一种荧光共振探针及其应用和试剂盒的制作方法

文档序号:12411834阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种荧光共振探针,适于检测靶核酸片段,其特征在于,其包括第一荧光探针和第二荧光探针,所述第一荧光探针具有第一结合区和第一识别区,所述第二荧光探针具有第二结合区和第二识别区,所述第一结合区与所述第二结合区反向互补,所述第一结合区的末端标记有第一荧光基团,所述第二结合区的末端标记有第二荧光基因,所述第一荧光基因的荧光光谱与所述第二荧光基团的激发光谱重叠,所述第一识别区和所述第二识别区分别与所述靶核酸片段上相邻的第一靶标区和第二靶标区反向互补。

2.根据权利要求1所述的荧光共振探针,其特征在于,所述第一结合区的长度为7-9bp。

3.根据权利要求1所述的荧光共振探针,其特征在于,所述第一识别区的长度为10-12bp,所述第二识别区的长度为10-12bp。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的荧光共振探针,其特征在于,所述第一荧光基团为Cy3,所述第二荧光基团为Cy5;

或者,所述第一荧光基团为Cy5,所述第二荧光基团为Cy5.5;

或者,所述第一荧光基团为CFP或GFP,所述第二荧光基团为YFP;

或者,所述第一荧光基团为Rluc,所述第二荧光基团为QDs-655

5.根据权利要求1所述的荧光共振探针,其特征在于,所述第一荧光探针的碱基序列如SEQ ID NO.1所示,所述第一荧光基团为Cy3,所述第一荧光基团标记于所述第一荧光探针的3’端,所述第二荧光探针的碱基序列如SEQ ID NO.2所示,所述第二荧光基团为Cy5,所述第二荧光基团标记于所述第一荧光探针的5’端。

6.权利要求1-5中任一项所述的荧光共振探针在检测靶核酸片段中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用,所述靶核酸片段为miRNA。

8.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,其包括:将所述荧光共振探针的所述第一荧光探针和所述第二荧光探针加入至杂交液中进行杂交反应,所述杂交液含有镁离子,所述镁离子的浓度为49-51mM。

9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述杂交反应条件是:时间29-31min、温度37-39℃。

10.权利要求1-5中任一项所述的荧光共振探针在制备用于检测靶核酸片段的试剂盒中的应用。

11.根据权利要求10所述的应用,所述靶核酸片段为miRNA。

12.一种试剂盒,其特征在于,其包括权利要求1-5中任一项所述的荧光共振探针。

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