专利名称：一种小麦胚芽活性多肽的制备方法
技术领域：
本发明属于食品加工技术领域，涉及一种从脱脂小麦胚芽粉中提取活性多肽的方法及应用。
背景技术：
小麦是世界上最早栽培的植物之一，也是世界上种植最广泛的粮食作物，全世界约有35%-40%的人口以小麦作为主要粮食作物。据FAO统计，2005年中国小麦种植面积为 38 992万亩，平均亩产280公斤，总产量为9616万吨，约占全国粮食作物面积的27. 5%，占全国粮食总产量的22. 7%，仅次于水稻占第二位重要粮食作物。我国的小麦总产量为世界第一位，年总产量约为1. 10亿吨，可以开发利用的小麦胚芽潜藏量高达观0-420万吨，目前小麦胚芽年产量可达3-5万吨。小麦胚芽又称麦芽粉、胚芽，是咖啡色屑状粉末。麦芽是小麦发芽及生长的器官之一，约占整个麦粒的2. 5%，是整个麦粒营养价值最高的部分，不仅含有丰富优质的蛋白质， 脂肪，还有多种维生素和矿物质，以及多种微量元素，被誉为“人类天然的营养宝库”。小麦胚芽蛋白含量高达30%，并含有人体必需的8种氨基酸，占总氨基酸的34. 74%。而且小麦胚芽蛋白质中氨基酸的构成比例与FA0/WH0颁布的模式值以及大豆、牛肉、鸡蛋的氨基酸构成比例基本接近，有很好的氨基酸平衡，在营养学上具有重要意义。目前对于小麦胚芽的利用，主要集中在三个方面第一，大部分小麦胚芽被混入麸皮中当作饲料来用，造成资源的极大浪费；第二，直接加到食品中，比如；麦胚烘烤食品、汤料、休闲小食品等；第三，提取小麦胚油，现在还处于起步阶段。脱脂后的麦胚又被用作饲料廉价出售。小麦胚芽没有得到合理利用，主要原因是对小麦胚芽的研究开发尚停留在营养源水平上，对于其保健功能研究不够深入。小麦胚芽含有丰富的不饱和脂肪酸、酶和色素，如果将其混入面粉，不仅会影响面粉色泽，不利于面粉长期储存，还会影响面粉烘焙品质。由于小麦胚芽的转化利用的研究较少，大部分的小麦胚芽得不到充分、合理、有效的利用。目前主要的提高其附加值的利用就是制备小麦胚芽油。脱脂后的小麦胚芽则更是少有人问津。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明的目在于提供一种小麦胚芽活性多肽的制备方法。服用本发明的方法制备的小麦胚芽活性多肽，通过减少体内脂肪堆积，对营养性肥胖具有一定的预防作用。为了实现本发明的目的，发明人通过大量试验研究，最终获得了如下技术方案 一种小麦胚芽活性多肽的制备方法，包括如下步骤
(1)将脱脂麦胚粉加水混勻，使料液比为1 :8-10，110°C灭菌l(T30min，等温度降到50 55°C，调pH至8.0，分别按每克脱脂麦胚粉添加1000U Alcalase蛋白酶、300U风味蛋白酶，维持5(T55°C反应1. 2-1. 5h，快速升温至95°C，保持10 15min，水解液冷却到常温后， IOOOOrpm离心15min，取上清液，得粗制多肽液；
(2)在粗制多肽液用水稀释3倍，按脱脂麦胚粉重量的1-1.洲加入活性炭，在5(T55°C 下搅拌反应30min，15000rpm离心15min，取上清液，得粗制脱色多肽液；
(3)将粗制脱色多肽液先后经滤纸过滤，IOOnm微滤膜过滤，500Da纳滤膜过滤，得多肽浓缩液；
(4)将大孔树脂DA201-C用无水乙醇浸泡16h，用乙醇洗至洗出液加适量水无白色浑浊，再用去离子水洗至无乙醇味，接着用4倍体积的6%( ν/ν)盐酸溶液浸泡池，再用去离子水洗至中性，再用4倍体积的6%(w/w)氢氧化钠溶液浸泡2h，再用去离子水洗至中性，得到处理好的湿树脂；
(5)将处理好的湿树脂装入层析柱，以步骤(3)所得的多肽浓缩液进行上样，上样速度为1. Oml/min,每15min取样，测定电导率以及220nm处的吸光度值A220，当A220达到0. 05 时，停止上样，换用去离子水洗，上液速度为2ml/min，直至电导率不再变化，换用70%(v/v) 乙醇进行动态洗脱，洗脱流速为2ml/min，当A220接近0. 05时开始收集样品，最终当A220 不再变化，则停止收集，所得样品经浓缩蒸去乙醇，冷冻干燥。优选地，所述的一种小麦胚芽活性多肽的制备方法，其中步骤(5)中将处理好的湿树脂装入2. 5cmX 30cm层析柱中，床体积为180ml。通过动物试验研究发现，利用上述方法制备的小麦胚芽活性多肽在预防小鼠因高脂饲喂导致的肥胖方面具有显著的作用。因此，本发明的第二个目的在于提供一种产品新用途，即利用上述方法制备的小麦胚芽活性多肽在制备预防营养性肥胖的保健品、食品或药品中的应用。与现有技术相比，本发明涉及的小麦胚芽活性多肽的制备方法具有如下优点和显著的进步本发明以脱脂的小麦胚芽作为原料，利用复合蛋白酶酶解脱脂后的小麦胚芽，来制得活性多肽，将其作为一种活性成分添加到产品中，提高小麦胚芽的附加值。尤其是，本发明制备的小麦胚芽活性多肽在预防小鼠因高脂饲喂导致的肥胖方面具有显著的作用，这预示着这种活性多肽可以用于制备预防营养性肥胖的保健品、食品或药品。因此，本发明不仅有着较高的经济效益，更重要的是适应现代人对营养保健食品的需要，对于缓解我国十分紧缺的蛋白和油脂资源，丰富我国营养、保健与医疗食品的种类，提高我国人民的膳食营养与健康水平有着十分重要的意义。
具体实施例方式以下是本发明小麦胚芽活性多肽的具体制备例和应用例，对本发明的技术方案做进一步作描述，但是本发明的保护范围并不限于这些实施例。凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均包括在本发明的保护范围之内。实施例1小麦胚芽活性多肽的制备
(1)将脱脂小麦胚芽粉(本发明涉及的脱脂小麦胚芽粉为市售产品，蛋白质含量30%， 由河南弥诺食品有限公司生产。)加水混勻，使料液比为1 :8，110°C灭菌15min，等温度降到50 55°C，调pH至8.0，分别按每克脱脂麦胚粉添加1000U Alcalase蛋白酶、300U风味蛋白酶，维持50 55°C反应1. 5h，快速升温至95°C，保持lOmin，水解液冷却到常温后，IOOOOrpm 离心15min，取上清液，得粗制多肽液；
(2)在粗制多肽液用水稀释3倍，按脱脂麦胚粉重量的1.洲加入活性炭，在5(T55°C下搅拌反应30min，15000rpm离心15min，取上清液，得粗制脱色多肽液；
(3)将粗制脱色多肽液先后经滤纸过滤，IOOnm微滤膜过滤，500Da纳滤膜过滤，得多肽浓缩液；
(4)将大孔树脂DA201-C用无水乙醇浸泡16h，用乙醇洗至洗出液加适量水无白色浑浊，再用去离子水洗至无乙醇味，接着用4倍体积的6%( ν/ν)盐酸溶液浸泡池，再用去离子水洗至中性，再用4倍体积的6%(w/w)氢氧化钠溶液浸泡2h，再用去离子水洗至中性，得到处理好的湿树脂；
(5)将处理好的湿树脂装入2.5cmX30cm层析柱中，床体积为180ml，以步骤(3)所得的多肽浓缩液进行上样，上样速度为l.Oml/min，每15min取样，测定电导率以及220nm处的吸光度值A220，当A220达到0. 05时，停止上样，换用去离子水洗，上液速度为2ml/min，直至电导率不再变化，换用70%(v/v)乙醇进行动态洗脱，洗脱流速为2ml/min，当A220接近 0. 05时开始收集样品，最终当A220不再变化，则停止收集，所得样品经浓缩蒸去乙醇，冷冻干燥，即得。实施例2小麦胚芽活性多肽对小鼠营养性肥胖的影响试验
选用昆明种小鼠60只(雄性，体重18 22g)。将小鼠按体重随机分为如下4组空白对照组、模型对照组、阳性对照组、试验组，每组15只。各组按表1的方式进行饲喂。
权利要求
1.一种小麦胚芽活性多肽的制备方法，包括如下步骤(1)将脱脂麦胚粉加水混勻，使料液比为1:8-10，110°C灭菌l(T30min，等温度降到 50 55°C，调pH至8.0，分别按每克脱脂麦胚粉添加1000U Alcalase蛋白酶、300U风味蛋白酶，维持5(T55°C反应1. 2-1. 5h，快速升温至95°C，保持10 15min，水解液冷却到常温后， IOOOOrpm离心15min，取上清液，得粗制多肽液；(2)在粗制多肽液用水稀释3倍，按脱脂麦胚粉重量的1-1.洲加入活性炭，在5(T55°C 下搅拌反应30min，15000rpm离心15min，取上清液，得粗制脱色多肽液；(3)将粗制脱色多肽液先后经滤纸过滤，IOOnm微滤膜过滤，500Da纳滤膜过滤，得多肽浓缩液；(4)将大孔树脂DA201-C用无水乙醇浸泡16h，用乙醇洗至洗出液加适量水无白色浑浊，再用去离子水洗至无乙醇味，接着用4倍体积的6%( ν/ν)盐酸溶液浸泡池，再用去离子水洗至中性，再用4倍体积的6%(w/w)氢氧化钠溶液浸泡2h，再用去离子水洗至中性，得到处理好的湿树脂；(5)将处理好的湿树脂装入层析柱，以步骤(3)所得的多肽浓缩液进行上样，上样速度为1. Oml/min,每15min取样，测定电导率以及220nm处的吸光度值A220，当A220达到0. 05 时，停止上样，换用去离子水洗，上液速度为2ml/min，直至电导率不再变化，换用70%(v/v) 乙醇进行动态洗脱，洗脱流速为2ml/min，当A220接近0. 05时开始收集样品，最终当A220 不再变化，则停止收集，所得样品经浓缩蒸去乙醇，冷冻干燥。
2.根据权利要求1所述的一种小麦胚芽活性多肽的制备方法，其特征在于将处理好的湿树脂装入2. 5cmX 30cm层析柱中，床体积为180ml。
3.根据权利要求1或2所述的一种小麦胚芽活性多肽在制备预防营养性肥胖的保健品、食品或药品中的应用。
全文摘要
本发明涉及一种从脱脂小麦胚芽粉中提取活性多肽的方法及应用，该方法通过复合蛋白酶对脱脂小麦胚芽粉进行水解，得粗制多肽液，然后进行脱色，滤纸过滤，微滤膜过滤，纳滤膜过滤，得多肽浓缩液，再通过大孔树脂柱处理得产品。本发明制得的活性多肽，将其作为一种活性成分添加到产品中，提高小麦胚芽的附加值。
文档编号A23J1/12GK102524514SQ20121001565
公开日2012年7月4日 申请日期2012年1月18日 优先权日2012年1月18日
发明者吴雷, 张丽琍, 张超, 祁斌 申请人:安徽燕之坊食品有限公司