一种酵母上游激活元件在丝状真菌中的应用的制作方法

文档序号:11145240阅读:来源:国知局

技术特征:

1.来源于酿酒酵母的SEQ ID NO.1所示的上游激活元件UAS在提高丝状真菌中目的蛋白表达量中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于所述的上游激活元件UAS克隆到启动子的上游,或终止子的下游位置。

3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于所述的上游激活元件UAS距离启动子或终止子的位置为0bp、50bp、100bp、200bp、300bp、400bp、500bp、1kb或距离启动子或终止子更远的距离。

4.根据权利要求2所述的应用,其特征在于所述的上游激活元件UAS为单拷贝、两拷贝、三拷贝、四拷贝、五拷贝、六拷贝、七拷贝、八拷贝、九拷贝、十拷贝或更多拷贝的串联重复。

5.根据权利要求2所述的应用,其特征在于所述的启动子选自常用于真菌的启动子或其突变的、截短的或杂合的启动子。

6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于所述的常用于真菌的启动子选自AOX1、cbh1、gpdA、pki、trpC、NA2、glaA、cbh1、cbhII、Alp、tef或amdS。

7.根据权利要求1所述的应用,其特征在于所述的目的蛋白选自糖化酶、葡萄糖氧化酶、酸性蛋白酶、酸性淀粉酶、中性蛋白酶、真菌淀粉酶、植酸酶或脂肪酶。

8.一种提高丝状真菌中目的蛋白表达量的方法,其特征在于构建重组表达载体,将来源于酿酒酵母的SEQ ID NO.1所示的上游激活元件UAS克隆到丝状真菌目的蛋白编码基因的启动子的上游,或终止子的下游位置;将重组表达载体转化丝状真菌宿主细胞,培养该丝状真菌表达目的蛋白。

9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于所述的上游激活元件UAS距离启动子或终止子的位置为0bp、50bp、100bp、200bp、300bp、400bp、500bp、1kb或距离启动子或终止子更远的距离;所述的上游激活元件UAS为单拷贝、两拷贝、三拷贝、四拷贝、五拷贝、六拷贝、七拷贝、八拷贝、九拷贝、十拷贝或更多拷贝的串联重复。

10.根据权利要求8所述的方法,其特征在于所述的启动子选自常用于真菌的启动子或其突变的、截短的或杂合的启动子;所述的常用于真菌的启动子优选AOX1、cbh1、gpdA、pki、trpC、NA2、glaA、cbh1、cbhII、Alp、tef或amdS;所述的目的蛋白选自糖化酶、葡萄糖氧化酶、酸性蛋白酶、酸性淀粉酶、中性蛋白酶、真菌淀粉酶、植酸酶或脂肪酶。

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