一种动植物混合蛋白肽的制备方法
【专利摘要】本发明是动植物混合蛋白肽的制备方法，该方法采用的混合原料是以大豆为植物蛋白原料、海洋低值小杂鱼为动物蛋白原料经处理后按特定比例配置而成，以该混合原料浆液为酶解底物，使用碱性蛋白酶，在pH6.5~8.5、温度45~60℃的条件下酶解反应1.5~3h，最后浓缩、干燥，即制成动植物混合蛋白肽。本发明生产的动植物混合蛋白肽，氨基酸平衡，有助于提高动物对蛋白质的消化吸收率，工艺简便、成本低廉、绿色环保，可用于大规模工业化生产，为畜禽及水产饲料提供一种新型蛋白源及添加剂。
【专利说明】ー种动植物混合蛋白肽的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及ー种蛋白肽的制备方法，特别是ー种动植物混合蛋白肽的制备方法。【背景技术】
[0002]蛋白肽是蛋白质中20个天然氨基酸以不同组成和排列方式构成的从二肽到复杂的线性、环型结构的不同肽类的总称，是ー种生物活性物质，机体摄食蛋白质经消化道的酶作用后，大多以低分子量肽形式吸收的，以游离氨基酸形式吸收的比例很小。研究表明，低分子量肽比游离氨基酸消化更快、吸收更多，其生物效价和营养价值比游离氨基酸更高。
[0003]由于鱼粉具有必需氨基酸和脂肪酸含量高，碳水化合物含量低，适ロ性好，抗营养因子少以及能够被养殖动物很好的消化吸收等特点，一直以来是水产饲料中不可或缺的优质蛋白源。鱼粉作为饲料中最主要的、昂贵的蛋白原料，其供给量、质量、价格受到了市场和环境关系的制约，全球鱼粉的供应量持续下降，价格迅速上升。我国豆类蛋白资源非常丰富、价格低廉、蛋白质含量高，消化吸收率高，是很好的植物性蛋白资源。但是单纯利用植物蛋白可能有以下限制因素，包括了必需氨基酸的缺乏及不平衡，抗营养因子及其毒性，降低饲料的适ロ性等。
[0004]专利文献201210539941.3 “ー种由鱼蛋白肽和大豆肽组成的蛋白肽的生产方法”公开了ー种固态发酵与液体酶解相结合的生产蛋白肽的方法。它是以鱼或鱼类下脚料和豆柏为原料，先接入发酵菌种进行固态发酵24-48h，然后将经过发酵的固体培养物与水混合，加入蛋白酶保温酶解，酶解后产物经灭酶、过滤、制成成品而得到由鱼蛋白肽和大豆肽组成的蛋白肽。
[0005]该方法采用豆柏与鱼或鱼类下脚料来制备蛋白肽，蛋白肽得率较低，因为豆柏经过高温处理，其蛋白存在着不同程度的变性，溶解性较差，会影响蛋白的消化。同时专利文献201210539941.3也存在エ`艺繁琐，生产周期长，生产成本高等问题。
【发明内容】
[0006]本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供ー种エ艺设计合理、成本低、制备的产品氨基酸营养平衡水平高、产品效价高的动植物混合蛋白肽的制备方法。
[0007]本发明所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。本发明是一种动植物混合蛋白肽的制备方法，其特点是，其步骤如下:
(I)预处理:
a.原料鱼:选取海洋低值小杂鱼为动物蛋白原料；将原料小杂鱼放入容器中，添加适量的水进行浸泡解冻处理，解冻后将水浙干，投入绞碎机中进行绞碎处理，再按料水比1:1.25^3投入匀浆机加水匀浆，得到小杂鱼匀浆液；
b.原料大豆:选取大豆为植物蛋白原料；将无霉变、去除杂质的大豆放入容器中,加入适量的水，浸泡l(Tl5h后将水浙干，按料水比1:2~3.5加水研磨打浆，得到豆浆；
c.混合:将小杂鱼匀浆液与豆浆按动物蛋白与植物蛋白的质量比f2:T2混合，搅拌均匀，得到混合原料浆液；
(2)制备:
a.酶解:将混合原料浆液抽入酶解罐，280(T4500u/g蛋白的比例加入碱性蛋白酶进行酶解，酶解工艺参数为:酶解时间1.5~3h，酶解温度45飞(TC，酶解pH6.5~8.5，底物蛋白质浓度是0.03、.05g/mL ;用浓度为0.5mol/L的氢氧化钠溶液及0.5mol/L的盐酸溶液调节pH值，酶解时对物料进行搅拌，得酶解液态混合物；
b.灭酶:酶解结束后,升温至85°C以上,加热lOmin，使酶失活，终止酶解反应，冷却，将灭酶后的混合物抽入离心机中离心，取其上层清液；或将灭酶后的混合物过滤，得到滤液；对上层清液或滤液进行灭菌处理，即得到液体动植物混合蛋白肽；
c.熬煮浓缩:将液体动植物混合蛋白肽加入熬煮罐进行熬煮浓缩处理，熬煮温度100°c，熬煮时间8-10小时，最终控制混合蛋白肽浓缩液水分在40-60%，即得到膏状动植物混合蛋白肽；
d.干燥:将膏状动植物混合蛋白肽经高压喷雾干燥处理，喷雾压力为15~20MPa，进风温度为15(Tl70°C、出风温度为7(T90°C，控制水分质量百分数在12%以下，获得粉状动植物混合蛋白妝。
[0008]本发明所述的动植物混合蛋白肽的制备方法，其优选的技术方案步骤如下:
(1)预处理:
a.原料鱼:选取海洋低值小杂鱼为动物蛋白原料；将原料小杂鱼放入容器中，添加适量的水进行浸泡解冻处理，解冻后将水浙干，投入绞碎机中进行绞碎处理，再按料水比1:3投入匀浆机加水匀浆，得到小杂鱼匀浆液；
b.原料大豆:选取大豆为植物蛋白原料；将无霉变、去除杂质的大豆放入容器中，加入适量的水，浸泡12h后将水浙干，按`料水比1:2.5加水研磨打浆，得到豆浆；
c.混合:将小杂鱼匀浆液与豆浆按动物蛋白与植物蛋白的质量比1:1混合，搅拌均匀，得到混合原料浆液；
(2)制备:
a.酶解:将混合原料浆液抽入酶解罐,3200u/g蛋白的比例加入碱性蛋白酶进行酶解，酶解工艺参数为:酶解时间2h，酶解温度55°C，酶解pH8.0，底物蛋白质浓度是0.038g/mL ；用浓度为0.5mol/L的氢氧化钠溶液及0.5mol/L的盐酸溶液调节pH值，酶解时对物料进行搅拌，得酶解液态混合物；
b.灭酶:酶解结束后,升温至85°C以上,加热lOmin，使酶失活，终止酶解反应，冷却，将灭酶后的混合物抽入离心机中离心，取其上层清液；或将灭酶后的混合物过滤，得到滤液；对上层清液或滤液进行灭菌处理，即得到液体动植物混合蛋白肽；
c.熬煮浓缩:将液体动植物混合蛋白肽加入熬煮罐进行熬煮浓缩处理，熬煮温度100°c，熬煮时间8-10小时，最终控制混合蛋白肽浓缩液水分在50%，即得到膏状动植物混合蛋白肽；
d.干燥:将膏状动植物混合蛋白肽经高压喷雾干燥处理，喷雾压力为20MPa，进风温度为160°C、出风温度为80°C，控制水分质量百分数在12%以下，获得粉状动植物混合蛋白肽。
[0009]与现有技术相比，本发明方法采用优质植物蛋白原料大豆替代豆柏，与海洋捕捞低值小杂鱼原料组合成动植物混合蛋白，采用本发明的方法生产动植物混合蛋白肽，不仅简化了生产エ艺，还进一歩降低了生产成本，提高氨基酸营养平衡水平，进ー步提升产品的使用效价，有助于提高动物对蛋白质的消化吸收率。本发明方法绿色环保，可用于大规模エ业化生产，为畜禽及水产饲料提供ー种新型蛋白源及添加剤。
[0010]本发明选用特定比例的混合蛋白原料作为酶解底物，以碱性蛋白酶对混合蛋白进行酶解，通过正交试验设计，系统地分析得出制备高水解度蛋白肽的最佳酶解条件。一方面提升了海洋低值小杂鱼和大豆的应用价值，另一方面精确地控制了酶解反应的进行，提高了混合动植物蛋白肽的水解度，降低了蛋白肽的生产成本，获得具有高溶解度的混合蛋白肽。使用碱性蛋白酶酶解豆浆和海洋小杂鱼混合物，水解度非常高，达到40% ;获得混合蛋白肽的方法和程序简单易行，条件温和，方法简便安全、高效，并无副毒物产生，避免酸碱水解而产生毒副产物和蛋白质变性，并可产生活性肽。本发明产生的动植物混合蛋白肽具有营养均衡，吸收速度快，耗能低，无竞争性和抑制性的特点，既降低了生产成本，解决了动物蛋白资源短缺的问题，又对外界环境无污染，是ー种绿色生态的新方法。
【具体实施方式】
[0011]以下进ー步描述本发明的具体技术方案，以便于本领域的技术人员进ー步地理解本发明，而不构成对其权利的限制。
[0012]实施例1，ー种动植物混合蛋白肽的制备方法，其步骤如下:
(1)预处理:
a.原料鱼:选取海洋低 值小杂鱼为动物蛋白原料；将原料小杂鱼放入容器中，添加适量的水进行浸泡解冻处理，解冻后将水浙干，投入绞碎机中进行绞碎处理，再按料水比1:1.25投入匀浆机加水匀浆，得到小杂鱼匀浆液；
b.原料大豆:选取大豆为植物蛋白原料；将无霉变、去除杂质的大豆放入容器中,加入适量的水，浸泡IOh后将水浙干，按料水比1:2加水研磨打浆，得到豆浆；
c.混合:将小杂鱼匀浆液与豆浆按动物蛋白与植物蛋白的质量比1:2混合，搅拌均匀，得到混合原料浆液；
(2)制备:
a.酶解:将混合原料浆液抽入酶解罐，2800u/g蛋白的比例加入碱性蛋白酶进行酶解，酶解エ艺參数为:酶解时间1.5h，酶解温度45°C，酶解pH6.5~8.5，底物蛋白质浓度是0.03g/mL ;用浓度为0.5mol/L的氢氧化钠溶液及0.5mol/L的盐酸溶液调节pH值，酶解时对物料进行搅拌，得酶解液态混合物；
b.灭酶:酶解结束后,升温至85°C以上,加热lOmin，使酶失活，终止酶解反应，冷却，将灭酶后的混合物抽入离心机中离心，取其上层清液；或将灭酶后的混合物过滤，得到滤液；对上层清液或滤液进行灭菌处理，即得到液体动植物混合蛋白肽；
c.熬煮浓缩:将液体动植物混合蛋白肽加入熬煮罐进行熬煮浓缩处理，熬煮温度100°c，熬煮时间8-10小吋，最终控制混合蛋白肽浓缩液水分在40%，即得到膏状动植物混合蛋白肽；
d.干燥:将膏状动植物混合蛋白肽经高压喷雾干燥处理，喷雾压カ为15MPa，进风温度为150°C、出风温度为70°C，控制水分质量百分数在12%以下，获得粉状动植物混合蛋白肽。
[0013]实施例2，ー种动植物混合蛋白肽的制备方法，其步骤如下:(1)预处理:
a.原料鱼:选取海洋低值小杂鱼为动物蛋白原料；将原料小杂鱼放入容器中，添加适量的水进行浸泡解冻处理，解冻后将水浙干，投入绞碎机中进行绞碎处理，再按料水比1:3投入匀浆机加水匀浆，得到小杂鱼匀浆液；
b.原料大豆:选取大豆为植物蛋白原料；将无霉变、去除杂质的大豆放入容器中，加入适量的水，浸泡15h后将水浙干，按料水比1: 3.5加水研磨打浆，得到豆浆；
c.混合:将小杂鱼匀浆液与豆浆按动物蛋白与植物蛋白的质量比2:1混合，搅拌均匀，得到混合原料浆液；
(2)制备:
a.酶解:将混合原料浆液抽 入酶解罐,4500u/g蛋白的比例加入碱性蛋白酶进行酶解，酶解工艺参数为:酶解时间3h，酶解温度60°C，酶解pH8.5，底物蛋白质浓度是0.05g/mL ；用浓度为0.5mol/L的氢氧化钠溶液及0.5mol/L的盐酸溶液调节pH值，酶解时对物料进行搅拌，得酶解液态混合物；
b.灭酶:酶解结束后,升温至85°C以上,加热lOmin，使酶失活，终止酶解反应，冷却，将灭酶后的混合物抽入离心机中离心，取其上层清液；或将灭酶后的混合物过滤，得到滤液；对上层清液或滤液进行灭菌处理，即得到液体动植物混合蛋白肽；
c.熬煮浓缩:将液体动植物混合蛋白肽加入熬煮罐进行熬煮浓缩处理，熬煮温度100°c，熬煮时间8-10小时，最终控制混合蛋白肽浓缩液水分在40-60%，即得到膏状动植物混合蛋白肽；
d.干燥:将膏状动植物混合蛋白肽经高压喷雾干燥处理，喷雾压力为20MPa，进风温度为170°C、出风温度为90°C，控制水分质量百分数在12%以下，获得粉状动植物混合蛋白肽。
[0014]实施例3，一种动植物混合蛋白肽的制备方法，其步骤如下:
(1)预处理:
a.原料鱼:选取海洋低值小杂鱼为动物蛋白原料；将原料小杂鱼放入容器中，添加适量的水进行浸泡解冻处理，解冻后将水浙干，投入绞碎机中进行绞碎处理，再按料水比1:3投入匀浆机加水匀浆，得到小杂鱼匀浆液；
b.原料大豆:选取大豆为植物蛋白原料；将无霉变、去除杂质的大豆放入容器中，加入适量的水，浸泡12h后将水浙干，按料水比1:2.5加水研磨打浆，得到豆浆；
c.混合:将小杂鱼匀浆液与豆浆按动物蛋白与植物蛋白的质量比1:1混合，搅拌均匀，得到混合原料浆液；
(2)制备:
a.酶解:将混合原料浆液抽入酶解罐，3200u/g蛋白的比例加入碱性蛋白酶进行酶解，酶解工艺参数为:酶解时间2h，酶解温度55°C，酶解pH8.0，底物蛋白质浓度是0.038g/mL ；用浓度为0.5mol/L的氢氧化钠溶液及0.5mol/L的盐酸溶液调节pH值，酶解时对物料进行搅拌，得酶解液态混合物；
b.灭酶:酶解结束后,升温至85°C以上,加热lOmin，使酶失活，终止酶解反应，冷却，将灭酶后的混合物抽入离心机中离心，取其上层清液；或将灭酶后的混合物过滤，得到滤液；对上层清液或滤液进行灭菌处理，即得到液体动植物混合蛋白肽；
c.熬煮浓缩:将液体动植物混合蛋白肽加入熬煮罐进行熬煮浓缩处理，熬煮温度100°c，熬煮时间8-10小吋，最终控制混合蛋白肽浓缩液水分在50%，即得到膏状动植物混合蛋白肽；
d.干燥:将膏状动植物混合蛋白肽经高压喷雾干燥处理，喷雾压カ为20MPa，进风温度为160°C、出风温度为80°C，控制水分质量百分数在12%以下，获得粉状动植物混合蛋白肽。
【权利要求】
1.一种动植物混合蛋白肽的制备方法，其特征在于，其步骤如下: (1)预处理: a.原料鱼:选取海洋低值小杂鱼为动物蛋白原料；将原料小杂鱼放入容器中，添加适量的水进行浸泡解冻处理，解冻后将水浙干，投入绞碎机中进行绞碎处理，再按料水比1:1.25^3投入匀浆机加水匀浆，得到小杂鱼匀浆液； b.原料大豆:选取大豆为植物蛋白原料；将无霉变、去除杂质的大豆放入容器中,加入适量的水，浸泡l(Tl5h后将水浙干，按料水比1:2~3.5加水研磨打浆，得到豆浆； c.混合:将小杂鱼匀浆液与豆浆按动物蛋白与植物蛋白的质量比1-2:1-2混合，搅拌均匀，得到混合原料浆液； (2)制备: a.酶解:将混合原料浆液抽入酶解罐，280(T4500u/g蛋白的比例加入碱性蛋白酶进行酶解，酶解工艺参数为:酶解时间1.5~3h，酶解温度45飞(TC，酶解pH6.5~8.5，底物蛋白质浓度是0.03、.05g/mL ;用浓度为0.5mol/L的氢氧化钠溶液及0.5mol/L的盐酸溶液调节pH值，酶解时对物料进行搅拌，得酶解液态混合物； b.灭酶:酶解结束后,升温至85°C以上,加热lOmin，使酶失活，终止酶解反应，冷却，将灭酶后的混合物抽入离心机中离心，取其上层清液；或将灭酶后的混合物过滤，得到滤液；对上层清液或滤液进行灭菌处理，即得到液体动植物混合蛋白肽； c.熬煮浓缩:将液体动植物混合蛋白肽加入熬煮罐进行熬煮浓缩处理，熬煮温度100°c，熬煮时间8-10小时，最终控制混合蛋白肽浓缩液水分在40-60%，即得到膏状动植物混合蛋白肽； d.干燥:将膏状动植物混合蛋白肽经高压喷雾干燥处理，喷雾压力为15~20MPa，进风温度为15(Tl70°C、出风温度为7(T90°C，控制水分质量百分数在12%以下，获得粉状动植物混合蛋白妝。
2.根据权利要求1所述的动植物混合蛋白肽的制备方法，其特征在于，其步骤如下: (1)预处理: a.原料鱼:选取海洋低值小杂鱼为动物蛋白原料；将原料小杂鱼放入容器中，添加适量的水进行浸泡解冻处理，解冻后将水浙干，投入绞碎机中进行绞碎处理，再按料水比1:3投入匀浆机加水匀浆，得到小杂鱼匀浆液； b.原料大豆:选取大豆为植物蛋白原料；将无霉变、去除杂质的大豆放入容器中，加入适量的水，浸泡12h后将水浙干，按料水比1:2.5加水研磨打浆，得到豆浆； c.混合:将小杂鱼匀浆液与豆浆按动物蛋白与植物蛋白的质量比1:1混合，搅拌均匀，得到混合原料浆液； (2)制备: a.酶解:将混合原料浆液抽入酶解罐,3200u/g蛋白的比例加入碱性蛋白酶进行酶解，酶解工艺参数为:酶解时间2h，酶解温度55°C，酶解pH8.0，底物蛋白质浓度是0.038g/mL ；用浓度为0.5mol/L的氢氧化钠溶液及0.5mol/L的盐酸溶液调节pH值，酶解时对物料进行搅拌，得酶解液态混合物； b.灭酶:酶解结束后,升温至85°C以上,加热lOmin，使酶失活，终止酶解反应，冷却，将灭酶后的混合物抽入离心机中离心，取其上层清液；或将灭酶后的混合物过滤，得到滤液；对上层清液或滤液进行灭菌处理，即得到液体动植物混合蛋白肽； C.熬煮浓縮:将液体动植物混合蛋白肽加入熬煮罐进行熬煮浓缩处理，熬煮温度.100°C，熬煮时间8-10小吋，最终控制混合蛋白肽浓缩液水分在50%，即得到膏状动植物混合蛋白肽； d.干燥:将膏状动植物混合蛋白肽经高压喷雾干燥处理，喷雾压カ为20MPa，进风温度为160°C、出风温度为80°C，控制水分质量百分数在12%以下，获得粉状动植物混合蛋白肽。
【文档编号】C12P21/06GK103555804SQ201310565184
【公开日】2014年2月5日 申请日期:2013年11月13日 优先权日:2013年11月13日
【发明者】陈忆凤, 朱勤, 毕银 申请人:陈忆凤