化特性，将其归属于假单胞菌属 iPseudomonas邓.'、。
[0016] 3、菌株0X5的生长及其对邻二甲苯的降解效果 (1)菌悬液的制备 用接种环从试管斜面挑取一环0X5接种于LB培养基，35°C、150r/min培养24h，取2mL转接于新鲜LB培养基，35°C培养12h(细菌处于对数生长期)，取菌液于4000r/min条 件下离心5min收集菌体，再用已灭菌的含邻二甲苯的无机盐培养基（pH7.0)洗涤2次， 然后采用含邻二甲苯的无机盐培养基重悬菌体，调节细胞密度至OD6。。~1，4°C保存备用。
[0017] (2)菌株0X5的生长与降解曲线 将菌株0X5接种于含1000mg/L邻二甲苯的无机盐培养基中，于35°C、150r/min和 初始pH=7.0的条件下培养，测定细菌的菌密度（0D_)和邻二甲苯的残留浓度，结果如图1 所示：菌株0X5对邻二甲苯的降解与其生长趋势相一致，表明该菌能利用邻二甲苯作为唯 一碳源进行生长繁殖，并对邻二甲苯有良好的降解效果。〇~12h内，菌株0X5生长速度缓 慢，主要是因为邻二甲苯具有一定的毒性，细菌需要一定时间适应环境；12h后细菌进入对 数生长期，〇D_值呈线性增长；30h时，由于大部分邻二甲苯已经被降解，细菌生长所需的 碳源减少，因此开始进入稳定期。
[0018] 实施例2:环境条件对假单胞菌sp.)0X5降解能力的影响 1、培养温度的影响 在邻二甲苯浓度为1000mg/L，pH为7. 0、摇床转速为150r/min和接种量为2vol% 时，温度对邻二甲苯降解的影响如图2所示：在25~40°C范围内，菌株0X5对邻二甲苯均具 有较好的降解效果，表明该菌对温度有较宽的适应范围。在25~35°C之间时，随着温度的升 高，底物的降解率随之增大；但当温度达到40°C时，菌株0X5对底物的降解率反而低于35°C 时的降解率。表明假单胞菌sp. ) 0X5的最适温度为35°C。
[0019] 2、初始pH值的影响 在邻二甲苯浓度为1000mg/L，温度为35°C、摇床转速为150r/min和接种量为2vol% 时，初始pH值对邻二甲苯降解的影响如图3所示：pH=5时，48h后，菌株0X5对邻二甲苯 的降解率仅为25. 2%，说明该株菌在酸性条件下很难生长；当pH=7~8时，30h后其降解率均 可达到90%以上，然而随着pH的继续增大其降解率又有所下降，表明菌株0X5对环境pH值 比较敏感，其适宜的pH范围为7~8。
[0020] 3、摇床转速的影响 在邻二甲苯浓度为1000mg/L，pH为7.0、温度为35°C和接种量为2vol%时，摇床转速 对邻二甲苯降解的影响如图4所示：摇床转速为100r/min时，菌株0X5对邻二甲苯的降 解率很低，当转速在150~250r/min时，48h后邻二甲苯的降解率达到了 90%以上，表明在 摇床转速为150~250r/min时已能满足假单胞菌敵wassp. )OX5对溶氧的需求， 结合实际生产中的可行性和成本考虑，确定菌株0X5的最佳摇床转速为150r/min。
[0021] 4、邻二甲苯初始浓度的影响 在pH为7.0、培养温度35°C、摇床转速150r/min和接种量为2vol%时，邻二甲苯初 始浓度对邻二甲苯降解的影响如图5所示：菌株0X5在36h内对1500mg/L的邻二甲苯的 降解率可达到90%，随着邻二甲苯浓度的增大，其降解率逐渐减小，且细菌到达稳定期的时 间延迟，说明说明菌株0X5对邻二甲苯具有良好的降解性能，但过高的邻二甲苯会抑制0X5 的生长。
[0022] 实施例3:假单胞菌sp. ) 0X5对焦化废水中苯系物的降解 将菌株0X5的菌悬液以2vol%的接种量投加至稀释的焦化废水（C0D=604mg/L)中，并分 别外加一定浓度的苯、甲苯、邻二甲苯、间二甲苯和对二甲苯，于35°C、150r/min摇床培养， 48h后测定培养液中残留的各苯系物的浓度，计算得出相应苯系物的降解率如表1所示：菌 株0X5在48h内可将废水中的三种二甲苯完全降解，并且对苯和甲苯的降解率也都达到了 95%以上，说明菌株0X5可较好地适应焦化废水中的环境，并能将废水中的苯系物很好降 解。
[0023]
实施例4 :假单胞菌sp. ) 0X5对某焦化厂生化出水COD的去除 以2vol%的接种量将菌株0X5接种至IOOmL已灭菌的某焦化厂生化出水中，置于35°C、 150r/min摇床培养，间隔一定时间取样检测废水中的C0D，结果如图6所示：菌株0X5经 72h将废水的COD从153.2mg/L降低至95.2mg/L，表明0X5能利用生化出水中的苯系物和 难降解有机物为碳源来进行生长繁殖，为利用邻二甲苯降解菌强化处理焦化废水中的COD 提供了依据。
[0024] 上述【具体实施方式】为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实 施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、 简化，均应为等效的。
【主权项】
1. 一株邻二甲苯降解菌，经鉴定为假单胞菌（sp.)，编号为0X5,保藏编 号为 CCTCC N0:M2015415。2. 如权利要求1所述邻二甲苯降解菌0X5的应用，其特征在于所述的0X5用于降解焦 化废水中的邻二甲苯和其他苯系物。3. 如权利要求2所述邻二甲苯降解菌的应用，其特征在于将所述的0X5用于降低焦化 生化出水中的C0D。
【专利摘要】本发明公开了一株邻二甲苯降解菌及其应用。本发明所提供的邻二甲苯降解菌OX5属于假单胞菌(<i>Pseudomonas？</i>sp<i>.</i>)，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2015年6月29日，保藏编号为CCTCC？NO:M2015415。该菌为革兰氏阴性菌，菌落呈圆形，微凸，菌落四周为乳白色，中间为黄色，表面湿润光滑。该菌能利用邻二甲苯作为唯一碳源进行生长繁殖，纯培养时，48h对1500mg/L的邻二甲苯的降解率高达98%，对邻二甲苯的耐受浓度达到2500mg/L。该菌不仅能降解焦化废水中的邻二甲苯和其他苯系物，而且还能降低焦化生化出水中的COD，用于焦化废水的生物强化处理，应用前景广阔。CCTCC NO:M201541520150629
【IPC分类】C02F101/34, C02F3/34, C12N1/20, C12R1/38
【公开号】CN105087429
【申请号】CN201510421488
【发明人】颜家保, 陈佩, 武文丽
【申请人】武汉科技大学
【公开日】2015年11月25日
【申请日】2015年7月17日