Crf受体拮抗剂的制作方法

专利名称：Crf受体拮抗剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及三环衍生物、其制备方法、含有该化合物的药物组合物以及其在治疗疾病中应用。
第一个促肾上腺皮质激素-释放因子(CRF)是从羊下丘脑分离得到并证实它是一种41个氨基酸的肽(Vale等，《科学》(Science)，2131394-397，1981)。已经发现，CRF能引起内分泌、神经和免疫系统功能产生显著变化。据信CRF是促肾上腺皮质激素(″ACTH″)、β-内啡肽及其他阿片促黑细胞-促肾上腺皮质激素原(″POMC″)衍生的肽从垂体前叶的基础释放和应激-释放的主要生理调节剂(Vale等人，《科学》(Science)，2131394-397，1981)。
除了刺激ATCH和POMC产生的作用外，CRF似乎是重要的中枢神经系统的神经递质之一并在综合身体对应激的全面反应中起着重要作用。
直接向大脑给药CRF可以引起与在暴露于应激环境的动物中所观察到的相同的行为、生理和内分泌反应。
因此，临床资料表明CRF受体拮抗体可能代表新的抗抑郁的和/或抗焦虑的药物，可用于治疗显示出CRF分泌过多的神经精神疾病。
最早的CRF受体拮抗剂是肽(参见，例如Rivier等，美国专利4,605,642；Rivier等，《科学》(Science)，224889，1984)。尽管这些肽证实了CRF受体拮抗剂能够减弱CRF的药理学应答，但是CRF肽受体拮抗剂存在着肽疗法的常见缺点，包括缺乏稳定性和口服活性有限。最近报道了小分子CRF受体拮抗剂。
WO 00/27846公开了通式(A)结构的CRF受体拮抗剂 其条件是A，B和C中至少一个为氮原子，A，B和C不都是氮原子且A-B或B-C为双键，A，B和C可以为氮原子或碳原子。
由于CRF的生理学重要性，开发具有显著的CRF受体结合活性并且可以拮抗CRF受体的生物活性的小分子仍然是向往的目标。这些CRF受体拮抗体将可以用于治疗内分泌、精神病学和神经病学的病症或疾病，包括一般的与应激相关的疾病。
虽然通过给药CRF受体拮抗剂来调节CRF已取得很大进展，但本领域中仍需要有效的小分子CRF受体拮抗剂。还需要含有所述CRF受体拮抗剂的药物组合物以及使用该拮抗剂例如治疗与应激相关的病症的方法。本发明满足了这些需要，并且具有其它相关优点。
特别地，本发明涉及新的化合物，它是对促肾上腺皮质激素-释放因子(CRF)受体具有特异性和有效性的拮抗剂。
本发明提供了通式(I)化合物，包括其立体异构体、前药以及药学上可接受的盐或者溶剂合物 其中R为芳基或者杂芳基，其中每个上述R基团可被1-4个独立地选自如下基团取代卤素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，卤代C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，卤代C1-C6烷氧基，C1-C6单或者双二烷基氨基，硝基，氰基以及基团R4；R1为氢，C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，卤代C1-C6烷基，卤代C1-C6烷氧基，氨基，卤代氰基；R2为氢或者C(H)n(R5)q(CH2)pZR6；R3为氢，C2-C6烯基，C2-C6炔基或者[CH(R5)(CH2)p]mZR6；R4为C3-C7环烷基，其可含有1个或者多个双键；芳基；或者5-6员杂环基；其中，每一上述基团R4可以被一个或者多个选自如下基团取代卤素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，卤代C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，卤代C1-C6烷氧基，C1-C6单或者双烷基氨基，硝基，以及氰基；
R5为氢，C2-C6烯基，C2-C6炔基或者(CH2)pZR6；R6I为C1-C6烷基，其可被一个或者多个选自如下基团取代卤素，卤代C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，卤代C1-C6烷氧基，C1-C6烷氧基，C1-C6单或者双烷基氨基，硝基，氰基以及R4基团；Y和X独立地选自碳或者氮；m和n独立地选自0或者1；p是0或者选自1到4的整数；q是1或者2；Z是键，O，NH或者S。
本发明中的游离碱氨基化合物的酸加成盐可通过现有技术中的众所周知方法制备，并可从有机酸或无机酸形成。适宜的有机酸包括马来酸，苹果酸，富马酸，苯甲酸，抗坏血酸，琥珀酸，甲磺酸，对甲苯磺酸，乙酸，草酸，丙酸，酒石酸，水杨酸，柠檬酸，葡糖酸，乳酸，扁桃酸，肉桂酸，天冬氨酸，硬脂酸，棕榈酸，乙醇酸，谷氨酸，以及苯磺酸。适宜的无机酸包括盐酸，氢溴酸，硫酸，磷酸，以及硝酸。因此，式(I)化合物的“药学上可接受的盐”将包括任何和所有可接受的盐的形式。
溶剂合物可以是，例如，水合物。
下文所述内容涉及本发明化合物包括具有通式(I)结构的化合物，以及其药学上可接受的盐，以及其药学上可接受的溶剂合物。
此外，前药也包含在本发明的内容中。前药是指在被给药病患者后在其体内释放通式I化合物的任何以共价键合的载体。前药通常是通过裂解修饰，或者常规处理，或者在体内的方式对其功能基团进行修饰来制备的。前药包括，例如，本发明的化合物，其中羟基、氨基、巯基与任何基团键合，并且在其被给药病人后，该基团被裂解，形成羟基、氨基、巯基。因此，前药的代表性化合物包括(但不局限于)化合物(I)中羟基，巯基和氨基官能团的乙酸酯，甲酸酯和苯甲酸酯衍生物。更进一步，在其为羧酸(-COOH)时，可使用其酯的形式，例如甲酯，乙酯等。
关于其立体异构体，具有通式(I)结构的化合物可能含有手性中心，并可能存在其内消旋体、外消旋体以及独立的对映异构体或者非对映异构体。所有这些异构体形式及其混合物都包括在本发明所述的内容中。此外，化合物(I)的一些结晶形式可能以多晶型物存在，包含在本发明中。
在本发明中使用的术语C1-C6烷基作为基团或者其中一部分是指含有1到6个碳原子的直链或者支链烷基；例如上述基团包括甲基，乙基，丙基，异丙基，正丁基，异丁基，叔丁基，戊基或者己基。
术语C3-C7环烷基是指含有3至7个碳原子的非芳香单环烃环，例如，环丙基，环丁基，环戊基，环己基或者环庚基；并且不饱和环烷基包括环戊烯基和环己烯基等。
术语卤素是指氟原子，氯原子，溴原子或者碘原子。
术语卤代C1-C6烷基是指具有一个或者两个碳原子且其中至少一个氢原子被卤原子取代的烷基，例如三氟甲基等。
术语C2-C6烯基定义为含有一个或者多个双键以及2到6个碳原子的直链或支链烃基，例如，乙烯基，2-丙烯基，3-丁烯基，2-丁烯基，2-戊烯基，3-戊烯基，3-甲基-2-丁烯基或者3-己烯基等。
术语C1-C6烷氧基可能包括直链或者支链烷氧基，例如甲氧基，乙氧基，丙氧基，丙-2-氧基，丁氧基，丁-2-氧基或者甲基丙-2-氧基等。
术语卤代C1-C6烷氧基是被至少被一个卤素，优选氟原子取代的C1-C6烷氧基，例如OCHF2，或者OCF3。
术语C2-C6炔基定义为含有一个或者多个三键以及2到6个碳原子的直链或支链烃基，包括乙炔基，丙炔基，1-丁炔基，1-戊炔基，3-甲基-1-丁炔基等。
术语C1-C6单或双烷基氨基代表独立地被一个或两个如前所定C1-C6烷基取代的氨基。
术语芳基是指芳香碳环基团，例如苯基、联苯基或者萘基。
术语杂芳基是指5-10员芳香杂环，且其中至少一个杂原子选自氮，氧和硫，并且含有至少一个碳原子，包括单环或者多环体系。
代表性杂芳基包括(但不限于)呋喃基，苯并呋喃基，噻吩基，苯并噻吩基，吡咯基，吲哚基，异吲哚，氮杂吲哚基，吡啶基，喹啉基，异喹啉基，噁唑基，异噁唑基，苯并噁唑基，吡唑基，咪唑基，苯并咪唑基，噻唑基，苯并噻唑基，异噻唑基，哒嗪基，嘧啶基，吡嗪基，三嗪基，1，2-二氮杂萘基，2，3-二氮杂萘基和喹唑啉基。
术语杂环基是指5-7员单环或者7-10员多环杂环基，可以是饱和的，不饱和的或者芳香性的，并且含有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子，并且其中的氮和硫的杂原子可任选地被氧化，并且氮原子可被任选地季铵盐化，包括与苯环稠合的二环或者三环(或者更多)杂环。杂环也可通过任何杂原子和碳原子相连。杂环还包括如上所定义的杂芳基。因此，除了前面所述的杂芳基外，杂环还包括(但不限于)吗啉基，吡咯烷酮基，吡咯烷基，哌啶基，乙内酰脲基，戊内酰胺基，环氧乙烷基，环氧丁烷基，四氢呋喃基，四氢吡喃基，四氢吡啶基，四氢嘧啶基，四氢噻吩基，四氢噻喃基，四氢嘧啶基，四氢噻吩基，四氢噻喃基等。
根据上述定义，术语5-6员杂环是指，含有1-4个独立地选自N，O，S杂原子，且其中N和S杂原子可任选地被氧化，N杂原子可任选地被季铵盐化的，饱和、或不饱和或芳香性的5-6员单杂环。杂环可通过杂原子与碳原子相连。因此，该术语包括(但不限于)吗啉基，吡啶基，吡嗪基，吡唑基，三唑基，咪唑基，噁二唑基，噁唑基，吡咯烷酮基，吡咯烷基，哌啶基，乙内酰脲基，戊内酰胺基，环氧乙烷基，环氧丁烷基，四氢呋喃基，四氢吡喃基，四氢吡啶基，四氢嘧啶基，四氢噻吩基，四氢噻喃基，四氢嘧啶基，四氢噻吩基，四氢噻喃基等。
本发明具有代表性的化合物包括具有如下通式结构(II)和(III)的化合物 其中，X各自对应以各碳原子或者氢原子。
因此，当X为碳原子时，本发明代表性化合物包括具有如下通式(IIa)，(IIb)，(IIc)，(IId)的化合物 基于X的不同选择，本发明具有代表性的化合物还包括具有通式(Ia-1)，(Ib-1)，(Ic-1)结构的化合物
基于X和Y的不同选择，本发明具有代表性的化合物包括，但不限于，具有通式(I-1)，(I-2)，(I-3)和(I-4)结构的化合物。
本发明更具体的实施方案包括，但不限于，具有通式(I)；(II)，(III)，(IIa)，(IIb)，(IIc)，(IId)；(Ia-1)，(Ib-1)，(Ic-1)；(I-1)，(I-2)，(I-3)，(I-4)结构的化合物其中·R2和R3不同时为氢本发明还更具体的实施方案包括，但不限于，具有通式(I)，(II)，(III)，(IIa)，(IIb)，(IIc)，(IId)；(Ia-1)，(Ib-1)，(Ic-1)；(I-1)，(I-2)，(I-3)，(I-4)结构的化合物其中·R1是C1-C3烷基或卤代C1-C3烷基，优选甲基或三氟甲基。
本发明优选实施方案包括，但不限于，具有通式(I)；(II)，(III)，(IIa)，(IIb)，(IIc)，(IId)；(Ia-1)，(Ib-1)，(Ic-1)；(I-1)，(I-2)，(I-3)，(I-4)结构的化合物其中·R2和R3不同时为氢，且，·R1是C1-C3烷基或者卤代C1-C3烷基，优选甲基或者三氟甲基；本发明更优选的实施方案包括，但不限于具有通式(I)；(II)，(III)，(IIa)，(IIb)，(IIc)，(IId)；(Ia-1)，(Ib-1)，(Ic-1)；(I-1)，(I-2)，(I-3)，(I-4)结构的化合物其中
·R2和R3不同时为氢；·R1是C1-C3烷基或者卤代C1-C3烷基，优选甲基或者三氟甲基；·R是选自2，4-二氯苯基，2-氯-4-甲基苯基，2-氯-4-三氟甲基，2-氯-4-甲氧基苯基，2，4，5-三甲基苯基，2，4-二甲基-苯基，2-甲基-4-甲氧基苯基，2-甲基-4-氯苯基，2-甲基-4-三氟甲基苯基，2，4-二甲氧基苯基，2-甲氧基-4-三氟甲基苯基，2-甲氧基-4-氯苯基，3-甲氧基-4-氯苯基，2，5-二甲氧基-4-氯苯基，2-甲氧基-4-异丙基苯基，2-甲氧基-4-三氟甲基苯基，2-甲氧基-4-异丙基苯基2-甲氧基-4-甲基苯基，2-三氟甲基-4-氯苯基，2，4-二-三氟甲基苯基，2-三氟甲基-4-甲基苯基，2-三氟甲基-4-甲氧基苯基，2-溴-4-异丙基苯基，4-甲基-6-二甲基氨基吡啶-3-基，4-二甲基氨基-6-甲基-吡啶-3-基，6-二甲基氨基-吡啶-3-基以及4-二甲基氨基-吡啶-3-基的芳基。
本发明优选的化合物包括5-(2，4-二氯苯基)-1-(1-乙基丙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(I-1-1)；5-(2，4-二氯苯基)-1-(2-乙基丁基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5，5a，8b-八氢-1，5，6，8-四氮杂苊(I-1-2)；5-(2，4-二氯苯基)-1-(2-甲氧基-1-甲氧基甲基乙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5，5a，8b-八氢-1，5，6，8-四氮杂苊(I-1-3)；7-甲基-1-(1-丙基丁基)-5-[4-(1，1，2-三氟乙基)-2-三氟甲基苯基]-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(I-1-4)；7-甲基-1-(1-丙基丁基)-5-[4-(1，1，2-三氟乙基)-2-三氟甲基苯基]-1，2，2a(S)，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊；7-甲基-1-(1-丙基丁基)-5-[4-(1，1，2-三氟乙基)-2-三氟甲基苯基]-1，2，2a-(R)，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊；5-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1-(1-丙基丁基)-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(I-1-5)；5-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1-(1-丙基丁基)-1，2，2a-(S)，3，4，5，5a，8b-八氢-1，5，6，8-四氮杂苊；5-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1-(1-丙基丁基)-1，2，2a-(R)，3，4，5，5a，8b-八氢-1，5，6，8-四氮杂苊；9-(2，4-二氯苯基)-4-(1-乙基丙基)-2-甲基-5，6，6a，7，8，9-六氢-4H-1，3，4-三氮杂非那烯(异构体1)和9-(2，4-二氯苯基)-4-(1-乙基丙基)-2-甲基-5，6，6a，7，8，9-六氢-4H-1，3，4-三氮杂非那烯(异构体2)，(2-1-1)；5-环丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(3-1-1)；1-(2，4-二氯苯基)-5-(2-甲氧基乙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(3-1-2)；1-(2，4-二氯苯基)-5-(1-乙基丙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(3-1-3)；1-(2，4-二氯苯基)-5-(2-乙基丁基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(3-1-4)；1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-5-(1-丙基丁基)-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(3-1-5)；7-甲基-5-(1-丙基丁基)-1-[4-(1，1，2-三氟-乙基)-2-三氟甲基苯基]-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(3-1-6)；5-环丙基甲基-1-(2，4-3二氯苯基)-7-甲基-4-丙基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(3-1-7)；4-丁基-5-环丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(3-1-8)；5-环丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-4-丙氧基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(3-1-9)；4，5-二丁基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(3-1-10)；5-(2，4-二氯苯基)-1-(1-乙基丙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，6，8-三氮杂苊(4-1-1)。
可通过下文所述的一般方法来制备化合物(I)，及其盐和溶剂合物。在下面的说明书中，除非另有不同说明，基团R，R1，R2，R3，R4，R5，R6，X，Y，Z，m，n，p和q与前面化合物(I)具有相同定义。
当R3不为氢且m为1时，化合物(I)相当于化合物(IV)，其中G对应前述R3的定义且其不为氢，并可通过由化合物(V)反应制备。
其中R7是C1-C4链状或者支链的烷基并且m为1，相当于化合物(VI)。化合物(VI)可与有机金属化合物GM任选地在路易斯酸如三氟化硼醚合物存在下反应，形成化合物(IV)， 其中M是金属。该反应中适宜的金属包括锂，铜和锰。
当R3为氢时，化合物(I)相当于通式(Ia)化合物，它可以通过在有机酸(如三氟乙酸)存在下通过还原化合物(V)来制备，化合物(V)中R7是氢，相当于化合物(Va)。本反应常用的还原试剂是三烷基硅烷(如三乙基硅烷)。该反应优选在非质子溶剂如二氯甲烷中进行。
当R3为氢时，化合物(IIb)相当于化合物(II)，它可通过如下一般图解所示的方法由化合物(VII)来制备 其中L是离去基，选自卤素优选氯和磺酸(例如甲磺酸，三氟甲磺酸)的活性残基，以及La代表能够使OLa成为良好的离去基的合适的活性基团(例如甲磺酸(mesylate)，三氟甲磺酸(triflate))。
在加热条件下，使用过量R2NH2(IX)，优选其作为溶剂进行反应。
可通过将化合物(VIII)中的烯丙基氧化为相应的醛化合物，接着进行原地环化并将其中的羟基转化成烷氧基来制备化合物(VI)，该反应将在后面的内容中详细描述。
该氧化反应可以在N-甲基吗啉氧化物(NMO)存在的条件下使用四氧化锇进行，然后使用过氧化钠处理。反应通常在水溶混的有机的溶剂，如丙酮、四氢呋喃中，并任选地在水存在的条件下进行。
可以通过羟基与C1-C4醇在适宜的无机酸，如盐酸存在的条件下反应将羟基转化为C1-C4烷氧基。
可通过通式化合物(X)与有机胺化合物R2NH2(IX)反应制备化合物(VIII)。
另一种可选择的方法是，化合物(IIa)可以通过化合物(XI)， 并且，当m为1时，它相当于化合物(XIa)，
在适宜的还原剂存在下与胺化合物(IX)反应，然后原地结晶来制备。
本反应适合的还原剂包括氢化物，如硼烷，或者金属氢化物配合物，如氢化锂铝，硼氢化物，或者有机金属配合物，例如甲基硼烷硫化物，9-硼二环壬烷(9-BBN)，三乙基硅烷，三乙酰氧基硼氢化钠，氰基硼氢化钠。
可选择地，可通过在碘，无机酸(如硫酸)或有机酸如甲酸、三氟乙酸、乙酸或者甲磺酸存在条件下由硼氢化钠反应制备硼烷。
该反应适宜的溶剂是醇(如乙醇)，醚(如四氢呋喃)，或者卤代烃(如二氯甲烷)或者酰胺(例如，N，N-二甲基甲酰胺)，反应温度为从室温到反应混合物回流温度的范围内。
当Y为氮，X为碳时，通式(X)化合物相当于化合物(Xa)，它可由化合物(XIIa)来制备， 相当于化合物(XII)化合物 其中X为碳，La是能够使OLa成为良好离去基(例如甲磺酸基)的合适活性基团，且Ra对应于氢或者必要时是一个适宜的氮保护基。
化合物(XIIa)可进行如下反应i)任选地去除氮保护基Ra；并且ii)在如叔胺，如三乙胺的有机碱存在下进行环化。
这些反应优选在非质子溶剂，如醚(例如四氢呋喃)，卤代烃例如二氯甲烷或者胺，如N，N-二甲基甲酰氨中进行。
当X为碳且n为0时，化合物(XII)相当于化合物(XIIa)，它可通过在化合物(XIII)上引入适宜的活性基团La来制备，其中Hal，Ra，n，如前定义。
可通过化合物(XV)，其中Rb是适宜的羟基保护基，与胺化合物(XIV)反应，然后保护其中的氮基(如果必要)并脱去羟基保护基，制备化合物(XIII)。
与胺的反应可以在适宜的非质子溶剂如DMF(二甲基甲酰氨)和强碱(如氢化钠)存在下进行。
可通过使用适宜的还原剂如二异丁基氢化铝将酯化合物(XVI)还原成相应的羟基化合物，然后使用适宜的羟基保护基保护其中的羟基来制备化合物(XV)。
可以通过化合物(XVII)与烯丙基卤化物(如烯丙基碘)反应制备化合物(XVI)。该反应可以在有机碱如六甲基二硅氮烷基锂条件下在低温和非质子溶剂(如四氢呋喃)中进行。
当n为1且X为碳时，化合物(XII)相当于化合物(XIIb)，它可通过用适宜的还原剂如硼氢化钠在溶剂如醇溶剂(例如甲醇)中还原化合物(XVIII)来制备。
可通过化合物(XX)与磷内鎓盐(XIX)的Wittig反应，其中R8为苯基衍生物，然后使用酸(例如盐酸)水解制备化合物(XVIII)。反应可在非质子溶剂如乙氰或醚如四氢呋喃中进行。
也可通过氧化化合物(XIII)来制备化合物(XX)。氧化反应可以使用已知的通用方法将羟基转化成醛基。因此，例如，可以在Swern反应条件下进行该反应。
当Y为碳且X为碳时，化合物(X)相当于化合物(Xb)，它可通过卤化化合物(XXI)来制备 其中，当X和Y都为碳时，相当于化合物(XXIb)化合物。
可以使用现有技术中的常用方法来进行卤化反应。因此，反应可以用PO(Hal)3处理进行。其中卤原子优选氯原子。
可以通过式(XXIII)的环己酮，其中R7如前定义，与式(XXII)的乙脒的盐(盐酸盐)反应制备化合物(XXIb)。
该反应可在碱性C1-C4烷醇盐(例如甲醇钠)存在下和诸如甲醇等溶剂中进行。
当n为1时，化合物(XXIII)相当于化合物(XXIIIa)，它可通过化合物(XXIV)与式(XXV)的硅烷衍生物反应来制备，其中R7如前定义。该反应在路易斯酸和有机溶剂中进行。
当n为0时，化合物(XXIII)相当于化合物(XXIIIb)，它可通过化合物(XXVI)，其中R7如前定义且R7不同时与R7具有相同含义，与有机金属化合物(R9)2M(XXVII)，其中R9为烯丙基且M是金属，任选在如三氟化硼的醚合物等路易酸存在下反应来制备。

该反应适宜的金属包括锂、铜和锰。
当X为氮时化合物(X)相当于化合物(Xc)，它可通过化合物(XXVIII)与烯丙基卤(例如烯丙基溴)反应来制备。该反应在低温条件下在无机碱如氢化钠存在下和非质子溶剂(例如四氢呋喃或者N，N-二甲基甲酰氨)中进行。
当n为0和Y为碳时，化合物(XXVIII)相当于化合物(XXVIIIa)，它可通过由化合物(XXIX)反应来制备，其中q如前定义， 当q为1且Y为碳时，化合物(XXIXa)相当于化合物(XXIX)，可以进行如下反应 i)将其中的羟基转化为适宜的离去基，例如甲磺酸基；ii)在Na2S2O4和无机碱如碳酸钾存在下将其中的硝基还原成氨基，和原地环化。
可通过还原酯化合物(XXX)制备通式化合物(XXIXa)。该反应可在非质子溶剂(如甲醇或乙醇)中和优选在40-100℃加热使用硼氢化钠方便地进行。化合物(XXX)可以通过由化合物(XXXI)与酯化合物(XXXII)反应制备。该反应可以在非质子溶剂如DMF中和无机碱(如氢化钠)存在下进行。
当n为2且Y为碳时，化合物(XXIX)相当于化合物(XXIXb)，它可通过使用常用的还原剂将化合物(XXXIII)还原制备，将醛转化成醇。因此，该反应适宜的还原剂是硼氢化钠。
可以通过水解化合物(XXXIV)的烯醇醚得到化合物(XXXXIII)。反应优选在无机酸例如盐酸存在下进行。可以通过化合物(XXXV)与内盐(XIX)在适宜的有机碱如正丁基锂存在下经Wittg反应制备化合物(XXXIV)。反应在如乙氰的非质子溶剂或者如四氢呋喃的醚类溶剂中进行。当Y对应为碳时，可使用通用的将醇转化为醛的方法氧化化合物(XXIXa)制备化合物(XXXV)。
当R3不为氢时，化合物(XI)相当于化合物(XIb)，它可通过R3为氢的化合物(XI)(相当于化合物(XIc))与有机金属化合物GMgBr(XXXXVI)反应，得到醇化合物(XXXVII)，然后它可按照下面的图解将其氧化成酮化合物(XIb)。

当m为1时，化合物(XIc)相当于化合物(XId)，它可通过氧化化合物(X)来制备。
氧化反应可以在臭氧存在下，在低温，例如-78℃，和在有机溶剂如二氯甲烷中方便地进行。
或者，也可在N-甲基吗啉氧化物(NMO)存在下使用四氧化锇进行反应，随后用过碘酸钠处理来进行氧化。反应可在易溶于水的有机溶剂，如丙酮和四氢呋喃中有水或无水条件下进行。
当X和Y为碳，m为0且n为1时，化合物(XIc)相当于化合物(XIe)，它可通过在溶剂如醇中，使用无机碱如氢氧化钾处理化合物(XXXVIII)，然后与高锰酸钾反应来制备。该反应适合在水中进行。
可通过卤化化合物(XXXIX)来制备化合物(XXXVIII)。卤化反应可按照上述方法进行。
也可通过在上述反应条件下，由化合物(XL)与乙酰胺(XXII)的盐(如盐酸盐)反应制备化合物(XXXIX)。化合物(XL)可通过化合物(XXIV)与硝基甲烷反应得到，其中R7如上定义。
当X为碳，M为0，n为1且Y为氮时，化合物(XIc)相当于化合物(XIf)，它可通过使用已知的氧化方法将化合物(XLI)氧化来制备，将羟基转化为醛。
化合物(XLI)可由化合物(XLII)经下述反应得到，其中La是适宜的离去基，如甲磺酰基，Ra和Rb如前定义i)可任选地去除氮保护基；ii)环化，以及iii)去除羟基保护基Rb。
可以按照前面讨论过的方法，氧化化合物(XLIII)，然后还原成羟基并将其转化为离去基制备化合物(XLII)。
氧化反应可以在臭氧，低温，例如-78℃，和在溶剂如二氯甲烷中方便地进行。还原反应使用硼氢化钠作为还原剂来进行。
可以通过化合物(XV)与胺(XIV)反应，然后保护其中的氮基团来制备化合物(XLIII)。
可以通过已知方法将化合物(XLI)转化为化合物(VIIa)，其相当于X为碳，Y为氮，m和n为1时的化合物(VII)。
根据前面的图解，化合物(VIIa)可以转化为化合物(I-1a)，其相当于R3为氢时的化合物(I-1)。
当X和Y为氮，且n为1时，化合物(Xc)相当于化合物(Xc′)，它可在有机或无机碱存在下，由化合物(XLIV)与二氯甲烷反应得到。反应适合在诸如N，N-二甲基甲酰氨或乙氰的非质子溶剂中进行。
化合物(XLIV)可通过化合物(XLV)用铁和无机酸，例如盐酸处理来制备。化合物(XLV)可以通过化合物(XXXI)与胺化合物(XIV)反应来制备。
化合物(XVII)，(XXIV)，(XXVI)和(XXXI)或者是已知化合物，或者可通过那些所述已知化合物的相似方法来制备总之，化合物(I-1a)，可按照下面图解1的方法来制备。


图1 其中Hal，R，R1，R7，R2，La，Ra和Rb如前定义，并且优选R7为甲基，Hal是氯，Ra是叔丁基羰基，R是t-BuPh2Si衍生物，Ola是甲磺酰基(mesyl)并且步骤a代表在0℃和碱条件下(如LiHMDS)使用烯丙基碘进行烯丙基化；其起始物料可通过Wayne GC.等在，J.Prakt.Chem.，(2000)，342(5)，504-7中所述的类似方法来制备；步骤b代表在通常条件下(CH2Cl2，0℃到室温)，使用适宜的还原剂，如DIBAl-H，还原酯基；步骤c代表对羟基进行保护，优选在DMF中以DMAP为催化剂(0℃至室温)使用t-BuPh2SiCl；步骤d代表如上所述的与胺RNH2(XIV)的反应；步骤e代表使用适宜的保护基保护氨基，例如在DMAP存在下使用(BOC)2O进行处理；步骤f代表，i)在丙酮/水中使用OsO4进行氧化，然后，ii)在THF/水中使用NaIO4处理，以及最后iii)在适宜的溶剂(例如EtOH)中使用NaBH4进行还原；步骤g代表脱去氨基保护基(例如在CH2Cl2中使用CF3CO2H)；步骤h代表分子内环化，例如通过在碱性(如Et3N)条件下的羟基的甲磺酰化；步骤i代表脱去羟基保护基(如在40℃和DMF中使用Et3N-3HF)；步骤j代表将羟基转化成适宜的离去基(例如甲磺酰化)；步骤k代表与胺(IX)进行如上所述的反应。
作为选择，合成方法可以按照图样2所示的下述步骤进行改进(从已描述的中间体开始)图解2 其中步骤l代表前面步骤f的最初的两步反应，并且步骤m代表在BF3-Et2O存在下使用Et3SiH处理。
然后按照图解1所示完成合成。
作为另一种选择，也可按照图解2a所示的下述步骤(从已经描述的中间体开始)避免对氨基进行保护图2a 其中步骤n对应前面的步骤f)；步骤o对应前面的步骤j)；步骤p代表如上所述与胺RNH2(XIV)进行反应；然后按照图解1所示完成合成。
在本发明的另一个实施方案中，化合物(I-2)，其中R3为氢时相当于化合物(I-2a)，可以通过如下图解3的方法来制备图解3 其中Hal，R，R1，R2，R7，Rb定义如前且优选R7为甲基，Hal为氯，Rb是t-BuPh2Si衍生物，OLa甲磺酰基并且步骤a′代表在通常条件下(R7OH，酸催化，回流)进行酯化；步骤b′代表使用适宜的烷基化试剂进行烷基化(例如在LiHMDS存在下5-碘戊酸甲基酯)；步骤c′代表在碱条件下(例如MeONa，回流甲苯)分子内环化；步骤d′代表苯基硒化，然后使用H2O2氧化随后消除；步骤e′代表在TiCl4催化条件下使用适宜的硅烷，如烯丙基三甲基硅烷进行1，4-羰基加成；
步骤f代表如上所述的与胺(XXII)进行反应；步骤g′代表羟基的卤化反应(例如使用POCl3回流下处理)；步骤h′代表双键的氧化裂解，如臭氧化；步骤i′代表在NaBH3CN存在下与胺(IX)进行还原胺化，随后进行分子内环化；在本发明另一个实施方案中，R3为氢时化合物(I-3)相当于化合物(I-3a)，可通过如图解4所示的方法制备图解4 其中步骤a″代表使用适宜的保护基对氨基进行保护，如在DMAP存在下使用(BOC)2O处理；步骤b″对应前面的步骤i)；步骤c″代表在碱条件下(如Et3N)对羟基进行甲磺酰化；步骤d″代表脱去氨基保护基，如使用TFA处理，随后在碱条件如Et3N下进行分子内环化；步骤e″对应于前面的步骤h′)或者前面的步骤1)；步骤f″对应于前面的步骤i′)；在另一个可供选择方案中，可以按照如图解5所示的完成合成的最后步骤，且当其中R3不为氢时，化合物(I-3)对应于化合物(I-3b)。
图解5 其中步骤a对应于前面的步骤k)；步骤b对应于前面的步骤1)；步骤c代表使用Et3SiH，TFA处理进行还原；步骤d代表醚基团的形成，例如在PTSA存在下使用甲醇处理；步骤e代表与有机金属化合物，如R3Cu在BF3.Et2O.存在下反应。
可选择地，当不需要保护氨基时，可以从已知的中间体按照下面图解6所示的方法制备化合物(I-3a)图解6 其中步骤a″″对应于前面的步骤i)；步骤b″″对应于前面的步骤j)，随后进行原地分子间环化；步骤c″″对应于前面的步骤f)；步骤d″″对应于前面的步骤j)和k).
在本发明的另一个实施方案中，其中当R3为氢时化合物(1-4)对应化合物(I-4a)，可按照图解7所示的方法制备
图解7 其中步骤a″代表在通常条件下与硝基甲烷反应；步骤b″代表如上所述的与胺(XXII)进行反应；步骤c″对应于前面的步骤g′)；步骤d″代表醛基的形成，例如在甲醇中使用KOH处理然后使用KMnO4进行氧化；步骤e″对应于前面的步骤i′).
适宜的氮保护基的例子包括烷氧基羰基如叔丁氧基羰基以及芳基磺酰基，如苯磺酰基。
在上述任一反应中，可通过常用的除去氮保护基的方法来除去氮保护基。(例如在J F W McOmie编著的《有机化学中的保护基》(Protective Groupsin Organic Chemistry)第46-119页(1973年Plenum Press出版)所述的保护基)。因此，当Ra是烷氧基羰基时可使用酸，例如三氟乙酸水解除去该基团。
适宜的羟基保护基的例子包括三烃基甲硅烷基醚例如三甲基甲硅烷基醚或者叔丁基二甲基甲硅烷基醚。
也可使用熟知的标准方法脱去羟基保护基(例如在J F W McOmie编著的《有机化学中的保护基》(Proteetive Groups Organic Chemistry第46-119页(1973年Plenum Press出版)所述的保护基)。例如Rb为叔丁基二甲基甲硅烷基时，可使用三乙基氨基三氢氟化物来进行处理。
药学上可接受的盐也可通过常用的方法由化合物(I)其他的盐，包括其他药学上可接受的盐来制备。
通过结晶或者蒸发合适的溶剂可以方便地将与溶剂分子结合的化合物(I)分离出来，并得到相应的溶剂合物。
当需要得到通式(I)化合物的某一特定的对映异构体时，可以通过用例如使用常用方法将通式(I)化合物相应的对映体混合物拆分得到。因此可以使用手性HPLC方法从通式(I)外消旋化合物得到所需的对映异构体。
本发明还包括同位素标记化合物，它们与通式I化合物及下面的化合物是相同的，但实际上其中的一个或者多个原子被与他们在自然界中存在的具有不同原子质量或者质量数的原子所替换。可结合于本发明化合物中的同位素包括氢，碳，氮，氧，磷，氟，碘合氯的同位素，如3H，11C，14C，18F，123I和125I。
包含上述同位素和/或其他原子的其他同位素的本发明的化合物以及所述化合物药学上可接受的盐都被包括在本发明的范围内。本发明中掺入放射性同位素如3H，14C的同位素标记化合物在药物和/或基层组织分布化验中是有用的。特别优选氚，3H和碳-14，14C同位素因为它们易于制备和检测。11C和8F同位素在PET(正电子发射X射线层析照相技术)中特别有用，而125I同位素在SPECT(单光子发射计算机化X射线层析照相技术)中特别有用，所有这些都被用于大脑成像。此外，由于具有更长的代谢稳定性，例如提高体内半衰期或降低必需的剂量，更重的同位素替代物，如氘，2H具有一定的治疗优势，因此，在某些环境下它们优选。一般可以通过下面图解中和/或实施例中的方法使用容易得到的同位素标记试剂取代非同位素标记试剂来制备本发明的同位素标记化合物I及后面的化合物。
本发明的CRF受体拮抗剂在包括CRF1受体和CRF2受体的CRF受体位点具有活性并且它可用于治疗由CRF或CRF受体介导条件下的疾病。
一个化合物作为CRF受体拮抗剂的效力可以通过各种试验方法进行测定。本发明适宜的CRF拮抗剂可以抑制CRF与其受体的特异性结合并拮抗与CRF相关的活性。通式(I)化合物可以通过一种或多种被一般为此可接受的试验来检测其作为CRF拮抗剂的活性，包括(但不限于)DeSouza等(《神经科学杂志》(J.Neuroscience)788，1987)和Battaglia等(《突触》(Synapse)1572，1987)所公开的方法。
可以使用类似的闪烁近似技术(SPA)来进行CRF-受体结合测试。配体连接在用来表达CRF受体的重组体膜上，CFR受体又连接在涂有麦杆菌凝集素的SPA珠上。在试验部分将公开试验的具体内容。
就CRF受体结合亲和性而言，本发明的CRF受体拮抗剂具有小于10μm的Ki值。在本发明一个优选的实施方案中，CRF受体拮抗剂具有小于10μm的Ki值。
在一个更优选的实施方案中具有小于1μm的Ki值和一个更优选的实施方案具有小于0.1μm的Ki值。如下面更具体描述的那样，本发明中的代表性的化合物的Ki值都通过实施例5中所述的方法进行了测定。
具有小于1μm的Ki值的优选的化合物是编号为3-1-3和3-1-10的化合物。
具有小于0.1μm的Ki值的更优选的化合物是编号为1-1-1，1-1-4，1-1-5，1-2-1，3-1-5和3-1-6的化合物。
本发明的化合物可用来治疗与CRF受体相关的中枢神经系统疾病。特别地，它可用于治疗和预防伴随有或者不伴随有精神病症、紧张症、抑郁症、非典型病症或产后发作症特征的包括双极性抑郁、多极性抑郁、单发性和复发性抑郁等主要的抑郁疾病，用于治疗焦虑症和恐慌症。其他的情绪疾病涵盖了主要的抑郁疾病，包括伴随有或者不伴随有非典型特征的有早期和后期发作的精神抑郁症，神经压抑症、外伤性抑郁症和社会恐惧症、伴随早期和后期发作特征并伴随情绪低落的早老性痴呆(Alzheimer氏痴呆)；由情绪沮丧引起的心血管异常；由酒精、安非他明、可卡因、迷幻剂、鸦片、苯环己哌啶、镇静剂、催眠剂、抗焦虑剂和其他药剂所引起的精神疾病；抑郁性精神分裂症；以及抑郁型调节紊乱。主要的抑郁病症还可能引起一般的疾病，包括但不限于，心肌梗塞、糖尿病、流产或早产等。
本发明的化合物还是一种有用的止痛剂。特别地，它们可用于治疗外伤疼痛如术后疼痛；撕裂性外伤疼痛如鳃状神经丛；慢性疼痛如骨关节炎、风湿性关节炎、或者psoriatic关节炎等；神经疼痛如后疱疹神经痛、三叉神经痛、部分或脉间神经痛、纤维神经痛、灼痛、外神经痛、糖尿病神经疾病、化疗引起的神经疾病、与艾滋病相关的神经疾病、枕骨神经痛、膝状神经痛、舌咽神经痛、反射性交叉神经营养不良、幻肢疼痛；各种头痛如偏头痛、急性或慢性紧张性头痛、颞下颌疼痛、上颌窦疼痛、集束性头痛；牙痛；癌痛；源于内脏的疼痛；肠胃痛；神经诱发痛；运动伤痛；痛经；月经痛；脑膜炎；蛛网膜炎；肌肉骨骼痛；背部轻微疼痛，如脊髓狭窄；圆盘脱落；坐骨神经痛；咽痛；脊椎骨愈合；痛风；烧伤；结疤痛；骚痒；以及丘脑痛如中风性丘脑痛。
本发明的化合物还被用于治疗进食和食欲功能紊乱以及食欲减退、神经性食欲缺乏和易饿症等疾病。
本发明的化合物还被用于治疗睡眠疾病，包括dysomnia，失眠，睡眠窒息，嗜睡和生理节奏紊乱(circadian ritmic disorders)。
本发明的化合物也用于治疗和预防认知疾病。认知疾病包括痴呆症，健忘症以及其他没有特别具体说明的认知疾病。
此外，本发明的化合物还用作那些没有认知和/或记忆缺陷的健康人的认知和/或记忆加强剂。
本发明的化合物还被用于治疗对一些物质的依赖性和耐受性。例如，它们可用于对烟碱，酒精，咖啡因，苯环己基哌啶(苯环己基哌啶类似化合物)的依赖性的治疗；或者用于治疗对鸦片剂(如大麻，海洛因，吗啡)或者苯并二氮杂庚因的依赖性和耐受性治疗；也可用于古柯碱，镇静剂(sedativeipnotic)，安非他明或安非他明相关药物(如右旋安非他明，甲基安非他明)或其组合物的成瘾性疾病治疗。
本发明的化合物还有用作抗炎制剂，特别地，它用于哮喘，流感，慢性支气管炎和风湿性关节炎等炎症；胃肠道炎症疾病如节段性回肠炎(Crohn)病、大肠溃疡、肠炎(IBD)以及非甾族抗炎药物引起的疾病；皮肤疾病如疱疹和湿疹；膀胱炎症如膀胱炎和严重的失禁症；以及眼部和牙部炎症的治疗。
本发明的化合物还用于治疗过敏性疾病的治疗，特别地用于皮肤过敏如风疹和气道过敏如鼻炎。
本发明的化合物还被用于治疗呕吐，例如反胃，恶心和呕吐。呕吐包括急性呕吐，延时呕吐和定时呕吐。本发明的化合物可用于由任何原因所引起的呕吐。例如，呕吐可以是由于药物引起的，例如肿瘤化疗剂，例如烷基化试剂如环磷酰胺、亚硝基脲氮芥、洛莫司汀和苯丁酸氮芥；细胞毒抗生素如更生霉素、多柔比星、丝链霉素C和争光霉素；抗代谢物如阿糖胞苷、甲胺喋啉、和5-氟尿嘧啶；长春花生物碱如依托泊苷，长春碱和长春新碱；以及其他诸如顺铂，达卡巴嗪，甲苄肼和羟基脲；以及它们的组合物；放射治疗如胸腔和腹部的放射治疗，如癌症的治疗；中毒；毒素如由代谢紊乱或者感染引起的疾病，如胃炎或细菌传播或者滤过性毒菌引起的胃肠感染；怀孕；前庭疾病如运动疾病，眩晕，头昏眼花，梅尼尔(Meniere)；术后疾病；；肠胃阻塞；肠胃动力消退；内脏疼痛如心肌梗塞或者腹膜炎；偏头痛；头盖间压力增加；头盖间压力降低(如恐高症)；阿片止痛剂如吗啡；和胃-食道逆呃，酸消化不良，饮食过度，胃泛酸，胃灼热/反胃，心绞痛如偶发性心绞痛，夜间心绞痛，以及饮食所引起的心绞痛和胃弱的治疗。
本发明的化合物特别用于胃肠疾病如肠躁动综合症(IBS)；皮肤疾病如牛皮癣，骚痒和晒斑；血管疾病如咽痛，血管头痛以及雷尼尔(Reynaud′s)病；大脑缺血如大脑血管痉挛伴随蛛网膜下出血；纤维组织和胶原质疾病如硬化病和嗜曙红细胞纤维化；与免疫系统增强或减弱相关的疾病例如全身红斑性肢痛病和风湿疾病如纤维组织炎；和咳嗽的治疗。
本发明的化合物被用于伴随脑中风、血栓中风、出血性中风、大脑缺血、大脑血管痉挛、血糖过低、组织缺氧、缺氧症、围产期晕厥心博停止的神经毒素引起的损伤的治疗。
因此，本发明提供了用于治疗疾病，尤其是用于人药的通式(I)化合物或其药学上可接受的盐或其溶剂合物。
另一方面，本发明提供了通式(I)化合物或其药学上可接受的盐或其溶剂合物在制备治疗由CRF介导的疾病的药物制剂中的用途。
另一方面，本发明提供治疗哺乳动物，包括人的特别是由CRF介导的疾病的方法，包括给药有效剂量的通式(I)化合物或其药学上可接受的盐或其溶剂合物。
所述的治疗方法还包括缓解或预防上述症状。
化合物(I)可以以原料药形式，优选作为药物制剂中的活性成为给药。
因此，本发明还提供了一种包括了至少一种通式(I)化合物或其药学上可接受的盐或其溶剂合物的药物组合物并做成可通过任意常规途径给药的制剂。优选将上述化合物制成适合给药的形式，特别地是作为人药，并且能够通过常用的方法使用一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂制成相应的制剂。
化合物(I)可以配制成口服给药、口腔含化给药、肠道外给药、局部给药(包括眼部和鼻腔)、长效制剂或直肠给药或者一种适宜的通过吸入或吹入(通过口或鼻)方式给药的合适形式。
对口服给药，药物组合物可以是以通过常用方法添加药学上可接受的赋形剂如粘结剂(例如预胶化玉米淀粉、聚乙烯吡咯或羟基丙基甲基纤维素)，填充剂(如乳糖、微晶纤维素或者磷酸氢钙)，润滑剂(如硬脂酸镁、滑石或硅土)，分散剂(如马铃薯淀粉或乙醇酸钠粉)，或者湿润剂(如月桂基磺酸钠)所制成的片剂或胶囊。可以使用本领域熟知的方法制作片剂。液体口服制剂可以是例如溶液、糖浆或悬浮液的形式，也可以是干药在服用前与水或者其他合适赋形剂配制成使用形式。上述液体制剂可以是通过常用方法添加药学上可接受的添加剂制备。所述添加剂有如悬浮剂(如山梨醇糖浆、纤维素衍生物或者氢化食用脂肪)，乳化剂(如卵磷酯或阿拉伯树脂)，非水赋形剂(如杏仁油、油脂、乙醇或者分馏植物油)，以及防腐剂(如-对-羟基苯甲酸甲基或丙基酯或者山梨酸)。在合适情况下制剂中也可含有缓冲盐、香料、色素和甜味剂。
口服制剂可以制成合适的形式以控制活性化合物的释放。
口腔含化给药时该组合物可以制成片剂或其他通用的形式。
本发明化合物可以通过药丸注射或者连续灌注的方式制成肠道外给药的形式。注射用制剂可以是单位剂量形式如在安碚瓶或者在多剂量容器中加入适量的防腐剂。该组合物可以是以在水状或油状赋形剂中的悬浮液、溶液或者乳液，并且可能含有某种配制剂如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂。作为选择，活性成分可以是粉末状，在使用前和适宜的赋形剂如无菌热原质-水混合。
本发明的化合物也可以配制成药膏、药霜、药胶、洗液、阴道栓、气溶胶或滴剂(例如眼、耳或鼻滴剂)的局部给药形式。药膏和药霜可以在水状或油状赋形剂中加入合适的增稠剂和/或胶凝剂制成。对眼部给药的药膏可以是以无菌方式使用无菌成分制得的。
洗液可用水或油性基质配制，一般还包含一种或多种卤化剂、稳定剂、分散剂、悬浮剂、增稠剂或着色剂。滴剂可以用水或非水赋形剂配制，还包含一种或多种分散剂、稳定剂、助溶剂或悬浮剂。它们还可含有防腐剂。
本发明的化合物还可以制成直肠给药的形式，如栓剂或者保留灌肠剂，例如含有常用栓剂赋形剂如可可油和其他甘油酯。
本发明的化合物还可制成长效制剂。这些长效制剂可以通过植入方式(例如皮下或者肌内)或者通过肌肉注射方式给药。因此，本发明的化合物可以与合适的聚合物或者憎水材料(例如在可接受的油中以乳剂形式)或离子交换树脂，或以微溶性衍生物例如微溶性盐一起制成制剂。
对鼻内给药，本发明的化合物可以制成通过合适计量的单一剂量设备给药的溶液，或者配制成用合适的传送设备给药的与合适的载体的粉末混合物。
本发明化合物的建议剂量为1至约1000mg/天。应当知道必须根据病人的年龄和状况来按照规律调整日常的用量。而精确的剂量应遵照主治医生或兽医的判断。还应根据给药途径和所特别选定的药物来确定剂量。
因此，肠道外给药每日的剂量通常在1至约100mg，优选1至80mg每天。对口服给药，每天的剂量通常在1至300mg范围内，如1至100mg。
实施例在下面的中间体和实施例中，除非另有说明熔点(m.p.)使用Gallenkamp熔点仪测定且未经校正，所有温度以℃为单位。红外光谱使用FT-IR仪测定。质子核磁共振(1H-NMR)波谱是400MHz下记录，化学位移记录的是相对内标Me4Si的低磁场(d)的ppm值，并且被标记为单峰(s)，双峰(d)，双双重峰(dd)，三重峰(t)，四重峰(q)或多重峰(m)。柱色谱是在硅胶柱上进行的(Merck AG Darmstaadt，德国)。在下面的内容中还使用了如下缩写EtOAc＝乙酸乙酯，cHex＝环己烷，CH2Cl2＝二氯甲烷，Et2O＝乙醚，DMF＝N，N-二甲基甲酰氨，DIPEA＝N，N-二异丙基乙胺，MeOH＝甲醇，Et3N＝三乙胺，TFA＝三氟乙酸，THF＝四氢呋喃，DIBAL-H＝二异丁基氢化铝，DMAP＝二甲基氨基吡啶，LHMDS＝六甲基二硅氮烷基锂；Tlc表示在硅胶薄板上的薄层色谱，以及干燥指使用无水硫酸钠干燥溶液；r.t.(RT)指室温。
中间体1(4，6-二氯-2-甲基-吡啶-5-基)-乙酸甲酯在0℃和N2气氛下向无水MeOH(60mL)中分批加入钠(1.74g)。在金属钠被消耗完后，加入盐酸乙脒(7.06g)。搅拌20分钟后，滤除其中的NaCl沉淀。向游离乙脒溶液中加入2-乙氧基羰基-琥珀酸二乙酯(6.04g)的无水MeOH(20mL)溶液并将混合物在室温下搅拌2天。真空浓缩反应混合物至干并将得到的黄色泡沫状物质(8.69g)，与POCl3(70mL)混合，并回流加热3.5小时。所得的溶液冷却至室温并将其缓慢倒入冰/水(600mL)和NH4OH(50mL)中，同时剧烈搅拌。所得产物使用EtOAc(3×50mL)萃取，然后使用Et2O(3×20mL)萃取。使用H2O(60mL)和盐水(40mL)冲洗合并的有机萃取液，Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩。使用快速色谱纯化粗油(硅胶，cHex/EtOAc 9∶1)得到黄色固体状标题化合物(4.27g)。
NMR(1H，CDCl3)δ5.85(m，1H)，5.15(dq，1H)，5.11(dq，1H)，3.61(dt，2H)，2.67(s，3H)。
MS(m/z)202[M]+.2Cl；167[MH-Cl]+，1Cl。
中间体22-(4，6-二氯-2-甲基-吡啶-5-基)-戊-4-烯酸甲酯在0℃和N2气氛下中间体1(1.33g，5.68mmol)的无水THF(8mL)溶液与双(三甲基甲硅基)氨基锂(1M己烷溶液，11.5mL，2eq)反应15分钟，然后加入烯丙基溴(0.99mL，2eq)。在室温下搅拌化合物4小时然后用水(20mL)淬灭反应。使用EtOAc(2×15mL)萃取产物然后分别用H2O(2×15mL)和盐水(1×15mL)冲洗有机相，Na2SO4干燥，真空浓缩。使用快速色谱(硅胶，EtOAc/cHex 1∶9)纯化粗产物得到白色固体状标题化合物(673.8mg)。
NMR(1H，CDCl3)δ5.77(m，1H)，5.03(m，2H)，4.43(dd，1H)，3.76(s，3H)，3.12(m，1H)，2.78(m，1H)，2.73(s，3H)。
MS(m/z)374[M]+2Cl。
中间体32-(4，6-二氯-2-甲基-吡啶-5-基)-戊-4-烯-1-醇在-78℃和N2气氛下向中间体2(257mg)的无水CH2Cl2(9.3mL)溶液中加入DIBAl-H(1M己烷溶液，5.6mL，6eq)。滴加完毕后反应混合物在在-78℃下搅拌1小时然后在0℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入0.5N HCl冰水(20mL)溶液中，然后使用CH2Cl2(3×10mL)萃取。使用无水Na2SO4干燥合并的有机萃取液，过滤，真空浓缩得到透明油状标题化合物(200mg)。
NMR(1H，CDCl3)δ5.76(m，1H)，5.12(m，1H)，5.01(m，1H)，4.16(m，1H)，4.06(m，1H)，3.91(m，1H)，2.8-2.6(m，2H)，2.70(s，3H)，1.50(t，1H)。
MS(m/z)247[M]+，2Cl。
中间体4
5-[1-(叔丁基二甲基-甲硅烷氧基甲基)-丁-3-烯基]-4，6-二氯-2-甲基嘧啶在0℃和N2气氛下向中间体3(200mg)的无水DMF(12mL)加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯(245mg，2eq)和咪唑(553mg，10eq)。在室温下反应混合物搅拌2小时然后再加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯(61mg，0.5eq)。1小时后，加入饱和NH4Cl(15mL)水溶液和EtOAc(15mL)，然后使用EtOAc(2×15mL)萃取水相。用H2O(10mL)冲洗合并的萃取液，无水Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩。使用快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 19∶1)纯化粗产物得到透明油状标题化合物(237mg)。
NMR(1H，CDCl3)δ5.72(m，1H)，5.10(d，1H)，4.98(d，1H)，4.11(m，1H)，3.94(m，2H)，2.69(s，3H)，2.6-2.7(m，2H)，0.82(s，9H)，0.05(s，3H)，0.01(s，3H)。
MS(m/z)361[M]+，2Cl。
中间体5{5-[1-(叔丁基二甲基-甲硅烷氧基甲基)-丁-3-烯基]-6-氯-2-甲基-吡啶-4-基}-(2，4-二氯苯基)胺在0℃和N2气氛下将2，4-二氯苯胺(192mg)的无水THF(12mL)与氢化钠(80％)，矿物油溶液，393mg)反应15分钟，然后加入中间体4(434mg，1.19mmol)的无水THF(4mL)溶液。混合物加热回流3小时然后用水(20mL)淬灭反应。用EtOAc(2×20mL)萃取产物，无水Na2SO4干燥，真空浓缩。用快速色谱(硅胶，EtOAc/cHex 9∶1)纯化粗产物得到黄色油状标题化合物(419mg)。
NMR(1H，CDCl3)，T＝55℃δ8.35(bs，1H)，8.13(bd，2H)，7.42(d，1H)，7.25(dd，1H)，5.73(m，1H)，5.03(m，2H)，4.10(dd，1H)，3.99(dd，1H)，3.65(bm，1H)，2.75(m，2H)，2.47(s，3H)，0.82(s，9H)，0.01(s，3H)，0.00(s，3H)。
MS(m/z)486[MH]+，3Cl。
中间体6{5-[1-(叔丁基二甲基-甲硅烷氧基甲基)-丁-3-烯基]-6-氯-2-甲基-吡啶-4-基}-(2，4-二氯苯基)-氨基甲酸叔丁酯在N2气氛下向中间体5(419mg)的无水CH2Cl2(17mL)溶液加入(Boc)2O(376mg，2eq)和DMAP(催化量)。反应混合物在室温下搅拌18小时。用水(10mL)稀释溶液然后使用EtOAc(3×15mL)萃取。无水Na2SO4干燥合并的有机萃取液，过滤，干燥、真空浓缩。快速色谱纯化粗产物(硅胶，cHex/EtOAc9∶1)得到黄色固体状标题化合物(420mg)。
NMR(1H，CDCl3，40℃)δ7.47(d，1H)，7.30(d，1H)，7.14(dd，1H)，5.66(m，1H)，5.03-4.89(m，2H)，3.98-3.8(m，2H)，3.43(b，1H)，2.8-2.6(m，2H)，2.56(bs，3H)，1.41(s，9H)，0.77(s，9H)，-0.02(s，3H)，-0.10(s，3H)。
IR(液体石蜡，cm-1)1716。
MS(m/z)588[MH]+，3Cl。
中间体7[6-氯-5-(1-羟基甲基-丁-3-烯基)-2-甲基-吡啶-4-基]-(2，4-二氯苯基)-氨基甲酸叔丁酯在N2气氛下向中间体6(50mg)的无水DMF(1mL)溶液加入TEA·3HF(21μl，1.5eq)。室温下搅拌反应混合物18小时。用水(10mL)稀释溶液然后使用EtOAc(3×15mL)萃取。无水Na2SO4干燥合并的有机萃取液，过滤，真空浓缩至干燥。使用快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 8∶2)纯化粗产物得到透明油状标题化合物(30mg)。
NMR(1H，DMSO，T＝70℃)δ7.69(d，1H)，7.43-7.33(m，2H)，5.64(m，1H)，5.00-4.88(m，2H)，4.54(1H，m)，3.71(m，2H)，3.29(m，1H)，2.66(m，2H)，2.5(s，3H)，1.31(s，9H)。
MS(m/z)472[MH]+，3Cl。
中间体8甲磺酸2-{4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氯苯基)-氨基]-6-氯-2-甲基-吡啶-5-基}-戊-4-烯酯在室温和N2气氛下向中间体7(130mg)的无水CH2Cl2(5.52mL)溶液中加入Et3N(192μl，5eq)和CH3SO2Cl(43μl，2eq)。室温下搅拌反应混合物18小时。用水(20mL)稀释反应混合物并用EtOAc(3×25mL)萃取。无水Na2SO4干燥合并的有机萃取液，过滤，真空浓缩。用快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 8∶2)纯化粗产物得到透明油状标题化合物(148mg)。
NMR(1H，DMSO，T＝70℃)δ7.72(d，1H)，7.36(dd，1H)，7.28(d，1H)，5.56(m，1H)，5.00(d，1H)，4.92(d，1H)，4.46(m，2H)，3.51(m，1H)，3.02(s，3H)，2.65(m，1H)，2.54(s，3H)，2.50(m，1H)，1.38(s，9H)。
IR(cm-1)1725，1641，1362。
MS(m/z)550[MH]+，3Cl。
中间体95-烯丙基-4-氯-7-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶中间体8(120mg)的TFA 20％/CH2Cl2(7mL)溶液在室温下搅拌2小时。为除去其中的TFA，真空蒸发反应混合物中的溶剂然后重复加入CH2Cl2并蒸发。将粗中间体溶解在无水THF(5mL)中，然后加入Et3N(284μl，5eq)。室温下搅拌1小时后加入向其中H2O，然后使用EtOAc(3×10mL)萃取水层。用无水Na2SO4干燥合并的有机萃取液，过滤，真空浓缩至干燥并得到透明油状标题化合物(124mg)。
NMR(1H，CDCl3)δ7.49(dd，1H)，7.30(d+s，2H)，5.77(m，1H)，5.16-5.12(m，2H)，4.00(t，1H)，3.77(m，1H)，3.57(m，1H)，2.7(m，1H)，2.47(m，1H)，2.45(s，3H)。
MS(m/z)354[MH]+，3Cl。
中间体10[4-氯-7-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7二氢-5H-吡咯并[2，3d]吡啶-5-基]-乙醛在-78℃下中间体9(30mg)的CH2Cl2(4mL)溶液臭氧氧化(5g.h-1)5分钟。当所有起始物料耗尽后(根据TLC，cHex/EtOAc 75/25)，向反应混合物用氧气然后用氮气冲洗20分钟。向冷却的反应混合物加入(CH3)2S(25μl，4eq)和加热至室温。溶液在室温下搅拌18小时。真空除去溶剂，以快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 3∶1)纯化粗产物得到透明油状标题化合物(8mg)。
NMR(1H，CDCl3)δ9.87(s，1H)，7.48(t，1H)，7.30(m，2H)，4.23(t，1H)，3.90(m，1H)，3.60(dd，1H)，3.29(dd，1H)，2.90(dd，1H)，2.42(s，3H)。
MS(m/z)356[MH]+，3Cl。
中间体115-[1-(叔丁基二苯基-甲硅烷氧基甲基)-丁-3-烯基]-4，6-二氯-2-甲基-嘧啶在℃和N2气氛下，向中间体3(152mg)的无水DMF(4mL)溶液中加入DMAP(3.8mg)，咪唑(420mg)和Ph2tBuSiCl(0.32mL)。反应混合物在室温下搅拌2小时。向该溶液中加入5mL饱和NH4Cl水溶液，然后以Et2O(2×15mL)萃取混合物，以水、饱和食盐水各冲洗合并的有机萃取液一次，然后以Na2SO4干燥，滤去固体，蒸去溶剂和以快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 95∶5)纯化粗黄色油状物，并得到透明油状标题化合物(270mg)。
NMR(1H，CDCl3)δ7.65(dd，2H)，7.56(dd，2H)，7.49-7.36(m，6H)，5.67(m，1H)，5.03(dd，1H)，4.94(dd，1H)，4.17(m，1H)，4.00(m，2H)，2.70(s，3H)，2.69(m，1H)，2.55(m，1H)，0.98(s，9H)。
MS(m/z)485[MH]+，2Cl。
中间体12{5-[1-(叔丁基二苯基-甲硅烷氧基甲基)-丁-3-烯基]-6-氯-2-甲基-吡啶-4-基}-(2，4-二氯苯基)-胺在0℃和N2气氛下，向2，4-二氯苯胺(80mg)的无水THF(1mL)溶液中加入NaH(80％，矿物油溶剂，31mg)，室温下反应30分钟。冷却至0℃的该混合物加入中间体11(227mg，0.467mmol)的无水THF(2mL)溶液。反应混合物回流下搅拌5小时。然后用水(20mL)淬灭反应。用Et2O(4×20mL)萃取。合并的有机萃取液用水洗一次，在用盐水洗一次，无水Na2SO4干燥。滤去固体，蒸发溶剂，快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 95∶5)纯化粗橙黄色油，得到黄色油状标题化合物(131.6mg)。
NMR(1H，CDCl3)δ8.2-7.7(d，1H)，7.55(d，2H)，7.50(d，2H)，7.40-7.20(m，9H)，5.70(m，1H)，5.07(dd，1H)，4.94(dd，1H)，4.06(m，2H)，3.70(m，1H)，2.71(m，2H)，2.50(m，3H)，0.95(s，9H)。
MS(m/z)610[MH]+，3Cl。
中间体13{5-[1-(叔丁基二苯基-甲硅烷氧基甲基)-丁-3-烯基]-6-氯-2-甲基-吡啶-4-基}-(2，4-二氯苯基)-氨基甲酸叔丁酯在室温和N2气氛下向中间体12(128mg)的无水CH2Cl2(2mL)加入Boc2O(61mg)和DMAP(3mg)。反应混合物室温下搅拌16小时。加入新的Boc2O(58mg+46mg)和催化量DMAP 2天后原料完全转化。用水稀释反应混合物然后用CH2Cl2(2×5mL)萃取。合并的有机萃取液水洗一次，然后用无水Na2SO4干燥。滤去固体，蒸发溶剂，然后用快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 9∶1)纯化粗黄色油状物，得到浅黄色油状标题化合物(138mg)。
NMR(1H，DMSO，70℃)δ7.67(d，1H)，7.54-7.30(m，5H+5H)，7.19(m，2H)，5.51(m，1H)，4.87(d，1H)，4.82(d，1H)，3.94(m，1H)，3.84(bm，1H)，3.53(m，1H)，2.57(s，3H)，2.62(m，1H)，2.35(m，1H)，1.35(s，9H)，0.90(s，9H)。
IR(液体石蜡，cm-1)1732。
MS(m/z)710[MH]+，3Cl，722[M+Na]+，610[MH-Boc+H]+。
中间体14{5-[1-(叔丁基二苯基-甲硅烷氧基甲基)-3-羟基-丙基]-6-氯-2-甲基-吡啶-4-基}-(2，4-二氯苯基)-氨基甲酸叔丁酯中间体13(108mg)的3mL CH2Cl2/CH3OH(9∶1)溶液被冷却至-78℃。在磁搅拌下向溶液中通入O330分钟。然后在低温和N2气氛下加入NaBH4(23.1mg)。室温下反应混合物搅拌3小时。用水淬灭反应然后使用CH2Cl2(2×5mL)萃取。合并的有机萃取液用饱和NH4Cl水溶液冲洗一次，然后用无水Na2SO4干燥。滤去固体，蒸发溶剂然后用快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 9∶1)纯化粗产物黄色油得到透明油状标题化合物(59mg)。
NMR(1H，DMSO，70℃)δ7.65(d，1H)，7.48-7.34(m，5H+5H)，7.28(d，1H)，7.12(bd，1H)，5.51(m，1H)，4.18(t，1H)，4.02(bt，1H)，3.82(bm，1H)，3.51(m，1H)，3.29(bm，2H)，2.55(s，3H)，2.05(m，1H)，1.84(bm，1H)，1.35(s，9H)，0.89(s，9H)。
IR(film，cm-1)1733。
MS(m/z)714[MH]+，3Cl，736[M+Na]+，3Cl，678[MH-HCl]+，2Cl，614[MH-Boc+H]+。
中间体15甲磺酸3-{4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氯苯基)-氨基]-6-氯-2-甲基-吡啶-5-基}-4-(叔丁基二苯基-甲硅烷氧基)-丁基酯在室温和N2气氛下向中间体14(57mg)的无水CH2Cl2(1mL)溶液中加入Et3N(55μl)和MsCl(13μl)。反应混合物搅拌5小时，用水稀释然后用CH2Cl2(2×5mL)萃取。合并的有机萃取液用水洗一次，盐水洗一次，无水Na2SO4干燥。滤去固体，蒸发溶剂得到粗产物无色标题化合物(60mg)。
NMR(1H，DMSO，70℃)δ7.65(d，1H)，7.50-7.34(m，5H+5H)，7.24(bd，1H)，7.15(bd，1H)，4.20-4.00(m，3H)，3.80-3.60(m，2H)，3.02(s，3H)，2.56(s，3H)，2.30-2.10(m，2H)，1.35(s，9H)，0.89(s，9H)。
IR(液体石蜡，cm-1)1725。
MS(m/z)794[MH]+，3 Cl，694[MH-Boc+H]+。
中间体16甲磺酸4-(叔丁基二苯基-甲硅烷氧基)-3-[4-氯-6-(2，4-二氯苯基氨基)-2-甲基-吡啶-5-基]-丁酯在室温和N2气氛下向中间体15(58mg)的无水CH2Cl2(1mL)溶液中加入TFA(200μl，35eq)。反应混合物搅拌16小时，减压蒸发，用CH2Cl2稀释几次然后再次蒸发得到粗产物黄色油状标题化合物(64mg)。
MS(m/z)694[MH]+，3Cl。
中间体175-(叔丁基二苯基-甲硅烷氧基甲基)-4-氯-8-(2-4-二氯苯基)-2-甲基-5，6，7，8-四氢-吡啶并[2，3-d]嘧啶在0℃和N2气氛下向中间体16(64mg)的无水THF(1mL)溶液中加入Et3N(100μl)。反应混合物在室温下搅拌16小时，然后用水稀释，Et2O(2×20mL)萃取。合并的有机萃取液用水洗一次，盐水洗一次，无水Na2SO4干燥。滤去固体，蒸发溶剂然后使用快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 95∶5)纯化粗油得到透明油状标题化合物(26.4mg)。
NMR(1H，CDCl3)δ7.74-6.98(m，5H+5H+1H+2H)，4.10-3.90，3.76-3.55，3.48-3.28(m，5H)，2.58-2.38(m，1H)，2.24，2.22(s，3H)，2.1-1.9(m 1H)，1.07(s，9H)。
MS(m/z)598[MH]+，3Cl。
中间体18[4-氯-8-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5，6，7，8-四氢-吡啶并[2，3-d]嘧啶-5-基]-甲醇在室温和N2气氛下向中间体17(22mg)的无水DMF(2mL)溶液中加入Et3N3HF(20μl)。在40℃下反应混合物搅拌4小时，然后用水稀释，Et2O(3×20mL)萃取。合并的有机萃取液用水洗一次，盐水洗一次，无水Na2SO4干燥。滤去固体，蒸发溶剂然后用快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 2∶1)纯化粗油得到透明油状标题化合物(13mg)。
NMR(1H，DMSO，90℃)δ7.66(bs，1H)，7.50-742(m，2H)，4.66(m，1H)，3.82(bt，1H)，3.68(m，1H)，3.66-3.36(m，2H)，3.20(m，1H)，2.33(m，1H)，2.14(s，3H)，1.94(m，1H)。
MS(m/z)358[MH]+，3Cl，360。
中间体19甲磺酸4-氯-8-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5，6，7，8-四氢-吡啶并[2，3-d]嘧啶-5-基甲基酯在0℃和N2气氛下向中间体18(13mg)的无水CH2Cl2(1mL)溶液中加入Et3N(20.0μl)和MsCl(6.0μl)。室温下反应混合物搅拌16小时，然后用水稀释，CH2Cl2(3×10mL)萃取。合并的有机萃取液用水洗一次，盐水洗一次，无水Na2SO4干燥。滤去固体，蒸发溶剂得到粗产物透明油状标题化合物(14.7mg)。
NMR(1H，CDCl3)δ7.50(dd，1H)，7.40-7.15(m，2H)，4.50-4.15(m，2H)，3.90-3.70(m，1H)，3.65-3.30(m，2H)，3.05(s，3H)，2.45-2.2(m，1H)，2.25(s，3H)，2.2-2.0(m，1H)。
MS(m/z)438[MH]+，3Cl。
中间体205-碘-戊酸甲酯向4-溴戊酸甲基酯(14g)的丙酮(63mL)溶液中加入NaI(11.5g)，混合物回流2小时。然后冷却至室温，滤去沉淀。蒸发滤液并向残液中加入醚。过滤所得的悬浮液，然后使用5％NaHSO3(3×100mL)水溶液和盐水(1×100mL)冲洗醚相，然后用无水Na2SO4干燥。滤去固体，蒸发溶剂得到黄色油状粗标题化合物(15.85g)。
NMR(1H，CDCl3)δ3.68(s，3H)，3.19(t，2H)，2.34(t，2H)，1.86(m，2H)，1.74(m，2H)。
MS(m/z)242[M]+，211[M-OMe]+，115[M-I]+。
中间体212-(2，4-二氯苯基)-壬二酸二甲酯在-78℃和N2气氛下向2，4-二氯苯基醋酸甲基酯(2g)的无水THF(27mL)溶液中逐滴加入1M LHMDS的THF(10.04mL)溶液并搅拌30分钟，然后在-78℃下逐滴胶乳纯净的中间体20(2.87g，1.3eq)，然后使用无水THF(2mL)冲洗滴液漏斗。移去冷却浴然后在室温下搅拌混合物3.5小时。减压蒸发溶剂。将残液溶解于乙醚中，水洗(3×30mL)和盐水(1×30mL)洗。无水Na2SO4。干燥。滤去固体，使用快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 9∶1)纯化粗产物得到浅黄色油状标题化合物(2.7g)。
NMR(1H，CDCl3)δ7.39(d，1H)，7.30(d，1H)，7.22(dd，1H)，4.10(t，1H)，3.67(s，3H)，3.65(s，3H)，2.29(t，2H)，2.05(m，1H)，1.74(m，1H)，1.64(m，2H)，1.40-1.20(m，2H)。
IR(薄膜，cm-1)1738。
MS(m/z)332[M]+，300[M-CH3OH]+，159。
中间体223-(2，4-二氯苯基)-2-羟基-环己-1-烯酸甲酯在-78℃和N2气氛下向无水MeOH(26mL)分批加入钠(0.7g)，同时剧烈搅拌。当金属钠消耗完后，向其中加入无水甲苯(100mL)。然后使用Dean-Stark装置蒸馏出MeOH/甲苯混合物(36mL)。在加入中间体21(2.52g)的无水甲苯(15mL)溶液前先将混合物冷却至室温。在使用AcOH酸化前，混合物回流3.5小时后冷却至室温。用水洗有机相，EtOAc(2×20mL)萃取水相并且合并的有机萃取液用水(2×20mL)洗，盐水(2×20mL)冲洗，无水Na2SO4干燥。滤去固体，蒸发溶剂。用快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 95∶5)纯化粗产物得到标题化合物(透明油状物1.8g)。
NMR(1H，CDCl3)δ12.19(s，1H)，7.40(d，1H)，7.19(dd，1H)，7.08(d，1H)，4.07(t，1H)，3.81(s，3H)，2.35(m，2H)，2.01(m，1H)，1.73(m，1H)，1.60(m，2H)。
MS(m/z)300[M]+，265，233。
中间体235-(2，4-二氯苯基)-6-氧代-环己-1-烯酸甲酯苯基硒酰氯(2.44g)在氮气保护下加入双颈烧瓶中，然后用无水CH2Cl2(21mL)溶解。棕色溶液冷却至0℃然后加入无水吡啶(0.9mL)，在0℃搅拌30分钟后得到黄色溶液。在0℃下分批加入中间体22(1.5g)的无水CH2Cl2(12mL)溶液，反应混合物室温搅拌4.5小时。然后将反应混合物倒入分液漏斗并用1M HCl(2×10mL)和水(3×10mL)冲洗。然后将CH2Cl2层转入烧瓶中并冷却至0℃。向混合物中加入H2O2水溶液(30％w/w，3mL)，并在0℃下搅拌10分钟，然后向其中第二次加入H2O2水溶液(3mL)。反应混合物变为无色并生产白色固体。0℃下20分钟后用饱和NaHCO3(2×10mL)水溶液和盐水(1×10mL)冲洗混合物，无水Na2SO4干燥，滤去固体，蒸发溶剂得到浅黄色油状标题化合物(1.45g)，冷却后变成固体。
NMR(1H，CDCl3)δ7.77(m，1H)，7.43(d，1H)，7.24(dd，1H)，7.11(d，1H)，4.12(dd，1H)，3.83(s，3H)，2.70(m，2H)，2.40-2.20(m，2H)。
IR(薄膜，cm-1)1737，1673。
MS(m/z)298[M]+，263[M-Cl]+，126。
中间体245-烯丙基-8-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-醇在-78℃下向中间体23(690mg)的无水CH2Cl2(6.5mL)溶液中加入TiCl4(0.255mL)。所得的棕色溶液在-78搅拌5分钟，然后加入烯丙基三甲基硅烷(0.440mL)的无水CH2Cl2(6.5mL)溶液。在-78℃下搅拌1.5小时后，用水淬灭反应，用CH2Cl2稀释，然后可将混合物加热至室温。使用CH2Cl2萃取水层，然后使用盐水(1×10mL)冲洗有机相，并用无水Na2SO4干燥。滤去固体，蒸发溶剂，得到浅黄色油状以非对映异构体烯醇酯和酮酯混合物形式存在的烯丙基化化合物(676mg)。
在N2气氛下向无水MeOH(6mL)分批加入钠(140mg，3eq)，当金属钠消耗完之后，加入盐酸乙脒(600mg)。搅拌10分钟后，滤去NaCl沉淀并以无水MeOH(2mL)冲洗。向粗产物烯丙基化产物(676g)加入游离乙脒溶液然后混合物在室温下搅拌18小时。蒸发溶剂和粗产物用快速色谱(硅胶，CH2Cl2/MeOH 98∶2→97∶3)纯化得到标题化合物的两种非对映异构体的3∶1混合物(538mg)。
NMR(1H，CDCl3)，(反式异构体)δ11.82(bs，1H)，7.42(d，1H)，7.10(dd，1H)，6.58(d，1H)，5.87(m，1H)，5.06(m，2H)，4.34(d，1H)，3.01(m，1H)，2.68(m，1H)，2.37(s，3H)，2.20(m，1H)，2.07(m，1H)，1.80(m，1H)，1.70(m，1H)，1.49(m，1H)。
NMR(1H，CDCl3)，(顺式异构体)δ11.70(bs，1H)，7.36(d，1H)，7.12(dd，1H)，6.81(d，1H)，5.83(m，1H)，5.02(m，2H)，4.23(bt，1H)，2.98(m，1H)，2.66(m，1H)，2.28(s，3H)，2.20(m，1H)，2.02-1.80(m，2H)，1.62-1.47(m，2H)。
MS(m/z)348[M]+，307[M-allyl]+。
中间体25反-5-烯丙基-4-氯-8-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5，6，7，8-四氢喹唑啉(异构体1)和顺5-烯丙基-4-氯-8-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5，6，7，8-四氢喹唑啉(异构体2)中间体24(538mg)溶解于POCl3(5mL)，然后将混合物回流2小时。蒸发POCl3并将残留物溶解于CH2Cl2，然后以NH4OH处理。两相分离后用CH2Cl2(3×10mL)萃取水相。用盐水(2×10mL)冲洗合并的有机萃取液然后用Na2SO4干燥。滤去固体并蒸发溶剂，用快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 95∶5)纯化粗产物得到透明油状标题化合物的异构体1(262mg)和标题化合物的异构体2(94mg)。
异构体1NMR(1H，CDCl3)δ7.44(d，1H)，7.06(dd，1H)，6.20(d，1H)，5.86(m，1H)，5.14(m，2H)，4.63(d，1H)，3.16(m，1H)，2.60(m，1H)，2.59(s，3H)，2.30(m，1H)，2.16(m，1H)，1.89(m，1H)，1.80(m，1H)，1.64(m，1H)。
MS(m/z)367[M+H]+。
异构体2NMR(1H，CDCl3)δ7.36(d，1H)，7.15(dd，1H)，6.83(bd，1H)，5.82(m，1H)，5.10-5.06(m，2H)，4.35(m，1H)，3.12(m，1H)，2.62(m，1H)，2.48(s，3H)，2.25(m，1H)，2.22-2.00(m，2H)，1.90-1.78(m，2H)。
MS(m/z)367[M+H]+。
中间体26[5-烯丙基-7-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7二氢-5H-吡咯并[2，3-d]吡啶-4-基]-环丙基甲基-胺加热中间体9(160mg，0.451mmol)的环丙基甲基胺(0.5mL)溶液至130℃(螺旋盖瓶)4小时。然后蒸发胺并使用快速色谱(硅胶，梯度CH2Cl2/EtOAc 9∶1-7∶3)纯化残留物得到透明油状的标题化合物(162mg，0.416mmol，92％)。
NMR(1H，CDCl3)δ7.43(d，1H)，7.36(d，1H)，7.24(dd，1H)，5.86(m，1H)，5.20-5.13(m，2H)，4.39(bt，1H)，3.88(dd，1H)，3.71(dd，1H)，3.40-3.30(m，3H)，2.46(m，1H)，2.35(m，1H)，2.36(s，3H)，1.08(m，1H)，0.60-0.27(m，4H)。
MS(m/z)389[M+H]+(2Cl)。
中间体275-环丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂-苊-4-醇向中间体26(160mg，0.411mmol)的丙酮/水8∶1(8mL)混合物的溶液中加入N-甲基吗啉-N-氧化物(100mg，2eq)，随后加入4％的OsO4(0.260mL，0.1eq)水溶液，反应混合物在室温下搅拌3.5小时。然后减压浓缩该溶液，加入饱和Na2SO3(50mL)水溶液。使用EtOAc(3×10mL)萃取水相，用无水Na2SO4干燥。滤去固体并蒸发溶剂，粗产物油被溶解在THF和水的1∶1的混合物(8mL)中，然后加入NaIO4(132mg，1.5eq)。反应混合物在室温下搅拌45分钟。用水稀释并用EtOAc(3×10mL)萃取。合并的有机萃取液用盐水冲洗一次然后使用无水Na2SO4干燥。滤去固体并蒸发溶剂，用快速色谱(硅胶，cHex/FtOAc1∶1)纯化粗产物得到透明油状的标题化合物(111mg，0.284mmol，69％)。
NMR(1H，DMSO-d6)δ7.68(d，1H)，7.44(m，2H)，5.92(d，1H)，5.17(m，1H)，4.13(t，1H)，3.79(m，1H)，3.76(dd，1H)，3.50(m，1H)，3.15(dd，1H)，2.24(m，1H)，2.21(s，3H)，1.43(dt，1H)，1.06(m，1H)，0.50-0.20(m，4H)。
MS(m/z)391[M+H]+(2Cl)。
中间体285-环丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-4-甲氧基-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊将PTSA(1.5mg，0.042eq)的无水MeOH(1.5mL)溶液加入纯净的中间体27(73mg，0.187mmol)中并将所得溶液在室温下搅拌18小时。然后蒸发溶剂并将残留物溶解在CH2Cl2(10mL)中。加入用水(1∶1，10mL)稀释饱和NaHCO3水溶液得到的溶液，然后用CH2Cl2(2×10mL)萃取水相。用水(1×10mL)和饱和NaCl水溶液(1×10mL)冲洗合并的有机萃取液，然后用无水Na2SO4干燥。滤去固体并蒸发溶剂，得到黄色油状标题化合物(68mg，0.168mmol，90％)，无需进一步纯化而用于后续步骤中。
NMR(1H，丙酮-d6)δ7.53(d，1H)，7.47(d，1H)，7.35(dd，1H)，4.93(t，1H)，4.23(t，1H)，4.05(dd，1H)，3.78(dd，1H)，3.51(m，1H)，3.39(s，3H)，3.13(dd，1H)，2.53(dddd，1H)，2.25(s，3H)，1.40(dt，1H)，1.09(m，1H)，0.50-0.20(m，4H)。
MS(m/z)405[MH]+2Cl)。
中间体29中间体22-[4-氯-7-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7二氢-5H-吡咯并[2，3-d]吡啶-5-基]-乙醇的另一种制备方法在0℃和N2气氛下向中间体10(93mg，0.261mmol)在无水CH2Cl2/MeOH2∶1混合物(3mL)中的溶液中加入NaBH4(20mg，2eq)。反应混合物在室温下搅拌1小时。然后用水(10mL)淬灭反应，减压浓缩。用EtOAc(3×10mL)萃取水相并用无水Na2SO4干燥。滤去固体并蒸发溶剂，得到白色固体状标题化合物(80mg，0.223mmol，85％)，无需进一步纯化而用于后续步骤中。
NMR(1H，CDCl3)δ7.54(d，1H)，7.40-7.30(m，2H)，4.20(t，1H)，3.93(dd，1H)，3.87(m，2H)，3.75(m，1H)，2.57(s，3H)，2.27(m，1H)，1.99(m，1H)。
MS(m/z)358[MH]+(3Cl)。
中间体30甲磺酸2-[4-氯-7-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7二氢-5H-吡咯并[2，3-d]吡啶-5-基]-乙基酯在室温和N2气氛下向中间体29(80mg，0.223mmol)的无水CH2Cl2(2mL)溶液加入三乙胺(155μl，5eq)然后加入甲磺酰氯(35μl，2eq)。反应混合物在室温下搅拌1小时。然后用水(10mL)淬灭反应并用CH2Cl2(3×10mL)萃取。合并的有机萃取液用盐水冲洗一次，用无水Na2SO4干燥。滤去固体并蒸发溶剂，使用快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 1∶1)纯化粗产物得到浅黄色油状标题化合物(71mg，0.163mmol，73％)。
NMR(1H，CDCl3)δ7.48(m，1H)，7.32(m，2H)，4.38(m，2H)，4.09(t，1H)，3.82(dd，1H)，3.66(m，1H)，3.00(s，3H)，2.46(m，1H)，2.42(s，3H)，2.14(m，1H)。
MS(m/z)436[MH]+(3Cl)。
中间体31{5-[1-(叔丁基二苯基-甲硅烷氧基甲基)-丁-3-烯基]-6-氯-2-甲基-吡啶-4-基}-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-胺在0℃和N2气氛下向2，4-双(三氟甲基)苯胺(2.11g，9.21mmol)的无水DMF(45mL)溶液中加入80％NaH/油(608mg，2.2eq)。30分钟后反应混合物被升温至室温，加入中间体11(4.46g，9.21mmol.)的无水DMF(30mL)溶液。反应混合物在室温下放置15分钟，然后冷却至0℃并用水稀释。用EtOAc(3×50mL)萃取水相，然后用水(50mL)，盐水(50mL)冲洗合并的有机萃取液，然后用无水Na2SO4干燥。滤去固体并蒸发溶剂，使用快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 97∶3)纯化粗产物得到透明油状得标题化合物(4.546g，6.71mmol，73％)。
NMR(1H，DMSO)δ8.34(s，1H)，7.97(s，1H)，7.53(d，1H)，7.48(d，1H)，7.54-7.31(m，10H)，5.7(m，1H)，4.97(d，1H)，4.90(d，1H)，4.11(m，1H)，3.99(m，1H)，3.72(m，1H)，2.56(m，2H)，2.18(s，3H)，0.91(s，9H)。
MS(m/z)678[MH]+。
中间体325-(叔丁基二苯基-甲硅烷氧基甲基)-4-氯-2-甲基-8-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-5，6，7，8-四氢-吡啶并[2，3-d]吡啶-7-醇在室温下向中间体31(2g，2.95mmol)在丙酮/H2O的8∶1混合物(36mL)中的溶液加入N-甲基-吗啉-N-氧化物(716mg，2eq)和OsO44％/H2O(1.8mL，0.1eq)。3.5小时后溶剂被蒸发然后加入饱和Na2SO3溶液。用EtOAc(2×20mL)萃取产物，然后用无水Na2SO4干燥合并的有机萃取液。滤去固体并蒸发溶剂。将油溶解于THF/H2O 9∶1混合物(45mL)中并加入NaIO4(947mg，1.5eq)。反应混合物在室温下搅拌18小时。用水稀释然后用EtOAc(3×20mL)萃取产物。用盐水冲洗合并的有机萃取液并用无水Na2SO4干燥。滤去固体并蒸发溶剂，得到标题化合物，两种非对映异构体的混合物(1.932g，2.85mmol，96％)。
NMR(1H，丙酮)异构体1δ8.15(m，2H)，7.72(m，5H)，7.44(m，6H)，6.19(d，1H)，5.27(m，1H)，4.41(t，1H)，4.08(dd，1H)，3.52(m，1H)，2.81(m，1H)，2.35(m，1H)，2.15(s，3H)，1.07(s，9H)。
异构体2δ8.15(m，2H)，7.72(m，5H)，7.44(m，6H)，5.8-5.4(m，2H)，4-3.8(m，2H)，3.6-3.4(m，1H)，3-2.8(m，1H)，2.35(m，1H)，2.15(s，3H)，1.07(s，9H)。
MS(m/z)680[MH]+。
中间体335-(叔丁基二苯基-甲硅烷氧基甲基)-4-氯-2-甲基-8-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-5，6，7，8-四氢-吡啶并[2，3-d]嘧啶在-78℃下向中间体32(1.93g，2.84mmol)的无水CH2Cl2(50mL)溶液中加入Et3SiH(1.82mL，4eq)和BF3·Et2O(1.58mL，4.4eq)。反应混合物在-78℃下搅拌1小时然后加热至室温并搅拌18小时。加入NaHCO3的饱和溶液并以CH2Cl2(3×50mL)萃取。合并的有机萃取液用无水Na2SO4干燥，滤去固体并蒸发溶剂。用快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 95∶5)纯化粗产物得到白色固体状标题化合物(0.607g，9.16mmol，32％)。
NMR(1H，CDCl3)δ7.98-7.94(d，1H)，7.88-7.80(dd，1H)，7.7-7.58 7.44-7.32(m，10H)，7.35-7.14(d，1H)，3.98-3.94(dd，1H)，3.73-3.55(m，1H)，3.63-3.59(m，1H)，3.44-3.36 3.38-3.3(2m，2H)，2.55-2.4(m，1H)，2.17-2.15(s，3H)，2.04-1.9(m，1H)，0.98(s，9H)。
MS(m/z)664[MH]+。
中间体34{4-氯-2-甲基-8-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-5，6，7，8-四氢-吡啶并[2，3-d]嘧啶-5-基}-甲醇在室温和N2气氛下向中间体33(600mg，0.91mmol)的无水DMF(15mL)溶液中加入Et3N·3HF(1.25mL，8.4eq)并将反应混合物在40℃加热6.5小时。然后冷却至室温并用水稀释。用Et2O(3×20mL)萃取产物，用盐水冲洗合并的有机萃取液并用无水Na2SO4干燥，滤去固体并蒸发溶剂。用快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 6∶4)纯化粗产物得到透明油状的标题化合物(337mg，0.8mmol，88％)。
NMR(1H，DMSO)δ8.26-8.12(m，2H)，7.9-7.8(d，1H)，5.08-4.98(t，1H)，3.9-3.6(2H)，3.7-3.3(2H)，3.24-3.10(1H)，2.3(m，1H)，2.09(s，3H)，2.0-1.8(m，1H)。
MS(m/z)426[MH]+。
中间体35甲磺酸4-氯-2-甲基-8-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-5，6，7，8-四氢-吡啶并[2，3-d]吡啶-5-基甲酯在0℃和N2气氛下向中间体34(200mg，0.47mmol)的无水CH2Cl2(10mL)溶液中加入Et3N(0.26mL，4eq)和MsCl(73μl，2eq)。反应混合物加热至室温并搅拌18小时。然后用水稀释并用CH2Cl2(3×20mL)萃取产物，用盐水冲洗合并的有机萃取液并用无水Na2SO4干燥，滤去固体并蒸发溶剂。然后用快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 6∶4)纯化粗产物得到透明油状的标题化合物(203mg，0.4mmol，86％)。
NMR(1H，DMSO)δ8.3 8.14(m，2H)，7.95-7.8(d+d，1H)，4.56-4.20(2H)，3.9-3.4(m，3H)，3.25(s，3H)，2.11(s，3H)，2.2-1.9(m，2H)。
MS(m/z)504[MH]+。
中间体36{4-氯-2-甲基-7-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-6，7二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基}-乙醛在室温和N2气氛下向中间体31(0.6g，0.886mmol)的无水DMF(15mL)溶液中加入Et3N·3HF(1.22mL，8.4eq)。反应混合物在室温下搅拌18小时。用水稀释反应混合物并以Et2O(3×20mL)萃取。用盐水冲洗合并的有机萃取液并用无水Na2SO4干燥，滤去固体并蒸发溶剂。使用快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 8∶2)纯化粗产物得到醇中间体(346mg，89％)，将其溶解于无水CH2Cl2(15mL)中并冷却0℃。加入Et3N(0.44mL，4eq)和MsCl(0.122mL，2eq)，加热反应混合物至室温并搅拌18小时。用水稀释反应混合物并用CH2Cl2(3×20mL)萃取产物。用无水Na2SO4干燥合并的有机萃取液，滤去固体并蒸发溶剂。用快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 8∶2)纯化粗产物得到环吡咯烷中间体(276mg，83％)。将该中间体溶解于丙酮/H2O 8∶1的混合物(18mL)中，并加入N-甲基-吗啉-N-氧化物(230mg，2eq)和OsO4(403μl，0.1eq)。反应混合物在室温下搅拌6小时。蒸发溶剂并加入饱和Na2SO3。以EtOAc(3×20mL)萃取产物并用无水Na2SO4干燥合并的有机萃取液。滤去固体，蒸发溶剂。将粗产物溶解于THF/H2O9∶1混合物(15mL)中并加入NaIO4(210mg，1.5eq)。反应混合物在室温下搅拌18小时，用水稀释，然后以EtOAc(3×20mL)萃取产物。用盐水冲洗合并的有机萃取液并用无水Na2SO4干燥。滤去固体，蒸发溶剂，得到透明油状的标题化合物(250mg，0.59mmol，90％)。
NMR(1H，CDCl3)δ9.86(s，1H)，8.05(s，1H)，7.93(d，1H)，7.5(d，1H)，4.24(m，1H)，3.93(m，1H)，3.65(dd，1H)，3.25(dd，1H)，2.93(dd，1H)，2.4(s，3H)。
MS(m/z)424[MH]+。
中间体37甲磺酸2-{4-氯-2-甲基-7-(2.4-二-三氟甲基-苯基)-6，7二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基}-乙酯在0℃和N2气氛下向中间体36(250mg，0.59mmol)在CH2Cl2/MeOH的9∶1混合物(15mL)中的溶液中加入NaBH4(44mg，2eq)。在0℃下反应混合物搅拌30分钟。加入浓HC直至pH＝7。用水稀释反应混合物然后以CH2Cl2(3×20mL)萃取产物。用盐水冲洗合并的有机萃取液并用无水Na2SO4干燥。滤去固体，蒸发溶剂，得到白色固体(醇中间体，231mg，0.54mmol，93％)，将其溶解于无水CH2Cl2(15mL)中。反应混合物冷却至0℃然后加入Et3N(302μl，4eq)和MsCl(85μl，2eq)。反应混合物在室温下搅拌18小时，然后用水稀释并用CH2Cl2(3×20mL)萃取产物，合并的有机萃取液以无水Na2SO4干燥。滤去固体，蒸发溶剂。然后粗产物以快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc6∶4)纯化得到透明油状的标题化合物(252mg，0.50mmol，93％)。
NMR(1H，CDCl3)δ8.05(bs，1H)，7.94(bd，1H)，7.53(bd，1H)，4.42(m，2H)，4.07(t，1H)，3.83(dd，1H)，3.71(m，1H)，3.04(s，3H)，2.46(m，1H)，2.43(s，3H)，2.13(m，1H)。
MS(m/z)504[MH]+。
中间体38和39(S)-2-乙酰氧基-丙酸4-氯-2-甲基-8-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-5，6，7，8-四氢-吡啶并[2，3-d]嘧啶-5(S)-基甲酯和(S)-2-乙酰氧基-丙酸4-氯-2-甲基-8-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-5，6，7，8-四氢-吡啶并[2，3-d]嘧啶-5(R)-基甲酯在0℃和N2气氛下向中间体34(320mg，0.753mmol)的CH2Cl2(7mL)溶液中加入DMAP(230mg，2.5eq)，Et3N(0.73mL，7eq)和(S)-2-乙酰氧基丙酰氯(0.61mL，6.4eq)。反应混合物在0℃下搅拌30分钟，加热至室温并以饱和NaHCO3溶液稀释。以CH2Cl2(3×30mL)萃取产物并用无水Na2SO4干燥合并的有机萃取液。滤去固体，蒸发溶剂。然后粗产物以快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 8∶2)纯化，并以制备手性高效液相色谱(HPLC)分离得到两种白色固体状非对映异构体中间体38(97mg，0.18mmol，d.e.＝97％)和中间体39(89.7mg，0.17mmol，d.e.＞99％)。
NMR(1H，丙酮)中间体38δ8.22-8.13(m，2H)，7.96-7.8(d+d，1H)，5.06(m，1H)，4.56-4.34(m，2H)，4.07-3.54(m，3H)，2.34-2.05(m，2H)，2.7(s，3H)，2.06(s，3H)，1.48(d+d，3H)。
中间体39δ8.22-8.14(m，2H)，7.96-7.81(d+d，1H)，5.06(m，1H)，4.5-4.3(m，2H)，4.1-3.54(m，3H)，2.7(s，3H)，2.3-2.0(m，2H)，2.13(s，3H)，1.47(d，3H)。
MS(m/z)540[MH]+。
HPLC制备型前置柱/保护柱 Filter Rhodyne柱型 Daicel CHIRALPAK AD柱长[cm] 25内径[mm] 2
注射体积[μl] 500移动相 正己烷-IPA 90/10v/v流速[mL/min] 6.5检测器类型 DAD波长[nm] 225，292中间体38 21.8，r.t.(min)中间体39 26.5，r.t.(min)分析型前置柱/保护柱 FilterRhodyne柱型 CHIRALPAK AD柱长[cm] 25内径[mm] 4.6粒径[μm] 5柱温[] 室温自动进样器温度[] 室温注射体积[μl] 20移动相 正己烷/异丙醇90/10v/v流速[mL/min] 1.0检测器类型 DAD波长[nm] 225中间体38 6.88，r.t.(min)前置柱/保护柱 Filter Rhodyne柱型 CHIRALPAK AD柱长[cm] 25内径[mm] 4.6柱温[℃] 室温自动进样器温度[℃] 室温移动相 正己烷/2-丙醇90/10v/v流速[mL/min] 1.0
检测器类型 DAD波长[nm] 220-350中间体39 8.29，r.t.(min)中间体40{4-氯-2-甲基-8-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-5，6，7，8-四氢-吡啶并[2，3-d]嘧啶-5(S)-基}-甲醇在0℃下下向中间体38(90mg，0.167mmol)在THF/H2O的4∶1混合物(5mL)中的溶液中加入LiOH(14mg，2eq)然后反应混合物搅拌50分钟。用水稀释并用Et2O(2×10mL)和EtOAc(1×10mL)萃取产物。合并的有机萃取液以无水Na2SO4干燥，滤去固体，蒸发溶剂，用快速色谱(硅胶，cHex/AcOEt 6∶4)纯化粗产物得到透明油状的标题化合物(65mg，0.15mmol，92％，e.e.＝97％)。
NMR(1H，DMSO)δ8.3-8.1(m，2H)，7.88-7.81(d+d，1H)，5.00(broad，1H)，3.9-3.6(m，2H)，3.7-3.3(m，2H)，3.2-3.1(m，1H)，2.3(m，1H)，2.09(s，3H)，2.00-1.8(m，1H)。
MS(m/z)426[MH]+。
HPLC分析型前置柱/保护柱 Filter Rhodyne柱型 Daicel CHIRALPAK AD柱长[cm] 25内径[mm] 0.46柱温[] 室温自动进样器温度[] 室温注射体积[μl] 20移动相 正己烷/IPA/EtOH步骤1 时间-保留A-保留B95/3.5/1.5流速[mL/min] 1.0检测器类型 DAD波长[nm] 225中间体40 10.28，r.t.(min)
中间体41甲磺酸4-氯-2-甲基-8-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-5，6，7，8-四氢-吡啶并[2，3-d]嘧啶-5(S)-基甲酯在0℃和N2气氛下向中间体40(62mg，0.145mmol)的无水CH2Cl2(5mL)溶液中加入Et3N(80μl，4eq)和MsCl(23μl，2eq)。反应混合物升温至室温并搅拌1小时。然后用水稀释并以CH2Cl2(3×20mL)萃取产物，然后用盐水冲洗合并的有机萃取液并以无水Na2SO4干燥，滤去固体，蒸发溶剂。粗产物以快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 6∶4)纯化得到透明油状的标题化合物(67mg，0.13mmol，92％，e.e.＝95％)。
NMR(1H，DMSO)δ8.3-8.14(m，2H)，7.94-7.83(d，1H)，4.55-4.20(2H)，3.94-3.4(m，3H)，3.25(s，3H)，2.11(s，3H)，2.25-1.94(m，2H)。
MS(m/z)504[MH]+。
HPLC分析型前置柱/保护柱 Filter Rhodyne柱型 CHIRALPAK AD柱长[cm] 25内径[mm] 4.6粒径[μm] 5柱温[] 室温自动进样器温度[] 室温注射体积[μl] 20移动相 正己烷/EtOH/IPA 73.5/1.5/25v/v流速[mL/min] 1.0检测器类型 DAD波长[nm] 225中间体41 6.52，r.t.(min)
中间体42{4-氯-2-甲基-8-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-5，6，7，8-四氢-吡啶并[2，3-d]嘧啶-5(R)-基}-甲醇在0℃向中间体39(83mg，0.154mmol)在THF/H2O 4∶1的混合物(5mL)中的溶液中加入LiOH(14mg，2eq)并将反应混合物搅拌20分钟。然后用水稀释并以Et2O(2×10mL)和EtOAc(1×10mL)萃取产物，合并的有机萃取液以无水Na2SO4干燥。滤去固体，蒸发溶剂。粗产物用快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc7∶3)纯化得到标题化合物(61mg，0.14mmol，93％，e.e.＞99％)透明油状的。
NMR(1H，DMSO)δ8.26-8.12(m，2H)，7.9-7.8(d，1H)，5.08-4.98(t，1H)，3.9-3.6(m，2H)，3.7-3.3(m，2H)，3.24-3.1(m，1H)，2.3(m，1H)，2.09(s，3H)，2.00-1.8(m，1H)。
MS(m/z)426[MH]+。
HPLC分析型前置柱/保护柱 Filter Rhodyne柱型 CHIRALPAK AD柱长[cm] 15内径[mm] 4.6注射体积[μl]10移动相 正己烷/乙醇/IPA步骤1保留时间A-保留B95/1.5/3.5v/v流速[mL/min] 1.0检测器类型 DAD波长[nm] 225中间体42 9.417，r.t.(min)中间体43甲磺酸4-氯-2-甲基-8-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-5，6，7，8-四氢-吡啶并[2，3-d]嘧啶-5(R)-基甲酯在0℃下和N2气氛中，向中间体42(58mg，0.136mmol)的无水CH2Cl2(5mL)溶液加入Et3N(76μl，4eq)和MsCl(21μl，2eq)。反应混合物升温至室温并搅拌1小时，然后用水稀释。以CH2Cl2(3×20mL)萃取产物。用盐水冲洗合并的有机萃取液并以无水Na2SO4干燥。滤去固体，蒸发溶剂，然后以快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 7∶3)纯化粗产物得到透明油状的标题化合物(57.6mg，0.11mmol，85％，e.e.＞99％)。
NMR(1H，DMSO)δ8.3-8.14(m，2H)，7.95-7.8(d，1H)，4.56-4.20(2H)，3.9-3.4(m，3H)，3.25(s，3H)，2.11(s，3H)，2.2-1.9(m，2H)。
MS(m/z)504[MH]+。
HPLC分析型前置柱/保护柱 Filter Rhodyne柱型 CHIRALPAK AD柱长[cm] 25内径[mm] 4.6粒径[μm] 3注射体积[μl] 10移动相 正己烷/乙醇/IPA步骤1时间-保留A-保留B75/1.5/23.5v/v流速[mL/min] 1.0检测器类型 DAD波长[nm] 225中间体43 4.703，r.t.(min)中间体443-(2，4-二氯-苯基)-2-羟基-6-硝基甲基-环己-1-烯酸甲酯向中间体23(26mg，0.087mmol)在Et2O/THF无水混合物(0.5mL/0.1mL)中的溶液中加入硝基甲烷(0.005mL，1.1eq)和大孔树脂A21(弱碱性树脂260mg)。无需搅拌在室温下缓挥发溶剂。2.5小时后，以Et2O冲洗干的树脂然后倾析。进一步使用Et2O(7x)冲洗并蒸发合并的有机部分。使用快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc，9∶1)纯化粗产物得到透明油状的标题化合物(25mg，80％)。
NMR(1H，CDCl3)δ12.72(s，1H)，7.41(d，1H)，7.24(dd，1H)，7.03(d，1H)，4.64(dd，1H)，4.50(t，1H)，4.07(bm，1H)，3.87(s，3H)，3.58(m，1H)，2.08(bm，1H)，1.85(bm，3H)。
MS(m/z)359[MH]+(2Cl)。
中间体458-(2，4-二氯-苯基)-2-甲基-5硝基甲基-5，6，7，8-四氢-喹唑啉4-醇在N2条件下向无水MeOH(1.5mL)中分批加入钠(21mg，3.1eq)。当金属钠消耗完后，加入盐酸乙脒(96mg，3.3eq)。搅拌10分钟后，滤去NaCl沉淀并以无水MeOH(2mL)冲洗。向中间体44(106mg，0.294mmol)中加入游离乙脒溶液，混合物在室温下搅拌18小时。蒸去溶剂，然后粗产物以快速色谱(硅胶，EtOAc/cHex 8∶2)纯化并得到透明油状的标题化合物(81mg，75％)。
MS(m/z)368[MH]+(2Cl)。
中间体464-氯-8-(2 4-二氯-苯基)-2-甲基-5硝基甲基-5，6，7，8-四氢-喹唑啉间体45(73mg，0.198mg)的POCl3(2mL)溶液回流加热2.5小时。蒸发除去POCl3并且将剩余物溶解在CH2Cl2中，以浓NH4OH冲洗有机相，分离有机相和水相，并以CH2Cl2(3×10mL)萃取水层。以NaCl饱和水溶液冲洗合并的有机萃取液并以无水Na2SO4干燥。滤去固体，蒸发溶剂，得到粗产物标题化合物(68mg，89％)并被用于下面的步骤。
MS(m/z)386[MH]+(3Cl)。
中间体474-氯-8-(2，4-二氯-苯基)-2-甲基-5，6，7，8-四氢-喹唑啉-5-甲醛在-10℃和N2气氛下向搅拌过的中间体46(64mg，0.166mmol)的无水MeOH(1mL)溶液，逐滴加入KOH的甲醇溶液(0.1M，2.3mL)，在-10℃下搅拌15分钟后，逐滴加入KMnO4(18mg，0.7eq)和MgSO4(20mg，1eq)在H2O(2.5mL)中的溶液，(反应温度保持在0℃以下)。在0℃搅拌反应混合物24小时。然后用塞力特硅藻土过滤，以CH2Cl2冲洗硅藻土。蒸发溶剂并以CH2Cl2(3×10mL)萃取水相。以无水Na2SO4干燥合并的有机萃取液，滤去固体，蒸发溶剂。以快速色谱(硅胶，cHex/EtOAC 9∶1→8∶2)纯化粗油得到标题化合物65∶35非对映异构体的混合物(27mg，46％，透明油状物)。
MS(m/z)355[MH]+(3Cl)。
实施例1代表性通式(I-1)结构混合物的合成5-(2，4-二氯苯基)-1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(I-1-1)在120℃下中间体19(14mg)的纯3-戊基胺(60μl)溶液搅拌8小时。然后以水稀释反应混合物并以Et2O(3×10mL)萃取。合并的有机萃取液水洗一次，盐水洗一次然后用无水Na2SO4进行干燥。滤去固体，蒸发溶剂，然后以快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 8∶2)纯化粗产物浅黄色油得到浅黄色油状的标题化合物(5.9mg)。
5-(2，4-二氯苯基)-1-(2-乙基-丁基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5，5a，8b-八氢-1，5，6，8-四氮杂苊(I-1-2)中间体19(10.0mg)的纯2-乙基-正丁基胺(100μl)溶液在密封瓶中在120℃搅拌7小时。反应混合物冷却至在室温下并直接以快速色谱(硅胶，甲苯/EtOAc 95∶5)纯化得到浅黄色油状标题化合物(1.9mg)。
5-(2，4-二氯苯基)-1-(2-甲氧基-1-甲氧基甲基-乙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5，5a，8b-八氢-1，5，6，8-四氮杂苊(I-1-3)中间体19(16.5mg)的纯2-甲氧基-1-(甲氧基甲基)乙基胺(52.6mg)溶液在150℃下(螺旋盖瓶)搅拌4小时。反应混合物冷却至室温并直接以快速色谱(硅胶，甲苯/EtOAc 6∶4)纯化得到浅黄色油状标题化合物(4.2mg)。
7-甲基-1-(1-丙基丁基)-5-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(I-1-4)中间体35(135mg，0.27mmol)和4-氨基庚烷(0.5mL，12eq)被在130℃(螺旋盖瓶)加热3小时。然后冷却反应混合物至室温下并以CH2Cl2稀释。蒸发除去溶剂并以快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 9∶1)纯化粗产物得到黄色固体状标题化合物(29.4mg，0.06mmol，23％)。
对映体拆分第一对映体7-甲基-1-(1-丙基丁基)-5-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-1，2，2a(S)，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊中间体41(60mg，0.119mmol)和4-氨基庚烷(178μl，10eq)在130℃(螺旋盖瓶)被加热3小时。以CH2Cl2稀释反应混合物然后蒸发溶剂。以快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 95∶5)纯化粗产物得到透明油状的标题化合物(19.4mg，0.04mmol，33％，e.e.＝95％)。
HPLC分析型柱型 CHIRALPAK OD柱长[cm] 25内径[mm] 4.6柱温[] 35注射体积[μl] 10移动相CO2/EtOH(0.15％Ipa)85/15流速[mL/min] 2.5检测器类型 UV波长[nm] 225柱压[bar] 150标题化合物2.55，r.t.(min)1H-NMR和MS与下表1所给出的化合物I-1-4的数据是相同的。
第二个对映体7-甲基-1-(1-丙基丁基)-5-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-1，2，2a(R)，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊中间体43(55mg，0.109mmol)和4-氨基庚烷(163μl，10eq)在130℃(螺旋盖瓶)被加热3小时。以CH2Cl2稀释反应混合物然后蒸发溶剂。以快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 95∶5)纯化粗产物得到透明油状的标题化合物(25.7mg，0.053mmol，49％，e.e.＞99％)。
HPLC分析型柱型 CHIRALPAK OD柱长[cm] 25内径[mm] 4.6柱温[]35注射体积[μl] 10移动相 CO2/EtOH(0.15％Ipa)85/15流速[mL/min] 2.5检测器类型UV波长[nm] 225柱压[bar]150标题化合物 2.12，r.t.(min)1H-NMR和MS与下表1所给出的化合物I-1-4的数据是相同的。
5-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1-(1-丙基丁基)-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(I-1-5)中间体19(20mg，0.046mmol)的4-氨基庚烷(100μl)溶液在130℃(螺旋盖瓶)加热18小时。蒸发除去胺并以快速色谱(硅胶，甲苯/EtOAc，9∶1→8∶2)纯化残留物得到透明油状的标题化合物(7mg，0.017mmol，36％)。
对映体拆分第一个对映体5-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1-(1-丙基丁基)-1，2，2a-(S)，3，4，5，5a，8b-八氢-1，5，6，8-四氮杂苊中间体47(120mg，0.276mmol)和4-氨基壬烷(163μl，10eq)在130℃(螺旋盖瓶)加热18小时。以CH2Cl2稀释反应混合物然后蒸发溶剂。以快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 95∶5)纯化粗产物得到透明油状的标题化合物(62mg，53％，ee％＞99％)。
HPLC分析型前置柱/保护柱 Rheodyne filter柱型CHIRALPAK AD柱长 25内径(mm)4.6粒径(μm) 5柱温(℃)室温自动进样器温度(℃)室温注射体积(μl) 20移动相 正己烷/叔丁醇90/10a/a流速(mL/min)1检测器类型 DAD波长(nm)220-350标题化合物 10.2r.t.(min)1H-NMR和MS与下表1所给出的化合物I-1-5的数据是相同的。
第二个对映体5-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1-(1-丙基丁基)-1，2，2a-(R)，3，4，5，5a，8b-八氢-1，5，6，8-四氮杂苊中间体49(130mg，0.298mmol)和4-氨基庚烷(0.342mL，10eq)在130℃(螺旋盖瓶)加热3小时。以CH2Cl2(5mL)稀释反应混合物然后蒸发溶剂。以快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 9.5∶0.5)纯化粗产物得到透明油状的标题化合物74mg，59％，ee％＝90％)。
HPLC分析型前置柱/保护柱 Rheodyne filter柱型 CHIRALPAK AD柱长(cm) 25内径(mm) 4.6
粒径(μm) 5柱温(℃)室温自动进样器温度(℃)室温注射体积(μl) 20移动相 正己烷/叔丁醇90/10a/a流速(mL/min)1检测器类型 DAD波长(nm)220-350标题化合物 7.5，r.t.(min)，90％1H-NMR和MS与下表1所给出的化合物I-1-5的数据是相同的。
所有的分析数据在下表1中给出。
表1
实施例2代表性通式(I-2)结构混合物的合成9-(2，4-二氯苯基)-4-(1-乙基丙基)-2-甲基-5，6，6a，7，8，9-六氢-4H-1，3，4-三氮杂非那烯(异构体1)和9-(2，4-二氯苯基)-4-(1-乙基丙基)-2-甲基-5，6，6a，7，8，9-六氢-4H-1，3，4-三氮杂非那烯(异构体2)，(2-1-1)中间体25(异构体1)溶解于无水CH2Cl2(6mL)中并在-78℃下以O3(5g/hr)处理20分钟。加入二甲基硫(1mL)并将混合物加热至室温搅拌过夜。使用Na2SO4干燥反应混合物，滤去固体，蒸发溶剂。得到粗产物醛的两种非对映异构体1∶1混合物(106mg)并且未经进一步纯化而使用。
向上述制备的醛(30mg)的无水MeOH(1mL)溶液中加入1-乙基-丙基胺(0.010mL)然后反应混合物在室温下搅拌3小时。加入1M的NaBH3CN的THF(0.162mL)溶液，混合物在室温下搅拌65小时。加入另一部分的1MNaBH3CN的THF(0.162mL)溶液并在室温下搅拌反应3小时。蒸发溶剂并在水和EtOAc之间分配残留液。用EtOAc(4×10mL)萃取水层，然后用盐水(2×10mL)冲洗合并的有机萃取液，无水Na2SO4干燥，滤去固体并蒸发溶剂。以快速色谱(硅胶，CH2Cl2/EtOAc 7∶3)纯化粗产物得到标题化合物(16mg)的两种非对映异构体的混合物。
使用制备TLC(1％NH4OH in甲苯/EtOAc 95∶5)分离这两种非对映异构体，得到黄色油状异构体1(5.4mg)和异构体2(5.6mg)。
所有分析数据在下表2中给出。
表2
实施例3代表性通式(I-3)结构混合物的合成5-环丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(3-1-1)向中间体10(20mg)的无水CH3OH(1mL)溶液中加入(氨基甲基)环丙烷(5μl，1eq).室温下搅拌反应混合物90分钟然后加入NaBH3CN 1.0M/THF(113μl)。混合物在室温下再搅拌18小时然后用H2O(10mL)淬灭反应。用EtOAc(2×15mL)萃取产物，以无水Na2SO4干燥合并的萃取液，过滤，真空浓缩至干燥。以快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 9∶1)纯化粗产物得到无色油状标题化合物(5mg)。
1-(2，4-二氯苯基)-5-(2-甲氧基乙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(3-1-2)向中间体10(16mg)的无水THF(1mL)溶液中加入2-甲氧基-乙基胺(4μl)。室温下搅拌反应混合物90分钟然后加入NaBH3CN 1.0M/THF(90μl)。混合物再在室温下搅拌18小时然后用H2O(10mL)淬灭反应。用EtOAc(2×15mL)萃取产物。以无水Na2SO4干燥合并的萃取液。过滤并真空浓缩至干燥。粗产物溶解于无水THF(2mL)中并加入TEA(30μl)。反应混合物加热回流10小时然后用H2O淬灭反应。以EtOAc(2×10mL)萃取产物。无水Na2SO4干燥合并的萃取液，过滤并真空浓缩至干燥。使用制备TLC(eluted 3 times1cHex100％，2cHex/EtOAc 75∶25，3cHex/EtOAc 50∶50)纯化得到浅褐色油状标题化合物2mg(12％)。
1-(2，4-二氯苯基)-5-(1-乙基丙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(3-1-3)向中间体10(20mg)的无水THF(1mL)溶液中加入1-乙基-丙基胺(6.5μl)。反应混合物在室温下搅拌90分钟然后加入NaBH3CN 1.0M/THF(112μl)。混合物再在室温下搅拌18小时然后用水(10mL)淬灭反应。以EtOAc(2×10mL)萃取产物。无水Na2SO4干燥合并的萃取液，过滤并真空浓缩至干燥。粗产物溶解于无水甲苯(2mL)中然后加热回流18小时。以H2O(10mL)稀释反应混合物并用EtOAc(3×10mL)萃取。无水Na2SO4干燥合并的萃取液，过滤并真空浓缩至干燥，以制备TLC(cHex/EtOAc 75∶25)纯化得到无色油状标题化合物(1.6mg，7％)。
1-(2，4-二氯苯基)-5-(2-乙基丁基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(3-1-4)在室温和N2气氛下向中间体10(35.5mg)的无水MeOH(2mL)溶液中加入2-乙基丁基胺(0.014mL)。反应混合物在室温下搅拌90分钟。然后在室温下加入NaBH3CN(1N THF溶液，0.2mL)并将反应混合物在70℃加热至3小时。然后将其冷却至室温并加入H2O(5mL)。减压蒸发有机溶剂后用EtOAc(3×5mL)萃取水悬浮液。使用饱和NaCl水溶液(5mL)冲洗混合有机层，然后用无水Na2SO4干燥。滤去固体并蒸发溶剂。以快速色谱(硅胶，cHex100％→cHex/EtOAc 95∶5)纯化粗产物得到黄色固体标题化合物(0.018g)。
1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-5-(1-丙基丁基)-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(3-1-5)中间体30(20mg，0.046mmol)的4-氨基庚烷(100μl)在130℃(螺旋盖瓶)加热6.5小时，然后置于室温18小时。蒸发胺，以快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc，9∶1)直接纯化残留物得到透明油状的标题化合物(9mg，0.021mmol，47％)。
7-甲基-5-(1-丙基丁基)-1-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(3-1-6)中间体37(230mg，0.457mmol)和4-氨基庚烷(0.68mL，10eq)在130℃(螺旋盖瓶)加热14小时。使用CH2Cl2稀释反应混合物然后蒸去溶剂。以快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 95∶5)纯化粗产物得到白色固体状标题化合物(54mg，0.11mmol，24％)。
5-环丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-4-丙基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(3-1-7)在-50℃和N2气氛下向CuBr Me2S(48mg，5eq)的无水Et2O(0.8mL)悬浮液逐滴加入PrMgBr 1M/THF(0.188mL，4eq)同时剧烈搅拌。深黄色混合物在-50℃下搅拌45分钟然后冷却至-78℃。加入BF3Et2O(0.024mL，4eq)，反应混合物在-78℃下搅拌20分钟后，加入中间体28(19mg，0.047mmol)的无水THF(0.5mL)溶液，然后将反应温度升至室温3小时。当总的反应时间4小时后，加入1∶1的浓NH4OH和NH4Cl(2mL)饱和水溶液的混合物并搅拌15分钟。加入水和EtOAc进行分层后然后用EtOAc(3×10mL)萃取水相。用水洗合并的有机萃取液后以无水Na2SO4干燥。滤去固体并蒸发溶剂。以快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 9∶1)纯化粗产物得到浅黄色油状标题化合物(3mg，0.007mmol，15％)。
4-丁基-5-环丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(3-1-8)在-50℃和N2气氛下向CuBr Me2S(72mg，4.3eq)的无水Et2O(1mL)悬浮液逐滴加入n-BuLi 1.6M/己烷(0.21mL，4.15eq)同时剧烈搅拌。深棕色混合物在-50℃下搅拌40分钟然后冷却至-78℃。加入BF3Et2O(0.043mL，4.15eq)。反应混合物在-78℃下搅拌15分钟后，加入中间体28(33mg，0.081mmol)的无水THF(0.5mL)溶液，然后可将反应温度升至室温3小时。当总的反应时间3.5小时后，加入1∶1的浓NH4OH和NH4Cl(2mL)饱和水溶液的混合物并搅拌混合物15分钟。加入水和EtOAc，进行分层后用EtOAc(3×10mL)萃取水相。用水冲洗合并的有机萃取液然后以无水Na2SO4干燥。滤去固体并蒸发溶剂。以快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 9∶1)纯化粗产物得到浅黄色油状标题化合物(异构体1顺式)，(16mg，0.037mmol，46％)。也分离得到一小部分反式异构体2。
5-环丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-4-丙基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(3-1-9)在-60℃和N2气氛下向CuBr Me2S(27mg，2eq)的无水Et2O(0.2mL)悬浮液加入丙基溴化镁溶液(0.2mL，2eq在室温下和N2气氛中将Mg(27mg，1.1mmol)和丙基溴加入无水Et2O(1.5mL)中反应1小时制备的)。再以0.2mL无水Et2O稀释黄色不均匀的反应混合物并在-60℃下搅拌30分钟。然后冷却至-78℃并加入BF3·Et2O(17μl，2eq)。在-78℃下10分钟后，加入中间体28(27mg，0.067mmol)的无水THF(0.4mL)溶液，反应混合物缓慢加热至室温(4小时)。然后使用1∶1的浓NH4OH/饱和水溶液NH4Cl混合物稀释并在室温下搅拌10分钟。使用CH2Cl2(4×20mL)萃取水相然后以H2O(2×20mL)冲洗合并的有机萃取液并以无水Na2SO4进行干燥。滤去固体并蒸发溶剂。以快速色谱(硅胶，9∶1→7∶3 cHex/EtOAc)纯化粗产物得到透明油状标题化合物(4mg，0.009mmol，14％)。
4，5二丁基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊(3-1-10)在N2气氛下向冷却至-50℃的CuBr Me2S(65mg，4.3eq)的无水Et2O(1mL)悬浮液加入，然后逐滴加入1.6M BuLi(0.184mL，0.295mmol，4eq)溶液同时剧烈搅拌。深棕色混合物在-50℃至-40℃下搅拌40分钟然后冷却至-78℃，加入BF3Et2O(0.037mL，4eq)。反应混合物在-78℃下搅拌15分钟后，加入中间体28(30mg，0.074mmol)的无水THF(0.5mL)溶液，然后将反应温度升至室温3小时。当总的反应时间3.5小时后，加入1∶1的浓NH4OH和饱和NH4Cl水溶液(1mL)的混合物并搅拌15分钟。加入水和EtOAc进行分层后用EtOAc(3×10mL)萃取水相。用水冲洗合并的有机萃取液后以无水Na2SO4干燥。滤去固体并蒸发溶剂。以快速色谱(cHex/EtOAc 9∶1)纯化粗产物(28mg)得到无色油状标题化合物(12mg，0.028mmol，37％)。
所有分析数据在下表3中给出。
表3


实施例4代表性通式(1-4)结构化合物的合成方法5-(2，4-二氯苯基)-1-(1-乙基丙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，6，8-三氮杂苊(4-1-1)在室温和N2气氛下向中间体47(22mg，0.062mmol)的无水MeOH(1mL)溶液中加入1-乙基丙胺(9μl，1.25eq)，反应混合物在室温下搅拌1.25小时。然后加入NaBH3CN 1.0M/THF(0.15mL，2.4eq)和反应混合物在室温下搅拌2小时，然后在-18℃下搅拌4天。蒸发溶剂后残留物以EtOAc/H2O进行分配。相分离后以EtOAc(3×5mL)萃取水相。以饱和NaCl水溶液(1×5mL)冲洗合并的有机萃取液，以无水Na2SO4干燥。滤去固体并蒸发溶剂。以快速色谱(硅胶，cHex/EtOAc 9∶1→8∶2)纯化得到透明油状的标题化合物(3mg，0.008mmol，12％)。
所有分析数据在下表4中给出。
表4 实施例5CRF结合活性通过CRF1和CRF2 SPA实验中，化合物在体外从中国仓鼠卵巢(CHO)细胞膜所表达的重组人类CRF受体中分别取代125I-oCRF和125I-Sauvagine的能力来测定CRF结合亲和性。为了制备膜，先将CHO细胞从融合T形烧瓶收集到装有SPA缓冲液中(HEPES/KOH 50mM，EDTA 2mM；MgCl210mM，pH7.4.)的50ml离心试管中，在与Polytron均匀混合后进行离心分离(在4℃下50′000g，5minBeckman离心分离机，JA20转子)。将小片重新悬浮、混合均匀，然后按照前面的方式离心分离。
SPA试验是在孔板(Optiplate)的每个孔中将100μL反应试剂混合物加入到1μL化合物的稀释液(100％DMSO溶液)中进行。可将SPA缓冲剂、WGASPA珠(2.5mg/mL)、BSA(1mg/mL)和膜(每毫升CRF1、CRF2各50、5μg蛋白质)以及50pM放射配体混合来制备测试用的混合物。该孔板在室温下温育过夜(＞18小时)，然后用带有WGA-SPA125I计数器的Packard Topcount读取数据。
实施例6CRF功能测试通过抑制效果功能测试来表征本发明的化合物。以CRF刺激人类CRF-CHO细胞并且通过测量cAMP的累积来评估受体活化作用。
从融合T形烧瓶取出CHO细胞，然后与不含G418的培养基重新混合并将其分装在96-孔孔板，25′000c/孔，100μL/孔并温育过夜。温育完成后以100μL 37℃的cAMP IBMX缓冲液(5mM KCl，5mM NaHCO3，154mM NaCl，5mM HEPES，2.3mM CaCl2，1mM MgCl2；1g/L葡萄糖，pH7.4加上1mg/mLBSA和1mM IBMX)以及1μL拮抗剂的纯DMSO稀释液替换该介质。在37℃无CO2条件下在板培养箱中再温育10分钟后，加入1μL拮抗剂的纯DMSO稀释液。按照前面的步骤，在板温育10分钟后，以Amersham RPA 538成套仪表测试cAMP细胞的含量。
本说明书所有引用的出版物，包括但不限于专利和专利申请，都用作参考文献，就象每份个别出版物具体和单独全文用作参考文献。
可以理解，本发明包括特定的或优选的上述种类的所有组合。
本申请的说明书和权利要求书部分可以作为任何后续申请要求优先权的基础。上述后续申请的权利要求可以涉及这里所述任何特征或它们的组合。它们可以是化合物、组合物，方法或用途权利要求、或实施例的形式，且不受其限制。
权利要求
1.通式(I)的化合物，包括其立体异构体，前药及其药学上可接受的盐或溶剂化物 其中R是芳基或杂芳基，其中每个上述基团R可被1到4个独立地选自如下基团的基团所取代卤素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，卤代C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，卤代C1-C6烷氧基，C1-C6单或双烷基氨基，硝基，氰基以及基团R4；R1是氢，C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，卤代C1-C6烷基，卤代C1-C6烷氧基，NH2，卤素或氰基；R2是氢或C(H)n(R5)q(CH2)pZR6；R3是氢，C2-C6烯基，C2-C6炔基或[CH(R5)(CH2)p]mZR6；R4是可包含一个或多个双键的C3-C7环烷基；芳基；或5-6员杂环；其中每个上述基团R4可被一个或多个选择选自如下基团所取代卤素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，卤代C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，卤代C1-C6烷氧基，C1-C6单或双烷基氨基，硝基，以及氰基；R5是氢，C2-C6烯基，C2-C6炔基或(CH2)pZR6；R6是可被一个或多个选择选自如下基团所取代的C1-C6烷基卤素，卤代C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，卤代C1-C6烷氧基，C1-C6烷氧基，C1-C6单或双烷基氨基，硝基，氰基以及基团R4；Y和X独立地为碳或氮原子；M和n独立地为0或1；p是0或1到4的整数；q是1或2；Z是键或，O，NH或S。
2.根据权利要求1所述的化合物，具有通式(II)结构 其中R，R1，R2，R3，m，n和Y根据权利要求1所定义。
3.根据权利要求1所述的化合物，具有通式(III)结构 其中R，R1，R2，R3，m，n和Y根据权利要求1所定义。
4.根据权利要求2所述的化合物，具有通式(IIa)结构 其中R，R1，R2，R3，n和Y根据权利要求1所定义。
5.根据权利要求2所述的化合物，具有通式(IIb)结构 其中R，R1，R2，R3，n和Y根据权利要求1所定义。
6.根据权利要求2所述的化合物，具有通式(IIc)结构 其中R，R1，R2，R3，m和Y根据权利要求1所定义。
7.根据权利要求2所述的化合物，具有通式(IId)结构 其中R，R1，R2，R3，m和Y根据权利要求1所定义。
8.根据权利要求6所述的化合物，具有通式(Ia-1)结构 其中R，R1，R2，R3和Y根据权利要求1所定义。
9.根据权利要求6所述的化合物，具有通式(Ib-1)结构 其中R，R1，R2，R3和Y根据权利要求1所定义。
10.根据权利要求6所述的化合物，具有通式(Ic-1)结构 其中R，R1，R2，R3和Y根据权利要求1所定义。
11.根据权利要求9所述的化合物，具有通式(I-1)结构 其中R，R1，R2，R3根据权利要求1所定义。
12.根据权利要求8所述的化合物，具有通式(I-2)结构 其中R，R1，R2，R3根据权利要求1所定义。
13.根据权利要求7所述的化合物，具有通式(I-3)结构 其中R，R1，R2，R3根据权利要求1所定义。
14.根据权利要求9所述的化合物，具有通式(I-4)结构 其中R，R1，R2，R3根据权利要求1所定义。
15.根据权利要求1至14任一项所述的化合物，其中R2和R3不同时为氢。
16.根据权利要求1至15任一项所述的化合物，其中R1是C1-C3烷基或卤代C1-C3烷基。
17.根据权利要求1至16任一项所述的化合物，其中R是芳基，选自2，4-二氯苯基，2-氯-4-甲基苯基，2-氯-4-三氟甲基苯基，2-氯-4-甲氧基苯基，2，4，5-三甲基苯基，2，4二甲基-苯基，2-甲基-4-甲氧基苯基，2-甲基-4-氯苯基，2-甲基-4-三氟甲基苯基，2，4二甲氧基苯基，2-甲氧基-4-三氟甲基苯基，2-甲氧基-4-氯苯基，3-甲氧基-4-氯苯基，2，5二甲氧基-4-氯苯基，2-甲氧基-4-异丙基苯基，2-甲氧基-4-三氟甲基苯基，2-甲氧基-4-异丙基苯基2-甲氧基-4-甲基苯基，2-三氟甲基-4-氯苯基，2，4-二-三氟甲基苯基，2-三氟甲基-4-甲基苯基，2-三氟甲基-4-甲氧基苯基，2-溴-4-异丙基苯基，4-甲基-6二甲基氨基吡啶-3-基，4-二甲基氨基-6-甲基-吡啶-3-基，6二甲基氨基-吡啶-3-基和4-二甲基氨基-吡啶-3-基。
18.根据权利要求1至17任一项所述的化合物，选自如下化合物5-(2，4-二氯苯基)-1-(1-乙基丙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊；5-(2，4-二氯苯基)-1-(2-乙基丁基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5，5a，8b-十氢-1，5，6，8-四氮杂苊；5-(2，4-二氯苯基)-1-(2-甲氧基-1-甲氧基甲基乙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5，5a，8b-八氢-1，5，6，8-四氮杂苊；7-甲基-1-(1-丙基丁基)-5-[4-(1，1，2-三氟乙基)-2-三氟甲基苯基]-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊；7-甲基-1-(1-丙基丁基)-5-[4-(1，1，2-三氟乙基)-2-三氟甲基苯基]-1，2，2a(S)，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊；7-甲基-1-(1-丙基丁基)-5-[4-(1，1，2-三氟乙基)-2-三氟甲基苯基]-1，2，2a-(R)，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊；5-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1-(1-丙基丁基)-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊；5-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1-(1-丙基丁基)-1，2，2a-(S)，3，4，5，5a，8b-八氢-1，5，6，8-四氮杂苊；5-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1-(1-丙基丁基)-1，2，2a-(R)，3，4，5，5a，8b-八氢-1，5，6，8-四氮杂苊；9-(2，4-二氯苯基)-4-(1-乙基丙基)-2-甲基-5，6，6a，7，8，9-六氢-4H-1，3，4-三氮杂非那烯(异构体1)和9-(2，4-二氯苯基)-4-(1-乙基丙基)-2-甲基-5，6，6a，7，8，9-六氢-4H-1，3，4-三氮杂非那烯(异构体2)；5-环丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊；1-(2，4-二氯苯基)-5-(2-甲氧基乙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊；1-(2，4-二氯苯基)-5-(1-乙基丙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊；1-(2，4-二氯苯基)-5-(2-乙基丁基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊；1-(2，4-一氯苯基)-7-甲基-5-(1-丙基丁基)-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊；7-甲基-5-(1-丙基丁基)-1-[4-(1，1，2-三氟-乙基)-2-三氟甲基苯基]-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊；5-环丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-4-丙基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊；4-丁基-5-环丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊；5-环丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-4-丙氧基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊；4，5二丁基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，5，6，8-四氮杂苊；5-(2，4-二氯苯基)-1-(1-乙基丙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氢-1，6，8-三氮杂苊。
19.一种制备根据权利要求1所述的通式(I)化合物的方法，其中R3不为氢且m是1，其中包括化合物(VI)，其中R7是C1-4直链或支链烷基， 与有机金属化合物GM的反应，其中G是根据权利要求1中所定义的C2-C6烯基，C2-C6炔基或[CH(R5)(CH2)p]mZR6，且M为金属；一种制备通式(I)化合物的方法，其中R3是氢，包括还原式(Va)化合物 或者一种制备式(I)化合物的方法，其中X是碳，包括通过加热式(VII)化合物产生的反应， 其中L是选自卤素，和磺酸活性残基的离去基，和La代表能够在有胺R2NH2(IX)时使OLa成为良好离去基的适宜的活性基团。
20.根据权利要求1到18任一项所述化合物在制备治疗由CRF(促肾上腺皮质激素-释放因子)介导的疾病的药物中的用途。
21.根据权利要求20所述的化合物用途，它用于制备治疗抑郁症和焦虑症的药物。
22.根据权利要求20所述的化合物用途，它用于制备治疗IBS(刺激性肠道疾病)和IBD(炎性肠道疾病)的药物。
23.根据权利要求1到18任一项所述化合物，它用于治疗由CRF(促肾上腺皮质激素-释放因子)介导的疾病。
24.根据权利要求1-18任一项所述的化合物，它用于治疗抑郁症和焦虑症。
25.根据权利要求1-18任一项所述的化合物，它用于治疗IBS(刺激性肠道疾病)和IBD(炎性肠道疾病)。
26.一种药物组合物，包括根据权利要求1至18任一项所述的化合物和一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。
27.一种治疗哺乳动物，包括人，特别是治疗由CRF介导的疾病的方法，包括给药有效量的根据权利要求1至18任一项所述的化合物。
28.根据权利要求27所述的方法，用于治疗抑郁症和焦虑症，包括给药有效量的根据权利要求1至18任一项所述的化合物。
29.根据权利要求27所述的方法，用于IBS(刺激性肠道疾病)和IBD(炎性肠道疾病)，包括给药有效量的根据权利要求1至18任一项所述的化合物。
30.根据权利要求1至18任一所述的化合物，用于治疗疾病。
全文摘要
本发明涉及通式(I)的三环嘧啶化合物，包括其立体异构体，前药和药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R是芳基或杂芳基，其中每个上述基团R可被1到4个独立地选自包括如下基团所取代卤素，C
文档编号A61P25/24GK1512883SQ02810745
公开日2004年7月14日 申请日期2002年4月30日 优先权日2001年4月30日
发明者罗马诺·迪法比奥, 法布里齐奥·米歇利, 亚历山德拉·帕斯奎里洛, 伊维斯·圣丹尼斯, 圣丹尼斯, 德拉 帕斯奎里洛, 罗马诺 迪法比奥, 齐奥 米歇利 申请人:葛兰素集团有限公司