一种st细胞培养基的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物医药领域，尤其涉及培养基。
【背景技术】
[0002] ST细胞系猪睾丸（swinetestis)细胞，体外培养呈贴壁生长，培养过程中增殖较 为缓慢，且细胞消化传代中容易成团。ST细胞对多种病毒比较敏感，如猪瘟病毒（CSFV)、 猪细小病毒（PPV)、伪狂犬病毒等。目前ST细胞通过动物血清培养，动物个体不同，血清产 地、批号不同，每批质量差异甚大，其成分不能保持一致，容易产生细菌和病毒，不利于细胞 的培养，虽然使用动物血清成本较低但是不容易培养出较纯的细胞不利于长期发展。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于提供一种ST细胞培养基，以解决上述技术问题。
[0004] 本发明所解决的技术问题可以采用以下技术方案来实现：
[0005] -种ST细胞培养基，其特征在于，以终浓度计，配方如下：L-精氨酸盐酸盐Img/ L-1000mg/L、2_疏基乙醇0?lmg/L_200mg/L、内消旋肌醇0? 01mg/L-10mg/L、一 乙醇胺 盐酸盐lmg/L-1000mg/L、植物水解物50mg/L-5000mg/L、4-轻乙基哌嗪乙磺酸1000 mg/ L-4000mg/L、氯化钠1000mg/L-7000mg/L和甘氨酸 lmg/L-100mg/L。
[0006] 本发明减少ST细胞培养过程中产生的病毒，增大存活率加快增殖速度。2-巯基乙 醇在培养基中充当抗氧化剂，4-羟乙基哌嗪乙磺酸和甘氨酸作为一种缓冲剂调节培养基中 的PH值，氯化钠能维持培养基内渗透压的稳定。
[0007] 所述配方还包括：L-精氨酸盐酸盐lmg/L-100mg/L、2-疏基乙醇0?lmg/L-100mg/ L、内消旋肌醇0? 01mg/L-lmg/L、一乙醇胺盐酸盐100mg/L-1000mg/L、植物水解物2000mg/ L-5000mg/L、4_轻乙基哌嗪乙磺酸3000mg/L-4000mg/L、氯化钠6000mg/L-7000mg/L、甘 氨酸10mg/L-20mg/L硫酸镁 lmg/L-1000mg/L、氯化钾50mg/L-5000mg/L、磷酸钠 Img/ L-1000mg/L、L-半胱氨酸盐酸盐 lmg/L-1000mg/L和胸苷0? 3mg/L_0. 4mg/L。
[0008] 本发明通过优化了部分数据使培养基成分更加精确，硫酸镁能促进培养基中糖和 蛋白质的代谢加快细胞增殖速度，氯化钾能调节培养基中的电解质平衡，L-半胱氨酸盐酸 盐在培养基中起到还原剂的作用，胸苷在培养基中充当药物中间体。
[0009] 所述配方还包括：L-谷氨酰胺50mg/L-5000mg/L、L-组氨酸盐酸盐lmg/L-1000mg/ L、L-异亮氨酸 lmg/L-1000mg/L、L-亮氨酸 lmg/L-1000mg/L、L-赖氨酸盐酸盐 lmg/ L-1000mg/L、L_蛋氨酸 lmg/L-1000mg/L和维生素 B12的含量为0? 6mg/L_0. 7mg/L。维生素 B12起到促进细胞再生的作用，L-谷氨酰胺能提高培养基的抗氧化能力，L-亮氨酸能促进 培养基中糖类的代谢，L-赖氨酸盐酸盐促进培养基中蛋白质的代谢。
[0010] 所述配方还包括：L-苯丙氨酸lmg/L-1000mg/L、L-苏氨酸lmg/L-1000mg/L、L-色 氨酸 lmg/L-1000mg/L、L-酪氨酸二钠盐 lmg/L-1000mg/L、L-缴氨酸 lmg/L-1000mg/L和 D-泛酸钙0. 01mg/L-10mg/L。L-苏氨酸能促进细胞生长、提高免疫机能减少被病毒感染的 几率，L-色氨酸在培养基中起到抗氧化剂的作用，D-泛酸钙帮助细胞形成，控制脂肪代谢。
[0011] 所述配方还包括：氯化胆碱0? 01mg/L-10mg/L、叶酸0? 01mg/L-10mg/L、烟酰胺 0? 01mg/L-10mg/L、盐酸P比咳醛 0? 01mg/L-10mg/L、核黄素 0? 01mg/L-10mg/L、盐酸硫胺 0? 01mg/L-10mg/L和D-(+)_葡萄糖50mg/L-5000mg/L。氯化胆碱能增加培养基内细胞的数 量，叶酸和核黄素能促进细胞的分裂和再生，烟酰胺促进生物氧化过程和组织新陈代谢，盐 酸硫胺参与糖类的中间代谢。
[0012] 所述配方还包括：酸红0?lmg/L-200mg/L、胰岛素0?lmg/L-200mg/L、转铁蛋白 0?lmg/L-200mg/L、亚硒酸钠 0? 001mg/L-lmg/L、碳酸氢钠 100mg/L-10000mg/L、生物素 0? 003mg/L~0? 004mg/L和L-丙氨酸4mg/L~5mg/L。生物素促进脂肪和蛋白质正常代谢， L-丙氨酸为培养基提供养分，胰岛素促进糖原、脂肪和蛋白质合成，转铁蛋白生成成熟红细 胞。
[0013] 所述配方中还包括：偏钒酸钠0? 00001mg/L~0?Olmg/L、三氯化铝0?OOOOlmg/ L~0?Olmg/L、氯化锦 0? 0001mg/L~0?lmg/L、氯化钴 0? 0001mg/L~0?lmg/L和氯氧化错 0. 0001mg/L~0.lmg/L。偏钒酸钠、三氯化铝、氯化钴和氯氧化锆在培养基中起到催化剂的 作用。
[0014] 所述配方中余量为蒸馏水。
[0015] 作为一种优选方案，一种ST细胞培养基的配方如下：
[0016]
[0025]
[0026] 其中，D-(+)-葡萄糖别名为D-无水葡萄糖、D-葡糖、a-D-葡萄糖、D-(+)-葡萄 糖（无水）、右旋糖。
【具体实施方式】
[0027] 为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面进 一步阐述本发明。
[0028] -种ST细胞培养基，以终浓度计，配方如下：L-精氨酸盐酸盐lmg/L-1000mg/ L、2-疏基乙醇0?lmg/L-200mg/L、内消旋肌醇0? 01mg/L-10mg/L、一乙醇胺盐酸盐lmg/ L-1000mg/L、植物水解物 50mg/L-5000mg/L、4-轻乙基哌嗪乙磺酸 1000mg/L-4000mg/L、氯 化钠1000mg/L-7000mg/L和甘氨酸lmg/L-100mg/L。本发明通过采用植物水解物来培养 ST细胞，因为植物水解物中成分一致并且能减少ST细胞培养过程中产生的病毒，增大存活 率加快增殖速度。2-巯基乙醇在培养基中充当抗氧化剂，4-羟乙基哌嗪乙磺酸和甘氨酸 作为一种缓冲剂调节培养基中的PH值，氯化钠能维持培养基内渗透压的稳定。配方还包 括：L-精氨酸盐酸盐lmg/L-100mg/L、2-疏基乙醇0?lmg/L-100mg/L、内消旋肌醇0?Olmg/ L-lmg/L、一乙醇胺盐酸盐 100mg/L-1000mg/L、植物水解物 2000mg/L-5000mg/L、4-轻乙基 哌嗪乙磺酸 3000mg/L-4000mg/L、氯化钠 6000mg/L-7000mg/L、甘氨酸 10mg/L-20mg/L硫酸 镁lmg/L-1000mg/L、氯化钾 50mg/L-5000mg/L、磷酸钠lmg/L-1000mg/L、L-半胱氨酸盐酸盐 lmg/L-1000mg/L和胸苷0. 3mg/L-0. 4mg/L。本发明通过优化了部分数据使培养基成分更加 精确，硫酸镁能促进培养基中糖和蛋白质的代谢加快细胞增殖速度，氯化钾能调节培养基 中的电解质平衡，L-半胱氨酸盐酸盐在培养基中起到还原剂的作用，胸苷在培养基中充当 药物中间体。
[0029] 配方还包括：L-谷氨酰胺50mg/L-5000mg/L、L-组