专利名称：纳米颗粒药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及纳米颗粒的一般用途，这种用于口服给药的纳米颗粒具有壳聚糖和带负电荷的基质以及至少一种生物活性剂的一种组合物、以及它们的增强的渗透性和耐酶性。
背景技术：
对于病人或一种受试动物来说口服进入被认为是最方便的给药方式。尽管如此，肠上皮是亲水性药物(如肽和蛋白质)吸收的主要屏障。这是因为亲水性药物不能够容易地跨细胞扩散通过脂质双分子层细胞膜。由位于相邻上皮细胞的腔表面的紧密连接的存在严格限制了亲水性分子经由细胞旁路的转运。这些紧密连接形成一种屏障，限制了亲水性分子的细胞旁扩散。溶质在细胞之间通过将细胞一起结合在一个层(例如胃肠道的上皮细胞)中的紧 密连接的移动，被称为细胞旁转运。紧密连接形成一种细胞间屏障，这种屏障将一个细胞层的顶端与基底外侧的流体腔分隔开。细胞旁转运是被动的，并且对于一种溶质来说它通过从顶端到基底外侧的腔的一种紧密连接的移动取决于该紧密连接的渗透性。聚合纳米材料已经被作为药物递送载体进行了广泛的研究。由合成的可生物降解聚合物(例如聚-e -己内酯和聚丙交酯)制成的纳米颗粒由于它们的生物相容性而备受关注。但是，这些纳米颗粒由于它们的疏水性对于亲水性药物不是理想的载体。在口服给药途径之后，蛋白质药物经在胃中的胃介质的低pH而易于降解。在口服给药之后的蛋白质药物的吸收由于它们的高分子量、亲水性、以及对酶钝化的敏感性是具有挑战性的。为了克服在胃肠道(GIT)内的酶屏障，口服肽类药物已经与蛋白酶抑制剂联合给药。虽然在短期内许多酶抑制剂与最小细胞毒性相关联，但是长期给药已经显示其干扰营养蛋白质的消化并且引起受激蛋白酶的分泌或胰腺肥大。在最好的情况下，在GIT中一种肽类药物分子与一种酶抑制剂之间的距离大约为几个微米。在联合给药时，当该肽类药物分子碰到在GIT中的蛋白酶时，蛋白酶抑制剂可能不在用作保护作用的非常接近之处，导致该酶抑制剂的降低的耐酶功效。壳聚糖(CS)，一种阳离子多糖，是无毒的并且是软组织相容的。另外，已知壳聚糖具有一种特殊的性质-粘附在粘膜表面(即粘膜粘附特性)、瞬时打开上皮细胞之间的连接、并且在接近于生理学范围的PH值下具有良好的可溶性，以释放有效负载。将肽或蛋白质药物(有效负载)载入一种在生理学PH范围的药物递送载体可以保留它们的生物活性。Thanou等人，报道了作为肠吸收增强剂的壳聚糖和其衍生物。当在酸性pH下被质子化时，壳聚糖能够提高肽类药物穿过粘膜上皮的细胞旁渗透性。发现在动物中壳聚糖或N-三甲基壳聚糖与肽类药物的联合给药与没有壳聚糖组分增强吸收的给药相比实质性地提高了这种肽的生物利用度。Y-PGA，一种阴离子肽，是通过杆菌属的成员产生的作为荚膜物质或作为粘液的一种天然化合物。Y -PGA是独特的，它是由通过酰胺键连接在一起的天然存在的L-谷氨酸组成的。据报道这种天然存在的Y-PGA是一种水溶性的、生物可降解的、并且无毒的聚合物。一种聚氨基羧酸(氨羧络合剂)，例如二亚乙基三胺五乙酸，已经显示出耐酶特性。临床上有益的是将有待使用的作为一种带负电荷的基质的PGA-氨羧络合剂结合物与作为一种带正电荷的基质的壳聚糖结合在纳米颗粒制剂中，以用于口服给药时增强吸收性能并且降低酶的作用。
发明内容
技术问题 为了被吸收，在口服给药之后的一种肽类药物将必然沿着胃肠道(GIT)运送、通过粘膜/糖萼层以穿过肠上皮进入门静脉并且最终排入全身血液循环中。大多数肽类药物对于被存在于胃肠液中和粘膜/糖萼层中的消化酶的降解是敏感的。一般而言，在胃肠道中在吸收的过程中极少有肽类药物能够抵抗酶的攻击(onslaught)。可以经由一种封装这两种物质的胶囊来完成一种耐酶化合物(例如，一种蛋白酶抑制剂)与一种生物活性药物(例如，一种肽类药物)向一种受试动物的联合给药。但是，由于接近限制(在GIT中的酶的存在下耐酶化合物和生物活性药物可以相距几微米或几毫米)；酶抑制作用将被严重损害。问题解决方案因此，本发明的一个目的是提供一种具有朝向感兴趣的药物非常接近的耐酶化合物的口服给药系统，以保护该药物在GIT中免受酶攻击。本发明的一些方面提供了一种纳米颗粒药物组合物，这些纳米颗粒包括由带正电荷的壳聚糖为主导的外壳部分以及核心部分，该核心部分包括一种带正电荷的壳聚糖、一种PGA-氨羧络合剂结合物的带负电荷的基质、至少一种载入纳米颗粒之内的生物活性剂、以及可任选的一种零电荷化合物。在一个实施方案中，该非常接近定义为在小于I微米的纳米范围之内。在另一个实施方案中，该PGA氨羧络合剂结合物的带负电荷的基质是该纳米颗粒系统中的耐酶化合物。本发明的一方面提供了一种新颖、独特的纳米颗粒系统，该系统用于通过使用一种简单且温和的离子凝胶作用的方法将蛋白质/肽类药物或生物活性剂递送至一种受试动物，该方法在于将一种聚-Y-谷氨酸(Y-PGA)溶液(或其他带负电荷的组分，例如PGA-氨羧络合剂结合物)添加到壳聚糖溶液中。在一个实施方案中，采用的壳聚糖是N-三甲基壳聚糖(TMC)、低分子量壳聚糖、EDTA壳聚糖、壳聚糖衍生物、和/或它们的组合。在一个实施方案中，本发明的CS的分子量大约为SOkDa或更小，适合于在维持蛋白质和肽类药物的生物活性的一个PH时的充分可溶性。规定一种低分子量壳聚糖颗粒是肾惰性的。制备的纳米颗粒的粒径和(电位值是由构成它们的组合物所控制。经TEM(透射电子显微镜检查)以及AFM(原子力显微镜检查)检查获得的结果表明，这种制备的纳米颗粒的形态是大致球形或类似球体的形状。可以经由口服给药和肠胃外给药(例如鼻内吸收)、皮下注射或注射到血管中来给予纳米颗粒。在一个实施方案中，壳聚糖作为外壳基质在这种纳米颗粒表面上占主导地位，并且这种纳米颗粒表面的实质性部分具有正电荷特征。在核心部分中，带负电荷的Y-PGA或其他适合的带负电荷的组分(例如PGA-氨羧络合试剂结合物)与带正电荷的壳聚糖以静电方式相互作用。在一个实施方案中，在核心部分中基本上所有的带负电荷的核心基质与带正电荷的基质的一部分结合或以静电方式相互作用从而维持基本上零电荷(中性)的核心。在一个进一步的实施方案中，这种纳米颗粒具有在大约50与400纳米之间的平均粒径，优选地在大约100与300纳米之间，并且最优选地在大约100与200纳米之间。由于该耐酶PGA-氨羧络合剂以及该生物活性剂两者均被封装在一种纳米颗粒中，它们的距离总是在纳米范围内。在一个实施方案中，这种包含生物活性剂的纳米颗粒进一步地包括至少一种渗透促进剂，其中该渗透促进剂既不涉及纳米颗粒的基本配方，也不涉及纳米颗粒结构的静电网络形成。该渗透促进剂可以选自下组，该组由以下各项组成螯合剂、胆汁盐、阴离子表面活性剂、中链脂肪酸、磷酸酯、等等。在另一个实施方案中，这种纳米颗粒和一种渗透促进剂 被联合载入一种胶囊中或被分别封装在两组胶囊中以用于联合给药。在一个实施方案中，用于治疗阿尔茨海默病的方法包括将具有用于治疗阿尔茨海默病的至少一种生物活性剂的纳米颗粒以大约每天IOmg至40mg的有效量施用给病人持续一个月至一年或更长的时期。在另一个实施方案中，该外壳基质的至少一部分是交联的，优选地处于小于50%的交联度，或最优选地在大约1%与20%之间。本发明的一方面提供了一种纳米颗粒药物组合物，其中该纳米颗粒可以是冻干的以形成固体的干燥的纳米颗粒。这种干燥的纳米颗粒可以载入一种胶囊、一种片剂、一种丸齐U、一种咀嚼块、或任何方便的药物递送载体中以用于在一种受试动物中口服给药，其中胶囊可以用一种肠溶包衣进一步地处理。这种冻干的纳米颗粒可以被再水合到一种溶液中或通过接触体液从而恢复成带有正表面电荷并具有与那些冻干前的纳米颗粒相同的物理和生化特性的湿的纳米颗粒。在一个实施方案中，在一个冻干过程中纳米颗粒可以与海藻糖或与I, 2, 3,4, 5,6-己六醇(hexan-1, 2, 3,4, 5,6-hexol)相混合。在一个实施方案中，将胶囊内表面处理成亲脂的或疏水的。在另一个实施方案中，该胶囊的外表面是肠溶包衣的或用一种肠溶包衣聚合物处理的。本发明的某些方面提供了一种用于在一种受试动物中口服给药的耐酶纳米颗粒药物组合物，这些纳米颗粒包括由带正电荷的壳聚糖为主导的外壳部分和核心部分，该核心部分含有带负电荷的PGA-氨羧络合剂结合物基质，其中在该核心部分中该带负电荷的基质至少部分地与一部分所述带正电荷的壳聚糖中和，并且至少一种生物活性剂被载入这些纳米颗粒之内。在一个实施方案中，该PGA-氨羧络合剂具有耐酶性。在一个实施方案中，本发明的药物组合物的纳米颗粒表面具有一种正表面电荷特征，其中这些纳米颗粒具有一种从大约+5mV至大约+75mV、优选地从大约+15mV至大约+50mV的表面电荷。在一个进一步的实施方案中，这些纳米颗粒是处于一种冻干粉的形式。在一个实施方案中，本发明的药物组合物的纳米颗粒进一步包括铁、锌、钙、硫酸镁以及TPP。本发明的一些方面提供了一种降低在受试动物中由肿瘤坏死因子引起的炎症应答的方法，该方法包括口服给予由一种TNF抑制剂、壳聚糖、以及一种PGA-氨羧络合剂结合物的核心基质组成的纳米颗粒。在一个实施方案中，该TNF抑制剂是一种单克隆抗体。在另一个实施方案中，该TNF抑制剂是英利昔单抗或阿达木单抗。在一个实施方案中，该TNF抑制剂是一种循环受体融合蛋白。在另一个实施方案中，该TNF抑制剂是依那西普。本发明的一些方面提供了将具有增强的耐酶性的生物活性纳米颗粒连同在生物活性纳米颗粒内部的生物活性剂给予受试者，其中这些纳米颗粒包括由带正电荷的壳聚糖占主导的外壳部分和核心部分,该核心部分含有至少一种耐酶剂和带负电荷的基质,其中该带负电荷的基质至少部分地与一部分带正电荷的壳聚糖中和。在一个实施方案中，该耐酶剂是氨羧络合剂，例如二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)或乙二胺四乙酸(EDTA)，在纳米颗粒的制造中该氨羧络合剂可以与壳聚糖基质或PGA基质结合。本发明的一些方面提供了一种纳米颗粒药物组合物，这些纳米颗粒包括由带正电荷的壳聚糖为主导的外壳部分和核心部分，该核心部分包含一种带负电荷的基质，其中该基质是PGA-氨羧络合剂结合物，其中在核心部分中该带负电荷的基质至少部分地与一部分该带正电荷的壳聚糖中和，并且至少一种生物活性剂被载入这些纳米颗粒之内。在一个实施方案中，纳米颗粒的该药物组合物进一步包括一种药学上可接受的载体、稀释剂、赋形齐U、或其他惰性添加剂。 在一个实施方案中，这些纳米颗粒被封装入一种胶囊中，其中该胶囊进一步包括至少一种增溶剂、发泡剂、乳化剂、药典上的赋形剂或至少一种渗透促进剂。在另一个实施方案中，这些纳米颗粒是冻干的，由此这些纳米颗粒是处于一种粉末形式。发明的有益效果本发明的纳米颗粒为将一种耐酶化合物(例如，PGA-氨羧络合剂结合物)和一种生物活性药物(例如，一种肽类药物)联合给予一种受试动物提供了有益的手段，其中该PGA-氨羧络合剂结合物与该生物活性剂通常在纳米距离之内以在充满酶的GIT中提供它的耐酶保护作用。
当参考附图阅读时，根据实施方案的说明，本发明的另外的目的和特征将变得更清楚并且其披露本身将得以最好地理解。图I显示了(a)制备的CS- y -PGA纳米颗粒的TEM显微照片(0. 10 % y -PGA 0. 20% CS)以及(b)制备的CS-Y-PGA纳米颗粒的AFM显微照片(0.01% y-PGA0. 01%CS)。图2显示了制备的CS- y -PGA纳米颗粒对Caco-2细胞单层的TEER值的影响。图3显示了具有正表面电荷的用FITC标记的壳聚糖的一种粒。图4显示了在糖尿病大鼠中血浆胰岛素含量对口服给药的载胰岛素纳米颗粒的时间，其中这些冻干的纳米颗粒在递送时被载入一种肠溶包衣胶囊中。图5显示了基于用(Y-PGA)-DTPA结合物的关于酶抑制研究的实验数据。
具体实施例方式以下所述的本发明的优选实施方案具体地涉及由壳聚糖/PGA-氨羧络合剂/胰岛素组成的纳米颗粒的制备、以及它们通过打开上皮细胞之间的紧密连接来增强肠的或血脑的细胞旁渗透的渗透性。虽然该说明书提出了不同的实施方案的具体细节，应当理解的是该说明书仅仅是说明性的并且不应当以任何方式被解释为对本发明进行限制。此外，本发明的不同应用、以及可以由那些本领域的技术人员想到的另外的修改，也被包括在下文所述的一般概念中。在此“生物活性剂”表示包括在给药之后以一种积极或消极方式在物理、生理、心理、生物化学、生物学、或其他躯体功能上可以影响接受者(一种受试动物)的任何试齐U。该“生物活性剂”可以包括，但不限于，药物、蛋白质、肽、siRNA、酶、补充营养素、维生素、其他活性剂。在一个实施方案中，该生物活性剂选自下组，该组由以下各项组成蛋白质、肽、核苷、核苷酸、抗病毒剂、抗肿瘤剂、抗生素、富氧剂(oxygen-enriching agent)、含氧剂(oxygen-containing agent)、抗癫痫药、以及抗炎药。该抗癫痫药可以包括纽诺汀(Neurontin)(加巴喷丁(gabapentin),—种Y -氨酪酸类似物)、利必通(Lamictal)(拉莫三嗪(Iamotrigine)，显示其作用于电压敏感性钠通道，稳定神经膜并且抑制兴奋神经递质的释放)、Febatol (非尔氨酯(felbamate),显示其对GABA受体结合位点具有弱的抑制作用)、妥泰(Topamax)(托卩比酯(topiramate),具有衍生自D-果糖的一种新颖的化学结构，其阻断电压敏感性钠通道，增强一种抑制性神经递质-GABA的活性，并且阻断一种兴奋神 经递质-谷氨酸盐的作用)、和/或Cerebyx(磷苯妥英(fosphenytoin),在肠胃外给药之后可被迅速转化的一种苯妥英前体)。进一步地，该生物活性剂可以选自下组，该组由以下各项组成降钙素、环胞素、胰岛素、催产素、酪氨酸、脑啡肽、促甲状腺激素释放激素(tyrotropinreleasing hormone)、促卵泡激素、促黄体激素、加压素以及加压素类似物、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、白细胞介素-11、干扰素、集落刺激因子、肿瘤坏死因子、肿瘤坏死因子抑制剂、以及黑素细胞刺激激素。白细胞介素Il(IL-Il)是一种促血小板生成的生长因子，该生长因子可以直接刺激造血干细胞以及巨核细胞祖细胞的增殖，并且诱导巨核细胞成熟导致血小板的产生增多(奥普瑞白介素 )。在一个优选实施方案中，该生物活性剂是一种阿尔茨海默拮抗剂或疫苗。用于治疗阿尔茨海默病的生物活性剂可以包括盐酸美金刚(Merz制药的Axura )、盐酸多奈哌齐(卫材有限公司(Eisai Co. Ltd.)的安理申(Aricepl. ))、酒石酸利伐斯的明(诺华的艾斯能(Exelon ))、盐酸加兰他敏(Johnson &Johnson的Reminyl )、或他克林(帕克-戴维斯(Parke Davis)的他克林(Cognex ))。在一个实施方案中，该生物活性剂可以选自下组，该组由以下各项以一种药学上的有效量组成硫酸软骨素、透明质酸、生长因子以及蛋白质。在一个进一步的实施方案中，该至少一种生物活性剂是胰岛素或胰岛素类似物。在再另一个实施方案中，该至少一种生物活性剂选自下组，该组由以下各项组成一种胰岛素增敏剂、一种胰岛素促分泌剂、一种类似物、GLP-2、GLP-2类似物、一种二肽基肽酶4抑制剂(DPP-4抑制剂)、艾塞那肽、利拉鲁肽、阿必鲁肽(albiglutide)、他司鲁泰(taspoglutide)、a -葡糖苷酶抑制剂、淀粉不溶素类似物、钠-葡萄糖协同转运蛋白2型(SGLT2)抑制剂、苯氟雷司、以及托瑞司他。在一个进一步的实施方案中，该含胰岛素的纳米颗粒包括一种痕量的锌或钙，或用一种肠溶包衣处理。在一个实施方案中，该生物活性剂是非胰岛素的艾塞那肽，一种非胰岛素的普兰林肽、胰岛素、胰岛素类似物、或它们的组合。本发明的该生物活性剂也可以选自下组，该组由以下各项组成催产素、加压素、促肾上腺皮质激素、催乳素、促黄体素释放素或促黄体生成激素释放激素、生长激素、生长激素释放因子、生长抑素、胰高血糖素、干扰素、胃泌素、四肽胃泌素、五肽胃泌素、尿抑胃素(urogastooine)、胰泌素、降钙素、脑啡肽类、内啡肽类、血管紧张素类、肾素、缓激肽、杆菌肽、多粘菌素、粘菌素、短杆菌肽、以及合成类似物、改性物以及它们的药理学上的活性片段、单克隆抗体类以及可溶性疫苗。生长激素(GH)是一种在人和其他动物中刺激生长和细胞繁殖的肽类激素。它是有191个氨基酸的单链多肽激素，是由在垂体前叶侧翼内的体促素细胞合成、贮存、以及分泌。促生长素(somatotrophin)是指在动物体内产生的生长激素，术语生长激素(somatropin)是指通过重组DNA技术产生的生长激素，并且对于人类缩写为 “rhGH”。在一个进一步的实施方案中，该生物活性剂选自下组，该组由以下各项组成蛋白质、肽、核苷、核苷酸、抗病毒剂、抗肿瘤药剂、抗生素、抗癫痫药、以及抗炎药。在一个进一步的实施方案中，该生物活性剂可以选自下组，该组由以下各项组成降钙素、环胞素、胰岛素、催产素、酪氨酸、脑啡肽、促甲状腺激素释放激素(TRH)、促卵泡激素(FSH)、促黄体激素 (LH)、加压素以及加压素类似物、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、白细胞介素-II (IL2)、白细胞介素-11 (IL-Il)、干扰素、集落刺激因子(CSF)、肿瘤坏死因子(TNF)以及黑素细胞刺激激素。在一个进一步的实施方案中，该生物活性剂是一种阿尔茨海默拮抗剂。在一个实施方案中，该抗癫痫药可以包括纽诺汀(Neurontin)(加巴喷丁(gabapentin))、利必通(Lamictal)(拉莫三嗪(Iamotrigine))、Febatol (非尔氨酯(felbamate))、妥泰(Topamax)(托卩比酯(topiramate))、Cerebyx(憐苯妥英(fosphenytoin))、狄兰汀(Dilantin)(苯妥英(phenytoin))、德巴金(Depakene)(丙戍酸)、得理多(Tegretol)(卡马西平(carbamazepine))、卡马西平环氧化物、Vimpat (拉科酰胺(Iacosamide))以及苯巴比妥(phenobarbitol)。磷苯妥英(帕克-戴维斯(Parke-Davis)的磷苯妥英制剂(Cerebyx);辉瑞制药有限公司(Pfizer Holding France)的Prodilantin)是一种水溶性的苯妥英药物前体，仅在医院中使用通过肠胃外递送用于对癫痫发作的治疗。磷苯妥英具有系统(IUPAC)名称为(2，5-二氧-4，4-联苯-咪唑烷-I-基)甲氧基膦酸。它的化学式为C16H15N2O6P,具有362. 274g/mol的分子质量。实例I :材料和CS- Y -PGA纳米颗粒的制备具有相对低分子量(大约80kDa或更低)的壳聚糖可以容易地溶解于pH 6. 0的水溶液中，然而在解聚作用之前该壳聚糖需要溶于一种其pH值大约为4. 0的醋酸溶液中。作为一个实例，紧接着将一种0. 10%的Y -PGA水溶液添加入该低分子量CS溶液中(粘度1.29±0. 02cp)，形成具有平均粒径为218. I ±4. lnm、具有多分散性指数为0. 3 (n = 5)的纳米颗粒。通过在室温下使用一种移液管(0. 5-5ml, PLASTI BRAND" BrandTech科学公司，德国)将Y-PGA水溶液(pH 7.4,2ml)以不同的浓度(按w/v计0. 01 %、0. 05 %、0. 10%,0. 15%、或0.20% )在磁力搅拌下添加入到一种低分子量CS水溶液(pH 6.0,10ml)中而获得纳米颗粒。通过38，OOOrpm超速离心I小时收集纳米颗粒。弃去上清液并且在去离子水中再悬浮纳米颗粒以用于进一步的研究。如此通过在此所述的简单且温和的离子-凝胶作用的方法获得的这些纳米颗粒显示出典型的特征具有在大约50至400nm之间的粒径的类似球体的构型、正表面电荷以及窄的多分散性指数。如在此所披露的，该纳米颗粒制剂中的Y -PGA可以用PGA-氨羧络合剂代替。在不同的Y -PGA和CS浓度下制备的CS- y -PGA纳米颗粒的粒径和;电位值被确定，并且结果显示在表Ia和Ib中。发现制备的纳米颗粒的粒径和(电位值主要是通过在添加溶液中Y-PGA的局部浓度对于在下沉溶液(sinksolution)中的CS的周围浓度的相对量来确定的。在一个固定的CS浓度，Y-PGA浓度的增加允许Y-PGA分子与更多CS分子相互作用，并且因此形成一种更大尺寸的纳米颗粒(表la，p <0.05)。当CS分子的量超过局部Y -PGA分子的量时，一些多余的CS分子缠结在CS- y -PGA纳米颗粒的表面上。因此，形成的纳米颗粒可以表现出一种以中性聚合电介质-络合物为核心、该核心被一种带正电荷的CS外壳(表Ib)包围的结构，该结构确保了胶体的稳定性。相反，当局部Y-PGA分子的量足以超过环境中的CS分子的量时，形成的纳米颗粒具有暴露在表面的Y-PGA并且因此具有;电位的负电荷。因此，制备的CS-Y-PGA纳米颗粒的粒径和;电位值可以由构成它们的组合物所控制。由TEM和AFM检查得到的结果显示，所制备的纳·米颗粒在形状上是具有一种平滑表面的球形(图Ia和Ib)。在任何2. 5与6. 6之间的pH时，这些纳米颗粒在形状上是具有一种平滑表面的球形。在一个实施方案中，在大约2. 5的pH时，当暴露在胃中的酸性介质时，本发明的纳米颗粒的稳定性可以使这种纳米颗粒能够保持完整。在一个进一步的研究中，只要在室温下将一种水性Y -PGA在磁力搅拌下加入到一种水性TMC (N-三甲基壳聚糖)(具有6 : I的TMC/ y -PGA重量比)，纳米颗粒(NPs)立即自组装。壳聚糖和N-三甲基壳聚糖的化学式如下所示
I* HOH2C
H(> -*HjC ■
Mif,3/ \ CMm
LCh3 -J *壳聚糖TMC带正电荷的TMC的量远远超过带负电荷的Y -PGA的量；一些多余的TMC分子缠结在纳米颗粒的表面上，因此表现出一种正表面电荷(表2)。TMC季铵化程度几乎不影响纳米颗粒的平均粒径和(电位。表 Iay -PGA和CS的浓度对制备的CS- y -PGA纳米颗粒的粒径的影响
权利要求
1.一种纳米颗粒药物组合物，所述纳米颗粒包括由带正电荷的壳聚糖为主导的外壳部分和核心部分，该核心部分包含一种PGA-氨羧络合剂结合物的带负电荷的基质，其中在该核心部分中所述带负电荷的基质至少部分地与一部分所述带正电荷的壳聚糖中和，并且至少一种生物活性剂被载入所述纳米颗粒中。
2.如权利要求I所述的药物组合物，其中所述纳米颗粒具有在大约50纳米与400纳米之间的平均粒径。
3.如权利要求I所述的药物组合物，其中所述壳聚糖是N-三甲基壳聚糖、EDTA-壳聚糖、低分子量壳聚糖、壳聚糖衍生物、或它们的组合。
4.如权利要求I所述的药物组合物，其中所述纳米颗粒是通过一种简单且温和的离子-凝胶工艺形成的。
5.如权利要求I所述的药物组合物，其中所述纳米颗粒可以被配制为一种片剂、丸剂或咀嚼块构型。
6.如权利要求5所述的药物组合物，其中所述片剂或丸剂用一种肠溶包衣进行处理。
7.如权利要求I所述的药物组合物，其中所述纳米颗粒被封装入胶囊中。
8.如权利要求7所述的药物组合物，其中所述胶囊进一步包括一种药学上可接受的载体、稀释剂、或赋形剂。
9.如权利要求7所述的药物组合物，其中所述胶囊进一步包括至少一种增溶剂、发泡齐U、或乳化剂。
10.如权利要求7所述的药物组合物，其中将所述胶囊用一种肠溶包衣进行处理。
11.如权利要求7所述的药物组合物，其中所述胶囊进一步包括至少一种渗透促进剂。
12.如权利要求11所述的药物组合物，其中所述渗透促进剂选自下组，该组由以下各项组成螯合剂、胆汁盐、阴离子表面活性剂、中链脂肪酸、磷酸酯、壳聚糖、以及壳聚糖衍生物。
13.如权利要求I所述的药物组合物，其中所述氨羧络合试剂选自下组，该组由以下各项组成=DTPA (二亚乙基三胺五乙酸)、EDTA (乙二胺四乙酸)、IDA (亚氨基二乙酸)、NTA (次氮基三乙酸)、EGTA(乙二醇四乙酸)、BAPTA(1，2-双(0-胺基苯氧基)乙烷-N，N，N'，N'-四乙酸)、0(7^(1，4，7，10-四氮杂环十二烷州州'，N，N'-四乙酸)、以及NOTA(2，2' ,2" _(I，4, 7-二氣杂环壬烧-1,4, 7_ 二基)二乙酸)。
14.如权利要求11所述的药物组合物，其中所述至少一种生物活性剂选自下组，该组由以下各项组成蛋白质、肽、胰岛素、胰岛素类似物、GLP-U GLP-I类似物、一种胰岛素增敏剂、一种胰岛素促分泌剂、GLP-2、GLP-2类似物、一种二肽基肽酶4抑制剂(DPP-4抑制齐Li)、艾塞那肽、利拉鲁肽、阿必鲁肽(albiglutide)、他司鲁肽(taspoglutide)、a -葡糖苷酶抑制剂、淀粉不溶素类似物、钠-葡萄糖协同转运蛋白2型(SGLT2)抑制剂、苯氟雷司、以及托瑞司他。
15.如权利要求I所述的药物组合物，其中所述纳米颗粒是冻干的，由此所述纳米颗粒是处于一种粉末的形式。
16.如权利要求I所述的药物组合物，其中所述纳米颗粒与海藻糖混合然后冻干，由此所述纳米颗粒处于一种粉末的形式。
17.如权利要求I所述的药物组合物，其中所述纳米颗粒进一步包括锌、硫酸镁、或三聚磷酸钠(TPP)。
18.如权利要求I所述的药物组合物，其中所述纳米颗粒用一种肠溶包衣进行处理。
19.如权利要求I所述的药物组合物，其中在PGA-氨羧络合剂结合物中的所述PGA是Y-PGA, a -PGA、PGA的衍生物、或PGA的盐。
20.如权利要求I所述的药物组合物，其中所述纳米颗粒进一步包括至少一种渗透促进剂。
全文摘要
本发明披露了一种用于口服递送的由壳聚糖、耐酶PGA-氨羧络合剂、以及一种生物活性剂组成的生物活性纳米颗粒药物组合物。这种用于口服给药的基于壳聚糖的纳米颗粒具有正表面电荷、增强的渗透性、以及在GIT中耐酶性的特征。
文档编号A01N25/08GK102970864SQ201180020056
公开日2013年3月13日 申请日期2011年1月31日 优先权日2010年4月21日
发明者凃和生, 宋信文 申请人:那挪玛加医药有限公司