一种新鲜双孢菇中假单胞菌快速筛查的方法与流程

文档序号:11516386阅读:375来源:国知局

本发明涉及一种新鲜双孢菇中假单胞菌快速筛查的方法,属于农产品安全检测领域。



背景技术:

双孢菇因其味道鲜美,营养价值高,药用和保健价值,而受到消费者的青睐,市面上的双孢菇多以鲜品销售,且普遍在常温下保存。双孢菇含有丰富的蛋白质和氨基酸且表面组织鲜嫩,更易滋生外源微生物,外源细菌的种类和丰度在货架期内呈动态变化。

随着双孢菇产量急速增大,行业中需要新的检测技术来保证其安全性,电子鼻已经广泛应用于食品安全领域,但在新鲜双孢菇中还未有相关技术。传统的微生物检测方法前处理复杂,试剂消耗量大,菌落培养周期长,无法对大量的样品进行实时检测。现代生物技术的微生物检测方法包括:核酸探针技术、pcr技术、生物芯片技术、生物传感器检测技术等,操作步骤复杂,检测成本高。气相色谱法测定结果到单分子级别,无法得到样品整体信息,过于精细的结果会增大提取信息的难度。

目前国内对双孢菇中假单胞菌的菌落总数测定通常使用选择性培养基培养样品得到粗略的菌落数量,或者应用pcr技术来准确测定。但现有的检测技术都难以实现对大量样品的快速检测试,且操作步骤复杂,检测周期长。在安全检验中对假单胞菌的检测并不需要准确的菌落数量,允许一定的误差。



技术实现要素:

针对上述问题,本发明提出了一种快速筛查方法,基于气味指纹技术来检测新鲜双孢菇中的挥发性物质,通过最小线性回归分析估算新鲜食用菌中的假单胞菌菌落总数,由此实现新鲜双孢菇中假单胞菌的快速检测。

本发明通过预测卫生学的分析方法,建立电子鼻pls分析与假单胞菌生长动态的数学模型,预测值与实测值的相对误差r2=0.9379,所建模型可以较好地预测新鲜食用菌中的假单胞菌生长状况。

具体操作为:取2g新鲜双孢菇样品置于20ml的顶空进样瓶中,聚四氟乙烯硅隔膜密封后静置20min,平衡后使用配有12种mos传感器的电子鼻系统进行测定,分析参数:流速150ml/min,顶空产生时间60s,产生温度60℃,搅拌速率200r/min,顶空注射体积0.5ml,注射速率0.25ml/s,获得时间360s,延滞时间120s。

新鲜双孢菇中假单胞菌菌落总数的预测模型为:y=1.0667x-0.14。

其中,y为假单胞菌菌落总数(×105cfu/g),x为新鲜双孢菇样品电子鼻最佳线性传感器响应值。

本发明为新鲜双孢菇中的假单胞菌快速检测方向提供了绿色、经济、便捷、易推广的理论支持和解决途径,开拓了食用微生物高通量快速安全检测研究的新思路。

具体实施方式

以下结合具体实例对本发明作进一步说明。称取双孢菇样品2g置于20ml的顶空进样瓶中,聚四氟乙烯硅隔膜密封后静置20min,平衡后使用配有12种mos传感器的电子鼻系统进行测定,分析参数:流速150ml/min,顶空产生时间60s,产生温度60℃,搅拌速率200r/min,顶空注射体积0.5ml,注射速率0.25ml/s,获得时间360s,延滞时间120s。由此显示香气成分的响应强度变化。

新鲜双孢菇中假单胞菌菌落总数的预测模型为:y=1.0667x-0.14。

其中,y为假单胞菌菌落总数(×105cfu/g),x为新鲜双孢菇样品电子鼻最佳线性传感器响应值。

由响应值得到假单胞菌菌落总数预测值为2.35×105cfu/g,样品实际值为2.7×105cfu/g,相对偏差为12.96%,能够在一定程度上预测新鲜双孢菇中假单胞菌的生长情况。



技术特征:

技术总结
本发明涉及一种新鲜双孢菇中假单胞菌快速筛查的方法,属于农产品安全检测领域。该方法基于气味指纹技术来检测新鲜双孢菇中的挥发性物质,由电子鼻主成分分析区分不同储藏时间的食用菌,通过最小线性回归分析估算新鲜食用菌中的假单胞菌菌落总数,由此实现新鲜双孢菇中假单胞菌的快速检测。本发明为快速检测微生物提供了的理论支持和解决方式,开拓了对新鲜食用菌中微生物快速筛查的新思路。

技术研发人员:杨文建;王柳清;胡秋辉;方勇;裴斐;马宁
受保护的技术使用者:南京财经大学
技术研发日:2017.06.07
技术公布日:2017.08.18
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