本发明属于兰科植物组培领域,具体涉及一种铁皮石斛试管苗生根培养基及其制备方法。
背景技术:
铁皮石斛,兰科石斛属多年生草本植物,是一种珍贵的中药材植物。但铁皮石斛生长条件十分苛刻,自然产量少,加上人们的过度采挖,使得野生资源濒临绝种,市场供不应求,价格一步飙升。
近年来,研究铁皮石斛组培苗以及栽种的越来越多,但是效果不甚明显,尤其是组培苗炼苗的成活率低,使得人工栽培处于瓶颈期。
申请号201510063559.1的中国专利公开了一种铁皮石斛生根壮苗专用培养基,具体公开了培养基中添加马齿苋提取物、南瓜粉、丙三醇、苹果酸、邻苯甲酰磺酰亚胺、水苏糖。虽然该培养基能提高铁皮石斛无菌试管苗的生根率,提高根数,植株生长较快,但是该培养基糖分高,抑菌效果差,培养过程中容易污染。
又如申请号201510395087.1的中国专利公开了一种利用海浮石促进铁皮石斛生根的培养基,具体公开了以1/2ms培养基为基础培养基,其中还含有如下组分:画报二号0-5g/l、海浮石0-100g/l、香蕉汁0-100g/l、土豆汁0-100g/l、活性炭1-3g/l、琼脂5-7g/l、白砂糖15-30g/l。该专利解决成苗移栽成活率低、生根周期长等问题,且简单易行,提高成苗移栽成活率,为产业化移栽提供技术支持。但是该组分并非不能代替铁皮石斛的室外环境,刺激铁皮石斛生根。
技术实现要素:
针对现有技术的不足,本发明的目的在于提供一种铁皮石斛试管苗生根培养基及其制备方法,该培养基促进铁皮石斛试管苗生根速度块,根须长度长,粗壮,且不易断根,且制备方法简单,长期存放不易染菌,简约了生产成本。
为解决上述技术问题,本发明采取的技术方案为:
一种铁皮石斛试管苗生根培养基,以1/2ms培养基为基础培养基,还包括其他组分如下所示:香蕉汁20-80g/l、珍珠粉1-4g/l,牛油果汁12-30g/l,琼脂粉12-28g/l,肌醇0.1-0.2g/l,白糖20-38g/l,盐酸硫胺素0.4-1.2×10-4g/l,盐酸吡哆醇01-0.4×10-4g/l,甘氨酸0.4-0.8×10-3g/l,肌醇0.08-0.14×10-4g/l,芦荟提取物2-8g/l。
作为优选方案的是一种铁皮石斛试管苗生根培养基,以1/2ms培养基为基础培养基,还包括其他组分如下所示:香蕉汁60g/l、珍珠粉2g/l,牛油果汁28g/l,琼脂粉18g/l,肌醇0.15g/l,白糖35g/l,盐酸硫胺素1.0×10-4g/l,盐酸吡哆醇0.1×10-4g/l,甘氨酸0.5×10-3g/l,肌醇0.10×10-4g/l,芦荟提取物6g/l。
作为优选方案的是,所述珍珠粉和琼脂粉的目数为200-380目。
作为优选方案的是,所述1/2ms培养基的组分按照质量份数包括以下组分:硫酸镁12-30份,硫酸铁12-29份,钼酸钠2-14份,去离子水50-70份,碘化钾0.1-0.4份,氯化钴4-9份,磷酸二氢钾0.1-0.8份,硫酸锰2-8份,氯化镍1-4份,硝酸铵4-10份。
上述铁皮石斛试管苗生根培养基的制备方法,包括以下步骤:步骤1,按照需要取得个原料;步骤2,将香蕉汁、牛油果汁、肌醇、白糖、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、甘氨酸、肌醇、芦荟提取物混合搅拌均匀,并加热至60-80℃,再加入珍珠粉、琼脂粉240-350rpm的转速搅匀得第一混合物;步骤3,将第一混合物喷雾干燥后的细粉等离子照射1-3s后,投入80-90℃的ms培养基中搅匀,再分装后灭菌备用,即可。
作为优选方案的是,所述步骤2中搅拌速度为350rpm。
作为优选方案的是,所述步骤3中喷雾干燥的温度为300℃。
作为优选方案的是,所述步骤3中等离子的照射频率为1280hz。
与现有技术相比,本发明培养基组分简单,协同作用好,刺激铁皮石斛试管苗生根,长壮,珍珠粉的加入为培养基提供了输空隙培养基,有利于嫩弱根须再培养基中生存,炼苗时便于清理根须上的培养基,另外,本发明的配方采用植物成分较多,不仅环保还能保护好长久抑菌,且制备方法简单,适合产业化。
具体实施方式
下面结合实施例详细说明本发明的优选技术方案。
实施例1
一种铁皮石斛试管苗生根培养基,以1/2ms培养基为基础培养基,还包括其他组分如下所示:香蕉汁20g/l、珍珠粉1g/l,牛油果汁12g/l,琼脂粉12g/l,肌醇0.1g/l,白糖20g/l,盐酸硫胺素0.4×10-4g/l,盐酸吡哆醇0.1×10-4g/l,甘氨酸0.4×10-3g/l,肌醇0.08×10-4g/l,芦荟提取物2g/l。
所述珍珠粉和琼脂粉的目数为200目。
所述1/2ms培养基的组分按照质量份数包括以下组分:硫酸镁12份,硫酸铁12份,钼酸钠2份,去离子水50份,碘化钾0.1份,氯化钴4份,磷酸二氢钾0.1份,硫酸锰2份,氯化镍1份,硝酸铵4份。
上述铁皮石斛试管苗生根培养基的制备方法,包括以下步骤:步骤1,按照需要取得个原料;步骤2,将香蕉汁、牛油果汁、肌醇、白糖、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、甘氨酸、肌醇、芦荟提取物混合以350rpm的速度搅拌均匀,并加热至60℃,再加入珍珠粉、琼脂粉240rpm的转速搅匀得第一混合物;步骤3,将第一混合物在300℃下喷雾干燥后的细粉用1280hz等离子照射1s后,投入80℃的ms培养基中搅匀,再分装后灭菌备用,即可。
实施例2
一种铁皮石斛试管苗生根培养基,以1/2ms培养基为基础培养基,还包括其他组分如下所示:香蕉汁60g/l、珍珠粉2g/l,牛油果汁28g/l,琼脂粉18g/l,肌醇0.15g/l,白糖35g/l,盐酸硫胺素1.0×10-4g/l,盐酸吡哆醇0.1×10-4g/l,甘氨酸0.5×10-3g/l,肌醇0.10×10-4g/l,芦荟提取物6g/l。
所述珍珠粉和琼脂粉的目数为300目。
所述1/2ms培养基的组分按照质量份数包括以下组分:硫酸镁25份,硫酸铁20份,钼酸钠10份,去离子水60份,碘化钾0.2份,氯化钴5份,磷酸二氢钾0.5份,硫酸锰6份,氯化镍3份,硝酸铵7份。
上述铁皮石斛试管苗生根培养基的制备方法,包括以下步骤:步骤1,按照需要取得个原料;步骤2,将香蕉汁、牛油果汁、肌醇、白糖、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、甘氨酸、肌醇、芦荟提取物混合以350rpm的速度搅拌均匀,并加热至70℃,再加入珍珠粉、琼脂粉300rpm的转速搅匀得第一混合物;步骤3,将第一混合物在300℃下喷雾干燥后的细粉用1280hz等离子照射2s后,投入85℃的ms培养基中搅匀,再分装后灭菌备用,即可。
实施例3
一种铁皮石斛试管苗生根培养基,以1/2ms培养基为基础培养基,还包括其他组分如下所示:香蕉汁80g/l、珍珠粉4g/l,牛油果汁30g/l,琼脂粉28g/l,肌醇0.2g/l,白糖20-38g/l,盐酸硫胺素1.2×10-4g/l,盐酸吡哆醇0.4×10-4g/l,甘氨酸0.8×10-3g/l,肌醇0.14×10-4g/l,芦荟提取物8g/l。
所述珍珠粉和琼脂粉的目数为380目。
所述1/2ms培养基的组分按照质量份数包括以下组分:硫酸镁30份,硫酸铁29份,钼酸钠14份,去离子水70份,碘化钾0.1-0.4份,氯化钴4-9份,磷酸二氢钾0.8份,硫酸锰8份,氯化镍4份,硝酸铵10份。
上述铁皮石斛试管苗生根培养基的制备方法,包括以下步骤:步骤1,按照需要取得个原料;步骤2,将香蕉汁、牛油果汁、肌醇、白糖、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、甘氨酸、肌醇、芦荟提取物混合以350rpm的速度搅拌均匀,并加热至80℃,再加入珍珠粉、琼脂粉350rpm的转速搅匀得第一混合物;步骤3,将第一混合物在300℃下喷雾干燥后的细粉用1280hz等离子照射3s后,投入90℃的ms培养基中搅匀,再分装后灭菌备用,即可。
实施例4
一种铁皮石斛试管苗生根培养基,以1/2ms培养基为基础培养基,还包括其他组分如下所示:香蕉汁80g/l、珍珠粉4g/l,牛油果汁30g/l,琼脂粉28g/l,肌醇0.2g/l,白糖20-38g/l,盐酸硫胺素1.2×10-4g/l,盐酸吡哆醇0.4×10-4g/l,甘氨酸0.8×10-3g/l,肌醇0.14×10-4g/l,芦荟提取物8g/l。
所述珍珠粉和琼脂粉的目数为380目。
所述1/2ms培养基的组分按照质量份数包括以下组分:硫酸镁12份,硫酸铁12份,钼酸钠2份,去离子水50份,碘化钾0.1份,氯化钴4份,磷酸二氢钾0.1份,硫酸锰2份,氯化镍1份,硝酸铵4份。
上述铁皮石斛试管苗生根培养基的制备方法,包括以下步骤:步骤1,按照需要取得个原料;步骤2,将香蕉汁、牛油果汁、肌醇、白糖、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、甘氨酸、肌醇、芦荟提取物混合以350rpm的速度搅拌均匀,并加热至80℃,再加入珍珠粉、琼脂粉350rpm的转速搅匀得第一混合物;步骤3,将第一混合物在300℃下喷雾干燥后的细粉用1280hz等离子照射3s后,投入90℃的ms培养基中搅匀,再分装后灭菌备用,即可。
对比例1
申请号为201510063559.1的实施例1。
用实施例1-4和对比例1的培养基培养铁皮石斛试管苗3个月后,记录试管苗的根长、根粗和根数,并记录于下表中。
从表中可以看出,本发明培养基有助于试管苗生根,根长且粗,有利于铁皮石斛炼苗,提高炼苗的成功率。另外,培养基中混合珍珠粉为基质提供一定的缝隙,有利于根须的攀爬,提高其生命力,因此本发明培养基具有良好的市场前景。