g
硼酸6.2 mg
七水硫酸锌8.6 mg
一水硫酸猛16.9 mg
碘化钾0.83 mg
二水钼酸钠0.25 mg
六水氯化钴0.025 mg
五水硫酸铜0.025 mg
硅酸钾100 mg
六水硫酸镍0.005 mg
肌醇100 mg
甘氨酸2.0 mg
烟酸0.5 mg
盐酸啦卩多醇0.5 mg
盐酸硫胺素0.1 mg
琼脂6g
鹿糖30g
IBA5.0mg
活性炭20g
95% 乙醇1ml 其余为水；
结果是，可诱导出成熟体胚16.80个，子叶胚12.90个，体胚死亡率4.0% ;生根率77.0
%，生根数2.40个，根长1.79cm。
[0021] 实施例3
步骤同实施例1，对象为金银花品种“花瑶晚熟”；
100ml所述直接体胚诱导培养基由如下配比的原料组成:
硝酸铵1200 mg
硝酸钾900 mg
硫酸镁180.7 mg
氯化钙332.2 mg
磷酸二氢钾170 mg
七水硫酸亚铁27.8 mg
乙二胺四乙酸二钠盐37.26 mg
硼酸6.2 mg
七水硫酸锌8.6 mg
一水硫酸猛16.9 mg
碘化钾0.83 mg
二水钼酸钠0.25 mg
六水氯化钴0.025 mg五水硫酸铜0.025 mg
硅酸钾200 mg
六水硫酸镍0.005 mg
肌醇100 mg
甘氨酸2.0 mg
烟酸0.5 mg
盐酸啦卩多醇0.5 mg
盐酸硫胺素0.1 mg
琼脂6g
鹿糖30g
6-BA2.0 mg
NAA0.03mg
95% 乙醇1ml1000ml所述生根培养基由如下配比的原料组成:
硝酸钱600 mg
硝酸钾450 mg
硫酸镁90.35 mg
氯化I丐166.1 mg
磷酸二氢钾85.0 mg
七水硫酸亚铁27.8 mg
乙二胺四乙酸二钠盐37.26 mg
硼酸6.2 mg
七水硫酸锌8.6 mg
一水硫酸猛16.9 mg
碘化钾0.83 mg
二水钼酸钠0.25 mg
六水氯化钴0.025 mg
五水硫酸铜0.025 mg
硅酸钾100 mg
六水硫酸镍0.005 mg
肌醇100 mg
甘氨酸2.0 mg
烟酸0.5 mg
盐酸啦卩多醇0.5 mg
盐酸硫胺素0.1 mg
琼脂6g
鹿糖30g
IBA4.0mg
活性炭20g 95%乙醇7ml
结果是，可诱导出成熟体胚18.36个，子叶胚15.89个，体胚死亡率1.0%，生根率82.0%，生根数2.42个，根长1.88cm。
【主权项】
1.一种金银花直接体胚发生和植株再生的直接体胚培养基，其特征在于，100ml所述直接体胚诱导培养基由如下配比的原料组成: 硝酸铵1000—1400 mg 硝酸钾700— 1100 mg 硫酸镁175—185 mg 氯化钙330— 335 mg 磷酸二氢钾165—175 mg 七水硫酸亚铁25— 30 mg 乙二胺四乙酸二钠盐35— 40 mg 硼酸5.5一6.5 mg 七水硫酸锌8一9 mg 一水硫酸猛15—18 mg 碘化钾0.8—0.85 mg 二水钼酸钠0.2—0.3 mg 六水氯化钴0.02—0.03 mg 五水硫酸铜0.02—0.03 mg 硅酸钾150— 250 mg 六水硫酸镍0.003—0.007 mg 肌醇90—110 mg 甘氨酸1.8 — 2.2 mg 烟酸0.3—0.7 mg 盐酸吡哆醇0.3—0.7 mg 盐酸硫胺素0.08—0.12 mg 琼脂5— 7 g 蔗糖28— 32 g .6_BA1.8一2.2 mg NAA0.01—0.05 mg .95% 乙醇5—15 ml 其余为水。2.如权利要求1所述的直接体胚诱导培养基，其特征在于，100ml所述直接体胚诱导培养基由如下配比的原料组成: 硝酸铵1200 mg 硝酸钾900 mg 硫酸镁180.7 mg 氯化钙332.2 mg 磷酸二氢钾170 mg 七水硫酸亚铁27.8 mg 乙二胺四乙酸二钠盐37.26 mg 硼酸6.2 mg 七水硫酸锌8.6 mg 一水硫酸猛16.9 mg 碘化钾0.83 mg 二水钼酸钠0.25 mg 六水氯化钴0.025 mg 五水硫酸铜0.025 mg 硅酸钾200 mg 六水硫酸镍0.005 mg 肌醇100 mg 甘氨酸2.0 mg 烟酸0.5 mg 盐酸啦卩多醇0.5 mg 盐酸硫胺素0.1 mg琼脂6 g鹿糖30 g .6-BA2.0 mg NAA0.01—0.05 mg 95% 乙醇5—15 ml 其余为水。3.一种金银花直接体胚发生和植株再生的生根培养基，其特征在于，100ml所述生根培养基由如下配比的原料组成: 硝酸铵500— 700 mg 硝酸钾400— 500 mg 硫酸镁85—95 mg 氯化钙160—170 mg 磷酸二氢钾80— 90mg 七水硫酸亚铁25— 30 mg 乙二胺四乙酸二钠盐35— 40 mg 硼酸5.5一6.5 mg 七水硫酸锌8一9 mg 一水硫酸猛15—18 mg 碘化钾0.8—0.9 mg 二水钼酸钠0.2—0.3 mg 六水氯化钴0.02—0.03 mg 五水硫酸铜0.02—0.03mg 硅酸钾80—120 mg 六水硫酸镍0.003—0.007mg 肌醇90—110 mg 甘氨酸1.8 — 2.2 mg 烟酸0.4—0.6 mg 盐酸P比卩多醇0.4一0.6 mg 盐酸硫胺素0.08—0.12 mg琼脂4一8 g 蔗糖25— 35 g IBA3.0一5.0 mg 活性炭O — 20g 95% 乙醇5—15 ml 其余为水。4.如权利要求3所述的生根培养基，其特征在于，100ml所述生根培养基由如下配比的原料组成: 硝酸钱600 mg 硝酸钾450 mg 硫酸镁90.35 mg 氯化I丐166.1 mg 磷酸二氢钾85.0 mg 七水硫酸亚铁27.8 mg 乙二胺四乙酸二钠盐37.26 mg 硼酸6.2 mg 七水硫酸锌8.6 mg 一水硫酸猛16.9 mg 碘化钾0.83 mg 二水钼酸钠0.25 mg 六水氯化钴0.025 mg 五水硫酸铜0.025 mg 硅酸钾100 mg 六水硫酸镍0.005 mg 肌醇100 mg 甘氨酸2.0 mg 烟酸0.5 mg 盐酸啦卩多醇0.5 mg 盐酸硫胺素0.1 mg琼脂6 g鹿糖30 g IBA3.0一5.0 mg 活性炭O或20g. 95% 乙醇5—15 ml 其余为水。5.一种金银花直接体胚发生和植株再生方法，其特征在于，所述方法是将金银花无菌叶片接种于权利要求1或2所述的直接体胚诱导培养基上培养，待直接体胚诱导培养基上长出子叶胚后，将子叶胚转接到权利要求3或4所述的生根培养基中培养，至子叶胚发育成再生小植株。6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法是将金银花无菌叶片接种于直接体胚诱导培养基上培养，75— 80天后将直接体胚诱导培养基上长出的子叶胚转接到生根培养基中培养，75— 80天后发育成再生小植株；直接体胚诱导培养基培养条件为:暗培养.1.5—2.5周，然后进行光照培养，每天光照时间为10 —14小时，光照强度为3500-3900LUX，温度为20—25°C;生根培养基培养条件为:光照培养，每天光照时间为10 —14小时，光照强度为3500-3900LUX，温度为20— 25°C ;将再生小植株炼苗I一 1.5周后移栽至基质中培养，所述基质由泥炭土和珍珠岩按体积比(1.5-2.5):1组成。
【专利摘要】本发明公开了一种金银花直接体胚发生和植株再生的培养基及方法，将金银花无菌叶片接种在直接体胚诱导培养基上，开始暗培养两周，然后置于光下培养，诱导体胚发育至子叶胚阶段，待诱导出一定数量的子叶胚后，转接到生根培养基中继续培养，进一步发育成健壮的再生小植株。本发明是一种操作简单、高效、低成本的金银花体胚繁殖技术，发生频率高，无畸形胚产生，组培苗生长健壮，可广泛应用于金银花组培育苗，成活率达99%以上，生产成本降低40%以上。本发明的推广应用,将极大提高金银花良种种苗的供应能力，经济效益显著。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN105123521
【申请号】CN201510558171
【发明人】陈建军, 李永欣, 王晓明, 曾慧杰, 蔡能, 乔中全
【申请人】湖南省林业科学院
【公开日】2015年12月9日
【申请日】2015年9月6日