秦川牛microRNA‑320a‑1基因单核苷酸多态性的检测方法及其应用与流程

文档序号:12098043阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种秦川牛microRNA-320a-1基因单核苷酸多态性的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:以待测秦川牛全基因组DNA为模板,以引物对P2为引物,PCR扩增秦川牛microRNA-320a-1基因片段;用限制性内切酶PvuII酶切PCR扩增得到的片段,再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳;根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定秦川牛microRNA-320a-1基因上单核苷酸多态性位点的基因型;

所述的引物对P2为:

上游引物:5`-AACTCCCACGTTGCGTCCAGC-3`;

下游引物:5`-GCTCCCCTCCGCCTTCTCTT-3`。

2.如权利要求1所述的秦川牛microRNA-320a-1基因单核苷酸多态性的检测方法,其特征在于,所述PCR扩增的反应程序为:94℃预变性2min;94℃变性30s,63℃退火30s,72℃延伸15s,30~36个循环;72℃延伸5min。

3.如权利要求1所述的秦川牛microRNA-320a-1基因单核苷酸多态性的检测方法,其特征在于,所述琼脂糖凝胶电泳采用质量浓度为3%的琼脂糖凝胶。

4.如权利要求1所述的秦川牛microRNA-320a-1基因单核苷酸多态性的检测方法,其特征在于,所述秦川牛microRNA-320a-1基因单核苷酸多态性的琼脂糖凝胶电泳结果为:CC基因型表现为188bp一条带,CT基因型表现为188bp、168bp和20bp三条带,TT基因型表现为168bp和20bp两条带。

5.一种秦川牛microRNA-320a-1基因单核苷酸多态性的检测试剂盒,其特征在于,该试剂盒包括基于RFLP方法鉴定秦川牛microRNA-320a-1基因上单核苷酸多态性位点的基因型的引物对P2,所述的引物对P2为:

上游引物:5`-AACTCCCACGTTGCGTCCAGC-3`;

下游引物:5`-GCTCCCCTCCGCCTTCTCTT-3`。

6.如权利要求1所述的秦川牛microRNA-320a-1基因单核苷酸多态性的检测方法在秦川牛分子标记辅助选择育种中的应用。

7.如权利要求6所述的应用,其特征在于,所述microRNA-320a-1基因单核苷酸多态性的检测应用于秦川牛肉用生长性状的标记辅助选择。

8.如权利要求6所述的应用,其特征在于,选择具有突变纯合基因型TT的秦川牛个体,快速建立遗传资源优良的秦川牛种群。

当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1