一种用于抗原抗体反应体外诊断试剂的热稳定剂的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及体外诊断领域或生物技术领域，用于提高抗原抗体反应体外诊断试剂 热稳定性。
【背景技术】
[0002] 免疫检测是目前医疗卫生和生物科学研宄领域常用的诊断方法。免疫检测的核心 步骤为抗原-抗体间特异性的复合反应，通过复合反应产生检测信号，实现对溶液中抗体 或抗原性的定量。由于抗体分子能够识别非常有限的分子种类，因此免疫检测能够获得极 高的准确性。
[0003] 目前关于抗原抗体反应的体外诊断试剂的稳定性的报道都是针对2-10度保存条 件下的长期稳定性来评价稳定性。专利CN200610025351，CN101893619A等提到的改进胶乳 结合的抗原或抗体粒子稳定性的方法仅仅从4度保存条件下来评价稳定性；抗原抗体反应 的体外诊断试剂不仅仅包括胶乳增强的粒子方法的试剂，也包括普通的免疫比浊法试剂， 这些试剂的共同特点抗原或抗体在溶液中低温如2-8度会发生缓慢的沉淀、结构卷曲或变 构，导致抗原抗体反应失真，影响测定。特别在高于10度以上的环境或溶液环境不佳（比 如胶乳试剂中缓冲液pH不适合，造成抗体脱落，BSA浓度过高，表面活性剂浓度太高等置换 出交联的抗体），抗原或抗体在溶液中布朗运动加强，会导致反应灵敏度急剧下降，这种下 降是不可逆的，从而使得试剂失效。另外试剂盒在使用和实际运输环节不可能完全保证在4 度的环境中进行。因此研宄一种能够提高抗原抗体体外诊断试剂热稳定性方法非常必要。
【发明内容】
[0004] 本发明主要解决的技术问题是提供一种用于抗原抗体反应体外诊断试剂的热稳 定剂，提高抗原抗体体外诊断试剂的热稳定性。
[0005] 为了解决上述技术问题，本发明提供了一种用于抗原抗体反应体外诊断试剂的热 稳定剂，其特征在于，包含表面活性剂、封闭剂、防腐剂、缓冲液、稳定剂和无机盐。
[0006] 优选地，所述的表面活性剂为非离子表面活性剂。
[0007] 更优选地，所述的非离子表面活性剂为B66,每IL抗原抗体反应体外诊断试剂加 入非离子表面活性剂〇. 5-3ml。
[0008] 优选地，所述的封闭剂为多聚赖氨酸，每IL抗原抗体反应体外诊断试剂加入封闭 剂的量为2-5g。
[0009] 优选地，所述的防腐剂为PC300,每IL抗原抗体反应体外诊断试剂加入防腐剂的 量为l_5ml。
[0010] 优选地，所述的缓冲液为MES缓冲液，每IL抗原抗体反应体外诊断试剂加入缓冲 液的量为20-50mmol。
[0011] 优选地，所述的稳定剂为蔗糖，每IL抗原抗体反应体外诊断试剂加入稳定剂的量 为 5-10g。
[0012] 优选地，所述的无机盐为氯化钠，每IL抗原抗体反应体外诊断试剂加入无机盐的 量为 50-100mmol。
[0013] 优选地，所述的抗原抗体反应体外诊断试剂为胱抑素 C测定试剂、脂蛋白（a)测定 试剂、β 2-微球蛋白测定试剂或前白蛋白测定试剂。
[0014] 与现有技术相比，本发明的有益效果是：
[0015] 本发明可有效改善抗原抗体反应体外诊断试剂的热稳定性，可有效延长试剂盒的 保存时间。
【具体实施方式】
[0016] 下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明 而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人 员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定 的范围。
[0017] 实施例
[0018] 一种用于抗原抗体反应体外诊断试剂的热稳定剂，包含表面活性剂、封闭剂、防腐 剂、缓冲液、稳定剂和无机盐。所述的表面活性剂为Emu I gen Β66，所述的封闭剂为多聚赖氨 酸，所述的防腐剂为PC300,所述的缓冲液为MES缓冲液，该缓冲液为AMRESC0公司生产，溶 液的PH为6. 0 (25°C )，所述的稳定剂为蔗糖，所述的无机盐为氯化钠。
[0019] 按照常规方法制备胱抑素 C测定试剂、脂蛋白（a)测定试剂、β 2-微球蛋白测定 试剂和前白蛋白测定试剂，各试剂组成如下：
[0020] 胱抑素 C测定试剂组成：
[0021] Rl ：
[0022] Tris :50mmol/L
[0023] 氯化钠 ：50mmol/L
[0024] PEG2000 ：5g/L
[0025] R2 ：
[0026] 甘氨酸：10mmol/L
[0027] 羊抗人胱抑素 C抗体致敏胶乳：IOml/L
[0028] 脂蛋白（a)测定试剂组成
[0029] Rl ：
[0030] Tris :50mmol/L
[0031] 氯化钠：40mmol/L
[0032] PEG6000 ：5g/L
[0033] R2 ：
[0034] 甘氨酸：10mmol/L
[0035] 鼠抗人脂蛋白（a)抗体致敏胶乳：20ml/L
[0036] β 2-微球蛋白测定试剂组成
[0037] Rl ：
[0038] Tris ：40mmol/L
[0039] 氯化钠：3Ommol/L
[0040] PEG8000 ：5g/L
[0041] R2 ：
[0042] 甘氛酸：5mmol/L
[0043] 羊抗人β 2-微球蛋白抗体致敏胶乳：20ml/L
[0044] 前白蛋白测定试剂组成
[0045] Rl ：
[0046] Tris :50mmol/L
[0047] 氯化钠：50mmol/L
[0048] PEG2000 ：5g/L
[0049] R2 ：
[0050] 甘氨酸：10mmol/L
[0051] 羊抗人前白蛋白抗体：100ml/L
[0052] 将表面活性剂、封闭剂、防腐剂、缓冲液、稳定剂和无机盐加入到上述的各抗原抗 体反应体外诊断试剂的R2试剂中混匀即可得到试验试剂，每IL抗原抗体反应体外诊断试 剂的R2试剂加入非离子表面活性剂B661ml，每IL抗原抗体反应体外诊断试剂的R2试剂加 入封闭剂的量为5g。每IL抗原抗体反应体外诊断试剂的R2试剂加入防腐剂的量为lml。 每IL抗原抗体反应体外诊断试剂的R2试剂加入缓冲液的量为20mmol。每IL抗原抗体反 应体外诊断试剂的R2试剂加入稳定剂的量为5g。每IL抗原抗体反应体外诊断试剂的R2 试剂加入无机盐的量为50mmol。取未加入上述热稳定剂的各抗原抗体反应体外诊断试剂作 为对照试剂。
[0053] 将以上试验试剂和对照试剂分别在2_8°C、20°C、37°C三个温度下放置5天后测定 各试剂灵敏度、观察试剂的外观，以下是实验结果：
[0054] 胱抑素 C测定试剂（试验试剂）
[0055]
【主权项】
1. 一种用于抗原抗体反应体外诊断试剂的热稳定剂，其特征在于，包含表面活性剂、封 闭剂、防腐剂、缓冲液、稳定剂和无机盐。
2. 如权利要求1所述的用于抗原抗体反应体外诊断试剂的热稳定剂，其特征在于，所 述的表面活性剂为非离子表面活性剂。
3. 如权利要求2所述的用于抗原抗体反应体外诊断试剂的热稳定剂，其特征在于，所 述的非离子表面活性剂为B66,每IL抗原抗体反应体外诊断试剂加入非离子表面活性剂 0? 5_3ml 〇
4. 如权利要求1所述的用于抗原抗体反应体外诊断试剂的热稳定剂，其特征在于，所 述的封闭剂为多聚赖氨酸，每IL抗原抗体反应体外诊断试剂加入封闭剂的量为2-5g。
5. 如权利要求1所述的用于抗原抗体反应体外诊断试剂的热稳定剂，其特征在于，所 述的防腐剂为PC300,每IL抗原抗体反应体外诊断试剂加入防腐剂的量为l-5ml。
6. 如权利要求1所述的用于抗原抗体反应体外诊断试剂的热稳定剂，其特征在于，所 述的缓冲液为MES缓冲液，每IL抗原抗体反应体外诊断试剂加入缓冲液的量为20-50mmol。
7. 如权利要求1所述的用于抗原抗体反应体外诊断试剂的热稳定剂，其特征在于，所 述的稳定剂为鹿糖，每IL抗原抗体反应体外诊断试剂加入稳定剂的量为5-10g。
8. 如权利要求1所述的用于抗原抗体反应体外诊断试剂的热稳定剂，其特征在于，所 述的无机盐为氯化钠，每IL抗原抗体反应体外诊断试剂加入无机盐的量为50-100_〇1。
9. 如权利要求1所述的用于抗原抗体反应体外诊断试剂的热稳定剂，其特征在于，所 述的抗原抗体反应体外诊断试剂为胱抑素C测定试剂、脂蛋白a测定试剂、0 2-微球蛋白 测定试剂或前白蛋白测定试剂。
【专利摘要】本发明提供了一种用于抗原抗体反应体外诊断试剂的热稳定剂，其特征在于，包含表面活性剂、封闭剂、防腐剂、缓冲液、稳定剂和无机盐。本发明可有效改善抗原抗体反应体外诊断试剂的热稳定性，可有效延长试剂盒的保存时间。
【IPC分类】G01N33-53
【公开号】CN104807990
【申请号】CN201510239329
【发明人】孙先胜
【申请人】骏实生物科技(上海)有限公司
【公开日】2015年7月29日
【申请日】2015年5月12日