抗微生物纤维和组合物的制作方法

本发明涉及用于产生抗微生物活性的纤维、伤口敷料和组合物，以及其用途，特别是用于伤口愈合。蜂蜜自古以来一直用于治疗微生物感染。近年来，蜂蜜的治疗功效、特别是在伤口愈合领域中的治疗功效已经重新引起关注。临床试验表明，蜂蜜是有效的广谱抗微生物剂，其可有效抵抗常见的伤口感染生物体如铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌和大肠杆菌，并可有效抵抗细菌的抗生素抗性菌株。作为天然产品，蜂蜜还为基于药物的治疗提供有吸引力的替代品。许多不同类型的蜂蜜具有抗微生物活性。这种活性主要归因于克分子渗透压浓度、ph、过氧化氢产生和植物化学组分的存在。与大多数其他蜂蜜相比，源自麦卢卡树(麦卢卡(leptospermumscoparium))的麦卢卡蜂蜜被认为具有优异的抗微生物活性，这是由于这种类型的蜂蜜中存在高水平的抗菌植物化学活性。然而，麦卢卡蜂蜜供应相对有限，并且不能满足全球市场的需求。除了其抗微生物作用之外，蜂蜜的几种其他活性据信也有助于伤口愈合，特别是慢性伤口的愈合。具体地说，蜂蜜具有自动清创伤口并使伤口脱臭的能力。清创术是除去死亡、损伤或感染的组织，以改善剩余健康组织的愈合潜力。蜂蜜据报道具有抗炎特性，能够刺激组织生长，并控制疼痛且减少瘢痕形成。市场上目前可获得几种基于蜂蜜的伤口护理敷料。这些中的许多使用麦卢卡蜂蜜或其他具有高水平非过氧化物抗菌活性的蜂蜜，因为存在于伤口流体中的酸性、过氧化氢酶活性和蛋白质消化酶可降低过氧化氢的抗菌效力。目前市售的基于蜂蜜的敷料包括由comvita/dermasciences制造的含有麦卢卡蜂蜜的medihoney系列产品，以及由advancis制造的activon(一种无添加剂的纯麦卢卡蜂蜜)。其他基于蜂蜜的敷料含有蜂蜜和一种或多种另外成分。这些包括melladermplus，其是由sanomed制造的抗菌伤口凝胶。所述凝胶含有来自保加利亚多花山区的蜂蜜，所述蜂蜜具有天然高葡萄糖氧化酶和酚含量(蜂蜜中的主要植物化学组分是酚类化合物)。在加工过程中，不对蜂蜜进行加热或照射，因为这被认为破坏其愈合特性，特别是通过葡萄糖氧化酶产生过氧化氢。相反地，使用wo2008/049578中描述的臭氧化方法来对它进行灭菌，其中臭氧气体在耐臭氧容器中鼓泡通过液化蜂蜜。然而，臭氧已被美国食品与药品管理局(fda)批准为仅用于可重复使用的医疗装置的灭菌剂，并且因此美国fda目前尚未授权将其用于伤口愈合中的基于蜂蜜的产品的灭菌。mesitran系列是一系列另外的富含蜂蜜的伤口护理产品。由triticum制造的l-mesitran软膏含有48％的医用级蜂蜜，以及几种其他组分，包括羊毛脂、向日葵油、鱼肝油、万寿菊、芦荟、维生素c和e、以及氧化锌。取决于蜂蜜的地理、季节和植物来源以及收获、加工和储存条件，蜂蜜之间的抗微生物效力的差异可能超过一百倍。因此，取决于所使用的蜂蜜的类型，基于蜂蜜的敷料具有不同的抗微生物功效。由jenkins、burton和cooper撰写的研究(“thedeterminationofantimicrobialactivityofthreehoneyimpregnatedwounddressingsbychallengetestwithemrsa-15”,advancis)发现，含有activon、medihoney或mesitran产品的基于蜂蜜的敷料都具有针对emrsa-15的不同功效。activon浸渍的敷料是最有效的，其次是medihoney敷料，而mesitran产品的作用大大降低。因此，需要降低蜂蜜的抗微生物效力的可变性，并提高具有低抗微生物效力的蜂蜜的抗微生物活性。还希望提供不依赖于使用具有高水平的植物化学组分的蜂蜜的基于蜂蜜的有效伤口护理产品。还希望提供尚未通过臭氧灭菌的基于蜂蜜的有效伤口护理产品。可获得几种其他不含蜂蜜的抗菌伤口护理敷料。这些包括含银的敷料，如convatec’sag敷料，其在伤口渗出物被吸收到敷料中时以受控的方式释放离子银。然而，已经报道了耐银生物体，如金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和肠球菌，并且其可导致伤口愈合中的无痛。聚维酮碘(pvp-i)是聚乙烯吡咯烷酮(聚维酮，pvp)和元素碘的稳定化学复合物。它是用于治疗和预防伤口感染中的局部施用的广谱抗菌剂。已经证明细菌不发展对pvp-i的抗性。自1994年以来，pvp-i已被美国fda批准用于小的急性伤口的急救。然而，关于它的安全性和功效一直存在一些争议，并且其不被美国卫生和公众服务部推荐用于褥疮。氯己定具有针对广谱无芽胞细菌的快速杀菌活性。已经记录了针对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和一系列临床分离株的抗菌活性。然而，已经观察到耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(mrsa)对氯己定具有抗性。在英国，药品和保健产品监管署(mhra)还发布了关于使用含有氯己定的医疗装置和药用产品的过敏反应的风险的患者安全警示。因此，还需要提供无毒且可用于治疗慢性伤口的具有广谱活性的抗微生物伤口护理产品。申请人已经认识到，蜂蜜的抗微生物活性取决于天然抑制剂与活化剂之间的微妙相互关系，并且已经开发了组合物，其中可在蜂蜜的不同类型和收获之间的可变性降低的情况下释放蜂蜜的天然抗微生物活性，并且其中可改善抗微生物效力差的蜂蜜的抗微生物特性。申请人还发现，即使在通过暴露于γ辐照灭菌后，这类组合物也具有显著伤口愈合特性。申请人已经认识到，这些发现也适用于其他天然物质。申请人已经发现，所述组合物的抗微生物效力可在广泛范围内精确地增强和控制。这使得可能提供具有最适合于预期用途的抗微生物效力的组合物。在伤口愈合领域，慢性伤口的治疗提出特殊挑战。慢性伤口是未能及时通过典型愈合过程按预期进展的那些伤口。慢性伤口已被定义为已经存在超过三周的伤口，或者未能通过有序和及时的过程进行以产生解剖和功能完整性或者未能通过修复过程进行而没有建立持续和功能结果的伤口(lazarus等人,archdermatol.1994；130(4):489-493)。慢性伤口是重要的健康问题(cowan等人,ulcers2013,articleid487024)。据报道，在美国与慢性伤口控制和治疗相关的卫生保健费用每年超过200亿美元。不愈合伤口的治疗和控制是具有挑战性的。传统上，基础伤口护理包括外科手术清创、手动冲洗、保湿敷料以及局部和/或全身抗微生物治疗。虽然伤口愈合科学已经取得了巨大进展，但慢性伤口及其相关并发症的流行率和发病率继续升高。慢性伤口中的细菌生物膜的存在和复杂性最近被认为是不愈合伤口的关键方面。细菌生物膜是多微生物生物体(细菌、真菌、以及可能病毒)的固着菌落，其通常是共生的。这些生物膜菌落产生保护性涂层，以保护菌落免于宿主防御。生物膜特有的这种保护物质的特征是动态的，并且其组分的产生似乎是由伤口床中的敌对环境(如局部抗生素的存在)引发的。已经显示生物膜具有抑制炎性细胞的愈合方面、抵抗抗生素(局部和全身)和其他疗法的存活和防御机制，并起始细胞间通讯途径(群体感应)，其促进新生物膜生长，从而导致顽固性不愈合伤口。细菌生物膜的特征在于附着于表面或在表面界面处形成的聚集细菌，并被组构为包埋于自我分泌细胞外聚合物质(eps)中的复合群落。这些动态细菌群落可主要由单一细菌或真菌物种组成，或者更常见地可以是多微生物的，其含有不断变化的多种不同物种。所有生物膜，不管其位置，都共有若干共同特征。这些包括将细菌细胞保持在一起的细胞外聚合物基质的合成，以及与由自生生活或“浮游”细胞表现的抗性相比，对通过宿主防御和抗微生物剂杀死的抗性增加。生物膜菌落的固有保护性质使大多数生物膜相关的感染难以或不可能根除。生物膜形成可分为三个不同的阶段(kaplan,jdentres89(3)2010:205-218)：细胞附着至表面，细胞生长成固着生物膜菌落，以及细胞从所述菌落脱离进入周围介质。细菌细胞与表面之间的初始可逆相互作用是由非特异性理夫绪兹(lifshitz)-范德华力、路易斯酸-碱和静电力介导的。这种瞬时附着由位于细菌细胞表面上或细胞附属物如菌毛和伞毛上的宿主和组织特异性粘附素增强。这导致细菌细胞不可逆地附着至表面。生物膜形成的第二阶段涉及细菌在表面上的增殖和细胞外聚合物基质的伴随合成。所述基质将细菌细胞以团块形式保持在一起，并使细菌团块牢固地附着至下层表面。聚合物生物膜基质组分的一些实例包括葡聚糖多糖、蛋白质伞毛和细胞外双链dna。除了为生物膜菌落提供结构“支架”外，基质还通过充当扩散屏障或通过直接结合至抗微生物剂并阻止其进入生物膜细胞而有助于生物膜介导的抗微生物抗性。表面上的细菌细胞的持续生长导致成熟生物膜菌落的形成，所述菌落含有聚集成柱状和蘑菇状团块的数百万个紧密堆积的细胞，所述团块向外突出到周围介质中几百微米。这些结构散布有充满流体的通道，所述通道充当原始循环系统，从而允许与本体流体相交换营养物和废物产物。此外，大量生物膜细胞通常含有没有细胞的分隔的内部空间。因此，成熟生物膜菌落是复杂的、高度分化的结构。许多关于ph值、氧浓度、营养物利用率和细胞密度不同的微环境存在于生物膜菌落内。这导致位于菌落的不同部位中的细胞间代谢和繁殖活性的较大异质性。位于菌落内部的代谢失活的细胞可对靶向活跃生长细胞的抗微生物剂的作用具有抗性。生物膜形成的最后阶段是细胞从生物膜菌落脱离并且其扩散(“播种”)到环境中。这是生物膜生命周期的重要阶段，其促成生物扩散、细菌存活和疾病传播。像生物膜形成的其他阶段一样，扩散可以是涉及许多环境信号、信号转导途径和效应子的复杂过程。所有细菌都不利用生物膜扩散的单一机制。已经在身体的各种表面上鉴别了生物膜，包括牙齿(菌斑)、心内膜、胃肠和泌尿生殖器粘膜和鼻上皮，以及诸如矫形假体和侵入性导管的外来物体。有证据表明，生物膜与慢性皮肤伤口中的伤口愈合受损密切相关。伤口生物膜引发慢性炎症反应，从而导致生物膜周围的嗜中性粒细胞和巨噬细胞的积聚。嗜中性粒细胞和巨噬细胞分泌影响生物膜和周围组织的高水平的活性氧物质(ros)。炎性细胞还分泌高水平的蛋白酶(基质金属蛋白酶和弹性蛋白酶)，所述蛋白酶可帮助分解生物膜与受影响组织之间的附着物，从而从组织中移除生物膜。然而，ros和蛋白酶也具有损伤正常周围组织、蛋白质、免疫细胞和组织细胞的能力，从而延缓愈合。在易受伤害的组织中，生物膜是通过浮游细菌在被患者的免疫系统、抗生素或清创术杀死之前附着并形成保护性群落而产生的。损害免疫系统或降低抗生素药物的有效性的若干条件促进生物膜在伤口中的形成和扩散。这些包括组织的缺血或坏死、营养缺乏或受损、以及损害身体免疫功能的共病，如hiv、糖尿病、较大身体创伤、放射治疗或用免疫抑制药物治疗。已经提出，生物膜所采用的方法包括使细菌能够附着于宿主细胞并注射蛋白质以重组宿主细胞途径的分子机制。对于一些细菌物种，所注射的细菌蛋白质重组宿主细胞细胞骨架，并防止迁移和有丝分裂且抑制细胞凋亡。当细菌开始形成生物膜时，其分子机制可吸引其他细菌以形成可持续的多微生物系统。生物膜菌落被认为拥有代表众多细菌物种的扩大的多样性基因库。长期生物膜存活通常与生物膜的遗传多样性直接相关，从而导致变得难以治疗的慢性感染。细菌生物膜的存活需要基因表达来确保附着至宿主，宿主的细胞衰老来防止脱落和引起局部炎症，以及刺激伤口床中的血浆产生来滋养生物膜菌落。具有形成生物膜的能力的微生物也具有群体感应分子以指导生物膜的集中和组构。生物膜中的分子的定向分泌和菌落的组构使营养物和其他必需分子的利用率最大化，同时使废物产品、竞争剂的毒素和其他环境危害对生物膜的相反作用最小化。多微生物生物膜可能并入能够调控途径并且还进行双向信号传导的群体感应分子。生物膜生物体具有感知许多群体感应途径并与许多群体感应途径通讯的能力。生物膜具有多种防御并可对治疗具有抗性，从而限制抗生素的有效性。抗生素和抗菌剂非常容易地杀死单一细菌，但生物膜屏障阻止大多数抗生素和抗菌剂到达细菌，特别是朝向伤口基质的中心。伤口生物膜对抗体、抗生素、消毒剂和吞噬炎性细胞具有抗性。因此，需要提供有效疗法来预防和治疗包括生物膜或能够形成生物膜的微生物的微生物感染，特别是慢性伤口(如慢性皮肤和烧伤伤口)中的微生物感染。在伤口的治疗中，伤口敷料可用于保护伤口并可提供活性物质(如抗微生物物质)的来源以用于治疗伤口。含有纤维(如通过静电纺丝产生的纳米纤维)的伤口敷料由于其高表面积、高孔隙率与非常小的孔径以及将药物或其他活性分子负载到纤维中的能力而可以是特别有利的。包含纳米纤维和活性物质的伤口敷料及其生产方法的实例描述于wo2008/049251和wo2011/059497中。申请人已经认识到活性氧物质如过氧化氢在诸如伤口愈合和预防感染的应用中的有益作用。具体地说，申请人已经认知到在延长的时间段内产生活性氧物质的益处。申请人已经制造了含有纤维(如静电纺丝纤维)的敷料，其能够产生活性氧物质并因此能够提供方便且有效的伤口治疗。在其最广泛的意义上，本发明涉及一种纤维，其包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶和包含所述酶的底物的物质。所述酶可以是可存在于所述物质中的能够转化底物以释放过氧化氢的任何酶活性(本文称为“底物转化活性”)的添加(即由于人为干预而添加的)。根据本发明，提供一种纤维，其包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶和包含所述酶的底物的未精制的天然物质，其中所述酶是可存在于所述未精制天然物质中的能够转化所述底物以释放过氧化氢的任何酶活性的添加。在一些实施方案中，所述纤维不包含足够的游离水来允许酶转化底物。这在需要在使用前长期储存纤维的情况下尤其有用。所述纤维可以是储存稳定的纤维。在其他实施方案中，所述纤维确实包含足够的游离水以允许酶转化底物。任选地，所述物质不包含过氧化氢酶活性。在一些实施方案中，所述物质是未精制的天然物质，例蜂蜜。根据本发明，还提供一种包括本发明的一种或多种纤维的伤口敷料。优选地，所述伤口敷料是或包括纤维或纳米纤维垫。所述伤口敷料可包括织造纤维。在一些实施方案中，所述敷料可包括纤维施加于其上的基底。合适的基底可包括纱布、绷带、组织、薄膜、凝胶、泡沫、水胶体、藻酸盐(如ams藻酸盐泡沫或纺粘藻酸盐敷料)、水凝胶或多糖糊剂、颗粒、珠粒。所述基底可以是箔、聚丙烯或所述伤口敷料可包括胶原或胶原-糖胺聚糖基质。在一些实施方案中，所述敷料可仅包括本发明的一种或多种纤维。因此，在一些实施方案中，所述敷料可不包括纤维施加于其上的基底。根据本发明，还提供一种包括本发明的一种或多种纤维的纤维垫。优选地，所述纤维或每种纤维是织造的。优选地，所述纤维是纳米纤维。本文中术语“纳米纤维”的使用是指直径小于或等于1000纳米(nm)的纤维。然而，所述纤维可以是微纤维。所述纤维可具有小于或等于1毫米、小于或等于500微米(μm)、小于或等于50μm或小于或等于10μm的直径。在一些实施方案中，所述纤维可具有小于或等于100nm的直径。在优选的实施方案中，所述纤维是静电纺丝纤维。这意味着所述纤维通过静电纺丝获得或形成。通常，静电纺丝使用具有三个主要部件的设备进行：高压电源、喷丝头(如金属针)和收集器(如接地导体)。所述喷丝头被连接至含有可静电纺丝组合物的注射器。通过使用注射泵，所述组合物可以恒定且可控的速率通过喷丝头供给。当对所述组合物施加高电压时，喷丝头的喷嘴处的组合物滴将变得高度带电，并且感应电荷被均匀地分布在表面上。因此，所述滴经历两种主要类型的静电力：表面电荷之间的静电排斥；以及由外电场施加的库仑力。在这些静电相互作用的作用下，液滴将变形成泰勒锥。一旦电场的强度超过阈值，静电力就能够克服组合物的表面张力且由此迫使射流从喷嘴中喷射。这种带电射流经历拉伸和抖动过程，从而导致形成长且细的丝。当组合物被不断拉长并干燥时，其直径可从几百微米大大减少至小至几十纳米。在典型的设置中，所施加的电压是30kv，喷丝头与收集器之间的距离是20cm，并且溶液的流速是1ml/小时。然而，应了解，可改变这些参数以优化结果或改变所产生的纤维的性质。还应了解，可使用上述典型设备的变化或修改来进行静电纺丝。例如，可使用不同类型的静电纺丝设备，如和elmarconanospidertm。根据本发明的优选实施方案，所述纤维或伤口敷料是无菌的。灭菌可通过任何合适的方式进行。申请人已经发现，适合于形成本发明的纤维或敷料的组合物在通过暴露于γ辐照灭菌后保留葡萄糖氧化酶活性(并因此保留释放过氧化氢的能力)。因此，所述纤维或伤口敷料优选通过暴露于γ辐照进行灭菌。γ辐照的合适水平是10-70kgy，优选25-70kgy，更优选35-70kgy。根据本发明，还提供一种对本发明的纤维或伤口敷料进行灭菌的方法，所述方法包括使所述纤维或伤口敷料暴露于γ辐照。有利地，过氧化氢可从所述纤维或敷料释放持续一段时间。这可取决于存在的底物的量或酶的量或活性。应了解，可选择底物的量和/或酶的量或活性，以在与水接触后在短时间内提供相对高水平的过氧化氢的释放，或者在较长时间内提供较低水平的过氧化氢的释放。所述纤维或敷料可包含足够的酶和底物以提供过氧化氢的持续释放至少二十四小时、更优选至少四十八小时的时间段。优选地，存在低于2mmol/升水平下的过氧化氢的持续释放至少二十四小时的时间段。如果所述纤维或敷料不含足够的游离水来允许酶转化底物，则当所述纤维或敷料与水接触(或混合)时，可发生过氧化氢的释放。所述纤维或敷料因此可包含足够的酶和底物以在与足够的水接触以允许所述酶转化所述底物之后，提供过氧化氢的持续释放至少二十四小时、更优选至少四十八小时的时间段。优选地，在与足够的水接触以允许酶转化底物之后，存在低于2mmol/升水平下的过氧化氢的持续释放至少二十四小时的时间段。在其他实施方案中，所述纤维或敷料可包含足够的酶和底物，以提供至少0.1、0.5、1或1.5mmol/升过氧化氢的持续释放至少24小时、更优选48小时的时间段。本发明还提供一种静电纺丝组合物，其包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶和包含所述酶的底物的未精制的天然物质，其中所述酶是可存在于所述未精制天然物质中的能够转化所述底物以释放过氧化氢的任何酶活性的添加。根据本发明，还提供一种产生纤维的方法，所述方法包括对本发明的可静电纺丝组合物进行静电纺丝。优选地，所述可静电纺丝组合物是溶液。所述溶液中的溶剂可以是或可包含水。所述溶剂可包含水性和/或非水性溶剂，如有机溶剂。所述纤维或可静电纺丝组合物可包含一种或多种可静电纺丝组分。有助于根据本发明的纤维或敷料的形成的任何可静电纺丝组分都可以是合适的。优选地，所述一种或多种可静电纺丝组分是可静电纺丝聚合物。在一些实施方案中，所述聚合物可以是合成聚合物。在一些实施方案中，所述聚合物是天然聚合物。在一些实施方案中，所述可静电纺丝聚合物选自聚环氧乙烷、聚乙烯醇和聚乙烯吡咯烷酮。其他聚合物可包括聚己内酯或膦基-羧酸(pca)。所述可静电纺丝组分优选地是生物相容的。任选地，所述可静电纺丝组分是水溶性的。所述可静电纺丝组分可溶于有机或非水性溶剂中。所述可静电纺丝组分可溶于水性与非水性溶剂的混合物中。合适的非水性溶剂可以是或可包含甘油、二甲亚砜、乙二醇或丙二醇。所述可静电纺丝组合物可包含达50重量％、25重量％、10重量％或5重量％的可静电纺丝组分。任选地，所述可静电纺丝组分可以是组合物的1重量％至50重量％。所述可静电纺丝组合物可包含达30重量％、20重量％或10重量％的未精制天然物质。所述可静电纺丝组合物可通过将聚合物溶液与未精制的天然物质混合来形成。例如，所述聚合物溶液可包含达50重量％、25重量％、10重量％或5重量％的可静电纺丝聚合物。所述可静电纺丝组合物可通过以90％:10％至60％:40％的重量比(聚合物溶液:未精制天然物质)混合聚合物溶液与未精制天然物质来形成。例如，所述可静电纺丝组合物可由80重量％聚合物溶液和20重量％未精制天然物质的混合物形成。应了解，所述可静电纺丝组分、未精制天然物质和溶剂的相对量可改变以改变纤维的性质。已经由可静电纺丝组合物形成的纤维可包含达80重量％的未精制天然物质。所述纤维可包含20重量％或更多的可静电纺丝组分。根据本发明，提供：用于产生抗微生物活性的组合物在制造根据本发明的纤维或敷料中的用途，所述组合物包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶和包含所述酶的底物的物质，其中所述酶是可存在于所述物质中的能够转化所述底物以释放过氧化氢的任何酶活性的添加。优选地，所述组合物是储存稳定的组合物。在一些实施方案中，所述组合物不包含足够的游离水来允许酶转化底物。任选地，所述物质不包含过氧化氢酶活性。所述酶可以是纯化的酶。优选地，所述物质是未精制的天然物质。本发明可提供一种产生抗微生物组合物的方法，所述方法包括使本发明的纤维与足够的水接触，以允许酶转化未精制天然物质中的底物并释放过氧化氢。本发明还提供一种通过所述方法获得或通过所述方法可获得的抗微生物组合物。优选地，所述抗微生物组合物是溶液。例如，所述纤维或敷料可在与溶剂接触时溶解。所述抗微生物组合物可以是悬浮液。所述抗微生物组合物可通过将纤维或伤口敷料施加至伤口来形成。在一些实施方案中，伤口渗出物可提供足够的水以允许酶转化未精制天然物质中的底物并释放过氧化氢。在一些实施方案中，本发明的纤维可通过以下方式形成：首先形成纤维(例如通过静电纺丝含有聚合物的溶液)且然后用组合物涂覆所述纤维，所述组合物包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶；以及包含所述酶的底物的物质。涂覆可通过诸如电喷雾或浸入组合物中的方法来实现。这可避免对于对包含酶和底物的组合物进行静电纺丝的需要。本发明涵盖一种用于产生抗微生物活性的组合物，所述组合物包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶；以及包含所述酶的底物的物质。所述组合物可包含聚合物。根据本发明，提供一种组合物，其包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶；包含所述酶的底物的物质；以及聚合物。在一些实施方案中，所述物质包含所述酶的纯化底物。根据本发明，提供一种组合物，其包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶；以及含有所述酶的纯化底物的物质。根据本发明，提供一种用于产生抗微生物活性的组合物，其中所述组合物包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶；含有所述酶的纯化底物的物质；以及聚合物。所述组合物的酶是可存在于所述物质中的能够转化底物以释放过氧化氢的任何酶活性(本文称为“底物转化活性”)的添加(即由于人为干预而添加的)。在一些实施方案中，所述组合物不包含未精制的天然物质。然而，在一些实施方案中，所述包含酶的底物的物质可以是未精制的天然物质。根据本发明，提供一种组合物，其包含：酶，其能够转化底物以释放过氧化氢；未精制的天然物质，其包含所述酶的底物，其中所述酶是可存在于所述未精制天然物质中的能够转化所述底物以释放过氧化氢的任何酶活性的添加；以及聚合物。所述组合物可以是可静电纺丝组合物。或者或另外，所述组合物可以是可喷雾或可雾化组合物。例如，所述组合物可具有允许喷雾或雾化的流变性质。在一些实施方案中，所述组合物不是可静电纺丝组合物。所述组合物可以是可注射组合物。例如，所述组合物可具有允许通过注射器施用的流变性质。在未将所述聚合物添加至所述组合物中的情况下，未精制的天然物质如蜂蜜可能不具有必要流变性质来允许有效喷雾或注射。例如，所述未精制的天然物质可能太粘稠。所述组合物中的聚合物可以是任何医学上可接受的聚合物，如任何食品与药品管理局批准的(fda批准的)聚合物。在一些实施方案中，所述聚合物可以是合成聚合物。在一些实施方案中，所述聚合物是天然聚合物。任选地，所述聚合物是水溶性的。所述聚合物可溶于有机或非水性溶剂中。所述聚合物可溶于水性与非水性溶剂的混合物中。所述聚合物可以是可生物降解的或可生物侵蚀的。所述聚合物可以是共聚物。在一些实施方案中，所述聚合物选自聚环氧乙烷(或聚乙二醇)、聚乙烯醇和聚乙烯吡咯烷酮。其他聚合物可包括聚(乳酸-共-乙醇酸)、聚乙醇酸、聚乳酸、聚己内酯或聚合物表面活性剂。另一种合适的聚合物可以是膦基-羧酸(pca)。其他聚合物可包括多糖如纤维素(其包括衍生物如羟丙基甲基纤维素和羟丙基纤维素)、藻酸盐、明胶或环糊精。合适的聚合物还可包括壳聚糖或透明质酸。所述组合物可包含达50重量％、25重量％、10重量％或5重量％的聚合物。例如，所述组合物可包含0.5重量％至3重量％的聚合物。任选地，所述聚合物可以是组合物的0.5重量％至50重量％。所述组合物可包含达30重量％、20重量％或10重量％的未精制天然物质。所述组合物可通过将聚合物溶液与物质(其可以是未精制的天然物质或包含纯化底物的物质)混合来形成。例如，所述聚合物溶液可包含达50重量％、25重量％、10重量％或5重量％的聚合物。所述组合物可通过将聚合物溶液与物质(其可以是未精制天然物质或包含纯化底物的物质)以90％:10％至60％:40％的重量比(聚合物溶液:物质)混合来形成。例如，所述组合物可由80重量％聚合物溶液和20重量％物质的混合物形成。优选地，所述组合物是储存稳定的组合物。在一些实施方案中，所述组合物不包含足够的游离水来允许酶转化底物。在一些实施方案中，所述组合物可包含足够的游离水以允许酶转化底物。过氧化氢可释放持续一段时间，这取决于组合物中存在的底物的量以及酶的活性。过氧化氢的释放可通过组合物的稀释发生或起始。应了解，可选择组合物中底物的量和/或酶的活性，以在短时间内提供相对高水平的过氧化氢的释放，或者在较长时间内提供较低水平的过氧化氢的释放。适当地，所述组合物优选在组合物的稀释后提供过氧化氢的持续释放至少二十四小时、更优选至少四十八小时的时间段。适当地，本发明的组合物优选在组合物的稀释之后提供低于2mmol/升水平下的过氧化氢的持续释放至少二十四小时(或至少48小时)的时间段。本发明的组合物可任选地在组合物的稀释后提供至少0.1、0.5、1或1.5mm/升过氧化氢的持续释放至少二十四小时、更优选四十八小时的时间段。所述组合物可包含非水性溶剂。所述组合物的粘度可根据组合物的所需应用进行调节。例如，可通过改变组合物中聚合物的类型和/或量或通过调节组合物的溶剂含量来调节粘度。所述组合物可以是凝胶。优选地，所述组合物是液体。根据本发明，提供一种用于将组合物递送至患者的装置，所述装置包括本发明的组合物。所述装置可以是喷雾或雾化装置，如泵作用喷雾器或气雾喷雾器。所述装置可用于外部使用，如用于将组合物施加至患者的皮肤。所述装置可用于内部施加至患者。例如，所述装置可以是用于将组合物施用至患者呼吸道的吸入器或雾化器。所述装置可以是灌洗器。所述装置可以是用于将组合物注射到患者体内的装置，如注射器。根据本发明，提供一种试剂盒，所述试剂盒包括：i)本发明的组合物；和ii)用于将组合物递送至患者的装置。所述组合物可与所述装置分开。所述组合物可用于预防性应用或用于治疗与微生物感染相关的病状。例如，可提供用于术前皮肤灭菌的预防性喷雾剂。这种喷雾剂可包含低粘度组合物。当施加时，所述组合物可以是非粘性的。所述喷雾剂可允许将活性氧层流递送至皮肤。层流可在延长的时间段内持续递送活性氧，其可在手术切口之前对皮肤进行灭菌并且在外科手术期间和之后提供预防性保护。可提供用于吸入的雾化喷雾剂。用于吸入的雾化喷雾剂可用于治疗患者气道中的感染。雾化喷雾剂可能需要具有低粘度的组合物。在施加敷料之前，可使用喷雾剂来施加至烧伤或伤口组织。这可能需要更粘稠的组合物。喷雾剂可内部施加至手术后患者，以预防器官感染和败血症。这可能需要更粘稠的组合物。在与诸如灌洗器的装置一起使用之前，组合物可用水稀释。优选地，组合物基本上是均匀的。根据本发明，提供一种将根据本发明的组合物施加或施用至患者的方法，其中所述方法包括将所述组合物喷雾、将所述组合物注射、将所述组合物吸入或将所述组合物施加至患者的鼻腔或鼻旁窦。根据本发明，提供一种用作药物的根据本发明的组合物。所述组合物可通过将组合物喷雾、注射、吸入或施加至患者的鼻腔或鼻旁窦来施用或施加。所述组合物可外部或内部施用或施加至患者。在一些实施方案中，所述组合物不是或不包含含有以下各项的组合物：酶，其能够转化底物以释放过氧化氢；未精制的天然物质，其包含所述酶的底物，其中所述酶是可存在于所述未精制天然物质中的能够转化所述底物以释放过氧化氢的任何酶活性的添加；以及聚合物。在一些实施方案中，所述组合物不是或不包含纤维或伤口敷料。在一些实施方案中，所述组合物不包含可静电纺丝组分。在一些实施方案中，所述组合物不包含可静电纺丝聚合物。在一些实施方案中，所述组合物不是或不包含以下：可静电纺丝组合物，其包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶，和未精制的天然物质，所述未精制的天然物质包含所述酶的底物，其中所述酶是可存在于所述未精制天然物质中的能够转化所述底物以释放过氧化氢的任何酶活性的添加。在一些实施方案中，所述组合物不是或不包含以下：通过使本发明的纤维与足够的水接触以允许酶转化未精制天然物质中的底物并释放过氧化氢而获得或可获得的组合物。在一些实施方案中，所述组合物不是或不包含含有已与手术蜂蜜(surgihoney)以80％peo溶液与20％手术蜂蜜的重量比混合的4重量％聚环氧乙烷的水溶液。在一些实施方案中，所述组合物不是或不包含含有1重量％聚环氧乙烷、79重量％去离子水和20重量％手术蜂蜜的组合物。在优选的实施方案中，所述组合物不是或不包含以下：水性喷雾25ml塑料瓶含有：活性蜂蜜10gtritoncf0.1g麦芽糖糊精或玉米淀粉1g其中“活性蜂蜜”是具有添加的葡萄糖氧化酶的蜂蜜。在优选的实施方案中，所述组合物不是或不包含以下：非水性喷雾活性蜂蜜70％丙二醇30％在优选的实施方案中，所述组合物不是或不包含以下：粉末活性蜂蜜麦芽糖糊精布洛芬微晶纤维素(cmc)聚乙烯吡咯烷酮(pvp)在优选的实施方案中，所述组合物不是或不包含以下：含醇凝胶在优选的实施方案中，所述组合物不是或不包含以下：真菌指甲治疗泡沫孔中的具有活性蜂蜜(5+)的石膏羟丙基纤维素甘油异丙醇柠檬酸一水合物在一些实施方案中，所述组合物不是或不包含以下：乳膏在一些实施方案中，所述组合物不包含以下中的一种或多种：麦芽糖糊精、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、卡波姆、泊洛沙姆、羟丙基纤维素、卡波普940。优选地，所述酶是纯化酶。术语“纯化酶”在本文中用于包括酶制剂，其中酶已经与当产生酶时最初存在的至少一些杂质分离。优选地，已除去或减少的杂质包括以其他方式干扰酶转化底物以释放过氧化氢的能力的那些。纯化酶处于高水平的纯度可能并不总是必要或希望的，条件是所述酶能够转化底物以释放过氧化氢。在一些情况下，可能需要使用相对粗的酶制剂。合适的纯度水平的实例包括至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％纯。然而，优选的是，可能在产生酶时最初存在的任何过氧化氢酶的量已被减少。酶可通过重组或非重组手段产生，并且可以是重组或非重组酶。酶可从微生物来源纯化，优选从非遗传修饰的微生物纯化。酶的纯度水平可取决于纤维或组合物的预期用途酌情选择。对于医疗用途，应使用医疗级或医疗装置级的纯度。过氧化氢酶是催化过氧化氢分解成水和氧气的酶。使用缺乏过氧化氢酶活性的物质意味着在来自不同来源或来自同一来源的不同收获物的相似物质之间的这种活性的量不存在可变性。这降低可由这类物质产生的抗微生物活性的可变性。或者，如果所述物质确实包括过氧化氢酶活性，并且在所述物质与酶接触之前使物质中的过氧化氢酶活性灭活是不可能的或不合需要的，则可使用足够的酶，以使得过氧化氢酶活性对可从所述物质产生的过氧化氢的作用降低。这也降低可从所述物质产生的抗微生物活性的可变性。在一些实施方案中，优选所述物质缺乏过氧化氢酶活性。过氧化氢酶存在于许多植物和动物中。过氧化氢酶活性可在所述物质的加工或提取期间除去，或在本发明中使用所述物质之前灭活。过氧化氢酶活性可例如通过巴氏灭菌热灭活。用于热灭活过氧化氢酶活性的合适温度是至少60℃、70℃或80℃，优选持续至少2分钟。优选地，本发明的纤维、敷料或组合物是储存稳定的。适用于(或用于)形成本发明的纤维或敷料的组合物可以是储存稳定的。术语“储存稳定的”在本文中用于表示纤维、敷料或组合物可在环境温度下储存至少数天，优选至少一周、更优选至少一个或两个月，同时在纤维、敷料或组合物与水接触之后保留产生抗微生物活性的能力。优选的储存温度低于37℃，优选20℃-25℃。优选地，发生避光储存。过氧化氢通常在环境温度下是不稳定的。因此，缺乏足够的游离水可阻止酶转化底物来释放过氧化氢，并且有助于在环境温度下维持稳定性延长的时间段。本发明的储存稳定的纤维、敷料或组合物、或适于形成本发明的纤维或敷料的组合物可包含一些水，条件是不存在足够的游离水来允许酶转化底物。适量的水将根据纤维、敷料或组合物的精确组分而变化。然而，通常，储存稳定的纤维、敷料或组合物可包含少于20％的总水含量，例如10％-19％水。本发明的纤维、敷料或组合物，如储存稳定的纤维、敷料或组合物优选不包含任何可检测的过氧化氢。可以说它们基本上不含过氧化氢。它们可例如通过在不存在足够的游离水来允许酶转化底物的情况下使酶与底物接触来形成。存在于所述纤维、敷料或组合物中的酶是可存在于所述物质中的能够转化底物以释放过氧化氢的任何酶活性(本文称为“底物转化活性”)的添加(即由于人为干预而添加的)，即本发明的纤维、敷料或组合物包含所述物质和添加的酶。应了解，在不存在足够的游离水来允许酶转化底物的实施方案中，应存在足够的酶以转化底物并根据需要在与水接触后形成过氧化氢。鉴于在足够的水存在下产生过氧化氢的重要性，应理解，纤维、敷料或组合物不应含有任何添加的过氧化物酶。在一些实施方案中，本发明的组合物、纤维或敷料可含有足够的游离水以允许酶转化底物，在一些实施方案中，这类组合物、纤维或敷料可能能够产生过氧化氢持续延长的时间段。例如，它们可能能够产生本文所述的水平下的过氧化氢(例如至少0.1、0.5、1或1.5mmol/升过氧化氢)至少一年，优选至少3年。在具有足够的游离水以允许酶转化底物的一些组合物中，随时间推移，可能存在所产生的过氧化氢的水平降低。这可能是由真菌对底物的发酵引起的。发酵可减少可用于过氧化氢产生的底物的量。在一些实施方案中，可通过将组合物、纤维或敷料密封在防止任何真菌污染的容器或药囊中且然后处理所述组合物以杀死组合物、纤维或敷料中的真菌来减少发酵。例如，这可通过γ辐照来实现。优选地，酶是氧化还原酶。可转化底物以释放过氧化氢的氧化还原酶的实例包括葡萄糖氧化酶、己糖氧化酶、胆固醇氧化酶、半乳糖氧化酶、吡喃糖氧化酶、胆碱氧化酶、丙酮酸氧化酶、乙醇酸氧化酶和氨基酸氧化酶。这些氧化还原酶的相应底物分别是d-葡萄糖、己糖、胆固醇、d-半乳糖、吡喃糖、胆碱、丙酮酸、乙醇酸和氨基酸。可存在一种或多种氧化还原酶和所述氧化还原酶的一种或多种底物的混合物。根据本发明的优选实施方案，氧化还原酶是葡萄糖氧化酶，并且底物是d-葡萄糖。所述物质可以是包含酶的底物的任何物质。优选地，所述物质缺乏过氧化氢酶活性。优选地，所述物质是未精制物质。术语“未精制”在本文中用于指未经加工成纯形式的物质。未精制物质包括可能已经例如通过干燥或沸腾浓缩的物质。优选地，所述物质包含一种或多种来自天然来源的底物(本文称为“天然物质”)。天然物质的实例包括来自植物来源，包括来自树汁、根、花蜜、花、种子、果实、叶子或芽的物质。更优选地，所述物质是未精制的天然物质。优选地，所述物质包含以下底物中的一种或多种：d-葡萄糖、己糖、胆固醇、d-半乳糖、吡喃糖、胆碱、丙酮酸、乙醇酸或氨基酸。优选地，所述物质是糖物质。术语“糖物质”在本文中用于指包含一种或多种糖的任何物质。术语“糖”在本文中用于指具有通式cm(h2o)n的糖类。优选的糖包括单糖，如d-葡萄糖、己糖或d-半乳糖。优选地，糖物质包含一种或多种来自天然来源的糖(本文称为“天然糖物质”)。更优选地，天然糖物质是未精制的天然糖物质。未精制的天然糖物质可以是(或源自)天然糖产品。在优选的实施方案中，未精制的天然糖产品是蜂蜜。在一些优选的实施方案中，蜂蜜是已被处理以除去或灭活过氧化氢酶活性的蜂蜜。或者，未精制的天然糖物质可以是加工的天然糖，如糖浆或转化糖浆。如上所述，物质本身可优选缺乏能够转化底物以释放过氧化氢的酶活性(称为“底物转化活性”)。物质中不存在底物转化活性具有以下优点：在来自不同来源或来自同一来源的不同收获物的相似物质之间的这种活性的量则不存在可变性。这可进一步降低由这类物质产生的抗微生物活性的可变性。然后仅通过与物质接触或加入物质的酶提供底物转化活性，并且因此可控制存在的底物转化活性的量。底物转化活性可在物质的加工或提取期间除去，或在本发明中使用所述物质之前灭活。底物转化活性可通过热灭活例如通过巴氏灭菌而灭活。用于热灭活底物转化活性的合适温度是至少80℃，优选持续至少2分钟。热灭活的优点在于，可在单个热灭活步骤中灭活过氧化氢酶活性和底物转化活性两者。在本发明的一些实施方案中，物质是加工的、提取的或精制的物质(即已通过加工除去杂质或不想要的元素的物质)。优选地，已除去或减少的杂质包括以其他方式干扰酶转化底物以释放过氧化氢的能力的那些。在本发明的一些实施方案中，物质包含酶的纯化底物。术语“纯化的底物”在本文中用于包括底物制剂，其中底物已经与当获得或产生酶时最初存在的至少一些杂质分离。纯化的底物可从天然来源获得或可合成产生。纯化的底物可以是加工的、提取的或精制的底物(即已通过加工除去杂质或不想要的元素的底物)。纯化底物处于高水平的纯度可能并不总是必要或希望的，条件是所述酶能够转化底物以释放过氧化氢。在一些情况下，可能需要使用相对粗的底物制剂。合适的纯度水平的实例包括至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或99％纯。然而，在一些实施方案中，可能希望纯化的底物是医疗级、医疗装置级或药物级底物。在具体实施方案中，纯化的底物是或包含纯化的糖物质。纯化的糖物质可从天然来源(例如加工的、提取的或精制的天然糖物质)获得，或是合成产生的。纯化的糖物质可以是至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或99％纯的。纯化的糖物质可以是医疗级、医疗装置级或药物级糖物质。纯化的糖物质可包括一种或多种纯化的糖物质，例如纯化的d-葡萄糖、己糖或d-半乳糖。例如，纯化的糖物质可以是医疗级、医疗装置级或药物级d-葡萄糖、己糖或d-半乳糖。在具体实施方案中，酶和底物是纯化的，例如纯化的葡萄糖氧化酶和纯化的d-葡萄糖，适当地医疗级、医疗装置级或药物级葡萄糖氧化酶和d-葡萄糖。本发明的纤维、敷料或组合物可包含另外的抗微生物剂，如：抗生素、抗病毒剂或抗真菌剂。在优选的实施方案中，本发明的纤维、敷料或组合物是医疗级或医疗装置级或药物级。优选地，所述物质是蜂蜜。蜂蜜可优选是医疗级或医疗装置级蜂蜜。在一些实施方案中，优选蜂蜜是已被处理以除去或灭活最初存在于蜂蜜中的过氧化氢酶活性的蜂蜜。根据本发明的优选实施方案，物质是巴氏灭菌蜂蜜，并且酶是葡萄糖氧化酶。根据优选的实施方案，物质是医疗级或医疗装置级蜂蜜，并且酶是医疗级或医疗装置级酶，优选葡萄糖氧化酶。如上所述，纤维或伤口敷料可以是无菌的，并且优选通过暴露于γ辐照进行灭菌。本发明的组合物也可以是无菌的，优选通过暴露于γ辐照灭菌。γ辐照的合适水平可以是10-70kgy，优选25-70kgy，更优选35-70kgy。由于臭氧尚未被美国fda授权用于在伤口愈合中使用的基于蜂蜜的产品的灭菌，因此灭菌优选不通过臭氧化发生，并且本发明的纤维、伤口敷料或组合物优选不包含臭氧或已经受通过臭氧化灭菌的任何组分。具体地说，本发明的纤维、伤口敷料或组合物不应包含臭氧化蜂蜜或臭氧化油。蜂蜜是由蜜蜂使用来自花的花蜜制成的天然产品。它是饱和或超饱和的糖溶液。蜂蜜在食品法典国际食品标准中被定义为“由蜜蜂从植物的花蜜或从植物活体部分的分泌物或植物活体部分上吮吸植物的昆虫的排泄物产生的天然甜味物质，蜜蜂收集所述花蜜或分泌物或排泄物，通过与其自身的特定物质组合进行转化、沉积、脱水、储存并留在蜂巢中以熟化和成熟”(修订的蜂蜜食典标准，2001年)。花蜜通常包含大约14％简单糖(w/w)、1％酚类化合物和85％水。酚类化合物给予蜂蜜味道、香气和色泽。在蜂巢的温暖条件下，通常36℃，花蜜将很快发酵。为了防止这种情况，将花蜜与来自觅食蜜蜂的唾液腺和咽下腺的含有酶的分泌物混合。在蜂巢中，花蜜从蜜蜂传递至蜜蜂，并且在将花蜜储存在蜂巢的蜂房中之前添加更多的分泌物。存在的酶的量随蜜蜂的年龄、饮食和生理阶段(当蜜蜂是觅食者时，其腺体产生更多的消化酶)、菌落强度、蜂巢的温度和花蜜流及其糖含量而变化。由蜜蜂添加至花蜜中的酶包括淀粉酶，其催化淀粉转化成糊精和糖；转化酶，其催化蔗糖转化为果糖和葡萄糖；以及葡萄糖氧化酶，其催化葡萄糖转化为过氧化氢和葡萄糖酸。低剂量的过氧化氢防止将快速发酵花蜜的酵母的生长。当蜜蜂逐渐干燥花蜜以形成蜂蜜时，葡萄糖酸使蜂蜜变为酸性(介于ph3.5与4.5之间)。水被有效地捕获至蜂蜜中的糖分子上，并且不可用于进一步化学反应。蜂蜜中的“游离”水的量被测量为水活度(aw)。据报道，在蜂蜜中发现的aw的范围是0.47-0.70，平均值为0.562和0.589(rciegg,m；blanc,b,1981,thewateractivityofhoneyandrelatedsugarsolutions.lebensmittel-wissenschaftundtechnologie14:1-6)。熟化蜂蜜的aw太低而不能支撑任何物种的生长，其中如果水含量低于17.1％，则不发生发酵(molan,p.c.(1992).theantibacterialactivityofhoney:1.thenatureoftheantibacterialactivity.beeworld,73(1),5-28)。蜂蜜的酸度和缺乏游离水防止发酵的进一步风险，并停止葡萄糖氧化酶工作。蜂蜜还含有源自花蜜的可变量的过氧化氢酶。花蜜蜂蜜的典型化学组成是：表1此外，存在痕量的花粉，其可用于鉴别蜂蜜的植物来源；以及酶转化酶、淀粉酶、过氧化氢酶和葡萄糖氧化酶。还存在植物化学组分。这种变化取决于蜂蜜的来源，但通常达大约1％。一旦稀释，天然蜂蜜中存在的葡萄糖氧化酶能够转化稀释蜂蜜中的葡萄糖底物以释放过氧化氢。然而，蜂蜜含量(特别是在葡萄糖氧化酶活性、葡萄糖和过氧化氢酶活性的含量中)的可变性意味着来自不同来源的蜂蜜或来自同一来源的蜂蜜的不同收获物在其抗微生物效力方面可能非常不同。根据本发明的一个实施方案，蜂蜜可进行巴氏灭菌。蜂蜜的巴氏灭菌灭活蜂蜜中存在的过氧化氢酶和葡萄糖氧化酶活性。任选地，可过滤巴氏灭菌的蜂蜜以除去可能在收获后蜂蜜中的任何颗粒(如蜡颗粒和蜂翅)。为了形成适用于制备本发明的纤维或敷料的储存稳定的组合物，葡萄糖氧化酶一旦冷却至不会使加入的葡萄糖氧化酶灭活且蜂蜜保持足够的液体以促进与葡萄糖氧化酶的混合的温度(适当地35℃-40℃)，葡萄糖氧化酶就可与巴氏灭菌的蜂蜜接触。蜂蜜可在足以用于热灭活过氧化氢酶活性的温度下进行巴氏灭菌。合适的最低温度是60℃至80℃。这一温度应优选维持至少两分钟。加热过程的控制可能是重要的，因为加热蜂蜜的副产物是hmf(羟基甲基糠醛)的形成，其用作蜂蜜的热量和储存变化的指标。hmf是通过在酸存在下分解果糖形成的。热量增加反应的速度。随着热量增加，速度的增长是指数的。对于蜂蜜升高到40℃以上的每一度时，接近正常蜂巢环境温度，hmf迅速增加。hmf不是有害的产品。果酱、糖蜜、金黄糖浆等可具有蜂蜜的hmf的10至100倍hmf水平。然而，hmf水平用作蜂蜜降解的指示，并且在食品法典标准下40mg/l是eu表蜂蜜的最大允许水平。为了防止hmf的积聚，优选将蜂蜜迅速升高至温度水平以灭活过氧化氢酶，且然后使用热交换机制将蜂蜜快速降温至介于40℃与45℃之间的最大值。在此实施方案的过程期间不添加水，且因此所得组合物不包含足够的游离水来允许葡萄糖氧化酶转化存在的葡萄糖来释放过氧化氢。因此，可用于形成本发明的纤维或敷料的储存稳定的组合物可包含：巴氏灭菌的蜂蜜和添加的葡萄糖氧化酶。可能没有可检测到的过氧化氢存在。组合物可在环境温度下储存至少数天。在本发明的其他实施方案中，蜂蜜可以是未巴氏灭菌的。根据一些优选的实施方案，蜂蜜(巴氏灭菌的或未巴氏灭菌的)是乳膏状蜂蜜。乳膏状蜂蜜是已被加工以控制结晶的蜂蜜。乳膏状蜂蜜含有大量的小晶体，其防止可在未加工的蜂蜜中发生的较大晶体的形成。用于产生乳膏状蜂蜜的方法在美国专利1,987,893中描述。在此过程中，原蜜首先进行巴氏灭菌，然后将先前加工的乳膏状蜂蜜添加至巴氏灭菌的蜂蜜以产生10％乳膏状蜂蜜和90％巴氏灭菌的蜂蜜的混合物。然后使混合物在14℃的控制温度下静置。所述方法在大约一周内产生一批乳膏状蜂蜜。可通过使正常蜂蜜结晶并将晶体粉碎至所需大小来制造种子批料。大规模生产者通过使用桨来搅拌蜂蜜混合物，同时将混合物保持在14℃来修改所述方法。在替代乳膏化方法中，可省略巴氏灭菌步骤，作为代替，使蜂蜜缓慢温热至37℃。在本发明的其他实施方案中，蜂蜜(巴氏灭菌的或未巴氏灭菌的)是未乳膏化的蜂蜜。例如，蜂蜜可能是巴氏灭菌的未乳膏化蜂蜜。葡萄糖氧化酶优选是具有用于人消费的食品标准或具有用于医疗应用的医疗级或医疗装置级的纯化的天然葡萄糖氧化酶制剂。葡萄糖氧化酶的活性可取决于所需的过氧化氢产生速率来选择。几种葡萄糖氧化酶制剂是可商购的(葡萄糖氧化酶由参考cas:9001-37-0鉴别)。来自非遗传修饰的生物体的葡萄糖氧化酶的常见微生物来源包括黑曲霉、尼崎青霉菌、变幻青霉、特异青霉菌的选定菌株。来自gmo黑曲霉的医疗装置级葡萄糖氧化酶可从biozymeuk获得，活性为240iu/mg。来自黑曲霉的食品标准葡萄糖氧化酶可从bio-catinc获得，活性为15,000单位/g。非遗传修饰的葡萄糖氧化酶可从bio-catinc获得，活性为12,000/g。来自黑曲霉的葡萄糖氧化酶(go3b2)可从bbienzymeslimited获得，活性为360单位/mg。污染物：α淀粉酶不大于0.05％，蔗糖酶不大于0.05％，麦芽糖酶不大于0.05％，并且go/cat不低于2000。酶活性(例如，葡萄糖氧化酶活性)可在例如1-400iu/mg或1-300iu/mg，例如250-280iu/mg的范围内。所使用的酶的量可能取决于几种因素，包括所需的用途、物质中存在的任何过氧化氢酶活性的量、物质中存在的底物的量、所需的过氧化氢释放水平和所需的过氧化氢释放时间长度。本领域的普通技术人员可容易地确定合适量的酶，如果需要，使用如以下实施例2中所述的良好扩散测定来确定不同量的酶的过氧化氢释放的程度。酶(如葡萄糖氧化酶)的合适量可以是纤维、敷料或组合物的0.0001％至0.5％w/w。可选择所使用的酶的量以便产生用于产生相当于选定苯酚标准品(例如10％、20％或30％苯酚标准品)的抗微生物活性的纤维、敷料或组合物。本发明的纤维、敷料或组合物(其中物质是蜂蜜(例如未巴氏灭菌的蜂蜜)，并且酶是能够转化蜂蜜中的d-葡萄糖以释放过氧化氢的葡萄糖氧化酶)可包含每克至少1单位、优选达1500单位的葡萄糖氧化酶。葡萄糖氧化酶是可天然存在于所述物质中的任何葡萄糖氧化酶活性的添加(即由于人为干预而添加的)。“单位”在本文中定义为在ph7.0下在25摄氏度下每分钟引起1微摩尔葡萄糖氧化的酶的量。申请人已经发现，可通过增加存在的葡萄糖氧化酶活性的量来增加本发明的纤维、敷料或组合物的抗微生物效力。在本发明的一些实施方案中，每克纤维、敷料或组合物可存在超过15单位，例如至少30单位、至少50单位或至少100个单位且适当地小于685单位，例如100-500单位的葡萄糖氧化酶。与每克具有达15单位葡萄糖氧化酶的纤维、敷料或组合物相比，这可提供优异的抗微生物特性。具体地说，可存在针对广泛范围的微生物的增加效力，所述微生物包括mssa、mrsa、a组和b组链球菌、肠球菌、大肠杆菌、大肠杆菌esbl、液化沙雷菌ampc、肺炎克雷伯氏菌、铜绿假单胞菌和白色念珠菌。在本发明的其他实施方案中，每克纤维、敷料或组合物可存在至少500单位，例如500-1000单位或685-1000单位的葡萄糖氧化酶。这些可提供更优异的抗微生物特性，如针对广泛范围的微生物(包括mssa、mrsa、大肠杆菌esbl和金黄色葡萄球菌)的效力增加。巴氏灭菌过程使蜂蜜中存在的任何酶活性灭活，且因此在来自不同来源的巴氏灭菌的蜂蜜之间或来自同一来源的蜂蜜的不同收获物之间不存在过氧化氢酶和底物转化活性的可变性。底物转化活性的量可通过添加具有限定量和活性的酶的纯化葡萄糖氧化酶制剂来控制。因此，蜂蜜的不同类型和收获物之间的抗微生物特性的固有可变性大大降低，并且具有低抗微生物效力的蜂蜜的抗微生物特性得到改善。根据本发明的进一步优选实施方案，物质可以是转化的物质，优选转化的糖浆，例如转化的枫糖浆。术语“转化的”在本文中用于指原始存在于物质中的蔗糖已例如通过转化酶或蔗糖酶的活性转化为葡萄糖和果糖。然后可将这类转化的物质与葡萄糖氧化酶一起使用。枫糖浆由糖枫或黑枫树的汁液制成。在寒冷的气候区域中，这些树在冬季前在它们的茎部和根部中储存淀粉，并且在春季，所述淀粉在转化成糖时在树液中增多。可轻拍枫树并且将渗出的汁液收集并浓缩以形成枫糖浆。枫糖浆通常包含大约66％蔗糖、33％水和1％葡萄糖和果糖。由于存在低量葡萄糖，当与葡萄糖氧化酶组合时，枫糖浆不具有强效抗微生物产生特性。然而，如果将蔗糖首先转化为葡萄糖和果糖，例如通过用转化酶或蔗糖酶处理，则所得到的转化糖浆包含高得多水平的葡萄糖氧化酶底物。本发明的纤维、敷料或组合物可用于治疗可通过过氧化氢治疗的任何微生物感染。实例包括由革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌、耐酸菌、病毒、酵母、寄生或致病微生物或真菌引起的感染。具体地说，可治疗由以下微生物引起的感染：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、痤疮丙酸杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、a组或b组β溶血性链球菌、大肠弯曲杆菌、空肠弯曲杆菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(mrsa)、甲氧西林敏感性金黄色葡萄球菌(mssa)、灰葡萄孢菌、结核分枝杆菌、隐孢子虫、疟原虫和弓形虫。本发明的纤维、敷料或组合物可用于治疗下生殖道感染。例如，本发明的组合物可局部施加以治疗这类感染。这类感染的实例包括细菌性阴道炎和一般细菌阴道分泌物。本发明的组合物可应用于诸如棉塞的插入装置。本发明的纤维、敷料或组合物可用于治疗包括耐碳青霉烯类肠杆菌科(cre)或产碳青霉烯酶肠杆菌科(cpe)的感染。根据本发明，还提供本发明的纤维或组合物用于预防或抑制微生物生长的用途。根据本发明还提供一种用作药物的本发明的纤维或组合物。根据本发明还提供一种用于预防、治疗或改善微生物感染的本发明的纤维或组合物。本发明还提供本发明的纤维或组合物在制造用于预防、治疗或改善微生物感染的药物中的用途。根据本发明还提供一种预防、治疗或改善微生物感染的方法，所述方法包括将本发明的纤维、组合物或伤口敷料施用至需要这种预防、治疗或改善的受试者。受试者可以是人或动物受试者。本发明的纤维、组合物或伤口敷料可局部施用。可用于形成本发明的纤维或伤口敷料的组合物，特别是其中未精制的天然物质是蜂蜜的那些组合物已被申请人发现具有显著伤口愈合性质。具体地说，已持续一个月至超过一年的慢性伤口在治疗的几天内明显开始愈合。具体地说，据信伤口愈合活动是由于过氧化氢的持续低水平释放所致。这导致将氧递送至伤口部位。氧在支持伤口愈合方面具有多种重要作用。复杂的伤口愈合过程需要大量的能量。如果伤口发生感染，则存在甚至更大的能量需求，这进而意味着对氧的甚至更大需求。氧参与自然愈合过程的许多机制。它在代谢支持、基质修复、杀菌/感染控制以及细胞反应的信号传导和控制中具有关键作用。接受足够氧的伤口与没有足够氧合的患者相比通常以增加的速率愈合。缺血/缺氧可直接抑制伤口愈合过程，如血管生成、胶原合成和上皮形成，并且还阻碍白细胞杀死细菌的能力。随着细菌繁殖，更多的白细胞被招募至伤口部位，从而进一步增加氧消耗。为了伤口愈合，必须具有足够的能量和营养物来驱动愈合过程。氧在这些代谢过程中是必不可少的。组织再生和愈合涉及肉芽组织的形成、上皮形成、收缩和重塑。愈合过程需要各种类型的细胞的增殖，随着基质积聚，形成新的血管并且置换上皮。这种细胞活性取决于氧利用率以允许无阻碍的呼吸。用于构建所有生物聚合物(例如蛋白多糖、结构蛋白质)所需的生物合成途径依赖于氧来满足潜在的能量需求。需要各种酶，包括基质金属蛋白酶，并且这些酶在能量需求、且因此氧需求方面也是代价高的。胶原合成是这些过程的基本组成部分。胶原的沉积对于重建结缔组织和作为血管形成过程的一部分使至关重要的。在形成前胶原期间，氧是脯氨酸和赖氨酸的羟基化所需的辅因子。成熟的胶原合成需要脯氨酰基-羟化酶和赖氨酰基-羟化酶，两者的功能都依赖于氧。新血管形成/血管形成对于完全愈合至关重要。这必须由适当的信号触发。在高氧环境中，巨噬细胞白细胞可触发所述信号，从而导致一系列协调的复杂事件，其涉及组织降解，随后胶原形成和组构、内皮细胞迁移/定殖和血管形成。当产生伤口时，身体的天然防御被激活。创伤后不久，嗜中性粒细胞聚集在伤口部位处，并且释放杀菌活性氧物质(ros)和过氧化氢(h2o2)以杀死细菌并预防感染。巨噬细胞响应于环境刺激到达伤口，吞噬外来颗粒，并且释放血管内皮生长因子(vegf)(一种对伤口愈合至关重要的血管生成因子)。氧在这些事件中起关键作用。巨噬细胞和嗜中性粒细胞白细胞的主要微生物杀伤机制之一是“呼吸爆发”–这些细胞杀死微生物所凭借的天然活性。在其呼吸爆发过程中具有缺陷的个体成为细菌感染的受害者。白细胞需要氧来递送呼吸爆发作用，并且增强氧水平可增强其效力。这些白细胞还具有在它们吞噬微生物(吞噬作用)时触发的其他细菌杀伤机制。这是依赖氧的过程，因为它涉及大量能源消耗，因此在缺氧环境中不能正常工作。它在富氧情况下最佳工作。氧对厌氧细菌也是致命的，并且对于一些抗生素的有效功能是重要的。分子氧是与生长因子和其他信号(例如，氧化还原信号)相互作用以调控信号转导途径的重要细胞信号。由巨噬细胞释放的触发血管生成的分子信号是“血管内皮生长因子”(vegf)。高氧水平可引起巨噬细胞白细胞释放vegf。许多其他重要因子和酶的基因由高氧水平诱导。一氧化氮(no)的产生也被认为是伤口愈合中的关键信号传导和控制事件。no是由酶一氧化氮合酶(nos)产生的，并且在伤口愈合的早期阶段，诱导形式的酶(inos)被上调。但是，它只有在精氨酸和氧供应充足的情况下才能发挥作用，以使得以适当速率生产no。氧也在信号传导(刺激)上皮化过程中起直接作用，上皮化过程是关键后期愈合事件，其中新的上皮细胞增殖，组构自身并分化成结构性上皮细胞。因此，据信本发明的纤维、伤口敷料或组合物对伤口部位的持续供氧在促进伤口愈合方面是特别重要的。伤口愈合的特征在于四个不同但重叠的阶段。随着血液逸出到损伤部位中，血小板与胶原和其他细胞外基质(ecm)组分接触。凝血因子被释放并且在几分钟内，伤口被纤维蛋白凝块覆盖。止血之后是炎症期。嗜中性粒细胞进入伤口部位并除去损伤的组织和细菌。巨噬细胞稍后出现，并且继续吞噬过程。血小板和巨噬细胞释放生长因子和促纤维化细胞因子如血小板源性生长因子(pdgf)和转化生长因子β(tgf-β)。肥大细胞释放含有组胺和引起周围血管渗漏并允许细胞进入伤口的其他介体的颗粒。在增殖期，内皮细胞形成新的毛细血管。成纤维细胞从相邻组织迁移到清洁的伤口中，增殖并沉积纤连蛋白、胶原蛋白和新ecm的其他组分。角质细胞增殖、迁移并恢复表面完整性。最终，在重塑期期间，富含成纤维细胞的肉芽组织逐渐被相对无细胞的瘢痕所取代。交联胶原蛋白分子给出接近完整皮肤的瘢痕拉伸强度。所有临床伤口都具有高微生物负荷可能性，并且需要管理过度感染。当这种负荷为导致明显感染高时，它对氧供应的需求很高，因为o2依赖性呼吸道爆发代表内源性限制伤口感染的主要机制。此外，损伤的组织需要通过氧化代谢来供给修复过程，且因此需要额外的氧。特征在于遭受破坏的脉管系统的损伤组织的氧需求的这种增加导致引起伤口缺氧的氧缺乏。外周血流减少和血管形成受损以及血管发生是糖尿病患者中、特别是下肢中的延迟性伤口的特征。这种低氧分压降低产生活性氧物质(ros)的内源性酶的活性。伤口缺氧延缓愈合，并且组织氧合状态是限制ros形成和成功愈合的重要决定因素。现在显而易见的是，氧依赖性氧化还原敏感过程不仅是消毒伤口并促进愈合所需的，而且是伤口反应过程中的信号传导和协调作用所需的，其是愈合级联的组成部分。以前公开的生物自由基是细胞破坏的自动介体的预想现在已经受到挑战。在体内，过氧化氢(h2o2)在伤口部位处主动产生以促进伤口愈合，并且在生物系统中，氧化剂不仅是氧化损伤的触发物，而且氧化剂如h2o2充当信号传导信使，并且驱动细胞活性的若干方面，这些结果提高ros分子可发挥信号传导作用超出单细胞背景并且可在伤口修复过程期间发挥重要的旁分泌信号传导作用的可能性。现在，这一概念已经得到验证。支持氧化剂如h2o2在细胞应激/炎症反应和随后的组织/神经元修复过程中发挥不可或缺的作用的证据是压倒性的。主要ros，h2o2在低浓度下充当第二信使并且起突出作用，因为它易于合成、易于降解并存在于所有类型的细胞中。它具有比自由基ros更长的半衰期，并且其小的不带电荷的分子容易扩散穿过组织。它不会像许多自由基那样与相邻分子不加区别地反应。低浓度的h2o2(10μm)充当化学吸引剂，这种活性不依赖于血清的存在。h2o2在相似的浓度范围内刺激人成纤维细胞和血管内皮细胞的增殖。当伤口产生时，身体的天然防御被激活，免疫细胞在创伤后不久聚集在伤口部位，并且释放高浓度的杀菌h2o2以防止污染。大部分ros在愈合的炎症期期间由嗜中性粒细胞和巨噬细胞释放，主要的微生物杀伤机制是这种“呼吸爆发”。所得伤口流体含有微摩尔浓度的ros(包括h2o2)，其保护宿主免受细菌和真菌感染。在25-50μm之间的浓度下观察到h2o2的抑菌作用，而在超过500μm的浓度下，观察到存活大肠杆菌的细菌细胞杀死。在其呼吸爆发过程中具有缺陷的个体成为细菌感染的受害者。内源性h2o2对特定细菌分子的特异性的缺乏连同其分泌到细胞外环境中而不是仅保留在吞噬体中的能力意味着这些分子可在整个伤口环境中发挥其抗微生物特性，其已在最大ros产生下显示，围绕伤口边缘形成h2o2梯度，从而达到大约100至200μm的距离。伤口愈合涉及细胞及其相关ros的建设性和破坏性作用的最佳组合以与消除感染性生物体和非自身物质并行消除感染。对于患有受损的伤口愈合的糖尿病患者，特别是在下肢中通过减少外周血流量和受损的血管形成和血管发生(ros浓度降低的结果)，造成伤口收缩的肌成纤维细胞(mfb)的分化受损。肌成纤维细胞细胞骨架的主要组分α-平滑肌肌动蛋白的表达随氧合血流的供应减少而减少。h2o2的较高浓度(500μm)刺激对于单核吞噬细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和淋巴细胞为趋化性的巨噬细胞炎性蛋白-1α的产生。已经表明，100μmh2o2产生刺激血管形成的血管内皮生长因子(vegf)，对角质形成细胞具有趋化性，其中低水平的h2o2通过活化促进细胞迁移和增殖，并且低水平的h2o2(10μm)已显示对嗜中性粒细胞具有趋化性，血管形成/趋化性过程在慢性伤口中被破坏。与患者中h2o2治疗的有利结果相反，有报道表明需要抑制伤口中的ros形成。响应于伤口内的过量ros浓度，白细胞和基质细胞具有许多细胞内、细胞外和膜结合的抗氧化系统，以在健康组织可变得受损之前清除ros。它们具有处于适当位置的系统，以安全地将活性氧代谢物解毒为不可避免的呼吸副产物。ros可被中和的生物化学系统对于生物体的存活是至关重要的。然而，剩下未处理的h2o2具有形成所有基团的最强反应性oh的潜力。已经证明，在皮肤伤口愈合期间，特别是在伤口边缘，可能发生ros清除剂的上调，目的是保护增殖细胞免受受损组织液内含有的高水平的氧化剂。这种ros解毒作用是多通道的，通过多种转录因子进行基因组控制，其中所得到的酶系统包括三种类型的加工酶超氧化物歧化酶(sod)(细胞溶质、线粒体和细胞外)、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶，其降低效力或使ros完全无害。除了解毒作用之外，由于sod与其他细胞氧化剂相比相对较长的半衰期及其穿过膜、作为最佳信号传导候选物的能力，sod是促进h2o2特性中的重要酶。除蛋白质ros控制外，ros还可与包含小抗氧化剂分子如维生素c、维生素e、β-胡萝卜素、谷胱甘肽、辅酶q、胆红素、α-生育酚、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nadph)和尿酸盐的非酶代谢物，特别是具有能够进行氧化/还原反应的金属离子的部分相互作用，例如转铁蛋白和铁蛋白都具有ros清除能力。然而，它是“导致电荷”消除ros的过氧化氢酶，并且占h2o2去除的50％以上。过氧化氢酶是含有血红素的酶，其在人体的多个组织中表达，在肝、肾和红细胞中具有较高浓度，在细胞内细胞器如过氧化物酶体内发现，并且依赖于h2o2扩散到这些隔室中并中和。男性中过氧化氢酶的血清水平已被报道为50ku/l，并且已显示愈合伤口中的过氧化氢酶活性在创伤后第一周期间下降，并且过氧化氢酶的活性水平在创伤后两周时恢复至其原始水平。伤口中过氧化氢酶的过度表达已经通过基因转移实现，并且通过这种酶上调h2o2的降解导致伤口血管形成和伤口闭合的损伤。此外，已经表明，过氧化氢酶和抗氧化剂n-乙酰基半胱氨酸阻断培养的平滑肌细胞对血小板源性生长因子(pdgf)的反应，其诱导已显示由h2o2介导的趋化性和dna合成。目前，急性伤口通常以上文描述的方式非常有序和有效地愈合，并且治疗方案采用传统程序，而不评估伤口环境和患者全身状况。病理性状况如慢性伤口(例如糖尿病不愈合褥疮)影响约1％的欧洲人群，连同对受影响患者的生活质量的可怕影响，慢性伤口具有重要经济相关性，因为潜在地2％的欧洲卫生预算用于对抗慢性伤口。已经证明了氧在急性和慢性伤口愈合中的积极作用，并且已经证明引入高压治疗(包括产生局部敷料的o2)以解决无反应性溃疡是有益的，因为这允许原位产生ros。除这些之外，依赖于低水平h2o2产生的传统疗法已得到很好的描述，并且现在直接引入持续低治疗性剂量的h2o2的新生物工程化疗法开始展示其在预防慢性伤口方面的有效性。这种技术不依赖于以使伤口发炎的高水平的ros淹没伤口部位并且不会由于氧化损伤而损害/延迟愈合，并且除了ros的浓度将处于阶梯衰减曲线的事实之外，例如含有1.5％h2o2的乳膏。这种先进疗法依赖于h2o2合成和降解的方式的复杂控制，连同其在炎性基质内的膜通透性，从而允许将治疗剂量的ros精确递送至伤口部位持续一段时间。从伤口愈合的这种研究和开发，内源性ros如何在伤口环境中产生的综合意态刺激愈合，并且经受氧化还原控制的许多过程是至关重要的。过量水平的ros，特别是h2o2导致氧化损伤、延长的炎症和可能的嗜中性粒细胞相关的蛋白水解损伤并且引起延迟的伤口闭合，但是这些升高的水平可作为愈合受损的结果存在，这在不活动和虚弱患者中频繁出现。然而，为了增强愈合和净化感染的伤口而产生的h2o2的量不足以引起氧化损伤，并且基于氧化还原的策略可充当助动起动慢性伤口愈合的有效工具。以上证明的非常低浓度的h2o2在伤口愈合、特别是在慢性伤口如糖尿病性溃疡中是有益的。这种理解产生新颖的基于氧化还原的技术，所述技术能够模拟伤口微环境中的这种内源性ros产生，并且具有有益于慢性伤口愈合的潜力。据信，除了其过氧化氢释放活性之外，伤口愈合活性还可由纤维、敷料或组合物的许多活性促成。具体地说，优选的实施方案据信具有清创伤口并使伤口脱臭的能力，具有抗炎特性以能够刺激组织生长以及控制疼痛并最小化瘢痕形成。恶臭是慢性伤口的常见特征，并且归因于从分解的血清和组织蛋白质产生恶臭化合物的厌氧细菌种类的存在。除了抗微生物作用之外，本发明的包含葡萄糖(优选24重量％-40重量％)的纤维、敷料或组合物允许细菌优先于氨基酸代谢此物，从而导致无臭的代谢物乳酸的产生。具有高克分子渗透压浓度(适宜地具有与蜂蜜类似的范围内的aw，即0.47-0.7)的纤维、敷料或组合物据信有助于通过组织蛋白酶的自溶作用来清创伤口。它们可通过其强力渗透作用从伤口组织中抽出淋巴液来创造湿润的伤口环境。这提供在伤口床和上覆坏死组织的界面处的恒定蛋白酶供应。这种行为也从下面洗涤伤口床的表面。由本发明的纤维、敷料或组合物释放的过氧化氢对蛋白酶的活化也可有所帮助。清创行为还可通过除去死亡组织而有助于降低伤口的细菌负荷。死亡组织众所周知为细菌生长提供极好的培养基，并且如果留在伤口中，则增加感染的风险。身体的炎症反应标志着愈合过程的开始，但延长的反应可抑制愈合，从而造成对组织的进一步损伤并使得更难以控制伤口。长期炎症反应通常与高水平的渗出物相关。抑制炎症以及减轻患者的疼痛减少血管开放，从而减轻水肿和渗出物。认为本发明的方面清洁感染和清创伤口的能力可有助于抗炎作用。本发明的包括抗氧化剂(优选一种或多种抗氧化剂存在于蜂蜜中)的实施方案也可通过清理自由基来减少过度炎症。长期炎症导致纤维化，其表现为伤口中的肥厚性瘢痕形成。本发明的纤维、敷料或组合物可通过减少炎症、促进血管形成和刺激肉芽组织的形成来减少瘢痕形成。优选的实施方案也可刺激上皮细胞的生长。本发明的纤维、敷料和组合物也据信具有由白介素-1(il-1)介导的免疫刺激作用。据信它们促进il-1从皮肤细胞的释放。il-1是也由巨噬细胞、单核细胞和树突状细胞分泌的细胞因子。它是身体针对感染的炎症反应的重要部分。它增加内皮细胞上粘附因子的表达，以使白细胞能够迁移至感染部位。它也作用于大脑的体温调节中心，从而导致体温升高。它被称为内源性热原。增加的体温有助于身体的免疫系统对抗感染。这是增加系统的抗微生物活性的炎性免疫应答的初始阶段。炎症反应通过其针对可能的感染的防御和参与细胞和组织修复和再生长而在伤口愈合中起中心作用。据信本发明的纤维、敷料或组合物的抗微生物作用由免疫刺激作用辅助并补充，这有助于损伤的组织和/或细胞的再生长和修复。本发明的纤维、敷料或组合物，特别是基于蜂蜜的那些纤维、敷料或组合物可为伤口组织提供湿润愈合环境而无周围皮肤浸渍的风险，并且防止敷料粘附至伤口床上，以使得当改变敷料时无疼痛且无组织损伤。它们还可刺激健康细胞发育并加速伤口中的肉芽形成和上皮化过程。它们也可具有闭塞作用以保护伤口和损伤的组织。还据信基于蜂蜜的组合物引起伤口ph的显著降低，这有利于愈合过程。根据本发明的优选方面，本发明的纤维、组合物或伤口敷料可用于伤口护理的方法中，包括伤口的治疗或伤口败血症的治疗或控制。伤口可以是急性伤口、慢性伤口、手术伤口(例如剖腹产伤口)、慢性烧伤或急性烧伤。纤维、组合物或伤口敷料可用于伤口败血症的预防性预防。应了解，纤维或敷料可接触存在于伤口部位的液体或通过所述液体稀释，在一些实施方案中，这将导致过氧化氢的释放。当任何组织的完整性受损(例如皮肤破裂、肌肉撕裂、烧伤或骨折)时，发生伤口。伤口可由一种行为(创伤)或外科手术、传染病或潜在病状引起。急性伤口包括手术切口和创伤性损伤，如撕裂、擦伤、撕脱、穿刺或叮咬以及烧伤损伤。急性伤口通常通过有序和及时的修复过程进行，其导致解剖和功能完整性的持续恢复。慢性伤口是已经存在超过三周的伤口，或者未能通过有序和及时的过程进行以产生解剖和功能完整性或者未能通过修复过程进行而没有建立持续和功能结果的伤口(lazarus等人,archdermatol.1994；130(4):489-493)。慢性伤口可分为四种类别：静脉性溃疡、动脉性溃疡、糖尿病性溃疡和褥疮。少数不属于这些类别的伤口可能是由于诸如辐射中毒或局部缺血的原因所致。通常发生在腿部的静脉性溃疡占慢性伤口的约70％至90％，并且主要影响老年人。它们被认为是由于由静脉中存在的瓣膜功能不当引起的静脉高压以阻止血液向后流动所致。局部缺血由功能障碍与再灌注损伤的组合引起，引起导致伤口的组织损伤。在静脉性疾病中，溃疡通常位于脚踝与小腿之间的脚脖区域中，通常位于腿的内侧。动脉性腿部溃疡由于动脉血流减少和随后的组织灌注而发生。动脉粥样硬化或外周血管疾病是动脉性腿部溃疡的最常见原因。如果不进行治疗，则血液供应的减少可导致受影响的动脉供给所述区域中的组织死亡。溃疡发展往往很快，伴随组织深度破坏。动脉性腿部溃疡可发生在小腿上的任何地方，并且通常更深和为圆形的，具有明确界定的边界。糖尿病性溃疡：糖尿病导致免疫损害和对小血管的损伤，从而防止组织的充分氧合，其引起慢性伤口。糖尿病导致神经病变，其抑制伤害感受和疼痛感受。因此，患者可能最初未注意到腿部和脚部的小伤口，并且可能因此不能预防感染或重复损伤。压力也在糖尿病性溃疡的形成中起作用。由于慢性溃疡，糖尿病患者对截肢的风险比一般人群高15％。褥疮通常发生在患有诸如瘫痪的病状的人中，其抑制通常经受压力的身体部位如脚跟、肩胛骨和骶骨的运动。褥疮由在组织上的压力大于毛细血管中的压力并且由此限制血液流入所述区域时发生的局部缺血引起。需要比皮肤更多的氧和营养物的肌肉组织显示来自长期压力的最差作用。与在其他慢性溃疡中一样，再灌注损伤会损伤组织。当治疗溃疡时，希望：在愈合时产生保护伤口的屏障；提供湿润伤口环境；割除伤口的腐肉；降低细菌负荷；并且理想地通过免疫调节和改进的营养促进愈合。没有常规伤口治疗产品能够实现所有这些作用。一些常规治疗具有这些作用中的一些，但是相当毒性的，并且因此不是理想的治疗。然而，本发明的纤维、敷料或组合物，特别是其中物质是蜂蜜的那些纤维、敷料或组合物，可具有所有这些特性。此外，可将抗微生物效力控制为比其他基于蜂蜜的伤口护理产品更有效，并且针对参与慢性伤口的一系列病原体，包括抗生素抗性生物体如mrsa是有效的。本发明的纤维、组合物或敷料在伤口的早期治疗中可以是特别有利的，特别是在诸如糖尿病患者的患者中，其中伤口可能恶化。早期治疗可预防在慢性伤口中出现的并发症，使患者保持活动性，并且避免处理并发症的费用。本发明的纤维、敷料或组合物也可有效减少或预防外科伤口的感染。手术伤口的感染是一个问题，特别是在具有大约10％的相当高的感染率的剖腹产术中。下文的实施例24表明，与历史数据相比，将组合物(其可用于形成本发明的纤维)单次施加至手术后剖腹产术伤口使手术部位感染率降低60％。外周插入的中心导管(picc线)用于施用化学疗法治疗和/或其他药物。picc线是一种长且薄的柔性管，其被插入到手臂的靠近肘部弯曲处的大静脉之一中。然后将其拧入静脉中直到尖端位于心脏正上方的大静脉中。然而，有可能在所述线内部或在其进入静脉的区域中发展感染。如果感染发展，则通常向患者给予抗生素。如果这些不清除感染，或如果感染严重，则可移除所述线。为了降低感染发展的可能性，可将含有抗微生物剂如氯己定或银的敷料施加至线进入部位。已经发现可用于形成本发明的纤维或敷料或组合物的组合物通过将本发明的组合物局部施加至线进入部位(参见下文的实施例23)而有效预防和清除picc线的定殖。本发明的纤维或敷料可容易地施加而无需任何专门的培训或复杂的设备。它们可能非常适合用于第三世界，其中患者常常具有增加的感染易感率，并且在手术和伤口护理中使用的材料和仪器通常比发达国家更具感染性。本发明的纤维或敷料可以是无毒的，并且因此可能不具有与含银敷料、pvp-i或氯己定相关的任何问题。本发明的纤维或敷料也可用于治疗供体或受体移植部位。根据本发明，提供一种治疗伤口的方法，所述方法包括向所述伤口施用本发明的纤维、敷料或组合物。根据本发明还提供一种用于治疗伤口的本发明的纤维或组合物。根据本发明进一步提供本发明的纤维或组合物在制造用于治疗伤口的药物中的用途。根据本发明还提供一种治疗炎症的方法，所述方法包括将本发明的纤维、敷料或组合物施用至炎症部位。根据本发明还提供一种用于治疗炎症的本发明的纤维或组合物。根据本发明进一步提供本发明的纤维或组合物在制造用于治疗炎症的药物中的用途。根据本发明还提供一种刺激组织生长的方法，所述方法包括向需要这种刺激的部位施用本发明的纤维、伤口敷料或组合物。根据本发明还提供一种用于刺激组织生长的本发明的纤维或组合物。根据本发明进一步提供本发明的纤维或组合物在制造用于刺激组织生长的药物中的用途。根据本发明还提供一种清创伤口的方法，所述方法包括向需要清创的伤口施用本发明的纤维、伤口敷料或组合物。根据本发明还提供一种用于清创伤口的本发明的纤维或组合物。根据本发明进一步提供本发明的纤维或组合物在制造用于清创伤口的药物中的用途。根据本发明还提供一种使伤口脱臭的方法，所述方法包括向需要脱臭的伤口施用本发明的纤维、伤口敷料或组合物。根据本发明还提供一种用于使伤口脱臭的本发明的纤维或组合物。根据本发明进一步提供本发明的纤维或组合物在制造用于使伤口脱臭的药物中的用途。对于伤口愈合应用，本发明的纤维、伤口敷料或组合物可以由保健提供者确定的适当频率施用。它们可至少每隔几天，例如每周，但优选每天或每隔一天施用。所施用的本发明的纤维、伤口敷料或组合物的量将取决于许多因素，如抗微生物特性的强度和其他伤口愈合特性、伤口的大小以及待治疗的受试者的年龄和状况。用于医疗用途的本发明的优选纤维、伤口敷料或组合物是无菌的，并且用于单次使用。避光储存的本发明的纤维、伤口敷料或组合物可保持稳定性至少六个月。例如，它们可被包装在高密度聚乙烯/低密度聚乙烯(hdpe/ldpe)管或聚酯-铝-聚乙烯(pet/ai/pe)药囊中。还根据本发明，提供一种包含本发明的纤维或组合物连同药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂的药物组合物。本发明的纤维、伤口敷料或组合物可包含至少一种合适的抗微生物或免疫刺激组分、赋形剂或佐剂，或需要提供产生抗微生物活性的能力的任何其他合适的组分。然而，优选地，本发明的纤维、敷料或组合物不包含任何抗生素。本发明的纤维、伤口敷料或组合物可用于治疗皮肤病症，如痤疮、湿疹或银屑病。痤疮和湿疹可具有可通过纤维、伤口敷料或组合物治疗的微生物感染组分，并且也可治疗由瘙痒引起的银屑病损伤的继发性微生物感染。本发明的纤维、伤口敷料或组合物可用于兽医学。重要的兽医应用包括治疗微生物感染和治疗或控制伤口护理或烧伤治疗。具体病状包括狗中的慢性皮肤感染(皮下葡萄球菌感染)，外耳炎(耳部感染)，动物的口腔护理，鸡中的弯曲杆菌感染，粉尘病，猪、家禽和牛中的肠道微生物感染，隐孢子虫感染，动物传染病的清除，伤口敷料，例如角质除去和脓肿治疗。本发明在兽医用途中具有特定优点，在于它允许微生物感染的治疗而不将抗生素引入食物链。本发明提供一种预防或治疗包含生物膜或能够形成生物膜的微生物的微生物感染的方法，所述方法包括施用根据本发明的纤维、伤口敷料或组合物。根据本发明，提供一种根据本发明的纤维或组合物，其用于预防或治疗包含生物膜或能够形成生物膜的微生物的微生物感染，优选地其中所述纤维或组合物预防或抑制由微生物进行的生物膜的生长或播种。根据本发明，提供根据本发明的纤维或组合物在制造用于预防或治疗微生物感染的药物中的用途，所述微生物感染包含生物膜或能够形成生物膜的微生物，优选地其中所述纤维或组合物预防或抑制由微生物进行的生物膜的生长或播种。微生物感染可包含能够形成生物膜的细菌，优选革兰氏阴性细菌，任选地其中所述细菌是铜绿假单胞菌或鲍氏不动杆菌。根据本发明的组合物、纤维或伤口敷料可用于治疗严重定殖的伤口。术语“严重定殖的”通常用于指已经达到临界点的伤口，在所述临界点细菌开始不利地影响伤口并开始引发其存在的迹象。严重定殖的伤口可指示生物膜的存在。大于105个生物体/克组织的细菌负荷常常接受为阻止伤口愈合(siddiquiar,bernsteinjm(2010)chronicwoundinfection:factsandcontroversies.clinicsindermatology28:519-26；edmonds,m.,&foster,a.(2004).theuseofantibioticsinthediabeticfoot.amjsurg,187(5a),25s-28s。因此，本发明的纤维、伤口敷料或组合物可用于治疗具有大于105个生物体/克组织的细菌负荷的伤口。本发明的组合物可包含在水溶性容器内，如药囊或袋中。因此，可提供封闭或含有本发明的组合物的水溶性容器。有利地，这可允许通过添加测量量的溶剂(如水或盐水)为特定治疗性应用递送精确量的组合物。例如，可使用包含在水溶性药囊中的本发明的组合物来形成鼻灌洗溶液或待被雾化(nebulised)或雾化(atomised)的溶液。因此，使含有所述组合物的可溶性药囊与水性溶剂接触可导致水性混合物的形成。水性混合物可含有足够的游离水以允许酶转化底物并产生过氧化氢。水溶性药囊优选由医疗级材料制成。药囊可在38℃的水中溶解。优选地，水溶性药囊是无毒的、抗静电的，耐紫外线的降解和耐气体、油和油脂的降解。在一个实例中，可溶性药囊可由聚合物或塑料材料(如聚乙烯醇)制成。包含在水溶性药囊中的本发明的组合物可用于治疗以下病状中的一种或多种：鼻病状，如窦炎和鼻窦炎；呼吸道感染，如上呼吸道感染(例如扁桃体炎、喉炎和窦炎)或下呼吸道感染(例如支气管炎、肺炎、细支气管炎和肺结核)；慢性阻塞性肺病；以及囊性纤维化。可提供包含本发明组合物和可充当屏障或层的水溶性材料的伤口敷料。水溶性材料可与组合物接触或邻近组合物。本发明的组合物可被水溶性材料包封或包含在水溶性材料中。水溶性材料可形成药囊、袋或外壳。组合物可位于水溶性材料的层之间。水溶性材料可由医疗级材料制成。水溶性材料可溶于38℃的水中。优选地，水溶性材料是无毒的、抗静电的，耐紫外线的降解和耐气体、油和油脂的降解。在一个实例中，水溶性材料可由聚合物或塑料材料(如聚乙烯醇)制成。在使用中，敷料可施加至伤口，并且水溶性材料可因此溶解在伤口渗出物中，从而允许本发明的组合物接触伤口并向伤口传送活性氧。有利地，可测量和准确剂量的活性氧因此可递送至伤口。水溶性材料可控制组合物从伤口敷料的释放。水溶性材料和组合物可附着至常规无菌伤口敷料的表面。在一些实施方案中，本发明的组合物具有特别低的水含量是有利的。例如，如果组合物被包含在水溶性容器或药囊中，情况可能是这样。如果水含量过高，则仅可能将组合物容纳在水溶性容器中持续短时间。因此，减少水含量可实现更长保质期。例如，三年保质期是特别令人希望的。在一些实施方案中，在组合物中存在12重量％或更少的水。在其他实施方案中，在组合物中存在10重量％或更少的水。在一些实施方案中，在组合物中存在5重量％或更少，或甚至3重量％或更少的水。在一些实施方案中，具有降低的水含量的组合物呈液体形式。在一些实施方案中，组合物呈固体形式。合适的固体形式包括粉末、薄片或颗粒。其他形式包括锭剂或片剂。在一些实施方案中，组合物是糊剂。例如，糊剂可能不容易在环境温度或室温(例如20℃-26℃)下流动，但其可具有柔软和/或可延展的稠度。在一些实施方案中，组合物可包含干蜂蜜或干燥蜂蜜。干蜂蜜或干燥蜂蜜产品是可商购的，并且通常通过诸如喷雾干燥、冷冻干燥或真空干燥的方法获得。因此，可使用这类方法制造具有降低的水含量的本发明的组合物。本发明的组合物可通过将能够转化底物以释放过氧化氢的酶添加至包含所述酶的底物的物质(例如未精制的天然物质，如蜂蜜)而获得或可获得，其中所述物质已被干燥并且包含12％或更少、10％或更少、5％或更少或3％或更少(按重量计)的水。或者，可将酶添加至所述物质中，并将所得组合物干燥。当酶被添加至物质中时，所述酶可以呈干或干燥形式。例如，酶可能已被冷冻干燥。酶可含有12％或更少、10％或更少、5％或更少或3％或更少(按重量计)的水。优选地，如果酶呈干或干燥形式，则其含有少于5％(按重量计)的水。可加入添加剂以促进干燥过程或改进干燥组合物的性质。例如，除非包括加工添加剂，否则干燥蜂蜜产品具有结块或粘合的倾向。合适的添加剂包括加工助剂、干燥助剂、填充剂或抗结块剂。添加剂可包括淀粉、奶粉、硬脂酸钙、麸皮糊精、卵磷脂和大豆粉。干燥蜂蜜制剂通常含有大于或等于50％、65％、70％(按重量计)的蜂蜜。因此，制剂的其余部分可包含合适的添加剂。在优选的实施方案中，没有添加添加剂来促进干燥过程或改进组合物的性质。因此，根据本发明，可提供一种组合物，其包含：能够转化底物以释放过氧化氢的酶；和包含所述酶的底物的物质，其中所述酶是可存在于所述物质中的能够转化所述底物以释放过氧化氢的任何酶活性的添加，并且其中所述组合物包含12％或更少、10％或更少、5％或更少或3％或更少(按重量计)的水。所述组合物可如本文所描述进一步限定。例如，酶可以是葡萄糖氧化酶，并且物质可以是未精制的天然物质(如蜂蜜)，或它可以是纯化的底物(如葡萄糖)。所述组合物可通过冷冻干燥获得或可获得。所述组合物然后可用于治疗如本文所述的医疗病状。例如，所述组合物可用于治疗伤口。为了治疗医疗病状，可首先将组合物添加至水中以形成水溶液。添加水可引发过氧化氢产生。根据本发明，可提供一种方法，其包括：干燥组合物，所述组合物包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶和包含所述酶的底物的物质，其中所述酶是可存在于所述物质中的能够转化所述底物以释放过氧化氢的任何酶活性的添加。所述组合物可通过喷雾干燥、冷冻干燥或真空干燥来进行干燥。干燥可使组合物中的水含量减少至12％或更少、10％或更少、5％或更少或3％或更少(按重量计)的水。或者，可提供一种方法，其包括：向包含所述酶的底物的干燥物质中添加酶。或者，所述方法可包括：i)干燥包含所述酶的底物的物质，以使得所述干燥产生具有12％或更少、10％或更少、5％或更少或3％或更少(按重量计)的水的物质；以及ii)将所述酶添加至所述干燥物质中，所述酶是可存在于所述物质中的能够转化所述底物以释放过氧化氢的任何酶活性的添加。所述物质可通过喷雾干燥、冷冻干燥或真空干燥来进行干燥。添加至所述物质中的酶可呈干或干燥形式。本发明的组合物、纤维或敷料可包含足够的酶和底物以提供特定水平或浓度的过氧化氢的持续释放。例如，本发明的组合物、混合物、纤维或敷料可提供至少2ppm、至少5ppm、至少10ppm、至少20ppm或至少50ppm浓度下的过氧化氢的持续释放。在优选的实施方案中，所述水平可以是至少2ppm。在一些实施方案中，所述浓度可以是最多500ppm、200ppm、100ppm、50ppm、20ppm或10ppm。在优选的实施方案中，所述水平可以是20ppm或更少。在更优选的实施方案中，所述水平可以是10ppm或更低。例如，所述浓度可以是10至500ppm、20至200ppm或50至100ppm、2至50ppm、2至20ppm或5至10ppm。如果组合物不包含足够的游离水来允许酶转化底物(例如，如果所述组合物是干或干燥的组合物)，则仅一旦当其被水稀释并且存在足够的游离水来允许酶转化底物才可发生过氧化氢产生。因此，添加水可引发过氧化氢产生。组合物、混合物、纤维或敷料可提供过氧化氢的持续释放至少1小时、至少12小时、至少24小时、至少2天或至少4天。优选地，过氧化氢的水平持续至少4天。在优选的实施方案中，过氧化氢的水平在10至500ppm下持续至少1小时、至少12小时、至少24小时、至少2天或至少4天。在其他实施方案中，过氧化氢的水平在50至100ppm下持续至少1小时、至少12小时、至少24小时、至少2天或至少4天。在其他实施方案中，过氧化氢的水平在2至50ppm下持续至少12小时、至少24小时、至少2天或至少4天。在其他实施方案中，过氧化氢的水平在5至10ppm下持续至少12小时、至少24小时、至少2天或至少4天。本发明的组合物或用于本发明中的组合物可包含非水性溶剂。如果组合物包含未精制的天然物质如蜂蜜，则这可能是特别有利的。例如，蜂蜜具有高粘度并且是粘性的，这可能使得难以处理和递送某些产品。如果需要储存稳定的组合物，则可能不可能通过添加水性溶剂来降低粘度。可通过使用非水性溶剂来降低蜂蜜的粘度。在本发明的包含非水性溶剂的组合物中，非水性溶剂可包含多于一种非水性溶剂的混合物(或由其组成)。因此，本文中提及“非水性溶剂”包括一种或多种或至少一种非水性溶剂。然而，在一些实施方案中，非水性溶剂可仅包含一种非水性溶剂(或由其组成)。通过在非水性溶剂中形成溶液，组合物中的物质可变得更易于加工和更低粘性。因此，可将这类溶液涂覆到基底、如织物基底上，并且因此可提供伤口敷料的组分。此外，粘性较低的组合物可以是可喷雾的。因此，根据本发明，提供一种用于产生抗微生物活性的组合物，所述组合物包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶、包含所述酶的底物的物质以及非水性溶剂。在包含非水性溶剂的组合物中，所述物质可以是未精制的天然物质如蜂蜜，或包含所述酶的纯化底物的物质，如本文所述。本发明的包含非水性溶剂的组合物可以是可静电纺丝的，如本文所述。在本发明的包含非水性溶剂的组合物中，所述物质可以是或可包含本文所述的未精制的天然物质。根据本发明，提供一种可静电纺丝的组合物，其包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶、包含所述酶的底物的未精制的天然物质以及非水性溶剂，其中所述酶是可存在于所述未精制天然物质中的能够转化所述底物以释放过氧化氢的任何酶活性的添加。本发明的包含非水性溶剂的组合物可包含如本文所述的聚合物。根据本发明，提供一种组合物，其包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶；包含所述酶的底物的物质；非水性溶剂；以及聚合物。在本发明的包含非水性溶剂的组合物中，所述物质可包含所述酶的纯化底物，如本文所述。根据本发明，提供一种组合物，其包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶；含有所述酶的纯化底物的物质；以及非水性溶剂。根据本发明，提供一种用于产生抗微生物活性的组合物，其中所述组合物包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶；含有所述酶的纯化底物的物质；非水性溶剂；以及聚合物。根据本发明，提供一种用于产生抗微生物活性的组合物，其中所述组合物包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶；包含所述酶的底物的未精制的天然物质；以及非水性溶剂。根据本发明，提供一种用于产生抗微生物活性的组合物，其中所述组合物包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶、包含所述酶的底物的未精制的天然物质、非水性溶剂以及聚合物，其中所述酶是可存在于所述未精制天然物质中的能够转化所述底物以释放过氧化氢的任何酶活性的添加。包含非水性溶剂的组合物可以是储存稳定的组合物，其不包含足够的游离水来允许酶转化底物，如本文所述。在包含非水性溶剂的组合物中，所述物质可缺乏过氧化氢酶活性，如本文所述。包含非水性溶剂的组合物可提供过氧化氢的持续释放持续一段时间，如本文所述。例如，组合物可能在组合物的稀释之后可提供过氧化氢的持续释放至少二十四小时，更优选至少四十八小时。合适的组合物在组合物的稀释后提供低于2mmol/升水平下的过氧化氢的持续释放至少二十四小时的时间段。包含非水性溶剂的组合物可包含足够的酶和底物以提供至少0.1、0.5、1或1.5mmol/升过氧化氢的持续释放至少24小时、更优选48小时的时间段。根据本发明，提供一种组合物，其包含：能够转化底物以释放过氧化氢的酶；包含所述酶的底物的物质；以及非水性溶剂，其中所述酶是可存在于所述物质中的能够转化所述底物以释放过氧化氢的任何酶活性的添加，并且其中所述组合物包含12％或更少、10％或更少、5％或更少或3％或更少(按重量计)的水。在包含非水性溶剂的组合物中，酶是可存在于所述物质中的能够转化底物以释放过氧化氢的任何酶活性(本文称为“底物转化活性”)的添加(即由于人为干预而添加的)。包含非水性溶剂的组合物可包含如本文所述的纯化酶。根据本发明还提供用作药物的包含非水性溶剂的组合物。例如，本发明的这类组合物可用于治疗本文所述的任何疾病或病状如微生物感染，或用于治疗本文所述的任何疾病或病状如微生物感染的方法中。在本发明的包含非水性溶剂的组合物中，非水性溶剂可包含乙醇、二甲亚砜、甘油、乙二醇或丙二醇。优选地，非水性溶剂是或包含甘油。甘油可充当湿润剂，并且因此包含甘油的组合物可有助于软化或保湿干性皮肤。非水性溶剂可包含乙醇、二甲亚砜、甘油、乙二醇或丙二醇中的一种或多种。在一些实施方案中，非水性溶剂可包含乙醇、二甲亚砜、甘油、乙二醇或丙二醇中的两种。在一些实施方案中，非水性溶剂可包含乙醇、二甲亚砜、甘油、乙二醇或丙二醇中的三种。在一些实施方案中，非水性溶剂可包含乙醇、二甲亚砜、甘油、乙二醇或丙二醇中的四种。各种非水性溶剂的溶解度参数和粘度参数在以下表中示出。物质粘度乙醇1.04mpa.s二甲亚砜1.99mpa.s甘油1412mpa.s乙二醇16.1mpa.s丙二醇42mpa.s水1.3mpa.s在优选的实施方案中，可选择非水性溶剂以使得它们具有在上表中举例说明的非水性溶剂的范围内的溶解度参数。例如，δt/mpa1/2可以是26至50，如26.5至47.8。δd/mpa1/2可以是15至19，如15.6至18.1。δp/mpa1/2可以是8至16，如8.8至16。δh/mpa1/2可以是10至45，如10.2至42.3。非水性溶剂可根据所需的粘度进行选择。例如，如果需要更大的粘度，则可优选甘油。在20℃下本发明的组合物的合适粘度可以是100mpa.s.或更低。在一些实施方案中，在20℃下合适的粘度可以是75mpa.s.或更低。在一些实施方案中，在20℃下合适的粘度可以是75mpa.s.或更低。在包含非水性溶剂的组合物的一些实施方案中，所述组合物可包含至少2重量％的非水性溶剂。在包含非水性溶剂的组合物的一些实施方案中，所述组合物可包含至少5重量％的非水性溶剂。在包含非水性溶剂的组合物的一些实施方案中，所述组合物可包含至少10重量％的非水性溶剂。在其他实施方案中，所述组合物可包含至少20重量％的非水性溶剂。在其他实施方案中，所述组合物可包含至少25重量％的非水性溶剂。在其他实施方案中，所述组合物可包含至少50重量％的非水性溶剂。在一些实施方案中，所述组合物可包含至少75重量％的非水性溶剂。水性溶剂的量可根据组合物的预期应用而变化。例如，可喷雾组合物或用于抗菌擦拭物的组合物可包含较高水平的非水性溶剂，以使得组合物具有较低的粘度。在一些实施方案中，组合物中非水性溶剂的量可以是50重量％-90重量％。对于一些应用，可能希望具有包含较少量的非水性溶剂的组合物，如用于形成伤口敷料的组合物。因此，一些组合物可包含最大量的非水性溶剂。组合物中非水性溶剂的最大量可以是50重量％或更低。在一些实施方案中，组合物中非水性溶剂的量可以是1重量％-50重量％、5重量％-50重量％或10重量％-50重量％。在本发明的包含非水性溶剂的组合物中，组合物可包含蜂蜜。如果组合物含有蜂蜜，则蜂蜜的量可以是至少20重量％。在一些实施方案中，蜂蜜可以至少25重量％的量存在。在一些实施方案中，蜂蜜可以至少50重量％的量存在。在一些实施方案中，蜂蜜可以至少75重量％的量存在。在一些实施方案中，组合物中蜂蜜的量可以是50重量％或更低。在一些实施方案中，组合物中蜂蜜的量可以是25重量％或更低。在一些实施方案中，蜂蜜可以50％-90％的量存在于组合物中。在一些实施方案中，组合物中的蜂蜜可以1重量％-50重量％、5重量％-50重量％或10重量％-50重量％的量存在。如果将组合物用于涂覆诸如织物的基底，则组合物的重量优选是每平方米基底至少100g。在其他实施方案中，组合物的重量可以是每平方米基底至少200g。在其他实施方案中，组合物的重量可以是每平方米基底至少300g。包含非水性溶剂的组合物可包含添加的或另外的水。因此，水可以是可存在于包含酶的底物的物质中的任何水的添加。例如，如果本发明的组合物中的物质是诸如蜂蜜的未精制天然物质，则所述组合物可包含已经存在于所述未精制天然物质中的水的添加的水。尽管添加的水，但是组合物可以是储存稳定的，如本文所述。由于非水性溶剂可结合或锁定在水中，所以添加的水可能不可用或不是游离的来允许酶转化底物。因此，非水性溶剂可充当湿润剂。非水性溶剂或湿润剂可降低组合物的水活度(aw)。因此，本发明的组合物可被认为包含添加的水和湿润剂，其中所述湿润剂是可已经存在于所述物质中的任何湿润剂的添加。未精制的天然物质如蜂蜜可被认为是湿润剂或包含湿润剂。因此，如果组合物包含未精制的天然物质，则所述湿润剂是所述未精制天然物质或可存在于所述未精制天然物质中的任何湿润剂的添加。在一些实施方案中，湿润剂不是非水性溶剂。然而，在优选的实施方案中，湿润剂是非水性溶剂。将未精制天然物质(如蜂蜜)包含在组合物中可使组合物粘稠并限制其应用范围。在组合物中包含非水性溶剂或润湿剂和添加的水可降低组合物的粘度，并且如果例如组合物是可容易喷雾的，则粘性较低的组合物可能是有益的。包含蜂蜜、非水性溶剂和添加的水的可喷雾组合物的实例示于实施例40中。在20℃下本发明的组合物的合适粘度可以是100mpa.s.或更低。在一些实施方案中，在20℃下合适的粘度可以是75mpa.s.或更低。在一些实施方案中，在20℃下合适的粘度可以是50mpa.s.或更低。因此，根据本发明，提供一种用于产生抗微生物活性的储存稳定的组合物，所述组合物包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶、包含所述酶的底物的物质、非水性溶剂以及水。所述水是可存在于物质中的任何水的添加。所述酶是可存在于物质中的能够转化底物以释放过氧化氢的任何酶活性的添加。根据本发明，提供一种用于产生抗微生物活性的储存稳定的组合物，所述组合物包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶、包含所述酶的底物的物质、湿润剂以及水。所述水是可存在于物质中的任何水的添加。所述酶是可存在于物质中的能够转化底物以释放过氧化氢的任何酶活性的添加。所述湿润剂是所述物质或可存在于所述物质中的任何湿润剂的添加。在本发明的包含湿润剂的组合物中，湿润剂可包含多于一种湿润剂的混合物(或由其组成)。因此，本文中提及“湿润剂”包括一种或多种或至少一种湿润剂。然而，在一些实施方案中，润湿剂可仅包含一种湿润剂(或由其组成)。在一些实施方案中，所述物质是或包含所述酶的纯化底物。在一些实施方案中，所述物质是或包含未精制的天然物质，优选蜂蜜。根据本发明，提供一种用于产生抗微生物活性的储存稳定的组合物，所述组合物包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶、包含所述酶的底物的未精制天然物质、非水性溶剂以及水。所述水是可存在于物质中的任何水的添加。所述酶是可存在于物质中的能够转化底物以释放过氧化氢的任何酶活性的添加。根据本发明，提供一种用于产生抗微生物活性的储存稳定的组合物，所述组合物包含能够转化底物以释放过氧化氢的酶、包含所述酶的底物的未精制天然物质、湿润剂以及水。所述水是可存在于物质中的任何水的添加。所述酶是可存在于物质中的能够转化底物以释放过氧化氢的任何酶活性的添加。所述湿润剂是可存在于未精制天然物质中的任何湿润剂的添加。可选择本发明的组合物中的湿润剂或非水性溶剂和额外的水的相对量，以使得所述组合物不包含足够的游离水来允许酶转化底物。当这种组合物与甚至更多的水接触时，例如如果所述组合物被稀释或者如果所述组合物与来自伤口的流体接触，则可存在足够的游离水用于酶转化底物并产生过氧化氢。在本发明的包含湿润剂或非水性溶剂和额外的水的组合物中，所述组合物中的额外的水的量可以是至少5重量％。在其他实施方案中，所述组合物中的额外的水的量可以是至少10重量％。在其他实施方案中，额外的水的量可以是至少15重量％。在其他实施方案中，额外的水的量可以是至少20重量％。组合物中的额外的水的量可以是50重量％或更少。在其他实施方案中，额外的水的量可以是至少40重量％或更少。在一些实施方案中，额外的水的量可以是5重量％-50重量％、5重量％-20重量％、15重量％-50重量％或20重量％-40重量％。在本发明的包含湿润剂或非水性溶剂和额外的水的组合物中，所述组合物中的水的总量(即，可已经存在于物质中的水的量与额外的水的量的组合)可以是至少15重量％。在其他实施方案中，水的总量可以是至少20重量％。组合物中的水的总量可以是50重量％或更少。在其他实施方案中，水的总量可以是40重量％或更少。在一些实施方案中，水的总量可以为15重量％-50重量％，或20重量％-40重量％。在本发明的包含湿润剂或非水性溶剂和额外的水的组合物中，所述组合物中水的摩尔分数可以是50重量％至75重量％。例如，所述组合物中水的摩尔分数可以是60重量％-70重量％。在本发明的包含额外的水和湿润剂或非水性溶剂的组合物中，水活度(aw)可小于0.6，优选小于0.5。在本发明的包含额外的水和湿润剂或非水性溶剂的组合物中，湿润剂或非水性溶剂的量可以是至少30重量％。在其他实施方案中，湿润剂或非水性溶剂的量可以是至少40重量％。在一些实施方案中，湿润剂或非水性溶剂的量可以是至少50重量％。湿润剂或非水性溶剂的量可以是75重量％或更少。湿润剂或非水性溶剂的量可以是60重量％或更少。在一些实施方案中，湿润剂或非水性溶剂的量可以是30重量％-75重量％或40重量％-60重量％。在本发明的包含湿润剂或非水性溶剂和额外的水的组合物中，湿润剂或非水性溶剂可选自乙二醇、丙二醇、甘油或二甲亚砜。在一些实施方案中，湿润剂或非水性溶剂是甘油。湿润剂或非水性溶剂可包含乙醇、二甲亚砜、甘油、乙二醇或丙二醇中的一种或多种。在一些实施方案中，湿润剂或非水性溶剂可包含乙醇、二甲亚砜、甘油、乙二醇或丙二醇中的两种。在一些实施方案中，湿润剂或非水性溶剂可包含乙醇、二甲亚砜、甘油、乙二醇或丙二醇中的三种。在一些实施方案中，湿润剂或非水性溶剂可包含乙醇、二甲亚砜、甘油、乙二醇或丙二醇中的四种。在一些实施方案中，包含非水性溶剂的组合物基本上不包含聚合物，例如小于的1重量％、0.5重量％、0.1重量％或0.01重量％的聚合物。在优选的实施方案中，本发明的包含非水性溶剂的组合物不是或不包含以下：i)含醇凝胶其中“活性蜂蜜”是具有添加的葡萄糖氧化酶的蜂蜜在优选的实施方案中，本发明的包含非水性溶剂的组合物不是或不包含以下：ii)非水性喷雾活性蜂蜜70％丙二醇30％在优选的实施方案中，本发明的包含非水性溶剂的组合物不是或不包含以下：iii)真菌指甲治疗泡沫孔中的具有活性蜂蜜的石膏羟丙基纤维素甘油异丙醇柠檬酸一水合物在优选的实施方案中，本发明的包含非水性溶剂的组合物不是或不包含以下：iv)咽喉喷雾剂蜂蜜和甘油，优选包含5％-20％蜂蜜在优选的实施方案中，本发明的包含非水性溶剂的组合物不是或不包含以下：v)乳膏vi)粉末活性蜂蜜麦芽糖糊精布洛芬微晶纤维素(cmc)聚乙烯吡咯烷酮(pvp)在某些实施方案中，本发明的组合物可不包括上述组合物(i)至(vi)中的任一种或任何组合。具体地说，本发明的组合物可不包括以上(i)；或(ii)；或(iii)；或(iv)；(ⅴ)；或(vi)的组合物；或本发明的组合物可不包括上述组合物的以下组合中的任一个：(i)和(ii)；(i)和(iii)；(i)和(iv)；(i)和(v)；(i)和(vi)；(ii)和(iii)；(ii)和(iv)；(ii)和(v)；(ii)和(vi)；(iii)和(iv)；(iii)和(v)；(iii)和(vi)；(iv)和(v)；(iv)和(vi)；或(v)和(vi)；或(i)、(ii)和(iii)；(i)、(ii)和(iv)；(i)、(ii)和(v)；(i)、(ii)和(vi)；(i)、(iii)和(iv)；(i)、(iii)和(v)；(i)、(iii)和(vi)；(i)、(iv)和(v)；(i)、(iv)和(vi)；(i)、(v)和(vi)；(ii)、(iii)和(iv)；(ii)、(iii)和(v)；(ii)、(iii)和(vi)；(ii)、(iv)和(v)；(ii)、(iv)和(vi)；(ii)、(v)和(vi)；(iii)、(iv)和(v)；(iii)、(iv)和(vi)；或(iii)、(v)和(vi)；或(i)、(ii)、(iii)和(iv)；(i)、(ii)、(iii)和(v)；(i)、(ii)、(iii)和(vi)；(i)、(iii)、(iv)和(v)；(i)、(iii)、(iv)和(vi)；(i)、(iii)、(v)和(vi)；(i)、(iv)、(v)和(vi)；(ii)、(iii)、(iv)和(v)；(ii)、(iii)、(iv)和(vi)；(ii)、(iii)、(v)和(vi)；(ii)、(iv)、(v)和(vi)；或(iii)、(iv)、(v)和(vi)；或(i)、(ii)、(iii)、(iv)和(v)；(i)、(ii)、(iii)、(iv)和(vi)；(i)、(ii)、(iv)、(v)和(vi)；或(i)、(iii)、(iv)、(v)和(vi)；或(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)和(vi)。本发明的包含非水性溶剂的组合物的具体实例描述于实施例39中。在本发明的一些实施方案中，可能重要的是，本发明的纤维或组合物在抗微生物(如果需要，一旦所述纤维或组合物与足够的游离水接触以释放过氧化氢)但不是基本上细胞毒性或细胞抑制性的浓度下或时间段内使用。手术蜂蜜是对在以下实施例20中更详细地描述的本发明组合物中的一些实施方案给出的名称。以下实施例41描述不同浓度的不同手术蜂蜜制剂对肥大细胞的作用。肥大细胞是位于与外部环境(如鼻粘膜组织)紧密接触的组织中的上皮细胞正下方的岗哨细胞。它们在识别病原体和调节免疫反应方面发挥重要作用。实施例41描述不同浓度的手术蜂蜜对人肥大细胞系hmc-1的细胞的作用。实施例41中的结果表明，当用组合物治疗人或动物受试者时，在小于100g/l、优选40g/l或更低、10g/l或更低或1g/l或更低的浓度下使用手术蜂蜜(特别是s1、s2或s3制剂，优选s2或s3制剂)或本发明的其他组合物可以是有益的。当存在肥大细胞时，如与外部环境紧密接触的组织中的上皮，例如鼻粘膜组织，这可以是特别有利的。这类浓度对于治疗以下各项可以是特别有效的：鼻病状，如窦炎和鼻窦炎；呼吸道感染，如上呼吸道感染(例如扁桃体炎、喉炎和窦炎)或下呼吸道感染(例如支气管炎、肺炎、细支气管炎和肺结核)；慢性阻塞性肺病；以及囊性纤维化。当用组合物治疗人或动物受试者时，将手术蜂蜜或本发明的其他组合物与人或动物细胞的接触限制至少于24小时，优选少于6小时或少于3小时也可以是有益的。当存在肥大细胞时，如与外部环境紧密接触的组织中的上皮，例如鼻粘膜组织，这可以是特别有利的。这类有限接触对于治疗以下各项可以是特别有效的：鼻病状，如窦炎和鼻窦炎；呼吸道感染，如上呼吸道感染(例如扁桃体炎、喉炎和窦炎)或下呼吸道感染(例如支气管炎、肺炎、细支气管炎和肺结核)；慢性阻塞性肺病；以及囊性纤维化。现在参考附图仅通过举例的方式描述可用于制备本发明的纤维、敷料和组合物的本发明的优选实施方案和优选组合物，其中：图1示出来自具有不同量的添加的葡萄糖氧化酶的巴氏灭菌的ulmo蜂蜜的抗微生物作用的孔扩散测定的结果；图2示出与不同苯酚标准品的作用相比，来自具有不同量的酶的组合物的抗微生物作用的孔扩散测定的结果；图3示出来自具有添加的葡萄糖氧化酶的巴氏灭菌的tineo蜂蜜的抗微生物作用的孔扩散测定的结果的照片；图4示出来自不同组合物的抗微生物作用的孔扩散测定的结果；图5示出来自包含不同酶制剂的组合物的抗微生物作用的孔扩散测定的结果；图6示出来自在储存60或90天后组合物的抗微生物作用的孔扩散测定的结果；图7示出来自组合物的粉末制剂的抗微生物作用的孔扩散测定的结果；图8示出与麦卢卡umf25+蜂蜜相比，来自灭菌的基于蜂蜜的组合物的抗微生物作用的孔扩散测定的结果；图9示出使用灭菌的基于蜂蜜的组合物治疗感染的脚趾的作用；图10示出使用灭菌的基于蜂蜜的组合物治疗趾部溃疡的作用；图11示出使用灭菌的基于蜂蜜的组合物治疗足部溃疡的作用；图12示出使用灭菌的基于蜂蜜的组合物治疗足部溃疡的作用；图13示出使用灭菌的基于蜂蜜的组合物治疗创伤性腿部伤口的作用；图14示出使用灭菌的基于蜂蜜的组合物治疗感染的腿部伤口的作用；图15示出使用灭菌的基于蜂蜜的组合物治疗腿部溃疡的作用；图16示出使用灭菌的基于蜂蜜的组合物治疗褥疮的作用；图17示出使用灭菌的基于蜂蜜的组合物治疗围绕导管的进入点的感染的作用；图18示出手术蜂蜜1(s1)、手术蜂蜜3(s3)和medihoney(mh)对于不同测试生物体的时间杀死曲线：(a)金黄色葡萄球菌；(b)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(mrsa)；(c)大肠杆菌；(d)耐万古霉素肠球菌(vre)；(e)铜绿假单胞菌；(f)克雷伯氏菌；(g)大肠杆菌esbl；(h)粪肠球菌；图19示出用于测试s1和s2手术蜂蜜的抗病毒活性的噬斑测定的结果；图20示出使用s1手术蜂蜜治疗压疮的结果的照片，其中：(a)示出治疗的第1天；并且(b)示出治疗的第30天；图21示出手术蜂蜜和两种改性的原型pt1和pt2的不同过氧化氢生产速率；以及图22示出在改性的蜂蜜、手术蜂蜜、pt1和pt2中苯酚活性与最大过氧化氢活性之间的关系。图23示出以下作用：(a)纯s1手术蜂蜜；或(b)s1手术蜂蜜的连续稀释液对铜绿假单胞菌菌株pa01和临床烧伤伤口分离株1054的生物膜形成的作用；和(c)纯s1手术蜂蜜；或(d)s1手术蜂蜜的连续稀释液对鲍氏不动杆菌对照菌株aye和aci克隆nctc_13420(c59)的生物膜形成的作用；图24示出纯麦卢卡蜂蜜对以下各项的生物膜形成的作用：(a)铜绿假单胞菌菌株pa01和临床烧伤伤口分离株1054；或(b)鲍氏不动杆菌对照菌株aye和aci克隆nctc_13420(c59)；以及(c)麦卢卡蜂蜜的连续稀释液对铜绿假单胞菌菌株pa01和临床烧伤伤口分离株1054(图2(c)的上部)或鲍氏不动杆菌对照菌株aye和aci克隆nctc_13420(c59)(图2(c)的下部)的生物膜形成的作用；图25示出s1、s2和s3手术蜂蜜的纯和连续稀释液对以下各项的生物膜形成的作用：(a)铜绿假单胞菌菌株pa01和临床烧伤伤口分离株1054；和(b)鲍氏不动杆菌对照菌株aye和aci克隆nctc_13420(c59)；图26示出手术蜂蜜制剂s1、s2和s3以及麦卢卡蜂蜜(mh)对铜绿假单胞菌的产生生物膜的分离株(ps_1586)的生物膜形成的作用；图27示出手术蜂蜜制剂s1、s2和s3以及麦卢卡蜂蜜(mh)对铜绿假单胞菌的产生生物膜的分离株(pa_6749)的生物膜形成的作用；图28示出手术蜂蜜制剂s1、s2和s3以及麦卢卡蜂蜜(mh)对鲍氏不动杆菌的产生生物膜的分离株(aci_19606)的生物膜形成的作用；图29示出手术蜂蜜制剂s1、s2和s3以及麦卢卡蜂蜜(mh)对鲍氏不动杆菌的产生生物膜的分离株(aci_c60)的生物膜形成的作用；图30示出手术蜂蜜s1、s2和s3制剂以及麦卢卡蜂蜜(mh)对预防或减少由鲍氏不动杆菌aci_c59产生的预形成生物膜的播种的作用；图31示出手术蜂蜜s1、s2和s3制剂以及麦卢卡蜂蜜(mh)对预防或减少由鲍氏不动杆菌aci_aye产生的预形成生物膜的播种的作用；图32示出与失活的手术蜂蜜(de)、麦卢卡蜂蜜(mh：‘comvitamanukacare18+’)、乙酸(aa)和几种可商购的伤口敷料和伤口乳膏相比，手术蜂蜜s1、s2和s3制剂对预防铜绿假单胞菌(对照菌株pa01)的生物膜形成的作用；以及图33示出与失活的手术蜂蜜(de)、麦卢卡蜂蜜(mh：‘comvitamanukacare18+’)、乙酸(aa)和几种可商购的伤口敷料和伤口乳膏相比，手术蜂蜜s1、s2和s3制剂对预防鲍氏不动杆菌(对照菌株aye)的生物膜形成的作用；图34示出与对照静电纺丝敷料(每个营养琼脂板的左侧)相比，含有手术蜂蜜的静电纺丝敷料(每个营养琼脂板的右侧)针对大肠杆菌的活性；图35示出与对照静电纺丝敷料(每个营养琼脂板的左侧)相比，含有手术蜂蜜的静电纺丝敷料(每个营养琼脂板的右侧)针对金黄色葡萄球菌的活性；图36示出静电纺丝手术蜂蜜敷料(左侧)和静电纺丝对照敷料(右侧)，并且其中所述静电纺丝手术蜂蜜敷料的过氧化氢产生能力已通过过氧化物测试试剂盒证实；图37示出手术蜂蜜的细胞毒性活性的测定结果；图38示出干燥手术蜂蜜颗粒和已经溶解在水中以形成溶液的干燥手术蜂蜜的过氧化氢产生；图39示出在达四天的不同时间段后，图38的手术蜂蜜溶液的过氧化氢产生；以及图40示出对具有不同浓度的手术蜂蜜的s1、s2和s3制剂的3、6和24小时培养物的hmc-1肥大细胞的存活的作用。实施例1此实施例描述用于产生用于本发明中的储存稳定的组合物的优选方法，以及储存稳定的组合物的稀释以释放过氧化氢。“活化的”蜂蜜的制造方法使用热交换器将蜂蜜加热2分钟至80℃(如果需要，可使用较低的温度，适当地至少60℃，条件是这足以灭活过氧化氢酶)。此加热过程的目的是将蜂蜜巴氏灭菌，降低其粘度，以使得其可进行过滤以除去可在收获后蜂蜜中的任何蜡颗粒和蜜蜂翅膀，并且灭活蜂蜜中将影响过氧化氢酶的有效产生的任何过氧化氢酶。然后过滤巴氏灭菌的蜂蜜，并将其自然冷却至正常蜂巢温度(35℃-40℃)。然后以低水平(相当于通常在蜂蜜中发现的水平)添加葡萄糖氧化酶以代替天然存在于蜂蜜中但已通过巴氏灭菌过程灭活的葡萄糖氧化酶。过滤的巴氏灭菌的蜂蜜在35℃-40℃下几乎是液体，因此它可容易地与葡萄糖氧化酶混合。然而，为什么混合不能在室温下完成没有其他原因。然后将所得的“活化的”蜂蜜储存在环境温度下。除了更换灭活的葡萄糖氧化酶外，对天然蜂蜜的组成没有任何改变。“活化的”蜂蜜中不存在可检测到的过氧化氢。“活化的”蜂蜜的稀释在“活化的”蜂蜜的稀释后，过氧化氢经过一段时间后释放，因为游离水变得可用，并且葡萄糖氧化酶开始转化存在于蜂蜜中的葡萄糖。过氧化氢水平低于2mmol/升，但释放持续延长的时间段。实施例2此实施例描述展示活化的ulmo蜂蜜的抗微生物作用的测试的结果。蜂蜜如果含有添加的葡萄糖氧化酶，则被描述为“活化的”。孔扩散测定使金黄色葡萄球菌(ncimb9518)在营养琼脂或营养培养液中生长。通过将过夜培养物擦抹到琼脂板的表面上来将抗生素扩散琼脂板接种培养物。使板在室温下静置15分钟。将直径7mm的孔钻孔到琼脂的表面中。将200微升样品(苯酚标准品或蜂蜜)置于每个孔中。将板孵育16小时，并使用游标卡尺(+/-0.1mm)测量抑制区。记录区域的直径，包括孔的直径。通过在所需浓度的纯化水中稀释苯酚来制备苯酚标准品。例如，通过将1g苯酚稀释在9g纯化水中来制备10％苯酚标准品。将标准品储存在30℃下，并且在使用前振荡。蜂蜜蜂蜜：巴氏灭菌的ulmo蜂蜜.使用未活化的蜂蜜(即尚未添加葡萄糖氧化酶的蜂蜜)作为对照。酶制剂葡萄糖氧化酶：来自由biozymeuk供应的gmo黑曲霉的医疗装置级材料，非食品级，活性240iu/mg。初始使用0.5％w/w酶，但可将其降低至0.005％w/w酶以实现20％苯酚标准品当量。过氧化氢的检测来自merckoquant的过氧化物测试：目录号1.10011.0002测量范围/色标度分度mg/lh2o20.5-2-5-10–25。水溶液中的程序测定：将蜂蜜溶解于水50/50w/w中。将测试条的反应区浸入测量样品(15℃-30℃)中持续1秒。允许过量液体通过条带的长边缘流掉到吸水纸巾上，并且在15秒后(目录号110011)或在5秒钟后(目录号110081)，确定反应区的颜色与标签上的哪个颜色区域最准确地重合。读取相应的结果(以mg/lh2o2计)，或者如果需要，估计中间值。为了确定内源性过氧化氢在蜂蜜中不可用，溶解于甲醇50/50w/w。有机溶剂(易挥发性醚)中的测定：将测试条的反应区浸入测量样品(15℃-30℃)中持续1秒。在溶剂蒸发后(轻轻地来回吹动条带3-30秒)，将反应区浸入蒸馏水中1秒，并使过量液体通过条带的长边缘流掉到吸水纸巾上或在反应区上轻轻地吹四次，每次3-5秒。在15秒后(目录号110011)或在5秒后(目录号110081)，确定反应区的颜色与标签上的哪个颜色区域最准确地重合。读取相应的结果(以mg/lh2o2计)，或者如果需要，估计中间值。结果图1a示出来自孔扩散测定的结果，其中将含有巴氏灭菌的ulmo蜂蜜、已加入不同量的葡萄糖氧化酶制剂(0.1％、0.01％、0.01％、0.0015或0.0001％w/w)的巴氏灭菌的ulmo蜂蜜或麦卢卡umf25+蜂蜜的样品添加至用金黄色葡萄球菌接种的琼脂板的孔中。结果示出对于每个样品记录的抑制区的直径。含有至少0.001％w/w葡萄糖氧化酶(240iu/mg)的活化的蜂蜜对金黄色葡萄球菌的抗微生物作用与麦卢卡25+蜂蜜对金黄色葡萄球菌的抗微生物作用等效。活化的蜂蜜的作用是杀菌的。图1b示出来自孔扩散测定的结果，其中将含有加入0.5％w/w葡萄糖氧化酶制剂的巴氏灭菌的ulmo蜂蜜的样品与mgo麦卢卡蜂蜜、麦卢卡25+蜂蜜的样品和一系列不同的苯酚标准品(10％-40％)进行比较。结果示出每个样品的抑制区的面积。结果表明，活化的ulmo蜂蜜的作用与30％苯酚标准品等效，并且比mgo麦卢卡蜂蜜有效超过两倍，且几乎比麦卢卡umf25+蜂蜜两倍有效。图2证明活化的蜂蜜的效力可通过加入合适量的酶来调整以适应需求。实施例3此实施例描述展示活化的tineo蜂蜜的抗微生物作用的测试的结果。蜂蜜如果含有添加的葡萄糖氧化酶，则被描述为“活化的”。使用tineo蜂蜜的样品和不同苯酚标准品进行如实施例2中所述的扩散测定。图3a是示出由不同样品引起的金黄色葡萄球菌的抑制区的一式两份琼脂板的照片。所述图包括示出琼脂板的孔中的样品的布局的图示：1.10％苯酚标准品2.20％苯酚标准品3.30％苯酚标准品4.tineo蜂蜜(不含添加的葡萄糖氧化酶的巴氏灭菌的tineo蜂蜜)5.tineo失活(巴氏灭菌的tineo蜂蜜，伴随进一步热失活)6.麦卢卡umf25+7.tineo20+(巴氏灭菌的tineo蜂蜜，具有添加的葡萄糖氧化酶0.005％biozyme酶)图3a示出，单独tineo蜂蜜和tineo失活的蜂蜜都不会引起金黄色葡萄球菌生长的抑制。添加有葡萄糖氧化酶的tineo蜂蜜(tineo20+)的作用大于麦卢卡umf25+的作用，并且等效于30％苯酚标准品。图3b是示出由不同样品引起的金黄色葡萄球菌的抑制区的琼脂板的照片，其如下文所示排列：1.10％苯酚标准品6.tineo蜂蜜活性40+(0.05％酶w/w)7.麦卢卡蜂蜜umf25+图3b示出，tineo蜂蜜活性25+和40+样品比麦卢卡蜂蜜25+样品更有效地抑制金黄色葡萄球菌的生长。实施例4此实施例描述展示活化的ulmo和tineo蜂蜜的抗微生物作用的测试的结果。图4a示出来自如实施例2中所述进行的孔扩散测定的三次重复的结果，所述测定测量在24小时孵育后金黄色葡萄球菌生长的抑制区。在40％-10％浓度范围下的去离子水中的苯酚样品，和2种类型的麦卢卡(manukaumf25+，manuka550mgo)以及具有0.01％w/wbiozyme葡萄糖氧化酶的活化的ulmo蜂蜜的样品(如实施例2中)。图4b示出来自进一步孔扩散测定的结果。将葡萄糖氧化酶(如实施例2中所述的biozyme制剂)添加至巴氏灭菌的ulmo蜂蜜(0.005％酶w/w)中，并在40℃下储存24或72小时。然后如实施例2中所述，在孔扩散测定中测试来自储存的活化的蜂蜜的样品针对金黄色葡萄球菌的活性，并将其与一系列4％-25％苯酚标准品进行比较。图4b示出，当在40℃下储存72小时时，活化的蜂蜜是稳定的，并且活化的蜂蜜在其针对金黄色葡萄球菌的效力方面等效于20％苯酚标准品。图4c示出来自进一步孔扩散测定的结果，其中将新和旧批次(旧批次在新批次前大约四个月接收)的巴氏灭菌的ulmo蜂蜜(如实施例2中所述的biozyme制剂，0.5％w/w)和具有增加量的添加的葡萄糖氧化酶(如实施例2中所述的biozyme制剂，0.0005-0.5％w/w)的tineo蜂蜜的活性与麦卢卡18+和25+umf蜂蜜以及一系列10％-40％的苯酚标准品进行比较。在图4c中，“正常”是指按收到的原样的巴氏灭菌的蜂蜜，“失活”是指已进一步热失活的巴氏灭菌的蜂蜜，并且“反应”是指在加入葡萄糖氧化酶之前已进一步热失活的巴氏灭菌的蜂蜜。因此，在无(“ulmo旧4正常”、“ulmo新x”、“ulmo新y”)和有添加的葡萄糖氧化酶的情况下测试ulmo蜂蜜。图4c示出金黄色葡萄球菌的抑制区的面积。可以看出，旧批次的巴氏灭菌的ulmo蜂蜜(“ulmo旧4反应”)保留与新的巴氏灭菌批次(“ulmo新x反应”和“ulmo新y反应”)等效的活性。所有这些批次显示比麦卢卡蜂蜜18+高大约两倍的活性，并且比麦卢卡蜂蜜25+更高的活性。将增加量的葡萄糖氧化酶添加至巴氏灭菌的tineo蜂蜜中增加蜂蜜的活性。在这一测试中，0.005％w/w酶与10％苯酚标准品基本等效，0.05％w/w酶与15％苯酚标准品大约等效，并且0.5％w/w酶与25％苯酚标准品大约等效。麦卢卡18+蜂蜜与10％苯酚标准品等效，并且麦卢卡25+蜂蜜显示介于10％与15％苯酚标准品之间的活性。实施例5在此实施例中，用巴氏灭菌的tineo蜂蜜测试不同葡萄糖氧化酶制剂的作用。所使用的酶制剂是如实施例2中所述的biozyme制剂，以及来自anhuiminmetalsdevelopmenti/eco.,ltd的食品级非gmo来源的葡萄糖氧化酶(下文称为“anhui”酶制剂)。图5a示出来自如实施例2中所述进行的孔扩散测定的结果，其中将不含酶或含有0.005-0.05％w/wanhui酶的巴氏灭菌的tineo蜂蜜的样品与不同的苯酚标准品(10％、20％、30％)和麦卢卡蜂蜜umf25+的样品进行比较。结果表明，增加酶的量使活化的蜂蜜对金黄色葡萄球菌的效力增加。0.0125％w/w酶与20％苯酚标准品和麦卢卡蜂蜜样品大约等效，并且0.05％w/w酶与30％苯酚标准品大约等效。图5b示出来自如实施例2中所述进行的孔扩散测定的结果，其中将不同量的酶添加至商业批次的巴氏灭菌的tineo蜂蜜的样品中。“tineo”样品是没有添加的葡萄糖氧化酶的巴氏灭菌的蜂蜜。“tineo失活”样品是已进一步热处理并且不含添加的葡萄糖氧化酶的巴氏灭菌的蜂蜜。“tineo20+”样品含有0.005％w/w的biozyme葡萄糖氧化酶。结果表明，tineo样品对金黄色葡萄球菌没有活性。tineo20+样品对金黄色葡萄球菌比manuka25+更有效，并且介于20％与30％苯酚标准品之间。实施例6此实施例描述储存60天或90天的活化的蜂蜜的稳定性测试的结果。将如实施例2中所述来自biozyme的葡萄糖氧化酶以0.005％w/w添加至巴氏灭菌的ulmo或tineo蜂蜜中，并且将所得混合物在37℃下储存两个月(ulmo蜂蜜样品)或在室温下储存90天(tineo蜂蜜样品)。所使用的酶的量对应于将用于商业食品的量。在储存后，在如实施例2中所述进行的针对金黄色葡萄球菌的孔扩散测定中测试样品。将储存的样品与10％、20％和30％苯酚标准品进行比较。图6a示出ulmo蜂蜜样品的结果，并且图6b示出tineo蜂蜜样品的结果。对于任一类型的蜂蜜的储存期，不存在明显的活性损失。实施例7此实施例描述粉末状活化的蜂蜜的抗微生物活性的测试结果，其中将粉末形式的葡萄糖氧化酶添加至粉末状蜂蜜中。粉末状蜂蜜获自admspecialtyingredients的honibake。将0.1％w/wbiozyme葡萄糖氧化酶(如实施例2中所述)添加至粉末状蜂蜜中。在如实施例2中所述的针对金黄色葡萄球菌的孔扩散测定中测试混合物的抗微生物活性。将混合物添加至琼脂板的两个不同孔中。使用仅具有蜂蜜粉末的对照。结果在图7a中示出。对照孔未显示活性，但活化的蜂蜜显示清楚的抑制区。图7b示出另一孔扩散测定的结果，其中将不同的粉末状蜂蜜与来自anhuiminmetalsdevelopmenti/eco.,ltd(实施例5)的粉末状酶混合。样品孔24a是仅蜂蜜粉末，并且样品孔24b是与1％w/w酶混合的蜂蜜粉末。再次，可看到清楚的抑制区。实施例8此实施例描述包含未巴氏灭菌的蜂蜜和添加的纯化葡萄糖氧化酶的组合物的灭菌。将各自含有50g组合物的10个密封药囊以11.6-14.2kgy的目标剂量(如通过剂量计所测定，剂量为13.1-13.6kgy)进行γ辐照，且随后单独测试无菌性。对于无菌性测试，所有工作都是在洁净室内在层流下进行的。将10g所述组合物添加至100ml无菌胰蛋白胨大豆培养液(tsb：酪蛋白胰酶消化物17g/l，大豆豆粕胰酶消化物3g/l，氯化钠5g/l，磷酸氢二钾2.5g/l，葡萄糖2.5g/l，ph7.3±0.2)，并且振荡以混合，然后转移至无菌容器中。添加另外100mltsb以除去任何样品残留物并添加至同一容器中。将tsb添加至样品并在30℃±2℃下孵育最少14天，并检查微生物生长的迹象。在测试开始之前，对所有培养基进行阳性对照。在充分孵育期后注意到一个积极的结果。接受35kgy作为灭菌剂量的证实。在使用与实施例2中所述的测定类似的孔扩散测定通过γ-辐照灭菌之前和之后的药囊测试证实了辐照对组合物的抗微生物活性的影响是可忽略的。灭菌后活性水平没有可观察到的降低。实施例9此实施例描述与麦卢卡umf25+蜂蜜和热失活蜂蜜(非活性蜂蜜)相比，证明包含未巴氏灭菌的蜂蜜和添加的已使用γ辐照灭菌的纯化葡萄糖氧化酶的组合物(称为“手术蜂蜜”)的抗微生物作用的测试的结果。使用麦卢卡蜂蜜umf25+、非活性蜂蜜和手术蜂蜜的样品进行如实施例2中所述的孔扩散测定。图8(a)是示出由不同样品引起的金黄色葡萄球菌(atcc9518)的抑制区的琼脂板的照片。麦卢卡蜂蜜umf25+位于图中板的顶行，非活性蜂蜜位于中间行，并且手术蜂蜜位于底行。图8(b)示出用麦卢卡umf25+蜂蜜处理的板(顶行)和用手术蜂蜜处理的板(底行)。结果清楚地表明，手术蜂蜜在灭菌后保留对金黄色葡萄球菌的显著的抗微生物活性，并且手术蜂蜜对金黄色葡萄球菌比麦卢卡蜂蜜umf25+更有效。实施例10包含未巴氏灭菌的蜂蜜和已使用γ辐照(在35kgy最低剂量下)灭菌的添加的纯化葡萄糖氧化酶的组合物的稳定性测试。加速老化技术是基于以下假设：材料变质中所涉及的化学反遵循arrhenius反应速率函数。此函数表明，均匀过程的温度的10℃升高或降低导致化学反应速率的大约两倍或1/2倍变化。例如，在55℃下，5.3周等效于1年搁置，并且在55℃下，两年将等效于10.6周，且五年将是26.5周。本研究使用来自两个不同生产批次的产品。产品是含有10g组合物的药囊。所述药囊已在35kgy最低剂量γ辐照下灭菌。样品在加速老化条件下在55℃(±2℃)下储存。实时与加速老化之间的关系如下：表2测试、测试时间间隔和所需的样品来自每一批次的样品以相同的时间间隔进行测试。下表总结了所进行的测试以及对于每一批次在每个时间点所需的样品的总数。*使用与用于填充药囊重量测试相同的样品**使用来自压力测试的五个样品表3测试方法填充药囊重量：一个空药囊具有1.7g的平均皮重。将10个药囊在校准的实验室天平上单独称重，减去皮重，并记录结果。压力测试：根据标准操作程序，在压力试验台上测试每个药囊。记录通过数和失败数。蜂蜜的ph：将五个药囊的内容物汇集到一个玻璃烧杯中。使用三种标准溶液校准hannaph计，然后将电极在去离子水中漂洗。将ph电极和温度探针浸入蜂蜜样品中，并且从数字显示屏读取ph值和温度，并进行记录。水分含量：从每个时间点取得五个药囊蜂蜜。取得将来自每个药囊的大约1ml样品并置于折射计的样品板上(一次一个样品)。将样品盖关闭，并且使用者在将仪器指向诸如窗户的光源的同时观察透镜。读取刻度的值，如由阴影线所示，并记录结果。颜色：打开一个药囊蜂蜜，并将一些蜂蜜组合物放到白色瓷砖上。将蜂蜜组合物的颜色与蜂蜜比色图表pfund量表进行比较，并记录得分(30–800)。结果填充药囊重量–加速老化批次a：表4批次b:表5压力测试结果–加速老化时间间隔(周)批次a批次b2.610/1010/10表6ph测试结果–加速老化表7水分含量测试结果–加速老化批次a：表8批次b:表9颜色测试结果–加速老化表10以下实施例11-19描述使用包含未巴氏灭菌的蜂蜜与添加的葡萄糖氧化酶的组合物(所述组合物在实施例中称为“手术蜂蜜”)治疗伤口的结果。手术蜂蜜被提供在密封的药囊中，所述药囊各自含有10g组合物。使用γ辐照将药囊灭菌。从治疗第0天使用药囊。每次更换敷料均涉及手术蜂蜜的新施加。在实施例中记录的每一天均更换敷料，或者有时更频繁。将手术蜂蜜施加至敷料，或直接施加至伤口，且然后被敷料覆盖。在这两种情况下，手术蜂蜜均与伤口直接接触，并被敷料覆盖。实施例11此实施例描述使用手术蜂蜜治疗感染的脚趾的结果。结果在图9中示出。患者是一名78岁的男性糖尿病患者。左脚上的伤口在治疗开始前一个月内发展，并引起轻度疼痛。a)第0天-伤口概况：伤口：3x2x1cm；99％健康肉芽形成但1％绿色定殖；周围皮肤剥脱；少量黄色脓液渗出物发出异味；b)第5天-伤口概况：伤口改善；每次用施加的1个蜂蜜药囊进行第二敷料更换；甲硝唑和阿莫西林；还施加茶树油；c)第10天-伤口概况：伤口改善；绿色定殖消失；伤口清洁，干皮除去，并且施加另一药囊蜂蜜实施例12此实施例描述使用手术蜂蜜治疗趾部溃疡的结果。结果在图10中示出。患者是一名61岁的女性糖尿病患者，具有在右脚上的感染性趾部溃疡，其在治疗前一个月长的时间内发展并引起轻度疼痛。a)第0天-伤口概况：伤口：2x2x0.2cm；1％黄褐色腐痂，其余肉芽形成组织；少量黄色渗出物；b)第7天-伤口概况：伤口改善；每日施加0.5药囊手术蜂蜜伴随敷料更换；flucox；c)第10天-伤口概况：伤口进一步改善；flucox停止。实施例13此实施例描述使用手术蜂蜜治疗足部溃疡的结果。结果在图11中示出。患者是一名50岁的女性糖尿病患者，具有在治疗前一个月发展的足部溃疡。报告脆弱皮肤，但无疼痛。a)第0天-伤口概况：伤口：1x0.5x0.5cm；1％黄褐色腐痂，其余肉芽形成的组织；非常少量的低、黄色渗出物；b)第7天-伤口概况：伤口改善；干燥；腐痂被健康肉芽形成所取代；大小和深度减少；用盐水清洁伤口且然后施加蜂蜜敷料(0.5药囊)；无抗生素；c)第9天-伤口概况：伤口大大改善；几乎闭合，无渗出物存在；敷料继续为每次施加0.5药囊。实施例14此实施例描述使用手术蜂蜜治疗糖尿病性足部溃疡的结果。结果在图12中示出。患者是一名患有由较差质量的鞋类刺激引起的糖尿病性足部溃疡的男性。所述患者在治疗前不到1个月具有溃疡。a)第0天-伤口概况：红色周围脱脂，伴随轻度疼痛；1％腐痂，99％肉芽形成；感染和糖尿病；低体积渗出物，浆液性和黄色；伤口大小：2cmx2cmx0.2cm；b)第7天-伤口概况：在医院进行评估，但敷料从第1天到现在每天更换。根据为训练有素的护士的儿媳妇的诊断记录更换敷料。伤口改善；100％健康肉芽形成；健康周围皮肤，轻度疼痛；每6小时使用抗生素，氟氯西林(flucoxacillin)500mg，持续7天；伤口大小：1.5cmx1.3cmx0.1。实施例15此实施例描述使用手术蜂蜜治疗创伤性腿部伤口的结果。结果在图13中示出。患者是一名95岁的女性，具有引起中度疼痛的小腿创伤性伤口。a)第0天-伤口概况：伤口：15x12x1cm；大部分为肉芽组织，但具有1％伤口床坏死和黑色；中等量的血液浆液性渗出物；b)第3天-伤口概况：伤口静态；无进一步坏死但伤口大致相同；施加1药囊蜂蜜；拭子：肠球菌属；无抗生素；c)第8天-伤口概况：伤口改善；较低体积的渗出物和减少的坏死组织。实施例16此实施例描述使用手术蜂蜜治疗感染的腿部伤口的结果。结果在图14中示出。患者是一名91岁的女性，具有小腿的感染性伤口。周围皮肤脆弱，且存在轻微疼痛。a)第0天-伤口概况：伤口大小：4.5x2.5cm；大部分为红色肉芽组织，1％黄色/褐色腐痂；中等体积的黄色浆液性渗出物。b)第15天-伤口概况：伤口改善；大小：4x2cm；存在较少腐痂和浆液性渗出物；c)第19天-伤口概况：伤口改善；每个敷料施加手术蜂蜜。实施例17此实施例描述使用手术蜂蜜治疗腿部溃疡的结果。结果在图15中示出。患者是患有在治疗开始前一年内发展并引起轻度疼痛的腿部溃疡的女性。a)第0天-伤口概况：健康的周围皮肤；1％脱脂；99％肉芽形成；中等体积渗出物，浆液性和黄色；伤口大小：7cmx3cm；b)第7天-伤口概况：伤口改善和患者社区护理；施加1药囊手术蜂蜜；大小减小且存在较少渗出物；疼痛更可容忍。实施例18此实施例描述使用手术蜂蜜治疗褥疮的结果。结果在图16中示出。患者是一名88岁的女性糖尿病患者，营养状况不佳。患者在治疗前6个月时间内发展褥疮(3级)，从而引起中度水平的疼痛，伴随脆弱周围皮肤。a)第0天-伤口概况：伤口大小：0.7x0.7x0.2cm；1％黄色/褐色腐痂，1％；蜂窝织炎组织，剩余肉芽组织；存在低体积的黄脓；b)第3天-伤口概况：伤口愈合(闭合)；施加1药囊手术蜂蜜。实施例19此实施例描述使用手术蜂蜜治疗导管的进入点周围的感染的结果。结果在图17中示出。患者是一名41岁的女性癌症患者。患者在导管进入点周围具有乳腺区感染。伤口在治疗前少于1周，引起轻度疼痛。a)第0天-伤口概况：伤口：2cmx2cm；1％蜂窝组织炎，剩余肉芽形成组织；低体积的渗出物，红色和浆液性；b)第6天-伤口概况：伤口大大改善；无渗出物；施加一个药囊手术蜂蜜；取得拭子但无生长；无抗生素；c)第14天-伤口概况：伤口改善至不再是一个问题的程度。实施例20手术蜂蜜手术蜂蜜是添加有纯化葡萄糖氧化酶的未巴氏灭菌的蜂蜜。制备了具有不同抗微生物能力的三种不同的手术蜂蜜制剂：s1手术蜂蜜(也称为sh1)：添加有0.1％(w/w)葡萄糖氧化酶的未巴氏灭菌的蜂蜜。所使用的酶是来自bio-cat,inc的来自黑曲霉的食品级葡萄糖氧化酶，活性15,000单位/g。将含有50g的s1手术蜂蜜的密封药囊以11/6-14.2kgy的目标剂量进行γ辐照。s2手术蜂蜜(也称为sh2)：添加有0.1％(w/w)葡萄糖氧化酶的未巴氏灭菌的蜂蜜。所使用的酶是来自bbienzymeslimited的来自黑曲霉的葡萄糖氧化酶(go3b2)，活性274单位/mg。单位定义：在ph7.0下在25摄氏度下每分钟引起1微摩尔葡萄糖氧化的酶的量。污染物：α淀粉酶不大于0.05％，蔗糖酶不大于0.05％，麦芽糖酶不大于0.05％，并且go/cat不低于2000。s3手术蜂蜜(也称为sh3)：添加有0.25％(w/w)葡萄糖氧化酶的未巴氏灭菌的蜂蜜。所使用的酶是来自bbienzymeslimited的葡萄糖氧化酶(go3b2)，活性274单位/mg。因此，s1手术蜂蜜含有每克组合物15单位的葡萄糖氧化酶，s2手术蜂蜜含有每克组合物274单位的葡萄糖氧化酶，并且s3手术蜂蜜含有每克组合物685单位的葡萄糖氧化酶。实施例21手术蜂蜜的体外抗微生物活性此实施例描述通过盘扩散法、最低抑菌浓度(mic)和最低杀菌浓度(mbc)测定以及时间杀菌测量，对一系列伤口和溃疡细菌分离株对手术蜂蜜的敏感性测试。概述结果：手术蜂蜜展示针对广泛范围的革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌和真菌的高度有效的抑制和杀灭活性。mic/mbc显著低于局部临床使用中可能达到的浓度。伤口中手术蜂蜜的局部浓度估计在近似500gms/l下。对于金黄色葡萄球菌，手术蜂蜜1mic/mbc是31和125gms/l，并且手术蜂蜜3mic/mbc是0.12和0.24gms/l。杀灭速度取决于效力。在手术蜂蜜1中，在48小时内对于所测试的所有生物体，发生最不有效的完全杀灭活性。对于手术蜂蜜3，最有效的杀灭活性在30分钟内发生。维持手术蜂蜜接种物制剂达一周展示完全杀灭活性且无细菌持久性。结论：手术蜂蜜具有作为高度活性的局部治疗的广泛潜力，其将蜂蜜的愈合特性的作用与用于皮肤损伤、伤口、溃疡和腔的生物工程化产品的有效抗微生物活性组合。它对多重耐药菌具有高度活性。它比其他测试的蜂蜜活性更高，并且在抗微生物活性方面可与化学抗菌剂媲美。随着许多国家人口的不断增长和全球肥胖和2型糖尿病的流行，表皮伤口和皮肤溃疡变得越来越普遍。在英国，社区护士花费大部分时间为腿部溃疡更换敷料，并且如果标准是维持社区腿部溃疡服务，则腿部溃疡护士的监督是至关重要的。皮肤中的大多数慢性破损变得被细菌定殖。难以知道这些何时以及是否是致病性的，但是可能即使不存在明显感染，细菌定殖也在减缓组织愈合、形成生物膜并导致伤口腐痂和令人反感的异味中发挥作用。组织活力是具有挑战性的，特别是在被共病复杂化时。慢性伤口总是变得被细菌定殖，这可能使愈合过程不稳定。当样品被报告为生长细菌时，可尝试送出微生物样品并提供全身抗生素。所有这种服务都是选择甚至更多的抗性微生物，这是慢性下肢溃疡常常被多耐药性生物如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌定殖的原因。手术蜂蜜已被开发作为用于伤口的预防性敷料。此研究检查了手术蜂蜜的体外特性。手术蜂蜜保留天然蜂蜜的所有已建立的愈合特性，但其抗微生物活性可在需要任何效力时设定。此研究测定了手术蜂蜜1、2和3的最低抑菌浓度(mic)和最低杀菌浓度(mbc)和时间杀死曲线。方法手术蜂蜜被提供为1级、2级和3级效力。它以半固体形式作为药囊中的无菌药物级产品呈现。从软组织微生物样品收集临床分离株。将金黄色葡萄球菌的18种分离株(12种甲氧西林敏感性(mssa)和6种耐甲氧西林(mrsa))、β溶血性链球菌的6种分离株(兰斯菲尔德族a(2)、b(2)、c(1)、g(1))、肠球菌属的5种分离株(包括耐万古霉素屎肠球菌)、大肠杆菌的6种分离株(包括超广谱β内酰胺酶生产者)、克雷伯氏菌属的2种分离株、粘质沙雷氏菌ampc生产者的1种分离株、铜绿假单胞菌的4种分离株、鲁氏不动杆菌的1种分离株、痤疮丙酸杆菌的1种分离株、脆弱拟杆菌的1种分离株以及白色念珠菌的2种分离株、光滑念珠菌1种分离株、烟曲霉菌的1种分离株针对手术蜂蜜进行测试。琼脂扩散在已经用一定浓度的测试生物体接种以得到半汇合生长的药敏检测琼脂中切割6mm孔。将初步研究中的测试手术蜂蜜和其他蜂蜜添加至所述孔。初始进行初步研究，以将手术蜂蜜效力s1、s2、s3与来自世界各地欧洲、南美、新西兰、耶马尼、苏丹的各种蜂蜜以及与医用蜂蜜medihoney和含有银(silveraquacell)和碘(iodoflex)的抗微生物敷料进行比较。在用金黄色葡萄球菌接种的板中切割孔并填充测试蜂蜜，或者在敷料的情况下，将这些切割至2x2cm并放置在接种的板的表面上。在初步研究之后，针对来自皮肤损伤的一系列细菌分离物单独测试手术蜂蜜效力s1、s2、s3。将所述孔用大约2gms纯的具有三种效力的手术蜂蜜的制剂填充至表面，稀释并在等体积的无菌水中乳化。在18-24小时有氧孵育(对于假丝酵母属和曲霉属更长，并且对于丙酸杆菌属和拟杆菌属厌氧孵育)后测量区大小。最低抑菌浓度和最低杀菌浓度将手术蜂蜜产品温热至37℃以使其液化，并将5gms与10ml无菌去离子水混合。这种稀释被认为是连续稀释的“纯”物质。使用英国抗微生物化学疗法协会(bsac)方法用于进行最低抑菌浓度(mic)和最低杀菌浓度(mbc)(andrewsjm.determinationofminimuminhibitoryconcentrations.jantimicrob372chemother2001；48(supp1):5-16)。将手术蜂蜜产品在微量滴定盘孔中连续稀释，从纯至1:1024。将75μl的每种蜂蜜稀释液添加至微量滴定盘的条带的每个孔中。纯浓度代表250gm/l的浓度和1:2048稀释，大约0.12gm/l。通过从纯培养物中获取每个生物体的四个形态上相同的菌落来制备测试生物体以产生0.5mcfarland密度。将此进一步1:10稀释。将包括对照的所有孔用75μl的测试分离物制剂接种。将孔盘在37℃下孵育18小时。mic被认为是未显示可检测到的浊度的最稀释孔。将mic孔和mic孔附近的那些孔在血琼脂上亚培养，并在37℃下孵育18小时以确定mbc。mbc是在孵育后未显示生长的最稀释浓度。时间杀死曲线通过取得0.1ml的0.5macfarlane密度的测试生物体并将其接种在3ml的营养培养液中来制备测试生物体接种物。将测试接种物分到3个单独的螺帽小玻瓶中，向对照和三种测试制剂添加0.5g的手术蜂蜜1(s1)、手术蜂蜜3(s3)或medihoney(mh)。通过连续1:10稀释并在血琼脂板上接种0.1ml、重复3次来测定接种物的菌落计数。将测试和对照接种物保持在30℃以模拟表皮皮肤损伤的温度。在0.5、2、4、24、48、72和168小时时，如上一式三份进行菌落计数。通过将0.1ml原始接种物接种到营养培养液中以中和手术蜂蜜的任何残留作用并在37℃下孵育72小时，然后在血琼脂上接种以测定测试生物体存活来进行终末培养。结果抑制区大小。初步比较研究证明，所有手术蜂蜜效力具有比任何其他测试的蜂蜜(包括医疗级蜂蜜medihoney)更大的抗微生物活性。s1的抑制区大于由任何其他蜂蜜产生的抑制区。银敷料在敷料下方产生一些抑制作用，但不存在与手术蜂蜜一样的抑制区。碘敷料对金黄色葡萄球菌产生大的抑制区(大约70mm)，大于s1(36mm)并且等效于于s3(67mm)。在定量区大小测试中，在所有效力下的手术蜂蜜都产生针对所测试的所有细菌革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌两者(包括多重抗生素抗性细菌和真菌物种)的琼脂扩散的抑制区。每种物种的区大小随手术蜂蜜效力制剂的增加而增加。表11.手术蜂蜜的抑制作用不仅依赖于与活性剂如与银敷料的直接接触，而且扩散远远超出表11中列出的产生广泛区的孔。mic和mbc手术蜂蜜对所测试的所有分离株展示显著抗微生物活性。mic和mbc在相同物种的分离株中是非常一致的，无论分离株是多重耐药性的还是高度敏感性的。表12列出通过稀释比测试的分离物种的mic和mbc值，并且表13示出mic和mbc(以克/升计)。效力的程度随着手术蜂蜜的等级而上升。在大多数情况下，每种分离物的mbc在单次稀释内接近mic。伤口中手术蜂蜜的局部浓度估计在大约500gms/l下。对于金黄色葡萄球菌，手术蜂蜜1mic/mbc是31和125gms/l，并且手术蜂蜜3mic/mbc分别是0.12和0.24gms/l。时间杀死曲线。手术蜂蜜快速杀死细菌。以大约105的菌落形成单位/毫升(cfu/ml)开始，对照中的cfu/ml数目稳定上升，而在手术蜂蜜接种物中，在与两种效力的手术蜂蜜接触后，cfu/ml迅速下降。在s1和s3的大多数情况下，到30分钟时cfu数目下降了1000倍(图18)。对于s1，细菌生长在大多数情况下到2小时时不可检测，并且对于s3到30分钟时不可检测。肠球菌似乎更具弹性，且持续48小时。对于所有生物体杀灭活性是完整的，因为在营养培养液中终末培养且随后在血琼脂上接种未能检测到s1或s3接种物中的任何生物体。讨论手术蜂蜜是天然蜂蜜，其在所述词的当前意义上也是有机的，因为不像用于人消费的许多商业蜂蜜，它没有农业添加剂或抗微生物残留物。它不依赖于特定的花蜜来源，不同于诸如依赖于特定植物花蜜来源获得其增强的活性的麦卢卡蜂蜜。抗微生物活性可通过制备过程在手术蜂蜜中进行控制，从而允许产生具有一致的测量效力的不同等级。此研究已经清楚地证明了手术蜂蜜作为高效抗微生物剂的功效，对所测试的所有细菌和真菌物种都有活性。在将手术蜂蜜与源自世界各地的各种蜂蜜以及与医用级蜂蜜medihoney进行比较的初步试验研究中，手术蜂蜜展示显著更大的抗微生物功效。与常用的局部抗菌剂银和碘相比，手术蜂蜜3产生与碘敷料一样大且大于银敷料(aquacelag)的抗微生物作用，所述银敷料仅在抑制与敷料直接接触的细菌方面有效。mic和mbc测试显示，在低于可能在局部治疗中达到的浓度10-1000倍的浓度下(估计为500gms/l)，手术蜂蜜不仅抑制而且杀死微生物。手术蜂蜜的杀灭活性在接近其抑制活性的浓度下发生。因此，当在任何定殖或表皮感染的伤口或软组织腔中局部施用时，存在手术蜂蜜在多微生物抑制和根除中高度活性的潜力。由于许多慢性伤口被抗性细菌定殖，并且生物膜生产中的细菌持续存在延缓伤口愈合，因此手术蜂蜜使用可有助于减少抗生素的不适当使用并促进伤口愈合。在临床使用中，伤口部位的局部手术蜂蜜浓度将显著高于血清或深层组织中全身抗生素的浓度。这反映在手术蜂蜜的mic和mbc值中，其相应地高于通常用于全身抗生素的那些。杀灭活性的速度通过对于手术蜂蜜3的30分钟内并且对于手术蜂蜜1的2小时内的极快时间杀死曲线显示。这是革兰氏阳性和革兰氏阴性生物体的情况，但是肠球菌似乎稍微更具弹性。真菌、假死酵母属、曲霉菌属也需要更高的浓度和更长时间的暴露来抑制生长并杀死生物体。手术蜂蜜被配制成无菌产品以作为局部伤口敷料施加至皮肤损伤和腔，目的是提供湿润的伤口愈合环境，同时还减少微生物定殖，有助于除去腐痂并促进肉芽形成和上皮化。其他抗微生物制剂可用作旨在治疗或预防伤口感染的局部制剂。银浸渍的敷料似乎具有良好的抗微生物活性，但与蜂蜜制剂相比，它们也显示细胞毒性。碘类似物也具有良好的抗微生物活性，但在某些情况下它们也据报道是有毒的。由于抗微生物抗性和毒性的发展，关于在伤口敷料中使用氯己定制剂也越来越受到关注。手术蜂蜜的临床应用可能在局部施加中、皮肤上、伤口和腔中。伤口可能变得被细菌定殖，所述细菌可形成生物膜并延迟愈合。随着关于抗微生物抗性和缺乏新颖抗微生物剂的关注越来越多，具有广泛抗微生物活性的局部药剂可在降低在软组织损伤中全身抗生素的使用方面发挥作用。这些体外研究已经证明了手术蜂蜜作为具有高抗微生物活性的伤口敷料的潜力，其效力可进行控制并且还可在伤口愈合中提供其他重要功能：湿润屏障、脱腐痂、局部营养供应、局部免疫调节，并且不是细胞毒性的。结论这些体外结果支持手术蜂蜜作为伤口敷料的临床应用，并且这可能是可在伤口的愈合过程中提供所有所需作用以及为有效和无毒的抗微生物剂的第一种产品。表11不同效力的手术蜂蜜(s1、s2、s3)情况下的抑制区大小表12.示出最低抑菌浓度(mic)和最低杀菌浓度(mbc)的稀释的来自纯手术蜂蜜(s1、s2、s3)的连续两倍稀释液。表13.以克/升表示的手术蜂蜜mic和mbc值实施例22手术蜂蜜的抗病毒活性将s1或s2手术蜂蜜与单纯疱疹病毒在细胞培养基中混合(细胞培养基中的蜂蜜和病毒的50％混合物)，且然后在37℃下孵育1小时。然后将混合物接种到细胞上，并且记录每种混合物形成的病毒空斑的数目。还进行无蜂蜜的对照或具有对照蜂蜜的对照。在1小时孵育后记录的病毒(单纯疱疹病毒)空斑的数量在图19中示出。对于s1或s2手术蜂蜜混合物，没有形成空斑，相比之下无蜂蜜的混合物形成160个空斑，并且具有对照蜂蜜的混合物形成150个空斑。结果表明，s1和s2手术蜂蜜制剂两者均具有强效抗病毒活性。实施例23与线部位敷料一起使用手术蜂蜜为了评估手术蜂蜜在预防外周插入的中心导管(picc线)的感染方面的有效性，将s1手术蜂蜜局部施加至30名患者的手臂中的线进入部位。将大约3g-8gs1手术蜂蜜施加至敷料，然后将其与伤口接触，并通过二级敷料保持在适当位置。评估线部位定殖和线相关的菌血症，并且与30名未接受手术蜂蜜敷料的患者进行比较。结果在以下表14中示出。表14.s1手术蜂蜜在预防和清除线部位定殖中的作用手术蜂蜜(30)非手术蜂蜜(30)在起始时定殖24在评价期间的定殖06在评价期间清除的定殖20结论是，手术蜂蜜是用于与线部位敷料一起使用的有效抗微生物剂。实施例24手术蜂蜜用于预防剖腹产伤口的感染的用途手术伤口的感染是剖腹产术的特定问题，其具有大约10％的相当高的感染率。在英国存在剖腹产伤口感染的全国增加(8％-24.6％)和每年与147,726例cs相关的跨nhs医院的广泛变化(13.6％-31.9％)(bragg等人,2010.variationinratesofcaesareansectionamongenglishnhstrustsafteraccountingformaternalandclinicalrisk:crosssectionalstudy.bmj2010；341)。剖腹产伤口感染是长期住院、资源消耗以及其他发病率和死亡率的主要原因。从剖腹产术恢复对于发展术后伤口感染的女性更加困难。为了评估手术蜂蜜在预防剖腹产伤口感染方面的效力，将s1手术蜂蜜一次局部施加至手术后伤口。将大约25g-35gs1手术蜂蜜施加至敷料，然后将其与伤口接触，并通过二级敷料保持在适当位置。在三个月时间内评估了近200名患者。临床评价在2012年10月与2013年1月之间进行剖腹产术(cs)的女性在手术结束时向伤口添加敷料时，将作为敷料的手术蜂蜜以单次施加的形式提供至伤口。每个10g药囊的手术蜂蜜用于单个患者使用。使用无菌技术，“非无菌”操作助手打开手术蜂蜜药囊，并将无菌内容物小心地施加到无菌敷料上。然后由产科医生或医院助产士将敷料施加至手术伤口。在手术之后，护理助产士完成评价记录。收集的数据是mrsa状态、糖尿病史、药物和身体质量指数。对于手术后14天，护理助产士还记录任何伤口愈合问题，特别是渗出、疼痛、炎症的存在。如果存在任何炎症，则请求伤口培养拭子，并记录微生物结果。基于由感染控制组收集的数据，将在使用手术蜂蜜敷料评估的三个月期间的手术部位感染(ssi)率与在评价前9个月的感染率进行比较。伤口感染在临床上被定义为需要抗生素治疗的发炎性伤口(红斑、肿胀、排出物)。ssi率被计算为进行的所有cs手术的百分比。结果结果在以下表15中示出。在2012年10月-2013年1月的3个月期间，存在186例cs，其中102例(55％)是急诊。没有女性被mrsa定殖。四人(2.23％)患有糖尿病。42人(27.3％)身体质量指数>25。在评价期间，在186例中存在4例确认的csssi。这表示2.15％的感染率。单个患者报告与手术蜂蜜治疗相关的呈伤口刺激形式的不良事件，其在3天内无需进一步干预即可解决。在前9个月，存在590例cs手术(234例选择性和356例急诊)，并且感染控制监测记录32例csssi，这表示5.42％的感染率。感染率的降低是显著的：p＝0.042(χ2测试)。表15.s1手术蜂蜜在预防剖腹产伤口的感染中的作用*来自微生物学样品数据，其可能低估trust中的历史感染率。英国全国平均水平接近10％结果表明，与历史数据相比，用s1手术蜂蜜治疗的组中存在较低手术部位感染率(降低60％)。手术蜂蜜敷料耐受性良好，几乎没有报告的不良反应。当使用手术蜂蜜时，伤口感染率下降60.33％。使用来自两组研究csssi率的ssi数据(预期)在手术蜂蜜之前是5.42％，并且(观察)之后是2.15％。在这些水平(低于先前报告的在9.6％下的感染率)，英国的外推csssi感染率将是(预期)每年8007例和(观察)每年3176例。差异是4831例，其可通过使用手术蜂蜜潜在减少。结论是，s1手术蜂蜜有效降低手术后剖腹产伤口感染率。用手术蜂蜜(一种对愈合组织没有毒性并且还促进愈合过程的药剂)预防伤口定殖是一种新颖和潜在的重要发现，其可改变控制外科伤口的方式。手术蜂蜜提供临床和成本有效的干预，以显著降低经历剖腹产术的女性的ssi。讨论这一评价证明，手术蜂蜜(一种高效的抗微生物伤口敷料)可用作主要cs伤口的伤口敷料以预防感染。作为具有确定伤口愈合性质的“天然”产品，除了提供有效抗微生物活性以预防伤口定殖和感染之外，手术蜂蜜可能促进伤口愈合。一些基于卤素的化学抗菌剂可提供相同程度的抗微生物活性，但可延迟伤口愈合(janwa.comparisonofconventionalpyodinedressingwithhoneydressingforthetreatmentofdiabeticfootulcers.jpmi-journalofpostgraduatemedicalinstitute2012；26(4):402-7)。碘伤口敷料在cs中禁忌(jointformularycommittee.thebritishnationalformulary.london:thepharmaceuticalpress；2013)并且一系列毒性与其使用有关(pietsch&meakins:complicationsofpovidone-iodineabsorptionintopicallytreatedburnpatients.thelancet1976；307(7954):280-2；scoggin等人：andacidosisinassociationwithtopicaltreatmentofburns.thelancet1977；309(8018):959；donovan等人:seizuresinapatienttreatedwithcontinuouspovidone–iodinemediastinalirrigation.newenglandjournalofmedicine1992；326(26):1784；colpaert:iodinetoxicityasacauseoftotalatrioventricularblockinburnpatients.burns2009；35:s45-s6；ramaswamykanive:cardiovascularcollapsefollowingpovidone-iodinewash.anaesthesiaandintensivecare2011；39(1):127-30；lakhal:povidoneiodine:featuresofcriticalsystemicabsorption.annalesfrancaisesd'anesthesieetdereanimation2011；30(7-8):e1-8):e1-e3.)。类似地，cochrane系统评价显示，没有足够的证据证明含银敷料或局部药剂是否促进伤口愈合，预防伤口感染(storm-versloot等人:topicalsilverforpreventingwoundinfection.cochranedatabaseofsystematicreviews2010)或有效治疗感染或污染的慢性伤口(vermeulen等人:topicalsilverfortreatinginfectedwounds(review).cochranereview2010；(10):42)。虽然关于蜂蜜作为伤口敷料的临床有效性的先前系统评价已经显示有益的可疑证据，但是这种新的制剂似乎在cs患者中提供显著临床益处(jull等人:honeyasatopicaltreatmentforwounds:thecochranecollaboration,2009；jull等人:honeyasatopicaltreatmentforwounds.cochranedatabaseofsystematicreviews(在线)2013；2)。在伤口感染率的时间比较中，评价已经显示感染率的60.33％降低，从干预前的5.42％降低至使用手术蜂蜜的2.15％。医疗相关感染是重要和昂贵的医疗并发症，其中大约8％的医院患者和ssi占这些感染的14％，并且接近5％的经历外科手术的患者被发现已经发展ssi。ssi与相当的发病率相关，并且超过三分之一的术后死亡与ssi至少部分相关。在许多外科手术中常规使用抗微生物预防措施来减少手术伤口感染。虽然外科医生也常规使用皮肤消毒来减少皮肤切开之前的皮肤细菌负荷，但是使用抗微生物敷料还不是常规做法。这一点的原因可能是大多数局部抗菌剂对组织愈合具有有害作用。手术蜂蜜是一种具有强效抗微生物活性的产品，其无毒且促进组织愈合。这种产品局部施加至“清洁”手术伤口实际上可替代某些类型的手术中的全身性抗生素预防。这种进步将有助于减少抗生素体积使用和对定殖细菌的选择压力。在此评价中选择剖腹产伤口，因为患者大体上健康，没有或有很少并发症，且cs感染率据报道有所增加。这种增加的可能原因是年龄较大的母亲，伴有并发症、特别是糖尿病的母亲的增加以及身体质量指数较高的母亲的普遍增加。虽然先前尚未在初级伤口敷料中常规使用抗微生物剂，但所述评价显示了手术蜂蜜在预防cs伤口感染方面的令人感兴趣的和有效的作用。实施例25s1手术蜂蜜用于治疗压疮的用途患者是患有脊柱裂的50岁女性患者，其是残疾的和不能活动的。患者在下背部一直到骶骨具有压疮，其已经持续超过1年。空腔被酿脓链球菌感染。s1手术蜂蜜用作局部敷料。从第2天报道伤口改善。到第30天，软组织腔几乎完全愈合。此时未检测到链球菌。结果的照片在图20中示出，其中：(a)示出治疗的第1天；并且(b)示出治疗的第30天；实施例26手术蜂蜜的抗微生物活性测试了手术蜂蜜(sh)和由意蜂(蜜蜂)制成的两种原型修改的蜂蜜对金黄色葡萄球菌(ncimb9518)的抗微生物活性。还检查了许多修改类型的手术蜂蜜改变来自样品的过氧化氢产生水平的能力。方法：使用生物测定方法针对金黄色葡萄球菌的标准菌株将手术蜂蜜(sh)与两种修改的蜂蜜原型1(pt1)和原型2(pt2)进行比较。进一步的工作研究了来自这些制剂的过氧化氢的产生速率。结果：手术蜂蜜抗微生物活性据显示主要是由于过氧化氢产生所致。通过手术蜂蜜的修改，两种更有效的蜂蜜原型显示产生大介于两倍与三倍之间的抗微生物活性，以及大高达十倍的过氧化活性。结论：手术蜂蜜是临床上可用的伤口抗菌敷料，其显示良好抗微生物活性。两种另外的蜂蜜原型已经显示具有可能由于所展示的过氧化活性的增加而增强的抗微生物活性。方法1.通过生物测定方法测定蜂蜜活性使用金黄色葡萄球菌(ncimb9518)测量手术蜂蜜(s)和两种修改的蜂蜜原型1(pt1)和原型2(pt2)的抗菌活性，并且表示为等效苯酚％。值被计算为来自测试的重复三天的三个样品复制的平均值。测定方法.所使用的琼脂孔扩散方法从在新西兰乳业的微生物学标准方法手册(1982)[beeproductsstandardscouncil:proposedstandardformeasuringthenonperoxideactivityofhoney.in.newzealand:beeproductsstandardscouncil；1982.]中描述的用于抑制性物质的冲板测定改编。接种物制备.使用无菌营养培养液作为空白以及稀释剂和具有1cm通路的比色皿，将过夜培养物调节至在540nm下测量的0.5的吸光度。测定板制备.将100μl体积的调节至0.5吸光度的培养物用于接种150ml营养琼脂以制备测定板。将琼脂涡旋以充分混合，并倒入已放置在水平表面上的大型培养皿中。一设定琼脂，就在第二天使用前将板倒置过夜。对于测定，将这些接种的板从4℃移除，并在室温下静置15分钟，然后将7.0mm直径的孔切割到琼脂的表面中。将250μl测试材料(样品或标准品)放入每个孔中。过氧化氢酶溶液.每天新鲜制备来自牛肝的过氧化氢酶(sigmac9322，2900单位/mg)在蒸馏水中的200mg/ml溶液。样品制备.通过将4g样品添加至4ml普通蒸馏水中并在37℃下放置30分钟以辅助混合来制备初级样品溶液。为了制备次级溶液，将2ml初级样品溶液添加至2ml普通蒸馏水中，并混合以用于总活性测试，并将2ml初级样品溶液添加至2ml过氧化氢酶溶液并混合以用于非过氧化活性。苯酚标准品的制备.通过将苯酚溶于水中来制备标准品(w/v)10％、30％、50％苯酚。将苯酚标准品在使用前在黑暗中升至室温，并在添加至测试孔之前充分混合。将每个标准品放置在三个孔中，以一式三份进行测试。将标准品保持在4℃下，有效期为一个月。样品和标准品施加.通过向3个孔中的每一个添加250μl来一式三份测试所有样品和标准品。板孵育.在施加样品后，将板在37℃下孵育大约18小时。记录抑制区的直径，包括孔的直径(7.0mm)。样品的抗菌活性的计算.计算每个苯酚标准品周围的清除区的平均直径并进行平方。绘制苯酚％相对于清除区的平均直径的平方的标准曲线图。使用线性回归获得最佳拟合直线，并且使用此线的方程式来从清除区的直径的平均测量值的平方计算每种稀释的蜂蜜样品的活性。为了允许稀释(假设手术蜂蜜的密度是1.35g/ml)，将此数字乘以4.69的因子，且然后将样品的活性表示为等效苯酚浓度(％w/v)。总活性：所有活性，包括由于过氧化氢(h2o2)所致的活性。非过氧化活性：通过用过氧化氢酶处理样品除去h2o2。2.通过h2o2法测定蜂蜜活性使用1.10011.和1.10081测量活性。过氧化物测试试剂盒.浓度表示为等效mg/lh2o2。将样品用纯化水1:10稀释。在孵育5分钟后，在12小时时间内、随后第24小时和第48小时时间点，每小时测量所有样品的h2o2产生。测定方法.过氧化物酶将氧从过氧化物转移至有机氧化还原指示剂，其然后转化成蓝色氧化产物。通过测试条的反应区与具有色域标度的目视比较，半定量地测量过氧化物浓度。将测试条的反应区浸入手术蜂蜜样品中1秒，从而使过量液体从条流掉到吸水纸巾上，并且在15秒(目录号110011)、5秒(目录号110081)后，在其之后确定反应区中形成的与色域标度更准确地重合的颜色。结果1.活性评级通过修改蜂蜜样品产生的抗微生物活性与单独手术蜂蜜相比，产生pt1和pt2的苯酚活性的分别两倍和几乎三倍增加。手术蜂蜜(sh)和两种修饰的原型pt1和pt2的三个样品的结果在表16中示出。2.通过h2o2法测定蜂蜜活性观察到原型修改产生达手术蜂蜜的的过氧化氢活性的七倍和十倍。三个样品的结果在图21中示出。通过获得三种蜂蜜原型中的每一种的最高水平的过氧化氢输出并绘制其对总酚活性的曲线，观察到线性关系(图22)。讨论来自所述工作的结果表明，手术蜂蜜和两种修改的原型pt1和pt2的主要抗微生物活性是由于过氧化氢所致。这是与来自各种花卉来源的某些其他蜂蜜类似的发现。但是，与先前工作不同，来自样品的过氧化氢的可用性能够增强，并且在12小时分别是单独手术蜂蜜的值的七倍和十倍。在抗微生物活性与来自三种蜂蜜原型的过氧化氢的最大输出之间存在显著线性关系。这种过氧化物活性提供有效的抗微生物活性，所述抗微生物活性理想地适用于施加至急性或慢性伤口以治疗或预防伤口感染的伤口敷料。虽然伤口中存在少量过氧化氢酶并且男性中过氧化氢酶的血清水平已被报道为50ku/l，但是已显示愈合伤口中的过氧化氢酶活性实际上在创伤后第一周期间下降，并且过氧化氢酶的活性水平在创伤后两周时恢复至其原始水平。因此，过氧化氢酶的这种浓度极不可能影响在外源施加的手术蜂蜜或两种修改的原型pt1和pt2情况下观察到的抗微生物活性。抗微生物伤口敷料的理想特征是：有效性、缺乏毒性、易于使用、患者和临床医生的可接受性以及物有所值。过氧化氢是一种有效的抗微生物剂且由于其对繁殖性细菌、酵母和孢子的强效活性已被用作杀虫剂。它通过细胞组分的化学氧化产生其抗微生物作用。过氧化氢的人体毒性是浓度依赖性的，并且一项研究已经声称抗微生物剂的不同浓度和人体毒性可重叠。相比之下，蜂蜜的某些制剂通过在施加敷料时随时间推移连续地向伤口供给低浓度的过氧化氢而不是作为大量并且无这种毒性而被证明是有效的抗微生物剂。确实存在令人信服的证据表明，在生理水平的过氧化氢被施加至哺乳动物细胞的情况下，这些细胞中存在生物反应的刺激和特异性生物化学途径的活化。清楚地，手术蜂蜜和两种修改的原型pt1和pt2是抗微生物敷料，其在至少24小时内提供有效的过氧化氢释放。结论手术蜂蜜和两种修改的原型pt1和pt2已被证明对金黄色葡萄球菌的标准菌株具有有效的抗微生物活性。这些抗微生物活性已被证明是由于过氧化氢所致。所述活性是可规模化的，并且可就过氧化氢活性而言进行描述。这些修改的蜂蜜提供有效、无毒且易于施用的敷料。表16示出手术蜂蜜(sh)和两种修改的原型pt1和pt2对金黄色葡萄球菌(ncimb9518)的过氧化和非过氧化抗菌活性。以下实施例27-30描述组合物(手术蜂蜜)对重要的形成生物膜的烧伤伤口病原体的体外抗菌活性的测定。手术蜂蜜先前已在实验室测试和临床实践两者中展示了对广泛浮游生物革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的高效抑菌和杀菌活性。预防性施加至剖腹产伤口已证明消除了抗性生物体并降低了定殖率和感染率。鉴于围绕抗微生物抗性的全球关注以及生物膜带来的挑战，对手术蜂蜜(s1、s2和s3–如上所述)的三种不同制剂对铜绿假单胞菌和鲍氏不动杆菌的形成生物膜的分离株的体外抗菌活性进行了研究以评估手术蜂蜜是否能够i)预防生物膜的形成，以及ii)根除或预防预先形成的生物膜的播种。使用两种生物膜测定研究了手术蜂蜜制剂s1、s2和s3的抗生物膜形成特性，并与标准麦卢卡蜂蜜进行了比较。这些使得能够在体外测量sh的“最低生物膜抑制浓度”(mbic)和“最低生物膜消除浓度”(mbec)。进行进一步实验以将sh的抗生物膜形成活性与一系列商业敷料，包括含有20％蜂蜜(l-mesitran纯)的商业敷料进行比较。实施例27与麦卢卡蜂蜜相比，通过手术蜂蜜预防生物膜形成此实施例描述了第一实验(实验1)，其比较手术蜂蜜(s1)和麦卢卡蜂蜜(mh)的作用，和第二实验(实验2)，其比较手术蜂蜜的的三种不同强度制剂(s1、s2和s3)对铜绿假单胞菌(对照菌株pa01，和临床烧伤伤口分离株1054)和鲍氏不动杆菌(对照菌株aye，和ukaci克隆nctc_13420(c59))的产生生物膜的分离株的生物膜形成的作用。方法对于每种纯蜂蜜样品，将一个铂环量的蜂蜜置于96孔微量滴定板的孔中的100μl水中。对于稀释的蜂蜜样品，将大约2.5ml蜂蜜置于具有6ml水的通用中。然后将3ml的此混合物连续稀释至1:2048。将100μl的每种连续稀释液添加至96孔板的不同孔。将分离株的过夜培养物在muller-hinton培养液中稀释至0.1的od600。将100μl稀释的过夜培养物添加至每个纯的或稀释的蜂蜜样品孔中。每个阳性对照孔含有100μl稀释的过夜培养物和100μl水。每个阴性对照孔含有200μl培养液或200μl纯蜂蜜样品。将板在33℃(伤口温度)下孵育72小时以促进生物膜形成。然后使用结晶紫染料(其结合至死亡和活生物膜)使板显色，并且在使用70％乙醇溶解染料后可视。然后使用分光光度计来评估溶解染料的光密度(od)。od读数对应于所并入的结晶紫的量。较高的od读数代表深色孔，和更大的生物膜质量。然后将od读数绘制成图。结果结果在图23-25中示出，并总结在以下表中，所述表记录每种菌株/分离株的最低生物膜抑制浓度(mbic)(使用0.3的od作为截止值)：1麦卢卡蜂蜜对假单胞菌的活性是零星的*＝当进行学生t检验以比较蜂蜜和阳性对照情况下的生长时统计上显著的(p<0.005)。结果表明，当以纯或1:2稀释使用时手术蜂蜜sh1预防假单胞菌生物膜形成，并且当以纯或1:2或1:4稀释使用时预防不动杆菌生物膜形成。当以纯的形式使用时，麦卢卡蜂蜜对假单胞菌生物膜产生具有零星作用，但当以纯的形式或1:2稀释使用时预防不动杆菌属生物膜形成。手术蜂蜜s2和s3也预防假单胞菌属和不动杆菌属生物膜形成，但能够以比s1手术蜂蜜更低的浓度做到这一点。在手术蜂蜜s2和s3抑制假单胞菌属和不动杆菌属生物膜形成的能力方面似乎不存在显著差异。不动杆菌属的生物膜形成似乎比假单胞菌属生物膜形成对手术蜂蜜和麦卢卡蜂蜜处理更敏感。结论从这些结果得出结论，手术蜂蜜能够预防生物膜的生物膜形成，并且手术蜂蜜s2和s3能够在比手术蜂蜜s1更低的浓度下预防生物膜形成。每种手术蜂蜜制剂能够以比麦卢卡蜂蜜更低的浓度预防生物膜形成。实施例28与麦卢卡蜂蜜相比，通过不同强度的手术蜂蜜制剂预防生物膜形成此实施例描述手术蜂蜜1(s1)、手术蜂蜜2(s2)、手术蜂蜜3(s3)和麦卢卡蜂蜜(mh)对铜绿假单胞菌(ps_1586]和ps_6749)和鲍氏不动杆菌(aci_c60和aci_19606)的产生生物膜的分离株的生物膜形成的作用。方法将每种蜂蜜置于37℃的孵育箱中30分钟。然后将大约3ml每种蜂蜜置于通用中，并添加3ml无菌水。然后将所述混合物剧烈涡旋并连续稀释至1:4096。将每种分离株的100μl稀释的过夜培养物添加至96孔微量滴定板中的100μl稀释的蜂蜜中，并在33℃(伤口温度)下孵育72小时以促进生物膜形成。然后使用结晶紫染料使板显色，并且在使用70％乙醇溶解染料后可视。然后使用分光光度计来评估溶解染料的光密度(od)。od读数对应于所并入的结晶紫的量。较高的od读数代表深色孔，和更大的生物膜质量。然后将od读数绘制成图。结果结果在图26-29中示出，并总结在以下表中，所述表记录每种分离株的最低生物膜抑制浓度(mbic)(使用0.3的od作为截止值)：11:64稀释未测试2与较低稀释度相比，在1:4稀释下观察到的增强的生物膜形成(参见下文)3与较低稀释度相比，在1:32稀释下观察到的增强的生物膜形成(参见下文)4与较低稀释度相比，在1:8至1:32稀释下观察到的增强的生物膜形成(参见下文)阳性对照(pos)显示，所有分离株都能够形成生物膜，并且阴性对照(neg)显示不存在污染。对于一些分离株，与手术蜂蜜或麦卢卡蜂蜜的较高和较低浓度下的生物膜形成相比，在一定浓度下观察到增强的生物膜形成。这种效应偶尔在其他杀生物剂的情况下也观察到。据信是由于杀生物剂的“应力”导致增强的生物膜形成。结论从这些结果得出结论，每种手术蜂蜜制剂(s1、s2和s3)能够预防所测试的每种分离株形成生物膜。s2和s3手术蜂蜜制剂能够以比s1手术蜂蜜更低的浓度做到这一点。用于预防分离株的生物膜形成的最佳手术蜂蜜制剂是s2。1:64稀释的s2能够预防所测试的每种分离株的生物膜形成。所测试的手术蜂蜜的每种强度制剂(s1、s2和s3)通常能够在比麦卢卡蜂蜜更低的浓度下预防生物膜形成。实施例29通过手术蜂蜜预防预先形成的生物膜播种此实施例描述手术蜂蜜s1、s2和s3制剂以及麦卢卡蜂蜜(mh)对预防或减少由鲍氏不动杆菌的两种分离株(aci_aye和aci_c59)产生的预先形成的生物膜的播种的作用。方法将200μl连续稀释的鲍氏不动杆菌(aci_aye或aci_c59)的过夜培养物添加至96孔微量滴定板的每个孔。将pcr栓板放置在微量滴定板的顶部，以使得每个孔含有可在其上形成生物膜的“栓”。然后将96孔板在33℃下孵育72小时，以促进生物膜生长。在72小时后，将栓洗涤且然后放入另一96孔板中，其中孔含有测试剂(手术蜂蜜或麦卢卡蜂蜜)或单独培养液(用于对照)。在24小时后，将栓洗涤且然后置于含有无菌培养液的另一个96孔板中以用于过夜孵育。第二天使用分光光度计评估培养液的od(如上述实施例27和28所述)。浊度培养液具有高od并且代表生物膜的成功播种。最后，使栓进行结晶紫测定(如实施例27和28中所述)，以证明生物膜首先存在于栓上。结果结果在图30和31中示出。在所述图中，y轴表示培养液的od，且因此表示播种量。如所预期，在每种阳性对照下观察到大量生物膜播种，并且在每种阴性对照下观察到最小背景浊度。生物膜存在于所有栓上。结果允许确定手术蜂蜜的最低生物膜消除浓度(mbec)。s1：对于两种分离株，在s1的低至1:16稀释下观察到减少的播种。在1:2稀释下观察到一些浊度。据信这可能是由于这些测试孔中的一些位于板的拐角中且因此更难洗涤所致的假象。在1:8稀释下也观察到一些浊度。同样，这据信是假象，可能是因为这些测试孔是在板上的阳性对照附近。s2：对于两种分离株，对于1:2至1:32/1:64稀释观察到减少的播种。至于sh1，在1:2稀释下观察到一些浊度。这可能是由于这些测试孔中的一些位于板的拐角中且因此更难洗涤所致。s3：对于两种分离株，对于1:2至1:32/1:64稀释观察到减少的播种。至于s1和s2，在1:2稀释下观察到一些浊度。这可能是由于这些测试孔中的一些位于板的拐角中且因此更难洗涤所致。mh：对于1:2至1:16/1:32稀释观察到减少的播种。结论结果证实，手术蜂蜜预防或减少预先形成的生物膜的播种。手术蜂蜜的s2和s3制剂能够在比s1制剂更低的浓度下预防或减少生物膜播种，但是在s2与s3制剂之间效力似乎差异不大。s2和s3制剂在减少生物膜播种方面似乎比麦卢卡蜂蜜稍微更有效。实施例30与可商购的伤口敷料相比，通过手术蜂蜜预防生物膜形成此实施例描述与失活的手术蜂蜜(de)、麦卢卡蜂蜜(mh：‘comvitamanukacare18+’)、乙酸(aa)和几种可商购的伤口敷料和伤口乳膏相比，手术蜂蜜s1、s2和s3制剂对预防铜绿假单胞菌(对照菌株pa01)和鲍氏不动杆菌(对照菌株aye)的生物膜形成的作用。方法将分离株的过夜培养物在muller-hinton培养液中稀释至0.1的od600。将手术蜂蜜s1、s2和s3、失活的手术蜂蜜(de)和麦卢卡蜂蜜(mh：‘comvitamanukacare18+’)在1:2–1:256的连续稀释(使用水作为稀释剂)下进行测试。将1ml蜂蜜与1ml稀释的分离培养物一起放入每个孔中。将1cm2的以下可商购的敷料中的每种添加至1ml水和1ml稀释的分离培养物：mepilexag；urgotulag；acticoat(ag)；urgotul(无am剂)；mesitrannet(基于蜂蜜的敷料)；polymem(无am剂)。还测试了可商购的乳膏trimovate和flamazine(用于治疗皮肤感染)。还从5％降至0.04％测试了乙酸。将板在33℃(伤口温度)下孵育72小时以促进生物膜形成。然后使用结晶紫染料使板显色，并且在使用70％乙醇溶解染料后可视。然后使用分光光度计来评估溶解染料的光密度(od)。od读数对应于所并入的结晶紫的量。较高的od读数代表深色孔，和更大的生物膜质量。然后将od读数绘制成图。结果结果在图32和33中示出。结果表明，acticoat和mepilexag敷料(以及在较小程度上，urgotel银)在预防两种菌株的生物膜形成方面均有效，flamazine乳膏也是有效的。urgotul和polymem敷料以及mesitrannet(商业基于蜂蜜的敷料)和trimovate乳膏在预防生物膜形成方面似乎没有作用。乙酸有效预防生物膜形成，直至0.31％(aye)和0.1％(pa01)。所测试的所有手术蜂蜜都至少在1:2和1:4稀释下并且一些在更低浓度下有效地预防两种菌株的生物膜形成(例如，s2在1:64稀释时对aye有效)。s2和s3手术蜂蜜在比s1手术蜂蜜更低的浓度下更有效地预防生物膜形成，并且每种手术蜂蜜制剂在比麦卢卡蜂蜜更低的浓度下更有效(参见例如，各自的1:8稀释的作用)。麦卢卡蜂蜜有效地预防生物膜形成直至1:2至1:4稀释。结果还表明，失活的手术蜂蜜(de)在预防生物膜形成方面是有效的。然而，当测试de蜂蜜的过氧化氢活性时，据发现其保留一些过氧化氢活性，且因此似乎没有完全灭活。结论从这些结果得出结论，手术蜂蜜在预防生物膜形成方面可与几种可商购的伤口敷料媲美，并且比mesitrannet(商业基于蜂蜜的敷料)更有效。在上述实施例中，测试了鲍氏不动杆菌的四种分离株和铜绿假单胞菌的三种分离株，并且手术蜂蜜能够以剂量依赖性方式预防所有分离株的生物膜形成。使鲍氏不动杆菌的预先形成的生物膜另外暴露于所有手术蜂蜜制剂24小时。对于所测试的两种菌株均观察到生物膜的播种减少，并且再次是剂量依赖性的。敷料实验(实施例30)揭示，与所测试的8种商业乳膏和敷料中的三种相比，手术蜂蜜在生物膜预防方面同等或更有效。此外，在此体外测试中，手术蜂蜜在预防鲍氏不动杆菌和铜绿假单胞菌的单一分离株的生物膜形成方面比l-mesitrannet更有效。这些结果表明，手术蜂蜜对烧伤伤口的关键革兰氏阴性病原体具有有效抗生物膜形成活性，并且具有优于所测试的大多数商业敷料的活性。这种组合物可用于代替抗生素，并且在抗生素抗性增加的时期，有助于减少不适当的抗生素使用。实施例31含手术蜂蜜的静电纺丝伤口敷料的抗微生物活性将含有4重量％聚环氧乙烷(peo)的水溶液与手术蜂蜜以80％peo溶液与20％手术蜂蜜的重量比进行混合。使用elmarconanospidertm静电纺丝设备在60kv电压、17cm的间隔距离和10rpm的电极旋转下将组合物静电纺丝到藻酸盐基底上以形成手术蜂蜜敷料。使用相同的静电纺丝设备和参数将5％(按重量计)的peo水溶液(不含手术蜂蜜)也静电纺丝到藻酸盐基底上以形成对照敷料。在第一测试中，将大肠杆菌的过夜培养物散布在含有营养琼脂的三个陪替氏培养皿的表面上。将对照敷料和手术蜂蜜敷料(大约2x2cm)的样品置于培养物的表面上。将对照敷料放置在每个板的左侧上，并将手术敷料施加至每个板的右侧。将板在37℃下孵育过夜18小时。在第二测试中，将金黄色葡萄球菌的过夜培养物散布在含有营养琼脂的三个陪替氏培养皿的表面上。将对照敷料和手术蜂蜜敷料(大约2x2cm)的样品置于培养物的表面上。将对照敷料放置在每个板的左侧上，并将手术敷料施加至每个板的右侧。将板在37℃下孵育过夜18小时。在第三测试中，测试了手术蜂蜜敷料和对照敷料的过氧化氢的存在。使用来自(代号1.10011)的过氧化物测试试剂盒测定过氧化氢的存在。在施加过氧化物测试试剂盒之前，将敷料润湿。结果第一测试的结果在图34中示出。左侧上的对照周围不存在抑制区(zoi)，并且在每个板的右侧上的活性样品周围存在大约1-2mm的zoi，从而证明对革兰氏阴性细菌的活性。第二测试的结果在图35中示出。左侧上的对照周围不存在zoi，并且在每个板的右侧上的活性样品周围存在大约5-10mm的清楚zoi，从而证明对革兰氏阳性细菌的活性。第三测试的结果在图36中示出。左侧上是活性手术蜂蜜敷料。蓝色的存在指示静电纺丝手术蜂蜜敷料(标记为d)正在产生过氧化氢，并且右侧上的对照敷料(标记为e)不具有过氧化氢产生能力。实施例32可喷雾组合物将含有1重量％聚环氧乙烷(peo)、79重量％去离子水和20重量％手术蜂蜜的组合物添加至泵作用喷雾装置中。使用喷雾装置来将组合物喷雾到过氧化氢测试条上。测试条指示组合物中存在过氧化氢。在五个月后，通过喷雾到过氧化氢测试条上，重新测试喷雾产生过氧化氢的能力。测试条指示组合物中存在过氧化氢。实施例33手术蜂蜜的抗病毒活性将sh1或sh2手术蜂蜜与单纯疱疹病毒(hsv)(50μg蜂蜜和50μl病毒)混合，并在37℃下孵育1小时。然后从混合物制备稀释系列(10-2、10-3、10-4、10-5)，并将稀释液用于噬斑减少测定中。还进行无蜂蜜的对照或具有对照蜂蜜的对照。记录每种稀释液形成的病毒空斑的数量。结果在以下表中示出。结果表明，sh1和sh2手术蜂蜜在两个实验中均对hsv具有强烈的杀病毒作用。实施例34手术蜂蜜的细胞毒性活性将sh1或sh2手术蜂蜜(50μg蜂蜜稀释10-2、10-3、10-4、10-5)在细胞上孵育2天。对活细胞数和细胞总数进行计数(存活力百分比＝活/总×100)。结果在以下表中和图37中示出。结果表明，sh1手术蜂蜜在10-2稀释下是细胞毒性的，并且在10-3和10-4稀释下是抑制细胞生长的，且sh2手术蜂蜜在10-2、10-3和10-4稀释下是抑制细胞生长的。sh1和sh2手术蜂蜜在10-5稀释下不是细胞毒性或抑制细胞生长的。从实施例33和34的结果可得出结论，手术蜂蜜可以杀病毒但不是细胞毒性或抑制细胞生长的剂量施用。实施例35干燥的手术蜂蜜干燥蜂蜜颗粒(k24289)由kanegradelimited(stevenage,uk)供应。干燥的蜂蜜颗粒通过真空干燥产生，并含有带脱脂奶粉的蜂蜜固体。水含量小于3％。通过在s1(sh1)和s2(sh2)水平下添加葡萄糖氧化酶来活化干燥的蜂蜜颗粒(参见实施例20)。图38(左图)显示，将水添加至活化的干燥蜂蜜颗粒导致立即产生50与100ppm之间的过氧化氢，如通过过氧化氢指示剂条所检测。图38(右图)显示将2g活化的干燥蜂蜜颗粒添加至30g无菌温水(大约35℃下)的结果。活化的蜂蜜颗粒容易溶解，无浮渣形成。即使在四天之后也没有沉淀，因为颗粒保持完全溶解。图39显示溶解的活性蜂蜜的活性在延长的时间段内保留。顶行(从左到右)：0小时；30分钟；60分钟；90分钟。底行(从左到右)：6小时；16.5小时；4天。在四天后，过氧化氢水平保持恒定在50与100ppm之间。这表明葡萄糖氧化酶保持活性，并且存在足够的葡萄糖以在长时间内产生过氧化氢。实施例36水性手术蜂蜜组合物的稳定性在2014年11月9日，制备了具有以下组成的样品：sh2手术蜂蜜：20重量％pva：5重量％水：75重量％使用过氧化氢测试条在2015年10月16日对样品进行了测试，并且发现仍然正在产生介于30-50ppm之间水平的过氧化氢。在2015年9月14日，通过将sh2手术蜂蜜与和水以1:15(手术蜂蜜:水，按重量计)混合来制备样品。使用过氧化氢测试条在2015年10月16日对样品进行了测试，并且发现仍然正在产生30-50ppm水平的过氧化氢。实施例37手术蜂蜜用于局部治疗下生殖道感染的用途手术蜂蜜已经用于治疗对标准治疗没有反应的持续阴道分泌物。适应症是具有各种病因的阴道分泌物，例如细菌性阴道炎和一般细菌阴道分泌物。将涂有手术蜂蜜的卫生棉条插入到阴道中，并且每24小时更换。治疗结果良好，并且没有报告不良作用。实施例38手术蜂蜜用于治疗cpe的用途一名患者在印度时发展软组织感染并被诊断为患有坏死性筋膜炎。这需要死组织的大量清除以及抗生素。手术后，发现患者在清创伤口中被cpe(产碳青霉烯酶肠杆菌科)定殖。患者需要隔离，并用手术蜂蜜治疗，其清除所述生物体。实施例39包含非水性溶剂的组合物样品1轻质水力缠结织物(40g/平方米)涂有25％w/w蜂蜜/甘油溶液织物上的涂层重量100g/平方米建议应用：伤口敷料中的吸水性织物。样品2轻质水力缠结织物(40g/平方米)涂有75％w/w蜂蜜/甘油溶液织物上的涂层重量100g/平方米建议应用：伤口敷料中的吸水性织物。样品3轻质水力缠结织物(40g/平方米)涂有25％w/w蜂蜜/甘油溶液织物上的涂层重量300g/平方米建议应用：抗菌擦拭物样品4轻质水力缠结织物(40g/平方米)涂有75％w/w蜂蜜/甘油溶液织物上的涂层重量300g/平方米建议应用：抗菌擦拭物样品5纸样织物(42g/平方米)涂有25％w/w蜂蜜/甘油溶液织物上的涂层重量100g/平方米建议应用：抗菌擦拭物样品6涂有25％w/w蜂蜜/甘油溶液的伤口敷料织物上的涂层重量400g/平方米样品7涂有25％w/w蜂蜜/甘油溶液的具有吸水垫的粘性伤口敷料织物上的涂层重量150g/平方米样品8轻质水力缠结织物(40g/平方米)涂有25％w/w手术蜂蜜/甘油溶液织物上的涂层重量100g/平方米建议应用：伤口敷料中的吸水性织物。样品9轻质水力缠结织物(40g/平方米)涂有25％w/w手术蜂蜜/甘油溶液织物上的涂层重量300g/平方米。实施例40包含蜂蜜、非水性溶剂和额外水的组合物。已经配制了以下组合物，其容易地从travel喷雾瓶喷雾(所有都为按重量计的量)：蜂蜜(手术蜂蜜)：25％甘油：52.5％水：22.5％如果包括蜂蜜中的水含量，则此组合物具有68.9％的水摩尔分数。喷雾瓶由手动泵操作。泵入口管长度：100mm管孔：1.5mm出口孔：2.5mm泵递送：每冲程0.14g水。实施例41手术蜂蜜对肥大细胞的细胞毒性肥大细胞是位于与外部环境(如鼻粘膜组织)紧密接触的组织中的上皮细胞正下方的岗哨细胞。它们在识别病原体和调节免疫反应方面发挥重要作用。此实施例描述不同浓度的手术蜂蜜对人肥大细胞系hmc-1的细胞的作用。方法a)细胞培养使用不同浓度的手术蜂蜜的s1、s2和s3制剂以及对照蜂蜜(acacia)：100g、40g、10g、1g/l。这些使用细胞生长培养基(imdm，10％fbs，2％青霉素链霉素)制成。将2百万个hmc-1细胞添加到12孔板中，使用2ml的各自浓度。b)细胞存活测定通过用台盼蓝染色20μl样品，在第3、第6和第24小时评估细胞存活。c)活和死亡测定使用血细胞计数器计数活细胞和死细胞。计算死细胞的百分比，并使用graphpadprism分析数据。结果具有不同浓度的s1、s2和s3手术蜂蜜的hmc-1细胞的第3、第6和第24小时培养的结果在图40中示出。高浓度的手术蜂蜜(s1)和对照acacia蜂蜜两者对hmc-1存活均是有害的。当使用100g/l的s1手术蜂蜜时，观察到hmc-1细胞形态改变。然而，在10g/l和40g/l下的s2和s3手术蜂蜜显示在第3小时和第6小时hmc-1细胞的低细胞死亡百分比。结论这些结果表明，在小于100g/l、优选40g/l或更低、10g/l或更低或1g/l或更低的浓度下使用手术蜂蜜(特别是s1、s2或s3制剂，优选s2或s3制剂)或本发明的其他组合物用于治疗存在肥大细胞的区域(如与外部环境紧密接触的组织(例如鼻粘膜组织)中的上皮)中的微生物感染可以是有效的。限制手术蜂蜜或本发明的其他组合物与细胞接触少于24小时，优选小于6小时或小于3小时也可以是有益的，特别是在接触存在肥大细胞的区域，如与外部环境紧密接触的组织(例如鼻粘膜组织)中的上皮时。当前第1页12