用作治疗剂的苯并咪唑衍生物的制作方法

专利名称：用作治疗剂的苯并咪唑衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及作为高级糖基化终产物受体(RAGE)的调制剂，及该受体与其配体如高级糖基化终产物(AGEs)、S100/钙粒蛋白/EN-RAGE、β-淀粉状蛋白和两性素(amphoterin)的相互作用的调制剂，用以处理、治疗、控制由RAGE引起的疾病或作为该疾病的辅助治疗的化合物。
背景技术：
用醛糖培育蛋白质或类脂导致蛋白质氨基的非酶促糖基化和氧化，形成Amadori加合物。随时间推移，该加合物发生另外的重排、脱水和与其它蛋白质交联，形成称为高级糖基化终产物(AGEs)的复合物。促进AGEs形成的因素包括蛋白质转换延迟(例如，淀粉样变性中那样)，赖氨酸含量高的大分子的累积，以及高血糖值(例如，糖尿病中那样)(Hori等，J.Biol.Chem.27025752-761，(1995))。AGEs牵涉到多种病症，包括与糖尿病和自然老化关联的并发症。
AGEs与微脉管系统的内皮细胞、单核细胞和巨噬细胞、平滑肌细胞、膜细胞(mesengial cell)、和神经元的细胞表面受体具有特异和可饱和的结合。高级糖基化终产物受体(RAGE)是细胞表面分子的免疫球蛋白总科的一个成员。RAGE的细胞外(N-末端)区包括三个免疫球蛋白型区域，一个V(可变)型区，后面是两个C型(恒定)区(Neeper等，J.Biol.Chem.26714998-15004(1992))。跟随细胞外区的是一个单一的跨膜的跨越区(spanning domain)，和一个短的强电荷细胞溶质尾巴。N-末端、细胞外区可以通过RAGE的蛋白质水解生成由V和C区构成的可溶RAGE(sRAGE)来加以分离。
RAGE在大多数组织中表达，特别是在胚胎形成时的皮层神经元中发现(Hori等，J.Biol.Chem.27025752-761(1995))。在老化的组织(Schleicher等，J.Clin.Invest.99(3)457-468(1997))、糖尿病患者的视网膜、脉管系统和肾(Schmidt等，Nature Med.11002-1004(1995))中还发现了增长量的RAGE。活化不同的组织和器官中的RAGE会导致大量病理生理结果。RAGE牵涉到多种病症，包括急性和慢性炎症(Hofmann等，Cell 97889-901(1999))、糖尿病晚期并发症如血管通透性增加的发作(Wautier等，J.Clin.Invest.97238-243(1995))、肾病(Teillet等，J.Am.Soc.Nephrol.111488-1497(2000))、动脉硬化症(Vlassara等，The Finish Medical Society DUODECIM，Ann.Med.28419-426(1996))、和视网膜病(Hammes等，Diabetologia 42603-607(1999))。RAGE还牵涉到阿尔茨海默氏病(Yan等，Nature382685-691，(1996))、勃起功能障碍、和肿瘤侵袭和肿瘤转移(Taguchi等，Nature 405354-357，(2000))。
除AGEs外，其它化合物也可以与RAGE结合并对其进行调节。在正常发展中，RAGE与两性素相互作用，这是一种介导培养的胚胎神经元中长出神经突的多肽(Hori等，1995)。RAGE还发现与EN-RAGE相互作用，这是一种与钙粒蛋白基本类似的蛋白质(Hofmann等，Cell97889-901(1999))。RAGE还发现与β-淀粉状蛋白相互作用(Yan等，Nature 389589-595，(1997)；Yan等，Nature 382685-691(1996)；Yan等，Proc.Natl.Acad.Sci.，945296-5301(1997))。
象AGEs、S100/钙粒蛋白/EN-RAGE、β-淀粉状蛋白、CML(Nε-羧甲基赖氨酸)和两性素这样的配体与RAGE结合已证明会改变多种基因的表达。例如，在多种细胞类型中，RAGE与其配体的相互作用产生氧化应力，从而导致自由基敏感的转录因子NF-κB的活化，以及NF-κB调节的基因如细胞因子IL-1β、TNF-α等的活化。此外，若干其它的调节路径，如涉及p21ras、MAP激酶、ERK1和ERK2的那些业已证明通过AGEs和其它配体与RAGE的结合活化。事实上，RAGE自身的转录至少部分由NF-κB调节。因此，通过由配体结合引发的正反馈回路为上升的且经常是有害的螺旋提供了能源。因此，拮抗生理配体与RAGE的结合是我们的下调病理生理变化的目标，这些病理生理变化由对RAGE来说过多的AGEs和其它配体浓度引起。
因此，需要开发能够拮抗生理配体与RAGE受体结合的化合物。
发明概述本发明提供特定的取代的苯并咪唑化合物。本发明的实施方案提供下述式(I)的化合物；其制备方法；含有该化合物的药物组合物；及其在治疗人或动物病症中的使用方法。本发明的化合物作为高级糖基化终产物受体(RAGE)与其配体如高级糖基化终产物(AGEs)、S100/钙粒蛋白/EN-RAGE、β-淀粉状蛋白和两性素的相互作用的调制剂是有用的。该化合物可用于多种应用场合，包括处理、治疗、控制由RAGE引起的人类疾病和/或作为该疾病的辅助治疗。这样的疾病或疾病状态包括急性和慢性炎症，糖尿病晚期并发症如血管通透性增加的发作、肾病、动脉硬化症、和视网膜病，阿尔茨海默氏病的发展、勃起功能障碍、和肿瘤侵袭和肿瘤转移。
本发明的详细说明第一方面，本发明提供特定的取代的苯并咪唑化合物。这样的化合物可用于调节、优选抑制RAGE与其生理配体的相互作用，如下面将详细说明的。
第二方面，本发明提供式(I)的化合物、其可药用盐、溶剂化物或前药
其中m为0-3的整数；n为0-3的整数；R1包括芳基；R2包括a)式-N(R9R10)、-NHC(O)R9、或-NHC(O)OR9的基团；b)式-OR9的基团；c)式-SR9、-SOR9、-SO2R9、-SO2NHR9、或-SO2N(R9R10)的基团；其中R9和R10独立地包括1)-H；2)-芳基；3)基团，包括a)-C1-6烷基；b)-C1-6烷基芳基； e)-芳基；f)-C1-6烷基；或g)-C1-6烷基芳基；R3和R4独立地包括
a)H；b)-芳基；c)-C1-6烷基；d)-C1-6烷基芳基；或e)-C1-6烷氧基芳基；R5、R6、R7和R8独立地包括a)-H；b)-C1-6烷基；c)-芳基；d)-C1-6烷基芳基；e)-C(O)-O-C1-6烷基；f)-C(O)-O-C1-6烷基芳基；g)-C(O)-NH-C1-6烷基；h)-C(O)-NH-C1-6烷基芳基；i)-SO2-C1-6烷基；j)-SO2-C1-6烷基芳基；k)-SO2-芳基；l)-SO2-NH-C1-6烷基；m)-SO2-NH-C1-6烷基芳基；n)-C(O)-C1-6烷基；o)-C(O)-C1-6烷基芳基；p)-Y-C1-6烷基；q)-Y-芳基；r)-Y-C1-6烷基芳基；s)-Y-C1-6亚烷基-NR13R14；或t)-Y-C1-6亚烷基-W-R15；其中Y和W独立地包括-CH2-、-O-、-N(H)-、-S-、-SO2-、-CON(H)-、-NHC(O)-、-NHCON(H)-、-NHSO2-、-SO2N(H)-、-C(O)-O-、-NHSO2NH-、-O-CO-、 或 R16和R17独立地包括芳基、C1-C6烷基、C1-C6烷基芳基、C1-C6烷氧基、或C1-C6烷氧基芳基；R15独立地包括芳基、C1-C6烷基、或C1-C6烷基芳基；或u)卤素、羟基、氰基、氨基甲酰基、或羧基；R11、R12、R13和R14独立地包括氢、芳基、C1-C6烷基、C1-C6烷基芳基、C1-C6烷氧基、或C1-C6烷氧基芳基；R13和R14可以一起形成具有与连接了R13和R14的氮原子键合的式-(CH2)o-X-(CH2)p-的环，和/或R11和R12可以独立地一起形成具有与连接了R11和R12的原子键合的式-(CH2)o-X-(CH2)p-的环，其中o和p独立地为1、2、3或4；X包括直接键、-CH2-、-O-、-S-、-S(O2)-、-C(O)-、-CON(H)-、-NHC(O)-、-NHCON(H)-、-NHSO2-、-SO2N(H)-、-C(O)-O-、-O-CO-、-NHSO2NH-、 或 其中R1、R2、R3、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18和R19中的芳基和/或烷基可以选择性地被取代基取代1-4次，其中所述的取代基或取代的术语所指的基团包括a)-H；
b)-Z-C1-6烷基；-Z-芳基；-Z-C1-6烷基芳基；-Z-C1-6烷基-NR20R21；-Z-C1-6烷基-W-R22；其中Z和W独立地包括-CH2-、-O-、-N(H)-、-S-、-SO2-、-CON(H)-、-NHC(O)-、-NHCON(H)-、-NHSO2-、-SO2N(H)-、-C(O)-O-、-NHSO2NH-、-O-CO-、 或 其中R20和R21独立地包括氢、芳基、C1-C6烷基、C1-C6烷基芳基、C1-C6烷氧基、或C1-C6烷氧基芳基；R22、R23和R24独立地包括芳基、C1-C6烷基、C1-C6烷基芳基、C1-C6烷氧基、或C1-C6烷氧基芳基；或c)卤素、羟基、氰基、氨基甲酰基、或羧基；以及R20和R21可以一起形成具有与连接了R20和R21的氮原子键合的式-(CH2)q-X-(CH2)r-的环，其中q和r独立地为1、2、3或4；X包括直接键、-CH2-、-O-、-S-、-S(O2)-、-C(O)-、-CON(H)-、-NHC(O)-、-NHCON(H)-、-NHSO2-、-SO2N(H)-、-C(O)-O-、-O-CO-、-NHSO2NH-、 或
R25、R26和R27独立地包括氢、芳基、C1-C6烷基、或C1-C6烷基芳基。
在一个优选实施方案中，本发明包括由下式(II)表示，其中m为0-3的整数；n为0；R3为氢的化合物、其可药用盐、溶剂化物或前药 以及其中R1包括芳基；R2包括式-N(R9R10)、-NHC(O)R9、或-NHC(O)OR9的基团；其中R9和R10独立地包括1)-H；2)-芳基；或3)基团，包括-C1-6烷基；或-C1-6烷基芳基；R4包括a)H；b)-芳基；c)-C1-6烷基；d)-C1-6烷基芳基；或e)-C1-6烷氧基芳基；R5、R6、R7和R8独立地包括a)-H；b)-C1-6烷基；c)-芳基；
d)-C1-6烷基芳基；e)-C(O)-O-C1-6烷基；f)-C(O)-O-C1-6烷基芳基；g)-C(O)-NH-C1-6烷基；h)-C(O)-NH-C1-6烷基芳基；i)-SO2-C1-6烷基；j)-SO2-C1-6烷基芳基；k)-SO2-芳基；l)-SO2-NH-C1-6烷基；m)-SO2-NH-C1-6烷基芳基；n)-C(O)-C1-6烷基；o)-C(O)-C1-6烷基芳基；p)-Y-C1-6烷基；q)-Y-芳基；r)-Y-C1-6烷基芳基；s)-Y-C1-6亚烷基-NR13R14；或t)-Y-C1-6亚烷基-W-R15；其中Y和W独立地包括-CH2-、-O-、-N(H)-、-S-、-SO2-、-CON(H)-、-NHC(O)-、-NHCON(H)-、-NHSO2-、-SO2N(H)-、-C(O)-O-、-NHSO2NH-、-O-CO-、 或 R16和R17独立地包括芳基、C1-C6烷基、C1-C6烷基芳基、C1-C6烷氧基、或C1-C6烷氧基芳基；R15包括芳基、C1-C6烷基、或C1-C6烷基芳基；或u)卤素、羟基、氰基、氨基甲酰基、或羧基；
R13和R14独立地包括氢、芳基、C1-C6烷基、C1-C6烷基芳基、C1-C6烷氧基、或C1-C6烷氧基芳基；R13和R14可以一起形成具有与连接了R13和R14的氮原子键合的式-(CH2)o-X-(CH2)p-的环，其中o和p独立地为1、2、3或4；X包括直接键、-CH2-、-O-、-S-、-S(O2)-、-C(O)-、-CON(H)-、-NHC(O)-、-NHCON(H)-、-NHSO2-、-SO2N(H)-、-C(O)-O-、-O-CO-、-NHSO2NH-、 或 以及其中R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R13、R14、R15、R16、R17、R18和R19中的芳基和/或烷基可以选择性地被取代基取代1-4次，其中所述的取代基或取代的术语所指的基团包括a)-H；b)-Z-C1-6烷基；-Z-芳基；-Z-C1-6烷基芳基；-Z-C1-6烷基-NR20R21；和-Z-C1-6烷基-W-R22；其中Z和W独立地包括-CH2-、-O-、-N(H)-、-S-、-SO2-、-CON(H)-、-NHC(O)-、-NHCON(H)-、-NHSO2-、-SO2N(H)-、-C(O)-O-、-NHSO2NH-、-O-CO-、 或
其中R20和R21独立地包括氢、芳基、C1-C6烷基、C1-C6烷基芳基、C1-C6烷氧基、或C1-C6烷氧基芳基；以及R22、R23和R24独立地包括芳基、C1-C6烷基、C1-C6烷基芳基、C1-C6烷氧基、或C1-C6烷氧基芳基；或c)卤素、羟基、氰基、氨基甲酰基、或羧基；以及R20和R21可以一起形成具有与连接了R20和R21的氮原子键合的式-(CH2)q-X-(CH2)r-的环，其中q和r独立地为1、2、3或4；X包括直接键、-CH2-、-O-、-S-、-S(O2)-、-C(O)-、-CON(H)-、-NHC(O)-、-NHCON(H)-、-NHSO2-、-SO2N(H)-、-C(O)-O-、-O-CO-、-NHSO2NH-、 或 R25、R26和R27独立地包括氢、芳基、C1-C6烷基、或C1-C6烷基芳基。
在式(I)和(II)的化合物中，表示的各种官能团应理解为在有连字号的官能团上具有连接点。换句话说，对于-C1-6烷基芳基，应理解该连接点为烷基；其一例为苄基。对于象-C(O)-NH-C1-6烷基芳基这样的基团，连接点为羰基碳。
在上式(I)中，下标m和n表示最多达3个亚甲基键的存在；换句话说，如果m为3，R1基团将通过-CH2CH2CH2-键来键合。如果m为0，R1基团将直接连接，即通过共价键。
上式(I)表示的化合物的各单独对映异构体及其任何全部或部分外消旋化合物也包括在本发明的范围内。本发明也包括由上式表示的化合物的各单独对映异构体与它的其中一个或多个立构中心反向的非对映异构体的混合物。
因高生物活性而优选的本发明的化合物按名称列在下表1中。
表1


另一方面，本发明包括药物组合物，该组合物含有式(I)或式(II)的化合物，以及一种或多种可药用载体、赋形剂或稀释剂。
在一个实施方案中，该药物组合物是以口服剂量或肠胃外剂量单位的形式。优选以每天约0.01-500mg/kg体重的剂量给用式(I)或式(II)的化合物。更优选以每天约0.1-200mg/kg体重的剂量给用该化合物。甚至更优选以每天约0.1-100mg/kg体重的剂量给用该化合物。
在一个实施方案中，该药物组合物进一步含有一种或多种治疗剂，所述治疗剂选自烷基化剂、抗代谢物、植物碱、抗生素、激素、生物应答调节剂、止痛剂、NSAIDs、DMARDs、糖皮质激素、磺酰脲类、双胍类、胰岛素、胆碱酯酶抑制剂、抗精神病药、抗抑郁药、和抗惊厥药。
根据另一方面，本发明包括抑制RAGE与其生理配体的相互作用的方法，该方法包括对需要的患者给用式(I)或式(II)的至少一种化合物。
在一个实施方案中，配体选自高级糖基化终产物(AGEs)、S100/钙粒蛋白/EN-RAGE、β-淀粉状蛋白、和两性素。
根据再一方面，本发明包括治疗疾病状态的方法，所述的疾病状态选自急性和慢性炎症，糖尿病症状、血管通透性、肾病、动脉硬化症、视网膜病，阿尔茨海默氏病、勃起功能障碍、和肿瘤侵袭和/或肿瘤转移，所述的方法包括对需要的患者给用治疗有效量的式(I)或式(II)的至少一种化合物。
根据再一个方面，本发明包括预防和/或治疗RAGE介导的人类疾病的方法，所述的方法包括对需要的人给用治疗有效量的权利要求1所述的式(I)的化合物，其中治疗有效量包括足够用来至少部分抑制配体与RAGE受体结合的化合物。
在一个实施方案中，该方法包括对需要的患者给用至少一种辅药和/或另外的治疗剂。优选治疗剂选自烷基化剂、抗代谢物、植物碱、抗生素、激素、生物应答调节剂、止痛剂、NSAIDs、DMARDs、糖皮质激素、磺酰脲类、双胍类、胰岛素、胆碱酯酶抑制剂、抗精神病药、抗抑郁药、和抗惊厥药。
也优选RAGE介导的人类疾病包括急性和慢性炎症，血管通透性异常、肾病、动脉硬化症、视网膜病，阿尔茨海默氏病、勃起功能障碍、肿瘤侵袭和/或肿瘤转移。
本文使用的术语“烷基”指含有指定数目碳原子的直链或支链烃基。本文使用的“烷基”的例子包括但不限于甲基、正丁基、正戊基、异丁基、和异丙基等。
本文使用的术语“烷氧基”指含有指定数目的与氧原子相连的碳原子的直链或支链烃基。本文使用的“烷氧基”的例子包括但不限于甲氧基、正丁氧基、正戊氧基、异丁氧基、和异丙氧基等。
本文使用的术语“芳基”指选择性地含有一个或多个氮、氧或硫杂原子的5-7员芳环、或选择性取代的苯环体系，其中N-氧化物和一氧化硫和二氧化硫是允许的取代基。这样的环可以稠合成一个或多个选择性地含有一个或多个氮、氧或硫杂原子的5-7员芳香环。优选的芳基包括苯基、联苯基、2-萘基、1-萘基、菲基、1-蒽基、吡啶基、呋喃基、呋喃基、噻吩基、吲哚基、异噻唑基、咪唑基、苯并咪唑基、四唑基、吡嗪基、嘧啶基、喹啉基、异喹啉基、苯并呋喃基、异苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并吲哚基、吡唑基、异吲哚基、嘌呤基、咔唑基、异噁唑基、噻唑基、噁唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基等。在这点上，特别优选的芳基包括选择性地被叔丁氧基、苄氧基、苯乙氧基、正丁氧基、异丙氧基和苯氧基取代的苯基、2-萘基、1-萘基、联苯基等环体系。
本文使用的术语“亚烷基”指具有指定数目碳原子的直链或支链二价烃基。本文使用的“亚烷基”的例子包括但不限于亚甲基、亚乙基等。
本文使用的术语“亚烯基”指具有指定数目的碳原子和一个或多个碳碳双键的直链或支链二价烃基。本文使用的“亚烯基”的例子包括但不限于乙烯-1，2-二基、丙烯-1，3-二基、亚甲基-1，1-二基等。
本文使用的术语“亚炔基”指具有指定数目的碳原子和一个或多个碳碳叁键的直链或支链二价烃基。本文使用的“亚炔基”的例子包括但不限于乙炔-1，2-二基、丙炔-1，3-二基等。
本文使用的术语“选择性地”指随后描述的事件可以发生或不发生，并且包括发生的事件和不发生的事件。
本文使用的术语“取代的”指用指定的取代基进行的取代，如果没有特别指明，多程度的取代也允许。
本文使用的化学结构术语“含有(contain)”或“含有(containg)”指在沿着O、S、SO、SO2、N或N-烷基的一个或多个上的上述定义的取代基的任何位置的在线取代，包括例如，-CH2-O-CH2-、-CH2-SO2-CH2-、-CH2-NH-CH3等。
本文使用的术语“溶剂化物”是由溶质(本发明中，为式(I)的化合物)与溶剂形成的化学计量可变的复合物。满足本发明该目的溶剂可以不影响溶质的生物活性。举例来说，溶剂可以是水、乙醇、或乙酸。
本文使用的术语“可生物水解的酯”是药物物质(在本发明中，是式(I)的化合物)的酯，其a)不影响母体物质的生物活性，但赋予该物质有利的体内性质，如作用持续时间、作用的开始等，或b)为生物学惰性，但可以由患者容易地在体内转变成生物学有效成分。利点有例如，可生物水解的酯口服从肠管吸收，并在血浆中转变为(I)。这样的许多例子在本领域是已知的，例如包括低级烷基酯(例如，C1-C4)、低级酰氧基烷基酯、低级烷氧基酰氧基烷基酯、烷氧基酰氧基酯、烷基酰胺基烷基酯、和胆碱酯。
本文使用的术语“可生物水解的酰胺”是药物物质(在本发明中，是式(I)的化合物)的酰胺，其a)不影响母体物质的生物活性，但赋予该物质有利的体内性质，如作用持续时间、作用的开始等，或b)为生物学惰性，但可以由患者容易地在体内转变成生物学有效成分。利点有例如，可生物水解的酰胺口服从肠管吸收，并在血浆中转变为(I)。这样的许多例子在本领域是已知的，例如包括低级烷基酰胺、α-氨基酸酰胺、烷氧基酰基酰胺、和烷基氨基烷基羰基酰胺。
本文使用的术语“前药”包括可生物水解的酰胺和可生物水解的酯，也包括a)化合物，其中这样的前药中的可生物水解的官能团包括在式(I)的化合物中例如，由R2中的羧基和R4中的胺形成的内酰胺，和b)化合物，可在指定的官能团上被生物学氧化或还原，产生式(I)的前药物质。这些官能团的例子包括但不限于1，4-二氢吡啶、N-烷基羰基-1，4-二氢吡啶、1，4-环己二烯、叔丁基等。
术语“药理学有效量”应指研究者或临床医生所探寻的将引起组织、动物或人类的生物或医学应答的药物或药剂的量。该量可以是治疗有效量。
无论何时术语“烷基”或“芳基”或它们的任何前缀词根(prefix roots)出现在取代基(例如，芳基烷氧基芳氧基)的名称中，它们应解释为包括上述对于“烷基”和“芳基”的那些限定。应该承认烷基取代基与具有一个或多个不饱和度的那些在官能上等价。指定数目的碳原子(例如C1-6)应独立地指烷基部分的碳原子数目或更大取代基(其中术语“烷基”以其前缀根出现)的烷基部分。同样地，术语“C2-C8亚烯基”和“C2-C8亚炔基”指具有2-8个碳原子以及分别具有至少一个碳碳双键或碳碳叁键的基团。
本文使用的术语“氧代”应指取代基＝O。
本文使用的术语“卤素(halogen)”或“卤素(halo)”应包括碘、溴、氯和氟。
本文使用的术语“巯基”应指取代基-SH。
本文使用的术语“羧基”应指取代基-COOH。
本文使用的术语“氰基”应指取代基-CN。
本文使用的术语“氨基磺酰基”应指取代基-SO2NH2。
本文使用的术语“氨基甲酰基”应指取代基-C(O)NH2。
本发明还提供可用作制备式(I)化合物的中间体的化合物的合成方法，以及式(I)化合物的制备方法。
例如，醛(1)可以与苯二胺化合物(2)在溶剂如乙醇中，在25-100℃的温度下缩合，生成产物苯并咪唑(3)，其中中间体加合物发生自发氧化(路线1)。
路线1 在另一个实施方案中，醛(1)(路线2)的合成可以通过在碱如NMM的存在下，在溶剂如THF中用氯甲酸异丁酯处理酸(4)，然后用N-甲基-O-甲基羟胺处理，形成中间体O，N-二甲基酰胺。可以分离酰胺，并在0℃下在THF或乙醚中用LAH处理，得到醛(1)。或者，醛(1)的合成可以通过在碱如NMM的存在下，在溶剂如THF中用氯甲酸异丁酯处理酸(4)，然后用硼氢化钠处理，得到中间体伯醇。可以用试剂如DMSO/草酰氯氧化该醇，然后在-78℃-0℃下在DCM中用三乙胺处理，得到醛(1)。或者，醇中间体可以通过在0℃-25℃下，在DCM中用重铬酸吡啶盐处理予以氧化，得到醛(1)。
路线2 路线3描述了取代的亚芳基二胺的合成。
路线3 因此，在一个实施方案中，可以在作为碱的碱金属碳酸盐存在下，在溶剂如DMF或乙腈中，用卤代烷或其它烷基化剂R26-LG1将邻氟硝基苯酚如(5)烷基化。LG1可以表示离核基团如碘化物、溴化物、甲磺酸盐等。在该转变过程中，R28是烷基或能够在带有LG1的碳上进行亲核取代的基团。可以在叔胺碱的存在下，在溶剂如THF中，在0℃-100℃的温度下，用胺R4-NH2处理中间体，得到(6)。可以通过在中性或酸性乙醇中，在25℃-100℃的温度下，用氯化亚锡处理来进行(6)中硝基的还原，得到苯胺(7)。或者，可以通过在溶剂如乙醇中，在25℃-80℃的温度下，用贵金属催化剂如木炭载钯和氢源如气体氢或甲酸铵处理将(6)还原，得到(7)。同样，可以使用二氟硝基芳香族化合物(8)，(8)中一个氟位于硝基的邻位。用一当量的胺R4-NH2处理(8)，得到邻位氟的优先置换。中间体的第二个氟可以用醇R28-OH置换，得到(9)。该例中，R28可以是烷基或芳基。如上所述用氯化亚锡还原(9)中的硝基，得到(7)。
路线4描述了苯基醚(11)的合成。
路线4 因此，在一个实施方案中，可以在溶剂如THF中，在-70℃-25℃的温度下，用醇R29-OH、三苯膦或其它适合的膦试剂、以及偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)或偶氨二甲酸二异丙酯(DIAD)处理酚(10)，得到(11)。R29为烷基，优选本质上为伯或叔烷基。或者，可以在碱金属碳酸盐或其它合适碱的存在下，在溶剂如DMF、丙酮或乙腈中，在25℃-100℃的温度下，用R29-LG1处理(10)，得到(11)。
下述的是本发明的方法中使用的通用过程。
通用实验LC-MS数据是在装备有2487双波长检测器和Leap TechnologiesHTS PAL自动取样器的Waters 600上，采用YMC Combiscreen ODS-A 50×4.6mm柱，使用梯度洗脱得到的。三分钟梯度是从25％B(97.5％乙腈，2.5％水，0.05％TFA)和75％A(97.5％水，2.5％乙腈，0.05％TFA)到100％B进行的。MS为Micromass ZMD设备。如果没有特别说明，所有数据均是以正模式(positive mode)得到的。1H NMR是在Varian 300MHz光谱仪上得到的。
实施例中使用的缩写如下所述APCI＝大气压化学电离BOC＝叔丁氧羰基BOP＝六氟磷酸(1-苯并三唑基氧基)三(二甲胺基)鏻d ＝天DIAD＝偶氮二甲酸二异丙酯DCC＝二环己基碳二亚胺DCM＝二氯甲烷DIEA＝二异丙基乙胺DMF＝N，N-二甲基甲酰胺DMPU＝1，3-二甲基亚丙基脲DMSO＝二甲亚砜EDC＝1-乙基-3-(3-二甲胺基丙基)-碳二亚胺盐酸盐EDTA＝乙二胺四乙酸ELISA＝酶联免疫吸附分析ESI＝电喷雾电离ether＝乙醚EtOAc＝乙酸乙酯FBS＝胎牛血清g ＝克h ＝小时
HBTU＝O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸盐HMPA＝六甲基磷酰三胺HOBt＝1-羟基苯并三唑Hz ＝赫兹i.v.＝静脉内的kD ＝千道尔顿L ＝升LAH＝氢化铝锂LDA＝二异丙基氨化锂LPS＝脂多糖M ＝摩尔的m/z＝质荷比mbar＝毫巴MeOH＝甲醇mg ＝毫克min＝分钟mL ＝毫升mM＝毫摩尔的mmol＝毫摩尔mol＝摩尔mp＝熔点MS＝质谱N ＝正常NMM＝N-甲基吗啉，4-甲基吗啉NMR＝核磁共振光谱法p.o.＝口服PBS＝磷酸盐缓冲的盐水溶液PMA＝乙酸肉豆蔻佛波醇ppm＝百万分率psi＝磅每平方英寸
Rf＝相对TLC迁移率rt ＝室温s.c.＝皮下的SPA＝闪烁亲近测定法TEA＝三乙胺TFA＝三氟乙酸THF＝四氢呋喃THP＝四氢吡喃基TLC＝薄层色谱法Tf＝保留时间因此，在一个实施方案中，通过本文描述的合成路线合成下列化合物。
通用过程通用过程I合成取代的醛步骤A将取代的酸的CH2Cl2溶液(0.05-1M)冷却到-15℃并用NMM(1-2当量)和氯甲酸异丁酯(1-2当量)处理。在-15℃下将得到的反应混合物搅拌15分钟，并用固体N，O-二甲基羟胺盐酸盐(1-2当量)处理。然后使反应混合物缓慢升至室温，并继续搅拌45分钟。用DCM稀释反应混合物，并用水和盐水洗涤。然后干燥溶液，并真空除去溶剂，得到粗酰胺。
步骤B将粗酰胺溶于乙醚中(0.05-1M)并冷却到-20℃。将氢化铝锂的1M THF溶液(0.5-1当量)缓慢加到反应混合物中，并继续在-20℃搅拌0.5-1小时。然后在-20℃下在反应混合物中加入甲醇(1mL)。使反应混合物升至0℃，并用10％硫酸氢钾水溶液处理。将得到的混合物倒入分液漏斗中并用乙酸乙酯萃取。用0.5N HCl、水和盐水洗涤有机层。然后干燥萃取液，并真空除去溶剂，得到粗醛。
通用过程II合成羟基取代的苯二胺步骤A将2-氟硝基芳香族化合物溶于THF中(0.05-1M)，并用伯胺(1-2当量)处理，以及回流6小时。将反应混合物冷却至室温，并真空浓缩。将残余物再溶于EtOAc中。用饱和碳酸氢钠溶液、水和盐水洗涤混合物。然后用硫酸钠干燥有机层，并真空除去溶剂，得到胺。
步骤B将以上得到的2-烷基氨基硝基芳香族化合物溶于乙醇中(0.05-1M)，并用氯化锡(II)二水合物(2-10当量)处理。然后将内容物回流过夜。将反应混合物冷却到室温，并且边搅拌边用饱和碳酸氢钠溶液处理，直到反应混合物的pH为7-8。滤出形成的沉淀物，将滤液浓缩至约1/3体积并用乙酸乙酯稀释。用盐水洗涤有机层并用硫酸钠干燥。真空除去溶剂，得到苯胺。
通用过程III合成烷氧基取代的苯二胺将2-氟-4-羟基硝基芳香族化合物溶于DMF中(0.05-1M)并用卤代烷或甲磺酸酯(1.2-1.5当量)和K2CO3或Cs2CO3(2当量)处理，并在70-90℃加热6-12小时。将反应混合物冷却至室温并用水稀释，得到均相混合物。用EtOAc萃取溶液两次。将有机层合并，并用水、盐水洗涤。然后用硫酸钠干燥有机相并真空除去溶剂，得到4-烷氧基硝基芳香族化合物。
步骤B室温下将以上得到的4-烷氧基硝基芳香族化合物溶于THF中(0.05-1M)并用伯胺(1-2当量)处理。反应结束后，真空浓缩反应混合物。将残余物再溶于EtOAc中。用饱和碳酸氢钠溶液、水和盐水洗涤混合物。然后用硫酸钠干燥有机相，并真空除去溶剂，得到硝基胺。
步骤C将硝基胺化合物溶于乙醇中(0.05-1M)并加入10％Pd/C(100mg/mmol)。在室温、1atm压力下将反应混合物氢化。将内容物滤过硅藻土(Celite)垫，并真空除去溶剂，得到二胺。
或者，如通用过程II(步骤B)所述，用氯化锡(II)还原硝基胺化合物。
通用过程IV合成2-取代的苯并咪唑将邻苯二胺化合物和醛化合物(各自约等摩尔量)在乙醇中混合(0.05-2M)并将溶液回流过夜。然后将内容物冷却至室温并真空浓缩。通过硅胶柱色谱法，用5％甲醇/氯仿洗脱，对得到的残余物加以纯化，得到希望的苯并咪唑产物。
通用过程V酚的烷基化将酚在干THF中(0.05-1M)搅拌并用醇(1-2当量)和三苯膦(1-2当量)处理。将混合物冷却至0℃并用偶氮二甲酸二异丙酯(DIAD)或偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)(1-2当量)处理。使反应混合物升至室温并在氮气氛下搅拌过夜。用水稀释反应混合物，并用EtOAc萃取混合物。用水和盐水洗涤有机层并用Na2SO4干燥。真空除去溶剂并用硅胶柱色谱法纯化所得的产物，得到烷基化的酚。
实施例1 将BOC-D-(O-苄基)酪氨酸(557mg)的CH2Cl2(10mL)溶液冷却至-15℃，并用N-甲基吗啉(0.5mL)和氯甲酸异丁酯(0.3mL)处理。将所得的反应混合物在-15℃搅拌15分钟并用固体N，O-二甲基羟胺盐酸盐(300mg)处理。然后使反应混合物逐渐升至室温并继续搅拌45分钟。用CH2Cl2(10mL)稀释反应混合物，用水(15mL)和盐水(15mL)洗涤。然后用硫酸钠干燥溶液，过滤并真空除去溶剂，得到粗酰胺(760mg)，不进一步纯化直接用于下一步骤。
将以上得到的粗酰胺溶于乙醚(5mL)中并冷却至-20℃。-20℃下，在反应混合物中缓慢加入氢化铝锂的1M THF溶液(4mL)并继续搅拌45分钟。然后-20℃下在反应混合物中加入甲醇(1mL)。使反应混合物升至0℃并用10％硫酸氢钾水溶液(10mL)处理。将所得的混合物倒入分液漏斗中并用乙酸乙酯萃取(2×10mL)，分层。用0.5NHCl(20mL)、水(20mL)和盐水(20mL)洗涤有机层。然后用硫酸钠干燥萃取液，过滤并真空除去溶剂，得到粗醛(520mg)，不进一步纯化直接使用。
将3-氟-4-硝基苯酚(800mg)溶于THF(10mL)中，并加入正丁胺(1mL)，回流6小时。将反应混合物冷却至室温，并真空浓缩。将残余物再溶于乙酸乙酯(25mL)中并放入分液漏斗中。用饱和碳酸氢钠溶液(20mL)、水(20mL)和盐水(20mL)洗涤内容物。然后用硫酸钠干燥萃取液，过滤并真空除去溶剂，得到粗胺(950mg)，不进一步纯化直接使用。
将上面得到的3-正丁基氨基-4-硝基苯酚(450mg)溶于乙醇(10mL)中并用氯化锡(II)二水合物(3g)处理。然后将内容物回流过夜。然后将反应混合物冷却至室温，边搅拌边加入饱和碳酸氢钠溶液，直到反应混合物的pH为7-8。滤出形成的沉淀物，并将滤液浓缩至原始体积的约1/3，并用乙酸乙酯(20)稀释，分层。用盐水(10mL)洗涤有机层并用硫酸钠干燥。过滤并真空除去溶剂，得到粗苯胺(300mg)，不进一步纯化直接使用。
将260mg二氨基苯酚和355mg上面由BOC-D-(O-苄基)酪氨酸得到的氨基醛溶于乙醇(10mL)中，并将溶液回流过夜。然后将内容物冷却至室温并真空浓缩。将得到的残余物通过硅胶柱并用5％甲醇/氯仿洗脱，得到240mg希望的苯并咪唑产物。
将上面形成的170mg苯并咪唑产物溶于干THF(5mL)中并加入3-二乙胺基-1-丙醇(150μL)和三苯膦(262mg)。将内容物冷却至0℃并加入偶氮二甲酸二异丙酯(200μL)。使反应混合物升至室温，并在氮气氛下搅拌过夜。用乙酸乙酯/水(5mL/3mL)稀释反应混合物，分层。进一步用乙酸乙酯(5mL)萃取水层。将有机层合并，并用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥。过滤溶液，并真室除去溶剂。通过硅胶柱色谱法，使用三乙胺/甲醇/CHCl3/己烷(1∶2∶40∶40)作为洗脱剂纯化得到的粗产物，得到120mg实施例1的化合物。LCTr 1.84min；MSm/z 629.4(M+1)。
实施例2 将40mg实施例1的化合物在二氧六环(1mL)中的4M HCl中搅拌过夜。然后真空除去溶剂，用乙醚将得到的残余物弄碎并搅拌。滗出乙醚并再重复两次乙醚洗涤。然后真空干燥产物，得到实施例2的胺盐，浅黄色固体(30mg)。LCTr 1.65min；MSm/z 529.4(M+H)。
实施例3 0℃下，在3-二乙胺基-1-丙醇(6.0mmol)、TEA(6.0mmol)在无水DCM(6mL)的搅拌的溶液中滴加MsCl(6.0mmol)，在相同温度下搅拌混合物10分钟，再在室温下搅拌1小时。真空除去溶剂后，根据通用过程III(步骤A)，将固体残余物与4-氯-3-硝基苯酚(5.0mmol)和K2CO3(10mmol)的无水DMF(10mL)溶液混合。使用硅胶柱色谱法，用5％MeOH/DCM作为洗脱剂纯化粗产物，得到2-氯-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)硝基苯(1.3g)。
在一个密封试管中，加入以上得到的烷氧基硝基化合物(1mmol)，以及正丁胺(2mL)和氯化亚铜(I)(1mmol)，并在80℃加热过夜。将反应混合物冷却至室温，用水(10mL)稀释，并用EtOAc萃取(2×10mL)。将有机层合并，然后用水和盐水洗涤，并用*Na2SO4干燥。真空除去溶剂，得到产物2-正丁基氨基-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)硝基苯(300mg)，不纯化直接用于进一步转化。
将以上得到的硝基胺(0.8mmol)溶于EtOH(5mL)中，并加入10％Pd/C(80mg)。根据通用过程III(步骤C)将反应混合物氢化，得到产物2-正丁基氨基-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯胺(200mg)。
根据通用过程IV，使用以上形成的二胺(0.5mmol)和由BOC-D-(O-苄基)酪氨酸还原得到的醛(如实施例1所述)(0.5mmol)的混合物，得到产物2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-叔丁氧羰基氨基-1-乙基]-3-丁基-6-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑(100mg)。LCTr 2.15min；MSm/z 629.7(M+H)。
实施例4 将40mg实施例3的产物在二氧六环(1mL)中的4M HCl中搅拌过夜。然后真空除去溶剂，并用乙醚将得到的残余物弄碎并搅拌。滗出乙醚并再重复两次乙醚洗涤。然后真空干燥产物，得到盐酸盐形式的胺2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-氨基-1-乙基]-3-丁基-6-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑(30mg)。LCTr 2.02min；MSm/z 529.7(M+H)。
实施例5 根据通用过程III(步骤A)，在3-氟-4-硝基苯酚(2mmol)和3-二乙胺基-1-丙醇的甲磺酸酯(2.5mmol)的DMF(4mL)溶液中加入K2CO3(4mmol)并加热。使用硅胶柱色谱法纯化后，得到产物2-氟-4-(3-二乙胺基-1-丙氧基)硝基苯。
将以上得到的硝基化合物(1.5mmol)溶于DMF(4mL)中，并加入碳酸铵(500mg)。然后在80℃加热反应混合物48小时。EtOAc(2×10ml)。将有机层合并，然后用水和盐水洗涤，并用Na2SO4干燥。真空除去溶剂，得到2-硝基-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯胺(300mg)，不进行纯化直接用于进一步转化。
将以上得到的硝基苯胺(0.8mmol)溶于EtOH(5mL)并加入10％Pd/C(80mg)。根据通用过程III(步骤C)将反应混合物氢化，得到产物2-氨基-4-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯胺(200mg)。
根据通用过程IV，使用以上形成的二胺(0.5mmol)和由BOC-D-(O-苄基)酪氨酸还原得到的醛(如实施例1所述)(0.5mmol)的混合物，得到产物2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-叔丁氧羰基氨基-1-乙基]-6-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑(90mg)。LCTr 1.91min；MSm/z573.6(M+H)。
实施例6 将30mg实施例3的产物在二氧六环(1mL)中的4M HCl中搅拌过夜。然后真空除去溶剂，并用乙醚将得到的残余物弄碎并搅拌。滗出乙醚，并再重复两次乙醚洗涤。然后真空干燥产物，得到2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-氨基-1-乙基]-6-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑(20mg)。LCTr 1.80min；MSm/z 473.6(M+H)。
实施例7 用K2CO3(20mmole)处理Boc-3-Tyr-OH(4.2mmol)和溴化苄(10mmol)的DMF(20mL)溶液，并在室温下搅拌20小时。用乙醚(150ml)稀释反应混合物并用水(2×100ml)和盐水(1×50ml)洗涤内容物，并用Na2SO4干燥。除去溶剂后，得到浅黄色油状物，将其溶于THF(20mL)中。在反应混合物中加入2N NaOH水溶液(20ml)并搅拌过夜。反应结束后，加入乙醚(100ml)和水(50ml)，并剧烈搅拌。弃掉乙醚层，加入柠檬酸使水层呈酸性，用乙醚(3×40ml)萃取产物并干燥(Na2SO4)。真空除去溶剂，得到产物Boc-(O-苄基)-3-Tyr-OH(1.6g)，白色固体。
将Boc-(O-苄基)-3-Tyr-OH(600mg)的CH2Cl2(10mL)溶液冷却至-15℃，并用N-甲基吗啉(0.5mL)和氯甲酸异丁酯(0.3mL)处理。将所得的反应混合物在-15℃搅拌15分钟并用固体N，O-二甲基羟胺盐酸盐(300mg)处理。其余步骤如实施例1所述。得到的粗酰胺(730mg)不进一步纯化直接用于下一步骤。
根据实施例1所述的步骤，使用氢化铝锂在THF中的1M溶液(4mL)，将乙醚(5mL)中的以上得到的粗酰胺转变成相应的醛。粗醛(500mg)不进一步纯化直接使用。
室温下用正丁胺(2.4当量)处理2-氟-4-(3-二乙胺基-1-丙氧基)硝基苯(2mmol；如实施例5制备)的THF(5mL)溶液。反应结束后，真空浓缩反应混合物。将残余物再溶于EtOAc(10mL)中，用饱和碳酸氢钠溶液、水和盐水洗涤。然后用硫酸钠干燥有机相，并真空除去溶剂，得到产物2-正丁基氨基-4-(3-二乙胺基-1-丙氧基)硝基苯(580mg)，不进一步纯化直接用于进一步转化。
将以上得到的硝基胺(1.0mmol)溶于EtOH(5mL)中，并加入10％Pd/C(100mg)。根据通用过程III(步骤C)将反应混合物氢化，得到产物2-正丁基氨基-4-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯胺(260mg)。
根据通用过程IV，使用以上得到的二胺(0.5mmol)与由BOC-(O-苄基)-3-Tyr-OH还原得到的醛(如前所述)(0.5mmol)的混合物，得到产物2-[2-(3-苄氧基苯基)-1-(叔丁氧羰基氨基)-1-乙基]-3-丁基-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑(130mg)。LCTr 2.12min；MSm/z630.0(M+H)。
实施例8 将Boc-(OEt)-Tyr-OH(2mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液冷却至-15℃，并用N-甲基吗啉(0.5mL)和氯甲酸异丁酯(0.3mL)处理。将所得的反应混合物在-15℃搅拌15分钟并用固体N，O-二甲基羟胺盐酸盐(300mg)处理。其余步骤如实施例1所述。得到的粗酰胺(70mg)不进一步纯化直接用于下一步骤。
根据实施例1所述的步骤，使用氢化铝锂在THF中的1M溶液(4mL)，将乙醚(5mL)中的以上得到的粗酰胺转变成相应的醛。粗醛(500mg)不进一步纯化直接使用。
根据通用过程IV，使用以上形成的醛(0.5mmol)和2-正丁基氨基-4-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯胺(0.5mmol；如实施例7所述合成)的混合物，得到产物2-[(1R)-2-(4-乙氧基苯基)-1-(叔丁氧羰基氨基)-1-乙基]-3-丁基-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑(120mg)。LCTr1.98min；MSm/z 568.0(M+H)。
实施例9 室温下在Boc-D-Tyr-OH(2mmol)和溴化苄(2.4mmol)的DMF(10mL)溶液中加入DIEA(3mmol)并搅拌。反应结束后，在反应混合物中加入4-氯苯乙醇(2.2mmol)，然后加入三苯膦(2.2mmol)和DIAD(2.4mmol)。处理过程如通用过程V所述。通过硅胶柱色谱法纯化粗产物，得到Boc-D-(O-4-氯苯乙基)-Tyr-OBn(800mg)。
将以上形成的苄基酯(1mmol)溶于乙酸乙酯(10mL)中，并用5％Pd/C处理。在1atm下将反应混合物氢化10-20分钟。得到产物Boc-D-(O-4-氯苯乙基)-Tyr-OH(360mg)，不进行纯化直接用于进一步转化。
将Boc-D-(O-4-氯苯乙基)-Tyr-OH(1mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液冷却至-15℃，并用N-甲基吗啉(0.5mL)和氯甲酸异丁酯(0.3mL)处理。将所得的反应混合物在-15℃搅拌15分钟并用固体N，O-二甲基羟胺盐酸盐(300mg)处理。其余步骤如实施例1所述。得到的粗酰胺(400mg)不进一步纯化直接用于下一步骤。
根据实施例1所述的步骤，使用氢化铝锂在THF中的1M溶液(4mL)，将乙醚(5mL)中的以上得到的粗酰胺转变成相应的醛。粗醛(300mg)不进一步纯化直接使用。
根据通用过程IV，使用以上形成的醛(0.5mmol)和2-正丁基氨基-4-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯胺(0.5mmol；如实施例7所述合成)的混合物，得到产物2-[(1R)-2-(4-(4-氯)苯乙氧基)苯基]-1-(叔丁氧羰基氨基)-1-乙基]-3-丁基-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑(150mg)。LCTr 2.24min；MSm/z 678.0(M+H)。
实施例10 室温下用3-二乙胺基-1-丙胺(2.4mmol)处理2-氟-4-(3-二乙胺基-1-丙氧基)硝基苯(2mmol；如实施例5所述制备)的THF(5mL)溶液。反应结束后，真空浓缩反应混合物。将残余物再溶于EtOAc(10mL)中，用饱和碳酸氢钠溶液、水和盐水洗涤。然后用硫酸钠干燥有机相并真空除去溶剂，得到产物2-(3-二乙胺基-1-丙基氨基)-4-(3-二乙胺基-1-丙氧基)硝基苯(620mg)，不进一步纯化直接用于进一步转化。
将以上得到的硝基胺(1.0mmol)溶于EtOH(5mL)中，并加入10％Pd/C(100mg)。根据通用过程III(步骤C)将反应混合物氢化，得到产物2-(3-二乙胺基-1-丙基氨基)-4-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯胺(300mg)。
根据通用过程IV，使用以上形成的二胺(0.5mmol)和由BOC-(O-苄基)-Tyr-OH还原得到的醛(0.5mmol；如前所述)的混合物，得到产物2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-(叔丁氧羰基氨基)-1-乙基]-3-(3-二乙胺基-1-丙基)-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑(160mg)。LCTr1.90min；MSm/z 687.0(M+H)。
实施例11 室温下用乙胺(4mmol)处理2-氟-4-(3-二乙胺基-1-丙氧基)硝基苯(2mmol；如实施例5所述制备)的THF(5mL)溶液。反应结束后，真空浓缩反应混合物。将残余物再溶于EtOAc(10mL)中，用饱和碳酸氢钠溶液、水和盐水洗涤。然后用硫酸钠干燥有机相并真空除去溶剂，得到产物2-(乙基氨基)-4-(3-二乙胺基-1-丙氧基)硝基苯(520mg)，不进一步纯化直接用于进一步转化。
将以上得到的硝基胺(1.0mmol)溶于EtOH(5mL)中，并加入10％Pd/C(100mg)。根据通用过程III(步骤C)将反应混合物氢化，得到产物2-(乙基氨基)-4-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯胺(240mg)。
根据通用过程IV，使用以上形成的二胺(0.5mmol)和由BOC-(O-苄基)-Tyr-OH还原得到的醛(0.5mmol；如前所述)的混合物，得到产物2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-(叔丁氧羰基氨基)-1-乙基]-3-乙基-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑(140mg)。LCTr 2.01min；MSm/z602.0(M+H)。
实施例12 将50mg实施例10的产物在二氧六环(1mL)中的4M HCl中搅拌过夜。然后真空除去溶剂，并用乙醚弄碎得到的残余物并搅拌。滗出乙醚，并再重复两次乙醚洗涤。然后真空干燥产物，得到盐酸盐形式的2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-氨基-1-乙基]-3-(3-二乙胺基-1-丙基)-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑(35mg)。LCTr 0.85min；MSm/z587.0(M+H)。
实施例13 室温下用苄基胺(2.4mmol)处理2-氟-4-(3-二乙胺基-1-丙氧基)硝基苯(2mmol；如实施例5所述制备)的THF(5mL)溶液。反应结束后，真空浓缩反应混合物。将残余物再溶于EtOAc(10mL)中，用饱和碳酸氢钠溶液、水和盐水洗涤。然后用硫酸钠干燥有机相并真空除去溶剂，得到产物2-(苄基氨基)-4-(3-二乙胺基-1-丙氧基)硝基苯(620mg)，不进一步纯化直接用于进一步转化。
将以上得到的硝基胺(1mmol)溶于乙醇(10mL)中，并用氯化锡(II)二水合物(5mmol)处理。根据通用过程II(步骤B)将内容物回流过夜。得到的粗苯胺(280mg)不进行纯化直接用于进一步转化。
根据通用过程IV，使用以上形成的二胺(0.5mmol)和由BOC-(O-苄基)-Tyr-OH还原得到的醛(0.5mmol；如前所述)的混合物，得到产物2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-(叔丁氧羰基氨基)-1-乙基]-3-苄基-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑(160mg)。LCTr 2.04min；MSm/z664.0(M+H)。
实施例14 将45mg实施例13的产物在二氧六环(1mL)中的4M HCl中搅拌过夜。然后真空除去溶剂，并用乙醚弄碎得到的残余物并搅拌。滗出乙醚，并再重复两次乙醚洗涤。然后真空干燥产物，得到2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-氨基-1-乙基]-3-苄基-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑(30mg)。LCTr 1.97min；MSm/z 564.0(M+H)。
实施例15
室温下用丙胺(3mmol)处理2-氟-4-(3-二乙胺基-1-丙氧基)硝基苯(2mmol；如实施例5所述制备)的THF(5mL)溶液。反应结束后，真空浓缩反应混合物。将残余物再溶于EtOAc(10mL)中，用饱和碳酸氢钠溶液、水和盐水洗涤。然后用硫酸钠干燥有机相并真空除去溶剂，得到产物2-(丙基氨基)-4-(3-二乙胺基-1-丙氧基)硝基苯(540mg)，不进一步纯化直接用于进一步转化。
将以上得到的硝基胺(1.0mmol)溶于EtOH(5mL)中，并加入10％Pd/C(100mg)。根据通用过程III(步骤C)将反应混合物氢化，得到产物2-(丙基氨基)-4-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯胺(270mg)。
根据通用过程IV，使用以上形成的二胺(0.5mmol)和由BOC-(O-苄基)-Tyr-OH还原得到的醛(0.5mmol；如前所述)的混合物，得到产物2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-(叔丁氧羰基氨基)-1-乙基]-3-丙基-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑(150mg)。LCTr 2.1min；MSm/z616.0(M+H)。
实施例16 将45mg实施例15的产物在二氧六环(1mL)中的4M HCl中搅拌过夜。然后真空除去溶剂，并用乙醚弄碎得到的残余物并搅拌。滗出乙醚，并再重复两次乙醚洗涤。然后真空干燥产物，得到盐酸盐形式的2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-氨基-1-乙基]-3-丙基-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑(35mg)。LCTr 1.82min；MSm/z 516.0(M+H)。
生物测定使用以下的测定法，鉴定式(1)中有效与RAGE结合，并因此可用作RAGE的调制剂，优选拮抗剂的化合物。该方法也在该日提交的共同待审美国专利申请09/799,152(Attorney Docket TTP2000-02)中描述和要求保护。
通用测定过程将100mM碳酸氢钠/碳酸钠缓冲液(pH 9.8)中的S100b、β-淀粉状蛋白和CML(500ng/100μL/孔)加载到NUNC Maxisorp平底96孔微滴定板的孔中。将板在4℃保温过夜。从孔中抽气并用含有1％牛血清白蛋白(BSA)的50mM咪唑缓冲盐水(pH 7.2)(含有1mMCaCl2/MgCl2)(300μL/孔)在37℃处理2小时。从孔中抽气并用155mMNaCl pH 7.2缓冲盐水洗涤三次(400μL/孔)，并在各次洗涤之间浸泡10秒。
将试验化合物溶于纳米纯(nanopure)水中(浓度10-100μM)。可以使用DMSO作为助溶剂。在各孔中加入试验化合物在2％DMSO中的溶液25μL，以及75μL sRAGE(4.0×10-4mg/mL FAC)，并在37℃温育试样1小时。用155mM NaCl pH 7.2缓冲盐水将孔洗涤三次，并在各次洗涤之间浸泡10秒。
非放射性结合通过在含有0.2％牛血清白蛋白和1mM CaCl2的50mM咪唑缓冲盐水(pH7.2)5mL中加入10μL生物素化山羊F(ab’)2抗小鼠IgG.(8.0×10-4mg/mL，FAC)10μL碱性磷酸酯酶Sterptavidin(3×10-3mg/mL FAC)10μL抗sRAGE的多克隆抗体(FAC 6.0×10-3mg/mL)来进行。将混合物在37℃温育30分钟。在各孔中加入100μL复合物并在室温下进行温育1小时。用洗涤缓冲液将孔洗涤3次，并在各次洗涤之间浸泡10秒。加入1M二乙醇胺中的1mg/mL(pNPP)(pH用HCl调至9.8)100μL。室温下在黑暗中显色1-2小时。用10μL终止液(50％乙醇中0.5N NaOH)结束反应，并使用微板读数器，用分光光度法测定了405nm的吸光率。
根据上述测定法，试验了下列式1化合物。
ELISA测定的IC50(μM)表示50％信号被抑制时的化合物浓度。
NA＝ELISA测定数据不能提供解释
本发明进一步提供含有本发明的RAGE调节化合物的药物组合物。本文使用的术语“药物组合物”指一种组合物，它以含有常规无毒载体、稀释剂、助剂、载体等的单位剂量制剂形式，例如口服、局部、肠胃外、通过吸入喷雾或经直肠等方式给用到哺乳动物个体体内。本文使用的术语“肠胃外”包括皮下注射、静脉内、肌肉内、脑池内注射、或通过注入技术。
含有本发明的化合物的药物组合物可以以适合口服的形式，例如，以片剂、锭剂(troches)、糖锭(lozenges)、水性或油性悬浮液、可分散粉末或颗粒、乳剂、硬或软胶囊、或糖浆或酏剂的形式。打算口服使用的组合物可以通过任何公知的方法调制，并且这样的组合物可以含有选自甜味剂、调味剂、着色剂、和防腐剂的一种或多种药剂，以提供制药上雅致和美味的制剂。片剂可以含有与适合片剂制造的无毒可药用赋形剂混合的有效成分。这些赋形剂可以是，例如，惰性稀释剂如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；成粒和崩解剂如玉米淀粉或藻酸；粘合剂如淀粉、明胶或阿拉伯树胶；和润滑剂如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。片剂可以是未包衣的或它们也可以通过公知的技术包衣以延迟在胃肠道中的崩解和吸收，从而提供长期的持续作用。例如，可以使用延时物质如甘油单硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯。它们也可以通过美国专利4,356,108、4,166,452和4,265,874中描述的技术进行包衣，以形成控释渗透性治疗片剂，这些专利文献在此并入本文作参考。
口服使用的制剂也可以是以硬明胶胶囊的形式，其中有效成分与惰性固体稀释剂如碳酸钙、磷酸钙或高岭土混合，或者是以软明胶胶囊的形式，其中有效成分与水或油介质如花生油、液体石蜡或橄榄油混合。
水性悬浮液可以含有与适合制造水性悬浮液的赋形剂混合的有效化合物。这样的赋形剂为悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯基吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯树胶；分散或湿润剂可以是天然存在的磷脂如卵磷脂、或环氧烷与脂肪酸的缩合产物如聚氧乙烯硬脂酸酯、或环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物如十七环氧乙烷鲸蜡醇(heptadecaethyl-eneoxycetanol)、或环氧乙烷与由脂肪酸和己糖醇衍生的偏酯的缩合产物如聚氧乙烯山梨醇单油酸酯、或环氧乙烷与由脂肪酸与己糖醇脱水物衍生的偏酯的缩合产物如聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯。水性悬浮液可以含有一种或多种着色剂、一种或多种调味剂、以及一种或多种甜味剂如蔗糖或糖精。
油性悬浮液可以通过将有效成分悬浮在植物油如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油中，或者悬浮在矿物油如液体石蜡中进行配制。油性悬浮液可以含有增稠剂如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可以加入甜味剂如上述的那些以及调味剂，以提供美味的口服制剂。这些组合物可以通过加入抗氧剂如抗坏血酸来保存。
适于通过加水调制水性悬浮液的可分散粉末和颗粒提供与分散剂或湿润剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂混合的有效成分。合适的分散剂或湿润剂和悬浮剂为上述已经列举的那些。也可以存在另外的赋形剂，例如甜味剂、调味剂和着色剂。
本发明的药物组合物也可以是以水包油乳剂的形式。油相可以是植物油如橄榄油或花生油，或者矿物油如液体石蜡，或者它们的混合物。合适的乳化剂可以是天然存在的树胶如阿拉伯树胶或黄蓍胶，天然存在的磷脂类如大豆、卵磷脂，衍生自脂肪酸和己醇糖脱水物的酯或偏酯如失水山梨糖醇单油酸酯，以及所述的偏酯与环氧乙烷的缩合产物如聚氧乙烯失水山梨糖醇单油酸酯。乳剂也可以含有甜味剂和调味剂。
糖浆和酏剂可以用甜味剂如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖进行配制。这样的制剂也可以含有缓和剂、防腐剂和调味及着色剂。药物组合物可以是无菌可注射水性或油性悬浮液的形式。该悬浮液可以根据公知的方法，使用上述的合适的分散或湿润剂和悬浮剂进行配制。无菌可注射制剂也可以是在无毒肠胃外用容许的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液，例如1，3-丁二醇溶液。在容许的可使用的载体和溶剂中，有水、林格液、和等渗氯化钠溶液。另外，无菌非挥发油通常用作溶剂或悬浮介质。为此，可使用任何品牌的非挥发油，使用合成甘油单酯和甘油二酯。此外，脂肪酸如油酸可以用于可注射液的调制。
该组合物也可以是以本发明的化合物的用于直肠给药的栓剂形式。这些组合物可以通过将药物与合适的常温为固体但在直肠温度下为液体的并且将在直肠中融化而释放药物的无刺激赋形剂混合进行调制。这样的物质例如包括可可脂和聚乙二醇。
对于局部应用，期待有含有本发明化合物的霜剂、油膏、冻胶、溶液或悬浮液等。为此应用目的，局部应用应包括洗口药和含漱剂。本发明的化合物也可以以脂质体输送体系的形式给用，如小的单层囊泡或大的单层囊泡以及多层囊泡。脂质体可以由多种磷脂如胆固醇、十八烷胺或磷脂酰胆碱制成。
本发明也提供本发明的前药。
本发明的化合物的可药用盐(结构中存在碱性或酸性基团)也包括在本发明的范围内。术语“可药用盐”指本发明化合物的无毒盐，一般可以通过将游离碱与合适的有机或无机酸反应或将酸与合适的有机或无机碱反应来制备。有代表性的盐包括下列盐乙酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、溴化物、乙二胺四乙酸钙(Calcium Edetate)、樟脑磺酸盐(Camsylate)、碳酸盐、氯化物、克拉维酸盐(Clavulanate)、柠檬酸盐、二盐酸化物、乙二胺四乙酸盐、乙二磺酸盐(Edisylate)、丙酸酯十二烷基硫酸盐(Estolate)、乙磺酸盐(Esylate)、富马酸盐、葡萄庚糖酸盐(Gluceptate)、葡萄糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酰基对氨苯砷酸盐(Glycollylarsanilate)、己基间苯二酚盐、哈胺(Hydrabamine)、氢溴酸盐、盐酸盐、羟基萘甲酸盐(Hydroxynaphthoate)、碘化物、羟乙磺酸盐(isethionate)、乳酸盐、乳糖酸盐(Lactobionate)、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基溴化物、甲基硝酸盐、甲基硫酸盐、马来酸一钾、粘液酸盐(Mucate)、萘磺酸盐、硝酸盐、N-甲基葡糖胺盐、草酸盐、双羟萘酸盐(embonate)、棕榈酸盐、泛酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐、多聚半乳糖醛酸盐、钾盐、水杨酸盐、钠盐、硬脂酸盐、碱式乙酸盐、琥珀酸盐、丹宁酸盐、酒石酸盐、8-氯茶碱盐(Teoclate)、甲苯磺酸盐、三乙碘化物(Triethiodide)、三甲基铵盐和戊酸盐、当存在酸性取代基时，如-COOH，可以形成铵盐、吗啉鎓盐、钠盐、钾盐、钡盐、钙盐等用作剂型。当存在碱性基团时，如氨基或碱性杂芳基如吡啶基，可以形成酸盐如盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、硫酸盐、三氟乙酸盐、三氯乙酸盐、乙酸盐、草酸盐、马来酸盐、丙酮酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、富马酸盐、扁桃酸盐、苯甲酸盐、肉桂酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苦味酸盐等，并且包括Journal of PharmaceuticalScience，66，2(1977)1-19页所列的与可药用盐相关的酸。
其它非药用盐可以用于制备本发明的化合物，这构成本发明的进一步的一方面。
另外，本发明的某些化合物可以与水或常用的有机溶剂形成溶剂化物。这样的溶剂化物也包括在本发明的范围内。
因此，在一个进一步的实施方案中，提供含有本发明的化合物、或其可药用盐、溶剂化物或前药，以及一种或多种可药用载体、赋形剂或稀释剂的药物组合物。
本发明的化合物选择性地充当RAGE与单一内源配体结合的调制剂，即β-淀粉状蛋白-RAGE相互作用的选择性调制剂，因此在治疗阿尔茨海默氏病和相关的痴呆方面特别有利。
另外，本发明的化合物充当RAGE与两种或多种内源配体而先于其它配体相互作用的调制剂。这样的化合物在治疗由RAGE介导的相关或不相关病状，即阿尔茨海默氏病和癌症方面是有利的。
另外，本发明的化合物充当RAGE相互及与其各配体结合的调制剂，因此防止了氧化应力的产生以及NF-κB调节的基因如细胞因子IL-1和TNF-α的活化。因此，对于生理配体与RAGE结合的拮抗防止了目标病理生理结果，并可用于处理或治疗疾病，即导致糖尿病并发症的AGE-RAGE相互作用、导致炎症的S100/EN-RAGE/钙粒蛋白-RAGE相互作用、导致阿尔茨海默氏病的β-淀粉状蛋白-RAGE相互作用、以及导致癌症的两性素-RAGE相互作用。
I.RAGE与糖尿病并发症如上所述，本发明的化合物可用于治疗糖尿病的并发症。已经证明最终导致高级糖基化终产物(AGEs)形成的大分子的非酶促糖基化在发炎部位、肾衰竭、存在高血糖症时以及与全身或局部氧化应力有关的其它病状时被增强(Dyer，D.，等，J.Clin.Invest.，912463-2469(1993)；Reddy，S.，等，Biochem.，3410872-10878(1995)；Dyer，D.，等，J.Biol.Chem.，26611654-11660(1991)；Degenhardt，T.，等，Cell Mol.Biol.，441139-1145(1998))。正如在患有与透析有关的淀粉样变性的病人中发现的由AGE-β2-小球蛋白构成的关节淀粉状蛋白中那样(Miyata，T.，等，J.Clin.Invest.，921243-1252(1993)；Miyata，T.，等，J.Clin.Invest.，981088-1094(1996))，或一般如糖尿病患者的脉管系统和组织所说明的(Schmidt，A-M.，等，Nature Med.，11002-1004(1995))，AGEs在脉管系统中的积累可能集中发生。AGEs随时间推移在糖尿病患者体内的逐渐积累暗示内源清除机理在AGE沉积部位不能有效起作用。这样的积累的AGEs能够通过许多机理改变细胞性质。尽管RAGE在正常组织和脉管系统中表面为低水平，但在受体的配体积累的环境中，已经证明RAGE变为向上调节(Li.，J.，等，J.Biol.Chem.，27216498-16506(1997)；Li.，J.，等，J.Biol.Chem.，27330870-30878(1998)；Tanaka，N.，等，J.Biol.Chem.，27525781-25790(2000))。RAGE的表达在糖尿病患者的脉管系统中的内皮细胞、平滑肌细胞和刺激性单核巨噬细胞中增加。另外，细胞培养研究证明AGE-RAGE相互作用引起在脉管动态平衡中起重要作用的细胞性质的变化。
II.RAGE和淀粉样变性病中的细胞机能障碍也如前所述，本发明的化合物可用于治疗淀粉样变性病和阿尔茨海默氏病。RAGE看来是一种与β-片纤维状材料结合的细胞表面受体，与亚基(淀粉状蛋白-β肽、Aβ、糊精、血清淀粉样蛋白A、朊病毒由来的肽)的组成无关(Yan，S.-D.，等，Nature，382685-691(1996)；Yan，S-D.，等，Nat.Med.，6643-651(2000))。淀粉样蛋白的沉积已证明导致RAGE的表达增强。例如，在阿尔茨海默氏病(AD)患者的脑中，RAGE的表达在神经元和神经胶质中增加(Yan，S.-D.，等，Nature，382685-691(1996))。Aβ与RAGE的相互作用的结果看起来在对于神经元和小神经胶质极为不同。尽管小神经胶质由于Aβ-RAGE相互作用被活化，这由细胞因子的游动性和表达的增强反映出来，但早期RAGE介导的神经元活化在随后的时间里被细胞毒性代替。另外关于RAGE在Aβ的细胞相互作用中的角色的证据涉及到当受体被阻碍时，Aβ-诱导的大脑血管收缩的抑制及肽传递通过血脑屏障到达脑实质(Kumar，S.，等，Neurosci.Program，141-#275.19(2000))。RAGE-淀粉样蛋白相互作用的抑制被证明减少细胞RAGE的表达和细胞应力标志(以及NF-κB活化)，并且减少淀粉样蛋白沉积(Yan，S-D，等，Nat.Med.，6643-651(2000))，这暗示着RAGE-淀粉样蛋白相互作用在淀粉样蛋白富集的环境(即使在初期阶段)中以及在淀粉样蛋白积累时的细胞性质的混乱中的作用。
III.RAGE与免疫/炎症反应的传播如上所述，本发明的化合物可用于治疗炎症。例如，S100/钙粒蛋白已证明包括一系列密切相关的钙结合多肽，特征是由一个连接肽连接的两个EF手区域(Schafer，B.，等，TIBS，21134-140(1996)；Zimmer，D.，等，Brain Res.Bull.，37417-429(1995)；Rammes，A.，等，J.Biol.Chem.，2729496-9502(1997)；Lugering，N.，等，Eur.J.Clin.Invest.，25659-664(1995))。尽管S100/钙粒蛋白缺少信号肽，但人们长期以来知道它们可以使用细胞外空间，特别是在慢性免疫/炎症反应的部位，与在囊性纤维化和风湿性关节炎中一样。RAGE是S100/钙粒蛋白家族的多个成员的受体，介导它们对细胞如淋巴细胞和单核巨噬细胞的促炎效果。另外，对于延迟型超敏感反应、IL-10裸小鼠的结肠炎、胶原蛋白诱导的关节炎、以及实验自动免疫脑炎模型的研究暗示RAGE-配体相互作用(假定与S100/钙粒蛋白)在炎症级联中具有近源作用。
IV.RAGE与两性素如上所述，本发明的化合物可用于治疗肿瘤和肿瘤转移。例如，两性素是高活动性群I非组蛋白染色体DNA结合蛋白(Rauvala，H.，等，J.Biol.Chem.，26216625-16635(1987)；Parkikinen，J.，等，J.Biol.Chem.，26819726-19738(1993))，已证明可与RAGE相互作用。已证明两性素促进神经突长出，以及用作蛋白酶复合物在纤维蛋白溶解系统中组装的表面(也已知是对细胞运动性有贡献)。另外，阻碍RAGE产生的局部肿瘤生长抑制效果已经在原发性肿瘤模型(C6神经胶质瘤)、路易斯肺瘤转移模型(Taguchi，A.，等，Nature 405354-360(2000))、以及在表达v-Ha-ras转基因的小鼠中的自发出现的刺瘤(Leder，A.，等，Proc.Natl.Acad.Sci.，879178-9182(1990))中观察到。
两性素是高活动性群I非组蛋白染色体DNA结合蛋白(Rauvala，H.和R.Pihlaskari.1987.Isolation and some characteristics of an adhesivefactor of brain that enhances neurite outgrowth in central neurons.J.Biol.Chem.26216625-16635；Parkikinen，J.，E.Raulo，J.Merenmies，R.Nolo，E.Kajander，M.Baumann和H.Rauvala.1993.两性素，the 30 kDaprotein in a family of HIMG1-type polypeptides.J.Biol.Chem.26819726-19738)。
V.RAGE与勃起功能障碍海绵体小动脉和窦中的平滑肌细胞的松弛导致进入阴茎的血流增加，使海绵体的压力在阴茎勃起时升高到顶点。氧化氮被认为是海绵体平滑肌松弛的主要刺激物(参见Wingard CJ，Clinton W，Branam H，Stopper VS，Lewis RW，Mills TM，Chitaley K.Antagonism of Rho-kinasestimulates rat penile erection via a nitric oxide-independent pathway.Nature Medicine 2001 Jan；7(1)119-122)。RAGE活化通过NADH氧化酶类酶产生氧化物(参见，Yan，S-D.，Schmidt A-M.，Anderson，G.，Zhang，J.，Brett，J.，Zou，Y-S.，Pinsky，D.，和Stern，D.Enhanced cellular oxidantstress by the interaction of advanced glycation endproducts with theirreceptors/binding proteins.J.Biol.Chem.2699889-9887，1994)，从而抑制氧化氮的循环。可能通过由减少细胞内产生AGEs来抑制RAGE信号途径的活化，氧化物的产生将削弱。RAGE阻碍物通过阻碍配体与RAGE的接触，可以促进和助长阴茎勃起。
钙敏化的ρ-激酶路径可能在海绵体的血管收缩中起协同作用，以维持阴茎软弱。ρ-激酶的拮抗导致海绵体压力增加，引起不依赖氧化氮的勃起反应(Wingard等)。由RAGE活化的一种信号机理涉及ρ-激酶家族如cdc42和rac(参见Huttunen HJ，Fages C，Rauvala H.Receptorfor advanced glycation end products(RAGE)-mediated neurite outgrowthand activation of NF-kappaB require the cytoplasmic domain of thereceptor but different downstream signaling pathways.J Biol Chem 1999Jul 9274(28)19919-24)。因此，通过抑制RAGE信号途径抑制ρ-激酶的活化将增强并刺激不依赖氧化氮的阴茎勃起。
因此，根据另一个方面，本发明提供抑制RAGE与生理配体相互作用的方法。在该方面的一个优选实施方案中，本发明提供治疗选自下列的疾病状态的方法急性和慢性炎症、血管通透性、肾病、动脉硬化症、视网膜病、阿尔茨海默氏病、勃起功能障碍和肿瘤侵袭和/或转移，该方法包括向需要的患者给用本发明的化合物，用量优选为药理学有效量，更优选治疗有效量。在优选的实施方案中，使用了至少一种式(I)的化合物，或者单独使用或者与一种或多种已知的治疗剂结合使用。在另一个优选实施方案中，本发明提供预防和/或治疗RAGE介导的人类疾病的方法，治疗包括将一种或多种由该疾病引起的症状缓解到完全治愈该特殊疾病或预防该疾病的发作，该方法包括向需要的人给用治疗有效量的本发明的化合物，优选式(I)的化合物。
在该方法中，影响多少量构成有效量的因素取决于患者的身材和体重、治疗剂的生物降解性、治疗剂的活性、以及其生物利用度。本文使用的表述“需要的患者”包括患有一种或多种上述的疾病或疾病状态或有患病风险的哺乳动物患者，优选人。因此，在本发明的治疗方法的范围中，该方法也由预防性地治疗哺乳动物患者或在开始诊断这样的疾病或疾病状态之前治疗哺乳动物患者的方法构成。
根据本发明的另一方面，本发明的RAGE调制剂用于辅助治疗或与其它已知的治疗剂组合治疗处置。
本文使用的术语“治疗”是指对患者所患特定疾病的宽范围治疗，包括将大多数由该疾病引起的症状的一种缓解到完全治愈该特定疾病或预防该疾病的发作。
下面列出的是辅药和额外的治疗剂的非完全名单，它们可以与本发明的RAGE调制剂结合使用抗癌剂的药理分类1.烷基化剂环磷酰胺、亚硝基脲、卡铂(carboplatin)、顺铂、甲基苄肼2.抗生素博来霉素、柔毛霉素、阿霉素3.抗代谢物甲氨蝶呤、阿糖胞苷、氟尿嘧啶4.植物碱长春碱、长春新碱、依托泊苷(Etoposide)、紫杉醇5.激素它莫西芬、乙酸奥曲肽(Octreotide acetate)、非那雄胺(Finasteride)、氟他胺(Flutamide)6.生物应答调节剂干扰素、白介素，治疗风湿性关节炎(炎症)的药理分类1.止痛剂阿斯匹林2.NSAIDs(非甾族抗炎症药)布洛芬、萘普生、环氟拉嗪3.DMARDs(病情缓解抗风湿药)甲氮喋呤、金制剂、羟基氯喹、柳氮磺胺吡啶4.生物应答调节剂，DMARDs依那西普(Etanercept)、因福利美(Infliximab)、糖皮质激素治疗糖尿病的药理分类1.磺酰脲类甲苯磺丁脲、甲磺吖庚脲、优降糖、格列甲嗪2.双胍类二甲双胍3.杂项口服剂阿卡波糖(Acarbose)、曲格列酮(Troglitazone)4.胰岛素治疗阿尔茨海默氏病的药理分类1.胆碱酯酶四氢氨基吖啶、多奈哌齐(Donepezil)2.抗精神病药氟哌啶醇、硫醚嗪3.抗抑郁药去郁敏、氟西汀(Fluoxetine)、曲唑酮(Trazodone)、帕罗西汀(Paroxetine)4.抗惊厥药卡巴咪嗪、丙戊酸在另一个优选的实施方案中，本发明提供治疗RAGE介导的疾病的方法，该方法包括向需要的患者给用治疗有效量的式(I)化合物，并与选自下列的治疗剂结合使用烷基化剂、抗代谢物、植物碱、抗生素、激素、生物应答调节剂、止痛剂、NSAIDs、DMARDs、糖皮质激素、磺酰脲类、双胍类、胰岛素、胆碱酯酶抑制剂、抗精神病药、抗抑郁药和抗惊厥药。在另一个优选的实施方案中，本发明提供如上所述的本发明的药物组合物，进一步含有选自下列的一种或多种治疗剂烷基化剂、抗代谢物、植物碱、抗生素、激素、生物应答调节剂、止痛剂、NSAIDs、DMARDs、糖皮质激素、磺酰脲、双胍类、胰岛素、胆碱酯酶抑制剂、抗精神病药、抗抑郁药和抗惊厥药。
一般来说，本发明的化合物，优选式(I)的化合物，是以约0.01-500mg/kg被治疗患者的体重的日剂量来给用的，优选的日剂量范围是0.01-200mg/kg，最优选0.1-100mg/kg体重。可以与载体物质结合来制备单一剂量的有效成分的量随被治疗患者和具体的给药方式而变化。例如，用于人口服的制剂可以含有1mg-2g式(I)的化合物，并含有合适且方便量的载体物质，其量可以在占组合物总量的约5-95％的范围内变化。剂量单位形式一般含有约5mg至约500mg有效成分。该剂量必须由临床医生根据被治疗患者的特定临床条件分别决定。因此，将理解任何具体病人的特定剂量水平将取决于多种因素，包括使用的特定化合物的活性、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、给药时间、给用途径、排泄速度、药物组合及进行治疗的具体疾病的严重程度。
尽管参照特定的优选实施方案描述、说明了本发明，但本领域的技术人员将理解在不偏离本发明的精神和范围的情况下可以进行多种变化、改进和替代。例如，由于在患有RAGE介导的疾病的哺乳动物的响应性的变化，上述优选剂量以外的有效剂量可能是合适的。同样地，观察到的特定的药理学反应可以根据并取决于选择的特定有效化合物或是否存在药用载体、以及剂量和采用的给用方式来变化，并且结果的这样的预期变化或差别也符合本发明的目的和实践。
权利要求
1.式(I)的化合物、或其可药用盐、溶剂化物或前药 其中m为0-3的整数；n为0-3的整数；R1包括芳基；R2包括a)式-N(R9R10)、-NHC(O)R9、或-NHC(O)OR9的基团；b)式-OR9的基团；c)式-SR9、-SOR9、-SO2R9、-SO2NHR9、或-SO2N(R9R10)的基团；其中R9和R10独立地包括1)-H；2)-芳基；3)基团，包括a)-C1-6烷基；c)-C1-6烷基芳基； e)-芳基；f)-C1-6烷基；或g)-C1-6烷基芳基；R3和R4独立地包括a)H；b)-芳基；c)-C1-6烷基；d)-C1-6烷基芳基；或e)-C1-6烷氧基芳基；R5、R6、R7和R8独立地包括a)-H；b)-C1-6烷基；c)-芳基；d)-C1-6烷基芳基；e)-C(O)-O-C1-6烷基；f)-C(O)-O-C1-6烷基芳基；g)-C(O)-NH-C1-6烷基；h)-C(O)-NH-C1-6烷基芳基；i)-SO2-C1-6烷基；j)-SO2-C1-6烷基芳基；k)-SO2-芳基；l)-SO2-NH-C1-6烷基；m)-SO2-NH-C1-6烷基芳基；n)-C(O)-C1-6烷基；o)-C(O)-C1-6烷基芳基；p)-Y-C1-6烷基；q)-Y-芳基；r)-Y-C1-6烷基芳基；s)-Y-C1-6亚烷基-NR13R14；或t)-Y-C1-6亚烷基-W-R15；其中Y和W独立地包括-CH2-、-O-、-N(H)-、-S-、-SO2-、-CON(H)-、-NHC(O)-、-NHCON(H)-、-NHSO2-、-SO2N(H)-、-C(O)-O-、-NHSO2NH-、-O-CO-、 或 R16和R17独立地包括芳基、C1-C6烷基、C1-C6烷基芳基、C1-C6烷氧基、或C1-C6烷氧基芳基；R15独立地包括芳基、C1-C6烷基、或C1-C6烷基芳基；或u)卤素、羟基、氰基、氨基甲酰基、或羧基；R11、R12、R13和R14独立地包括氢、芳基、C1-C6烷基、C1-C6烷基芳基、C1-C6烷氧基、或C1-C6烷氧基芳基；R13和R14可以一起形成具有与连接了R13和R14的氮原子键合的式-(CH2)o-X-(CH2)p-的环，和/或R11和R12可以独立地一起形成具有与连接了R11和R12的原子键合的式-(CH2)o-X-(CH2)p-的环，其中o和p独立地为1、2、3或4；X包括直接键、-CH2-、-O-、-S-、-S(O2)-、-C(O)-、-CON(H)-、-NHC(O)-、-NHCON(H)-、-NHSO2-、-SO2N(H)-、-C(O)-O-、-O-CO-、-NHSO2NH-、 或 其中R1、R2、R3、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18和R19中的芳基和/或烷基可以选择性地被取代基取代1-4次，其中所述的取代基或取代的术语所指的基团包括a)-H；b)-Z-C1-6烷基；-Z-芳基；-Z-C1-6烷基芳基；-Z-C1-6烷基-NR20R21；和-Z-C1-6烷基-W-R22；其中Z和W独立地包括-CH2-、-O-、-N(H)-、-S-、-SO2-、-CON(H)-、-NHC(O)-、-NHCON(H)-、-NHSO2-、-SO2N(H)-、-C(O)-O-、-NHSO2NH-、-O-CO-、 或 其中R20和R21独立地包括氢、芳基、C1-C6烷基、C1-C6烷基芳基、C1-C6烷氧基、或C1-C6烷氧基芳基；以及R22、R23和R24独立地包括芳基、C1-C6烷基、C1-C6烷基芳基、C1-C6烷氧基、或C1-C6烷氧基芳基；或c)卤素、羟基、氰基、氨基甲酰基、或羧基；以及R20和R21可以一起形成具有与连接了R20和R21的氮原子键合的式-(CH2)q-X-(CH2)r-的环，其中q和r独立地为1、2、3或4；X包括直接键、-CH2-、-O-、-S-、-S(O2)-、-C(O)-、-CON(H)-、-NHC(O)-、-NHCON(H)-、-NHSO2-、-SO2N(H)-、-C(O)-O-、-O-CO-、-NHSO2NH-、 或 R25、R26和R27独立地包括氢、芳基、C1-C6烷基、或C1-C6烷基芳基。
2.权利要求1的化合物，其中m为0-3的整数；n为0；R3为氢，由式(I)表示；其可药用盐、溶剂化物或前药 以及其中R1包括芳基；R2包括式-N(R9R10)、-NHC(O)R9、或-NHC(O)OR9的基团；其中R9和R10独立地包括1)-H；2)-芳基；或3)基团，包括-C1-6烷基；或-C1-6烷基芳基；R4包括a)H；b)-芳基；c)-C1-6烷基；d)-C1-6烷基芳基；或e)-C1-6烷氧基芳基；R5、R6、R7和R8独立地包括a)-H；b)-C1-6烷基；c)-芳基；d)-C1-6烷基芳基；e)-C(O)-O-C1-6烷基；f)-C(O)-O-C1-6烷基芳基；g)-C(O)-NH-C1-6烷基；h)-C(O)-NH-C1-6烷基芳基；i)-SO2-C1-6烷基；j)-SO2-C1-6烷基芳基；k)-SO2-芳基；l)-SO2-NH-C1-6烷基；m)-SO2-NH-C1-6烷基芳基；n)-C(O)-C1-6烷基；o)-C(O)-C1-6烷基芳基；p)-Y-C1-6烷基；q)-Y-芳基；r)-Y-C1-6烷基芳基；s)-Y-C1-6亚烷基-NR13R14；或t)-Y-C1-6亚烷基-W-R15；其中Y和W独立地包括-CH2-、-O-、-N(H)-、-S-、-SO2-、-CON(H)-、-NHC(O)-、-NHCON(H)-、-NHSO2-、-SO2N(H)-、-C(O)-O-、-NHSO2NH-、-O-CO-、 或 R16和R17独立地包括芳基、C1-C6烷基、C1-C6烷基芳基、C1-C6烷氧基、或C1-C6烷氧基芳基；R15包括芳基、C1-C6烷基、或C1-C6烷基芳基；或u)卤素、羟基、氰基、氨基甲酰基、或羧基；R13和R14独立地包括氢、芳基、C1-C6烷基、C1-C6烷基芳基、C1-C6烷氧基、或C1-C6烷氧基芳基；R13和R14可以一起形成具有与连接了R13和R14的氮原子键合的式-(CH2)o-X-(CH2)p-的环，其中o和p独立地为1、2、3或4；X包括直接键、-CH2-、-O-、-S-、-S(O2)-、-C(O)-、-CON(H)-、-NHC(O)-、-NHCON(H)-、-NHSO2-、-SO2N(H)-、-C(O)-O-、-O-CO-、-NHSO2NH-、 或 以及其中R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R13、R14、R15、R16、R17、R18和R19中的芳基和/或烷基可以选择性地被取代基取代1-4次，其中所述的取代基或取代的术语所指的基团包括a)-H；b)-Z-C1-6烷基；-Z-芳基；-Z-C1-6烷基芳基；-Z-C1-6烷基-NR20R21；和-Z-C1-6烷基-W-R22；其中Z和W独立地包括-CH2-、-O-、-N(H)-、-S-、-SO2-、-CON(H)-、-NHC(O)-、-NHCON(H)-、-NHSO2-、-SO2N(H)-、-C(O)-O-、-NHSO2NH-、-O-CO-、 或 其中R20和R21独立地包括氢、芳基、C1-C6烷基、C1-C6烷基芳基、C1-C6烷氧基、或C1-C6烷氧基芳基；以及R22、R23和R24独立地包括芳基、C1-C6烷基、C1-C6烷基芳基、C1-C6烷氧基、或C1-C6烷氧基芳基；或c)卤素、羟基、氰基、氨基甲酰基、或羧基；以及R20和R21可以一起形成具有与连接了R20和R21的氮原子键合的式-(CH2)q-X-(CH2)r-的环，其中q和r独立地为1、2、3或4；X包括直接键、-CH2-、-O-、-S-、-S(O2)-、-C(O)-、-CON(H)-、-NHC(O)-、-NHCON(H)-、-NHSO2-、-SO2N(H)-、-C(O)-O-、-O-CO-、-NHSO2NH-、 或 R25、R26和R27独立地包括氢、芳基、C1-C6烷基、或C1-C6烷基芳基。
3.权利要求1的化合物，其中该化合物包括2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-叔丁氧羰基氨基-1-乙基]-3-丁基-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑。
4.权利要求1的化合物，其中该化合物包括2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-氨基-1-乙基]-3-丁基-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑三盐酸盐。
5.权利要求1的化合物，其中该化合物包括2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-叔丁氧羰基氨基-1-乙基]-3-丁基-6-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑。
6.权利要求1的化合物，其中该化合物包括2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-氨基-1-乙基]-3-丁基-6-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑。
7.权利要求1的化合物，其中该化合物包括2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-叔丁氧羰基氨基-1-乙基]-6-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑。
8.权利要求1的化合物，其中该化合物包括2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-氨基-1-乙基]-6-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑。
9.权利要求1的化合物，其中该化合物包括2-[2-(3-苄氧基苯基)-1-(叔丁氧羰基氨基)-1-乙基]-3-丁基-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑。
10.权利要求1的化合物，其中该化合物包括2-[(1R)-2-(4-乙氧基苯基)-1-(叔丁氧羰基氨基)-1-乙基]-3-丁基-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑。
11.权利要求1的化合物，其中该化合物包括2-[(1R)-2-(4-(4-氯)苯乙氧基)苯基]-1-(叔丁氧羰基氨基)-1-乙基]-3-丁基-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑。
12.权利要求1的化合物，其中该化合物包括2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-(叔丁氧羰基氨基)-1-乙基]-3-(3-二乙胺基-1-丙基)-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑。
13.权利要求1的化合物，其中该化合物包括2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-(叔丁氧羰基氨基)-1-乙基]-3-乙基-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑。
14.权利要求1的化合物，其中该化合物包括2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-氨基-1-乙基]-3-(3-二乙胺基-1-丙基)-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑。
15.权利要求1的化合物，其中该化合物包括2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-(叔丁氧羰基氨基)-1-乙基]-3-苄基-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑。
16.权利要求1的化合物，其中该化合物包括2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-氨基-1-乙基]-3-苄基-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑。
17.权利要求1的化合物，其中该化合物包括2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-(叔丁氧羰基氨基)-1-乙基]-3-丙基-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑。
18.权利要求1的化合物，其中该化合物包括2-[(1R)-2-(4-苄氧基苯基)-1-氨基-1-乙基]-3-丙基-5-(3-二乙胺基-1-丙氧基)苯并咪唑。
19.药物组合物，含有权利要求1所述的式(I)的化合物作为有效成分并含有一种或多种可药用载体、赋形剂或稀释剂。
20.权利要求19的药物组合物，其是口服剂量或肠胃外剂量单位的形式。
21.权利要求19的药物组合物，其中所述的化合物是以约0.01-500mg/体重/天的剂量范围给用的。
22.权利要求19的药物组合物，其中所述的化合物是以约0.1-200mg/kg体重/天的剂量范围给用的。
23.权利要求19的药物组合物，其中所述的化合物是以约0.1-100mg/kg体重/天的剂量范围给用的。
24.权利要求19的药物组合物，其进一步含有一种或多种选自下列的治疗剂烷基化剂、抗代谢物、植物碱、抗生素、激素、生物应答调节剂、止痛剂、NSAIDs、DMARDs、糖皮质激素、磺酰脲类、双胍类、胰岛素、胆碱酯酶抑制剂、抗精神病药、抗抑郁药和抗惊厥药。
25.抑制RAGE与其生理配体的相互作用的方法，包括向需要的患者给用至少一种权利要求1所述的式(I)的化合物。
26.权利要求25的方法，其中配体选自高级糖基化终产物(AGEs)、S100/钙粒蛋白/EN-RAGE、β-淀粉样蛋白和两性素。
27.治疗选自下列疾病状态的方法急性和慢性炎症，糖尿病症状、血管通透性、肾病、动脉硬化症、视网膜病，阿尔茨海默氏病、勃起功能障碍、和肿瘤侵袭和/或肿瘤转移，所述的方法包括向需要的患者给用治疗有效量的至少一种权利要求1所述的式(I)的化合物。
28.预防和/治疗RAGE介导的人类疾病的方法，包括向需要的人给用治疗有效量的权利要求1所述的式(I)的化合物，其中治疗有效量包括足够用来至少部分抑制配体与RAGE受体结合的化合物。
29.权利要求28的方法，其进一步包括向需要的患者给用至少一种辅药和/或额外的治疗剂。
30.权利要求29的方法，其中所述的治疗剂选自烷基化剂、抗代谢物、植物碱、抗生素、激素、生物应答调节剂、止痛剂、NSAIDs、DMARDs、糖皮质激素、磺酰脲类、双胍类、胰岛素、胆碱酯酶抑制剂、抗精神病药、抗抑郁药和抗惊厥药。
31.权利要求28的方法，其中RAGE介导的人类疾病包括急性和/或慢性炎症。
32.权利要求28的方法，其中RAGE介导的人类疾病包括血管通透性异常。
33.权利要求28的方法，其中RAGE介导的人类疾病包括肾病。
34.权利要求28的方法，其中RAGE介导的人类疾病包括动脉硬化症。
35.权利要求28的方法，其中RAGE介导的人类疾病包括视网膜病。
36.权利要求28的方法，其中RAGE介导的人类疾病包括阿尔茨海默氏病。
37.权利要求28的方法，其中RAGE介导的人类疾病包括勃起功能障碍。
38.权利要求28的方法，其中RAGE介导的人类疾病包括肿瘤侵袭和/或肿瘤转移。
全文摘要
本发明提供特定的化合物、其制备方法、含有该化合物的药物组合物、以及其在治疗人类和动物疾病中的应用。本发明的化合物可用作高级糖基化终产物受体(RAGE)与其配体如高级糖基化终产物(AGEs)、S100/钙粒蛋白/EN－RAGE、β－淀粉样蛋白和两性素的相互作用的调制剂，用于处理、治疗、控制由RAGE引起的人类疾病或作为其辅助治疗。这样的疾病或疾病状态包括急性和慢性炎症，糖尿病晚期并发症发作如血管通透性增加、肾病、动脉硬化症、和视网膜病，阿尔茨海默氏病的发展、勃起功能障碍、和肿瘤侵袭和/或肿瘤转移。
文档编号A61K31/4184GK1494423SQ02805957
公开日2004年5月5日 申请日期2002年3月5日 优先权日2001年3月5日
发明者阿德南·M·M·米亚丽, 拉梅什·高伯拉斯瓦米, 高伯拉斯瓦米, 阿德南 M M 米亚丽 申请人:特兰斯泰克制药公司