本发明涉及藻胆蛋白的分离纯化领域，具体涉及一种从江蓠菜深加工泡碱液分离纯化藻胆蛋白的工艺技术。
背景技术：
江蓠菜含有丰富的活性物质，如藻胆蛋白、高度不饱和脂肪酸和琼脂多糖等功能活性成分，尤其是藻胆蛋白和琼脂多糖，使得江蓠菜具有多种重要的生理功能，可广泛应用于食品、医药和化妆品等领域。综合现如今国内外对江蓠研究加工经验的加深，在耗时短、低成本的前提下获得高产率的活性物质已经成为研究的主要方向。
其中藻胆蛋白不仅具有良好的捕光特性，而且具有很好的荧光特性、营养保健功能和药用价值。其用途极为广泛，可作为天然色素应用于食品、化妆品等工业，又可制成荧光试剂，用于免疫学和临床医学诊断的领域中。同时，藻胆蛋白还具有抗氧化、抗肿瘤以及提高机体免疫力等重要生理功能，是保健品及药品等的重要资源。
在琼脂产品的生产加工中，主要是以海洋近海资源红藻江蓠菜为原料，经分析藻体含有约6％的藻胆蛋白，在琼脂产品生产加工过程中，使用大量的稀碱液对藻体进行前处理，在此过程中部分的藻胆蛋白溶于稀碱液中，并与其它废水一起排出，既造成浪费又造成环境污染，因此，研究出从琼脂生产过程中的前处理稀碱液中提取藻胆蛋白的工艺技术具有深远的社会意义和经济价值。
技术实现要素：
本发明提供了一种从江蓠菜深加工泡碱液分离纯化藻胆蛋白的工艺技术，有效的从江蓠菜深加工泡碱液中提取高纯度的藻胆蛋白，同时工艺简单，得率高，可获得显著的经济效益。
为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：
一种从江蓠菜深加工泡碱液分离纯化藻胆蛋白的工艺技术，包括以下步骤：
(1)碱液收集：在琼脂生产过程中，将对江蓠菜进行前处理后的泡碱液抽取至溶液池中，静置12～24h，待溶液中的杂质、悬浮物完全沉淀下来后，除去液面的漂浮物，抽取上清液置于容器中，备用；
(2)浓缩：将上述上清液通过膜过滤法去除一定量的稀碱液，得蛋白质含量为0.5％～2.0％的浓缩液，并回收被去除的稀碱液；
(3)超滤：采用NaNO3高渗-超滤法分离提纯浓缩液中的藻胆蛋白，去除无机盐和小分子蛋白质，得藻胆蛋白粗制品；
(4)分离纯化：将藻胆蛋白粗制品先采用DEAE-Sepharose离子交换柱纯化，再经SephacrylS-300HR柱做进一步纯化，得藻胆蛋白初品；将藻胆蛋白初品依次经羟基磷灰石层析柱、Superdex 75柱纯化得藻胆蛋白。
优选地，所述步骤(2)中浓缩液的蛋白质含量为0.8％～1.8％。
优选地，所述步骤(2)中浓缩液的蛋白质含量为1.2％～1.6％。
优选地，所述步骤(2)中回收的稀碱液用于江蓠菜前处理。
优选地，所述步骤(3)中超滤时的滤膜选用聚砜膜。
优选地，所述聚砜膜的膜截留分子量为5000～6000。
本发明的有益效果为：本发明先采用NaNO3高渗-超滤法分离提纯藻胆蛋白，安全无毒，之后采用多种纯化技术混合使用，大大提高了藻胆蛋白的纯化效率及纯度，本发明中从江蓠菜深加工泡碱液分离纯化藻胆蛋白的工艺技术利用江蓠菜深加工泡碱液中含有丰富的藻胆蛋白的特点，合理构建分离纯化体系，有效的从江蓠菜深加工泡碱液中提取高纯度的藻胆蛋白，同时工艺简单，得率高，并可实现稀碱液的循环再利用，节约原料，提高资源利用效率，可获得显著的经济效益，并有效避免了环境污染。
具体实施方式
下面结合具体实施例进一步说明本发明的技术解决方案，实施例不能理解为是对技术解决方案的限制。
实施例1：
一种从江蓠菜深加工泡碱液分离纯化藻胆蛋白的工艺技术，包括以下步骤：
(1)碱液收集：在琼脂生产过程中，将对江蓠菜进行前处理后的泡碱液抽取至溶液池中，静置24h，溶液中的杂质、悬浮物完全沉淀下来，除去液面的漂浮物，抽取上清液置于容器中，备用；
(2)浓缩：将上述上清液通过膜过滤法去除一定量的稀碱液，得蛋白质含量为0.5％的浓缩液，并回收被去除的稀碱液，将其用于琼脂生产过程中江蓠菜的前处理；
(3)超滤：采用NaNO3高渗-超滤法分离提纯浓缩液中的藻胆蛋白，去除无机盐和小分子蛋白质后，得藻胆蛋白粗制品，其中超滤时的滤膜选用聚砜膜，该聚砜膜膜截留分子量为5000；
(4)分离纯化：将藻胆蛋白粗制品先采用DEAE-Sepharose离子交换柱纯化，再经SephacrylS-300HR柱做进一步纯化，得藻胆蛋白初品；将藻胆蛋白初品依次经羟基磷灰石层析柱、Superdex 75柱纯化得藻胆蛋白。
检测结果表明：藻胆蛋白提取率为84.5％。
实施例2：
一种从江蓠菜深加工泡碱液分离纯化藻胆蛋白的工艺技术，包括以下步骤：
(1)碱液收集：在琼脂生产过程中，将对江蓠菜进行前处理后的泡碱液抽取至溶液池中，静置12h，溶液中的杂质、悬浮物完全沉淀下来，除去液面的漂浮物，抽取上清液置于容器中，备用；
(2)浓缩：将上述上清液通过膜过滤法去除一定量的稀碱液，得蛋白质含量为1.8％的浓缩液，并回收被去除的稀碱液，将其用于琼脂生产过程中江蓠菜的前处理；
(3)超滤：采用NaNO3高渗-超滤法分离提纯浓缩液中的藻胆蛋白，去除无机盐和小分子蛋白质后，得藻胆蛋白粗制品，其中超滤时的滤膜选用聚砜膜，该聚砜膜膜截留分子量为5000；
(4)分离纯化：将藻胆蛋白粗制品先采用DEAE-Sepharose离子交换柱纯化，再经SephacrylS-300HR柱做进一步纯化，得藻胆蛋白初品；将藻胆蛋白初品依次经羟基磷灰石层析柱、Superdex 75柱纯化得藻胆蛋白。
检测结果表明：藻胆蛋白提取率为85.2％。
实施例3：
一种从江蓠菜深加工泡碱液分离纯化藻胆蛋白的工艺技术，包括以下步骤：
(1)碱液收集：在琼脂生产过程中，将对江蓠菜进行前处理后的泡碱液抽取至溶液池中，静置16h，溶液中的杂质、悬浮物完全沉淀下来，除去液面的漂浮物，抽取上清液置于容器中，备用；
(2)浓缩：将上述上清液通过膜过滤法去除一定量的稀碱液，得蛋白质含量为1.2％的浓缩液，并回收被去除的稀碱液，将其用于琼脂生产过程中江蓠菜的前处理；
(3)超滤：采用NaNO3高渗-超滤法分离提纯浓缩液中的藻胆蛋白，去除无机盐和小分子蛋白质后，得藻胆蛋白粗制品，其中超滤时的滤膜选用聚砜膜，该聚砜膜膜截留分子量为5000；
(4)分离纯化：将藻胆蛋白粗制品先采用DEAE-Sepharose离子交换柱纯化，再经SephacrylS-300HR柱做进一步纯化，得藻胆蛋白初品；将藻胆蛋白初品依次经羟基磷灰石层析柱、Superdex 75柱纯化得藻胆蛋白。
检测结果表明：藻胆蛋白的提取率为85.4％。
实施例4：
一种从江蓠菜深加工泡碱液分离纯化藻胆蛋白的工艺技术，包括以下步骤：
(1)碱液收集：在琼脂生产过程中，将对江蓠菜进行前处理后的泡碱液抽取至溶液池中，静置18h，溶液中的杂质、悬浮物完全沉淀下来，除去液面的漂浮物，抽取上清液置于容器中，备用；
(2)浓缩：将上述上清液通过膜过滤法去除一定量的稀碱液，得蛋白质含量为2.0％的浓缩液，并回收被去除的稀碱液，将其用于琼脂生产过程中江蓠菜的前处理；
(3)超滤：采用NaNO3高渗-超滤法分离提纯浓缩液中的藻胆蛋白，去除无机盐和小分子蛋白质后，得藻胆蛋白粗制品，其中超滤时的滤膜选用聚砜膜，该聚砜膜膜截留分子量为6000；
(4)分离纯化：将藻胆蛋白粗制品先采用DEAE-Sepharose离子交换柱纯化，再经SephacrylS-300HR柱做进一步纯化，得藻胆蛋白初品；将藻胆蛋白初品依次经羟基磷灰石层析柱、Superdex 75柱纯化得藻胆蛋白。
检测结果表明：藻胆蛋白提取率为84.2％。
实施例5：
一种从江蓠菜深加工泡碱液分离纯化藻胆蛋白的工艺技术，包括以下步骤：
(1)碱液收集：在琼脂生产过程中，将对江蓠菜进行前处理后的泡碱液抽取至溶液池中，静置20h，溶液中的杂质、悬浮物完全沉淀下来，除去液面的漂浮物，抽取上清液置于容器中，备用；
(2)浓缩：将上述上清液通过膜过滤法去除一定量的稀碱液，得蛋白质含量为0.8％的浓缩液，并回收被去除的稀碱液，将其用于琼脂生产过程中江蓠菜的前处理；
(3)超滤：采用NaNO3高渗-超滤法分离提纯浓缩液中的藻胆蛋白，去除无机盐和小分子蛋白质后，得藻胆蛋白粗制品，其中超滤时的滤膜选用聚砜膜，该聚砜膜膜截留分子量为5000；
(4)分离纯化：将藻胆蛋白粗制品先采用DEAE-Sepharose离子交换柱纯化，再经SephacrylS-300HR柱做进一步纯化，得藻胆蛋白初品；将藻胆蛋白初品依次经羟基磷灰石层析柱、Superdex 75柱纯化得藻胆蛋白。
检测结果表明：藻胆蛋白的提取率为84.8％。
实施例6：
一种从江蓠菜深加工泡碱液分离纯化藻胆蛋白的工艺技术，包括以下步骤：
(1)碱液收集：在琼脂生产过程中，将对江蓠菜进行前处理后的泡碱液抽取至溶液池中，静置14h，溶液中的杂质、悬浮物完全沉淀下来，除去液面的漂浮物，抽取上清液置于容器中，备用；
(2)浓缩：将上述上清液通过膜过滤法去除一定量的稀碱液，得蛋白质含量为1.4％的浓缩液，并回收被去除的稀碱液，将其用于琼脂生产过程中江蓠菜的前处理；
(3)超滤：采用NaNO3高渗-超滤法分离提纯浓缩液中的藻胆蛋白，去除无机盐和小分子蛋白质后，得藻胆蛋白粗制品，其中超滤时的滤膜选用聚砜膜，该聚砜膜膜截留分子量为6000；
(4)分离纯化：将藻胆蛋白粗制品先采用DEAE-Sepharose离子交换柱纯化，再经SephacrylS-300HR柱做进一步纯化，得藻胆蛋白初品；将藻胆蛋白初品依次经羟基磷灰石层析柱、Superdex 75柱纯化得藻胆蛋白。
检测结果表明：藻胆蛋白的提取率为85.8％。
实施例7：
一种从江蓠菜深加工泡碱液分离纯化藻胆蛋白的工艺技术，包括以下步骤：
(1)碱液收集：在琼脂生产过程中，将对江蓠菜进行前处理后的泡碱液抽取至溶液池中，静置22h，溶液中的杂质、悬浮物完全沉淀下来，除去液面的漂浮物，抽取上清液置于容器中，备用；
(2)浓缩：将上述上清液通过膜过滤法去除一定量的稀碱液，得蛋白质含量为1.6％的浓缩液，并回收被去除的稀碱液，将其用于琼脂生产过程中江蓠菜的前处理；
(3)超滤：采用NaNO3高渗-超滤法分离提纯浓缩液中的藻胆蛋白，去除无机盐和小分子蛋白质后，得藻胆蛋白粗制品，其中超滤时的滤膜选用聚砜膜，该聚砜膜膜截留分子量为6000；
(4)分离纯化：将藻胆蛋白粗制品先采用DEAE-Sepharose离子交换柱纯化，再经SephacrylS-300HR柱做进一步纯化，得藻胆蛋白初品；将藻胆蛋白初品依次经羟基磷灰石层析柱、Superdex 75柱纯化得藻胆蛋白。
检测结果表明：藻胆蛋白的提取率为85.1％。
以上为对本发明实施例的描述，通过对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。