亚己烯基。本发明的另一方面是式I的化合物，其中X4是亚丙基、亚丙烯基、亚丁基、亚丁烯基、亚戊基或亚戊烯基。本发明的另一方面是式I的化合物，其中X6是被0-1个烷基取代基取代的哌啶基。任何变量（包括R1、R2、R3、X1、X2、X3、X4、X5和X6）的任何范围可独立地与变量的任何其它实例的范围一起使用。除非另有规定，这些术语具有下列含义。“烷基”是指由1至6个碳构成的直链或支链烷基。“烯基”是指具有至少一个双键的由2至6个碳构成的直链或支链烷基。“亚烷基”是指由1至6个碳构成的直链或支链二价烷基。“亚烯基”是指具有至少一个双键的由2至6个碳构成的直链或支链二价烯基。“环烷基”是指由3至7个碳构成的单环环系。“羟基烷基”、“烷氧基”和具有取代烷基部分的其它术语包括就烷基部分而言由1至6个碳原子构成的直链和支链异构体。“卤素”包括氟、氯、溴和碘。在用卤素规定的取代基，例如“卤代烷基”和“卤代烷氧基”、“卤代苯基”和“卤代苯氧基”中，“卤代”包括从单卤代到全卤代的所有卤代异构体。“芳基”包括碳环和杂环芳族取代基。通过化学结构式显示键合在多环体系（例如双环环系）上的可变位置的取代基旨在键合到它们在结构式中附着到的环上。括号和多括号术语旨在向本领域技术人员阐明键合关系。例如，((R)烷基)之类的术语是指被取代基R进一步取代的烷基取代基。本发明包括该化合物的所有可药用盐形式。可药用盐是抗衡离子不会显著影响该化合物的生理活性或毒性并因此充当药理等效物的那些盐。可以根据常见有机技术使用市售试剂制备这些盐。一些阴离子盐形式包括乙酸盐、醋硬脂酸盐、苯磺酸盐、溴化物、氯化物、柠檬酸盐、富马酸盐、葡糖醛酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、碘化物、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、硝酸盐、双羟萘酸盐（pamoate）、磷酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐和xinofoate。一些阳离子盐形式包括铵、铝、苄星青霉素、铋、钙、胆碱、二乙基胺、二乙醇胺、锂、镁、葡甲胺、4-苯基环己基胺、哌嗪、钾、钠、氨丁三醇和锌。本发明的一些化合物以立体异构形式存在。本发明包括该化合物的所有立体异构形式，包括对映体和非对映体。制备和分离立体异构体的方法是本领域中已知的。本发明包括该化合物的所有互变异构形式。本发明包括阻转异构体和旋转异构体。本发明意在包括本化合物中出现的原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子序数但不同质量数的那些原子。作为一般实例而非限制，氢的同位素包括氘和氚。碳的同位素包括13C和14C。本发明的同位素标记化合物通常可通过本领域技术人员已知的常规技术或通过与本文描述的那些类似的方法使用适当的同位素标记试剂代替原本使用的未标记试剂来制备。这样的化合物具有各种潜在用途，例如作为测定生物活性中的标样和试剂。在稳定同位素的情况下，这样的化合物具有有利地改变生物、药理学或药代动力学性质的潜力。生物方法HIV复制的抑制.构建重组NL-Rluc病毒，其中来自NL4-3的nef基因的一个部分被海肾荧光素酶基因替代。通过两个质粒pNLRLuc和pVSVenv的共转染制备NL-Rluc病毒。pNLRLuc含有在PvuII位置克隆到pUC18中的NL-RlucDNA，而pVSVenv含有连接到LTR启动子上的VSVG蛋白质的基因。使用来自Invitrogen(Carlsbad,CA)的LipofectAMINEPLUS试剂盒根据制造商的指示在293T细胞中以1:3的pNLRLuc:pVSVenv比率进行转染，并在MT-2细胞中滴定生成的假型病毒。关于敏感性分析，在化合物存在下使用滴定的病毒感染MT-2细胞，并在培养5天后，处理细胞并通过表达的荧光素酶的量量化病毒生长。这提供用于量化病毒生长程度和因此量化受试化合物的抗病毒活性的简单容易的方法。使用来自Promega(Madison,WI)的DualLuciferase试剂盒量化荧光素酶。通过在该化合物的连续稀释液存在下培养，测定病毒对化合物的敏感性。使用中效方程的指数形式计算50%有效浓度（EC50），其中(Fa)=1/[1+(ED50/药物浓度)m]（JohnsonVA,ByingtonRT.InfectivityAssay.InTechniquesinHIVResearch.ed.AldoviniA,WalkerBD.71-76.NewYork:StocktonPress.1990）。在三种血清条件下评估化合物的抗病毒活性：10%FBS、15mg/ml人血清白蛋白/10%FBS或40%人血清/5%FBS，并使用来自至少2个实验的结果计算EC50值。结果显示于表1中。药物组合物和使用方法本发明的化合物抑制HIV复制。因此，本发明的另一方面是治疗人类患者的HIV感染的方法，其包括与可药用载体一起给予治疗有效量的式I的化合物或其可药用盐。本发明的另一方面是式I的化合物在制备用于治疗AIDS或HIV感染的药物中的用途。本发明的另一方面是治疗人类患者的HIV感染的方法，其包括与治疗有效量的至少一种用于治疗AIDS或HIV感染的其它药剂一起给予治疗有效量的式I的化合物或其可药用盐，所述其它药剂选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV融合抑制剂、HIV吸附抑制剂、CCR5抑制剂、CXCR4抑制剂、HIV出芽或成熟抑制剂和HIV整合酶抑制剂。本发明的另一方面是一种方法，其中所述药剂是核苷HIV逆转录酶抑制剂。本发明的另一方面是一种方法，其中所述核苷HIV逆转录酶抑制剂选自阿巴卡韦、去羟肌苷、恩曲他滨、拉米夫定、司他夫定、替诺福韦、扎西他滨和齐多夫定或其可药用盐。本发明的另一方面是一种方法，其中所述药剂是非核苷HIV逆转录酶抑制剂。本发明的另一方面是一种方法，其中所述非核苷HIV逆转录酶抑制剂选自地拉韦定、依法韦仑和奈韦拉平或其可药用盐。本发明的另一方面是一种方法，其中所述药剂是HIV蛋白酶抑制剂。本发明的另一方面是一种方法，其中所述HIV蛋白酶抑制剂选自安普那韦、阿扎那韦、茚地那韦、洛匹那韦、奈非那韦、利托那韦、沙奎那韦和福沙那韦或其可药用盐。本发明的另一方面是一种方法，其中所述药剂是HIV融合抑制剂。本发明的另一方面是一种方法，其中所述HIV融合抑制剂是恩夫韦地或T-1249或其可药用盐。本发明的另一方面是一种方法，其中所述药剂是HIV吸附抑制剂。本发明的另一方面是一种方法，其中所述药剂是CCR5抑制剂。本发明的另一方面是一种方法，其中所述CCR5抑制剂选自Sch-C、Sch-D、TAK-220、PRO-140和UK-427,857或其可药用盐。本发明的另一方面是一种方法，其中所述药剂是CXCR4抑制剂。本发明的另一方面是一种方法，其中所述CXCR4抑制剂是AMD-3100或其可药用盐。本发明的另一方面是一种方法，其中所述药剂是HIV出芽或成熟抑制剂。本发明的另一方面是一种方法，其中所述出芽或成熟抑制剂是PA-457或其可药用盐。本发明的另一方面是一种方法，其中所述药剂是HIV整合酶抑制剂。本发明的另一方面是一种药物组合物，其包含治疗有效量的式I的化合物或其可药用盐与至少一种用于治疗AIDS或HIV感染的其它药剂和可药用载体，所述其它药剂选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV融合抑制剂、HIV吸附抑制剂、CCR5抑制剂、CXCR4抑制剂、HIV出芽或成熟抑制剂和HIV整合酶抑制剂。本发明的另一方面是所述组合物，其中所述药剂是核苷HIV逆转录酶抑制剂。本发明的另一方面是所述组合物，其中所述核苷HIV转录酶抑制剂选自阿巴卡韦、去羟肌苷、恩曲他滨、拉米夫定、司他夫定、替诺福韦、扎西他滨和齐多夫定或其可药用盐。本发明的另一方面是所述组合物，其中所述药剂是非核苷HIV逆转录酶抑制剂。本发明的另一方面是所述组合物，其中所述非核苷HIV逆转录酶抑制剂选自地拉韦定、依法韦仑和奈韦拉平或其可药用盐。本发明的另一方面是所述组合物，其中所述药剂是HIV蛋白酶抑制剂。本发明的另一方面是所述组合物，其中所述HIV蛋白酶抑制剂选自安普那韦、阿扎那韦、茚地那韦、洛匹那韦、奈非那韦、利托那韦、沙奎那韦和福沙那韦或其可药用盐。本发明的另一方面是所述组合物，其中所述药剂是HIV融合抑制剂。本发明的另一方面是所述组合物方法，其中所述HIV融合抑制剂是恩夫韦地或T-1249或其可药用盐。本发明的另一方面是所述组合物，其中所述药剂是HIV吸附抑制剂。本发明的另一方面是所述组合物，其中所述药剂是CCR5抑制剂。本发明的另一方面是所述组合物，其中所述CCR5抑制剂选自Sch-C、Sch-D、TAK-220、PRO-140和UK-427,857或其可药用盐。本发明的另一方面是一种方法，其中所述药剂是CXCR4抑制剂。本发明的另一方面是一种方法，其中所述CXCR4抑制剂是AMD-3100或其可药用盐。本发明的另一方面是所述组合物，其中所述药剂是HIV出芽或成熟抑制剂。本发明的另一方面是所述组合物，其中所述出芽或成熟抑制剂是PA-457或其可药用盐。本发明的另一方面是所述组合物，其中所述药剂是HIV整合酶抑制剂。关于式I的化合物与至少一种抗-HIV剂一起给药，“联合”、“共同给药”、“同时”和类似术语是指这些组分是如AIDS和HIV感染领域的专业人员所理解的联合抗逆转录病毒疗法或高效抗逆转录病毒疗法（HAART）的一部分。“治疗有效”是指提供如AIDS和HIV感染领域的专业人员所理解的有意义的患者益处所需的药剂量。一般而言，治疗目标是抑制病毒载量、恢复和保持免疫功能、改进的生活质量和HIV相关的发病率和死亡率的降低。“患者”是指如AIDS和HIV感染领域的专业人员所理解的感染HIV病毒并适合治疗的人。“治疗”、“疗法”、“方案”、“HIV感染”、“ARC”、“AIDS”和相关术语如AIDS和HIV感染领域的专业人员理解的那样使用。本发明的化合物通常作为由治疗有效量的式I的化合物或其可药用盐和可药用载体构成的药物组合物提供并可能含有常规赋形剂。治疗有效量是提供有意义的患者益处所需的量。可药用载体是具有可接受的安全性的那些常规已知的载体。组合物包括所有常见的固体和液体形式，包括胶囊、片剂、锭剂和粉剂以及液体混悬剂、糖浆、酏剂和溶液剂。使用常见配制技术制备组合物，并且常规赋形剂（如粘合和润湿剂）和媒介物（如水和醇）常用于组合物。参见例如Remington’sPharmaceuticalSciences,第17版,MackPublishingCompany,Easton,PA(1985)。固体组合物通常以剂量单位配制，且每剂提供大约1至1000毫克活性成分的组合物是优选的。剂量的一些实例是1毫克、10毫克、100毫克、250毫克、500毫克和1000毫克。通常，其它抗逆转录病毒剂在与临床使用的这类药剂类似的单位范围内存在。通常，这是0.25-1000毫克/单位。液体组合物通常在剂量单位范围内。通常，该液体组合物在1-100毫克/毫升的单位剂量范围内。剂量的一些实例是1毫克/毫升、10毫克/毫升、25毫克/毫升、50毫克/毫升和100毫克/毫升。通常，其它抗逆转录病毒剂在与临床使用的这类药剂类似的单位范围内存在。通常，这是1-100毫克/毫升。本发明包括所有常规给药模式；口服和肠道外方法是优选的。通常，给药方案类似于临床使用的其它抗逆转录病毒剂。通常，日剂量为每天1-100毫克/公斤体重。通常，口服需要的化合物较多，肠道外较少。但是，医生将利用合理的医疗判断确定具体给药方案。本发明还包括在联合疗法中提供该化合物的方法。也就是说，该化合物可以与可用于治疗AIDS和HIV感染的其它药剂联合但分开使用。这些药剂的一些包括HIV吸附抑制剂、CCR5抑制剂、CXCR4抑制剂、HIV细胞融合抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV核苷逆转录酶抑制剂、HIV非核苷逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、出芽和成熟抑制剂、免疫调节剂和抗感染药。在这些联合方法中，式I的化合物通常以每天1-100毫克/公斤体重的日剂量与其它药剂联合给药。所述其它药剂通常以治疗上使用的量给药。但是，医生将利用合理的医疗判断确定具体给药方案。合成方法本发明的化合物可通过本领域已知的各种方法制备，包括下列方案和具体实施方案部分的那些。合成方案中所示的结构编号和变量编号不同于并且不应混淆于权利要求或说明书其余部分中的结构或变量编号。方案中的变量仅意在例示如何制备本发明的一些化合物。本公开不限于上述示例性实例且这些实例应在所有方面被视为示例性而非限制性的，参考所附权利要求书而非上述实例，因此意在涵盖落在权利要求书的含义和等同范围内的所有变化。方案和实施例中所用的缩写通常遵循本领域中使用的惯例。说明书和实施例中所用的化学缩写如下定义：“KHMDS”为双(三甲基甲硅烷基)氨基钾；"DMF"为N,N-二甲基甲酰胺；“HATU”为六氟磷酸O-(t-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓，“MeOH”为甲醇；“Ar”为芳基；"TFA"为三氟乙酸，“DMSO”为二甲亚砜；“h”为小时；“rt”为室温或保留时间（上下文会规定）；“min”为分钟；"EtOAc"为乙酸乙酯；"THF"为四氢呋喃；“Et2O”为乙醚；"DMAP"为4-二甲基氨基吡啶；“DCE”为1,2-二氯乙烷；“ACN”为乙腈；“DME”为1,2-二甲氧基乙烷；“HOBt”为水合1-羟基苯并三唑；和“DIEA”为二异丙基乙胺。本文所用的缩写如下定义：“1x”为一次，“2x”为两次，“3x”为三次，"℃"为摄氏度，“eq”为当量，“g”为克，“mg”为毫克，“L”为升，“mL”为毫升，“μL”为微升，“N”为当量浓度（normal），“M”为摩尔浓度，“mmol”为毫摩尔，“atm”为大气压，“psi”为磅/平方英寸，“conc.”为浓缩，“sat”或“sat’d”为饱和，“MW”为分子量，“mp”为熔点，“ee”为对映异构过量，“MS”或“MassSpec”为质谱法，“ESI”为电喷雾电离质谱法，“HR”为高分辨率，“HRMS”为高分辨质谱法，“LCMS”为液相色谱-质谱法，“HPLC”为高压液相色谱法，“RPHPLC”为反相HPLC，“TLC”或“tlc”为薄层色谱法，“NMR”为核磁共振波谱法，“1H”为质子，“δ”为delta，“s”为单峰，“d”为双重峰，“t”为三重峰，“q”为四重峰，“m”为多重峰，“br”为宽，“Hz”为赫兹，且“α”、“β”、“R”、“S”、“E”和“Z”为本领域技术人员熟悉的立体化学名称。一些化合物可根据方案I由适当取代的杂环I-1合成，化合物I-1和I-2是商购的或通过本领域已知的反应合成。中间体I-3可通过本领域已知的程序制备或如以下实施例中所述使用化合物I-1和化合物I-2制备。中间体I-3可使用本领域技术人员已知的条件转化为中间体I-4。中间体I-4可通过本领域已知的反应包括Davis氧化，氧化为中间体I-5。中间体I-5可通过已知的条件包括Dess-Martin氧化，氧化为中间体I-6。中间体I-6在催化手性配体的存在下使用已知的条件还原为手性中间体I-7。中间体I-7可通过已知的条件包括乙酸叔丁酯和高氯酸转化为中间体I-8。使用本领域已知的条件将胺偶联至中间体I-8可提供中间体I-9。中间体I-9可通过本领域已知的条件包括水解转化为中间体I-10。中间体I-10通过本领域技术人员公知的方法转化为中间体I-11。中间体I-11通过本领域公知的方法包括关环复分解反应转化为大环I-12。中间体I-12的皂化提供目标化合物I-13。或者，中间体I-11可以通过本领域技术人员公知的方法经由中间体I-14转化为最终化合物I-13。本发明的一些化合物也可通过方案II中概述的方法制备。本发明的一些化合物也可通过方案III中概述的方法制备。本文所述的化合物通过本领域技术人员已知的方法通过硅胶柱上的正相柱色谱法使用适当的溶剂体系来提纯。本文实验章节中提到的制备HPLC提纯通过C18制备柱(5μm)上使用以下流动相的梯度洗脱进行：流动相A:9:1H2O/乙腈含10mMNH4OAc和流动相B:A:9:1乙腈/H2O含10mMNH4OAc或流动相A:95:5H2O/MeOH含20mMNH4OAc和流动相B:95:5MeOH/H2O含20mMNH4OAc。中间体16-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-7-羟基-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯:使用Dean-Stork冷凝器将5-氨基-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(35.5g,229mmol,根据WO2008015271制备)、2-乙酰基琥珀酸二乙酯(51.2mL,275mmol)和TsOH·H2O(0.218g,1.144mmol)于邻二甲苯(500mL)中的悬浮液回流5h。(注：该悬浮液变为清澈均匀的溶液，然后在约15分钟内从溶液中沉淀析出黄色固体)。然后，将反应混合物冷却，用己烷(250mL)稀释，过滤，用己烷洗涤并干燥得到6-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-7-羟基-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(53g,75%收率)，为浅黄色固体。中间体27-氯-6-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯:将6-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-7-羟基-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(25g,81mmol)和N,N-二甲基苯胺(20.6mL,163mmol)于POCl3(100mL)中的混合物在120℃加热3h。然后将反应冷却至室温并真空浓缩至一半体积。将其倒入大量冰水中并搅拌20min。形成沉淀并通过过滤收集。将该固体溶于乙酸乙酯(1L)并用水洗涤。水相用乙酸乙酯反萃，合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。然后粗产物用EtOAc/己烷研磨以得到7-氯-6-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(22g,67.5mmol,83%收率)，为浅黄色固体。中间体37-氯-6-(2-乙氧基-1-羟基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯:在-78℃下经20min向0.9MKHMDS(40.9mL,36.8mmol)于THF(100mL)中的搅拌溶液中添加7-氯-6-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(10g,30.7mmol)的THF(50mL)溶液。30min后，将3-苯基-2-(苯基磺酰基)-1,2-氧杂氮杂环丙烷(10.43g,39.9mmol)的THF(15mL)溶液添加到红色反应混合物中并继续在-78℃下搅拌另外30min。然后，所得橙色反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(50mL)淬灭，用EtOAc(200mL)稀释，用水(100mL)、盐水(100mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩以得到固体。该固体用少量乙酸乙酯研磨并过滤固体，用己烷洗涤并高真空干燥以得到7-氯-6-(2-乙氧基-1-羟基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(5g,16.85mmol,43%收率,90%纯)，为浅黄色固体。中间体46-(2-乙氧基-2-氧代乙酰基)-7-氯-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯:向7-氯-6-(2-乙氧基-1-羟基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸酯(5.9g13.81mmol)于CH2Cl2(100mL)中的混合物中添加Dess-Martin(5.86g,13.81mmol)并将所得混合物在室温下搅拌1h。反应混合物用乙酸乙酯(100mL)稀释并用饱和NaHCO3水溶液(30mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法提纯(5-70%EtOAc/己烷)以得到期望的7-氯-6-(2-乙氧基-2-氧代乙酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(3.5g,9.27mmol,67.1%收率)，为灰白色固体。中间体5(S)-7-氯-6-(2-乙氧基-1-羟基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯:向6-(2-乙氧基-2-氧代乙酰基)-7-氯-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(264mg,0.777mmol)于无水甲苯(5mL)中的搅拌黄色溶液中添加1.0M(R)-1-甲基-3,3-二苯基六氢吡咯并[1,2-c][1,3,2]氧杂氮杂硼杂环戊烯/甲苯(0.311mL,0.311mmol)。将混合物冷却至-35℃并历时10min添加50%儿茶酚硼烷/甲苯(0.272mL,1.088mmol)。30min后，将反应混合物缓慢升温至-15℃并搅拌另外2h，然后用EtOAc(30mL)和饱和Na2CO3水溶液(5mL)稀释。将混合物剧烈搅拌30min，有机相用饱和Na2CO3水溶液(2X5mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩。残余物通过硅胶色谱法提纯(5-100%EtOAc/己烷)以得到期望的(S)-7-氯-6-(2-乙氧基-1-羟基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(200mg,0.585mmol,75%收率)，为灰白色固体。中间体6(S)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-7-氯-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯:在室温下向(S)-7-氯-6-(2-乙氧基-1-羟基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(200mg,0.585mmol)于CH2Cl2(6mL)和乙酸叔丁酯(4mL)中的搅拌溶液中添加高氯酸(0.151mL,1.756mmol)。将反应烧瓶密封。搅拌3h后，反应混合物用CH2Cl2(50mL)稀释，用饱和NaHCO3水溶液(5mL)小心淬灭。分离有机层并用盐水(5mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩以得到黄色液体。该粗产物通过硅胶柱上的快速柱色谱法使用(10-50%EtOAc/Hex为洗脱剂)提纯以得到期望的(S)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-7-氯-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(200mg,0.503mmol,86%收率)，为粘性油状物。中间体74-羟基-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯:在N2气氛下，将甲基溴化镁(1.67mL,5.02mmol)的3N乙醚溶液逐滴添加到4-羟基-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4g,20.08mmol)于乙醚(20mL)中的冷却的(-25℃)溶液中。将反应混合物升温至室温并搅拌2h。然后将其冷却至0℃并通过添加饱和氯化铵水溶液淬灭。添加另外20mL乙醚并在分液漏斗中分配混合物。留出有机相，水相用另外20mL乙醚萃取。合并的乙醚萃取物经MgSO4干燥，过滤并蒸发得到油状物，其然后通过biotage提纯，用0-50%EtOAc/己烷洗脱以得到4-羟基-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.30g,18.0mmol,90%)，为无色油状物。中间体84-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯:在0℃下向4-羟基-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.30g,20.0mmol)于DMF(50mL)中的混合物中添加NaH(60wt%)(1.60g,39.9mmol)。然后将混合物在室温下搅拌2h。此时历时5min缓慢添加烯丙基溴(8.64mL,100mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3h。然后将其冷却至0℃并用饱和氯化铵水溶液淬灭。反应混合物用乙醚萃取。有机相经MgSO4干燥，过滤并浓缩以得到无色油状物，其然后通过biotage提纯，使用0-25%EtOAc/己烷洗脱以分离3.1g(61%)的4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯，为无色油状物。中间体94-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶盐酸盐:将4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.10g,12.1mmol)和4NHCl/二氧杂环己烷(15mL,60.0mmol)的混合物在室温下搅拌3h。然后将其真空浓缩以得到2.2g(95%)的4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶盐酸盐，为浅褐色固体。中间体10(S)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-叔丁氧基-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯:将(S)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-7-氯-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(1g,2.51mmol),4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶盐酸盐(0.723g,3.77mmol)、Hunig's碱(1.317mL,7.54mmol)于DMF(15mL)中的混合物在室温下搅拌16h。然后将其浓缩并通过biotage提纯以分离(S)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-叔丁氧基-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(1g,69%)，为白色固体。中间体11(S)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-叔丁氧基-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸:将(S)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-叔丁氧基-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(1g,1.936mmol)、NaOH(1.936mL,1.936mmol)于EtOH(10mL)中的混合物在室温下搅拌16h。然后将其浓缩并通过添加1NHCl调节pH=4。然后将其用EtOAc萃取。有机层经MgSO4干燥，过滤并浓缩以得到(S)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-叔丁氧基-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸(700mg,68%)，为白色固体。中间体121-氨基-3-(2-溴苯基)丙-2-酮·HCl:历时5min向1MLiHMDS/THF(35.5mL,35.5mmol)于THF(100mL)中的-78℃溶液中逐滴添加2-异氰乙酸甲酯(3.18g,32.1mmol)的THF(10mL)溶液。30min后，历时5min添加2-(2-溴苯基)乙酰氯(5g,21.41mmol)的THF(20mL)溶液。1h后，移去冷浴并将混合物在室温下搅拌16h。然后加入水(50mL)并用乙酸乙酯(100mL)萃取混合物，用盐水(50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物然后用浓HCl(60mL)回流3h。然后将混合物冷却至室温并通过过滤收集固体，用乙酸乙酯洗涤并高真空干燥以得到1-氨基-3-(2-溴苯基)丙-2-酮·HCl(2.7g,10.21mmol,47.7%收率)，为棕褐色固体。中间体13(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((3-(2-溴苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸(500mg,1.023mmol)于CH2Cl2(10mL,含有catDMF)中的溶液中添加草酰氯(0.099mL,1.126mmol)并将混合物在室温下搅拌1h。然后将粗制酰氯添加到1-氨基-3-(2-溴苯基)丙-2-酮·HCl(406mg,1.535mmol)和DIEA(1.072mL,6.14mmol)于CH2Cl2(10.0mL)中的预搅拌溶液中并将所得溶液在室温下搅拌4h。然后加入水并用二氯甲烷萃取混合物，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物然后通过硅胶柱上的快速柱色谱法使用(5-70%EtOAc/Hex为洗脱剂)提纯以得到(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((3-(2-溴苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(520mg,0.744mmol,72.7%收率)，为浅黄色固体。中间体14(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-溴苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((3-(2-溴苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(520mg,0.744mmol)于甲苯中的溶液中添加Lawesson's试剂(331mg,0.819mmol)并在室温下搅拌15min，在60℃下搅拌5h。然后冷却混合物，浓缩并将残余物通过Biotage提纯(0-30%EtOAc/己烷;40g柱)以得到(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-溴苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(320mg,0.459mmol,61.7%收率)，为稠膏。中间体15(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-(丁-3-烯-1-基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:在5mLbyl中放置(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-溴苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(100mg,0.144mmol)、丁-3-烯-1-基硼酸(43.0mg,0.431mmol)、Ag2O(83mg,0.359mmol)、K2CO3(79mg,0.574mmol)和THF(1mL)并将所得混合物脱气15min。然后加入PdCl2(dppf)·CH2Cl2加合物(11.72mg,0.014mmol)并继续脱气另外5min。然后将byl密封并将混合物在80℃(油浴温度)下加热72h。然后冷却反应混合物，用乙酸乙酯稀释，用水、饱和NaHCO3、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物随后通过Biotage提纯(0-30%EtOAc/己烷;25g柱)以得到(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-(丁-3-烯-1-基)苄基)噻唑-2-基-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(37mg,0.055mmol,38.4%收率)，为无色油状物。中间体16和17(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(22E)-4,26-二甲基-25-氧杂-31-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[24.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十二酸乙酯-和(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(22Z)-4,26-二甲基-25-氧杂-31-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[24.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十二酸乙酯:在70℃下向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-(丁-3-烯-1-基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(37mg,0.055mmol)于DCE(15mL)中的溶液中添加第二代Hoveyda-Grubbs催化剂(2.415mg,3.85µmol)并将混合物在70℃下加热2h。然后冷却混合物，浓缩并通过制备HPLC提纯以得到两种产物。首先洗脱的，较小环中间体16:首先洗脱，小环化合物;(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(22E)-4,26-二甲基-25-氧杂-31-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[24.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十二酸乙酯-(3mg,4.76µmol,8.65%收率):中间体17:第二洗脱的，较大环化合物；(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(22E)-4,26-二甲基-25-氧杂-31-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[24.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十二酸乙酯(7mg,10.87µmol,19.74%收率):。实施例1和2(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(22E)-4,26-二甲基-25-氧杂-31-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[24.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十二碳-2,4,6(32),8,10,12,15(20),16,18,22-十烯-3-基]乙酸和(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23Z)-4,27-二甲基-26-氧杂-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸:上述步骤的酯混合物用1NNaOH(0.033mL,0.033mmol)/MeOH(0.7mL)在70℃下处理3h。然后将混合物冷却并通过制备HPLC提纯以得到两种化合物。实施例1:首先洗脱;(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(22E)-4,26-二甲基-25-氧杂-31-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[24.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十二碳-2,4,6(32),8,10,12,15(20),16,18,22-十烯-3-基]乙酸(1.1mg,1.737µmol,36.5%收率)。实施例2:第二洗脱;(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23Z)-4,27-二甲基-26-氧杂-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸(2.5mg,3.86µmol,81%收率):。中间体181-氨基-3-(3-溴苯基)丙-2-酮·HCl:历时5min向1MLiHMDS/THF(35.5mL,35.5mmol)于THF(100mL)中的-78℃溶液中逐滴添加2-异氰乙酸甲酯(3.18g,32.1mmol)的THF(10mL)溶液。30min后，历时5min添加2-(3-溴苯基)乙酰氯(5g,21.41mmol)的THF(20mL)溶液。1h后，移去冷浴并将混合物在室温下搅拌16h。然后加入水(25mL)并用乙酸乙酯(100mL)萃取混合物，用盐水(50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物然后用浓HCl(60mL)回流3h。然后将混合物冷却至室温并通过过滤收集固体，用乙酸乙酯洗涤并高真空干燥以得到1-氨基-3-(3-溴苯基)丙-2-酮·HCl(3.7g,13.99mmol,65.3%收率)，为棕褐色固体。中间体19(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((3-(3-溴苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸(520mg,1.064mmol)于CH2Cl2(10mL,含有cat.DMF)中的溶液中添加草酰氯(0.585mL,1.171mmol)并将混合物在室温下搅拌1h。然后将粗制酰氯添加到1-氨基-3-(3-溴苯基)丙-2-酮·HCl(422mg,1.596mmol)和DIEA(1.115mL,6.39mmol)于CH2Cl2(10.00mL)中的预搅拌溶液中并将所得溶液在室温下搅拌4h。然后加入水并用二氯甲烷萃取混合物，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物随后通过硅胶柱上的快速柱色谱法使用(5-70%EtOAc/Hex为洗脱剂)提纯以得到(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((3-(3-溴苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(600mg,0.859mmol,81%收率)，为浅黄色固体。中间体20(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(3-溴苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((3-(3-溴苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(400mg,0.573mmol)于甲苯中的溶液中添加Lawesson's试剂(255mg,0.630mmol)并在室温下搅拌15min，在60℃下搅拌5h。然后冷却混合物，浓缩并将残余物通过Biotage提纯(0-30%EtOAc/己烷;40g柱)以得到(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(3-溴苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(250mg,0.359mmol,62.7%收率)，为稠膏。中间体21(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(3-(丁-3-烯-1-基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:在5mL微波byl中装入(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(3-溴苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(150mg,0.215mmol)、丁-3-烯-1-基硼酸(64.5mg,0.646mmol)、Ag2O(125mg,0.538mmol)、K2CO3(119mg,0.861mmol)和THF(3mL)并将所得混合物脱气15min。然后加入PdCl2(dppf)·CH2Cl2加合物(17.58mg,0.022mmol)并继续脱气另外5min。然后将byl密封并将混合物在80℃(油浴温度)下加热18h。然后将反应混合物冷却，用乙酸乙酯稀释，用水、饱和NaHCO3、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物然后通过Biotage提纯(0-30%EtOAc/己烷;25g柱)以得到(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(3-(丁-3-烯-1-基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(20mg,0.030mmol,13.83%收率)，为稠膏。中间体22(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(22E)-4,26-二甲基-25-氧杂-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[24.2.2.16,9.1¹0,¹³.1¹5,¹9.0²,7]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(31),16,18,22-十烯-3-基]乙酸乙酯:在70℃下向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(3-(丁-3-烯-1-基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(15mg,0.022mmol)于DCE(5mL)中的溶液中添加第二代Hoveyda-Grubbs催化剂(0.979mg,1.563µmol)并将混合物在70℃下加热2h。然后冷却混合物，浓缩并通过制备HPLC提纯以得到目标产物(3mg,4.66µmol,20.87%收率)，为被一些杂质污染的稠膏。不经进一步提纯原样用于下一步骤。实施例3(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(22E)-4,26-二甲基-25-氧杂-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[24.2.2.16,9.1¹0,¹³.1¹5,¹9.0²,7]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(31),16,18,22-十烯-3-基]乙酸:向(2S)-叔丁氧基((22E)-4,26-二甲基-25-氧杂-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[24.2.2.1~6,9~.1~10,13~.1~15,19~.0~2,7~]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(31),16,18,22-十烯-3-基)乙酸乙酯(3mg,4.66µmol)于MeOH(1mL)中的溶液中添加1NNaOH(0.023mL,0.023mmol)并将混合物在70℃下加热3h。然后冷却混合物并通过制备HPLC提纯以得到(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(22E)-4,26-二甲基-25-氧杂-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[24.2.2.16,9.1¹0,¹³.1¹5,¹9.0²,7]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(31),16,18,22-十烯-3-基]乙酸(1.5mg,2.314µmol,49.7%收率)，为白色固体。实施例4(2S)-2-(叔丁氧基)-2-{4,26-二甲基-25-氧杂-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[24.2.2.16,9.1¹0,¹³.1¹5,¹9.0²,7]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(31),16,18-九烯-3-基}乙酸:向(2S)-叔丁氧基((22E)-4,26-二甲基-25-氧杂-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[24.2.2.1~6,9~.1~10,13~.1~15,19~.0~2,7~]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(31),16,18,22-十烯-3-基)乙酸(20mg,0.032mmol)于MeOH(2mL)中的混合物中添加10%Pd/C(3.46mg,3.25µmol)并将混合物在气球氢气氛下搅拌5h。然后过滤混合物并通过制备HPLC提纯以得到(2S)-2-(叔丁氧基)-2-{4,26-二甲基-25-氧杂-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[24.2.2.16,9.1¹0,¹³.1¹5,¹9.0²,7]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(31),16,18-九烯-3-基}乙酸(9mg,0.014mmol,42.6%收率)，为灰白色固体。中间体232-(2-羟基乙基)苯酚:向2-(2-羟基苯基)乙酸(10g,65.7mmol)于THF(150mL)中的冷(0℃)溶液中添加Et3N(10.08mL,72.3mmol)，接着逐滴添加氯甲酸乙酯(6.31mL,65.7mmol)。将混合物在0℃下搅拌1h，然后过滤固体并将滤液添加到NaBH4(3.73g,99mmol)于50%THF水溶液中的冷(0℃)溶液中。将混合物在0℃下搅拌1h，然后在室温下搅拌2h。真空除去溶剂并将残余物吸收在水(200mL)和乙醚(500mL)中。分离乙醚层，用2MNa2CO3、水、1M柠檬酸和水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩以得到2-(2-羟基乙基)苯酚(7g,50.7mmol,77%收率)，为无色油状物，其不经提纯用于下一步骤。中间体24叔丁基(2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)苯氧基)二甲基甲硅烷:在0℃下向2-(2-羟基乙基)苯酚(6g,43.4mmol)于DMF(150mL)中的溶液中添加咪唑(8.87g,130mmol)、接着TBDMS-Cl(19.64g,130mmol)并将所得混合物在室温下搅拌72h。然后加入水(50mL)并用乙醚(2X200mL)萃取混合物。乙醚层随后用盐水(50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物通过Biotage提纯(0-10%EtOAc/己烷;300g柱)以得到叔丁基(2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)苯氧基)二甲基甲硅烷(10.4g,28.4mmol,65.3%收率)，为无色油状物。中间体252-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)乙醇:向叔丁基(2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)苯氧基)二甲基甲硅烷(8.87g,24.19mmol)于乙醇(100mL)中的溶液中添加PPTS(0.608g,2.419mmol)并将混合物在50℃下加热1h。然后除去溶剂，残余物通过快速色谱法提纯(5-30%EtOAc/己烷)以得到2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)乙醇(4.4g,17.43mmol,72.1%收率)，为无色油状物。中间体262-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)乙醛:在0℃下向2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)乙醇(4.3g,17.03mmol)于CH2Cl2(120mL)中的溶液中添加Dess-Martin氧化剂(10.84g,25.6mmol)并将混合物在0℃下搅拌1h，然后将混合物升温至室温并再搅拌1h。混合物然后用CH2Cl2(100mL)稀释并用饱和NaHCO3(50mL)溶液洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物然后通过快速色谱法提纯(5-30%EtOAc/己烷)以得到2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)乙醛(3.4g,13.58mmol,80%收率)，为无色油状物。中间体271-氨基-3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)丙-2-醇:将TMS-CN(2.002mL,14.94mmol)逐滴添加到2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)乙醛(3.4g,13.58mmol)和ZnI2(0.217g,0.679mmol)于干燥圆底烧瓶中的混合物中并将混合物在室温下搅拌1h。然后将粗制氰醇醚溶于乙醚(5mL)并逐滴添加到2MLAH2M/THF(7.47mL,14.94mmol)于乙醚(20mL)中的溶液中并在室温下搅拌1h。然后滴加水(1mL)，接着加入15%NaOH(1mL)和然后水(2mL)。将混合物搅拌15min(形成颗粒状黄色沉淀物)。过滤，干燥(Na2SO4)并浓缩得到1-氨基-3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)丙-2-醇(2.2g,7.82mmol,57.6%收率)，为黄色油状物，其不经进一步提纯用于下一步骤。中间体28和29(2S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)-2-羟基丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯和(2S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((2-羟基-3-(2-羟基苯基)丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸(2.2g,4.50mmol)于CH2Cl2(30mL,含有cat.DMF)中的溶液中添加草酰氯(2.477mL,4.95mmol)并将混合物在室温下搅拌1h。然后将粗制酰氯添加到1-氨基-3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)丙-2-醇·HCl(1.861g,5.85mmol)和DIEA(3.93mL,22.51mmol)于CH2Cl2(30.0mL)中的预搅拌溶液中并将所得溶液在室温下搅拌4h。然后加入水并用二氯甲烷萃取混合物，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。将粗制物然后通过硅胶柱上的快速柱色谱法使用(5-70%EtOAc/Hex为洗脱剂)提纯以得到(2S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)-2-羟基丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(1.7g,2.261mmol,50.2%收率)，为白色固体。和脱保护的苯酚(2S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((2-羟基-3-(2-羟基苯基)丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(0.8g,1.254mmol,27.9%收率)，为白色固体。中间体30(2S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((3-(2-(烯丙氧基)苯基)-2-羟基丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(2S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((2-羟基-3-(2-羟基苯基)丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(400mg,0.627mmol)于DMF(6mL)中的溶液中添加K2CO3(87mg,0.627mmol)并将混合物在70℃下加热10min。然后冷却混合物至室温并添加3-溴丙-1-烯(0.064mL,0.753mmol)并将所得混合物在室温下搅拌16h。然后加入水并用乙醚(2X25mL)萃取混合物，用盐水(10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物通过Biotage提纯(0-40%EtOAc/己烷;40g柱)以得到(2S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((3-(2-(烯丙氧基)苯基)-2-羟基丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(310mg,0.457mmol,72.9%收率)，为白色固体。4个缺失的哌啶质子。LCMS(M+H)=678.7。中间体31(2S)-2-(叔丁氧基)-2-{4,27-二甲基-10,13-二氧代-21,26-二氧杂-1,5,7,8,11-五氮杂五环[25.2.2.16,9.0²,7.0¹5,²0]三十二碳-2,4,6(32),8,15(20),16,18-七烯-3-基}乙酸乙酯:在70℃下向(2S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((3-(2-(烯丙氧基)苯基)-2-羟基丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(150mg,0.221mmol)于DCE(30mL)中的溶液中添加第二代Hoveyda-Grubbs催化剂(11.09mg,0.018mmol)并将混合物在70℃下加热2h。此时LCMS表明起始物料消耗并存在目标产物为主(环化的,非对映异构体的大约1:1混合物)。然后将混合物冷却并减压浓缩。残余物然后用MeOH(5mL)稀释并添加10%Pd/C(23.55mg,0.022mmol)。然后将混合物在气球氢气氛下搅拌1h。此时LCMS表明双键还原。混合物然后通过硅藻土垫过滤，用甲醇冲洗该垫。随后浓缩滤液，在高真空下干燥。残余物然后用CH2Cl2(5mL)稀释并添加粉末状4A°分子筛(300mg)和NMO(38.9mg,0.332mmol)。在将混合物搅拌10min后，加入TPAP(7.78mg,0.022mmol)并将混合物在室温下搅拌1h。混合物然后通过硅胶垫过滤，浓缩滤液并通过Biotage提纯(0-30%EtOAc/己烷;25g柱)以得到目标产物(62mg,0.095mmol,43.1%收率)，为白色固体。实施例5(2S)-2-(叔丁氧基)-2-{4,27-二甲基-21,26-二氧杂-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18-九烯-3-基}乙酸:向(2S)-2-(叔丁氧基)-2-{4,27-二甲基-10,13-二氧代-21,26-二氧杂-1,5,7,8,11-五氮杂五环[25.2.2.16,9.0²,7.0¹5,²0]三十二碳-2,4,6(32),8,15(20),16,18-七烯-3-基}乙酸乙酯(20mg,0.031mmol)于甲苯(1mL)中的溶液中添加Lawesson's试剂(24.90mg,0.062mmol)并将所得混合物在60℃下加热3h。然后冷却混合物，浓缩并用1NNaOH(0.363mL,0.363mmol)/MeOH(2mL)在70℃下处理3h。然后冷却混合物并通过制备HPLC提纯以得到(2S)-2-(叔丁氧基)-2-{4,27-二甲基-21,26-二氧杂-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18-九烯-3-基}乙酸(26mg,0.040mmol,54.9%收率)，为白色固体。中间体32(2S)-2-(叔丁氧基)-2-{4,27-二甲基-21,26,32-三氧杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18-九烯-3-基}乙酸乙酯:向(2S)-2-(叔丁氧基)-2-{4,27-二甲基-10,13-二氧代-21,26-二氧杂-1,5,7,8,11-五氮杂五环[25.2.2.16,9.0²,7.0¹5,²0]三十二碳-2,4,6(32),8,15(20),16,18-七烯-3-基}乙酸乙酯(60mg,0.092mmol)、Ph3P(72.7mg,0.277mmol)和TEA(0.064mL,0.462mmol)于乙腈(2mL)中的搅拌溶液中添加CCl4(0.027mL,0.277mmol)并将混合物在室温下搅拌5h，然后在40℃下搅拌16h。然后冷却混合物，浓缩并通过制备HPLC提纯以得到目标产物(8mg,0.013mmol,13.71%收率)，为稠膏。实施例6(2S)-2-(叔丁氧基)-2-{4,27-二甲基-21,26,32-三氧杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18-九烯-3-基}乙酸:向(2S)-2-(叔丁氧基)-2-{4,27-二甲基-21,26,32-三氧杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18-九烯-3-基}乙酸乙酯(8mg,0.013mmol)于MeOH(0.5mL)中的溶液中添加1NNaOH(0.063mL,0.063mmol)并将混合物在70℃下加热3h。然后冷却混合物并通过制备HPLC提纯以得到目标产物(5.9mg,9.77µmol,77%收率)，为白色固体。中间体33(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(2S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)-2-羟基丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(1.5g,1.995mmol)于CH2Cl2(20mL)中的溶液中添加粉末状4A分子筛(2g)和NMO(0.350g,2.99mmol)。在将混合物搅拌10min后，添加TPAP(0.070g,0.199mmol)并将混合物在室温下搅拌1h。混合物然后通过硅胶垫过滤。滤液随后浓缩并通过Biotage提纯(0-30%EtOAc/己烷;80g柱)以得到(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(850mg,1.133mmol,56.8%收率)，为白色固体。还回收330mg的起始物料。4个缺失的哌啶氢。LCMS(M+H)=750.7。中间体34(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(200mg,0.267mmol)于甲苯(5mL)中的溶液中添加Lawesson's试剂(162mg,0.400mmol)并在室温下搅拌15min，在60℃下搅拌5h。然后冷却混合物，浓缩，残余物通过Biotage提纯(0-40%EtOAc/己烷;40g柱)以得到(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(110mg,0.147mmol,55.1%收率)，为白色固体。4个哌啶氢缺失。LCMS(M+H)=749.5。中间体35(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-羟基苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(106mg,0.142mmol)于THF(3mL)中的溶液中逐滴添加TBAF的1M溶液(0.156mL,0.156mmol)并将所得混合物在室温下搅拌1h。此时LCMS表明反应完成。然后浓缩混合物，残余物通过Biotage提纯(5-70%,EtOAc/己烷;25g柱)以得到(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-羟基苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(74mg,0.117mmol,82%收率)，为白色固体。中间体36(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-(烯丙氧基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-羟基苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(68mg,0.107mmol)于DMF(2mL)中的溶液中添加K2CO3(29.7mg,0.215mmol)并将混合物在70℃下加热10min。然后将混合物冷却至室温并添加3-溴丙-1-烯(0.018mL,0.215mmol)，将所得混合物在室温下搅拌16h。然后加入水并用乙醚(2X25mL)萃取混合物，用盐水(10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物通过Biotage提纯(0-40%EtOAc/己烷;25g柱)以得到(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-(烯丙氧基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(60mg,0.089mmol,83%收率)，为白色固体。4个缺失的哌啶氢。LCMS(M+H)=674.6。中间体37(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[4,27-二甲基-21,26-二氧杂-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸乙酯:在70℃下向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-(烯丙氧基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(55mg,0.082mmol)于DCE(50mL)中的溶液中添加第二代Hoveryda-Grubbs催化剂(5.11mg,8.16µmol)并将混合物加热2h。然后冷却混合物，浓缩并通过Biotage提纯(0-40%EtOAc/己烷)以得到目标产物(40mg,0.062mmol,76%收率)，为灰白色固体(双键的几何学和位置未知)。实施例7(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[4,27-二甲基-21,26-二氧杂-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸:向(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-4,27-二甲基-21,26-二氧杂-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸乙酯(40mg,0.062mmol)于MeOH(2mL)中的溶液中添加1NNaOH(0.310mL,0.310mmol)并将所得混合物在70℃下加热3h。然后冷却混合物并通过制备HPLC提纯以得到目标产物(24mg,0.039mmol,62.7%收率)，为白色固体。中间体38(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-(丁-3-烯-1-基氧基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-羟基苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(100mg,0.158mmol)、丁-3-烯-1-醇(0.036mL,0.473mmol)、Ph3P(124mg,0.473mmol)于THF(3mL)中的混合物中添加DIAD(0.092mL,0.473mmol)并将混合物在室温下搅拌16h。然后加入水并用乙醚(2X25mL)萃取混合物，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物然后通过Biotage提纯(0-40%EtOAc/己烷)以得到(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-(丁-3-烯-1-基氧基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(90mg,0.131mmol,83%收率)，为稠膏。中间体39(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(24E)-4,28-二甲基-21,27-二氧杂-33-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[26.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十四碳-2,4,6(34),8,10,12,15(20),16,18,24-十烯-3-基]乙酸乙酯:在70℃下向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-(丁-3-烯-1-基氧基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(90mg,0.131mmol)于DCE(90mL)中的溶液中添加第二代Hoveyda-Grubbs催化剂(8.20mg,0.013mmol)并将混合物加热2h。然后冷却混合物，浓缩并通过Biotage提纯(0-40%EtOAc/己烷)以得到目标产物(70mg,0.106mmol,81%收率)(双键的位置未确认，被少量其它异构体污染)。实施例8(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(24E)-4,28-二甲基-21,27-二氧杂-33-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[26.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十四碳-2,4,6(34),8,10,12,15(20),16,18,24-十烯-3-基]乙酸:向(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(24E)-4,28-二甲基-21,27-二氧杂-33-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[26.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十四碳-2,4,6(34),8,10,12,15(20),16,18,24-十烯-3-基]乙酸乙酯(70mg,0.106mmol)于MeOH(2mL)中的溶液中添加1NNaOH(0.530mL,0.530mmol)并将所得混合物在70℃下加热3h。然后冷却混合物并通过制备HPLC提纯以得到目标产物(50mg,0.075mmol,70.9%收率)，为白色固体。实施例9(2S)-2-(叔丁氧基)-2-{4,28-二甲基-21,27-二氧杂-33-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[26.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十四碳-2,4,6(34),8,10,12,15(20),16,18-九烯-3-基}乙酸:向实施例8(15mg,0.024mmol)于MeOH(2mL)中的溶液中添加10%Pd/C(2.53mg,2.374µmol)并将混合物在气球氢气氛下搅拌16h。然后过滤混合物并通过制备HPLC提纯以得到目标产物(7mg,0.011mmol,46.5%收率)，为白色固体。4个缺失的哌啶氢。LCMS(M+H)=634.6。中间体40(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((3-(2-(烯丙氧基)苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(2S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((3-(2-(烯丙氧基)苯基)-2-羟基丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(220mg,0.325mmol)于CH2Cl2(6mL)中的溶液中添加粉末状4A°分子筛(1g)和NMO(57.0mg,0.487mmol)。在将混合物搅拌10min后，加入TPAP(11.41mg,0.032mmol)并将混合物在室温下搅拌1h。此时LCMS表明反应完成。然后通过硅胶垫过滤混合物。然后浓缩滤液并通过Biotage提纯(0-50%EtOAc/己烷;25g柱)以得到(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((3-(2-(烯丙氧基)苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(130mg,0.192mmol,59.3%收率)，为白色固体。4个哌啶氢缺失。LCMS(M+H)=676.7。中间体41(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-(烯丙氧基)苄基)噁唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-((3-(2-(烯丙氧基)苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(120mg,0.178mmol)、Ph3P(140mg,0.533mmol)和TEA(0.124mL,0.888mmol)于CH2Cl2(3mL)中的搅拌溶液中添加六氯乙烷(126mg,0.533mmol)并将混合物在室温下搅拌16h。然后将混合物直接装载在硅胶柱上并通过Biotage提纯(0-30%EtOAc/己烷)以得到(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-(烯丙氧基)苄基)噁唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(80mg,0.122mmol,68.5%收率)，为白色固体。4个哌啶氢缺失。LCMS(M+H)=658.7。中间体42(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-4,27-二甲基-21,26,32-三氧杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸乙酯:在70℃下向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-(烯丙氧基)苄基)噁唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(75mg,0.114mmol)于DCE(75mL)中的溶液中添加第二代Hoveyda-Grubbs催化剂(7.14mg,0.011mmol)并将混合物加热2h。然后冷却混合物，浓缩并通过Biotage提纯(0-40%EtOAc/己烷)以得到目标产物(35mg,0.056mmol,48.7%收率)，为灰白色固体(双键的几何学和位置未知，被其它异构体污染)。实施例10(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-4,27-二甲基-21,26,32-三氧杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸:将(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-4,27-二甲基-21,26,32-三氧杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸乙酯(35mg,0.056mmol)于MeOH(1.5mL)中的溶液用1NNaOH(0.278mL,0.278mmol)在70℃下处理3h。然后将混合物冷却至室温并通过制备HPLC提纯以得到目标产物(22mg,0.035mmol,62.5%收率)，为白色固体。中间体43(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-2-(5-(2-((R)-戊-4-烯-2-基氧基)苄基)噻唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-羟基苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(100mg,0.158mmol)、(R)-戊-4-烯-2-醇(40.8mg,0.473mmol)、Ph3P(124mg,0.473mmol)于THF(3mL)中的混合物中添加DEAD(0.075mL,0.473mmol)并将混合物在室温下搅拌16h。然后加入水并用乙醚(2X25mL)萃取混合物，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物然后通过Biotage提纯(0-40%EtOAc/己烷)以得到(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-2-(5-(2-((R)-戊-4-烯-2-基氧基)苄基)噻唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(30mg,0.043mmol,27.1%收率)，为稠膏。4个缺失的哌啶质子。LCMS(M+H)=702.7。中间体44(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(22R,24E)-4,22,28-三甲基-21,27-二氧杂-33-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[26.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十四碳-2,4,6(34),8,10,12,15(20),16,18,24-十烯-3-基]乙酸乙酯:在70℃下向(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-2-(5-(2-((R)-戊-4-烯-2-基氧基)苄基)噻唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(30mg,0.043mmol)于DCE(30mL)中的溶液中添加第二代Hoveyda-Grubbs催化剂(2.68mg,4.27µmol)并将混合物加热2h。然后冷却混合物，浓缩并通过Biotage提纯(0-40%EtOAc/己烷)以得到目标产物(16mg,0.024mmol,55.6%收率)(双键的位置未确认，被少量其它异构体污染)。不经进一步提纯原样用于下一步骤。LCMS(M+H)=674.5。实施例11((2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(22R)-4,22,28-三甲基-21,27-二氧杂-33-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[26.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十四碳-2,4,6(34),8,10,12,15(20),16,18-九烯-3-基]乙酸:向(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(22R,24E)-4,22,28-三甲基-21,27-二氧杂-33-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[26.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十四碳-2,4,6(34),8,10,12,15(20),16,18,24-十烯-3-基]乙酸乙酯(16mg,0.024mmol)于MeOH(2mL)中的溶液中添加10%Pd/C(2.53mg,2.374µmol)并将所得混合物在气球氢气氛下搅拌16h。此时LCMS表明双键还原。混合物然后通过硅藻土垫过滤并浓缩。所得残余物用1NNaOH(0.071mL,0.071mmol)/MeOH(2mL)在70℃下处理3h。然后冷却混合物，通过制备HPLC提纯以得到目标产物(9mg,0.014mmol,58.5%收率)。中间体454-甲酰基-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯:根据WO2008/118718中报导的程序制备。在0℃下向4-甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g,21.10mmol)于CH2Cl2(50mL)中的溶液中添加KOtBu(3.08g,27.4mmol)，接着添加MeI(3.96mL,63.3mmol)并将所得混合物在0℃下搅拌30min，然后升温至室温并搅拌1.5h。然后将反应混合物倒入盐水中，混合物用二氯甲烷萃取，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物然后通过Biotage提纯(0-20%EtOAc/己烷)以得到4-甲酰基-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.8g,7.92mmol,37.5%收率)，为无色油状物。中间体46(E)-4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯:在-78℃下向烯丙基膦酸二乙酯(2.82g,15.84mmol)于THF(50mL)中的溶液中添加1.6MMeLi(9.90mL,15.84mmol)并将所得混合物搅拌30min。然后添加HMPT(9.68mL,52.8mmol)，接着添加(E)-4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.8g,7.16mmol,54.3%收率)/THF(10mL)并将混合物在-78℃下搅拌1h，然后升温至室温。16h后，混合物用饱和NH4Cl溶液淬灭并用乙醚萃取(2x100mL)。将合并的有机萃取物干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物然后通过Biotage提纯(0-20%EtOAc/己烷;80g柱)以得到((E)-4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.8g,7.16mmol,54.3%收率)，为无色油状物。中间体47(E)-4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶·HCl:将(E)-4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.8g,7.16mmol)和4MHCl/二氧杂环己烷(8.95ml,35.8mmol)的混合物在室温下搅拌3h。然后浓缩混合物，固体用乙醚/己烷研磨，过滤并在高真空下干燥以得到(E)-4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶·HCl(1.2g,6.39mmol,89%收率)，为灰白色固体。中间体48(S,E)-7-(4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯:向(S)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-7-碘-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(2.5g,5.11mmol)和(E)-4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶·HCl(1.247g,6.64mmol)于NMP(20mL)中的溶液中添加DIEA(2.68mL,15.33mmol)并将混合物在60℃下加热72h。此时LCMS表明反应完成。然后将混合物冷却至室温，用水稀释并用乙酸乙酯萃取(2X50mL)，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物然后通过快速色谱法提纯(5-40%EtOAc/己烷)以得到(S,E)-7-(4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(1.2g,2.341mmol,45.8%收率)，为稠膏。4个缺失的哌啶氢。LCMS(M+H)=513.6。中间体49(S,E)-7-(4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸:向(S,E)-7-(4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(1.1g,2.146mmol)于乙醇(15mL)中的溶液中添加1NNaOH(2.146mL,2.146mmol)并将混合物在室温下搅拌16h。此时LCMS表明目标产物为主以及还有双酸(大约10%)和起始物料(大约30%)。因此加入另外0.5mL当量的NaOH并将混合物搅拌另外5h。然后浓缩混合物，将残余物溶于水并用1NHCl酸化。混合物随后用乙醚萃取(2X50mL)，用盐水(25mL)洗涤，过滤干燥并浓缩以得到(S,E)-7-(4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸(700mg,1.445mmol,67.3%收率)，为被双酸污染的白色固体。不经进一步提纯原样用于下一步骤。中间体50(S,E)-2-(2-((3-(2-溴苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-7-(4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S,E)-7-(4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸(370mg,0.764mmol)于CH2Cl2(7mL,含有cat.DMF)中的溶液中添加草酰氯(0.420mL,0.840mmol)并将混合物在室温下搅拌1h。然后将粗制酰氯添加到1-氨基-3-(2-溴苯基)丙-2-酮·HCl(303mg,1.145mmol)和DIEA(0.800mL,4.58mmol)于CH2Cl2(7.0mL)中的预搅拌溶液中并将所得溶液在室温下搅拌4h。然后加入水并将混合物用二氯甲烷萃取，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗制物然后通过硅胶柱上的快速柱色谱法使用(5-70%EtOAc/己烷为洗脱剂)提纯以得到(S,E)-2-(2-((3-(2-溴苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-7-(4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(450mg,0.648mmol,85%收率)，为浅黄色固体。中间体51(S,E)-2-(2-(5-(2-溴苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S,E)-2-(2-((3-(2-溴苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-7-(4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(450mg,0.648mmol)于甲苯中的溶液中添加Lawesson's试剂(288mg,0.713mmol)并在室温下搅拌15min，在60℃下搅拌5h。此时LCMS表明目标产物以及Lawessons加合物(LCMS(M+H)=896.3)。然后将混合物在100℃下加热3h。此时LCMS表明反应完成。然后冷却混合物，浓缩，残余物通过Biotage提纯(0-30%EtOAc/己烷;40g柱)以得到(S,E)-2-(2-(5-(2-溴苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(170mg,0.245mmol,37.9%收率)，为稠膏。中间体52(S,E)-2-(2-(5-(2-(丁-3-烯-1-基)苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:将(S,E)-2-(2-(5-(2-溴苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(170mg,0.245mmol)、丁-3-烯基三氟硼酸盐(119mg,0.736mmol)、Cs2CO3(240mg,0.736mmol)于甲苯(4mL)和水(0.4mL)中的混合物脱气5min。然后加入Pd(OAc)2(11.02mg,0.049mmol)接着加入二环己基(2',6'-二异丙氧基-[1,1'-联苯]-2-基)膦(45.8mg,0.098mmol)并将混合物在80℃下加热16h。然后冷却反应混合物，用乙酸乙酯稀释，用水、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物然后通过Biotage提纯(0-30%EtOAc/己烷;40g柱)以得到(S,E)-2-(2-(5-(2-(丁-3-烯-1-基)苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(90mg,0.135mmol,54.9%收率)，为稠膏。4个缺失的哌啶氢。LCMS(M+H)=668.6。实施例12(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E,25E)-4,27-二甲基-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18,23,25-十一烯-3-基]乙酸:在70℃下向(S,E)-2-(2-(5-(2-(丁-3-烯-1-基)苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(90mg,0.135mmol)和CuI(25.7mg,0.135mmol)于DCE(100mL)中的溶液中添加GrubbsII(11.44mg,0.013mmol)并将混合物在70℃下加热4h。然后冷却混合物，通过硅胶垫过滤并浓缩。残余物然后用1NNaOH(0.539mL,0.539mmol)/MeOH(3mL)在70℃下处理3h。然后将混合物冷却并通过制备HPLC提纯以得到目标产物(46mg,0.071mmol,53.0%收率)，为灰白色固体。实施例13和14(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(25E)-4,27-二甲基-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18,25-十烯-3-基]乙酸和(2S)-2-(叔丁氧基)-2-{4,27-二甲基-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18-九烯-3-基}乙酸:在70℃下向(S,E)-2-(2-(5-(2-(丁-3-烯-1-基)苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-1,3-二烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(50mg,0.075mmol)和CuI(14.26mg,0.075mmol)于DCE(50mL)中的溶液中添加GrubbsII(6.36mg,7.49µmol)并将混合物在70℃下加热2h。然后冷却混合物，通过硅胶垫过滤并浓缩。残余物用甲醇(20mL)稀释并添加10%Pd/C(120mg,0.112mmol)。然后使混合物在60PSI下经受Par氢化16h，然后过滤和浓缩。残余物然后用1NNaOH(0.374mL,0.374mmol)/MeOH(2mL)在70℃下处理3h。然后冷却混合物并通过制备HPLC提纯以得到两种产物。实施例13:(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(25E)-4,27-二甲基-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18,25-十烯-3-基]乙酸(3.1mg,5.05µmol,6.75%收率)。4个缺失的哌啶氢。LCMS(M+H)=614。实施例14:(2S)-2-(叔丁氧基)-2-{4,27-二甲基-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18-九烯-3-基}乙酸(15.8mg,0.026mmol,34.3%收率)。4个缺失的哌啶氢。LCMS(M+H)=616.7。中间体534-甲基-4-乙烯基哌啶-1-甲酸叔丁酯:在0℃下向Ph3PMeBr(4.84g,13.55mmol)于THF(100mL)中的溶液中添加2.5Mn-BuLi(9.82mL,16.01mmol)并将混合物在相同温度下搅拌30min。然后滴加4-甲酰基-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.8g,12.32mmol)/THF(10mL)并将混合物在0℃下搅拌1h。反应混合物然后用乙酸乙酯稀释并用饱和NH4Cl和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物然后通过Biotage提纯(0-30%EtOAc/己烷)以得到4-甲基-4-乙烯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g,4.88mmol,39.6%收率)，为无色液体。中间体541-氨基-3-(2-溴-4-氟苯基)丙-2-酮·HCl:历时5min向1MLiHMDS/THF(28.9mL,28.9mmol)于THF(70mL)中的-78℃溶液中逐滴添加2-异氰乙酸甲酯(2.59g,26.1mmol)的THF(10mL)溶液。30min后，历时5min加入2-(4-氟-2-甲基苯基)乙酰氯(3.25g,17.42mmol)的THF(20mL)溶液。1h后，移除冷浴并将混合物在室温下搅拌16h。然后加入水(25mL)，混合物用乙酸乙酯(100mL)萃取，用盐水(50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物然后用浓HCl(40mL)回流3h。然后将混合物冷却至室温并浓缩。残余物然后用乙酸乙酯研磨并在高真空下干燥以得到1-氨基-3-(2-溴-4-氟苯基)丙-2-酮·HCl(2.5g,8.85mmol,50.8%收率)，为棕褐色固体。中间体554-甲基-4-乙烯基哌啶·HCl:将4-甲基-4-乙烯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g,4.88mmol)和4MHCl/1,4-二氧杂环己烷(6.10ml,24.41mmol)的混合物在室温下搅拌3h。然后浓缩混合物并在高真空下干燥以得到4-甲基-4-乙烯基哌啶·HCl(760mg,4.70mmol,96%收率)，为灰白色固体。中间体56(S)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基-7-(4-甲基-4-乙烯基哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯:向(S)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-7-碘-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(2,4.09mmol)和4-甲基-4-乙烯基哌啶·HCl(0.727g,4.50mmol)于NMP(20mL)中的溶液中添加DIEA(2.142mL,12.26mmol)并将混合物在60℃下加热6h。此时LCMS表明反应完成。然后将混合物冷却至室温，用水稀释并用乙酸乙酯萃取(2X50mL)，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物然后通过快速色谱法提纯(5-40%EtOAc/己烷)以得到(S)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基-7-(4-甲基-4-乙烯基哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(1g,2.055mmol,50.3%收率)，为稠膏。中间体57(S)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基-7-(4-甲基-4-乙烯基哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸:向(S)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基-7-(4-甲基-4-乙烯基哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(1g,2.055mmol)于EtOH(10mL)中的溶液中添加1NNaOH(2.055mL,2.055mmol)并将混合物在室温下搅拌16h。然后浓缩混合物，将残余物溶于水并用1NHCl酸化。混合物然后用乙醚(2X50mL)萃取，用盐水(25mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩以得到(S)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基-7-(4-甲基-4-乙烯基哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸(830mg,1.810mmol,88%收率)，为被双酸污染的白色固体。不经进一步提纯原样用于下一步骤。中间体58(S)-2-(2-((3-(2-溴-4-氟苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-5-甲基-7-(4-甲基-4-乙烯基哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基-7-(4-甲基-4-乙烯基哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸(400mg,0.872mmol)于CH2Cl2(7mL,含有cat.DMF)中的溶液中添加草酰氯(0.480mL,0.960mmol)并将混合物在室温下搅拌1h。然后将粗制酰氯添加到1-氨基-3-(2-溴-4-氟苯基)丙-2-酮·HCl(370mg,1.308mmol)和DIEA(0.914mL,5.23mmol)于CH2Cl2(7.00mL)中的预搅拌溶液中并将所得溶液在室温下搅拌4h。然后加入水，混合物用二氯甲烷萃取，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗制物然后通过硅胶柱上的快速柱色谱法使用(5-70%EtOAc/己烷为洗脱剂)提纯以得到(S)-2-(2-((3-(2-溴-4-氟苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-5-甲基-7-(4-甲基-4-乙烯基哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(440mg,0.641mmol,73.5%收率)，为浅黄色固体。中间体59(S)-2-(2-(5-(2-溴-4-氟苄基)噻唑-2-基)-5-甲基-7-(4-甲基-4-乙烯基哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-2-(2-((3-(2-溴-4-氟苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-5-甲基-7-(4-甲基-乙烯基哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(440mg,0.641mmol)于甲苯中的溶液中添加Lawesson's试剂(285mg,0.705mmol)并在室温下搅拌15min，在60℃下搅拌5h。此时LCMS表明反应完成。然后冷却混合物，浓缩，残余物通过Biotage提纯(0-30%EtOAc/己烷;40g柱)以得到(S)-2-(2-(5-(2-溴-4-氟苄基)噻唑-2-基)-5-甲基-7-(4-甲基-4-乙烯基哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(350mg,0.511mmol,80%收率)，为浅黄色固体。中间体60己-5-烯基三氟硼酸钾:向己-5-烯-1-基硼酸(750mg,5.86mmol)于乙腈(20mL)和水(5mL)中的溶液中添加KHF2(1831mg,23.44mmol)并将混合物在室温下搅拌2h。然后真空浓缩混合物，干燥的固体用热丙酮研磨并过滤除去无机盐。将所得滤液浓缩并用乙醚洗涤以得到己-5-烯基三氟硼酸钾(650mg,3.42mmol,58.4%收率)，为白色固体。中间体61(S)-2-(叔丁氧基)-2-(2-(5-(4-氟-2-(己-5-烯-1-基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基-7-(4-甲基-4-乙烯基哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯:将(S)-2-(2-(5-(2-溴-4-氟苄基)噻唑-2-基)-5-甲基-7-(4-甲基-4-乙烯基哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(50mg,0.073mmol)、己-5-烯基三氟硼酸钾(41.6mg,0.219mmol)、Cs2CO3(71.4mg,0.219mmol)于甲苯(2mL)和水(0.2mL)中的混合物脱气5min。添加Pd(OAc)2(3.28mg,0.015mmol)接着二环己基(2',6'-二异丙氧基-[1,1'-联苯]-2-基)膦(13.63mg,0.029mmol)并将混合物在80℃下加热16h。然后冷却反应混合物，用乙酸乙酯稀释，用水、盐水稀释，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物然后通过Biotage提纯(0-30%EtOAc/己烷;25g柱)以得到(S)-2-(叔丁氧基)-2-(2-(5-(4-氟-2-(己-5-烯-1-基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基-7-(4-甲基-4-乙烯基哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(30mg,0.044mmol,59.7%收率)，为稠膏。4个缺失的哌啶氢。LCMS(M+H)=688.2。实施例15和16(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(25E)-18-氟-4,27-二甲基-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18,25-十烯-3-基]乙酸和(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(24E)-18-氟-4,26-二甲基-31-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[24.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十二碳-2,4,6(32),8,10,12,15(20),16,18,24-十烯-3-基]乙酸:在70℃下向(S)-2-(叔丁氧基)-2-(2-(5-(4-氟-2-(己-5-烯-1-基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基-7-(4-甲基-4-乙烯基哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸乙酯(40mg,0.058mmol)和CuI(11.07mg,0.058mmol)于DCE(35mL)中的溶液中添加GrubbsII(4.94mg,5.81µmol)并将混合物在70℃下加热16h。此时LCMS表明非常少量的目标产物。然后加入第二代Hoveyda-Grubbs催化剂(3.64mg,5.81µmol)并将混合物在85℃下加热5h。此时LCMS表明反应完成和目标产物为主以及更小的环。然后冷却混合物，通过硅胶垫过滤并浓缩。残余物然后用1NNaOH(0.233mL,0.233mmol)/MeOH(2mL)在70℃下处理3h。然后冷却混合物并通过制备HPLC提纯以得到两种化合物。实施例15:在HPLC上第二洗脱，主要化合物;(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(25E)-18-氟-4,27-二甲基-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18,25-十烯-3-基]乙酸(12mg,0.019mmol,32%收率)4个缺失的哌啶氢。LCMS(M+H)=632.3。实施例16:HPLC上第一洗脱，次要化合物;(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(24E)-18-氟-4,26-二甲基-31-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[24.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十二碳-2,4,6(32),8,10,12,15(20),16,18,24-十烯-3-基]乙酸(HPLC上第一洗脱，次要)(5mg,0.009mmol,14%收率):。中间体624-(丁-3-烯-1-基)哌啶-1,4-二甲酸1-叔丁酯4-甲酯:将二异丙胺(17.57mL,123mmol)和THF(300mL)的混合物冷却至-78℃并缓慢添加n-BuLi(77mL,123mmol)于己烷中的1.6M溶液。将混合物搅拌15min，升温至0℃持续20min并再冷却至-78℃。滴加哌啶-1,4-二甲酸1-叔丁酯4-甲酯(25g,103mmol)/THF(25mL)并将混合物搅拌40min。然后，加入HMPA(17.88mL,103mmol)和4-溴丁-1-烯(27.7g,206mmol)的混合物并将混合物搅拌1h，之后将其升温至室温并搅拌16h。然后加入饱和NH4Cl并用乙醚(2X500mL)萃取混合物，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物通过Biotage提纯(0-20%EtOAc/己烷;300g柱)以得到4-(丁-3-烯-1-基)哌啶-1,4-二甲酸1-叔丁酯4-甲酯(22g,74.0mmol,72.0%收率)，为浅黄色油状物。中间体634-(丁-3-烯-1-基)-4-(羟基甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯:在0℃下向4-(丁-3-烯-1-基)哌啶-1,4-二甲酸1-叔丁酯4-甲酯(21.2g,71.3mmol)于THF(300mL)中的溶液中添加2MLAH/THF(35.6mL,71.3mmol)并将所得混合物在0℃下搅拌1h，然后在室温下搅拌2h。然后将混合物冷却至0℃并相继加入水(2.7mL)、1NNaOH(2.7mL)和水(8.2mL)，将混合物搅拌5min。滤除固体，滤饼用乙酸乙酯洗涤。滤液用水(2X50mL)、盐水(100mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并减压浓缩以得到4-(丁-3-烯-1-基)-4-(羟基甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(16.5g,61.3mmol,86%收率)，为黄色油状物。中间体644-(丁-3-烯-1-基)-4-(((甲磺酰基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯:在0℃下将Ms-Cl(5.59mL,71.7mmol)滴加到4-(丁-3-烯-1-基)-4-(羟基甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(16.1g,59.8mmol)、TEA(16.66mL,120mmol)和DMAP(0.365g,2.99mmol)于CH2Cl2(300mL)中的搅拌溶液中，将混合物在室温搅拌2h。然后加入水，混合物用二氯甲烷(100mL)萃取，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物通过Biotage提纯(0-40%Hex/EtOAc)以得到4-(丁-3-烯-1-基)-4-(((甲磺酰基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(18g,51.8mmol,87%收率)，为无色油状物。中间体654-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯:向4-(丁-3-烯-1-基)-4-(((甲磺酰基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(17g,48.9mmol)于THF(250mL)中的溶液中添加Superhydride(98mL,98mmol)于THF中的1M溶液并将所得混合物回流3h。在冷却至室温后，加入水并用乙醚(2X200mL)萃取混合物，用盐水(100mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物通过Biotage提纯(0-20%EtOAc/己烷)以得到4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.5g,13.81mmol,28.2%收率)。还回收8g起始物料。中间体664-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶·HCl:将4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.5g,13.81mmol)和4MHCl/二氧杂环己烷(17.27ml,69.1mmol)的混合物在室温下搅拌3h。然后浓缩混合物并在高真空下干燥以得到4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶·HCl(2.6g,13.70mmol,99%收率)，为灰白色固体。中间体67(S)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯:向(S)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-7-碘-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(3g,6.13mmol)和4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶·HCl(1.512g,7.97mmol)于NMP(20mL)中的溶液中添加DIEA(3.21mL,18.39mmol)并将混合物在60℃下加热72h。此时LCMS表明反应完成。然后将混合物冷却至室温，用水稀释并用乙酸乙酯(2X50mL)萃取，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物然后通过快速色谱法提纯(5-40%EtOAc/己烷)以得到(S)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(2.6g,5.05mmol,82%收率)，为稠膏。中间体68(S)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸:向(S)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸乙酯(2.6g,5.05mmol)于乙醇(30mL)中的溶液中添加1NNaOH(5.05mL,5.05mmol)并将所得混合物在室温下搅拌16h。然后浓缩混合物，将残余物溶于水并用1NHCl酸化。混合物然后用乙醚(2X100mL)萃取，用盐水(50mL)洗涤，干燥，过滤并浓缩以得到(S)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸(2.3g,4.73mmol,94%收率)，为浅黄色固体。4个缺失的哌啶氢。LCMS(M+H)=487.3。中间体69(S)-2-(2-((3-(2-溴-4-氟苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸(500mg,1.028mmol)于CH2Cl2(7mL,含有cat.DMF)中的溶液中添加草酰氯(0.565mL,1.130mmol)并将混合物在室温搅拌1h。然后将粗制酰氯添加到1-氨基-3-(2-溴-4-氟苯基)丙-2-酮·HCl(435mg,1.541mmol)和DIEA(1.077mL,6.17mmol)于CH2Cl2(7.0mL)中的预搅拌溶液中并将所得溶液在室温搅拌4h。然后加入水，混合物用二氯甲烷萃取，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗制物然后通过硅胶柱上的快速柱色谱法使用(5-70%EtOAc/己烷为洗脱剂)提纯以得到(S)-2-(2-((3-(2-溴-4-氟苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(475mg,0.665mmol,64.7%收率)，为浅黄色固体。4个缺失的哌啶氢。LCMS(M+2H)=716.2。中间体70(S)-2-(2-(5-(2-溴-4-氟苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-2-(2-((3-(2-溴-4-氟苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(465mg,0.651mmol)于甲苯中的溶液中添加Lawesson's试剂(289mg,0.716mmol)并在室温下搅拌15min，在60℃下搅拌5h。此时LCMS表明反应完成。然后冷却混合物，浓缩，残余物通过Biotage提纯(0-30%EtOAc/己烷;40g柱)以得到(S)-2-(2-(5-(2-溴-4-氟苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(300mg,0.421mmol,64.7%收率)，为浅黄色固体。中间体71(S)-2-(2-(5-(2-(丁-3-烯-1-基)-4-氟苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:将(S)-2-(2-(5-(2-溴-4-氟苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(150mg,0.210mmol)、丁-3-烯基三氟硼酸钾(102mg,0.631mmol)、Cs2CO3(206mg,0.631mmol)于甲苯(4mL)和水(0.4mL)中的混合物脱气5min。然后加入Pd(OAc)2(9.45mg,0.042mmol)，接着加入二环己基(2',6'-二异丙氧基-[1,1'-联苯]-2-基)膦(39.3mg,0.084mmol)并将混合物在80℃下加热16h。然后冷却反应混合物，用乙酸乙酯稀释，用水、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物然后通过Biotage提纯(0-30%EtOAc/己烷;40g柱)以得到(S)-2-(2-(5-(2-(丁-3-烯-1-基)-4-氟苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(115mg,0.167mmol,79%收率)，为稠膏。实施例17和18(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-18-氟-4,27-二甲基-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸和(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-18-氟-4,26-二甲基-31-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[24.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十二碳-2,4,6(32),8,10,12,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸:在70℃下向(S)-2-(2-(5-(2-(丁-3-烯-1-基)-4-氟苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(110mg,0.160mmol)和CuI(30.5mg,0.160mmol)于DCE(100mL)中的溶液中添加GrubbsII(13.58mg,0.016mmol)并将混合物在70℃下加热4h。然后冷却混合物，通过硅胶垫过滤并浓缩。残余物然后用1NNaOH(0.640mL,0.640mmol)/MeOH(3mL)在70℃下处理3h。然后将混合物冷却并通过制备HPLC提纯以得到两种产物。实施例17:(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-18-氟-4,27-二甲基-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸(68mg,0.108mmol,67.3%收率),在HPLC上第二洗脱,灰白色固体。4个缺失的哌啶氢。LCMS(M+H)=632.3。实施例18:(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-18-氟-4,26-二甲基-31-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[24.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十二碳-2,4,6(32),8,10,12,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸(4mg,6.15µmol,3.85%收率)在HPLC上首先洗脱，灰白色固体。中间体72(S)-2-(7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(4-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-2-(2-(5-(2-溴-4-氟苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(150mg,0.210mmol)于无水1,4-二氧杂环己烷(4mL)中的溶液中添加联硼酸频哪醇酯(58.8mg,0.232mmol)和乙酸钾(62.0mg,0.631mmol)，将混合物脱气15min。向脱气的溶液中添加PdCl2(dppf)(15.40mg,0.021mmol)并继续脱气另外5min，此后将反应在90℃加热16h。此时LCMS表明反应完成并出现目标产物。在冷却至室温后，加入水(5mL)并用乙醚(25mL)萃取混合物，用盐水(10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物然后通过Biotage提纯使用0-30%EtOAc/己烷以得到(S)-2-(7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(4-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(50mg,0.066mmol,31.3%收率)，为稠膏。不经进一步提纯原样用于下一步骤。LCMS(M+H)=760.4。中间体73(S)-2-(7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(4-氟-2-羟基苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-2-(7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(4-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(40mg,0.053mmol)于丙酮(1mL)中的溶液中添加过硫酸氢钾制剂(32.4mg,0.053mmol)于水(1mL)中的溶液并将所得混合物在室温下搅拌1h。然后加入饱和硫代硫酸钠并用乙酸乙酯萃取混合物，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物然后通过Biotage提纯(0-50%EtOAc/己烷;12g柱)以得到(S)-2-(7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(4-氟-2-羟基苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(24mg,0.037mmol,70.2%收率)，为粘稠油状物。中间体74(S)-2-(7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(4-氟-2-((R)-戊-4-烯-2-基氧基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-2-(7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(4-氟-2-羟基苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(22mg,0.034mmol)、(R)-戊-4-烯-2-醇(14.58mg,0.169mmol)、Ph3P(44.4mg,0.169mmol)于THF(1mL)中的混合物中添加DIAD(0.033mL,0.169mmol)并将混合物在室温搅拌16h。然后加入水，混合物用乙醚(2X25mL)萃取，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物然后通过Biotage提纯(0-40%EtOAc/己烷)以得到(S)-2-(7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(4-氟-2-((R)-戊-4-烯-2-基氧基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(15mg,0.021mmol,61.7%收率)，为稠膏。实施例19和20(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(22R,24E)-18-氟-4,22,28-三甲基-21-氧杂-33-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[26.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十四碳-2,4,6(34),8,10,12,15(20),16,18,24-十烯-3-基]乙酸和(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(22R,24Z)-18-氟-4,22,28-三甲基-21-氧杂-33-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[26.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十四碳-2,4,6(34),8,10,12,15(20),16,18,24-十烯-3-基]乙酸：在70℃下向(S)-2-(7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(4-氟-2-((R)-戊-4-烯-2-基氧基)苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(15mg,0.021mmol)和CuI(3.98mg,0.021mmol)于DCE(15mL)中的溶液中添加GrubbsII(1.774mg,2.089µmol)并将混合物在70℃下加热4h。然后冷却混合物，通过硅胶垫过滤并浓缩。残余物然后用1NNaOH(0.084mL,0.084mmol)/MeOH(3mL)在70℃下处理3h。然后冷却混合物并通过制备HPLC提纯以得到两种产物。实施例19:(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(22R,24E)-18-氟-4,22,28-三甲基-21-氧杂-33-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[26.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十四碳-2,4,6(34),8,10,12,15(20),16,18,24-十烯-3-基]乙酸(3.3mg,4.99µmol,23.87%收率)。实施例20:(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(22R,24Z)-18-氟-4,22,28-三甲基-21-氧杂-33-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[26.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十四碳-2,4,6(34),8,10,12,15(20),16,18,24-十烯-3-基]乙酸(1.3mg,1.964µmol,9.40%收率)。中间体751-氨基-3-(2-溴-5-氟苯基)丙-2-酮·HCl:历时5min向1MLiHMDS/THF(35.6mL,35.6mmol)于THF(100mL)中的-78℃溶液中滴加2-异氰乙酸甲酯(3.19g,32.2mmol)的THF(10mL)溶液。30min后，历时5min加入2-(2-溴-5-氟苯基)乙酰氯(5.4g,21.47mmol)的THF(20mL)溶液。1h后，移除冷浴并将混合物在室温搅拌16h。然后加入水(25mL)，混合物用乙酸乙酯(100mL)萃取，用盐水(50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物然后用浓HCl(40mL)回流3h。然后将混合物冷却至室温并浓缩。残余物然后用乙酸乙酯研磨并在高真空下干燥以得到1-氨基-3-(2-溴-5-氟苯基)丙-2-酮·HCl(3.5g,12.39mmol,57.7%收率)，为棕褐色固体。中间体76(S)-2-(2-((3-(2-溴-5-氟苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸(700mg,1.439mmol)于CH2Cl2(8mL)中的溶液中添加草酰氯(0.791mL,1.582mmol)。然后加入1滴DMF并将混合物在室温搅拌1h。然后将粗制酰氯添加到1-氨基-3-(2-溴-5-氟苯基)丙-2-酮·HCl(610mg,2.158mmol)和DIEA(1.507mL,8.63mmol)于CH2Cl2(8.00mL)中的预搅拌溶液中并将所得溶液在室温下搅拌4h。然后加入水，混合物用二氯甲烷萃取，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗制物然后通过硅胶柱上的快速柱色谱法使用(5-70%EtOAc/己烷为洗脱剂)提纯以得到(S)-2-(2-((3-(2-溴-5-氟苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(720mg,1.007mmol,70.0%收率)，为浅黄色固体。4个缺失的哌啶质子。LCMS(M+2H)=716.3。中间体77(S)-2-(2-(5-(2-溴-5-氟苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-2-(2-((3-(2-溴-5-氟苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(750mg,1.049mmol)于甲苯中的溶液中添加Lawesson's试剂(467mg,1.154mmol)并在室温下搅拌15min，在70℃下搅拌3h。此时LCMS表明反应完成。然后将混合物冷却，浓缩，残余物通过Biotage提纯(0-30%EtOAc/己烷;40g柱)以得到(S)-2-(2-(5-(2-溴-5-氟苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(500mg,0.702mmol,66.8%收率)，为浅黄色固体。中间体78(S)-2-(7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-(丁-3-烯-1-基)-5-氟苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:将(S)-2-(2-(5-(2-溴-5-氟苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(150mg,0.210mmol)、丁-3-烯基三氟硼酸盐(102mg,0.631mmol)、Cs2CO3(206mg,0.631mmol)于甲苯(4mL)和水(0.4mL)中的混合物脱气5min。然后加入Pd(OAc)2(9.45mg,0.042mmol)，接着加入二环己基(2',6'-二异丙氧基-[1,1'-联苯]-2-基)膦(39.3mg,0.084mmol)并将混合物在80℃下加热16h。然后冷却反应混合物，用乙酸乙酯稀释，用水、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物然后通过Biotage提纯(0-30%EtOAc/己烷;40g柱)以得到(S)-2-(7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-(丁-3-烯-1-基)-5-氟苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(110mg,0.160mmol,76%收率)，为稠膏。实施例21,22和23(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-17-氟-4,27-二甲基-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸,(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23Z)-17-氟-4,27-二甲基-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸和(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-17-氟-4,26-二甲基-31-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[24.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十二碳-2,4,6(32),8,10,12,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸:在70℃下向(S)-2-(7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-(丁-3-烯-1-基)-5-氟苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(110mg,0.160mmol)和CuI(30.5mg,0.160mmol)于DCE(100mL)中的溶液中添加GrubbsII(13.58mg,0.016mmol)并将混合物在70℃下加热4h。然后冷却混合物，通过硅胶垫过滤并浓缩。残余物然后用1NNaOH(0.640mL,0.640mmol)/MeOH(3mL)在70℃下处理3h。然后将混合物冷却并通过制备HPLC提纯以得到三种产物。实施例21:在HPLC上第三洗脱(主要),(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-17-氟-4,27-二甲基-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸(43mg,0.068mmol,42.6%收率)。4个缺失的哌啶氢。LCMS(M+H)=632.4。实施例22:首先洗脱,(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23Z)-17-氟-4,27-二甲基-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸(5.2mg,8.23µmol,5.15%收率)。实施例23:第二洗脱,(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-17-氟-4,26-二甲基-31-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[24.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十二碳-2,4,6(32),8,10,12,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸(1.9mg,3.08µmol,1.923%收率)。4个缺失的哌啶氢。LCMS(M+H)=618.3。中间体79(S)-2-(2-((3-(2-溴苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-6-(1-(叔丁氧基)-2-乙氧基-2-氧代乙基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸(500mg,1.028mmol)于CH2Cl2(7mL,含有cat.DMF)中的溶液中添加草酰氯(0.565mL,1.130mmol)并将混合物在室温搅拌1h。然后将粗制酰氯添加到1-氨基-3-(2-溴苯基)丙-2-酮·HCl(408mg,1.541mmol)和DIEA(1.077mL,6.17mmol)于CH2Cl2(7.0mL)中的预搅拌溶液中并将所得溶液在室温下搅拌4h。然后加入水并用二氯甲烷萃取混合物，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗制物然后通过硅胶柱上的快速柱色谱法使用(5-70%EtOAc/己烷为洗脱剂)提纯以得到(S)-2-(2-((3-(2-溴苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(578mg,0.830mmol,81%收率)，为浅黄色固体。4个缺失的哌啶氢。LCMS(M+2H)=698.5。中间体80(S)-2-(2-(5-(2-溴苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-2-(2-((3-(2-溴苯基)-2-氧代丙基)氨基甲酰基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(570mg,0.818mmol)于甲苯中的溶液中添加Lawesson's试剂(364mg,0.900mmol)并在室温下搅拌15min，在60℃下搅拌5h。此时LCMS表明反应完成。然后冷却混合物，浓缩，残余物通过Biotage提纯(0-30%EtOAc/己烷;40g柱)以得到(S)-2-(2-(5-(2-溴苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(350mg,0.504mmol,61.6%收率)，为浅黄色固体。4个缺失的哌啶氢。LCMS(M+2H)=696.4。中间体81(S)-2-(7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-2-(5-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苄基)噻唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-2-(2-(5-(2-溴苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(340mg,0.489mmol)在无水DMF(5mL)中的溶液中添加联硼酸频哪醇酯(137mg,0.538mmol)和乙酸钾(144mg,1.468mmol)，将混合物脱气15min。向脱气溶液中添加PdCl2(dppf)·CH2Cl2加合物(40.0mg,0.049mmol)并继续脱气另外5min，此后将反应在90℃加热16h。此时LCMS表明反应完成和出现目标产物。在冷却至室温后，加入水(5mL)，混合物用乙醚(25mL)萃取，用盐水(10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗制物然后通过Biotage提纯使用0-30%EtOAc/己烷以得到(S)-2-(7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-2-(5-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苄基)噻唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯，为稠膏。4个缺失的哌啶氢。LCMS(M+H)=742.6。中间体82(S)-2-(7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-羟基苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:向(S)-2-(7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基-2-(5-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苄基)噻唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(65mg,0.088mmol)于丙酮(2mL)中的溶液中添加过硫酸氢钾制剂(53.9mg,0.088mmol)于水(2mL)中的溶液并将所得混合物在室温搅拌1h。然后加入饱和硫代硫酸钠，混合物用乙酸乙酯萃取，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩以得到(S)-2-(7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-羟基苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(50mg,0.079mmol,90%收率)，为粘稠油状物。粗制物不经进一步提纯用于下一步骤。4个缺失的哌啶氢。LCMS(M+H)=632.6。中间体83(S)-2-(2-(5-(2-(烯丙氧基)苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯:将2-(7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(5-(2-羟基苄基)噻唑-2-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(50mg,0.079mmol)、烯丙醇(13.79mg,0.237mmol)和三苯基膦(62.3mg,0.237mmol)于干燥THF(2mL)中的溶液用DEAD(0.038mL,0.237mmol)处理，将反应搅拌3hr。然后加入水，混合物用乙醚(25mL)萃取，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。残余物通过Biotage提纯(0-30%EtOAc/己烷)以得到(S)-2-(2-(5-(2-(烯丙氧基)苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(35mg,0.052mmol,65.8%收率)，为稠膏。4个缺失的哌啶氢。LCMS(M+H)=672.6。实施例24(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-4,27-二甲基-21-氧杂-32-硫杂-1,5,7,8,11-五氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10,12,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸:在70℃下向(S)-2-(2-(5-(2-(烯丙氧基)苄基)噻唑-2-基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸乙酯(35mg,0.052mmol)和CuI(9.92mg,0.052mmol)于DCE(35mL)中的溶液中添加GrubbsII(4.42mg,5.21µmol)并将混合物在70℃下加热4h。冷却混合物，通过旋转蒸发仪除去溶剂，残余物通过biotage提纯(0-30%EtOAc/己烷)。收集产物部分并减压浓缩，得到目标酯，其用1NNaOH(0.208mL,0.208mmol)/MeOH(3mL)在70℃下处理3h。然后冷却混合物并通过制备HPLC提纯以得到目标产物(10.9mg,0.017mmol,32.3%收率)。中间体842-(烯丙氧基)苯甲醛:向2-羟基苯甲醛(15g,123mmol,1当量)和烯丙基溴(11.7mL,135mmol,1.1当量)于MeCN(250mL)中的溶液中添加K2CO3(23.8g,172mmol,1.4当量)。然后将黄色浆料加热至回流。2h后，TLC表明完全转化。将现在浅黄色的混合物从加热移除并过滤。真空浓缩滤液以提供2-(烯丙氧基)苯甲醛(19.15g,96%)，为黄色油状物。中间体85(2-(烯丙氧基)苯基)甲醇:向2-(烯丙氧基)苯甲醛(19.15g,118mmol,1当量)于MeOH(240mL)中的溶液中逐份添加NaBH4(5.58g,148mmol,1.25当量)。观察到放出气体并温和发热。30min后，TLC表明完全转化。将反应真空浓缩。残余物然后用1NHCl处理并用DCM萃取(x2)。将合并的DCM萃取物干燥(Na2SO4)并真空浓缩以提供(2-(烯丙氧基)苯基)甲醇(19.60g,100%)，为黄色油状物。中间体861-(烯丙氧基)-2-(氯甲基)苯:向(2-(烯丙氧基)苯基)甲醇(19.60g,119mmol,1当量)于DCM(410mL)中的溶液中添加二氯三苯基膦(45.1g,135mmol,1.1当量)。18h后，将反应真空浓缩。残余物用戊烷研磨并过滤。将滤液真空浓缩以提供粗产物。粗产物通过硅胶快速色谱法提纯(0-100%DCM/己烷)以提供1-(烯丙氧基)-2-(氯甲基)苯(11.75g,54%)，为浅黄色油状物。中间体872-(2-(烯丙氧基)苄基)丙二腈:吡唑合成基于Echevarria,A.;Elguero,J.Syn.Comm.1993,23,925-930。向1-(烯丙氧基)-2-(氯甲基)苯(0.89g,4.87mmol,1当量)和丙二腈(0.92g,14.6mmol,3当量)于DMF(24mL)中的溶液中添加NaH(0.55g的于矿物油中的60%乳液,13.6mmol,2.8当量)。放出气体。1h后，将反应物小心添加到1NHCl中并用乙醚萃取(x2)。将合并的乙醚萃取物干燥(MgSO4)并真空浓缩。粗产物通过硅胶快速色谱法提纯(0-100%EtOAc/己烷)以提供2-(2-(烯丙氧基)苄基)丙二腈(1.0g,97%)，为浅黄色油状物。该产物被~20%的未鉴定杂质污染。中间体884-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑-3,5-二胺:向2-(2-(烯丙氧基)苄基)丙二腈(1.0g,4.71g,1当量)于EtOH(9mL)中的溶液中添加肼(0.79mL的30%水溶液,7.54mmol,1.6当量)。将黄色溶液加热至回流持续4h。然后将反应从加热移除并浓缩。粗产物通过硅胶快速色谱法提纯(0-10%MeOH/CHCl3含1%NH4OH)以提供4-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑-3,5-二胺(0.35g,30%)，为棕褐色泡沫状物。中间体894-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑:将4-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑-3,5-二胺(0.35g,1.43mmol,1当量)于水(2.9mL)和次磷酸(4.45g,34.4mmol,24当量)中的溶液冷却至0℃(冰/水)。向冷却的橙色均匀反应中逐滴添加NaNO2(0.22g,3.15g,2.2当量)于水(2mL)中的溶液。反应明显变暗为深褐色，含有一些发泡和一些粘性沉淀物。在添加完成后，将反应从冷却浴移除并搅拌2h。然后将反应添加到1NNaOH中并用DCM萃取(x4)。将合并的DCM萃取物干燥(Na2SO4)并真空浓缩。粗产物通过硅胶快速色谱法提纯(0-10MeOH/CHCl3含1%NH4OH)以提供4-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑(72mg,23%)，为褐色油状物。中间体902-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-溴-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸甲酯:将2-(2-溴-7-氯-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸甲酯(13.4g,41.9mmol,1当量,关于制备参见WO2012033735)、4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶(7.16g,46.1mmol,1.1当量)和DIPEA(17.6mL,101mmol,2.4当量)于DMF(84mL)中的溶液在60℃下加热2h。然后将反应添加到水中并用乙醚萃取(x2)。将合并的乙醚萃取物干燥(MgSO4)并真空浓缩。粗产物通过硅胶快速色谱法提纯(0-50%EtOAc/hex)以提供2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-溴-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸甲酯(17.7g,97%)。中间体912-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-溴-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-氧代乙酸甲酯:将2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-溴-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸甲酯(17.7g,40.5mmol,1当量)于THF(200mL)中的溶液冷却至-78℃(IPA/CO2)。历时约2min滴加KHMDS(72mL的于THF中的0.91M溶液,64.9mmol,1.6当量)。反应变为深橙色。30min后，一次性加入3-苯基-2-(苯磺酰基)-1,2-氧杂氮杂环丙烷(15.9g,60.8mmol,1.2当量)。反应明显变深。30min后，将反应添加到饱和碳酸氢钠水溶液中并用乙醚萃取(x2)。将合并的乙醚萃取物干燥(MgSO4)并真空浓缩以提供粗产物，为褐色油状物。将其溶于DCM(200mL)和Dess-Martin氧化剂(20.6g,48.6mmol,1.2当量)。30min后，将反应添加到饱和碳酸氢钠水溶液中并用DCM萃取(x3)。将合并的DCM萃取物干燥(Na2SO4)并真空浓缩以提供粗产物。粗产物通过硅胶快速色谱法提纯(0-50%EtOAc/hex)以提供2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-溴-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-氧代乙酸甲酯(9.2g,50%)。中间体92(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-溴-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸甲酯:将2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-溴-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-氧代乙酸甲酯(9.20g,20.3mmol,1当量)和(R)-1-甲基-3,3-二苯基六氢吡咯并[1,2-c][1,3,2]氧杂氮杂硼杂环戊烯(12.2mL的于甲苯中的1M溶液,12.2mmol,0.6当量)于甲苯(200mL)中的溶液冷却至-25℃(MeCN/CO2)。然后添加儿茶酚硼烷(6.8mL的50%甲苯溶液,28.4mmol,1.4当量)并将温度保持在-15℃至-25℃达18h。此时，加入更多的(R)-1-甲基-3,3-二苯基六氢吡咯并[1,2-c][1,3,2]氧杂氮杂硼杂环戊烯(4mL的1M甲苯溶液,4mmol,0.2当量)和儿茶酚硼烷(3mL的50%甲苯溶液,12.5mmol,0.6当量)。然后将反应搅拌另外4h。反应然后用10%K2CO3水溶液(100mL)和EtOAc(100mL)淬灭并从冷却浴移除。搅拌45min后，将混合物添加到水中并用乙醚萃取(x4)。将合并的乙醚萃取物干燥(MgSO4)并真空浓缩以提供粗产物，为黄色泡沫状物质，其未经提纯用于下一步骤。(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-溴-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-羟基乙酸甲酯。中间体93(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-溴-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸甲酯:将来自之前步骤的粗制醇溶于DCM(50mL)和tBuOAc(150mL)。向该溶液中添加高氯酸(3.7mL的70%水溶液,60.9mmol,3当量)以得到浑浊橙色溶液。搅拌3h后，将反应小心添加到饱和碳酸氢钠水溶液中并用DCM萃取(x3)。将合并的DCM萃取物干燥(Na2SO4)并真空浓缩以提供粗产物。粗产物通过硅胶快速色谱法提纯(0-100%EtOAc/hex)以提供(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-溴-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸甲酯(3.56g,34%)和(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-溴-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-羟基乙酸甲酯(4.53g,49%)。(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-溴-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸甲酯(3.56g,34%)和(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-溴-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-羟基乙酸甲酯。中间体94(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(4-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸甲酯:铜偶联基于Antilla,J.C.;Baskin,J.M.;Barder,T.E.;Buchwald,S.L.J.Org.Chem.2004,69,5578-5587。将(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-溴-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸甲酯(0.17g,0.334mmol,1当量)、4-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑(72mg,0.334mmol,1当量)、CuI(6.4mg,0.033mmol,0.1mmol)、(1R,2R)-N1,N2-二甲基环己烷-1,2-二胺,外消旋(0.021mL,0.133mmol,0.4当量)和K2CO3(101mg,0.734mmol,2.2当量)于甲苯(1.7mL)中的溶液在110℃下加热18h。加入更多的CuI(14mg,0.074mmol,0.22当量)和(1R,2R)-N1,N2-二甲基环己烷-1,2-二胺,外消旋(0.021mL,0.133mmol,0.4当量)并继续加热另外40h。然后将反应冷却至环境温度并通过硅胶快速色谱法直接提纯(0-100%EtOAc/hex)以提供(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(4-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸甲酯(127mg,59%)，为粘稠黄色油状物。[注:未观察到哌啶的4个H，预期相当宽];LCMS(ESI,M+1):643.5。中间体95(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-4,27-二甲基-21,26-二氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,11,13(32),15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸甲酯:将氮鼓泡通过(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(4-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸甲酯(116mg,0.180mmol,1当量)于DCE(150mL)中的溶液持续15min。然后将溶液加热至70℃并添加第二代Hoveyda-Grubbs催化剂(11mg,0.018mmol,0.1当量)。继续加热微浅蓝色溶液3h。然后将反应冷却至环境温度并真空浓缩。粗产物通过硅胶快速色谱法提纯(0-100%EtOAc/hex)以提供目标产物(82mg,74%)，为粘稠黄色油状物。实施例25(2S)-2-(叔丁氧基)-2-{4,27-二甲基-21,26-二氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,11,13(32),15(20),16,18-九烯-3-基}乙酸:将(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-4,27-二甲基-21,26-二氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[25.2.2.1^{6,9}.1^{10,13}.0^{2,7}.0^{15,20}]三十三碳-2,4,6(33),8,11,13(32),15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸甲酯(20mg,0.033mmol,1当量)和10%Pd/C(16mg)于EtOH(1mL)中的溶液暴露于氢气球。1h后，将反应通过硅藻土塞过滤，用最少量的MeOH洗脱。向该过滤后的溶液中添加氢氧化锂一水合物(27mg,0.651mmol,20当量)和水(2滴)。然后将反应在60℃加热18h。加入更多的氢氧化锂一水合物(27mg,0.651mmol,20当量)并将温度升至70℃。搅拌1h后，将反应从热源移除并过滤。滤液通过制备HPLC提纯以提供目标产物(9.1mg,46%)。[注:未观察到4个哌啶氢，可能在水峰下];LCMS(ESI,M+1):603.5。实施例26(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-4,27-二甲基-21,26-二氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,11,13(32),15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸:通过中间体95的直接皂化制备，收率59%。中间体962-(烯丙氧基)-3-氟甲醛:由3-氟-2-羟基苯甲醛使用与中间体84相同的程序以定量收率制备。中间体97(2-(烯丙氧基)-3-氟苯基)甲醇:由中间体96使用与中间体85相同的程序以90%收率制备。(2-(烯丙氧基)-3-氟苯基)甲醇。中间体982-(烯丙氧基)-1-(氯甲基)-3-氟苯:由中间体97使用与中间体86相同的程序以67%收率制备。中间体992-(2-(烯丙氧基)-3-氟苄基)丙二腈:由中间体98使用与中间体87相同的程序制备。物质未经提纯继续用于下一步骤。中间体1004-(2-(烯丙氧基)-3-氟苄基)-1H-吡唑-3,5-二胺:由中间体99使用与中间体88相同的程序以20%收率制备(2个步骤)。中间体1014-(2-(烯丙氧基)-3-氟苄基)-1H-吡唑:由中间体100使用与中间体89相同的程序以19%收率制备。中间体102(S)-2-(2-(4-(2-(烯丙氧基)-3-氟苄基)-1H-吡唑-1-基)-7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸甲酯:由中间体93和101使用与中间体94相同的程序以54%收率制备。LCMS(ESI,M+1):661.5。中间体103(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-19-氟-4,27-二甲基-21,26-二氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,11,13(32),15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸甲酯:由中间体102使用与中间体95相同的程序以48%收率制备。实施例27(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-19-氟-4,27-二甲基-21,26-二氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,11,13(32),15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸:通过中间体103的直接皂化以53%收率制备，参见实施例25的制备。实施例28(2S)-2-(叔丁氧基)-2-{19-氟-4,27-二甲基-21,26-二氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,11,13(32),15(20),16,18-九烯-3-基}乙酸:由中间体103以60%收率制备，参见实施例25的制备。中间体1042-(烯丙氧基)-5-氟苯甲醛:由2-羟基-5-氟苯甲醛使用与中间体84相同的程序以96%收率制备。LCMS(ESI,M+1):181.15。中间体105(2-(烯丙氧基)-5-氟苯基)甲醇:由中间体104使用与中间体85相同的程序以88%收率制备。中间体1061-(烯丙氧基)-2-(溴甲基)-4-氟苯:将2-(烯丙氧基)-5-氟苯基)甲醇(1.06g,5.82mmol,1当量)溶于DCM(11.6ml)。将溶液冷却至0℃并向该溶液中逐滴添加PBr3(0.274ml,2.91mmol,0.5当量)。将所得溶液在0℃下搅拌1h。真空浓缩溶剂并通过硅胶快速色谱柱提纯(5%EtOAc/己烷)以提供产物(0.60g,42%)。中间体1072-(2-(烯丙氧基)-5-氟苄基)丙二腈:由中间体106使用与中间体87相同的程序以75%收率制备。中间体1084-(2-(烯丙氧基)-5-氟苄基)-1H-吡唑-3,5-二胺:由中间体107使用与中间体88相同的程序以55%收率制备。中间体1094-(2-(烯丙氧基)-5-氟苄基)-1H-吡唑:由中间体108使用与中间体89相同的程序以28%收率制备。LCMS(ESI,M+1):233.2。中间体110(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(4-(2-(烯丙氧基)-5-氟苄基)-1H-吡唑-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸甲酯:由中间体93和109使用与中间体94相同的程序以54%收率制备。LCMS(ESI,M+1):661.4。中间体111(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-17-氟-4,27-二甲基-21,26-二氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,11,13(32),15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸甲酯:由中间体110使用与中间体95相同的程序以46%收率制备。LCMS(ESI,M+1):633.4。实施例29(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-17-氟-4,27-二甲基-21,26-二氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,11,13(32),15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸:通过中间体111的直接皂化以46%收率制备，参见实施例25的制备。实施例30(2S)-2-(叔丁氧基)-2-{17-氟-4,27-二甲基-21,26-二氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,11,13(32),15(20),16,18-九烯-3-基}乙酸:由中间体111以38%收率制备，参见实施例25的制备。中间体1122-(丁-3-烯-1-基氧基)苯甲醛:向2-羟基苯甲醛(10g,82mmol,1当量)于DMF(205mL)中的溶液中添加NaH(3.6g的于矿物油中的60%混悬液,90mmol,1.1当量)。放出气体。添加4-溴丁-1-烯(10mL,98mmol,1.2当量)并将混合物加热至90℃持续4h。在冷却至环境温度后，将反应在1NNaOH和乙醚之间分配。将乙醚层干燥(MgSO4)并真空浓缩以提供中间体31a，为黄色油状物(6.9g,48%)。不经提纯继续使用(被残余的矿物油污染)。中间体113(2-(丁-3-烯-1-基氧基)苯基)甲醇:由中间体112使用与中间体85相同的程序以59%收率制备。中间体1141-(丁-3-烯-1-基氧基)-2-(氯甲基)苯:由中间体113使用与中间体86相同的程序以48%收率制备。中间体1152-(2-(丁-3-烯-1-基氧基)苄基)丙二腈:由中间体114使用与中间体87相同的程序以61%收率制备。LCMS(ESI,M+1):227.1。中间体1164-(2-(丁-3-烯-1-基氧基)苄基)-1H-吡唑-3,5-二胺:由中间体115使用与中间体88相同的程序以55%收率制备。LCMS(ESI,M+1):259.2。中间体1174-(2-(丁-3-烯-1-基氧基)苄基)-1H-吡唑:由中间体116使用与中间体89相同的程序以33%收率制备。LCMS(ESI,M+1):229.3。中间体118(S)-2-(7-(4-(烯丙氧基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(4-(2-(丁-3-烯-1-基氧基)苄基)-1H-吡唑-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸甲酯:由中间体93和117使用与中间体94相同的程序以38%收率制备。LCMS(ESI,M+1):657.5。中间体119(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(24E)-4,28-二甲基-21,27-二氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[26.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十四碳-2,4,6(34),8,11,13(33),15(20),16,18,24-十烯-3-基]乙酸甲酯:由中间体118使用与中间体94相同的程序以29%收率制备。LCMS(ESI,M+1):629.45。实施例31(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(24E)-4,28-二甲基-21,27-二氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[26.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十四碳-2,4,6(34),8,11,13(33),15(20),16,18,24-十烯-3-基]乙酸:通过中间体119的直接皂化以6%收率制备，参见实施例25的制备。实施例32(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(24Z)-4,28-二甲基-21,27-二氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[26.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十四碳-2,4,6(34),8,11,13(33),15(20),16,18,24-十烯-3-基]乙酸:通过中间体119的直接皂化以11%收率制备，参见实施例25的制备。实施例33(2S)-2-(叔丁氧基)-2-{4,28-二甲基-21,27-二氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[26.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十四碳-2,4,6(34),8,11,13(33),15(20),16,18-九烯-3-基}乙酸:由中间体119以45%收率制备，参见实施例25的制备。中间体120(S)-2-(2-溴-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸甲酯:将(S)-2-(2-溴-7-氯-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸甲酯(),4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶盐酸盐(153mg,0.806mmol,1.05当量)和DIPEA(0.40mL,2.304mmol,3当量)于DMF(3.8mL)中的溶液在65℃下加热20min。冷却至环境温度后，将反应用EtOAc稀释。将其用饱和碳酸氢盐水溶液、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓缩。粗产物通过快速硅胶色谱法提纯(20%EtOAc/己烷)以提供产物(0.35g,90%)。LCMS(ESI,M+1):509.4。中间体121(S)-2-(7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-2-(4-(2-(丁-3-烯-1-基氧基)苄基)-1H-吡唑-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸甲酯:由中间体89和120使用与中间体94相同的程序以82%收率制备。LCMS(ESI,M+1):655.5。中间体122(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(24E)-4,28-二甲基-21-氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[26.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十四碳-2,4,6(34),8,11,13(33),15(20),16,18,24-十烯-3-基]乙酸甲酯:由中间体121使用与中间体95相同的程序以82%收率制备。LCMS(ESI,M+1):627.5。实施例34(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(24E)-4,28-二甲基-21-氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[26.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十四碳-2,4,6(34),8,11,13(33),15(20),16,18,24-十烯-3-基]乙酸:通过中间体122的直接皂化以17%收率制备，参见实施例25的制备。实施例35(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(24Z)-4,28-二甲基-21-氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[26.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十四碳-2,4,6(34),8,11,13(33),15(20),16,18,24-十烯-3-基]乙酸:通过中间体122的直接皂化以25%收率制备，参见实施例25的制备。实施例36(2S)-2-(叔丁氧基)-2-{4,28-二甲基-21-氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[26.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十四碳-2,4,6(34),8,11,13(33),15(20),16,18-九烯-3-基}乙酸:由中间体122以40%收率制备，参见实施例25的制备。中间体1233-(烯丙氧基)苯甲醛:由3-羟基苯甲醛使用与中间体84相同的程序制备。粗物质继续使用。中间体124(3-(烯丙氧基)苯基)甲醇:由中间体123使用与中间体85相同的程序以92%收率（两个步骤）制备。中间体1251-(烯丙氧基)-3-(氯甲基)苯:由中间体124使用与中间体86相同的程序以81%收率制备。中间体1262-(3-(丁-3-烯-1-基氧基)苄基)丙二腈:由中间体125使用与中间体87相同的程序以80%收率制备。中间体1274-(3-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑-3,5-二胺:由中间体126使用与中间体88相同的程序以60%收率制备。中间体1284-(3-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑:由中间体127使用与中间体89相同的程序以23%收率制备。中间体129(S)-2-(2-(4-(3-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑-1-基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-2-(叔丁氧基)乙酸甲酯:由中间体120和128使用与中间体94相同的程序以87%收率制备。LCMS(ESI,M+1):641.5。中间体130(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(22E)-4,26-二甲基-20-氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[24.2.2.16,9.1¹0,¹³.1¹5,¹9.0²,7]三十三碳-2,4,6(33),8,11,13(32),15(31),16,18,22-十烯-3-基]乙酸甲酯:由中间体37l使用与中间体25l相同的程序以92%收率制备。LCMS(ESI,M+1):613.5。实施例37(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(22E)-4,26-二甲基-20-氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[24.2.2.16,9.1¹0,¹³.1¹5,¹9.0²,7]三十三碳-2,4,6(33),8,11,13(32),15(31),16,18,22-十烯-3-基]乙酸：通过中间体130的直接皂化以40%收率制备，参见实施例25的制备。实施例38(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(22E)-4,26-二甲基-20-氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[24.2.2.16,9.1¹0,¹³.1¹5,¹9.0²,7]三十三碳-2,4,6(33),8,11,13(32),15(31),16,18,22-十烯-3-基]乙酸:通过中间体130的直接皂化以6%收率制备，参见实施例25的制备。实施例39(2S)-2-(叔丁氧基)-2-{4,26-二甲基-20-氧杂-1,5,7,8,10,11-六氮杂六环[24.2.2.16,9.1¹0,¹³.1¹5,¹9.0²,7]三十三碳-2,4,6(33),8,11,13(32),15(31),16,18-九烯-3-基}乙酸:由中间体130以23%收率制备，参见实施例25的制备。中间体1311-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯:向1H-吡唑-4-甲酸乙酯(0.94g,6.71mmol,1当量)和1-(烯丙氧基)-2-(氯甲基)苯(1.35g,7.38mmol,1.1当量)于MeCN(34mL)中的溶液中添加K2CO3(2.04g,14.76mmol,2.2当量)。然后将浆料加热至回流持续6h。冷却至环境温度后，过滤混合物并将滤液真空浓缩以提供1-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(2.04g,~100%)，为浅橙色油状物。中间体1321'-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H,1'H-[3,4'-联吡唑]-5-胺:将MeCN(0.52mL,9.97mmol,1.4当量)于THF(7mL)中的溶液冷却至-78℃(IPA/CO2)。然后加入n-BuLi(6.23mL的1.6M己烷溶液,9.97mmol,1.4当量)并将反应搅拌10min。向该白色浆料中添加1-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(2.04g,7.12mmol,1当量)于THF(7mL)中的溶液。反应变为棕褐色浆液，然后为橙色均匀溶液，最后褪色为浅黄色。10min后，移除冷却浴，将反应升温至环境温度。搅拌1h后，将反应添加到NH4Cl饱和水溶液中并用DCM萃取(x2)。将合并的DCM萃取物干燥(Na2SO4)并真空浓缩以提供粗制3-(1-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑-4-基)-3-氧代丙腈。将该粗产物溶于EtOH(36mL)并加入肼(0.36mL,11.39mmol,1.6当量)。将反应然后在回流下加热2h并真空以提供粗产物。粗产物通过硅胶快速色谱法提纯(0-10%MeOH/CHCl3含1%NH4OH)以提供1'-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H,1'H-[3,4'-联吡唑]-5-胺(1.51g,两个步骤72%)，为白色固体。中间体1332-(2-(1-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑-4-基)-7-羟基-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸甲酯。向1'-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H,1'H-[3,4'-联吡唑]-5-胺(1.51g,5.11mmol,1当量)于二甲苯(26mL)中的浆液中添加2-乙酰基琥珀酸二甲酯(1.0mL,6.14mmol,1.2当量)和TsOH(2mg,0.010mmol,0.002当量)。将反应加热至回流持续4h，然后从加热移除。冷却至环境温度后，反应用己烷稀释，过滤浅黄色固体以提供2-(2-(1-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑-4-基)-7-羟基-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸甲酯(2.03g,92%)。中间体1342-(2-(1-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑-4-基)-7-氯-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸甲酯:将2-(2-(1-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑-4-基)-7-羟基-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸甲酯(1.44g,3.32mmol,1当量)和N,N-二甲基苯胺(0.93mL,7.31mmol,2.2当量)于POCl3(17mL)中的溶液加热至90℃持续1h。然后将反应冷却至环境温度并真空浓缩。将残余物添加到饱和碳酸氢钠水溶液中并用CHCl3萃取(x3)。将合并的CHCl3萃取物干燥(Na2SO4)并真空浓缩以提供粗产物。粗产物通过硅胶快速色谱法提纯(0-100%EtOAc/hex)以提供2-(2-(1-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑-4-基)-7-氯-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸甲酯(0.95g,63%)。[注:这可能是两个非常接近的单峰在一起]，。中间体1352-(2-(1-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑-4-基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸甲酯:将2-(2-(1-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑-4-基)-7-氯-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸甲酯(0.24g,0.531mmol,1当量)、4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶,HCl(111mg,0.584mmol,1.1当量)和DIPEA(2.2mL,1.275mmol,2.4当量)于DMF(2.7mL)中的溶液在60℃下加热6h。然后将反应添加到饱和碳酸氢钠水溶液中并用EtOAc萃取(x2)。将合并的EtOAc萃取物干燥(Na2SO4)并真空浓缩。粗产物通过硅胶快速色谱法提纯(10-100%EtOAc/hex)以提供2-(2-(1-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑-4-基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸甲酯(0.265g,88%)。中间体1362-[(23E)-4,27-二甲基-21-氧杂-1,5,7,8,12,13-六氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10(32),11,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸甲酯:将氮气鼓泡通过2-(2-(1-(2-(烯丙氧基)苄基)-1H-吡唑-4-基)-7-(4-(丁-3-烯-1-基)-4-甲基哌啶-1-基)-5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙酸甲酯(0.26mg,0.457mmol,1当量)于DCE(91mL)中的溶液持续5min。然后将溶液加热至70℃并添加第二代Hoveyda-Grubbs催化剂(29mg,0.046mmol,0.1当量)。继续加热微浅蓝色溶液1h。然后将反应冷却至环境温度并真空浓缩。粗产物通过硅胶快速色谱法提纯(0-100%EtOAc/hex)以提供目标产物(0.156g,63%)，为棕褐色泡沫状物质。中间体1372-[(23E)-4,27-二甲基-21-氧杂-1,5,7,8,12,13-六氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10(32),11,15(20),16,18,23-十烯-3-基]-2-氧代乙酸甲酯:将2-[(23E)-4,27-二甲基-21-氧杂-1,5,7,8,12,13-六氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10(32),11,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸甲酯(0.156,0.289mmol,1当量)于THF(6mL)中的溶液冷却至-78℃(IPA/CO2)。加入KHMDS(0.44mL的0.91MTHF溶液,0.404mmol,1.4当量)。反应变为深橙黄色。15min后，一次性加入3-苯基-2-(苯磺酰基)-1,2-氧杂氮杂环丙烷(113mg,0.433mmol,1.5当量)。30min后，将冷反应添加到饱和碳酸氢钠水溶液中并用EtOAc萃取(x2)。将合并的EtOAc萃取物干燥(Na2SO4)并真空浓缩以提供粗产物。将其溶于DCM(5.8mL)和Dess-Martin氧化剂(172mg,0.405mmol,1.4当量)。16h后，将反应添加到饱和碳酸氢钠水溶液中并用DCM萃取(x3)。将合并的DCM萃取物干燥(Na2SO4)并真空浓缩以提供粗产物。粗产物通过硅胶快速色谱法提纯(10-100%EtOAc/hex)以提供目标产物(0.15g,94%)。中间体138(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-4,27-二甲基-21-氧杂-1,5,7,8,12,13-六氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10(32),11,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸甲酯:将2-[(23E)-4,27-二甲基-21-氧杂-1,5,7,8,12,13-六氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10(32),11,15(20),16,18,23-十烯-3-基]-2-氧代乙酸甲酯(0.15g,0.270mmol,1当量)和(R)-1-甲基-3,3-二苯基六氢吡咯并[1,2-c][1,3,2]氧杂氮杂硼杂环戊烯(120mg,0.433mmol,1.6当量)于甲苯(5.4mL)中的溶液冷却至-25℃(MeCN/CO2)。然后添加儿茶酚硼烷(0.92mL的50%甲苯溶液,0.433mmol,1.6当量)并将温度保持在-15℃至-25℃达3h。然后将冷反应添加到10%水溶液中，用EtOAc萃取(x3)。将合并的EtOAc萃取物干燥(Na2SO4)并真空浓缩以提供粗产物，为浅黄色泡沫状物质(290mg)。将其溶于t-BuOAc(5.4mL)。向该溶液中添加高氯酸(0.070mL的70%水溶液,0.810mmol,3当量)以得到浑浊白色溶液。为了尝试和提高溶解度，加入DCM(5mL)和更多的高氯酸(0.2mL的70%水溶液,5.7当量)。搅拌1h后，将反应小心添加到饱和碳酸氢钠水溶液中并用DCM萃取(x3)。将合并的DCM萃取物干燥(Na2SO4)并真空浓缩以提供粗产物。粗产物通过硅胶快速色谱法提纯(10-100%EtOAc/hex)以提供目标产物(3mg,26%,2个步骤)。实施例40(2S)-2-(叔丁氧基)-2-{4,27-二甲基-21-氧杂-1,5,7,8,12,13-六氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10(32),11,15(20),16,18-九烯-3-基}乙酸:将(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-4,27-二甲基-21-氧杂-1,5,7,8,12,13-六氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10(32),11,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸甲酯(34mg,0.055mmol,1当量)和10%Pd/C(12mg,0.011mmol,0.2当量)于MeOH(1.1mL)中的溶液暴露于氢气球。6h后，将反应通过硅藻土塞过滤，用最少量的MeOH洗脱。向该过滤后的溶液中添加氢氧化锂一水合物(70mg,1.6mmol,30当量)。然后将反应在60℃加热18h。将反应从热源移除并过滤。滤液通过制备LC/MS提纯，使用以下条件以提供目标产物(5.9mg,16%)：柱：WatersXBridgeC18,19x200mm,5-μm粒子;流动相A:含有20-mM乙酸铵的水;流动相B:95:5乙腈:含20-mM乙酸铵的水;梯度:40-80%B历时20分钟,然后在100%B保持5分钟;流速:20mL/min。实施例41(2S)-2-(叔丁氧基)-2-[(23E)-4,27-二甲基-21-氧杂-1,5,7,8,12,13-六氮杂六环[25.2.2.16,9.1¹0,¹³.0²,7.0¹5,²0]三十三碳-2,4,6(33),8,10(32),11,15(20),16,18,23-十烯-3-基]乙酸:通过中间体138的直接皂化以82%收率制备，参见实施例40的程序。本领域技术人员显而易见的是，本公开不限于上述示例性实施例，并且可以在不背离其基本属性的情况下体现为其它具体形式。因此这些实施例应在所有方面被视为示例性而非限制性的，参考所附权利要求书而非上述实施例，因此其中意在涵盖落在权利要求书的含义和等同范围内的所有变化。