专利名称：一种碳纳米管-细胞生长因子复合敷料及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种碳纳米管-细胞生长因子复合敷料的制备方法。
背景技术：
皮肤起着保护机体内环境并维持其稳定的作用，皮肤烧、创伤后治疗的最终目标就是促进创面愈合，重建或恢复皮肤屏障功能。随着对伤口愈合研究机制的深入，人们认识到使用敷料的目的远远不止是为了覆盖创面，还应具有吸附分泌物、杀灭细菌和促进伤口愈合的多重功效。纳米敷料具有很强的吸附性，能起到抗菌膜屏障作用，防止创面感染、出血，促进创面修复而成为近年来的研究热点。碳纳米管敷料是目前比较成熟的纳米辅料，具有一定的抗菌及促进创面愈合的疗效，并且毒副作用小，使用方便。但碳纳米管敷料的缺点是吸水性较差，随体性欠佳，对创面黏附性强，给换药带来一定的困难，还不能很好地促进创面愈合，因此有待于进一步研究改进。
发明内容
本发明旨在提供一种碳纳米管-细胞生长因子复合敷料的制备方法。为了达到上述目的，本发明包括以下步骤1.酸化碳纳米管(I)酸化碳纳米管将85%-98· 3% (重量百分比)的浓硫酸20 IOOml、65%_85%(重量百分比)的浓硝酸10 50 ml和粒径为30 nm 500 nm碳纳米管O.1g 2. Og分散均匀后再放入60°C 100°C水浴中酸化O. 5 h 2 h ;(2)抽滤洗涤用孔径为O. 11 μ m-0. 33 μ m的抽滤膜进行抽滤，并用蒸馏水洗涤至洗涤液pH值5. O 8. O ;(3)干燥称重将经步骤(2)滤出的碳纳米管在40°C -70°C烘干；(4)溶解离心计算将(3)得到的碳纳米管溶于50 ml蒸馏水中，室温超声分散O. 5h -3h,再在 8000rpm-20000rpm 离心 5mins 30 mins,然后沉淀干燥；2.制备碳纳米管-聚乙烯醇-细胞生长因子复合溶液(I)将碳纳米管加入去离子水分散均匀。(2)以所得碳纳米管分散液为液体介质，加入聚乙烯醇中。在60°C 100°C下水浴加热，搅拌均匀；(3)向经上述步骤所得的溶液里面加入细胞生长因子粉剂或者细胞生长因子溶液，使细胞生长因子终浓度为O.Olyg/ml 1000 μ g/ml，室温磁力振荡或者超声分散O. 5h 8 h。生物电镜表征显示其再将其分散均匀。3.静电纺织将碳纳米管-聚乙烯醇-细胞生长因子复合溶液进行静电纺丝，设定电压范围20kv 70kv (10-200)。
采用本发明的制备方法可得到组织均匀、发珠较少，纤维平直、连续、直径均一的碳纳米管一聚乙烯醇-细胞生长因子复合无纺布材料，由这些纤维形成的无纺布是一种有纳米微孔的多孔材料，因此有更大的比表面积，并且层中孔隙保证了空气的流通，可阻隔水等液体的深入，这样不仅可以有效地保护伤口、防止感染，而且保证了伤口的通风，同时采用本发明的制备方法可很好地复合细胞生长因子而作为药物载体形成缓释控释体系，促进伤口的愈合，有利于伤口尽快复原。且很好地保证了细胞生长因子的活性
具体实施例方式实施例1 :1.酸化碳纳米管(I)酸化碳纳米管将85%-98. 3%的浓硫酸60ml、65%_85%的浓硝酸20 ml和粒径为30 nm 500 nm碳纳米管O.1g 2. Og超声分散O. 5 h _3h,再放入60°C 100°C水浴中酸化O. 5 h 2 h ;(2)抽滤洗涤用孔径为O. 11 μ m-0. 33 μ m的抽滤膜进行抽滤，并用蒸馏水洗涤至洗涤液pH值5. O 8. O ;(3)干燥称重将经步骤(2)滤出的碳纳米管在40°C -70°C烘干；(4)溶解离心计算将(3)得到的碳纳米管溶于50 ml蒸馏水中，室温超声分散O. 5h -3h,再在 8000rpm-20000rpm 离心 5mins 30 mins,然后沉淀干燥；2.制备碳纳米管-聚乙烯醇-细胞生长因子复合溶液(I)将酸化得到的碳纳米管IOmg放入烧杯中，加入去离子水1000ml，5 W 100 W磁力搅拌O.1 h 6 h,再 10khz-40 khz频率超声分散O. 5 h 3 h,得到均一、稳定、无沉淀的分散溶液。(2)以所得碳纳米管水分散液为液体介质,加入O. Olml-1Oml (质量分数为1%-50%)的聚乙烯醇。在60 °C 100°C下水浴加热I h 3 h。持续搅拌，以保证最终所得为均一、稳定、不出现沉淀或者絮凝的分散液。(3)向经上述步骤所得的溶液里面加入细胞生长因子粉剂或者细胞生长因子溶液，使细胞生长因子终浓度为O.Olyg/ml 1000 μ g/ml，室温磁力振荡或者超声分散O. 5h 8 h直至分散均勻。3.静电纺织将碳纳米管-聚乙烯醇-细胞生长因子复合溶液倒入注射器中，并将注射器固定在注射泵上。打开高压发生器，开始静电纺丝，在收集介质(金属箔)上收集所得样品。设定电压范围20kv 70kv，进行静电纺织，得到无纺布。采用本发明的制备方法可得到组织均匀、发珠较少，纤维平直、连续、直径均一的碳纳米管一聚乙烯醇复合无纺布材料，由这些纤维形成的无纺布是一种有纳米微孔的多孔材料，因此有更大的比表面积，并且层中孔隙保证了空气的流通，可阻隔水等液体的深入，这样不仅可以有效地保护伤口、防止感染，而且保证了伤口的通风，同时采用本发明的制备方法可很好地复合细胞生长因子而作为药物载体形成缓释控释体系，促进伤口的愈合，有利于伤口尽快复原。实施例2 1.酸化碳纳米管 (I)酸化碳纳米管将85%-98· 3%的浓硫酸60ml、65%_85%的浓硝酸20 ml和粒径为30 nm 500 nm碳纳米管O.1g 2. Og超声分散O. 5 h _3h,再放入60°C 100°C水浴中酸化O. 5 h 2 h ;(2)抽滤洗涤用孔径为O. 11 μ m-0. 33 μ m的抽滤膜进行抽滤，并用蒸馏水洗涤至洗涤液pH值5. O 8. O ;(3)干燥称重将经步骤(2)滤出的碳纳米管在40°C -70°C烘干；(4)溶解离心计算将(3)得到的碳纳米管溶于50 ml蒸馏水中，室温超声分散O. 5h -3h,再在 8000rpm-20000rpm 离心 5mins 30 mins,然后沉淀干燥；2.制备碳纳米管-聚乙烯醇-细胞生长因子复合溶液(I)将酸化得到的碳纳米管IOmg放入烧杯中，加入去离子水1000ml，5 W 100 W磁力搅拌O.1 h 6 h,再10khz-40 khz频率超声分散O. 5 h 3 h,得到均一、稳定、无沉淀的分散溶液。(2)以所得碳纳米管水分散液为液体介质,加入O. Olml-1Oml (质量分数为1%-50%)的聚乙烯醇。在60°C 100°C下水浴加热I h 3 h。持续搅拌，以保证最终所得为均一、稳定、不出现沉淀或者絮凝的分散液。(3)向经上述步骤所得的溶液里面加入细胞生长因子粉剂或者细胞生长因子溶液，使细胞生长因子终浓度为O.Olyg/ml 1000 μ g/ml，室温磁力振荡或者超声分散O. 5h 8 h直至分散均勻。3.静电纺织将碳纳米管-聚乙烯醇-细胞生长因子复合溶液进行静电纺丝，设定电压范围20kv 70kvo
采用本发明的制备方法可得到组织均匀、发珠较少，纤维平直、连续、直径均一的碳纳米管一聚乙烯醇复合无纺布材料，由这些纤维形成的无纺布是一种有纳米微孔的多孔材料，因此有更大的比表面积，并且层中孔隙保证了空气的流通，可阻隔水等液体的深入，这样不仅可以有效地保护伤口、防止感染，而且保证了伤口的通风，同时采用本发明的制备方法可很好地复合细胞生长因子而作为药物载体形成缓释控释体系，促进伤口的愈合，有利于伤口尽快复原。实施例3:1.酸化碳纳米管(I)酸化碳纳米管将85%-98· 3%的浓硫酸60ml、65%_85%的浓硝酸20 ml和粒径为30 nm 500 nm碳纳米管O.1g 2. Og超声分散O. 5 h _3h,再放入60°C 100°C水浴中酸化O. 5 h 2 h ;(2)抽滤洗涤用孔径为O. 11 μ m-0. 33 μ m的抽滤膜进行抽滤，并用蒸馏水洗涤至洗涤液pH值5. O 8. O ;(3)干燥称重将经步骤(2)滤出的碳纳米管在40°C -70°C烘干；(4)溶解离心计算将(3)得到的碳纳米管溶于50 ml蒸馏水中，室温超声分散O. 5h -3h,再在 8000rpm-20000rpm 离心 5mins 30 mins,然后沉淀干燥；2.制备碳纳米管-聚乙烯醇-细胞生长因子复合溶液(I)将酸化得到的碳纳米管IOmg放入烧杯中，加入去离子水1000ml，5 W 100 W磁力搅拌O.1 h 6 h,再10khz-40 khz频率超声分散O. 5 h 3 h,得到均一、稳定、无沉淀的分散溶液。
(2)以所得碳纳米管水分散液为液体介质，加入O. Olml-1Oml(质量分数为1%_50%)的聚乙烯醇。在60°C 100°C下水浴加热I h 3 h。持续搅拌，以保证最终所得为均一、稳定、不出现沉淀或者絮凝的分散液。(3)向经上述步骤所得的溶液里面加入细胞生长因子粉剂或者细胞生长因子溶液，使细胞生长因子终浓度为O.Olyg/ml 1000 μ g/ml，室温磁力振荡或者超声分散O. 5h 8 h直至分散均勻。3.静电纺织将碳纳米管-聚乙烯醇-细胞生长因子复合溶液进行静电纺丝，设定电压范围20kv 70kv。采用本发明的制备方法可得到组织均匀、发珠较少，纤维平直、连续、直径均一的碳纳米管一聚乙烯醇复合无纺布材料，由这些纤维形成的无纺布是一种有纳米微孔的多孔材料，因此有更大的比表 面积，并且层中孔隙保证了空气的流通，可阻隔水等液体的深入，这样不仅可以有效地保护伤口、防止感染，而且保证了伤口的通风，同时采用本发明的制备方法可很好地复合细胞生长因子而作为药物载体形成缓释控释体系，促进伤口的愈合，有利于伤口尽快复原。
权利要求
1.一种碳纳米管-细胞生长因子复合敷料的制备方法，其特征是，包括以下步骤 (一)酸化碳纳米管 (1)将85 98.3% (重量百分比)的浓硫酸20 IOOml、65 85% (重量百分比)的浓硝酸10 50ml和粒径为5 500nm碳纳米管O.1 2. Og分散均勻后再放入60 100°C水浴中酸化O. 5 2h ; (2)用孔径为O.11 O. 33 μ m的抽滤膜进行抽滤，并用蒸馏水洗涤至洗涤液pH值5.O 8. O ; (3)将经步骤(2)滤出的碳纳米管在40 70°C烘干； (4)将(3)得到的碳纳米管溶于蒸馏水中，分散均匀，沉淀干燥； (二)制备碳纳米管-聚乙烯醇-细胞生长因子复合溶液 (1)将碳纳米管加入去离子水分散均匀； (2)以所得碳纳米管分散液为液体介质，加入聚乙烯醇中，使碳纳米管的质量分数为I 50%，在60 100°C下水浴加热，搅拌均匀； (3)向经上述步骤所得的溶液里面加入细胞生长因子粉剂或者细胞生长因子溶液，使细胞生长因子终浓度为O. 01 1000 μ g/ml，将其分散均匀，制成碳纳米管-聚乙烯醇-细胞生长因子复合溶液； (三)静电纺织 将碳纳米管-聚乙烯醇-细胞生长因子复合溶液进行静电纺丝，设定电压范围10 200kvo
2.根据权利要求1的碳纳米管-细胞生长因子复合敷料的制备方法，其特征是，所述静电纺丝电压范围为20 70kv。
全文摘要
本发明公开了一种碳纳米管-细胞生长因子复合敷料的制备方法，包括以下步骤(一)酸化碳纳米管；(二)制备碳纳米管-聚乙烯醇-细胞生长因子复合溶液；(三)静电纺织。可得到组织均匀、发珠较少，纤维平直、连续、直径均一的碳纳米管-聚乙烯醇复合无纺布材料，有更大的比表面积，并且层中孔隙保证了空气的流通，可阻隔水等液体的深入，这样不仅可以有效地保护伤口、防止感染，而且保证了伤口的通风，同时采用本发明的制备方法可很好地复合细胞生长因子而作为药物载体形成缓释控释体系，促进伤口的愈合，有利于伤口尽快复原。
文档编号A61L15/24GK103041439SQ20121033047
公开日2013年4月17日 申请日期2012年9月7日 优先权日2012年9月7日
发明者周建大, 周江林, 谢慧清, 胡丰 申请人:中南大学湘雅三医院, 湖南湘雅博爱康复医院