专利名称：咪唑并稠合化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及作为p38蛋白激酶(“p38”)抑制剂的某些杂环化合物。特别是，本发明涉及咪唑并取代的杂-双环化合物，它们的制备方法，包含它们的药物制剂，和使用它们的方法。
促分裂原活化蛋白激酶(MAP)属于定向脯氨酸的丝氨酸/苏氨酸激酶家族，它们通过双磷酸化激活它们的底物。该激酶通过大量包括营养和渗透压应力、UV光、生长因子、内毒素和炎性细胞因子在内的信号激活。MAP激酶中有一组是包括多种同工型的p38激酶组(例如，p38α，p39β，p38γ和p38δ)。该p38激酶负责磷酸化和激活转录因子以及其它激酶，其本身被物理和化学应力、促炎性细胞因子和细菌脂多糖激活。
更重要的是，已经表明p38磷酸化的产物介导包括TNF、IL-1、IL-6和环加氧酶-2的炎性细胞因子的产生。这些细胞因子的每一种都涉及多种病症。例如，TNF-α是一种主要由激活的单细胞和巨嗜细胞产生的细胞因子。其过量或无控制的产生在类风湿性关节炎的病理学中发挥病因的作用。最近，已经表明TNF产生的抑制在治疗炎症、炎性肠病、阿尔茨海默氏病，局限性回肠炎，多发性硬化和哮喘方面有广泛应用。
TNF还涉及病毒感染，例如HIV，流感病毒，以及包括1型单纯疱疹病毒(HSV-1)，2型单纯疱疹病毒(HSV-2)，巨细胞病毒(CMV)，水痘-带状疱疹病毒(VZV)，Epstein-Barr病毒，人疱疹病毒-6(HHV-6)，人疱疹病毒-7(HHV-7)，人疱疹病毒-8(HHV-8)在内的疱疹病毒，假狂犬病和鼻气管炎，等。
类似地，IL-1也是由激活的单细胞和巨嗜细胞产生的，并且在许多包括类风湿性关节炎、发热、和骨重吸收的减弱在内的病理生理反应中起作用。
通过抑制p38激酶而对这些细胞因子进行抑制有益于控制、减少和缓解许多这些疾病的病症。
一方面(i)本发明提供了式(I)表示的化合物或其异构体，药用盐，酯或前药 其中Z为N或CH；当原子C5和Z1之间的键为单键时，Z1选自N和CH，当C5和Z1之间的键为双键时，Z1为C；R1为氢或烷基；R2为烷基，芳烷基，环烷基，杂烷基，杂环基，芳基，或杂芳基；A不存在或为-O-，-CHR’-，-C(＝O)-，-S(O)n-，或-NR3-，其中n为0，1，或2，R’为氢或烷基，且R3为氢，烷基，芳基，杂芳基，或环烷基；原子C5和Z1之间的键为单键或双键；原子C8和C9之间的键为单键或双键；并且Y为烷基，杂烷基，环烷基，芳基，或杂芳基。
在另一方面，本发明提供(ii)按照(i)的化合物或其异构体，药用盐，酯或前药，所述化合物具有下式 其中R2选自任选取代的芳烷基，任选取代的环烷基，任选取代的杂环基，任选取代的芳基，和任选地被羟基、O(C1-4烷基)或S(O)2(C1-4烷基)中之一取代的C1-4烷基；A不存在或为-O-；Y为任选地被1-2个选自卤素，羟基，氨基，烷基或杂烷基的基团取代的苯基；或(iii)按照(ii)的化合物，其中R2选自环戊基，环己基，四氢吡喃基，哌啶基，硫代壬基(thianonyl)，四氢-1，1-二氧化物-2-H-噻喃基，苯基，和苄基，其中每个所述R2基团任选地被羟基，卤素，O(C1-4烷基)，或S(O)2(C1-4烷基)中之一取代；或R2选自任选地被羟基、O(C1-4烷基)或S(O)2(C1-4烷基)中之一取代的C1-4烷基；或(iv)按照(ii)的化合物，其具有下式， 其中R2如(ii)所定义；或(v)按照(iv)的化合物，其中R2选自环戊基，环己基，四氢吡喃基，哌啶基，硫代壬基，四氢-1，1-二氧化物-2-H-噻喃基，苯基，和苄基，其中每个所述R2基团任选地被羟基，卤素，O(CH3)，或S(O)2(CH3)中之一取代；或R2选自任选地被羟基、O(CH3)或S(O)2(CH3)中之一取代的C1-4烷基；或(vi)按照(i)的化合物，其中Z为-N-；或(vii)按照(i)或(vi)的化合物，其中Z1为-C-并且Z1和C5之间的键为双键；或(viii)按照(i)，(vi)或(vii)中任何一项的化合物，其中A不存在或为-O-；或(ix)按照(i)，(vi)至(viii)中任何一项的化合物，其中R1为氢；或(x)按照(i)，(vi)至(ix)中任何一项的化合物，其中R2选自环戊基，环己基，四氢吡喃基，哌啶基，硫代壬基，四氢-1，1-二氧化物-2-H-噻喃基，苯基，和苄基，其中每个所述R2基团任选地被羟基，卤素，O(C1-4烷基)，或S(O)2(C1-4烷基)中之一取代；或R2选自任选地被羟基、O(C1-4烷基)或S(O)2(C1-4烷基)中之一取代的C1-4烷基；或(xi)按照(i)，(vi)至(x)中任何一项的化合物，其中Y为被卤素，羟基，氨基，烷基或杂芳基任选取代的苯基；或(xii)具有式Ia的化合物， 其中Y为芳基；Z为N或CH；A不存在或为O；R1为氢；R2为烷基，羟烷基，任选取代的环烷基，任选取代的杂环基，任选取代的芳基，或任选取代的芳烷基；且C8和C9之间的键为单键或双键；或(xiii)按照(xii)的化合物，其中Z为N，A为-O-并且C8和C9之间的键为双键；或(xiv)按照(xiii)的化合物，其中R2为4-四氢吡喃基且Y为4-氟苯基；或R2为4-氟苯基且Y为4-氟苯基；或(xv)按照(xii)的化合物，其中Z为N，A不存在，并且C8和C9之间的键为双键；或(xvi)按照(xv)的化合物，其中R2为4-羟基环己基和Y为2-氯苯基；R2为4-四氢吡喃基和Y为2-氯苯基；R2为4-(N-甲基-磺酰基哌啶基)和Y为2-氯苯基；
R2为环戊基和Y为2-氯苯基；R2为4-(N-甲基-磺酰基哌啶基)和Y为2-氯苯基；R2为4-四氢-1，1-二氧化物-2-H-噻喃基和Y为2-氯苯基；R2为异丙基和Y为2-氯苯基；或R2为4-氟苄基和Y为2-氯苯基；或(xvii)按照(i)的化合物，其具有下式结构 或(xviii)按照(xvii)的化合物，其中Z为N，A不存在，R1为氢，Y为2-氯苯基，和R2为4-羟基环己基；或(xix)按照(i)的化合物，其具有式I(c)结构 或(xx)按照(xix)的化合物，其中Z为N，A不存在，R1为氢，Y为2-氯苯基，和R2为4-羟基环己基。
式I的化合物和它们的上述盐是蛋白激酶的抑制剂，并显示对p38的有效体内活性。因此，该化合物可以用于治疗由促炎性细胞因子如TNF和IL-1介导的疾病。
因此，在另一方面，本发明涉及治疗p38介导的疾病或症状的方法，其中将治疗有效量的式I的化合物施用于需要该治疗的患者。
在还有另一方面，本发明涉及制备上述化合物的方法。
在仍有另一方面，本发明涉及制备药物的方法，该药物用于治疗p38介导的疾病或症状。
如本文所用，术语“烷基”是指1-6个碳原子的直链或支链饱和一价烃基，例如甲基，乙基，正丙基，2-丙基，叔-丁基，戊基等等。
术语“芳基”是指一价单环或双环芳香烃基优选苯基，其任选地独立地被一个或多个取代基取代。当芳基优选地被一个，两个或三个取代基所取代，取代基优选地选自烷基，卤代烷基，卤素，羟基，硝基，氰基，氨基，卤代烷氧基，杂烷基，亚甲二氧基，亚乙二氧基，Y-芳基，Y-杂芳基，Y-环烷基，Y-杂环基，Y-ORP-Y-NRPRq，-Y-C(O)-RP，-YS(O)0-2RP，-Y-N-S(O)2RP，-Y-S(O)2NRPRq，-Y-N-C(O)NRPRq，其中Y不存在或为C1-C3亚烷基，RP和Rq各自彼此独立地选自氢，烷基，卤代烷基，羟基，烷氧基，芳基，杂芳基，环烷基，和杂环基。更具体地，术语芳基包括但不限于苯基，氯苯基，甲氧苯基，1-萘基，2-萘基，及其衍生物。
“芳烷基”是指基团-RxRy，其中Rx是亚烷基，Ry是如上定义的芳基，例如苄基，苯亚乙基等。
如本文所用术语“环烷基”是指3-7个环碳的饱和一价环烃基，例如环戊基，环丁基，环己基等等。饱和一价环烃基定义如上，可以任选地被一个，两个或三个非氢的取代基所取代。优选地，取代基选自烷基，羟基，烷氧基，氨基，单取代的氨基，二取代的氨基，卤代烷基，卤素，氰基烷基，氧基(即羰基氧)，杂烷基，杂环基，羟烷基，和-(X)n-C(O)R’(其中X为O或NR”，n为0或1，R”为氢，烷基，卤代烷基，氨基，单取代的氨基，二取代的氨基，羟基，烷氧基，烷基或任选取代的苯基，并且R’为H或烷基)，和-S(O)nR’(其中n为0-2)。更具体地，术语取代的环烷基包括例如取代的环戊基，取代的环己基等。
术语“卤代”、“卤化物”或“卤素”，当指取代基时是指氟，氯，溴，或碘，优选氯。
术语“卤代烷基”是指被一个或多个相同或不同卤原子取代的烷基，例如-CH2Cl，-CF3，-CH2CF3，-CH2CCl3等，并另外包括那些烷基如其中所有烷基氢原子被氟原子取代的全氟烷基。
如本文所用术语“杂烷基”是指上述定义的烷基部分，其中一个，两个或三个氢原子已经被独立地选自下列的取代基所取代-ORa，-NRbRc，和S(O)nRd(其中n为0-2的整数)，条件是杂烷基部分的连接点是通过碳原子，其中Ra是氢，酰基，烷基，环烷基，或环烷基烷基；Rb和Rc彼此独立地为氢，酰基，烷基，环烷基，或环烷基烷基，或者Rb和Rc与它们连接的氮原子一起形成杂环或杂芳基；并且当n为0时，Rd为氢，烷基，环烷基，或环烷基烷基，并且当n为1或2时，Rd为烷基，环烷基，环烷基烷基，氨基，酰基氨基，单烷基氨基，或二烷基氨基。代表性的实例包括但不限于2-羟乙基，3-羟丙基，2-羟基-甲基乙基，2，3-二羟基丙基，1-羟基-甲基乙基，3-羟基丁基，2，3-二羟基丁基，2-羟基-1-甲基丙基，2-氨基乙基，3-氨基丙基，2-甲磺酰基乙基，氨磺酰基甲基，氨磺酰基乙基，甲氨基磺酰基甲基，甲氨基磺酰基乙基，甲氨基磺酰基丙基等。当Ra为氢时，基团-ORa也称为“羟烷基”并且包括但不限于2-羟乙基，3-羟丙基，2-羟甲基乙基，2，3-二羟基丙基，1-羟甲基乙基，3-羟基-丁基，2，3-二羟基丁基，和2-羟基-1-甲基丙基。
“杂芳基”是指具有至少一个芳香环的一价单环或双环的含5-12个环原子的基团，所述环原子包含一个，两个，或三个环杂原子，其独立地选自N，O，或S，剩余环原子为C，条件是当杂芳基是其中一个环是碳环和/非芳环的二环系统时，杂芳基的连接点将在杂芳环上。杂芳环任选地被一个或多个取代基，优选一个或两个取代基所取代，取代基彼此独立地选自烷基，卤代烷基，卤素，硝基，氰基，氨基，亚甲二氧基，Y-芳基，Y-杂芳基，Y-环烷基，-Y-杂环基，-Y-OR’，-Y-NR’R”，-Y-C(O)-R’，-Y-O-C(O)-R’，-YS(O)0-2R’，-Y-N-SO2-R’，-Y-SO2-NR’R”，和-Y-N-C(O)NR’R”，其中Y不存在或为C1-C3亚烷基，R’和R”各自彼此独立地为氢，烷基，卤代烷基，羟基，烷氧基，芳基，杂芳基，环烷基，和杂环基。更具体地，术语杂芳基包括但不限于哌啶基，呋喃基，噻吩基，噻唑基，异噻唑基，三唑基，咪唑基，异噁唑基，吡咯基，吡唑基，嘧啶基，苯并呋喃基，四氢苯并呋喃基，异苯并呋喃基，苯并噻唑基，苯并异噻唑基，苯并三唑基，吲哚基，异氮(杂)茚基，苯并噁唑基，喹啉基，四氢喹啉基，异喹啉基，苯并咪唑基，苯并异噁唑基或苯并噻吩基，咪唑并[1，2-a]-吡啶基(pryidinyl)，咪唑并[2，1-b]噻唑基，及其衍生物。
“单取代的氨基”是指基团-NHRe，其中Re是烷基，杂烷基，卤代烷基，环烷基，环烷基烷基，羟烷基，芳基，芳烷基，芳烯基，杂芳基，杂芳烷基，杂芳烯基，杂环基，或杂环烷基，例如甲氨基，乙氨基，苯胺，苄胺等。类似地，术语“二取代的氨基”是指基团-NRgRh，其中Rg和Rh彼此独立地为烷基，杂烷基，卤代烷基，环烷基，环烷基烷基，羟烷基，芳基，芳烷基，芳烯基，杂芳基，杂芳烷基，杂芳烯基，杂环基，或杂环烷基，或Rg和Rh和它们连接的氮原子一起形成杂环。代表性的实例包括但不限于二甲氨基，甲基乙氨基，二(1-甲基-乙基)氨基，哌嗪基，哌啶基等。
“杂环基”是指饱和环状基团，其中一个或两个环原子是选自N，O，或S(O)n的杂原子(其中n为0-2的整数)，剩余的还原子为C，其中一个或两个C原子可以任选地包含羰基氧基团，例如环中的一个或两个原子可以是式-C(＝O)-的部分。该杂环可以任选地独立地被一个，两个，或三个选自以下各项的取代基所取代烷基，羟基，羟烷基，烷氧基，杂烷基，卤代烷基，和-(X)n-C(O)R(其中X为O或NR’，n为0或1，R为氢，烷基，卤代烷基，氨基，一取代的氨基，二取代的氨基，羟基，烷氧基，或任选取代的苯基，并且R’为H或烷基)，Y-芳基，Y-杂芳基，Y-环烷基，Y-杂环基，Y-ORP，-Y-NRPRq，-Y-C(O)-RP，-YS(O)0-2RP，-Y-N-S(O)2RP，-Y-S(O)2NRPRq，-Y-N-C(O)NRPRq，其中Y不存在或为C1-C3亚烷基，RP和Rq各自彼此独立地选自氢，烷基，卤代烷基，羟基，烷氧基，芳基，杂芳基，环烷基，和杂环基。更具体地，术语杂环包括但不限于四氢吡喃基，哌啶基，哌嗪基，吗啉基，及其衍生物。
术语“酰基”是指基团-C(O)Rr，其中Rr是烷基，卤代烷基，杂烷基，芳基，杂芳基，芳烷基或杂芳烷基。
“烷氧基”，“芳氧基”，“芳烷氧基”，或“杂芳烷氧基”是指基团-OR，其中R分别是如上定义的烷基，芳基，芳烷基，或杂芳烷基，例如甲氧基，苯氧基，吡啶-2-基甲氧基，苄氧基等。
当本文式中的键表示为其中两键之一为虚线的双键时，如在 中，应当理解除非另外特别指出，该符号是指键可以任选地为单键或双键，其针对相邻原子作出适当选择。因此，当声明“虚线为键”时，这意味着存在双键；当声明“虚线不为键”时，这意味着存在单键。
“离去基团”具有常规与它在合成有机化学中有关的含义，即能够被亲核体替换的原子或基团，包括卤素(如氯，溴，和碘)，烷磺酰基氧基，芳基磺酰基氧基，烷基羰基氧基(例如乙酰氧基)，芳基羰基氧基，甲磺酰氧基，甲苯磺酰基氧基，三氟甲磺酰基氧基，芳氧基(例如2，4-二硝基苯氧基)，甲氧基，N，O-二甲基羟基氨基等。
“药用赋形剂”是指用于制备药物组合物的通常是安全、无毒并且既无生物学上的也无其它方面的不良作用的赋形剂，而且包括兽医以及人类药用可接受的赋形剂。说明书和权利要求书中使用的“药用赋形剂”包括一种或一种以上的这种赋形剂。
化合物的“药用盐”是指药学可接受并具有母体化合物的预期药理学活性的化合物。此类盐包括(1)酸加成盐，与无机酸形成的酸加成盐，所述的无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；或与有机酸形成的酸加成盐，有机酸例如是乙酸、丙酸、己酸、环戊烷丙酸、羟基乙酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙烷-二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、4-氯代苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸、4-甲基双环[2.2.2]-辛-2-烯-1-羧酸、葡庚糖酸、4，4’-亚甲基双-(3-羟基-2-烯-1-羧酸)，3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、十二烷基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羟基萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸等；或(2)当母体化合物中存在的酸性质子或被金属离子代替时生成的盐，所述的金属离子例如是碱金属离子、碱土金属离子或铝离子；或与有机碱配位时生成的盐，所述的有机碱例如是乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡糖胺等。
本文中“前-药”和“前药”可以互换使用，并且是指当将此类前药施用给哺乳动物对象时在体内可以释放出式I的活性母体药物的任何化合物。式I的化合物的前药是通过修饰式(I)的化合物中存在的一个或多个官能团来制得，制备所采用的方式应使该修饰可以体内裂解释放出母体化合物。前药包括式(I)的化合物，其中式(I)的化合物中羟基、氨基、或巯基分别与任何可以在体内裂解再生出游离羟基、氨基或巯基的基团结合。前药的实例包括但不限于式(I)的化合物中的羟基官能团的酯(例如醋酸酯，甲酸酯，和苯甲酸酯衍生物)、氨基甲酸酯(例如N，N-二甲基氨基羰基)等。
“保护基团”是指当连接到分子中的反应性基团上时掩蔽、减少或防止该反应性的一组原子。保护基团的例子可以参见T.W.Green和P.G.Futs，有机化学的保护基团(Wiley，第2版，1991)，和Harrison和Harrison等，有机合成方法概要(Compendium of Synthetic Organic Methods)，1-8卷(John Wiley和Sons，1971-1996)。代表性的氨基保护基团包括甲酰基，乙酰基，三氟乙酰基，苄基，苄氧基羰基(CBZ)，叔丁氧基羰基(Boc)，三甲基甲硅烷基(TMS)，2-三甲基甲硅烷基-乙磺酰基(SES)，三苯甲基和取代的三苯甲基基团，烯丙氧基羰基，9-芴基甲氧基羰基(FMOC)，硝基-藜芦基氧基羰基(NVOC)等等。代表性的羟基保护基团包括羟基被酰基化或被烷基化的基团，如苄基和三苯甲基醚以及烷基醚，四氢吡喃基醚，三烷基甲硅烷基醚和烯丙基醚。
疾病的“治疗”或“疗法”包括(1)预防疾病，也就是使疾病的临床症状不会在哺乳动物中发展，所述的哺乳动物可能与该疾病接触或易感该疾病，但不曾经历或显现出疾病的该症状；(2)抑制疾病，也就是阻止或减轻该疾病或其临床症状的发展；或(3)缓解疾病，也就是引起疾病或其临床症状的减退。
“治疗有效量”是指当施用给哺乳动物治疗疾病时，足以实现对该疾病的治疗的化合物的量。“治疗有效量”应根据化合物、疾病及其严重性、被治疗哺乳动物的体重等来改变。
在一个实施方案中，本发明提供由下式表示的化合物 其中Z，Z1，R1，R2，A，Y，和C5与Z1和C8与C9之间的键定义如上。
优选的式I化合物包括其中A不存在或是-O-，Z和Z1都为N，Y为芳基，R1为氢，且R2如以上关于式(I)所定义的那些。更优选的化合物是式I的化合物，其中Z为N，Z1为C以致于C5和Z1之间的键为双键，A不存在或为-O-，Y为芳基(更优选任选取代的苯基)，R1为氢，并且R2如以上关于式(I)所定义。
还更优选的化合物是式I(a)的化合物 其中Z为N，A不存在或为-O-，Y为任选取代的苯基，R1为氢，R2定义如上。
最优选的化合物是式I(a)的那些，其中Z为N，A不存在，Y为被卤素，羟基，氨基，烷基或杂烷基取代的苯基，R1为氢，R2为烷基，杂烷基，任选取代的环烷基，任选取代的杂环基或取代的苯基或苄基。
特别优选的化合物是式I(a)的化合物，其中A不存在，Y为被卤素取代的苯基，虚线为双键，R1为氢，R2为烷基(更优选任选地被羟基，甲氧基或甲磺酰基取代的低级烷基)，杂烷基，任选取代的环烷基(更优选任选地被甲氧基取代的环戊基或环己基)，任选取代的杂环基(更优选任选取代的哌啶基)，或取代的苯基或苄基(更优选被卤素取代的苯基或苄基)。下表I列出了一些代表性的式I(a)的化合物。
本发明其它代表性的化合物是式I(b)的化合物。
其中R1，Z，R2，A和Y如以上关于式(I)和I(a)的化合物所定义。
还有其它本发明代表性的化合物是式I(c)的化合物 其中Z，R1，R2，A和Y如以上关于式(I)和I(a)的化合物所定义。
优选的式I(c)的化合物(12)是其中Z为N，A不存在，R1为氢，Y为2-氯苯基，R2为4-羟基环己基。质谱为MH+399。
表1代表性的式I(a)的化合物是其中虚线为键，Z为N，R1为氢，并且R2，A，和Y的值如下所列的化合物 表1
优选的式I(a)的化合物(13)是其中Z为N，虚线不为键，R1为氢，
R2为4-羟基环己基，且Y为2-氯苯基的化合物。MH+396，M.P.169.3℃-175.8℃。
特别优选的式I(a)的化合物是以上表1的化合物(3)和(7)。
本发明的化合物可以以未溶剂化型以及溶剂化型(包括水合形式)形式存在，并意欲包括在本发明范围内。此外，如上所述，本发明还包括所有的这些化合物的药用盐，以及该化合物的前体药物形式和所有的立体异构体，无论是纯的手性形式，还是外消旋混合物或其它形式的混合物。
式I的化合物能够进一步形成药用酸加成盐。所有这些形式也被考虑在所要求的本发明的范围内。
式I化合物的药用酸加成盐包括从无机酸衍生的盐，如盐酸、硝酸、磷酸、硫酸、氢溴酸、氢碘酸、磷酸等；以及从有机酸衍生的盐，如脂肪族单或二羧酸，苯基取代的链烷酸，羟基链烷酸，链烷二羧酸，芳香酸，脂肪族和芳香族磺酸等，这些盐包括硫酸盐，焦硫酸盐，硫酸氢盐，亚硫酸盐，硝酸盐，磷酸盐，磷酸氢盐，磷酸二氢盐，偏磷酸盐，焦磷酸盐，盐酸盐，氢溴酸盐，氢碘酸盐，乙酸盐，丙酸盐，辛酸盐，异丁酸盐，草酸盐，丙二酸盐，琥珀酸盐，辛二酸盐，癸二酸盐，富马酸盐，马来酸盐，扁桃酸盐，苯甲酸盐，氯代苯甲酸盐，甲基苯甲酸盐，二硝基苯甲酸盐，邻苯二甲酸盐，苯磺酸盐，甲苯磺酸盐，苯基乙酸盐，柠檬酸盐，乳酸盐，马来酸盐，酒石酸盐，甲烷磺酸盐，等等。还包括氨基酸的盐如精氨酸盐等，葡糖酸盐，半乳糖醛酸(例如参见Berge等“药物盐”，药物科学杂志(J.of Pharmaceutical Science)，1977，66，1-19)。
碱性化合物的酸加成盐的制备可以通过以常规方式将游离碱与足够量的所需的酸接触，制备盐。通过以常规方式将该盐形式与碱接触，分离游离碱，可以再生出游离碱的形式。该游离碱形式在某些物理性质如在极性溶剂中的溶解度有些不同于其各自的盐，但对于本发明的目的，这些盐在其它方面等同于其各自的游离碱。
碱性药用加成盐可以与金属离子或胺形成，如碱金属和碱土金属离子或有机胺。用作阳离子的金属离子的例子包括钠、钾、镁、钙等等。适合的胺的例子有N，N′-二苄基亚乙基二胺，氯普鲁卡因，胆碱，二乙醇胺，乙二胺，N-甲基葡糖胺，和普鲁卡因(例如参见Berge等，上述)。
酸性化合物的碱加成盐的制备可以通过以常规方式将游离酸与足够量的所需的碱接触，制备盐。通过以常规方式将该盐形式与酸接触，分离游离酸，可以再生出游离酸的形式。该游离酸形式在某些物理性质如在极性溶剂中的溶解度有些不同于其各自的盐，但对于本发明的目的，这些盐在其它方面等同于其各自的游离酸。
应用本领域普通技术人员的公知方法，可以通过多种方法制备本发明的化合物。下列反应路线举例说明制备本发明化合物的方法。本文所用的缩写具有下列含义MCPBA间氯过苯甲酸NMP1-甲基-2-吡咯烷酮THF四氢呋喃TLC薄层色谱法EtOAc乙酸乙酯LAH氢化铝锂DMF二甲基甲酰胺DMPU1，3-二甲基-3，4，5，6-四氢-2(1H)-嘧啶酮反应路线1描述合成式I(a)(1)的化合物(其中虚线不为键的式I(a)的化合物)的常规方法，其以受保护的硫代吡啶-5-羧酸酯1开始，其中Rp和Rpa是保护基如低级烷基和苄基；RL为离去基团如卤素。保护基和离去基团分别如第6页第30行至第7页第9行和第5页第22至26行所定义。由反应路线中的羧酸酯1制备化合物5的常规方法在WO0129042和WO 0129041中描述。
用三乙胺和铵盐水溶液处理化合物1以提供化合物2。用氢化铝锂或其它本领域公知的还原剂将化合物2还原以产生化合物3。通过用活化的氧化锰粉末处理或通过其它本领域已知的氧化方法将化合物3氧化为醛4。化合物4与通式-A-Y-C(O)ORZ的酯反应以提供嘧啶酮5，其中A和Y定义如上并且RZ为低级烷基，芳基或环烷基。
化合物5与N-(2-羟乙基)-苯邻二甲酰亚胺反应以获得苯邻二甲酰亚胺6。苯邻二甲酰亚胺6与一水合肼一起搅拌和分离纯形式的化合物7。通过将它与三甲基铝反应环化成三环硫化物8。
三环硫化物8可以直接与通式-NH2R1R2的胺反应以提供通式I(a)(1)的化合物。
反应路线1 反应路线2描述制备式I(a)(2)的化合物(其中虚线为键的式I(a)的化合物)的常规方法，其从来自上面反应路线1的醛4开始，将它与通式CN-CH2-A-Y的氰化物和碳酸钾在DPMU中一起加热以获得氨基吡啶并嘧啶9。用三乙胺和1，2-二氯乙基乙醚处理化合物9以提供式10的硫化物。
然后通过反应路线1中所述方法将化合物10氧化为相应的亚砜11。亚砜11然后与式-NH2R1R2的胺反应以提供通式I(a)的化合物。备选地，硫化物10可以直接与-NH2R1R2反应以提供通式I(a)(2)的化合物。
反应路线2 反应路线3描述从化合物12开始制备式I(c)的化合物的常规方法。按照WO 0129042和WO 0129041所述方法制备化合物12。
反应路线3 用三苯膦，偶氮二羧酸二乙酯和N-(2-羟乙基)-苯邻二甲酰亚胺处理化合物12以获得化合物13。化合物13然后与水合肼反应获得化合物14，其然后与三乙基铝溶液反应而获得化合物15。化合物15与式-H2R1R2的胺反应以获得通式I(c)的化合物。
备选地，化合物15可以用3-氯过苯甲酸氧化以获得相应的亚砜(未显示)，其然后与胺-NR1R2反应以获得期望的式I(c)的化合物。
这些用于制备本发明化合物的方法也是本发明目的，其包括下列方法(i)一种制备按照权利要求1的化合物的方法，其包含将式A的化合物与式CN-CH2-A-Y的氰化物反应以提供式B的化合物，其中A，Z和Y如权利要求1中所定义，并且Rp选自低级烷基和苄基； b)用试剂和1，2-二氯乙醚处理化合物B以获得化合物C，所述试剂选自三乙胺，三烷基胺碱，1，4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷，或二异丙基乙胺；
c)用试剂氧化化合物C以获得化合物D，所述试剂选自3-氯过苯甲酸，过氧化氢/甲酸，过氧化氢/甲基三氧铼VII，或OXONE；和 d)将化合物D与式-H2N-R1R2的胺接触足够的时间以获得按照权利要求1的化合物，其中R1和R2如权利要求1所定义。
(ii)一种制备按照权利要求1的化合物的方法，其包含a)将式E的化合物与试剂反应以获得化合物F，其中Z，A和Y如权利要求1所定义，Rp是低级烷基或苄基，所述试剂选自三苯膦，偶氮二羧酸二乙酯和N-(2-羟乙基)-苯邻二甲酰亚胺；
b)将化合物F与肼反应以获得化合物G； c)将化合物G与三甲基铝反应以获得化合物H； d)任选地用试剂氧化化合物H以获得相应的亚砜，所述试剂选自3-氯过苯甲酸，过氧化氢/甲酸，过氧化氢/甲基三氧铼VII，或OXONE，并将该亚砜与式-H2N-R1R2的胺接触足够的时间以获得按照权利要求1的化合物，其中R1和R2如权利要求1所定义。
式I的化合物和碱性的式I化合物与酸的药用盐可以用作药物，例如以药物制剂的形式。该药物制剂可以通过肠内给药，例如以片剂、包衣的片剂、糖锭剂、硬和软明胶胶囊、溶液剂、乳剂或者混悬剂的形式口服给药，例如以鼻腔喷雾剂的形式鼻腔内给药，例如以栓剂的形式直肠内给药。但是它们也可以例如以注射液的形式胃肠外给药。
式I化合物及其上述药用盐可以与用于制备药物制剂的药物惰性的有机或无机载体一起加工。例如，乳糖，玉米淀粉或其衍生物，滑石，或者硬脂酸或其盐等可以用作片剂，包衣的片剂，糖锭剂，硬和软明胶胶囊的载体。软明胶胶囊的合适的载体包括例如植物油，蜡，脂肪，半固体或者液体多元醇等；但是，根据该活性成分的性质，可能有软明胶胶囊根本不需要任何赋形剂的情况。制备溶液剂和糖浆剂的合适的载体包括例如水，多元醇，蔗糖，转化糖和葡萄糖等。栓剂的合适的载体包括例如天然或者硬化油，蜡，脂肪，半固体或者液体多元醇等。
该药物组合物还可以含有防腐剂，增溶剂，稳定剂，润湿剂，乳化剂，甜味剂，着色剂，调味剂，改变渗透压的盐，缓冲剂，掩蔽剂或者抗氧化剂。除了式I化合物及其上述药用盐，它们也可以含有其它的治疗上有价值的活性剂。
含有式I的化合物或式I的碱性化合物与酸的药用盐与相容的药用载体材料的药物也是本发明的一个目的，以及同样地，还有制备该药物的方法，其包括将一种或多种这些化合物或其盐以及，必要时，一种或者多种其它的治疗上有价值的物质，与相容的药用载体制成盖仑(galenical)给药剂型。
如前所述，按照本发明，式I的化合物和它们的上述药用盐可以作为治疗活性剂，尤其是作为抗炎剂或移植手术后防止移植排斥的药物应用。剂量在很宽的范围内变化，当然会适合于每个具体病例的个体需要。通常，如果对成年人给药，方便的每日剂量应该在约0.1mg/kg至约100mg/kg，优选约0.5mg/kg至约5mg/kg。每日剂量可以单剂量或分剂量给药，当发现征兆时，可以超过上述的剂量上限。
最后，本发明的另一个目的在于式I的化合物和它们的上述药用盐用于生产药物的用途，所述药物尤其用于治疗或预防炎症、免疫性疾病、肿瘤性疾病、支气管肺病、皮肤病和心血管病，用于治疗哮喘、中枢神经系统疾病或糖尿病并发症，或用于预防移植手术之后的移植排斥。
式I化合物将用于，但不限于，治疗人或其它哺乳动物由于该哺乳动物过量或不受控制地产生TNF或p38激酶而加剧或导致的任何疾病或病症。因此，本发明提供一种治疗细胞因子介导的疾病的方法，其包括施用有效干扰细胞因子量的式I化合物或其药用盐或互变异构体。
式I的化合物将用于，但不限于，治疗受治者中的炎症，和用作治疗发热的退热剂。本发明的化合物将用于治疗关节炎，包括但不限于，类风湿性关节炎、脊椎关节病、痛风性关节炎、骨关节炎、系统性红斑狼疮和青少年关节炎、骨关节炎、痛风性关节炎、以及其它关节炎病症。另外，本发明的化合物将用于治疗肺病或肺炎症，包括成人呼吸窘迫综合征、肺肉瘤病、哮喘、矽肺病、和慢性肺炎性疾病。另外，本发明的化合物还用于治疗病毒和细菌感染，包括脓毒病、脓毒性休克、革兰氏阴性脓毒病、疟疾、脑膜炎、恶病质继发感染或恶性肿瘤、恶病质继发获得性免疫缺陷综合征(AIDS)、AIDS、ARC(AIDS相关性复症)、肺炎、和疱疹病毒。此外，本发明化合物还用于治疗骨吸收疾病，例如骨质疏松症、内毒素性休克、中毒性休克综合征、再灌注损伤、自身免疫性疾病，包括移植物对宿主的反应和同种异体移植排斥、心血管病，包括动脉粥样硬化症、血栓形成、充血性心力衰竭、和心脏再灌注损伤、肾再灌注损伤、肝病和肾炎，以及感染引起的肌痛。
本发明化合物还用于治疗流感、多发性硬化、癌症、糖尿病、系统性红斑狼疮(SLE)、皮肤相关性疾病例如牛皮癣、湿疹、烧伤、皮炎、瘢痕形成、和疤痕组织形成。本发明的化合物还将用于治疗胃肠道疾病例如炎性肠病、局限性回肠炎、胃炎、过敏性肠综合征、溃疡性结肠炎。本发明的化合物还将用于治疗眼病，例如视网膜炎、视网膜病、葡萄膜炎、恐光症、和对眼组织的急性损伤。本发明的化合物还将用于治疗血管生成，包括瘤形成、转移、眼科疾病例如角膜移植排斥、眼新血管形成、视网膜新血管形成，包括损伤或感染后的新血管形成、糖尿病性视网膜病、晶状体后纤维增生和新生血管性青光眼；溃疡性疾病，例如胃溃疡；病理性，但非恶性病症，例如血管瘤，包括新生儿血管瘤、鼻咽血管纤维瘤和骨无血管形成性坏死；糖尿病性肾病和心肌病；以及妇女生殖系统疾病例如子宫内膜异位。本发明的化合物还可以用于预防环加氧酶-2的产生。
除了可用于人类的治疗，这些化合物还用于包括哺乳动物、嗫齿动物等的宠物动物(companion animals)、外来动物和家畜的兽医治疗。更优选的动物包括马、狗、和猫。
另外，本发明的化合物还用于共同治疗，部分或完全代替其它常规抗炎药，例如与甾类、环加氧酶-2抑制剂、NSAIDs、DMARDS、免疫抑制剂、5-脂氧合酶抑制剂、LTB4拮抗剂和LTA4水解酶抑制剂共同给药。
本文中使用的术语“TNF介导的疾病”指TNF通过TNF本身的控制，或者通过TNF导致另一种单核因子(例如但不限于IL-1，IL-6或IL-8)被释放而发挥作用的任何和所有疾病和病症。例如，这样一种病症，其中IL-1是一种主要成分，其产生或作用响应于TNF而加剧或分泌，因此这种疾病被认为是TNF介导的疾病。
本文中使用的术语“p38介导的疾病”指通过p38本身的控制，或者通过p38导致另一种因子(例如但不限于IL-1，IL-6或IL-8)被释放，而发挥作用的任何和所有疾病和病症。例如，这样一种病症，其中IL-1是一种主要成分，其产生或作用响应于p38而加剧或分泌，因此这种疾病被认为是p38介导的疾病。
因为TNF-β与TNF-α(也称为恶液质素)存在密切的结构同源性，并且因为它们均诱导类似的生物反应，并结合同样的细胞受体，所以，TNF-α和TNF-β的合成都被本发明的化合物所抑制，因此被本发明总体称为“TNF”，除非另有具体说明。
实施例实施例1(化合物#12) 本实施例举例说明式I(c)的化合物的制备。
步骤1向3.0g(7.84mmol)嘧啶酮A，4.12g(15.7mmol)三苯膦和4.12g(15.7mmol)N-(2-羟乙基)-苯邻二甲酰亚胺在45mL 1，4-二噁烷中的5℃的悬浮液，在20分钟的时间内通过添加漏斗滴加2.73g(2.5mL，15.7mmol)偶氮二羧酸二乙酯在10mL 1，4-二噁烷中的溶液。将悬浮液在5℃下搅拌1小时，然后在室温下搅拌过夜，此时悬浮液变成黄色溶液。将溶液在真空中浓缩并通过硅胶柱色谱法纯化残渣，用二氯甲烷中的7.5％乙酸乙酯洗脱，提供3.92g苯邻二甲酰亚胺1(90％产率)。
步骤2 将1.5g(2.7mmol)步骤1的苯邻二甲酰亚胺1的混合物与2.0mL水合肼在100mL甲醇中在室温下搅拌过夜。将溶液在真空中浓缩并将残渣在氯仿和水之间分配。用盐水洗涤氯仿溶液，干燥(MgSO4)并浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化产物，用二氯甲烷中的10％甲醇洗脱，提供1.0g中间体2(87％产率)。
步骤3 向1.56g(3.7mmol)化合物2在30mL甲苯中的溶液滴加2.3mL三甲基铝溶液(在甲苯中2M，4.6mmol)。加热反应混合物至回流1小时直至完成。在真空中去除甲苯并用100mL饱和NH4Cl水溶液和100g冰淬灭残渣。加入200mL乙酸乙酯并过滤混合物。将收集的固体再次与200mL乙酸乙酯和200mL水混合。将其搅拌15分钟并过滤。再重复该操作1次。合并所有三次的滤液并转移至分液漏斗和分离各层。用乙酸乙酯再萃取水层1次。用盐水洗涤合并的乙酸乙酯溶液(约800mL)并干燥(MgSO4)，在真空中去除，提供1.4g三环化合物3(淡黄色固体，94％产率)。
步骤4 化合物12将0.171g(0.42mmol)三环-硫化物3在20mL二氯甲烷中的溶液冷却至5℃。加入0.094g(0.42mmol)3-氯过苯甲酸(77％ max.)。搅拌混合物30分钟直至完成，将溶液倒入饱和Na2SO3水溶液，用二氯甲烷(2×75mL)萃取。然后用冷饱和NaHCO3水溶液，盐水洗涤二氯甲烷，并干燥(MgSO4)。在真空中去除溶剂，回收0.17g亚砜(96％产率)。将该亚砜与0.21g(1.8mmol)反式-4-氨基环己醇混合，在120℃油浴中加热1mLNMP 45分钟直至反应完成。用水稀释该混合物并用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。然后用水(3×30)，盐水洗涤合并的乙酸乙酯溶液并干燥(MgSO4)。在真空中去除溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化回收的残渣，用MeOH/CH2Cl2/Et3N(1/9/0.4)洗脱，提供19mg化合物13。(质谱M+1＝399)实施例2(化合物13)本实施例举例说明根据反应路线1中所述方法制备式I(a)的化合物。
步骤1
向3.0g(9.88mmol)吡啶酮B，5.18g(19.8mmol)三苯膦和3.78g(19.8mmol)N-(2-羟乙基)-苯邻二甲酰亚胺在45ml 1，4-二噁烷中的5℃的悬浮液，在20分钟的时间内通过添加漏斗滴加2.73g(2.5mL，15.7mmol)偶氮二羧酸二乙酯在10mL 1，4-二噁烷中的溶液。然后将悬浮液在5℃下搅拌1小时，然后在室温下搅拌过夜。将悬浮液过滤并用甲醇，然后乙醚洗涤固体。2.17g白色固体是所需物质。将滤液浓缩并通过硅胶柱色谱法纯化，用己烷中的5％乙酸乙酯洗脱，提供另外1.2g所需产物。4的总产率为71％。
步骤2 向1.2g(2.5mmol)苯邻二甲酰亚胺4在100ml甲醇中的悬浮液加入6ml一水合肼。在室温下将其搅拌过夜，此后悬浮液变成澄清的黄色溶液。浓缩混合物并用水稀释残渣，用氯仿萃取。用盐水洗涤有机溶液并干燥(MgSO4)，通过硅胶柱色谱法纯化残渣，用二氯甲烷中的10％甲醇洗脱，提供0.48g氨基乙基吡啶酮5(55％产率)。
步骤3 向0.48g(1.4mmol)化合物5在10mL甲苯中的溶液滴加0.87mL三甲基铝溶液(在甲苯中2M，1.76mmol)。加热反应混合物至回流两小时直至完成。在真空中去除甲苯，用50mL饱和NH4Cl淬灭残渣和用乙酸乙酯(3×75mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机溶液并干燥(MgSO4)，在真空中去除提供0.36g三环化合物6(80％产率)。
步骤4 化合物13将0.1g(0.3mmol)化合物6和0.325g(1mmol)反式-4-氨基环己醇在0.5mL NMP中的混合物在200℃砂浴(加热套)下加热14小时。在冷却后用水稀释混合物并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。用水(3×50mL)，盐水洗涤合并的有机溶液，并干燥(MgSO4)。在真空中去除溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化产物，用在二氯甲烷中5％-20％甲醇的梯度洗脱，提供0.102g化合物13。(质谱M+1＝396，MP＝169.3-175.8℃)。
实施例3(化合物1) 步骤14-氨基-2-苄基硫烷(sulfanyl)基-嘧啶-5-羧酸酯 将5g(20.4mmol)醛7，71g(24.4mmol)2-氯苄基氰化物和18g(130mmol)碳酸钾在50mL DMPU中的混合物在110℃的油浴中加热3小时直至反应完成。将混合物倒入600ml水中，用300mL乙酸乙酯萃取。用水(3×250mL)洗涤有机溶剂，用200mL己烷稀释，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，滤过硅胶短塞。在真空中去除溶剂。在50mL乙酸乙酯中搅拌残渣固体30分钟。滤去固体并用少量乙酸乙酯洗涤，回收2.23g氨基吡啶并嘧啶8。浓缩滤液并通过硅胶柱色谱法纯化残渣，用己烷中的50％乙酸乙酯洗脱，分离另外0.62g 2-苄基硫烷基-6-(2-氯苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-基胺8(总产率37％)。
步骤2
向3g(7.9mmol)胺8，4.8g(6.6mL，47.6mmol)三乙胺，5mL水和50mL乙腈的混合物，在6小时的时间内(开始两小时1当量/小时，后面四小时0.5当量/小时)加入总共4.0mL(32mmol)1，2-二氯乙基乙醚，直至反应完成。让混合物在室温下静置过夜，用水稀释并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。用盐水洗涤有机溶液，干燥(MgSO4)，并在真空中去除。通过硅胶柱色谱法完成纯化，用己烷中的30％乙酸乙酯洗脱，提供2g硫化物9(63％产率)。
步骤3 将0.056g(0.14mmol)化合物9和0.053g(0.46mmol)反式-4-氨基环己醇在1mL NMP中的混合物在205℃的砂浴(加热套)中加热14小时。在冷却后用水稀释混合物并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。用水(3×50mL)，盐水洗涤合并的有机溶液，并干燥(MgSO4)。在真空中去除溶剂，提供0.39g所需化合物1(化合物1)。(质谱M+1＝394，MP＝116-119℃)。
步骤4
任选地，向2g(5mmol)硫化物9在60mL二氯甲烷在5℃下的冷却溶液加入1.11g(5mmol)3-氯过苯甲酸(77％max.)。反应在3小时内完成，将混合物倒入饱和NaHCO3水溶液，用二氯甲烷萃取。然后用10％NaHSO3水溶液，盐水洗涤有机溶剂，并干燥(MgSO4)。在真空中去除溶剂后，回收2g亚砜10。(96％产率)。以类似方法制备相应的二甲亚砜(用Bn代替Me)。然后如上述步骤4所述将亚砜10转化为化合物#1。
实施例4(化合物3) 1-(甲磺酰基)哌啶-4-胺(15)的制备步骤11-苄基哌啶-4-基氨基甲酸苄酯 向4-氨基-1-苄基哌啶11(41.2g，216.5mmol)和三乙胺(51.3mL，369mmol)在600mL四氢呋喃中的0℃溶液，在30-45分钟的时间内以保持反应温度为5-10℃的速率滴加氯甲酸苄酯(31mL，217mmol)。在添加完成后，使反应混合物升温至室温并搅拌12小时。在减压下去除溶剂和挥发物。然后加入水(500mL)和乙酸乙酯(1.2L)，在两相之间分配反应物。用饱和碳酸氢钠水溶液(2X，150mL)洗涤有机层，然后干燥(盐水，MgSO4)。蒸发溶剂产生棕褐色液体，其通过柱色谱法纯化(SiO2，EtOAc/己烷-30/70至EtOAc-100)以提供27.8g胺12，其为白色固体(质谱M+＝324，MP＝79.1-79.6℃)。
步骤2哌啶-4-基氨基甲酸苄酯 在室温下将苄胺12(27.8g，85.7mmol)溶解在400mL二氯甲烷中，通过添加漏斗滴加在50mL二氯甲烷中的1-氯-氯甲酸乙酯(25.4g，178mmol)。在添加完成后，在室温下搅拌反应混合物3小时。在减压下去除溶剂和挥发物，加入甲醇(500mL)。在搅拌下加热反应至回流1小时，然后冷却至室温。通过蒸发去除反应溶液产生26.3g哌啶13，其为灰白色固体(质谱M+1＝235，MP＝190.7-192.2℃)。
步骤31-(甲磺酰基)哌啶-4-基氨基甲酸苄酯
在室温下将保护的哌啶13(10g，42.7mmol)和三乙胺(12mL，86.7mmol)溶解在500mL二氯甲烷中。通过添加漏斗滴加在20mL二氯甲烷中的甲磺酰氯(4.3mL，55.5mmol)。在添加完成后，在室温下搅拌反应混合物3小时。在减压下去除溶剂和挥发物。加入乙酸乙酯(500mL)和盐酸水溶液(0.5M，350mL)。反应物在两相之间分配并去除水层。再次用盐酸水溶液(0.5M，2X，100mL)，然后用饱和碳酸氢钠水溶液(3X，100mL)洗涤有机层。然后干燥反应溶剂(盐水，MgSO4)，在减压下蒸发以提供9.2g甲磺酰胺14(MP＝148.6-152.8℃)。
步骤41-(甲磺酰基)哌啶-4-胺 在室温下将甲磺酰胺14(9.2g，29.5mmol)溶解在氮气下500mL圆底烧瓶中的200mL四氢呋喃中。然后加入碳载钯(10％，2-3g)，用氢气(3X)冲洗反应容器。将氢气球放在反应烧瓶上，搅拌溶液15小时(如果需要加入更多的催化剂和装填更多的氢气球)。将二氯甲烷(100mL)加入反应物，将其滤过硅藻土垫。在减压下蒸发溶剂提供4.63g所需胺15(质谱M+1＝179，MP＝65.3-65.7℃)。
步骤5将0.6g(1.43mmol)实施例3的亚砜10和0.51g(2.86mmol)1-(甲磺酰基)哌啶-4-胺15在1mL NMP中的混合物加热至70-80℃ 1小时。将其冷却和用水稀释，用乙酸乙酯(2×75mL)萃取。[原材料15和产物在TLC(5％ MeOH/CH2Cl2)上具有相同的Rf值，反应产物的质谱M+1＝457]。用水(2×75mL)，盐水洗涤有机溶液，并干燥(MgSO4)和浓缩。通过柱色谱法纯化残渣，用二氯甲烷中的30％乙酸乙酯洗脱，提供0.473g(73％产率)的产物。将其溶解在1mL二氯甲烷中并加入1.24mL 1M HCl/乙醚。搅拌悬浮液30分钟，过滤并用乙醚洗涤，提供0.47g化合物3。(质谱M+1＝457，MP＝188-194℃)。
实施例5(化合物2) 将0.7g(1.67mmol)实施例3的亚砜10和0.84g(8.4mmol)4-氨基四氢吡喃在1mL NMP中的混合物搅拌10分钟。反应是放热的并在10分钟内完成。用水稀释混合物并用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机溶剂并干燥(MgSO4)，并在真空中去除。通过硅胶柱色谱法完成纯化，用己烷中的60％乙酸乙酯洗脱，提供0.46g(73％产率)产物。将1mL二氯甲烷中的该固体与1.45mL 1M HCl/乙醚混合，搅拌混合物1小时。在真空中去除溶剂，提供0.48g化合物2。(质谱M+1＝380，MP＝211-214℃)。
实施例6(化合物5) 制备4-氨基四氢噻喃-二氧化物步骤14-氨基四氢噻喃
将5g(0.043mol)四氢噻喃-4-酮16，29.26g(0.215mol)三水合乙酸钠和14.9g(0.215mol)盐酸羟胺在200mL乙醇中的悬浮液混合物加热至回流6小时，直至反应完成。冷却该反应混合物，在减压下去除乙醇。用400mL冰水稀释残渣，用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。用盐水洗涤有机溶液，干燥并过滤。在减压下浓缩滤液，产生5.6g(定量产率)的thianone肟17(白色固体)。
步骤2 向76mL of 1MLAH/THF(0.076mol)滴加2g(0.015mol)thianone肟17在30mL THF中的溶液。在完成添加后，在回流下搅拌混合物7小时，然后在室温下搅拌过夜。冷却该悬浮液，小心滴加2.9mL水，接着滴加2.9mL 15％氢氧化钠水溶液，然后8.7mL水。搅拌悬浮液30分钟，在硅藻土上过滤，用200mL乙酸乙酯洗涤。干燥滤液，过滤并在减压下蒸发至干燥(＜50℃)，提供1.62g(92.3％产率)4-氨基四氢噻喃18。
步骤3
向2.3g(0.0197mol)4-氨基四氢噻喃18在25mL 1N NaOH中的悬浮液在5℃下滴加3.14mL(3.75g，0.022mol)氯甲酸苄酯。在完成添加后固体立即形成，在室温下搅拌混合物1小时，过滤并用水洗涤。接着用己烷(50mL)洗涤。在干燥(风干)后，获得4.4g(88％产率)产物19。(质谱M+1＝252)。
步骤4 在室温下向40g(0.159mol)硫化物19在200mL二氯甲烷中的溶液以小份加入75g(0.33mol)3-氯过苯甲酸。反应是放热的。使反应混合物搅拌过夜。用饱和Na2SO3水溶液(2×150mL)，然后用NaHCO3(3×150mL)洗涤混合物。然后用盐水洗涤有机溶液，用MgSO4干燥。将混合物过滤，在真空中蒸发滤液以提供37.5g砜20(83％产率)。
步骤5 向10g(0.026mol)N-苯甲酰氧基羰基-砜20在Parr瓶中的150mL乙醇中的混合物加入0.5g氢氧化钯(20％在碳上，Pearlman催化剂)。将其在50psi下进行Parr氢化器15小时直至完成。在硅藻土上过滤并在真空中浓缩，提供5.0g游离胺21(68％产率)。
步骤6将1.4g(0.41mmol)亚砜10和1.22g(8.2mmol)4-氨基四氢噻喃-二氧化物21在3mL NMP中的混合物加热至70℃ 2小时。冷却混合物，用水稀释，用乙酸乙酯(2×75mL)萃取。用水(3×75mL)，盐水洗涤合并的乙酸乙酯溶液，干燥(MgSO4)，通过硅胶柱色谱法纯化原材料，用二氯甲烷中的4％甲醇洗脱，提供1.5g所需产物。将其溶解在3mL二氯甲烷中，滴加4.5mL 1M HCl/乙醚。搅拌悬浮液30分钟，将固体过滤，用乙醚洗涤，提供1.86g(98％产率)的化合物5。(质谱M+1＝428，MP＝221.8-226.8℃)实施例7(化合物6) 将0.4g(1.2mol)亚砜10和0.52g(5.8mmol)2-氨基-2-甲基-1-丙醇在10ml氯仿和0.8ml nmp中的混合物加热至70℃ 3小时。在减压下去除氯仿。加入40ml甲醇/乙醚(1∶1)。搅拌悬浮液10分钟并过滤。用更多的乙醚洗涤固体，提供0.258g(58.5％产率)的所需产物。将其溶解在15ml二氯甲烷中的10％甲醇中，加入0.85ml 1M HCl/乙醚。搅拌混合物30分钟并浓缩。加入乙醚并过滤固体，用乙醚洗涤，提供0.295g化合物6。(质谱M+1＝368，MP＝190.8-194.3℃)实施例8(化合物7)
将0.4g(1.2mmol)亚砜10装入玻璃密封管(聚四氟乙烯螺帽)反应器。在用冰水浴冷却反应容器同时用氮吹洗反应容器2分钟。加入5ml异丙胺并密封管。将红色溶液在64℃油浴中加热2小时直至反应完成。冷却混合物，用二氯甲烷漂洗反应容器。在真空中去除溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化样品，用二氯甲烷中5％-10％的乙酸乙酯梯度洗脱，提供0.34g(87％产物)。将该淡黄色固体溶解在最少量的二氯甲烷中，加入1.2ml 1MHCl/乙醚，接着5ml乙醚。搅拌黄色悬浮液1小时并过滤，用乙醚洗涤，提供0.34g化合物7。(质谱M+1＝338，MP＝210-212.5℃)实施例9(化合物8) 将0.4g(1.2mmol)亚砜10和0.29g(2.33mmol)4-氟苄胺在5mL氯仿中的混合物在60℃油浴中加热1.5小时，直至反应完成。通过柱色谱法直接纯化产物，用二氯甲烷中5％-10％的乙酸乙酯梯度洗脱，提供0.42g(89％产率)产物。将黄色固体溶解在最少量的二氯甲烷中，加入1.25mL1M HCl/乙醚。搅拌混合物30分钟，在真空中去除溶剂。加入乙醚并过滤固体和用乙醚洗涤，提供0.469g化合物8。(质谱M+1＝404，MP＝178-180℃)
实施例10(化合物9) 将0.4g(1.2mmol)亚砜10和0.36g(2.4mmol)2-氨基乙基甲基砜在3mL NMP中的混合物加热至65℃ 30分钟。[通过在室温下将4-甲氧基苄胺与甲基乙烯基砜在三乙胺的存在下在THF中反应制备2-氨基甲基砜，通过在甲酸铵和10％ Pd-C的存在下在甲醇中搅拌去除N-苄基]。冷却混合物，用水和乙酸乙酯稀释。过滤形成的固体，用更多的乙酸乙酯和然后40mL甲醇洗涤，提供0.34g(72.6％产率)产物。将其溶解在5mL二氯甲烷中的10％甲醇中，加入1mL 1M HCl/乙醚。持续搅拌30分钟，在真空中去除溶剂。加入乙醚研制，过滤形成的固体，用另外10mL乙醚洗涤，提供0.374g化合物9。(质谱M+1＝402，MP＝172.2-176℃)实施例11(化合物10) 步骤1
将2.48g(10.1mmol)实施例2的醛4，1.83g(12mmol)4-氟苯氧基乙腈(在K2CO3/DMF中由4-氟苯酚和碘乙腈制备)和7g(50.6mmol)碳酸钾在30mL NMP中的混合物在110℃下加热4小时直至反应完成。将混合物倒入200ml水中并用乙酸乙酯(3×125mL)萃取。用水(3×150mL)，盐水洗涤有机溶剂，用200mL己烷稀释，干燥(MgSO4)，滤过硅胶短塞。在真空中去除溶剂。通过硅胶柱色谱法纯化残余的固体，用二氯甲烷中5％-20％的乙酸乙酯梯度洗脱，提供1.3g氨基吡啶并嘧啶22，(37％产率)。(质谱M+1＝379，MP＝186.2-192.9℃)步骤2 在6小时的时间内(开始两小时1当量/小时，后面四小时0.5当量/小时)向1.3g(3.4mmol)胺22，54g(2.1mL，15.3mmol)三乙胺，3mL水和30mL乙腈的混合物加入总共2.4mL(19.6mmol，5.8当量)1，2-二氯乙基乙醚，直至反应完成。使混合物在室温下静置过夜，用水稀释，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。用盐水洗涤有机溶液，干燥(MgSO4)，并在真空中去除。通过硅胶柱色谱法完成纯化，用己烷中的10％乙酸乙酯洗脱，提供0.78g(57％产率)苯氧基-三环-咪唑23(57％产率)。
步骤3
向0.77g(1.92mmol)硫化物23在30mL二氯甲烷中在5℃下的冷却的溶液加入0.43g(1.92mmol)3-氯过苯甲酸(77％ max.)。在1小时内完成反应，将混合物倒入冷却的饱和NaHCO3水溶液，用二氯甲烷萃取。用盐水洗涤有机溶液并干燥(MgSO4)。在真空中去除溶剂后，回收0.763g亚砜(95％产率)。
步骤4将0.4g(0.96mmol)亚砜24和0.48g(4.78mmol)4-氨基四氢吡喃在1mL NMP中的混合物在60-70℃下加热30分钟。用水稀释混合物并用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机溶液并干燥(MgSO4)，在真空中去除。通过硅胶柱色谱法完成纯化，用二氯甲烷中的10-30％乙酸乙酯梯度洗脱以洗出非极性杂质，和最后用二氯甲烷中的2.5％甲醇洗脱以洗出产物，0.210g(58％产率)。将1mL二氯甲烷中的该固体与0.83mL 1M HCl/乙醚混合，搅拌混合物1小时，用乙醚洗涤并过滤，提供0.21g化合物10。(质谱M+1＝380，MP＝198-206℃)实施例12(化合物11) 向在5℃下的5ml二氯甲烷中的0.11g(1.0mmol)4-氟苯胺滴加0.5ml(1.0mmol)三甲基铝试剂(2M/甲苯)。在加入后，持续搅拌10分钟。然后通过注射器将该溶液加入0.355g(0.85mmol)实施例10的亚砜在10ml二氯甲烷中的5℃溶液。然后搅拌混合物17小时，然后在回流下搅拌3小时。将其倒入饱和NH4Cl水溶液。过滤混合物并在分层时将滤液转移至分液漏斗。再用二氯甲烷萃取水层一次，用盐水洗涤合并的有机溶液并干燥(盐水，MgSO4)。在真空中去除溶剂后，通过硅胶柱色谱法纯化残渣，用二氯甲烷中的10％乙酸乙酯洗脱，提供0.16g黄色固体。将其与5ml二氯甲烷中的20％甲醇混合并加入0.49ml 1M HCl/乙醚。将其搅拌30分钟并将溶剂蒸干。加入10ml乙醚，搅拌黄色悬浮液10分钟，过滤并用另外的乙醚洗涤，提供0.145g化合物11。(质谱M+1＝390，mp＝289.3-291.1℃)本领域技术人员应当理解上述反应路线的某些修改也被考虑和属于本发明的范围内。例如，某些步骤将涉及与特定反应条件不相容的官能团的保护基的使用。
实施例13下面是代表性的包含式(I)的化合物的药物制剂。
片剂制剂将下列成分紧密混合并压制成单刻痕的片剂。
成分每片量，mg本发明化合物400玉米淀粉50交联羧甲基纤维素钠 25乳糖120硬脂酸镁5胶囊制剂将下列成分紧密混合并装载到硬壳明胶胶囊中。
成分 每胶囊的量，mg本发明化合物 200乳糖，喷雾干燥 148硬脂酸镁 2
混悬剂制剂将下列成分混合以形成口服给药的混悬剂。
成分 量本发明化合物 1.0g富马酸 0.5g氯化钠 2.0g对羟基苯甲酸甲酯 0.15g对羟基苯甲酸丙酯 0.05g成粒糖 25.5g山梨糖醇(70％溶液) 12.85gVeegum K(Vanderbilt Co.) 1.0g调味剂 0.035ml着色剂 0.5mg蒸馏水 适量至100ml注射剂将下列成分混合以形成注射剂。
成分 量本发明化合物 0.2g醋酸钠缓冲液，0.4M 2.0mlHCl(1N)或NaOH(1N) 适量至适当pH水(蒸馏的，无菌的) 适量至20ml所有上述成分，除了水以外，都在搅拌下合并和加热至60-70℃。然后在剧烈搅拌下加入足量的60℃水以乳化成分，然后加入适量水至100g。
栓剂制剂通过将本发明的化合物与WitepsolH-15(饱和植物脂肪酸的甘油三酸酯；Riches-Nelson，Inc.，New York)混合制备总重2.5g的栓剂，并且具有下列组成
本发明化合物 500mgWitepsolH-15 余量实施例14p-38(MAP)激酶抑制-体外分析使用对Ahn，N.G.；等J.of Biol.Chem.Vol.266(7)，4220-4227，(1991)中描述的方法进行微小改进的方法，通过测定p-38激酶将γ-33P-ATP中的γ-磷酸转移给髓鞘碱性蛋白(MBP)而测定本发明的化合物在体外抑制p-38 MAP激酶的活性。
重组p38 MAP激酶的磷酸化型用SEK-1和MEKK在大肠杆菌中表达(参见，Khokhlatchev，A.等J.of Biol.Chem.Vol.272(17)，11057-11062，(1997)，然后用镍柱通过亲合色谱纯化。
磷酸化的p38 MAP激酶在激酶缓冲液(20mM 3-(N-吗啉代)丙磺酸，pH7.2，25mMβ-磷酸甘油，5mM乙二醇-双(β-氨基乙醚)-N，N，N′，N′-四乙酸，1mM钒酸钠，1mM二硫苏糖醇，40mM氯化镁)中稀释。加入溶解于DMSO的实验化合物或仅DMSO(对照)，样品在30℃保温10分钟。通过加入含有MBP和γ-33P-ATP的底物混合物引发激酶反应。在30℃下继续培养20分钟后，加入0.75％磷酸终止该反应。利用磷酸纤维素膜(Millipore，Bedford，MA)从残余γ-33P-ATP分离出磷酸化MBP，并且利用闪烁计数器定量测定(Packard，Meriden，CT)。
说明书的表1中列出的化合物的p-38抑制活性(表示为IC50，分析导致p-38酶50％抑制的浓度)为0.001μM-10μM。例如，以下表2显示使用实施例14的测定抑制p38的代表性的值。
表权利要求
1.式(I)表示的化合物或其异构体，药用盐，酯或前药 其中Z为N或CH；当原子C5和Z1之间的键为单键时，Z1选自N和CH，当C5和Z1之间的键为双键时，Z1为C；R1为氢或烷基；R2为烷基，羟烷基，任选取代的芳烷基，任选取代的环烷基，杂烷基，任选取代的杂环基，任选取代的芳基，或任选取代的杂芳基；A不存在或为-O-，-S(O)n-，-CHR’-，-C(＝O)-，或-NR3-，其中n为0，1，或2，R’为氢或烷基，且R3为氢，烷基，任选取代的芳基，任选取代的杂芳基，或任选取代的环烷基；原子C5和Z1之间的键为单键或双键；原子C8和C9之间的键为单键或双键；并且Y为烷基，杂烷基，任选取代的环烷基，任选取代的芳基，或任选取代的杂芳基。
2.按照权利要求1的化合物或其异构体，药用盐，酯或前药，所述化合物具有下式 其中R2选自任选取代的芳烷基，任选取代的环烷基，任选取代的杂环基，任选取代的芳基，和任选地被羟基、O(C1-4烷基)或S(O)2(C1-4烷基)中之一取代的C1-4烷基；A不存在或为-O-；Y为任选地被1-2个选自卤素，羟基，氨基，烷基或杂烷基的基团取代的苯基。
3.按照权利要求2的化合物，其中R2选自环戊基，环己基，四氢吡喃基，哌啶基，硫代壬基，四氢-1，1-二氧化物-2-H-噻喃基，苯基，和苄基，其中每个所述R2基团任选地被羟基，卤素，O(C1-4烷基)，或S(O)2(C1-4烷基)中之一取代；或R2选自任选地被羟基、O(C1-4烷基)或S(O)2(C1-4烷基)中之一取代的C1-4烷基。
4.按照权利要求2的化合物，其具有下式， 其中R2如权利要求2所定义。
5.按照权利要求4的化合物，其中R2选自环戊基，环己基，四氢吡喃基，哌啶基，硫代壬基，四氢-1，1-二氧化物-2-H-噻喃基，苯基，和苄基，其中每个所述R2基团任选地被羟基，卤素，O(CH3)，或S(O)2(CH3)中之一取代；或R2选自任选地被羟基、O(CH3)或S(O)2(CH3)中之一取代的C1-4烷基。
6.按照权利要求1的化合物，其中Z为-N-。
7.按照权利要求1或6的化合物，其中Z1为-C-并且Z1和C5之间的键为双键。
8.按照权利要求1，6或7中任何一项的化合物，其中A不存在或为-O-。
9.按照权利要求1，6-8中任何一项的化合物，其中R1为氢。
10.按照权利要求1，6-9中任何一项的化合物，其中R2选自环戊基，环己基，四氢吡喃基，哌啶基，硫代壬基，四氢-1，1-二氧化物-2-H-噻喃基，苯基，和苄基，其中每个所述R2基团任选地被羟基，卤素，O(C1-4烷基)，或S(O)2(C1-4烷基)中之一取代；或R2选自任选地被羟基、O(C1-4烷基)或S(O)2(C1-4烷基)中之一取代的C1-4烷基。
11.按照权利要求1，6-10中任何一项的化合物，其中Y为被卤素，羟基，氨基，烷基或杂芳基任选取代的苯基。
12.具有式Ia的化合物， 其中Y为芳基；Z为N或CH；A不存在或为O；R1为氢；R2为烷基，羟烷基，任选取代的环烷基，任选取代的杂环基，任选取代的芳基，或任选取代的芳烷基；且C8和C9之间的键为单键或双键。
13.按照权利要求12的化合物，其中Z为N，A为-O-并且C8和C9之间的键为双键。
14.按照权利要求13的化合物，其中R2为4-四氢吡喃基且Y为4-氟苯基；或R2为4-氟苯基且Y为4-氟苯基。
15.按照权利要求12的化合物，其中Z为N，A不存在，并且C8和C9之间的键为双键。
16.按照权利要求15的化合物，其中R2为4-羟基环己基和Y为2-氯苯基；R2为4-四氢吡喃基和Y为2-氯苯基；R2为4-(N-甲基-磺酰基哌啶基)和Y为2-氯苯基；R2为环戊基和Y为2-氯苯基；R2为4-(N-甲基-磺酰基哌啶基)和Y为2-氯苯基；R2为4-四氢-1，1-二氧化物-2-H-噻喃基和Y为2-氯苯基；R2为异丙基和Y为2-氯苯基；或R2为4-氟苄基和Y为2-氯苯基。
17.按照权利要求1的化合物，其具有下式结构
18.按照权利要求17的化合物，其中Z为N，A不存在，R1为氢，Y为2-氯苯基，和R2为4-羟基环己基。
19.按照权利要求1的化合物，其具有式I(c)结构
20.按照权利要求19的化合物，其中Z为N，A不存在，R1为氢，Y为2-氯苯基，和R2为4-羟基环己基。
21.一种药物组合物，其包含与药用载体组合的治疗有效量的一种或多种按照权利要求1-18或24中任何一项的化合物。
22.一种制备按照权利要求1的化合物的方法，其包含将式A的化合物与式CN-CH2-A-Y的氰化物反应以提供式B的化合物，其中A，Z和Y如权利要求1中所定义，并且Rp选自低级烷基和苄基； b)用试剂和1，2-二氯乙醚处理化合物B以获得化合物C，所述试剂选自三乙胺，三烷基胺碱，1，4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷，或二异丙基乙胺； c)用试剂氧化化合物C以获得化合物D，所述试剂选自3-氯过苯甲酸，过氧化氢/甲酸，过氧化氢/甲基三氧铼VII，或OXONE；和 d)将化合物D与式-H2N-R1R2的胺接触足够的时间以获得按照权利要求1的化合物，其中R1和R2如权利要求1所定义。
23.一种制备按照权利要求1的化合物的方法，其包含a)将式E的化合物与试剂反应以获得化合物F，其中Z，A和Y如权利要求1所定义，Rp是低级烷基或苄基，所述试剂选自三苯膦，偶氮二羧酸二乙酯和N-(2-羟乙基)-苯邻二甲酰亚胺； b)将化合物F与肼反应以获得化合物G； c)将化合物G与三甲基铝反应以获得化合物H； d)任选地用试剂氧化化合物H以获得相应的亚砜，所述试剂选自3-氯过苯甲酸，过氧化氢/甲酸，过氧化氢/甲基三氧铼VII，或OXONE，并将该亚砜与式-H2N-R1R2的胺接触足够的时间以获得按照权利要求1的化合物，其中R1和R2如权利要求1所定义。
24.通过如权利要求22或23所要求的方法制备的如权利要求1-20中任何一项所要求的化合物。
25.一种如权利要求1-20或24中任何一项所要求的作为药物的化合物。
26.一种治疗p38介导的疾病的方法，其包含向需要该治疗的患者施用有效量的按照权利要求1-20或24中任何一项的化合物。
27.权利要求26的方法，其中所述p38介导的疾病选自关节炎，局限性回肠炎，阿尔茨海默氏病，过敏性肠综合征，成人呼吸窘迫综合征，和慢性阻塞性肺病。
28.权利要求1-20或24中任何一项所要求的化合物在制备药物中的应用，所述药物用于治疗p38介导的疾病。
29.权利要求28的应用，其中所述p38介导的疾病选自关节炎，局限性回肠炎，阿尔茨海默氏病，过敏性肠综合征，成人呼吸窘迫综合征，和慢性阻塞性肺病。
30.上述本发明。
全文摘要
本发明公开对应于其中A，Z，Z
文档编号A61P25/00GK1646529SQ03807536
公开日2005年7月27日 申请日期2003年3月27日 优先权日2002年4月3日
发明者D·M·戈尔茨坦, R·C·霍利, 艾弗瑞德·鐩廷·雷, E·B·舍格伦 申请人:霍夫曼-拉罗奇有限公司