本发明公开了一种天然脂肪酸合酶抑制剂的制备方法，属于脂肪酸合酶抑制剂技术领域。
背景技术：
肥胖是体内脂肪层过厚，主要指甘油三酯积聚过多而导致的一种状态。引起肥胖的原因有很多，主要是生活模式、饮食结构和基因遗传。脂肪酸合酶是生物体内催化乙酰辅酶A和丙二酰辅酶A合成内源性长链脂肪酸的关键酶。脂肪酸合酶主要在肝、肾、脑、肺、乳腺及脂肪组织中表达，主要是将碳水化合物合成脂肪酸并以甘油三酯的形式储存。脂肪酸合酶在正常生理状态下主要受饮食和激素的调节，其中碳水化合物的摄取、甲状腺、胰岛素、糖皮质激素上调脂肪酸合酶和促进脂肪酸合成，不饱和脂肪酸、cAMP、胰高血糖素下调脂肪酸合酶和抑制脂肪酸合成。脂肪酸合酶抑制剂通过抑制脂肪酸合酶的活性来抑制脂肪酸的合成，从而起到降低体重的作用。
脂肪酸是脂肪族类酸，在能量运输和储存、细胞结构、提供激素合成的中间物等多个方面发挥着关键作用。脂肪酸合酶是内源性脂肪形成的关键酶，并且在调节脂质的关键中间体和碳水化合物细胞代谢中起重要作用。脂肪酸合酶在高代谢活性的组织(例如，肝、脂肪质组织和脑)中高度表达，并且有充分的理由相信，脂肪酸合酶抑制剂会在周围组织中产生有利的代谢效应。
技术实现要素：
本发明主要解决的技术问题：针对目前脂肪酸合酶抑制剂合成困难、活性低，而且从天然物质中提取率低，物质不稳定的问题，提供了一种天然脂肪酸合酶抑制剂的制备方法，本发明先利用矮砂仁和鸡爪槭叶制备得固体发酵培养基，灭菌后分别接种枯草芽孢杆菌种子液、酿酒酵母种子液和米曲霉种子液进行发酵培养，将发酵物再用乙醇多次浸提，将浸提液浓缩并冷冻干燥，得干燥物1，再取成熟的番茄进行打浆，离心除水后放入液氮中处理，处理后冷冻干燥得冻干番茄粉，将其用乙酸乙酯混合后超声处理，抽滤得滤液，减压浓缩后冷冻干燥得干燥物2，并与干燥物1混合后加入缓冲液混合，冷冻干燥后放入烘箱中，反应后取出，即可得到天然脂肪酸合酶抑制剂，本发明脂肪酸合酶抑制剂是从天然植物中提取和化学合成得到，安全环保，成本低廉，可以有效抑制脂肪酸合酶的活性，从而使生物细胞内合成脂肪量减少，而且可以提高人体免疫力。
为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：
（1）分别称取200～300g新鲜的矮砂仁和300～500g新鲜的鸡爪槭叶，分别切碎后混合，并加入60～80g小麦淀粉、5～10g葡萄糖和100～200g亚麻饼粕，将混合物放入紫外灯下灭菌处理10～15min，得固体发酵培养基；
（2）在上述灭菌后固体发酵培养基上分别按接种量接种5～10%枯草芽孢杆菌种子液、3～5%酿酒酵母种子液和4～6%米曲霉种子液，接种后在30～40℃的温度下发酵10～20h，得发酵物；
（3）将上述发酵物按质量比1:10与质量分数80%乙醇溶液混合，混合后加热回流浸提2～4h，浸提后离心分离得上清液，并将沉淀物重复浸提2～3次，合并上清液后减压浓缩至原体积15～20%，得浓缩液，并冷冻干燥，干燥后粉碎、过100～120目筛，得干燥物1，备用；
（4）称取400～500g成熟的红番茄，表面洗净、去蒂后放入料理机中打浆，将得到的番茄浆在4000～5000r/min转速下离心分离25～35min，得沉淀物，放入液氮冷冻装置中，在-40～-30℃温度下冷冻处理30～40min，冷冻后粉碎，过60～80目筛，得冻干番茄粉；
（5）将上述冻干番茄粉按质量比1:30加入乙酸乙酯混合，混合后在温度为60～70℃和超声功率为180～250W功率下超声处理30～50min，超声后冷却至室温，抽滤得滤液，将滤液减压浓缩至原体积5～10%后得浓缩液，并冷冻干燥，得干燥物2；
（6）将上述干燥物2和步骤（3）备用的干燥物1按质量比3:1混合，将混合物按质量比1:10与浓度为0.2mol/LpH为7.0磷酸盐缓冲液混合，搅拌混合1～2h后冷冻干燥5～7h，干燥后研磨、过100～120目筛，将过筛后的物质放入烧杯中，并密封，将烧杯放入烘箱中，在70～90℃温度下放置10～12h，冷却至室温后取出，即可得到天然脂肪酸合酶抑制剂。
本发明的应用方法是：本发明制备得到的天然脂肪酸酶抑制剂可以应用在减肥药物、保健食品和普通食品中，将天然脂肪酸酶抑制剂添加在甜品中，添加量为甜品质量的5～8%，食用4～6个月后，可以有效抑制脂肪的形成，体重减少5～10%。
本发明的有益效果是：
（1）本发明脂肪酸合酶抑制剂是从天然植物中提取和化学合成得到，安全环保，成本低廉；
（2）本发明制备得到的脂肪酸合酶抑制剂可以有效抑制脂肪酸合酶的活性，从而使生物细胞内合成脂肪量减少，而且可以提高人体免疫力。
具体实施方式
分别称取200～300g新鲜的矮砂仁和300～500g新鲜的鸡爪槭叶，分别切碎后混合，并加入60～80g小麦淀粉、5～10g葡萄糖和100～200g亚麻饼粕，将混合物放入紫外灯下灭菌处理10～15min，得固体发酵培养基；在上述灭菌后固体发酵培养基上分别按接种量接种5～10%枯草芽孢杆菌种子液、3～5%酿酒酵母种子液和4～6%米曲霉种子液，接种后在30～40℃的温度下发酵10～20h，得发酵物；将上述发酵物按质量比1:10与质量分数80%乙醇溶液混合，混合后加热回流浸提2～4h，浸提后离心分离得上清液，并将沉淀物重复浸提2～3次，合并上清液后减压浓缩至原体积15～20%，得浓缩液，并冷冻干燥，干燥后粉碎、过100～120目筛，得干燥物1，备用；称取400～500g成熟的红番茄，表面洗净、去蒂后放入料理机中打浆，将得到的番茄浆在4000～5000r/min转速下离心分离25～35min，得沉淀物，放入液氮冷冻装置中，在-40～-30℃温度下冷冻处理30～40min，冷冻后粉碎，过60～80目筛，得冻干番茄粉；将上述冻干番茄粉按质量比1:30加入乙酸乙酯混合，混合后在温度为60～70℃和超声功率为180～250W功率下超声处理30～50min，超声后冷却至室温，抽滤得滤液，将滤液减压浓缩至原体积5～10%后得浓缩液，并冷冻干燥，得干燥物2；将上述干燥物2和备用的干燥物1按质量比3:1混合，将混合物按质量比1:10与浓度为0.2mol/LpH为7.0磷酸盐缓冲液混合，搅拌混合1～2h后冷冻干燥5～7h，干燥后研磨、过100～120目筛，将过筛后的物质放入烧杯中，并密封，将烧杯放入烘箱中，在70～90℃温度下放置10～12h，冷却至室温后取出，即可得到天然脂肪酸合酶抑制剂。
实例1
分别称取200g新鲜的矮砂仁和300g新鲜的鸡爪槭叶，分别切碎后混合，并加入60g小麦淀粉、5g葡萄糖和100g亚麻饼粕，将混合物放入紫外灯下灭菌处理10min，得固体发酵培养基；在上述灭菌后固体发酵培养基上分别按接种量接种5%枯草芽孢杆菌种子液、3%酿酒酵母种子液和4%米曲霉种子液，接种后在30℃的温度下发酵10h，得发酵物；将上述发酵物按质量比1:10与质量分数80%乙醇溶液混合，混合后加热回流浸提2h，浸提后离心分离得上清液，并将沉淀物重复浸提2次，合并上清液后减压浓缩至原体积15%，得浓缩液，并冷冻干燥，干燥后粉碎、过100目筛，得干燥物1，备用；称取400g成熟的红番茄，表面洗净、去蒂后放入料理机中打浆，将得到的番茄浆在4000r/min转速下离心分离25min，得沉淀物，放入液氮冷冻装置中，在-40℃温度下冷冻处理30min，冷冻后粉碎，过60目筛，得冻干番茄粉；将上述冻干番茄粉按质量比1:30加入乙酸乙酯混合，混合后在温度为60℃和超声功率为180W功率下超声处理30min，超声后冷却至室温，抽滤得滤液，将滤液减压浓缩至原体积5%后得浓缩液，并冷冻干燥，得干燥物2；将上述干燥物2和备用的干燥物1按质量比3:1混合，将混合物按质量比1:10与浓度为0.2mol/LpH为7.0磷酸盐缓冲液混合，搅拌混合1h后冷冻干燥5h，干燥后研磨、过100目筛，将过筛后的物质放入烧杯中，并密封，将烧杯放入烘箱中，在70℃温度下放置10h，冷却至室温后取出，即可得到天然脂肪酸合酶抑制剂。
本发明制备得到的天然脂肪酸酶抑制剂可以应用在减肥药物、保健食品和普通食品中，将天然脂肪酸酶抑制剂添加在甜品中，添加量为甜品质量的5%，食用4个月后，可以有效抑制脂肪的形成，体重减少5%。
实例2
分别称取250g新鲜的矮砂仁和400g新鲜的鸡爪槭叶，分别切碎后混合，并加入70g小麦淀粉、8g葡萄糖和150g亚麻饼粕，将混合物放入紫外灯下灭菌处理13min，得固体发酵培养基；在上述灭菌后固体发酵培养基上分别按接种量接种8%枯草芽孢杆菌种子液、4%酿酒酵母种子液和5%米曲霉种子液，接种后在35℃的温度下发酵15h，得发酵物；将上述发酵物按质量比1:10与质量分数80%乙醇溶液混合，混合后加热回流浸提3h，浸提后离心分离得上清液，并将沉淀物重复浸提2次，合并上清液后减压浓缩至原体积17%，得浓缩液，并冷冻干燥，干燥后粉碎、过110目筛，得干燥物1，备用；称取450g成熟的红番茄，表面洗净、去蒂后放入料理机中打浆，将得到的番茄浆在4500r/min转速下离心分离30min，得沉淀物，放入液氮冷冻装置中，在-35℃温度下冷冻处理35min，冷冻后粉碎，过70目筛，得冻干番茄粉；将上述冻干番茄粉按质量比1:30加入乙酸乙酯混合，混合后在温度为65℃和超声功率为220W功率下超声处理40min，超声后冷却至室温，抽滤得滤液，将滤液减压浓缩至原体积7%后得浓缩液，并冷冻干燥，得干燥物2；将上述干燥物2和备用的干燥物1按质量比3:1混合，将混合物按质量比1:10与浓度为0.2mol/LpH为7.0磷酸盐缓冲液混合，搅拌混合1.5h后冷冻干燥6h，干燥后研磨、过110目筛，将过筛后的物质放入烧杯中，并密封，将烧杯放入烘箱中，在80℃温度下放置11h，冷却至室温后取出，即可得到天然脂肪酸合酶抑制剂。
本发明制备得到的天然脂肪酸酶抑制剂可以应用在减肥药物、保健食品和普通食品中，将天然脂肪酸酶抑制剂添加在甜品中，添加量为甜品质量的6%，食用5个月后，可以有效抑制脂肪的形成，体重减少8%。
实例3
分别称取300g新鲜的矮砂仁和500g新鲜的鸡爪槭叶，分别切碎后混合，并加入80g小麦淀粉、10g葡萄糖和200g亚麻饼粕，将混合物放入紫外灯下灭菌处理15min，得固体发酵培养基；在上述灭菌后固体发酵培养基上分别按接种量接种10%枯草芽孢杆菌种子液、5%酿酒酵母种子液和6%米曲霉种子液，接种后在40℃的温度下发酵20h，得发酵物；将上述发酵物按质量比1:10与质量分数80%乙醇溶液混合，混合后加热回流浸提4h，浸提后离心分离得上清液，并将沉淀物重复浸提3次，合并上清液后减压浓缩至原体积20%，得浓缩液，并冷冻干燥，干燥后粉碎、过120目筛，得干燥物1，备用；称取500g成熟的红番茄，表面洗净、去蒂后放入料理机中打浆，将得到的番茄浆在5000r/min转速下离心分离35min，得沉淀物，放入液氮冷冻装置中，在-30℃温度下冷冻处理40min，冷冻后粉碎，过80目筛，得冻干番茄粉；将上述冻干番茄粉按质量比1:30加入乙酸乙酯混合，混合后在温度为70℃和超声功率为250W功率下超声处理50min，超声后冷却至室温，抽滤得滤液，将滤液减压浓缩至原体积10%后得浓缩液，并冷冻干燥，得干燥物2；将上述干燥物2和备用的干燥物1按质量比3:1混合，将混合物按质量比1:10与浓度为0.2mol/LpH为7.0磷酸盐缓冲液混合，搅拌混合2h后冷冻干燥7h，干燥后研磨、过120目筛，将过筛后的物质放入烧杯中，并密封，将烧杯放入烘箱中，在90℃温度下放置12h，冷却至室温后取出，即可得到天然脂肪酸合酶抑制剂。
本发明制备得到的天然脂肪酸酶抑制剂可以应用在减肥药物、保健食品和普通食品中，将天然脂肪酸酶抑制剂添加在甜品中，添加量为甜品质量的8%，食用6个月后，可以有效抑制脂肪的形成，体重减少10%。