脒及其衍生物以及含有它们的药物组合物的制作方法

专利名称：脒及其衍生物以及含有它们的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及脒及其衍生物以及含有它们的药物组合物，它们可用于预防和治疗多形核嗜中性白细胞(PMN白细胞)在炎症部位恶性聚集所致的组织损伤。
背景技术：
特定的血细胞(巨噬细胞、粒细胞、中性粒细胞、多形核细胞)通过一种称之趋化的过程沿着化学刺激物的浓度梯度迁移而应答该刺激剂(当以称为趋化因子的物质刺激时)。主要的公知刺激剂或趋化因子的代表为补体C5a的分解产物、细菌表面溶解产生或来自合成肽的一些N-甲酰肽，例如甲酰基-甲硫氨酰基-亮氨酰基-苯丙氨酸(f-MLP)，主要是各种细胞因子，包括白介素-8(IL-8，也称CXCL8)。白介素-8是一种内源性趋化因子，由大部分有核细胞产生，例如成纤维细胞和巨噬细胞。
在一些以嗜中性白细胞恶性聚集为特征的病理状态中，部位上较严重的组织损伤与嗜中性白细胞的浸润有关。最近，已经普遍证实了嗜中性白细胞激活在确定缺血后再灌注和肺部高氧相关性损伤中的作用。
IL-8的生物活性受该白介素与CXCR1和CXCR2膜受体相互作用介导，所述膜受体属于在人嗜中性白细胞和某些类别T细胞表面上表达的七种跨膜受体家族(L.Xu等人，J.Leukocyte Biol.，57，335，1995)。已经知道一些能够辨别CXCR1与CXCR2的选择性配体，其中GRO-α是CXCR2选择性趋化因子的一个例子。
虽然已知CXCR1激活在IL-8介导的趋化性中具有重要作用，但最近有人提出，CXCR2激活在牛皮癣等慢性炎性疾病中也可能发挥病理生理作用。事实上，IL-8对角化细胞功能产生作用也支持了牛皮癣中IL-8的病理生理作用。
实际上有证据显示，IL-8是上皮细胞增殖和血管生成的有效刺激物，而上皮细胞增殖和血管生成是牛皮癣发病机制的两个重要方面(A.Tuschil等人，J Invest Dermatol，99，294，1992；Koch AE等人，Science，258，1798，1992)。
此外，不断有证据显示，IL-8在黑素瘤进展和转移中的病理生理作用受CXCR2激活的介导(L.R.Bryan等人，Am J Surg，174,507，1997)。
IL-8通过CXCR2受体通道在肺部疾病(肺损伤、急性呼吸窘迫综合征、哮喘、慢性肺炎和囊性纤维化)，特别是在慢性阻塞性肺病发病机制中有潜在致病作用已有广泛描述(D.WP Hay和H.M.Sarau.，Current Opinion inPharmacology 2001，1242-247)。
在研究酮洛芬(S)和(R)单对映体对于其外消旋物消炎活性的贡献以及它们在趋化因子调节中的作用时(P.Ghezzi et al.，J.Exp.Pharm.Ther.，287，969，1998)，已经证实，两种对映体及其与手性和非手性有机碱形成的盐以剂量依赖方式抑制IL-8在人PMN白细胞内诱导的Ca2+离子胞内浓度趋化性和升高(专利申请US6,069,172)。后来，又证明了(C.Bizzarri等人，Biochem.Pharmacol.61，1429，2001)，酮洛芬与属于非类固醇消炎药(NSAID)一类的其它分子，例如，氟比洛芬、布洛芬和吲哚美辛，具有相同的抑制IL-8生物活性的性质。NSAID的典型环加氧酶(COX)抑制活性限制了这些化合物在嗜中性白细胞依赖性病理和炎性疾病中的治疗应用，例如牛皮癣、特发性肺纤维化、急性呼吸衰竭、再灌注和肾小球性肾炎引起的损伤。抑制由对环加氧酶作用所产生的前列腺素合成涉及增加细胞因子的生成，这如同TNF-α一样，在扩大不希望有的嗜中性白细胞促炎作用中起作用。
已经发现了一些适合“体内”给予的几类新的有效和选择性IL-8生物活性抑制剂。R-2-芳基丙酸酰胺和N-酰基磺酰胺被形容为IL-8诱导的嗜中性白细胞趋化性和脱粒的有效抑制剂(WO 01/58852；WO 00/24710)。此外，WO03/043625描述了新的R和S-2-苯基丙酸，它们被认为是有效的IL-8抑制剂，完全没有不希望的COX抑制作用。

发明内容
我们已经发现一类新的脒及其衍生物，具有有效地抑制IL-8诱导的嗜中性白细胞趋化性和脱粒的能力。
因此，本发明提供通式(I)所示的脒和衍生物 及其药学上可接受的盐，式中，Ar是未取代或由一或多个基团取代的苯基，所述取代基独立地选自卤素、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基、羥基、C1-C4-酰氧基、苯氧基、氰基、硝基、氨基、C1-C4-酰基氨基、卤代-C1-C3-烷基、卤代-C1-C3-烷氧基、苯甲酰基，或者Ar是取代或未取代的5-6元杂芳环，所述杂芳环选自吡啶、吡咯、噻吩、呋喃、吲哚；R选自-H、C1-C5-烷基、苯基、C1-C5苯基烷基、C1-C5-环烷基、C1-C5-链烯基、C1-C5-烷氧基；-以通式-(CH2)n-NRaRb表示的残基，其中n是0至5的整数，Ra和Rb可以相同或不同，是C1-C6-烷基、C1-C6-链烯基，或者Ra和Rb与它们所连接的氮原子一起形成一个通式(II)所示的3-7元杂环 其中，W代表单键、O、S、N-Rc，Rc是H、C1-C6-烷基或C1-C6-烷基苯基，n是0至4的整数。
R′是H、CH3、CH2CH3；R和R′或者可以形成一个通式(III)所示的5-7元杂环
其中，X代表残基-O(CH2)n，-O(CH2)n中的n是1至3的整数，或者X代表残基-(CH2)n，-(CH2)n中的n是2至4的整数，或者X代表乙烯基-CH＝CH-。
当R是C1-C5烷基时，所述烷基可以任选地由一个诸如氧或硫的杂原子断开。例如，R可以是通式-CH2-CH2-Z-CH2-CH2OR”，其中R”是H或者C1-C5-烷基。
通式(I)所示的化合物是手性化合物，本发明提供外消旋物和(+)和(-)单对映体。
本发明的另一个目的是如上所定义的通式(I)所示的本发明化合物，它们用作药物。具体地说，本发明提供用作IL-8诱导的人PMN趋化性的抑制剂的通式(I)化合物。
当Ar是苯基时，优选的苯基如下-在3位(间位)上由一个基团取代，所述基团选自直链或支链C1-C5-烷基、C2-C5-链烯基或C2-C5-链炔基、取代或未取代的苯基、直链或支链C1-C5-羟基烷基、C2-C5-酰基、取代或未取代的苯甲酰基；-在4位(对位)上由一个基团取代，所述基团选自C1-C5-烷基、C2-C5-链烯基或C2-C5-链炔基、C3-C6-环烷基、C1-C5-酰基氨基、取代或未取代的苯甲酰基氨基、C1-C5-磺酰氧基、取代或未取代的苯磺酰氧基、C1-C5-烷烃磺酰氨基、取代或未取代的苯磺酰氨基、C1-C5-烷烃磺酰基甲基、取代或未取代的苯磺酰基甲基、2-呋喃基；由3-四氢呋喃基、2-噻吩基、2-四氢噻吩基或者C1-C8(烷酰基，环烷酰基，芳基烷酰基)-C1-C5-烷基氨基，例如乙酰基-N-甲基-氨基、新戊酰基-N-乙基-氨基取代；当Ar是杂芳环时，优选的杂芳环如下-吡咯、噻吩、呋喃。
优选的R基团是-H、C1-C5-烷基、C1-C5-苯基烷基；
-通式-(CH2)n-NRaRb所示的残基，其中n是2至3的整数，更好是3，基团NRaRb是N，N-二甲胺、N，N-二乙胺、1-哌啶基、4-吗啉基、1-吡咯烷基、1-哌嗪基、1-(4-甲基)哌嗪基；更好的NRaRb是N，N-二甲胺或1-哌啶基。
优选的基团R′是H；当R和R′形成通式(III)所示的杂环时，X最好代表残基-O(CH2)n-，其中n是1或2的整数，或者X代表残基-(CH2)2。
本发明特别优选的化合物是(R，S)(2-(4-异丁基苯基)丙脒盐酸盐(+)(2-(4-异丁基苯基)丙脒盐酸盐(-)(2-(4-异丁基苯基)丙脒盐酸盐(R，S)2-(3-苯甲酰基苯基)丙脒盐酸盐(R，S)2-[(3-氟-4-苯基)苯基]丙脒盐酸盐(R，S)2-(4-三氟甲烷磺酰氧基苯基)丙脒盐酸盐(R，S)2-(5-苯甲酰基-2-噻吩)丙脒盐酸盐(R，S)2-(4-异丁基苯基)-N-[3″-(N′-哌啶子基)丙基]丙脒二盐酸盐(R，S)2-(4-异丁基苯基)-N-甲基-丙脒盐酸盐(R，S)2-(3-苯甲酰基苯基)-N-[3-(N，N-二甲基氨基)丙基]丙脒盐酸盐(R，S)2-(4-异丁基苯基)丙脒乙酸酯(R，S)2-(4-异丁基苯基)-N-[3-(N，N-二甲基氨基)丙基]丙脒(R，S)2-(4-异丁基苯基)-N-苄基丙脒(R，S)3-[1-(4-异丁基苯基)乙基]-5，6-二氢-2H-1，2，4-二嗪(R，S)2-[1-(4-异丁基苯基)乙基]-4，5-二氢-2H-1，3-咪唑。
本发明的化合物是IL-8诱导的人PMN趋化性的有效和选择性抑制剂。
本发明的通式(I)化合物一般以其与药学上可接受的有机和无机酸形成的加成盐形式分离出来。
这样的酸的例子选自盐酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、反丁烯二酸、柠檬酸。
通式(I)所示的化合物是这样获得的在甲醇/盐酸溶液中处理相应的以通式(IV)所示的腈衍生物，再使中间产物亚氨酸酯与通式NHR(R如上所定义)所示的胺在诸如二氯甲烷等有机溶剂中反应，
式(IV)中，Ar如上所定义。
基团R和R′形成通式(III)所示的杂环的通式(I)化合物是通过通式(V)所示的酰胺与诸如Al(CH3)3等合适的催化剂进行直接环化反应而得到的， 式(V)中，X如上所定义。
另一个选择是，基团R和R′形成通式(III)所示的杂环的通式(I)化合物是通过通式(I)所示的脒(R’是H，R是H或OH)与通式L-K-L’所示的试剂在碱存在下反应而成，其中L和L’是卤素、甲磺酸盐等常用离去基团，当R和R’都是H时，K代表残基-(CH2)n-，n是2至4的整数；当R是OH，R’是H时，K代表残基-(CH2)n-，n是1至3的整数。
“体外”评估通式(I)化合物抑制由IL-8和GRO-α片段诱导的多形核白细胞(下文用PMN表示)和单核细胞趋化性的能力。为此，从身体健康的成人志愿者身上抽取肝素化人血液，从该血液分离出PMN，通过葡聚糖沉降去除单核细胞(按照W.J.Ming等人公开的方法，J.Immunol.，138，1469，1987)，通过低渗溶液处理去除红血细胞。以锥虫蓝排除法计算细胞活力，用DiffQuick染色后再估算细胞离心产物中的循环多形核比率。
在趋化性试验中采用人重组IL-8(Pepro Tech)作为刺激剂，实际上获得相同的结果将冻干蛋白溶解在一定体积含有0.2％牛血清蛋白(BSA)的HBSS中，配成10-5M的母液，用HBSS稀释至10-9M用于趋化性试验。
在趋化性试验过程中(按照W.Falket等人，J.Immunol.Methods，33，239，1980)，采用5微米孔径的PVP-free过滤器，并有适合进行相同试验的细微室。
本发明通式(I)的化合物的评估浓度范围是10-6至10-10M，因此，以同样浓度把它们加入细微室下部孔和上部孔中。按照Van Damme J.等人的方法(Eur.J.Immunol.，19，2367，1989)，评估本发明通式(I)的化合物抑制IL-8诱导的人单核细胞趋化性的能力。
本发明以通式(I)表示的化合物中特别优选的是这样的化合物，其中Ar基团是3′-苯甲酰基苯基、3′-(4-氯-苯甲酰基)-苯基、3′-(4-甲基-苯甲酰基)-苯基、3′-乙酰基-苯基、3′-丙酰基-苯基、3′-异丁酰基-苯基、4′-三氟甲烷磺酰氧基-苯基、4′-苯磺酰氧基-苯基、4′-三氟甲烷磺酰氨基-苯基、4′-苯磺酰氨基-苯基、4′-苯磺酰甲基-苯基、4′-乙酸基苯基、4′-丙酰氧基-苯基、4′-苯甲酰氧基-苯基、4′-乙酰基氨基-苯基、4′-丙酰基氨基-苯基、4′-苯甲酰基氨基-苯基，这些化合物具有能有效地抑制GRO-α诱导的PMN趋化性的附加性质；这种性质可使这些化合物对具体涉及CXCR2信道或者与CXCR2信道与CXCR1信号传导联合的IL-8相关病理有治疗用途。
虽然考虑到感兴趣的治疗应用最好选用IL-8和GRO-α诱导的生物活性的的双重抑制剂，但是选择性作用于CXCR1IL-8受体或者CXCR2GRO-α/IL-8受体的上述化合物，可用于治疗下文所述的特定病理。
采用Patrignani等人所述的步骤(J.Pharmacol.Exper.Ther.，271，1705，1994)，完全在血液中体外评估通式(I)化合物，结果发现它们作为环加氧酶(COX)的抑制剂是完全无效的。
多数情况下，通式(I)化合物在10-5至10-7M浓度范围内不会干扰脂多糖(LPS，1微克/毫升)刺激小鼠巨噬细胞诱导产生PGE2。可记录的对PGE2产生的抑制通常低于统计学显著性的极限，一般不超过基数值的15-20％。抑制COX的效率降低是本发明化合物在治疗应用中的一个优点，其作用与抑制前列腺素合成是巨噬细胞刺激增强TNF-α合成(LPS或过氧化氢诱导)一样大，TNF-α是中性粒细胞激活的重要介导剂，也是细胞因子IL-8产生的刺激物。
考虑到上述讨论的实验结果和白介素-8(IL-8)及其同源物在涉及嗜中性白细胞激活和浸润过程中的作用，本发明的化合物特别适用于治疗某些疾病，例如牛皮癣(R.J.Nicholoff等人，Am.J.Pathol.，138，129，1991)。可用本发明化合物治疗的的其它疾病是慢性肠炎症病理，例如溃疡性结肠炎(Y.R.Mahida等人，Clin.Sci.，82，273，1992)和黑素瘤、急性呼吸窘迫综合征(COPD)、大疱性类疱疮、类风湿性关节炎(M.Selz等人，J.Clin.Invest.，87，463，1981)、特发性纤维化(前面引用的E.J.Miller和P.C.Carré等人，J.Clin.Invest.，88，1882，1991)、肾小球性肾炎(T.Wada等人，J.Exp.Med.，180，1135，1994)以及预防和治疗由局部缺血和再灌注引起的损伤。
CXCR1和CXCR2激活的抑制剂可用于上述的应用，特别是可用于治疗慢性炎症病理(例如牛皮癣)，其中两种IL-8受体的激活被认为对于该疾病的进展有重要的病理生理作用。
事实上已众所周知，激活CXCR1是IL-8介导的PMN趋化性所必需的(Hammond M等人，J Immunol，155，1428，1995)。另一方面，CXCR2的激活是牛皮癣患者IL-8介导的上皮细胞增殖和血管生成所必需的已为人所知(Kulke R等人，J Invest Dermatol，110，90，1998)。
此外，CXCR2选择性拮抗剂特别用于治疗重要肺部疾病，例如慢性阻塞性肺病(D.WP Hay and H.M.Sarau.，Current Opinion in Pharmacology 2001，1242-247)。
所以，本发明的另一个目的在于提供一些化合物，用于治疗牛皮癣、溃疡性结肠炎、黑素瘤、慢性阻塞性肺病(COPD)、大疱性类疱疮、类风湿性关节炎、特发性纤维化、肾小球性肾炎以及预防和治疗由局部缺血和再灌注引起的损伤，还提供这些化合物在制备治疗上述疾病的药物中的用途。含有本发明化合物及其合适载体的药物组合物也在本发明的范围之内。
本发明的化合物与常规使用的佐剂、运载体、稀释剂或赋形剂实际上可放在一起制成药物组合物及其单位剂量形式，其形式可为固体，如片剂或填充胶囊，或液体，如溶液、悬浮液、乳液、酏剂或它们的填充胶囊，所有形式均可口服，或以灭菌注射液的形式供肠道外(包括皮下)用药。这些药物组合物及其单位剂量形式可包括按传统比例配制的成分，可另外加入或不加入活性化合物或活性成分，而单位剂量形式也可含有任何适当有效量的活性成分，与每天服用的剂量相称。
当本发明的脒用作药物时，一般以药物组合物的形式给药。这些组合物可采用药学领域已知的方式来制备，它们包括至少一活性化合物。通常，本发明化合物的给予量是药物有效量。但化合物的实际给予量一般由医生根据有关情况来决定，包括治疗情况、所选择的给药途径、实际给予的化合物、各个患者的年龄、体重和反应、患者症状的严重性等等。
本发明的药物组合物的给药途径有多种，包括口服、直肠、透皮、皮下、静脉内、肌内及鼻内给药。根据所选的输送路径，化合物最好配成注射液或口服组合物。口服组合物可制成本体溶液或悬浮液或本体粉末。然而，最常见的是把组合物制成单位剂量形式以方便准确计算剂量。术语“单位剂量形式”是指适合人体和其它哺乳动物的单位剂量的物质单个单位，每个单位含有经过预先计算的预定量活性物质，与一合适的药学赋形剂一起产生所希望的治疗效果。典型的单位剂量形式包括预填充和预测量的液体组合物的安瓿或注射器或者丸剂、片剂、胶囊等固体组合物。在这些组合物中，酸化合物往往是微量组分(占重量约0.1％至约50％，优选占重量约1％到约40％)，其余为各种赋形剂或者载体和处理助剂，有助形成所需的剂量形式。
适合口服的液体形式可包括一合适的水性或非水性赋形剂和缓冲剂、悬浮剂和分散剂、着色剂、调味剂等。液体形式，包括下面提到的注射组合物，通常要储存于黑暗环境中，以避免遇光产生任何催化作用，如生成过氧化氢或过氧化物。固体形式可包括例如下列任何一种成分或有类似性质的化合物粘合剂，如微细晶体纤维素、黄茋胶或明胶；赋形剂，如淀粉或乳糖；崩解剂，如藻胶酸、原胶或玉米淀粉；润滑剂，如硬脂酸镁；助流剂，如胶体二氧化硅；甜味剂，如蔗糖或糖精；或香味剂，如薄荷、水杨酸盐或甜橙味剂。
注射组合物一般是基于注射灭菌盐水或磷酸盐缓冲盐水或其它本领域已知的注射载体。如上所述，这些组合物中以通式(I)表示的脒衍生物一般是微量组分，其重量往往在0.05至10％之间，其余为注射载体等。每天平均剂量取决于许多因素，如疾病的严重性和患者的情况(年龄、性别、体重)。通式(I)化合物的每日剂量通常不是固定的，由1毫克或几毫克直至高达1500毫克，可选择分成多次给药。由于长时间服食本发明化合物毒性低，所以可以给予较高剂量。
上述口服或注射组合物的成份仅仅是作代表性说明。其它一些物质或加工技术等可参考本文的引用文献(宾夕法尼亚洲的Mack出版社，Remingto’sPharmaceutical Seiences Handbook第八部分，第18版，1990)。
给予本发明的化合物可以缓释形式或经由缓释药物输送系统。代表性缓释物质的描述也可参考上述引用文献Remingto’s Pharmaceutical SeiencesHandbook。
结合下列实施例对本发明加以详细说明，但这并不构成对本发明的范围的限制。
缩写THF四氢呋喃；DMF二甲基甲酰胺；AcOEt乙酸乙酯。
具体实施例方式
实验程序实施例1按照Granik，Russ.Chem.Rev.，52，377-393(1983)描述的程序，可制备以下未取代的脒1a(R，S)(2-(4-异丁基苯基)丙脒盐酸盐2-(4-异丁基苯基)丙腈按照WO 00/24710所述的方法，制备了4-异丁基-α-甲基苯基乙酰胺(2g；9.7mmol)，将它溶解在甲苯/三氯甲烷溶液(21，30mL)中。加入20％在甲苯中的光气(15.5mL，30mmol)，得到的混合物在惰性气氛下搅拌12小时，直至起始试剂完全消失。减压蒸发溶剂后，将粗产物溶解在乙酸乙酯(20mL)中，有机相用饱和碳酸氢钠溶液(2×20mL)以及用饱和氯化钠溶液(2×15mL)洗涤，硫酸钠干燥，真空蒸发，得到2-(4-异丁基苯基)丙腈，为无色油(1.45g；7.76mmol)。得率为80％。
1H-NMR(CDCl3)δ7.42(d，2H，J＝7Hz)；7.28(d，2H，J＝7Hz)；4.05(q，1H，J＝8Hz)；2.65(d，2H，J＝8Hz)；1.95(m，1H)；1.80(d，3H，J＝8Hz)；1.05(d，6H，J＝8Hz)。
0-5℃下，冷却2-(4-异丁基苯基)丙腈(2g；1.07mmol)在二乙醚/甲醇混合物(1∶1，20mL)中的溶液，向该溶液鼓入氯化氢气体，保持1小时。然后，将温度升至室温，使混合物搅拌过夜。减压蒸发溶剂后，把粗产物溶解在甲醇(10mL)中，在0-5℃下冷却。鼓入氨气1小时，使得到的混合物室温搅拌，过夜。减压蒸发溶剂后，把粗产物悬于二乙醚(15mL)中，室温搅拌2小时。真空过滤分离出2-(4-异丁基苯基)丙脒盐酸盐，为白色固体(0.193g；0.80mmol)。得率为75％。
1H-NMR(DMSO-d6)δ8.80-8.50(bs，NH3+Cl-)；7.40(d，2H，J＝7Hz)；7.15(d，2H，J＝7Hz)；3.98(q，1H，J＝8Hz)；2.42(d，2H，J＝8Hz)；1.90(m，1H)；1.57(d，3H，J＝8Hz)；0.88(d，6H，J＝8Hz)。
按照上述方法，以合适的羧酸制备了下列化合物1b(R，S)2-(3-苯甲酰基苯基)丙脒盐酸盐按照上述程序，由2-(3′-苯甲酰基苯基)丙腈和相应的α-甲基苯基乙酰胺制备了(R，S)2-(3-苯甲酰基苯基)丙脒盐酸盐。通用制备方法可参见WO01/58852。得率为70％，熔点110-113℃。
1H-NMR(DMSO-d6)δ7.86(s，1H)；7.80-7.50(m，8H+NH2++NH2)；4.13(q，1H，J＝7Hz)；1.60(d，3H，J＝7Hz)。
1c(R，S)-2-[(3-氟-4-苯基)苯基]丙脒盐酸盐按照上述程序，由2-(3-氟-4-苯基)丙腈和相应的α-甲基苯基乙酰胺制备了(R，S)-2-[(3-氟-4-苯基)苯基]丙脒盐酸盐。通用制备方法可参见WO01/58852。得率为53％，熔点143-145℃。
1H-NMR(DMSO-d6)δ9.18(bs，NH2+Cl-)；8.85(bs，NH2)；7.67-7.30(m，8H)；4.15(q，1H，J＝7Hz)；1.62(d，3H，J＝7Hz)。
1d(R，S)2-(4-三氟甲烷磺酰氧基苯基)丙脒盐酸盐按照上述程序，由2-(4′-三氟甲烷磺酰氧基苯基)丙腈和相应的α-甲基苯基乙酰胺制备了(R，S)2-(4-三氟甲烷磺酰氧基苯基)丙脒盐酸盐。得率为68％。
1H-NMR(DMSO-d6)δ7.47(d，2H，J＝8Hz)；7.25(d，2H，J＝8Hz)；6.55(bs，NH2+NH2+Cl-)；3.92(q，1H，J＝7Hz)；1.56(d，3H，J＝7Hz)。
1e(R，S)2-(5-苯甲酰基-2-噻吩)丙脒盐酸盐按照上述程序，由2-(5-苯甲酰基-2-噻吩)丙腈和相应的丙酰胺制备了(R，S)2-(5-苯甲酰基-2-噻吩)丙脒盐酸盐。得率为60％。
1H-NMR(DMSO-d6)δ7.9(d，2H，J＝8Hz)；7.7-7.4(m，4H)；7.0(d，1H，J＝8Hz)；6.55(bs，NH2+NH2+Cl-)；3.9(q，1H，J＝7Hz)；1.56(d，3H，J＝7Hz)。
(R，S)(2-(4-异丁基苯基)丙脒的光学拆分对(R，S)(2-(4-异丁基苯基)丙脒盐酸盐进行光学拆分，得到(2-(4-异丁基苯基)丙脒的(+)和(-)单对映体。用强碱性AMBERLITE IRA-910树脂处理盐酸盐得到了游离碱。
用(L)和(D)酒石酸盐在甲醇中处理(R，S)(2-(4-异丁基苯基)丙脒，制备了相应的(L)和(D)酒石酸盐。然后，将酒石酸盐在异丙醇(或丙酮)溶液中结晶析出，得到了光学纯(+)和(-)(2-(4-异丁基苯基)丙脒异构体。
用强碱性AMBERLITE IRA-910树脂处理酒石酸盐得到了游离碱。
1f(+)(2-(4-异丁基苯基)丙脒[α]D＝+28.1(c＝0.5，甲醇)1g(-)-(4-异丁基苯基)丙脒[α]D＝-28.0(c＝0.5，甲醇)。
实施例22a(R，S)2-(4-异丁基苯基)-N-[3-(N-哌啶子基)丙基]丙脒二盐酸盐0-5℃下，冷却2-(4-异丁基苯基)丙腈(0.15g；0.80mmol)在二乙醚/甲醇混合物(1∶1，10mL)中的溶液，向该溶液鼓入氯化氢气体，保持1小时。然后，将温度升至室温，使混合物搅拌过夜。减压蒸发溶剂后，把粗产物溶解在甲醇(10mL)中，在0-5℃下冷却。滴入3-哌啶子基丙胺(0.15g；0.96mmol)在甲醇(5mL)中的溶液，得到的混合物室温搅拌，过夜。减压蒸发溶剂后，把粗油悬于2N盐酸(溶液pH＝2)中，产物用二氯甲烷(3×15mL)萃取。有机萃取液合并，用饱和氯化钠溶液(2×15mL)洗涤，硫酸钠干燥，真空蒸发，得到2-(4′-异丁基苯基)N-[3-(N-哌啶子基)丙基]丙脒二盐酸盐，为玻璃状固体(0.193g；0.48mmol)。得率为60％。
1H-NMR(CDCl3)δ10.88(bs，NH+Cl-)；10.22(bs，NH+Cl-)；9.82(bs，NH+Cl-)；7.64(bs，NH)；7.41(d，2H，J＝8Hz)；7.15(d，2H，J＝8Hz)；4.39(q，1H，J＝8Hz)；3.78(m，2H)；3.45(m，2H)；3.10(m，2H)；2.75(m，2H)；2.46(d，2H，J＝8Hz)；2.32-2.05(m，3H)；2.00-1.68(m，9H)；0.90(d，6H，J＝8Hz)。
按照上述方法，以合适的胺为游离碱制备了下列化合物2b(R，S)2-(4-异丁基苯基)-N-甲基-丙脒盐酸盐按照实施例1所述的程序，由2-(4-异丁基苯基)丙腈和相应的α-甲基苯基乙酰胺制备了(R，S)2-(4-异丁基苯基)-N-甲基-丙脒盐酸盐。得率为75％。
1H-NMR(DMSO-d6)δ10.15(bs，NH+Cl-)；7.12(m，4H)；4.25(bs，NH2)；3.71(m，1H)；2.90(s，3H)；2.48(d，2H，J＝8Hz)；1.91(m，1H)；1.55(d，3H，J＝8Hz)；0.93(d，6H，J＝8Hz)。
2c(R，S)2-(3-苯甲酰基苯基)-N-[3-(N，N-二甲基氨基)丙基]丙脒盐酸盐按照实施例1所述的程序，由2-(3-苯甲酰基苯基)丙腈和相应的α-甲基苯基乙酰胺制备了(R，S)2-(3-苯甲酰基苯基)N-[3-(N，N-二甲基氨基)丙基]丙脒盐酸盐。得率为48％。
1H-NMR(DMSO-d6)δ7.81(d，2H，J＝8Hz)；7.74(s，1H)；7.67(d，1H，J＝8Hz)；7.59(d，1H，J＝8Hz)；7.52-7.27(m，4H+NH)；3.65(q，1H，J＝7Hz)；3.25(t，2H，J＝6Hz)；2.27(t，2H，J＝6Hz)；2.09(s，6H)；1.66(m，2H)；1.46(d，6H，J＝7Hz)。
实施例3(R，S)2-(4-异丁基苯基)丙脒乙酸酯制备2-(4-异丁基苯基)丙脒的另一个程序是Judkins B.D.、Allen D.G.Cook T.A.、Evans B.和Sardharwala T.E.，Synth在Comm.，26(23)，4315-4367(1996)中描述的方法，本实施例参照这种制备方法。
(R，S)2-(4-异丁基苯基)-N-羟基-丙脒室温下使羟胺盐酸盐(0.38g，5.32mmol)和叔丁醇钠(0.5g，5.28mmol)与乙醇(10mL)的混合物搅拌15分钟；滤出沉淀物，将母液滴入2-(4-异丁基苯基)丙腈(0.11g，0.49mmol)在无水乙醇(3mL)中的溶液。得到的溶液回流18小时。室温冷却后，减至蒸发溶剂，用三氯甲烷(25mL)稀释粗残留物，先后用5％柠檬酸溶液(2×15mL)和饱和氯化钠溶液(2×15mL)洗涤，硫酸钠干燥，真空蒸发，得到2-(4-异丁基苯基)N-羟基-丙脒，在正己烷中结晶析出白色固体(0.075g，0.34mmol)。得率为70％。熔点为75-78℃。
1H-NMR(CDCl3)δ7.25(d，2H，J＝7Hz)；7.12(d，2H，J＝7Hz)；5.030(bs，1H，NH)；4.35(bs，2H，NH-OH)；；3.58(q，1H，J＝8Hz)；2.48(d，2H，J＝8Hz)；1.87(m，1H)；1.50(d，3H，J＝8Hz)；0.92(d，6H，J＝8Hz)。
将2-(4-异丁基苯基)N-羟基-丙脒(0.097g，0.44mmol)溶解在乙酸(3mL)中，室温下用乙酐(0.06mL，0.66mmol)处理。加入10％钯/活性炭(0.03g)，向烧瓶鼓泡通入氢气，直至起始试剂完全消失。加入甲醇(5mL)，以硅藻土饼滤出催化剂，减压蒸发溶剂，得到油状残留物。粗残留物在正己烷中结晶析出，得到2-(4-异丁基苯基)丙脒乙酸酯，为白色固体(0.106g，0.4mmol)。得率为91％。熔点＞220℃。
1H-NMR(DMSO-d6)δ8.70-8.50(bs，NH3++NH)；7.42(d，2H，J＝7Hz)；7.23(d，2H，J＝7Hz)；3.85(q，1H，J＝8Hz)；2.52(d，2H，J＝8Hz)；1.97(m，1H)；1.75(s，3H)；1.60(d，3H，J＝8Hz)；0.95(d，6H，J＝8Hz)。
实施例4Weintraub L.，Oles S.R.和Kalish N在J.Org.Chem.，33(4)，1679-1681(1968)中描述了制备2-(4-异丁基苯基)-N-烷基-丙脒的另一种方法。
4a(R，S)2-(4-异丁基苯基)-N-[3-(N，N-二甲基氨基)丙基]丙脒按照WO 00/24710描述的方法，制备了4-异丁基-α-甲基苯基乙酰胺(1g；4.9mmol)，在室温和惰性气氛下，将它溶解在干二氯甲烷(10mL)中，并用四氟硼酸三乙基氧(1.0M，溶剂为二氯甲烷，5mL，5mmol)处理。得到的溶液室温搅拌，过夜。减压蒸发溶剂后，在室温和惰性气氛下，粗中间产物用二乙醚(5mL)稀释，并用3-(二甲基氨基)丙胺(0.61mL，4.9mmol)处理。得到的溶液回流2小时。室温冷却后，减压蒸发溶剂，粗产物经快速分离色谱法纯化(洗脱液CHCl3/环己烷/CH3OH/NH4OH，60∶24∶17∶2)。得到纯的2-(4-异丁基苯基)-N-[3-(N，N-二甲基氨基)丙基]丙脒，为浅黄色油(0.82g，2.84mmol)。得率为58％。
1H-NMR(DMSO-d6)δ7.39(d，2H，J＝8Hz)；7.14(d，2H，J＝8Hz)；4.15(q，1H，J＝7Hz)；3.25(t，2H，J＝7Hz)；2.42(d，2H，J＝7Hz)；2.16(t，2H，J＝7Hz)；2.06(s，3H)；1.80(m，1H)；1.65(m，2H)；1.53(d，3H，J＝7Hz)；0.84(d，6H，J＝7Hz)。
按照上述方法，以N-苄胺制备了下列化合物4b(R，S)2-(4-异丁基苯基)-N-苄基丙脒得率为65％。
1H-NMR(CDCl3)δ7.35-7.18(m，5H)；7.15(d，2H，J＝8Hz)；7.0.5(d，2H，J＝8Hz)；5.05(bs，2H，NH)；4.30(s，2H)；3.65(q，1H，J＝7Hz)；2.45(d，2H，J＝7Hz)；1.91(m，1H)；1.55(d，3H，J＝7Hz)；0.95(d，6H，J＝7Hz)。
实施例5(R，S)3-[-4-异丁基苯基)乙基]-5，6-二氢-2H-1，2，4-二嗪将(R，S)2-(4-异丁基苯基)-N-羟基-丙脒(50mg，0.23mmol，制备方法见实施例3)室温溶解在10ml氯仿中。室温下向该溶液加入过量碳酸钠和0.28mmol1，2-二氯乙烷(28mg；过量20％)。悬浮液回流5小时。冷却后，滤出无机盐，溶液用盐水(2x 10mL)洗涤。减压除去溶剂，经硅胶柱色谱法(正己烷/乙酸乙酯，9∶1)纯化标题化合物，得到29mg浅黄色油(得率为51％)。
1H-NMR(CDCl3)δ7.35(d，2H，J＝7Hz)；7.15(d，2H，J＝7Hz)；3.70(q，1H，J＝8Hz)；3.6-3.4(m，4h)；2.42(d，2H，J＝8Hz)；2，3-2.1(m，2H)；1.90(m，1H)；1.57(d，3H，J＝8Hz)；0.88(d，6H，J＝8Hz)。
实施例6(R，S)2-[1-(4-异丁基苯基)乙基]-4，5-二氢-2H-1，3-咪唑)在室温和惰性气氛下，将(R，S)-2-[(4-异丁基)苯基]-丙脒盐酸盐(100mg，0.49mmol，制备方法见实施例la)悬于25mL干氯仿中，然后用过量很多(10-50当量)的叔丁醇钾处理。向该悬液加入0.59mmol 1，2-二氯甲烷(58mg；过量20％)。悬浮液回流24小时。室温下滤出悬浮固体，溶液用5％pH 5磷酸盐缓冲液和盐水洗涤。硫酸钠干燥溶液，再蒸发；残留的油经硅胶柱色谱法纯化，得到纯的标题化合物(73mg，得率为651％)。
1H-NMR(CDCl3)δ7.40(d，2H，J＝7Hz)；7.15(d，2H，J＝7Hz)；3.75(q，1H，J＝8Hz)；3.5-3.6(m，4H)；2.42(d，2H，J＝8Hz)；1.90(m，IH)；1.57(d，3H，J＝8Hz)；0.88(d，6H，J＝8Hz)。
表1列出实施例1-6的化合物的化学结构。
表1
权利要求
1.通式(I)所示的脒， 及其药学上可接受的盐，式中，Ar是未取代或由一或多个基团取代的苯基，所述取代基独立地选自卤素、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基、羟基、C1-C4-酰氧基、苯氧基、氰基、硝基、氨基、C1-C4-酰基氨基、卤代-C1-C3-烷基、卤代-C1-C3-烷氧基、苯甲酰基，或者Ar是取代或未取代的5-6元杂芳环，所述杂芳环选自吡啶、吡咯、噻吩、呋喃、吲哚；R选自-H、C1-C5-烷基、苯基、C1-C5苯基烷基、C1-C5-环烷基、C1-C5-链烯基、C1-C5-烷氧基；-以通式-(CH2)n-NRaRb表示的残基，其中n是0至5的整数，Ra和Rb可以相同或不同，各自是C1-C6-烷基、C1-C6-链烯基，或者Ra和Rb与它们所连接的氮原子一起形成一个通式(II)所示的3-7元杂环 其中，W代表单键、O、S、N-Rc，Rc是H、C1-C6-烷基或C1-C6-烷基苯基；R′是H、CH3、CH2CH3；R和R′或者可以形成一个通式(III)所示的5-7元杂环 其中，X代表残基-O(CH2)n，-O(CH2)n中的n是1至3的整数，或者X代表残基-(CH2)n，-(CH2)n中的n是2至4的整数，或者X代表乙烯基-CH＝CH-。
2.如权利要求1所述的化合物，其特征在于Ar选自3′-苯甲酰基苯基、3′-(4-氯-苯甲酰基)-苯基、3′-(4-甲基-苯甲酰基)-苯基、3′-乙酰基-苯基、3′-丙酰基-苯基、3′-异丁酰基-苯基、4′-三氟甲烷磺酰氧基-苯基、4′-苯磺酰氧基-苯基、4′-三氟甲烷磺酰氨基-苯基、4′-苯磺酰氨基-苯基、4′-苯磺酰甲基-苯基、4′-乙酸基苯基、4′-丙酰氧基-苯基、4′-苯甲酰氧基-苯基、4′-乙酰基氨基-苯基、4′-丙酰基氨基-苯基、4′-苯甲酰基氨基-苯基。
3.如权利要求1或2所述的化合物，其特征在于R选自-氢；-通式-(CH2)n-NRaRb所示的残基，其中n是2至3的整数，基团NRaRb选自N，N-二甲胺或1-哌啶基，而R′是H；或者R和R′形成通式(III)所示的杂环，其中X代表残基-O(CH2)n-，式中n是1或2的整数，或者X代表残基-(CH2)2。
4.如权利要求1至3所述的化合物，选自以下化合物(R，S)(2-(4-异丁基苯基)丙脒盐酸盐(+)(2-(4-异丁基苯基)丙脒盐酸盐(-)(2-(4-异丁基苯基)丙脒盐酸盐(R，S)2-(3-苯甲酰基苯基)丙脒盐酸盐(R，S)24(3-氟-4-苯基)苯基]丙脒盐酸盐(R，S)2-(4-三氟甲烷磺酰氧基苯基)丙脒盐酸盐(R，S)2-(5-苯甲酰基-2-噻吩)丙脒盐酸盐(R，S)2-(4-异丁基苯基)-N-[3″-(N′-哌啶子基)丙基]丙脒二盐酸盐(R，S)2-(4-异丁基苯基)-N-甲基-丙脒盐酸盐(R，S)2-(3-苯甲酰基苯基)-N-[3-(N，N-二甲基氨基)丙基]丙脒盐酸盐(R，S)2-(4-异丁基苯基)丙脒乙酸酯(R，S)2-(4-异丁基苯基)-N-[3-(N，N-二甲基氨基)丙基]丙脒(R，S)2-(4-异丁基苯基)-N-苄基丙脒(R，S)3-[1-(4-异丁基苯基)乙基]-5，6-二氢-2H-1，2，4-二嗪(R，S)2-[1-(4-异丁基苯基)乙基]-4，5-二氢-2H-1，3-咪唑。
5.如权利要求1所述的通式(I)所示的化合物的制备方法，其特征在于所述方法包括使通式(IV)所示的腈衍生物 其中Ar如权利要求1所定义，与通式NHR所述的胺反应，其中R如权利要求1所定义。
6.如权利要求1所述的通式(I)所示的化合物的制备方法，其中通式(I)的R和R’基团形成通式(III)所示的杂环，其特征在于所述方法包括使R’是H，R是H或OH的通式(I)所示的脒与通式L-K-L’所示的试剂在碱存在下反应，其中L和L’是离去基团，当R和R’都是H时，K代表残基-(CH2)n-，式中n是2至4的整数；当R是OH，R’是H时，K代表残基-(CH2)n-，式中n是1至3的整数。
7.如权利要求1至4中任一项所述的化合物，它们用作药物。
8.如权利要求7所述的化合物，它们用作IL-8诱导的人PMN趋化性的抑制剂。
9.如权利要求1至4中任一项所述的化合物在制备用来治疗牛皮癬、溃疡性结肠炎、黑素瘤、慢性阻塞性肺病、大疱性类天疱疮、类风湿关节炎、特发性纤维化、肾小球性肾炎以及用来预防和治疗由局部缺血和再灌注引起的损伤的药物中的用途。
10.药物组合物，其特征在于所述药物组合物含有如权利要求1至4所述的化合物及其合适的载体。
全文摘要
本发明描述了通式(I)所示的脒及其衍生物。本发明还描述了它们的制备方法以及含有它们的药物组合物。本发明的脒可用来抑制由IL－8诱导的嗜中性白细胞趋化性。本发明的化合物可用来治疗牛皮癣、溃疡性结肠炎、黑素瘤、慢性阻塞性肺部疾病(COPD)、大疱性类天疱疮、类风湿性关节炎、特发性纤维化、肾小球性肾炎，以及用于预防和治疗由缺血和再灌注引起的损伤。
文档编号C07D233/10GK1882530SQ200480033491
公开日2006年12月20日 申请日期2004年9月16日 优先权日2003年9月25日
发明者M·阿莱格蒂, M·C·切斯塔, G·纳诺, R·贝尔蒂尼, C·比萨里, F·科洛塔 申请人:冬姆佩制药股份公司