1.一种三联肽Cec Md3js,其特征在于,用于编码所述三联肽Cec Md3js的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述三联肽Cec Md3js的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.一种权利要求1所述的三联肽Cec Md3js的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1,合成核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的目的基因;
步骤2,以限制性内切酶KpnⅠ和XbaⅠ双酶切载体pGAPZαA,并回收得到3147bp的载体片段;将所述目的基因和所述载体片段连接,得到含有重组载体pGAPZαA/Cec Md3js的连接液;
步骤3,将步骤2的连接液转化至大肠杆菌感受态细胞DH5α中,并提取重组载体pGAPZαA/Cec Md3js,得到重组载体pGAPZαA/Cec Md3js;
步骤4,将重组载体pGAPZαA/Cec Md3js转化到宿主细胞中,得到表达工程菌;
步骤5,培养步骤4的表达工程菌,进行三联肽Cec Md3js的表达,并提取三联肽Cec Md3js,得到三联肽Cec Md3js。
3.根据权利要求2所述的三联肽Cec Md3js的制备方法,其特征在于,步骤4的宿主细胞为毕赤酵母GS115。
4.一种权利要求1所述的三联肽Cec Md3js,在制备抗菌肽Cec Md中的应用。
5.一种权利要求1所述的三联肽Cec Md3js,在制备治疗革兰氏阴性菌疾病药物或者治疗革兰氏阳性菌疾病药物中的应用。
6.一种权利要求1所述的三联肽Cec Md3js,在制备动物饲料添加剂中的应用。
7.一种利用权利要求1所述的三联肽Cec Md3js制备抗菌肽Cec Md的方法,其特征在于,具体包括以下步骤:
步骤a,用pH 8.0,0.01mol/L的PB缓冲液为溶剂,配制浓度为1mg/mL的三联肽Cec Md3js溶液;然后配制体积分数为50%的甲酸溶液,将三联肽Cec Md3js溶液与甲酸溶液按照1000:12的体积比例混合,50℃水浴36h,得到切割溶液;
步骤b,用蒸馏水将切割溶液稀释3倍,真空冷冻干燥,得到固体抗菌肽;
步骤c,用蒸馏水将固体抗菌肽复溶,再经真空冷冻干燥,得到抗菌肽Cec Md粗品;
步骤d,抗菌肽Cec Md的纯化
将抗菌肽Cec Md粗品经5000kDa膜分离,得到的分离液经G50层析柱纯化,得到抗菌肽Cec Md。