匪1?(3001抱，0150-(16)3 1.16(111，3!1)，1.38-1.42(111，2!1)，1.57-1· 58 (m, 1H), 1. 69 (m, 2H), 1. 91-1. 95 (m, 2H), 3. 04 (m, 1H), 5. 90 (d, J = 6. 9Hz, 1H), 7. 31 (d, J =8. 7Hz, 1H), 7. 82 (dd, J = 2. I, 8. 7Hz, 1H), 8. 37 (dd, J= 1.8, 9. 6Hz, 1H), 8. 56 (d, J = I. 8Hz, 1H), 8. 91 (d, J = 9. 6Hz, 1H), 9. 32 (d, J=L 2Hz, 1H), 12. 57 (t, J=L 2Hz, 1H) ；13C NMR(75MHz, DMS〇-d6) δ 25. I, 25. 6, 33. 7, 57. 5, 112. 4, 116. 0, 116. 2, 118. 7, 121. 8, 125. 0, I 26. I, 127. 0, 127. 6, 133. 3, 134. 5, 134. 8, 136. 8, 144. 2.
[0118] 实施例9
[0119] 2, 10-二溴-13-环己基氨基-6-氧代-5, 6-二氢吡啶[2'，Γ :2,3]咪唑[l，5-c] 喹唑啉高氯酸盐的制备。
[0120]
[0121] 将高氯酸（70%，lmmol, 142mg)加入到 5-溴靛红（lmmol, 226mg), 2-氨基-5-溴批 P定（I. 35mmol, 233mg)和环己基异氰（I. 35mmol, 147mg)的正丁醇（4mL)溶液，回流搅拌反 应8小时。待反应液冷却至室温时，过滤并用少量乙醇洗涤滤饼得到目标产物，收率37%。
[0122] 产物经测定=1H 匪R (500MHz, DMS0-d6) δ 1. 15-1. 22 (m, 3H)，1. 39-1. 41 (m，2H)，I. 57 (s，1H)，I. 70 (m，2H)，I. 91-1. 94 (m，2H)，3· 03-3. 05 (m，1H)，5· 86 (d ,J = 7. 0Hz, 1H), 7. 32 (d, J = 8. 8Hz, 1H), 7. 82 (d, J = 8. 9Hz, 1H), 8. 45 (d, J = 9. 5Hz, 1H), 8. 55(s, 1H), 8. 84(d, J = 9. 5Hz, 1H), 9. 35 (s, 1H), 12. 53 (s, 1H) ；13C NMR(100MHz, DMS0-d6) δ 25. I, 25. 6, 33. 7, 57. 6, 112. 4, 114. 8, 116. I, 116. 2, 118. 8, 121. 6, 125. 9, 126. 8, 127. 0, 133. 5, 134. 7, 139. I, 144. 2.
[0123] 实施例10
[0124] 13-环己基氨基-2-碘-10-甲基-6-氧代-5, 6-二氢吡啶[2'，Γ :2, 3]咪唑 [l，5-c]喹唑啉高氯酸盐的制备。
[0125]
[0126] 将高氯酸（70%，lmmol, 142mg)加入到 5-碘靛红（lmmol, 273mg)，2-氨基-5-甲 基批陡（I. 35mmol, 146mg)和环己基异氰（I. 35mmol, 147mg)的正丁醇（4mL)溶液，回流搅 拌反应8小时。待反应液冷却至室温时，过滤并用少量乙醇洗涤滤饼得到目标产物，收率 36% 〇
[0127] 产物经测定=1H NMR (400MHz, DMS0-d6) δ 1. 15-1. 22 (m, 3H), 1. 40-1. 49 (m ,2H), I. 58-1. 60 (m, 1H), I. 71-1. 78 (m, 2H), I. 92-1. 95 (m, 2H), 2. 60 (s, 3H), 3. 01 ( d, J = 6. 4Hz, 1H), 5. 83(d, J = 6. 4Hz, 1H), 7. 14 (d, J = 8. 4Hz, 1H), 7. 91 (d, J = 8. 8Hz, 1H), 8. 16 (d, J = 9. 2Hz, 1H), 8. 75 (s, 1H), 8. 81 (d, J = 9. 2Hz, 1H), 8. 89 (s, 1H), 12. 3 3(s, 1H) ；13C NMR (100MHz, DMS0-d6) δ 18.3,25. 1,25.7,33.8,57.3,87.7, 113.0, 114.5, 118. 5, 121. I, 124. 6, 125. 3, 131. 2, 132. 9, 133. 4, 134. 8, 138. 9, 139. 9, 144. 4.
[0128] 实施例11
[0129] 四稠环咪唑[1，2_a]吡啶类化合物的肿瘤细胞体外杀伤活性测定.
[0130] 将实施例6、实施例7、实施例8、实施例9和实施例10制备得到的四稠环咪唑 [l，2-a]吡啶类化合物分别与胃癌HEF145肿瘤细胞株一起进行体外细胞活性实验，以 500〇 cells/well的细胞浓度接种到96孔细胞培养板上，在37°C，5% CO2培养过夜备用。用 完全培养基将实施例6、实施例7、实施例8、实施例9和实施例10制备得到的四稠环咪唑 [1，2-a]吡啶类化合物分别配比成不同浓度梯度，与细胞在37°C，5% CO2的条件下共同培 养52小时，用MTT法检测细胞存活率。
[0131] 实施例6、实施例7、实施例8、实施例9和实施例10制备得到的四稠环咪唑 [1，2-a]吡啶类化合物的IC 5。值对应表2所示。
[0132] 表2 :在胃癌HEF145肿瘤细胞的体外实验中，实施例6、实施例7、实施例8、实施例 9和实施例10制备得到的四稠环咪唑[1，2-a]吡啶类化合物的IC 5。值对应表。
[0134] 由表2可以看出，实施例10制备得到的四稠环咪唑[1，2-a]吡啶类化合物在 HEF145肿瘤细胞中有明显杀伤作用，其IC50值小于ΙΟμΜ。实施例6、实施例7、实施例8 和实施例9制备得到的四稠环咪唑[1，2-a]吡啶类化合物的IC50在20~30 μ M之间。
[0135] 在HEF145肿瘤细胞的体外实验中，分别添加实施例6、实施例7、实施例8、实施例 9和实施例10制备得到的四稠环咪唑[1，2-a]吡啶类化合物后得到的细胞生长率曲线图， 如图3、图4、图5、图6和图7所示。
[0136] 由图3、图4、图5、图6和图7可以看出，实施例6、实施例7、实施例8、实施例9和 实施例10制备得到的四稠环咪唑[1，2-a]吡啶类化合物均对HEF145肿瘤细胞均表现出较 好的体外杀伤活性，具有抗肿瘤作用。
[0137] 以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并 不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员 来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保 护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
【主权项】
1. 一种四稠环咪唑[l，2-a]吡啶类化合物，其特征在于，具有如下结构式：其中，X为C104、HS04、C1或卜> 札为H、F、Cl、Br、I、Cl~C20的烷基或Cl~C20的烷氧基， R2为H、F、Cl、Br、I、Cl~C20的烷基或Cl~C20的烷氧基， R3为H、C3~C6的烷基或芳香基。2. -种四稠环咪唑[l，2-a]吡啶类化合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤： 提供具有如下结构式的布朗斯特酸、化合物A、化合物B和化合物C， 布朗斯特酸：HX，化合物化合物C: V'NH2 ；H ,其中，HX为HC104、H2S04、HC1 或I为H、F、C1、 Br、I、Cl~C20的烷基或C1~C20的烷氧基，R2为H、F、Cl、Br、I、Cl~C20的烷基或C1~C20的烷氧基，R3为H、C3~C6的烷基或芳香基；以及 将所述化合物A、所述化合物B和所述化合物C溶解在有机溶剂中，加入所述布朗斯特 酸后搅拌回流，充分反应后冷却至室温，将反应液分离纯化，得到四稠环咪唑[l，2-a]吡啶 类化合物，所述四稠环咪唑[l，2-a]吡啶类化合物的结构如下： u； 其中，X为C104、HS04、C1 耷3. 根据权利要求2所述的四稠环咪唑[1，2-a]吡啶类化合物的制备方法，其特征在于， 得到四稠环咪唑[l，2-a]吡啶类化合物的步骤中，所述化合物A、所述化合物B和所述化合 物C的摩尔比为0? 7~1. 5 :0? 7~1. 5 :0? 7~1. 5。4. 根据权利要求3所述的四稠环咪唑[1，2-a]吡啶类化合物的制备方法，其特征在于， 得到四稠环咪唑[l，2-a]吡啶类化合物的步骤中，所述化合物A、所述化合物B和所述化合 物C的摩尔比为1. 35 :1 :1. 35。5. 根据权利要求2所述的四稠环咪唑[1，2-a]吡啶类化合物的制备方法，其特征在 于，得到四稠环咪唑[1，2-a]吡啶类化合物的步骤中，所述有机溶剂为正丁醇、异丁醇、叔 丁醇、异戊醇、异丙醇、三氟乙醇、乙醇、甲醇或N，N-二甲基甲酰胺。6. 根据权利要求2所述的四稠环咪唑[1，2-a]吡啶类化合物的制备方法，其特征在于， 得到四稠环咪唑[1，2-a]吡啶类化合物的步骤中，所述布朗斯特酸和所述化合物B的摩尔 比为〇? 2~1. 2 :1。7. 根据权利要求2所述的四稠环咪唑[1，2-a]吡啶类化合物的制备方法，其特征在于， 将反应液分离纯化，得到四稠环咪唑[1，2-a]吡啶类化合物的操作为：将所述反应液过滤 后保留滤渣，用乙醇洗涤所述滤渣后得到所述四稠环咪唑[1，2-a]吡啶类化合物。8. -种四稠环咪唑[1，2-a]吡啶类化合物在抗肿瘤药物领域的应用，其特征在于，所 述四稠环咪唑[1，2-a]吡啶类化合物具有如下结构式：其中，X为C104、HS04、C1 或Ri为H、F、Cl、Br、I、Cl~C20的烷基或Cl~C20的烷氧基， R2为H、F、Cl、Br、I、Cl~C20的烷基或Cl~C20的烷氧基， R3为H、C3~C6的烷基或芳香基。
【专利摘要】本发明公开了一种四稠环咪唑[1,2-a]吡啶类化合物及其制备方法和应用，该四稠环咪唑[1,2-a]吡啶类化合物，具有如下结构式：其中，X-为ClO4-、HSO4-、Cl-或R1为H、F、Cl、Br、I、C1～C20的烷基或C1～C20的烷氧基，R2为H、F、Cl、Br、I、C1～C20的烷基或C1～C20的烷氧基，R3为H、C3～C6的烷基或芳香基。相对于传统的咪唑[1,2-a]吡啶类类衍生物，这种四稠环咪唑[1,2-a]吡啶类化合物具有新颖化学结构，并且在胃癌HEF145肿瘤细胞的体外实验中展现出药理活性。
【IPC分类】A61P35/00, C07D471/14, A61K31/519
【公开号】CN105017253
【申请号】CN201410179023
【发明人】林硕, 车超, 李松, 杨波, 辛胜昌
【申请人】广东华南新药创制中心
【公开日】2015年11月4日
【申请日】2014年4月29日