一种同步纯化并制备高营养蛋白粒子的方法及其产品与流程

本发明涉及一种同步纯化并制备高营养蛋白粒子的方法及其产品的方法，特别涉及一种高纯度蛋白的纯化并同时提高生物利用度蛋白的制备方法。

背景技术：

大豆浓缩蛋白是利用大豆为原料，通过粉碎、去皮、浸提、分离、洗涤、干燥等加工工艺，除去大豆中的油脂及非蛋白组分后制作而成。传统工艺制备的大豆浓缩蛋白溶解性和分散性较低，肉眼可观察到所形成的分散在水中的浑浊及颗粒状分散相；且产品纯度只能维持在60％左右，严重影响了人体对其吸收利用。与传统制备工艺相比，纳米化之后可增强凝胶性、乳化性、水溶性、及分散性，提高了综合利用率及生物利用率，保持了原有的食用功效，降低了生产成本。

反溶剂重结晶法是通过改变在原溶液体系饱和溶液时期复合营养型蛋白原始粉末的溶解度，即在溶剂中添加对复合型蛋白原粉溶解性能差的溶剂，使原溶剂的溶能力降低，使原粉颗粒重结晶后析出，从而达到减小原粉粒径，提升微粉生物利用度的目的。此法常作为制备生物活性粉体的一种手段。因其投入较小、操作过程简便、大规模产生微细颗粒可能性高的特点，重结晶工艺的前景相比传统低水溶性蛋白微细颗粒的制备工艺前景优良。专利公开了一种大豆浓缩蛋白微细颗粒的制备方法及应用，其制备思路为：首先，称取大豆浓缩蛋白原粉于一号烧杯，搅拌并溶解于乙醇中，制备成溶液。其次，将去离子水溶剂置于二号烧杯后加入转子，并将二号烧杯放在转子搅拌机上，启动转子搅拌机至实验要求的转速。最后为反溶剂操作实验，溶液喷洒装置与蠕动泵连接完成后，使大豆浓缩蛋白乙醇溶液经喷洒装置喷入一号烧杯的去离子水即反溶剂中搅拌，进行沉淀重结晶，得到乳白色的微细大豆蛋白悬浮液。利用抽滤装置对悬浮液进行第一次抽滤分离，并用去离子水进行二次洗涤后抽滤，对洗涤后的大豆浓缩蛋白粒子进行干燥，而后将得到的大豆浓缩蛋白纳米颗粒收集密封。

技术实现要素：

本发明公开了一种同步纯化并制备高营养蛋白粒子的方法及其产品，包括步骤：

(1)将纯度30％～50％大豆浓缩蛋白与有机溶剂比例按照1:10～1:30混合，将一定浓度的溶液加入到筛选好的反相溶剂中，在0℃～20℃下，匀速搅拌体系中使得蛋白粒子从反相溶液中析出一定的小粒径；

(2)通过一定的手段除去混合溶剂而得到蛋白小分子聚合浸膏，采用相应的溶剂对蛋白浸膏进行洗脱，通过冷冻干燥收集产品；

(3)混合溶剂与反溶剂的回收；

在本发明中，优选的，步骤(1)大豆蛋白粉体中的蛋白质纯度为35％～50％；

在本发明中，优选的，步骤(1)中所述的大豆浓缩蛋白粉与有机溶剂比例为1:20；

在本发明中的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的大豆蛋白溶液与反相溶剂的体积比为1:5，体系温度为10℃；

在本发明中，优选的，步骤(1)中所述的匀速搅拌体系搅拌速度范围为8000r/min～ 10000r/min；

在本发明中，优选的步骤(2)中所述的去除混合溶剂的方法为离心法；

在本发明中，优选的步骤(2)中所述的洗脱溶剂为乙醇、乙酸乙酯、水中的中的至少一种。

在本发明中，优选的步骤(2)中所述的除去残留溶剂方式为喷雾干燥、真空冷冻干燥、烘干法中的至少一种；

在本发明中，优选的步骤(3)中所述的有机溶剂回收方法是高温干燥法、冷凝法或旋转蒸发法中的至少一种；

此外，本发明的采用的反溶剂法操作简单，成本低廉，易于产业化。同以往传统方法相比，本发明的优点：

1.根据非蛋白不溶解的原理，通过配置蛋白溶液杂质的析出，本方法大幅度的增加了蛋白的纯度；

2.本发明大幅缩小了蛋白的粒径，增加蛋白的比表面积，提升水溶性；

3.本发明实现有机溶剂回收再利用，对环境友好。

附图说明

图1为制备好分散均匀的蛋白小分子，在扫描电镜下可观测到蛋白小分子的排列清晰分明，有层次感；分子间不存在团聚现象，由此可推断出结论：蛋白分子具有较大的比表面积。

图2为激光粒度下的蛋白粒径分析图谱，通过粒径分布区域可得知，蛋白小分子在 200-300纳米的堆聚数量最高，因此可推断该产品的水溶性好，易于为人体所吸收。

具体实施方式

下面通过具体实施例进一步描述本发明，使得本发明内容更为清晰。以下实施例仅仅是范例性的，不会对本发明的范围做出任何限制。本领域技术人员在不背离本发明思想及其范围下可对技术方案做出修改和替换，但这些改动均会落入本发明的保护范围内。

实例1

配置浓度为50mg/ml的大豆浓缩蛋白乙醇溶液100ml，缓慢释放到300ml的超纯水中，在10℃的温度、9000r/min的高速匀浆条件下缓慢搅拌20min，通过4000r/min的离心去除去混合溶剂后，用500ml的纯净水洗脱滤饼三次，将蛋白粒子放入-70℃超低温冰箱冷冻5h，置入真空冷冻干燥后收集产品。

实例2

首先配置浓度为100mg/ml的大豆浓缩蛋白NaOH溶液100ml，缓慢释放到200ml的超纯水中，在15℃的温度、10000r/min的高速匀浆条件下缓慢搅拌15min，通过4000r/min的离心去除去混合溶剂后，用400ml的纯净水洗脱滤饼三次，加入70％乙醇溶解蛋白后喷雾干燥收集。