利用甲基营养型芽孢杆菌nkg-1实施的植物抑菌方法
【技术领域】
[0001 ]本发明涉及一种利用甲基营养型芽孢杆菌NKG-1实施的植物抑菌方法，具体涉及 一种利用甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus strain NKG-1)实施的植物 抑菌方法，能够有效抑制病原菌的侵染。
【背景技术】
[0002] 植物病害会给农业生产造成严重的经济损失，目前通常会对植物各个生长阶段施 加农药防治病虫害，其中施加的主要是化学农药，具有施肥方便、见效快等特点。但是长期 大量施用化学农药导致农药残留及环境污染，最终危害人类健康并破坏生态平衡，同时也 使病原菌对各种化学杀菌剂产生了严重的抗药性。利用活体微生物进行生物防治因其对环 境、生态及人类健康安全、无毒等优点得到了世界各国的广泛重视并发挥着越来越重要的 作用。
[0003] 芽孢杆菌是一种广泛分布于各种不同生活环境中的腐生细菌，是一群好氧兼厌氧 的产芽孢革兰氏阳性杆菌的总称。芽孢杆菌属的细菌具有生长速度快、营养需求简单、有较 强的耐热性及抗逆性;利于生防菌剂的生产和剂型加工，也利于其在环境中的存活、定殖与 繁殖。此外，还具有在植物表面易于存活与繁殖、对人畜无害、不污染环境、制剂稳定、施用 方便等优势而备受瞩目。不仅符合人们对绿色食品的需求，而且为农业的可持续发展提供 了保障。芽孢杆菌作为一种理想的生防微生物，逐渐成为近年来研究的热点并越来越引起 人们重视。目前，用于防治植物病害的芽孢杆菌主要有枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis)、侧抱芽抱杆菌(Bacillus laterosporus)、錯样芽抱杆菌(Bacillus cereus)、 地衣芽抱杆菌（Bacillus licheniformis)、苏云金芽抱杆菌（Bacillus thuringiensis)、 多粘类芽抱杆菌(Bacillus polymyxa)、短小芽抱杆菌(Bacillus pumilus)等。
[0004] 由于芽孢杆菌既具有广阔的开发应用前景，开发新筛选的未定种的芽孢杆菌及对 新菌株的拮抗功能和抑菌作用进行鉴定是具有非常重要的意义的。
【发明内容】
[0005] 针对现有技术中存在的需求，本发明的目的在于提供一种利用甲基营养型芽孢杆 菌(Bacillus methylotrophicus strain NKG-1)实施的植物抑菌方法，能够抑制多种病原 真菌和细菌的侵染，具有很好的防治效果，因此具有良好的应用前景。
[0006] 为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
[0007] 本发明所利用的甲基营养型芽抱杆菌（Bacillus methylotrophicus strain NKG-1)，所述甲基营养型芽孢杆菌NKG-1保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生 物中心，保藏号码是CGMCC12055,保藏日期是2016年1月15日。
[0008] 利用甲基营养型芽抱杆菌(Bacillus methylotrophicus strain NKG-1)实施的 植物抑菌方法，使用所述甲基营养型芽孢杆菌NKG-1的菌液制备成生物杀菌剂，使用制得的 甲基营养型芽孢杆菌NKG-1生物杀菌剂在植物生长期进行施药处理，抑制病原菌的侵染。
[0009] 进一步，所述病原菌引起的植物病害为番茄灰霉病、苹果轮纹病、苹果腐烂病、葡 萄黑腐病、稻瘟病、辣椒炭疽病、黄瓜炭疽病、桃根霉软腐病、小麦赤霉病、小麦纹枯病、棉花 枯萎病、番茄叶霉病、芦笋茎腐病、玉米小斑病、烟草赤星病、棉苗疫病、花生青枯病或棉花 角斑病。
[0010] 进一步，所述病原菌为灰葡萄孢菌、葡萄座腔菌、黑腐皮壳菌、葡萄球座菌、稻巨座 壳菌、辣椒炭疽菌、萌芦科刺盘孢菌、匍枝根霉菌、禾谷镰孢菌、禾谷丝核菌、尖镰孢菌、褐孢 霉菌、天门冬拟茎点霉菌、玉蜀黍平脐蠕孢菌、链格孢菌、卵菌门疫霉菌、青枯假单胞杆菌或 地毯草单胞菌锦葵变种。
[0011] 进一步，所述植物为葡萄，所述病原菌为葡萄球座菌，在葡萄树新芽长出6-10英 寸、开花前3-5d、开花后、开花后10-14d施药1次，之后每隔15d施药1次，共计9-10次。
[0012] 进一步，所述植物为芦笋，所述病原菌为天门冬拟茎点霉菌，在芦笋抽芽前期、芦 笋抽生期、正常生长期内间隔5-10d施药1次，共计施药8次;对初发少量轻病株，采用幼茎涂 药浆的方法。
[0013] 进一步，所述甲基营养型芽孢杆菌NKG-1生物杀菌剂是将菌液稀释制得的液剂，或 将菌液制备成可湿性粉剂再稀释制得的液剂，或将菌液制备成的药浆。
[0014] 进一步，所述甲基营养型芽孢杆菌NKG-1的菌液稀释倍数为400、500、600或800倍， 稀释倍数为稀释剂与甲基营养型芽孢杆菌NKG-1菌液的体积比；
[0015] 所述甲基营养型芽孢杆菌NKG-1的可湿性粉剂稀释倍数为400、500、600或800倍， 稀释倍数为稀释剂与甲基营养型芽孢杆菌NKG-1可湿性粉剂的质量比；
[0016] 所述药浆为甲基营养型芽孢杆菌NKG-1的菌液100-200倍液混合面粉制得，稀释倍 数为稀释剂与甲基营养型芽孢杆菌NKG-1菌液的体积比，所述面粉与菌液100-200倍液的混 合比例为质量比1:3-4。
[0017] 进一步，所述甲基营养型芽孢杆菌NKG-1的菌液浓度为1 X (106-109)cfu/mL。
[0018] 进一步，所述甲基营养型芽孢杆菌NKG-1的菌液浓度为IX 107cfu/mL。
[0019] 本发明利用甲基营养型芽抱杆菌（Bacillus methylotrophicus strain NKG-1) 实施的植物抑菌方法具有以下优点：
[0020] 利用甲基营养型芽孢杆菌NKG-1的菌液制得的生物杀菌剂对灰葡萄孢菌、葡萄座 腔菌、黑腐皮壳菌、葡萄球座菌、稻巨座壳菌、辣椒炭疽菌、萌芦科刺盘孢菌、匍枝根霉菌、禾 谷镰孢菌、禾谷丝核菌、尖镰孢菌、褐孢霉菌、天门冬拟茎点霉菌、玉蜀黍平脐蠕孢菌、链格 孢菌、卵菌门疫霉菌、青枯假单胞杆菌、地毯草单胞菌锦葵变种等都有明显的抑制作用，能 够有效治疗这些病原菌引起的相应病害。
[0021 ]本发明属于生物防治，对环境无污染，没有农药残留，不会破坏生态平衡。
【附图说明】
[0022]图1为甲基营养型芽孢杆菌NKG-1的电子显微镜扫描图片（ΙΟμπι级别）；
[0023]图2为甲基营养型芽孢杆菌NKG-1的电子显微镜扫描图片(2μπι级别）；
[0024]图3为甲基营养型芽孢杆菌NKG-1的电子显微镜扫描图片（Ιμπι级别）；
[0025]图4为甲基营养型芽孢杆菌NKG-1对禾谷丝核菌的抑菌实验效果照片；
[0026]图5为甲基营养型芽孢杆菌NKG-1对辣椒炭疽菌的抑菌实验效果照片；
[0027] 图6为甲基营养型芽孢杆菌NKG-1对黑腐皮壳菌的抑菌实验效果照片；
[0028] 图7为甲基营养型芽孢杆菌NKG-1对尖镰孢菌的抑菌实验效果照片；
[0029] 图8为甲基营养型芽孢杆菌NKG-1对稻巨座壳菌的抑菌实验效果照片；
[0030] 图9为甲基营养型芽孢杆菌NKG-1对禾谷镰孢菌的抑菌实验效果照片；
[0031] 图10为甲基营养型芽孢杆菌NKG-1对葡萄球座菌的抑菌实验效果照片；
[0032] 图11为甲基营养型芽孢杆菌NKG-1对萌芦科刺盘孢菌的抑菌实验效果照片；
[0033]图12为甲基营养型芽孢杆菌NKG-1对卵菌门疫霉菌的抑菌实验效果照片；
[0034] 图13为甲基营养型芽孢杆菌NKG-1对葡萄座腔菌的抑菌实验效果照片；
[0035] 图14为甲基营养型芽孢杆菌NKG-1对链格孢菌的抑菌实验效果照片；
[0036] 图15为甲基营养型芽孢杆菌NKG-1对灰葡萄孢菌的抑菌实验效果照片；
[0037]图16为甲基营养型芽孢杆菌NKG-1对玉蜀黍平脐蠕孢菌的抑菌实验效果照片；
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