一种刺梨酸的制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种刺梨酸的制备方法。方法如下：1）取干燥刺梨果粉碎，加入5-10倍量70%-99%乙醇溶液，回流提取2-3次，提取液缩至无醇加入大孔树脂中吸附，乙醇溶液梯度洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，加入等体积石油醚充分搅拌，收集石油醚层过滤，得粗提物；2）所得粗提物用5-10倍量70%-80%乙醇溶解，加入活性炭脱色，滤液浓缩至醇浓度30%-50%置结晶，结晶物再用90%-95%乙醇溶液加热溶解结晶2-3次，干燥即得。采用本发明生产刺梨酸，工艺操作简便，所得产品纯度高，易于实现工业化生产。
【专利说明】一种刺梨酸的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于生物技术化学领域，特别涉及一种刺梨酸的制备方法。
【背景技术】
[0002]刺梨为蔷薇科植物刺梨的果实，别名茨梨，刺梨果实营养丰富，誉为“营养库”，含维生素(还含β -谷甾醇(β -sitosterol),委陵菜酸(tomentic acid),野雅春酸
(euscaphic acid),原儿茶酸(procatechuic acid),以硬脂酸及二---烧酸为主的脂肪
酸，刺梨酸(roxburic acid)又叫2 β , 3a, 7 β , 19a-四羟基-12-乌苏烯_28_羧酸(2 β ,3a, 7 β , 19a-tetrahydroxyursolu-12-ene-28-car-boxylic acid)等成分，具有降血压、抗氧化及抗肿瘤等作用。
[0003]刺梨酸为五环三萜 类化合物，分子是C30H4806，分子量504.71，研究发现具有抗肿瘤作用。
[0004]通过文献检索，现有刺梨酸制备方法是采用有硅胶分离方法。由于操作复杂，制备量较小，样品得率低，很难实现工业化生产。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是解决现有技术的不足和缺陷，提供一种操作简便的刺梨酸的制备方法。
[0006]为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案:一种刺梨酸的制备方法，其特征在于以下步骤:
1)取干燥刺梨果粉碎，加入5-10倍量70%-99%乙醇溶液，回流提取2-3次，提取液缩至无醇加入大孔树脂中吸附，乙醇溶液梯度洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，加入等体积石油醚充分搅拌，收集石油醚层过滤，得粗提物；
2)所得粗提物用5-10倍量70%-80%乙醇溶解，加入活性炭脱色，滤液浓缩至醇浓度30%-50%置结晶，结晶物再用90%-95%乙醇溶液加热溶解结晶2-3次，干燥即得。
[0007]所述的大孔树脂可选AB-8、D101、HZ816、HPD100中的一种。
[0008]所述的乙醇溶液梯度洗脱为先用5-10倍柱体积20%_50%乙醇洗脱，再用5_10倍柱体积70%-90%乙醇溶液洗脱。
[0009]采用本法生产刺梨酸，工艺简便易操作，产品纯度高，易于实现工业化制备。
[0010]下面将结合【具体实施方式】进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0011]实施例1:
取干燥刺梨果5kg粉碎，加10倍量90%乙醇溶液，回流提取2次，提取液缩至无醇，加适量水稀释，加入AB-8大孔树脂中吸附，先用7倍柱体积40%乙醇洗脱，再用8倍柱体积80%こ醇溶液洗脱，收集洗脱液减压浓缩至400ml，加入等体积石油醚充分搅拌，收集石油醚层过滤，得粗提物。所得粗提物用10倍量70%こ醇溶解，加入20g活性炭脱色，滤除活性炭，滤液浓缩至醇浓度40%置结晶，结晶物再用90%こ醇溶液加热溶解结晶3次，干燥得刺梨酸
4.2g，经 HPLC 检测，含量 98.2%。[0012]实施例2:
取干燥刺梨果5kg粉碎，加5倍量70%こ醇溶液，回流提取3次，提取液缩至无醇，加适量水稀释，加入D101大孔树脂中吸附，先用5倍柱体积30%こ醇洗脱，再用10倍柱体积90%こ醇溶液洗脱，收集洗脱液减压浓缩至500ml，加入等体积石油醚充分搅拌，收集石油醚层过滤，得粗提物。所得粗提物用7倍量80%こ醇溶解，加入25g活性炭脱色，滤除活性炭，滤液浓缩至醇浓度30%置结晶，结晶物再用95%こ醇溶液加热溶解结晶3次，干燥得刺梨酸
3.5g，经 HPLC 检测，含量 95.8%。
[0013]实施例3:
取干燥刺梨果5kg粉碎，加6倍量75%こ醇溶液，回流提取3次，提取液缩至无醇，加适量水稀释，加入HZ816大孔树脂中吸附，先用7倍柱体积30%こ醇洗脱，再用8倍柱体积80%こ醇溶液洗脱，收集洗脱液减压浓缩至300ml，加入等体积石油醚充分搅拌，收集石油醚层过滤，得粗提物。所得粗提物用7倍量80%こ醇溶解，加入20g活性炭脱色，滤除活性炭，滤液浓缩至醇浓度40%置结晶，结晶物再用90%こ醇溶液加热溶解结晶3次，干燥得刺梨酸
3.8g，经 HPLC 检测，含量 97.8%。
[0014]实施例4:
取干燥刺梨果5kg粉碎，加7倍量75%こ醇溶液，回流提取3次，提取液缩至无醇，加适量水稀释，加入HPD100大孔树脂中吸附，先用6倍柱体积40%こ醇洗脱，再用5倍柱体积90%こ醇溶液洗脱，收集洗脱液减压浓缩至200ml，加入等体积石油醚充分搅拌，收集石油醚层过滤，得粗提物。所得粗提物用10倍量80%こ醇溶解，加入20g活性炭脱色，滤除活性炭，滤液浓缩至醇浓度30%置结晶，结晶物再用95%こ醇溶液加热溶解结晶2次，干燥得刺梨酸
4.5g，经 HPLC 检测，含量 96.3%。
【权利要求】
1.一种刺梨酸的制备方法，其特征在于以下步骤: 1)取干燥刺梨果粉碎，加入5-10倍量70%-99%こ醇溶液，回流提取2-3次，提取液缩至无醇加入大孔树脂中吸附，こ醇溶液梯度洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，加入等体积石油醚充分搅拌，收集石油醚层过滤，得粗提物； 2)所得粗提物用5-10倍量70%-80%こ醇溶解，加入活性炭脱色，滤液浓缩至醇浓度30%-50%置结晶，结晶物再用90%-95%こ醇溶液加热溶解结晶2-3次，干燥即得。
2.根据权利要求1所述的刺梨酸的制备方法，其特征在于步骤1)中所述的大孔树脂可选 AB-8、D101、HZ816、HPD100 中的ー种。
3.根据权利要求 1所述的刺梨酸的制备方法，其特征在于步骤1)中所述的こ醇溶液梯度洗脱为先用5-10倍柱体积20%-50%こ醇洗脱，再用5-10倍柱体积70%_90%こ醇溶液洗脱。
【文档编号】C07J63/00GK103450317SQ201310360309
【公开日】2013年12月18日 申请日期:2013年8月19日 优先权日:2013年8月19日
【发明者】张金芳, 万冬梅 申请人:南京标科生物科技有限公司