00个菌落的区块中的菌落。菌落形成单位(CFU)/ml的浓度通过使用以下 公式确定：
[0244]
[0245] F.小鼠血浆中前药UL7-002向活性抑制剂的转化
[0246] 基本原理
[0247] 为了证实前药在血浆酶的存在下转化为母体活性化合物，将前药衍生物与小鼠血 浆在2小时的5个时间点，在37°C下孵育。然后通过LC-MS/MS分析样品以获得随时间变化出 现的活性化合物的量和随时间变化保留的前药衍生物的量。
[0248] 实验过程
[0249] 在小鼠血浆稳定性测定中以ΙΟμΜ的浓度评估本发明的前药衍生物。测试化合物用 DMS0稀释至10mM的最终储备浓度。出于测定的目的，制备的储备液进一步用DMS0稀释至400 μΜ的浓度并取5yL加入195yL的小鼠血浆(pH 7.4)中，然后在37°C下孵育。DMS0在平板中的 终浓度为2.5% (v/v)。在孵育之后0、15、30、60和120分钟，通过加入400yL包含0.55μΜ美托 洛尔和1 % (v/v)甲酸的乙腈使反应终止。然后使平板在4°C下，以3000rpm离心45分钟。将80 yL上清液转移到锥形底96孔玻璃包被的平板中。在通过LC-MS/MS分析前药衍生物和活性物 质之前加入40yL水。该测定应位于Leicester的发明人的要求，由合同研究组织Cyprotex Discovery Limited,UK进行。
[0250] 结果
[0251 ]保留的前药化合物和出现的母体活性化合物的定量进行如下：
[0252] (1)母体活性化合物使用以去活化小鼠血浆生成的6点校正曲线定量。（2)在每个 时间点保留的前药化合物的百分比由LC-MS/MS峰面积比（化合物峰面积/内标峰面积)计 算。该百分比随后用于确定前药化合物相对于在时间Omin的起始浓度（ΙΟμΜ)，在每个时间 点的浓度。前药UL7-002向其母体活性化合物UL7-001的转化显示于表4。
[0253] 结论
[0254] 表4中提供的结果清楚地表明了本发明的前药的治疗效果，该效果通过本发明的 前药在血浆中向母体活性化合物的快速转化来证实。除了治疗效果以外，UL7-002的理化性 质对于制备适于非胃肠递送的制剂是有利的。
[0255] 表 4
[0256]
[0257] 在整个说明书和随附的权利要求书中，除非上下文另外要求，术语"包含 (comprise)"、和变型如"包含(comprises)"和"包含(comprising)"将被理解为意指包含规 定的整数、步骤、整数的组或步骤的组但不排除任何其他整数、步骤、整数的组或步骤的组。
[0258] 本文参考的所有专利和专利申请通过引用以其整体并入。
[0259] 由该说明书和权利要求书形成构成部分的申请可以用作关于任何随后申请的优 先权的基础。这样的随后申请的权利要求可以针对本文所述的任何特征或特征的组合。其 可以为产品、组合物、方法或用途权利要求的形式并且可以通过举例的方式包括而不限于 该权利要求。
【主权项】
1. 一种化合物，其为式(I)的化合物、或其药学上可接受的前药衍生物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物。2. 根据权利要求1所述的化合物，其为前药衍生物形式。3. 根据权利要求2所述的化合物，其中，所述前药衍生物选自羧酸酯衍生物、氨基磺酸 酯衍生物、磷酸酯衍生物和氨基甲酸酯衍生物。4. 根据权利要求3所述的化合物，其中，所述前药衍生物是羧酸酯衍生物。5. 根据权利要求3或4所述的化合物，其为式(Ia)的化合物：其中，R4IPR41^-或两者独立地选自-C (O) R16、-SO2NH2、-PO (OR19)( OR2q )、-CHR26-OPO (OR19)( OR2q )和-C (0) NR17R18，其中，R26 为氢或 C1-C6 烷基，R16、R17、R18、R19 和 R2q 独立地选自： (c) C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C 6炔基、C3-Ciq环烷基、C5-Ciq环烯基、杂环基、-C 1-C3烷基-C3-Ciq环烷基、-C1-C 3烷基-C5-Ciq环烯基或-C1-C3烷基杂环基，或R 17和R18与它们连接的N-起 可以形成任选地包含选自0、S和NR25aR 25b中的另外的杂原子的5元或6元杂环，其中R25a为氢、 C1-C6烷基、-CH2-OPO(ORis) (OR2t3)或5元或6元杂环，且R25b不存在或为C1-C 6烷基;并且其中上 述R16、R17或R18基团中的任意基团可以任选地被选自以下基团中的一个或多个基团取代:氰 基、-OPO (OR19)(OR2t3 )、- (0 (CH2) z) r0R24、C1-C6 烷氧基、C1-C6 氟烷氧基、C1-C6 烷基、C1-C6 氟烷基 和-C(O)NRaRb，其中每个z可以相同或不同，表示2或3，r表示选自1至20的整数，且R 24为氢、 C1-C3烷基或-PO (OR19)( OR2q )，其中俨和妒独立地选自氢和&-(：6烷基，以及上述R16、R17或R 18 基团中的任意基团可以任选地被一个或多个卤素原子取代;和 (d) 芳基、杂芳基、C1-C3烷基芳基和-C1-C3烷基杂芳基，所述芳基和杂芳基任选地被取 代； 或R18、R19和R2t3可以独立地表示氢。6. 根据权利要求5所述的化合物，其中，1?43和1?4|3之一或两者独立地选自-(：(0)1? 16、-SO2NH2、-PO (OR19)( OR2q )和-C (0) NR17R18，其中 R16、R17、R18、R19 和 R2q 独立地选自： (a) C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C 6炔基、C3-Ciq环烷基、C5-Ciq环烯基、杂环基、-C 1-C3烷基-C3_ClQ环烷基、-Cl-C3烷基 -C5_ClQ环烯基或-Cl-C3烷基杂环基，其中上述R 16、R17或R18基团中 的任意基团可以任选地被选自氰基、C1-C6烷氧基、C1-C6氟烷氧基、C 1-C6烷基、C1-C6氟烷基 和-C(O)NRaRb中的基团取代，其中RlPRb独立地选自氢和&-〇5烷基，并且上述R 16、R17或R18基 团中的任何基团可以任选地被一个或多个卤素原子取代，和 (b)芳基、杂芳基、C1-C3烷基芳基和-C1-C3烷基杂芳基，所述芳基和杂芳基任选地被取 代； 或R18、R19和R2t3可以独立地表示氢； 并且当R4IPR4b之一独立地选自以上定义的基团时，另一个为氢。7. 根据权利要求5或6所述的化合物，其中，R4，R4bW者独立地选自-以0)1?16、-30 2順2、-PO (OR19)( OR2q )、-CHR26-OPO (OR19)( OR2q )和-C (0) NR17R18，其中 R26 为氢或 Ci-C6 烷基。8. 根据权利要求5或6所述的化合物，其中，R4lPR4b2-选自-C(0)R16、-S0 2NH2、-P0 (OR19)( OR2q )、-CHR26-OPO (OR19)( OR2q )和-C (0) NR17R18，其中 R26 为氢或 Ci-C6 烷基;并且 R4IP R4b中的另一个为氢。9. 根据权利要求5至8中任一项所述的化合物，其中，R4IPR41^-或两者独立地选自-C (O)R 16010. 根据权利要求9所述的化合物，其中，R1^C1-C6烷基或C3-C iq环烷基，其中上述基团 中的任一基团可以任选地被选自-OPO (OR19)( OR2q )和-(0 (CH2) z) r〇R24的基团取代，其中每个 z可以相同或不同，表示2或3，r表示选自1至20的整数，且R 24为氢、C1-C3烷基或-P0(0R19) (OR 2t3)，或R16是任选地被-(CHR26)q-0P0(OR 19) (OR2t3)取代的苯基，其中q表示0或1。11. 根据权利要求10所述的化合物，其中，R16是C1-C6烷基。12. 根据权利要求11所述的化合物，其中，R4IPR41^-C(O)CH(CH3) 2t313. 根据权利要求1至12中任一项所述的化合物，其是二盐酸盐。14. 一种药物组合物，包含根据权利要求1至13中任一项所述的化合物，所述化合物任 选地与一种或多种药学上可接受的稀释剂或载体组合。15. 根据权利要求14所述的药物组合物，包含一种或多种其它治疗活性成分。16. 根据权利要求1至13中任一项所述的化合物，其用作药物。17. 根据权利要求1至13或16中任一项所述的化合物，用于与一种或多种其他治疗活性 成分组合使用。18. 根据权利要求1至13、16或17中任一项所述的化合物，用于治疗由产生成孔毒素如 胆固醇依赖性溶细胞素的细菌引起的细菌感染。19. 根据权利要求18所述用途的化合物，其中，所述细菌感染由链球菌属 (Streptococcus spp ·)(例如，肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae )、A链球菌群 (Group A Streptococci )或猪链球菌（Streptococcus suis))、梭菌属（Clostridium spp ·)(例如，产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens))、李斯特菌属（Listeria spp ·) (例如，单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes))或芽孢杆菌属(BaciIlus spp.)(例如，炭疽杆菌(Bacillus anthracis))引起D20. 根据权利要求19所述用途的化合物，用于治疗由肺炎链球菌引起的细菌感染。21. 根据权利要求20所述用途的化合物，用于治疗肺炎球菌性肺炎、肺炎球菌性脑膜 炎、肺炎球菌性败血症/菌血症、肺炎球菌性角膜炎或肺炎球菌性中耳炎。22. 根据权利要求18所述用途的化合物，其用于治疗选自以下的、由除了肺炎球菌以外 的细菌引起的病症:气性坏疽、胃肠炭疽、吸入性炭疽、猪脑膜炎、脑炎、败血症/菌血症和肺 炎。23. 根据权利要求16至22中任一项所述用途的化合物，其中，所述化合物与一种或多种 其他治疗活性成分(例如，一种或多种抗微生物剂或免疫调节剂)组合给药。24. -种治疗由产生成孔毒素如胆固醇依赖性溶细胞素的细菌引起的细菌感染的方 法，其包括将有效量的根据权利要求1至13、15或16中任一项所述的化合物给药于有需要的 受试者。25. -种如权利要求1中所定义的式(I)的化合物的受保护的衍生物。26. -种制备如权利要求1中所定义的式（I)化合物的方法，其包括使式（II)的化合物 或其受保护的衍生物与1-甲基哌嗪反应；以及如果需要，使所生成的化合物去保护。27. -种制备如权利要求5至13中任一项所定义的式（I a)化合物的方法，其包括使式 (I)的化合物或其受保护的衍生物与式R4aX的化合物和/或式R4bX的化合物反应，其中X为离去基团。
【专利摘要】本发明尤其提供了新颖N-苯基取代的吡咯衍生物及其在治疗中的用途，尤其是在治疗细菌(例如，肺炎球菌)感染中的用途。
【IPC分类】C07F9/09, C07D207/36
【公开号】CN105492422
【申请号】CN201480044335
【发明人】彼得·威廉·安德鲁, 马法尔达·皮雷斯·达马索, 马克·威廉·戴维斯, 弗里茨-弗里德尔·弗里克尔, 拉娜·伦内恩, 丹尼尔·哈姆扎, 西蒙·克里斯多夫·伊尔斯特
【申请人】莱斯特大学
【公开日】2016年4月13日
【申请日】2014年6月4日
【公告号】CA2914262A1, EP3004056A1, US20160120864, WO2014195702A1