，在两个初步干燥步骤中干燥模具制剂中的液体。将含有液体制剂的 模具置于湿度受控的腔体内（85%RH)，室溫下干燥1-30分钟，随后在32°C的烘箱中干燥约 30分钟。将对应于背衬制剂F2(表6)的背衬层诱铸在含有活性剂制剂的模具上W连接至 微突起。该背衬层首先使用受控气流在压缩干空气（CDA)盒中干燥30分钟，随后置于45°C 的对流烘箱中干燥30-90分钟。随后将UV粘合剂置于背衬层顶部，使用5密耳聚碳酸醋 (PC)薄膜覆盖W铺展该粘合剂，随后使用UV融合系统固化。UV固化剂量是1. 6J/cm2。固 化后，将包含含活性剂微突起层/PLGA/PC上UV粘合剂背衬层的MSA从模具中移开并冲切 成1 - 2cm2切片。该MSA随后经历最终干燥步骤W从微突起层中完全除去水分并从背衬层 中完全除去残留溶剂。该最终干燥在真空（约0.05托）下进行，35°C下干燥过夜。在多叶 饰（Polyfoil)袋中单独密封运些MSA。活性剂或活性剂、第二试剂组合（即形成固体MSA 的那些）的示意性经干燥组合物总结于表8。
[021引为测定最终MSA中的活性剂浓度，在5mM憐酸盐缓冲液（pH8. 0)中从MSA中提取 活性剂。通过SEC-HPLC测量MSA中的活性剂。通过UV测量MSA中的活性剂/第二试剂加 载量，因为可基于制剂中两种组分的比例预测第二试剂和活性剂加载量。MSA中的活性剂是 约16yg/cm2;具有合并的试剂的MSA中第二试剂加载量是约55yg/cm2s [0引9]表8
[0220] 示例性固体组合物MSA
[0222] 实施例8
[0223] 含活性剂的微结构阵列的制造
[0224] 将约55y1的上文表4所述液体制剂El或E3加至娃酬模具内，使用1拙18mm盖 玻片覆盖，在50psi下加压1分钟并擦拭。或者，将约75y1的液体制剂诱铸至娃酬模具 内，使用22X30mm盖玻片覆盖，在50psi下加压1分钟并擦拭。擦拭后，在两个初步干燥步 骤中干燥模具制剂中的液体。将含有液体制剂的模具置于湿度受控的腔体内（85%RH),室 溫下持续1-30分钟，随后在32°C的烘箱中下持续约30分钟。将对应于背衬制剂F2 (表6) 的背衬层诱铸在含有活性剂制剂的模具上W连接至微突起。该背衬层首先使用受控气流在 压缩干空气（CDA)盒中干燥30分钟，随后置于45°C的对流烘箱中干燥30-90分钟。随后 将UV粘合剂置于背衬层顶部，使用5密耳聚碳酸醋（PC)薄膜覆盖W铺展该粘合剂，随后使 用UV融合系统固化。UV固化剂量是1. 6J/cm2。固化后，将包含含活性剂微突起层/PLGA/ PC上UV粘合剂背衬层的MSA从模具中移开并冲切成1 - 2cm2切片。该MSA随后经历最终 干燥步骤W从微突起层中完全除去水分并从背衬层中完全除去残留溶剂。该最终干燥在真 空（约0.05托）下进行，35°C下干燥过夜。在多叶饰（Polyfoil)袋中单独密封运些MSA。 示意性经干燥制剂（即形成固体MSA的那些）总结于表9。
[0225]为测定最终MSA中的活性剂加载量，在憐酸盐缓冲液（pH7. 0)中从MSA中提取活 性剂。通过SRID测量MSA中的试剂加载量。表9总结了MSA的浓度。
[022引 表9
[0227] 示例性固体组合物
[0229]表 10
[0230]MSA中活性剂加载量（SRID测定）
[0232] 实施例9
[0233] 体外皮肤穿透效率和表观剂量递送效率
[0234] 从腹部切下全厚度猪皮，随后夹住并刮毛W除去毛髪。将按上文所述制备的MSA 施用于刮毛后的皮肤位点，使用施用器W施加足W将各微突起的至少一部分插入皮肤的力 并在原位用手固定约5-15分钟的时间。对施用位点进行染料染色并照相W观察微结构阵 列穿透。使用基于计算机的图像分析程序定量穿透。随后基于MSA的预期微结构理论数目 计算皮肤穿透效率（SPE)，如下所示：
[0235] % 8阳=100X巧穿透/#微结构）
[0236] 通过将使用的MSA在水性提取介质中浸溃约30分钟来提取体外SPE测试后MSA 中剩余的残留活性剂，随后使用合适的分析方法（如SEC-册LC)分析提取物。虽然如下所 示计算表观递送剂量/单位和递送效率：
[0237] 表观递送剂量=初始药物加载量-残留药物
[023引 ％药物递送效率=IOOX表观递送剂量/初始药物加载量
[0239] 实施例6所述MSA(制剂Gl)的S阳大于80 %。
[0240] 实施例10
[0241] 制造过程中和储存后MSA中活性剂稳定性
[0242] 通过在多个制造步骤期间提取样品并分析活性剂纯度来监测制造期间的活性剂 稳定性（"过程中稳定性"）。
[0243] 对于保存期稳定性，将含有活性剂的MSA储存在不同的储存条件下：例如5°C， 25°C/65%RH和40°C/75%RH。在预定的时间点处，分析样品的纯度。
[0244] 使用不同的分析方法来表征所用活性剂的稳定性：粒度、SDS-PAGE、SEC-HPLC和 体外效力或者SRID试验方法被用于监测活性剂的稳定性。
[0245] 含有制剂Gl中活性剂的MSA在5°或25°C稳定性保持至少3个月。
[0246] 实施例11
[0247] 使用MSA透皮给予的活性剂的体内免疫原性研究
[024引在猪中评估通过MSA给予的活性剂的体内免疫原性。所有动物都使用活性剂的IM注射初免。随后将MSA中含有的活性剂用作加强剂。比较MSA给予的活性剂的加强应答与 基于活性剂IM注射的加强。来自MSA所给予活性剂的加强应答至少与IM液体注射一样良 好。
[0249] 在无毛豚鼠中评估活性剂的体内免疫原性。IM注射活性剂/增强剂（佐剂）液体 被用作对照。所有组都给予=次活性剂：初免/加强/加强。通过MSA递送的活性剂显示 与IM注射相比相等或更好的性能。然而，与IM相比，使用MSA给药的应答质量要好得多。 [0巧0] 虽然上文描述了许多示例性方面和实施方式，但本领域技术人员应理解某些修 改、排列、添加及其子项组合。因此，W下所附权利要求和之后导入的权利要求旨在被理解 为包括所有运类修改、排列、添加及其子项组合，如在其真正精神和范围内那样。
[0251] 本文中提及的所有专利、专利申请和出版物均W参考的方式用全文纳入本文。然 而，在通过引用纳入包含明确定义的专利、专利申请或公开出版物时，应理解运些明确定义 用于其所在的纳入的专利、专利申请或公开出版物，不一定用于本申请的文本，特别是本申 请的权利要求书，其中本文提供的示例、定义用作代替。
【主权项】
1. 一种包含大致平的基底和多个生物可降解微结构的微结构阵列，各微结构具有与所 述基底连接的连接点和用以穿透对象皮肤的末梢尖端，其中 (i) 所述多个微结构包含生物可降解和水溶性基质中的活性剂，所述生物相容性和水 溶性基质包含亲水性聚合物和糖醇，且 (ii) 所述基底包含生物相容性非水溶性聚合物基质， 所述微结构在穿透所述对象的皮肤后溶解释放所述活性剂。2. 如权利要求1所述的微结构阵列，所述聚合物选自多糖、改性的纤维素、乙烯基酰胺 聚合物、乙烯醇聚合物、1，2-环氧聚合物或其共聚物。3. 如权利要求2所述的微结构阵列，所述多糖是葡聚糖或化学改性的葡聚糖。4. 如权利要求2所述的微结构阵列，所述多糖是右旋糖酐或化学改性的淀粉。5. 如权利要求4所述的微结构阵列，所述多糖是选自羧甲基淀粉和羟烷基淀粉的化学 改性的淀粉。6. 如权利要求5所述的微结构阵列，所述羟烷基淀粉是羟乙基淀粉（HES)或羟丙基淀 粉（HPS)。7. 如权利要求5或6所述的微结构阵列，所述化学改性的淀粉的取代度为0. 80至 0. 40 〇8. 如权利要求1-7中任一项所述的微结构阵列，所述糖醇选自甘油、木糖醇、甘露醇、 山梨糖醇、半乳糖醇、乳糖醇、赤藓糖醇、甘油、麦芽糖醇、蔗糖和海藻糖。9. 如权利要求4所述的微结构阵列，所述多糖是右旋糖酐且所述糖醇是山梨糖醇。10. 如权利要求6所述的微结构阵列，所述多糖是羟乙基淀粉且所述糖醇是山梨糖醇。11. 如权利要求1-10中任一项所述的微结构阵列，所述生物相容性和水溶性基质还包 含一种或多种赋形剂或佐剂。12. 如权利要求9或10所述的微结构阵列，其中，在包含活性剂的所述生物相容性和水 溶性基质中，当以约〇. 05重量％至约20重量％范围的活性剂浓度溶于水性缓冲液时，其特 征还包括所述活性剂在5°C稳定性保持至少7天。13. 如权利要求1-12中任一项所述的微结构阵列，所述多个微结构包含约0. 1-15重 量％ (固体）活性剂，约20-95重量％ (固体）多糖和约5-50重量％ (固体）糖醇。14. 一种适用于形成多个溶解型微结构的液体制剂，所述液体制剂包含缓冲液中的活 性剂、多糖和糖醇，所述液体制剂包含约1-30重量％多糖、约1-30重量％糖醇和约0. 05-20 重量％活性剂。15. 如权利要求14所述的液体制剂，所述多糖是右旋糖酐或化学改性的淀粉。16. 如权利要求15所述的液体制剂，所述多糖是选自羧甲基淀粉或羟烷基淀粉的化学 改性的淀粉。17. 如权利要求16所述的液体制剂，所述羟烷基淀粉是羟乙基淀粉（HES)或羟丙基淀 粉（HPS)。18. 如权利要求17所述的液体制剂，所述羟烷基淀粉的取代度为0. 80至0. 40。19. 如权利要求14-18中任一项所述的液体制剂，所述糖醇选自甘油、木糖醇、甘露醇、 山梨糖醇、半乳糖醇、乳糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、蔗糖和海藻糖。20. 如权利要求14所述的液体制剂，其中，（i)所述多糖是右旋糖酐且所述糖醇是山梨 糖醇或（ii)所述多糖是羟乙基淀粉且所述糖醇是山梨糖醇。21. 如权利要求14-20中任一项所述的液体制剂，所述液体制剂还包含一种或多种赋 形剂或佐剂。22. 权利要求14-21中任一项所述的液体制剂的干燥形式。23. -种制备微结构阵列的方法，所述方法包括： (i) 提供包含缓冲液中活性剂、亲水性聚合物和糖醇的液体制剂，所述液体制剂包含约 1-30重量％亲水性聚合物、约5-50重量％糖醇和约0. 1-50重量％活性剂； (ii) 将来自（i)的所述液体制剂分散在具有微结构空腔阵列的模具上并填充所述微 结构空腔以形成制剂填充的模具， (iii) 干燥所述制剂填充的模具， (iv) 将背衬层置于来自（iii)的干燥模具上，使得所述背衬层形成基底，所述基底具 有与各所述微结构空腔连接的连接点，从而提供模塑的微结构阵列；以及 (V)将来自（iv)的所述微结构阵列移出所述模具。24. 如权利要求23所述的方法，所述亲水性聚合物选自多糖、改性的纤维素、乙烯基酰 胺聚合物、乙烯醇聚合物、1，2-环氧聚合物和共聚物。25. 如权利要求23或24所述的方法，所述方法还包括将所述背衬层固定至背衬基材。26. 如权利要求23-25中任一项所述的方法，其中，在所述分散步骤后，从所述模具的 表面上除去过量的液体制剂。27. 如权利要求23-26中任一项所述的方法，所述液体制剂是溶液或悬浮液。28. 如权利要求23-27中任一项所述的方法，所述微结构空腔通过加压填充。29. 如权利要求23-28中任一项所述的方法，所述液体制剂是权利要求14-21中任一项 所述的液体制剂。30. -种向哺乳动物对象透皮给予活性剂的方法，所述方法包括将权利要求1-13中任 一项所述的微结构阵列插入所述对象的皮肤中。
【专利摘要】提供了一种包含与基底相连的多个溶解型微结构(如微突起)的微结构阵列。多个微结构包含生物相容性和水溶性基质中的活性剂，该水溶性基质优选包含多糖聚合物和糖醇，且该基底通常包含非水溶性基质。多个微结构在穿透对象的皮肤后经溶解以释放活性剂。还提供了干燥和液体形式的相关微结构制剂，制备上述微结构阵列的方法和通过将本发明所述微结构阵列应用于对象皮肤来给予活性剂的方法，以及其他特征。
【IPC分类】A61B17/20, A61M37/00, A61K9/00
【公开号】CN105188569
【申请号】CN201480015948
【发明人】陈国华, 丁中立, E·加提-泰格, P·辛格
【申请人】考里安国际公司
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2014年3月7日
【公告号】CA2904335A1, EP2967597A1, US20140276378, WO2014150069A1