1.一种包含单链融合多肽的LIGHT受体激动剂蛋白,包括:
(i)第一可溶性LIGHT细胞因子结构域,
(i)第一肽接头,
(ii)第二可溶性LIGHT细胞因子结构域,
(iii)第二肽接头,和
(iv)第三可溶性LIGHT细胞因子结构域,以及
(v)铰链接头,选自包括SEQ ID NO:16和19-24的组,以及
(vi)抗体Fc片段,其中所述抗体Fc片段(vii)由SEQ ID No:13或14中所示的氨基酸序列或SEQ ID No:13或14的氨基酸1-217组成。
2.根据权利要求1所述的LIGHT受体激动剂蛋白,其中,所述抗体Fc片段(vii)通过铰链接头(vi)融合至第三LIGHT细胞因子结构域(v)的C末端端部。
3.根据权利要求1-2中任一项所述的LIGHT受体激动剂蛋白,其基本上是非聚集的。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的LIGHT受体激动剂蛋白,其中,所述第二和/或第三可溶性LIGHT细胞因子结构域是任选地包括氨基酸序列突变的N末端缩短的结构域。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的LIGHT受体激动剂蛋白,其中,所述可溶性LIGHT细胞因子结构域中的至少一个,特别是所述可溶性LIGHT细胞因子结构域(iii)和(v)中的至少一个,是具有起始于根据SEQ ID NO:1的人LIGHT细胞因子的氨基酸E91或N93或P94的N末端序列的可溶性LIGHT细胞因子结构域,以及其中E91或N93或P94可以由中性氨基酸例如Ser或Gly替换。
6.根据权利要求5所述的LIGHT受体激动剂蛋白,其中,所述可溶性LIGHT细胞因子结构域中的至少一个,特别是所述可溶性LIGHT细胞因子结构域(iii)和(v)中的至少一个,是具有N末端序列的可溶性LIGHT细胞因子结构域,所述N末端序列选自
(a)N93–A95以及
(b)(Gly/Ser)93–A95。
7.根据权利要求5或6所述的LIGHT受体激动剂蛋白,其中,可溶性LIGHT细胞因子结构域以SEQ ID NO:1的氨基酸V240结束和/或任选地包括在位置N93、N102、E115、T116、Q117、L118、G119、L120、C154、R172、Y173、E175、E176、E178、C187、R228、D229处或在所述位置中的两个或更多个处的突变。
8.根据权利要求5-7中任一项所述的LIGHT受体激动剂蛋白,其中,至少所述可溶性LIGHT细胞因子结构域(iii)是以V240结束的C末端缩短的LIGHT细胞因子结构域。
9.根据权利要求6-9中任一项所述的LIGHT受体激动剂蛋白,其中,所述可溶性LIGHT细胞因子结构域(i)、(iii)和(v)由根据SEQ ID NO:1的人LIGHT细胞因子的氨基酸91-240组成。
10.根据前述权利要求中任一项所述的LIGHT受体激动剂蛋白,其中,所述第一和第二肽接头(ii)和(iv)独立地具有3-8个氨基酸的长度,特别是3、4、5、6、7或8个氨基酸的长度,并且优选地是甘氨酸/丝氨酸接头,任选地包括可以糖基化的天冬酰胺残基。
11.根据权利要求10所述的LIGHT受体激动剂蛋白,其中,所述第一和所述第二肽接头(ii)和(iv)由根据SEQ ID NO:2的氨基酸序列组成。
12.根据前述权利要求中任一项所述的LIGHT受体激动剂蛋白,其另外包含N末端信号肽结构域,例如SEQ ID NO:17的N末端信号肽结构域,其可以包括蛋白酶切割位点,和/或其另外包括C末端元件,所述C末端元件可以包含和/或连接至识别/纯化结构域,例如根据SEQ ID NO:18的Strep标签。
13.根据前述权利要求中任一项所述的LIGHT受体激动剂蛋白,包括SEQ ID No:15和2535中任一者的氨基酸序列。
14.根据前述权利要求中任一项所述的LIGHT受体激动剂蛋白,包括两种多肽,每种多肽具有如SEQ ID NO:27、29、30、31、32、33、34或35中所示的氨基酸序列
15.根据权利要求14所述的LIGHT受体激动剂蛋白,其中,所述两种多肽通过在以下位置处形成的三个链间二硫键而共价连接:
a)SEQ ID No:27、29、30的位置468、474和477,或
b)SEQ ID NO:31的位置474、480和483,或
c)SEQ ID NO:32的位置465、471和474,或
d)SEQ ID NO:33、34的位置472、478和481,或
e)SEQ ID NO:35的位置469、475、478。
16.根据权利要求14或15所述的LIGHT受体激动剂蛋白,包括选自SEQ ID NO:27、29;30和32的N156;SEQ ID NO:31的N156和N312;以及SEQ ID NO:33、34和35的N156和N311的列表的一种或多种N糖基化的天冬酰胺残基。
17.根据前述权利要求中任一项所述的LIGHT受体激动剂蛋白,其中,所述一种或多种多肽进一步翻译后修饰。
18.根据权利要求17所述的LIGHT受体激动剂蛋白,其中,所述翻译后修饰包括N-末端谷氨酰胺至焦谷氨酸的修饰。
19.一种核酸分子,编码权利要求1-18中任一项所述的LIGHT受体激动剂蛋白,优选地与表达控制序列可操作性连接。
20.一种表达载体,包括权利要求19所述的核酸分子。
21.一种细胞或非人类生物,用权利要求19所述的核酸分子或权利要求20所述的载体转化或转染,其中,所述细胞是例如原核细胞或真核细胞,优选哺乳动物细胞,或更优选人细胞或中国仓鼠卵巢(CHO)细胞。
22.一种药物或诊断组合物,包括作为活性剂的权利要求1-19中任一项所述的LIGHT受体激动剂蛋白、权利要求19所述的核酸分子或权利要求20所述的载体。
23.根据权利要求22所述的药物或诊断组合物,还包括一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂和/或佐剂。
24.根据权利要求22或23所述的药物组合物用于治疗,更具体地用于预防和/或治疗由LIGHT细胞因子功能障碍引起的、与LIGHT细胞因子功能障碍相关的和/或伴随LIGHT细胞因子功能障碍的疾患,特别是增殖性疾患,诸如肿瘤,例如实体肿瘤或淋巴肿瘤;传染病;炎性疾病;代谢性疾病;自身免疫性疾病,例如类风湿性和/或关节炎疾病;退行性疾病,例如神经退行性疾病,诸如多发性硬化;凋亡相关疾病或移植排斥。