专利名称：一种纳米艾迪注射制剂及其制备方法
技术领域：
本发明属于中药制药领域，具体涉及一种纳米艾迪注射制剂及其制备方法。
背景技术：
纳米中药主要是指运用纳米技术制造的，粒径小于100纳米的中药有效成分、有效部位、原药及复方制剂。生物机体对药物的吸收、代谢是一个复杂的过程，中药制剂产生的药理效应不能仅仅归之于药物特有的化学组成还与该制剂的物理状态密切相关。因此，改变药物制剂的物理状态是新药研制的一种有效方法。在改变物理状态方面，改变药物的单元尺寸是十分有效的。当颗粒尺寸进入纳米量级时由于量子尺寸效应和表面效应，纳米粒子呈现出新奇的物理化学和生物学特性。这就是应用纳米技术于中药研究可能使药物活性和生物利用度提高乃至产生新的特性依据所在。
纳米中药的制备是研究纳米中药最基础的，也是最重要的问题。将纳米技术引入中药的研究时，必须考虑中药组方的多样性、中药成分的复杂性，例如中药单味药可分为矿物药、植物药、动物药和菌物药等，中药的有效部位和有效成分又包括无机化合物和有机化合物、水溶性成分和脂溶性成分等。因此，针对不同的药物，在进行纳米化时必须采用不同的技术路线。纳米中药与中药新制剂关系十分密切，如何在中药理论的指导下进行纳米中药新制剂的研究，将中药制成高效、速效、长效、计量小、低毒、服用方便的现代制剂，也是进行中药纳米化时必须考虑的问题。
目前，纳米技术在中药研究中存在的问题也不能忽视的。一.纳米中药的制备困难我国虽已制备一些纳米级的中药，可是由于中药品种繁多，成分复杂，不同的成分由于其作用部位、作用机制及作用缓急的不同而要求其粒径大小、载体成分及给药剂量均有可能不同。同时纳米中药应该有它自己的一套质量标准，使其生产规范化二.纳米中药的毒副作用药物制成纳米微粒，其物理性质和化学性质均发生了显著的变化，这些变化对人体是否有毒副反应均未有有关的研究报道。但由于纳米材料的特殊性，除了可穿透皮肤，还会进入细胞器内，是否会直接参与或作为催化剂扰乱机体正常的化学反应，均未见有关报道。此外，纳米中药还可以通过机体的屏障系统，那它是否会影响中枢神经系统，精子的生成及其活力、胎儿的发育等，这些问题均无法回避；三.中药在纳米级粉碎后，纳米微粒表面积变大，由于纳米微粒表面的活性使他们很容易团聚在一起，这给纳米微粒的收集及其药效的稳定性带来很大的困难。
现代中药的研究就是要在继承中药传统的基础上，充分利用现代科技手段，使中药具有先进的生产工艺和现代剂型，做到“有效、安全、可控”，将纳米技术应用于中药领域是现代中药发展的重要方向之一。纳米中药一般不是简单地将中药材进行粉碎至纳米量级，而是针对组成中药方剂的某味药的有效部位甚至是有效成分进行纳米技术加工处理，赋予传统中药以新的功能，如提高生物利用度，增强靶向性；降低毒副作用；呈现新的药效，拓宽原药的适应证；丰富中药的剂型选择；减少用药量，节省中药资源等。
同传统中药相比，纳米中药具有以下特点①提高了药物的利用度，减少用药量。②增强药物的靶向性。③具有缓释功能，将中药纳米粒进行一定的表面修饰后，可能使中药具有缓释作用。④呈现新的药效，拓宽原药适应症，中药加工至纳米尺寸时，由于其量子尺寸等效应导致其物理、化学特性的改变，从而可使中药呈现出新功能。⑤丰富中药的剂型选择，提升传统给药途径。
徐辉碧等检索了1998年～2000年美国专利中涉及纳米科技的专利，发现该类专利与生物医学相关的专利占总数的80％以上，杨孟君在2001年一年内申请了940多件纳米中药的专利，但其申请的大部分都是中药原料药进行纳米粉碎，其专利实用性不强。
目前纳米中药的研究主要集中于利用纳米技术对少数成分比较明确的单体有效成分进行纳米处理制成纳米制剂，或将原料药直接粉碎成纳米级，对大部分中药的纳米制剂研究还很少，主要是因为中药有效成分和有效部位特别是中药复方中有效部位本身就是一个“黑匣子”，中药中真正起药理作用的有效成分或有效部位研究本身就是一个难题，而且由于中药成分比较复杂，所以将其制备成纳米制剂需要克服的困难较多，因此，中药纳米制剂及技术是医药科研工作者的重要研究课题。
艾迪注射液由斑蝥以及人参、黄芪、刺五加制备而成，人参、黄芪、刺五加具有免疫刺激，免疫趋化和提高机体耐受力的作用；斑蝥中斑蝥素具有细胞毒性和细胞凋亡诱导作用，斑蝥素可加强化疗药物的细胞毒性，并可诱导细胞凋亡，斑蝥素对癌细胞有较强的亲和性，抑制癌细胞蛋白质的合成，从而抑制其生长分化。但斑蝥素溶解性差，体内吸收较难达到有效的血药浓度，且有较大的副作用，可引起刺激性炎症、血栓性静脉炎、局部组织坏死、泌尿道和消化道刺激症状，因此艾迪注射液在临床应用中具有很多副作用。
查阅文献和专利，未检索到纳米艾迪注射制剂的资料。
发明内容
基于上述原因，为了降低艾迪注射液的毒副作用，增强其对癌细胞的作用，我们经过长期的实验研究，将人参、黄芪、、刺五加、斑蝥有效部位与药用载体组合，制备成纳米艾迪注射制剂，使有效部位经包封成纳米物质后，增加了对细胞的通进性，提高它在生物膜上的主动转运，并以胞饮作用的方式为细胞所吞噬。由于癌细胞较正常细胞更旺盛活跃，艾迪纳米药物极易融合进癌细胞内，且因癌细胞中含有较正常细胞更多的磷脂酶与酞胺酶，通过酶解作用又能把大量药物释放出来，并在癌组织中滞留，增强杀伤肿瘤细胞的作用，所以纳米艾迪注射制剂具有有效地提高抗癌靶向性作用，而且能有效的减轻其毒性，与市售艾迪注射液比较，具有很好的靶向抗癌作用。
本专利工艺中将人参、黄芪、刺五加、斑蝥有效部位与药用载体混合，制备成纳米级药物；本专利通过一定的方法将中药中复杂的活性部位制备成纳米级，制备成注射制剂，与现有的技术比较，将不同种类的活性部位进行纳米制备是我们成功解决的难点。
本发明所用的以上载体制备工艺是我们经大量实验研究和优选的结果，在研究过程中我们采用了很多纳米技术工艺并进行了比较，有的工艺难以制备成纳米药物，而有的工艺即便制备成纳米药物，也达不到本发明制剂的靶向效果。
本发明在于提供一种纳米艾迪的注射制剂；本发明还在于提供一种纳米艾迪注射制剂的制备方法；本发明还在于提供纳米艾迪注射制剂的应用；本发明通过以下技术方案实现的。
一.工艺制法提取纯化方法根据WS3-B-3809-98标准中艾迪注射液的制法得到人参、黄芪、刺五加、斑蝥有效部位；艾迪注射制剂纳米技术处方为人参、黄芪、刺五加、斑蝥有效部位1.5-4.5重量份，药用载体8.8-56.3重量份。
方法一取上述有效部位、乳化剂和脂质，在通氮气条件下加热至80±5℃，在搅拌条件下加入相同温度甘油和poloxamer188的水溶液，制成粗乳，在80±5℃通氮气条件下用高压乳匀机载41.4MPa压力下乳匀5次，充氮气分装后，迅速冷却形成主药混悬液。
方法二取上述有效部位、卵磷脂、泊络沙姆F-68、土温80，在高速搅拌条件加入70±5℃的蒸馏水中，待完全熔融作为水相，再称取单硬脂酸甘油酯加热熔融作为油相，将油相缓慢加入水相中，持续搅拌1h后超声分散室温，频率45-50Hz，超声时间5-8分钟，即得澄明的混悬液。
方法三取上述有效部位，脂质和丙酮加入容器中，超声使充分溶解，加入乳化剂，微热使溶成有机相，另取助乳化剂泊络沙姆F-68溶于水中，构成水相，将有机相在(1000r/min)搅拌下注入75±2℃水相中，继续加热搅拌4h，使有机融媒完全蒸发并使体系浓缩，将所得的半透明体系搅拌下(1000r/min)快速溶解于0-2℃的水相，继续搅拌2h，即得混悬液。
方法四取上述有效部位，溶于30％-70％乙醇中；将脂质中一种或多种溶于烷烃，混合搅拌均匀；将乙醇溶解物和烷烃溶解物混合，放入旋转刮膜蒸发仪，控制压力0.1-0.2个大气压，去除有机溶剂至尽，将蒸馏物放入密闭容器中进行超声处理，得到混悬液。
本发明所用的脂质如脂肪酸甘油酯类(包括三硬脂酸甘油酯、三棕榈酸甘油酯、三肉豆蔻酸甘油酯、三月桂酸甘油酯、三窬酸甘油酯、Witepsol W35、WitepsolH35、Witepsol H42、单硬脂酸甘油酯)及脂肪酸类(如硬脂酸、棕榈酸)等；本发明所用的乳化剂如磷脂(包括大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂及磷脂酰胆碱等)、泊洛沙姆、聚山梨醇、胆酸盐、四丁酚醛等；方法五油相将上述有效部位油溶液(聚氰基丙烯酸烷酯、聚乳酸、聚丙交酯-乙交酯、壳聚糖、明胶中的一种或几种)，同无水乙醇混合，摇匀，得透明溶液；水相为0.5％非离子型表面活性剂Pluronic F68的水溶液(pH值约6)，两相均为20℃，将油相通过硅胶管或细针头射入电磁搅拌的水相中，立即形成纳米囊，将溶液真空蒸发至原体积的1/5左右，用玻砂漏斗(9-15μm)过滤，即得混悬液。
制剂制备水针剂制备取上述混悬液，加注射用水溶解完全，加入稳定剂PVP，调节PH值，过滤，灭菌，灌装，得到水针剂；输液剂制备取上述混悬液加入药用辅料，加注射用水溶解完全，加入稳定剂PVP，调节PH值，过滤，灭菌，灌装，得到输液剂；粉针剂制备取上述混悬液加入药用辅料，加注射用水溶解完全，调节PH值，过滤，灭菌，冷冻干燥，得到粉针剂；本发明输液剂所用的药用辅料为氯化钠或葡萄糖；本发明粉针剂所用的辅料为蔗糖、乳糖或甘露醇；本发明纳米水针剂、纳米输液剂加入少量PVP(聚乙烯吡咯烷酮)，可以提高制剂的稳定性。
本发明纳米艾迪注射制剂具有清热解毒，消瘀散结的功用，在制备治疗原发性肝癌，肺癌，直肠癌，恶性淋巴瘤，妇科恶性肿瘤药物中的应用。
二.质量标准检测依据根据《中华人民共和国药典》(2005年版，二部附录XIXE微囊、微球与脂质体制剂指导原则)进行的纳米质量检测。
实验仪器H-7000型透射电镜仪(日本Hitachi公司)；Zetamaster光子相关光谱仪(英国Malvem公司)；LC-10A高效液相色谱仪(日本岛津)；TGL-18G型台式高速离心机。
1.形态观察及粒径将本专利艾迪纳米药物在透射电镜下进行形态观察，可见呈圆球体，大小较均匀，表面光滑，无粘连。根据纳米药物的光学显微照片测定了1000个，平均粒径为40±5nm，最大粒径为60nm，最小粒径为10nm，且粒径分布符合正态分布规律。
2.包封率和载药量测定采用斑蝥素含量测定，并用下述公式计算包封率和载药量包封率(％)＝(投药量-游离药物量)/投药量×100％；载药量(％)＝(投药量-游离药物量)/纳米药物的重量×100％。
结果包封率为90.6％，载药量为8％-17％。
3.稳定性考察将纳米药物分别置于小瓶内，密封。于冰箱(3-5℃)、室温(20-25℃)和37℃(RH75％)的环境中放置，于0、1、2和3月观测纳米药物的外观、大小、再分散性等。结果均未见明显变化，3种条件下的纳米药物再分散性保持良好，无聚合现象的发生。结果见表1。
表1稳定性实验结果
结论通过上述实验表明，本专利纳米药物具有很好的稳定性，充分说明本发明工艺具有实际意义。
三.检测分析实验艾迪注射制剂有效成分的检测分析根据WS3-B-3809-98标准中艾迪注射液的含量测定的方法测定纳米艾迪注射制剂和市售艾迪注射液中人参皂苷和斑蝥素的含量，实验结果见表2表2艾迪注射制剂含量比较
结论通过上述实验表明，本专利工艺具有实际意义。
四.安全性实验实验1刺激性实验实验药物本发明各组纳米艾迪制剂(广东天之骄药物开发有限公司实验室提供)实验动物健康大耳家兔，雌雄兼用。
实验方法取健康大耳家兔3只，将动物固定于兔箱内，用酒精将皮肤消毒后，于右侧耳缘静脉处注射本专利纳米艾迪注射制剂，于另一侧对应部位注射同一体积的等渗葡萄糖水作为对照。每日注射1次，连续3次，观察兔耳缘静脉反应。于末次给药24h后将兔放血处死，取下两耳，用10％甲醛溶液浸泡，距注射部位1-4cm处，解剖取出静脉，做组织切片检查，观察注射部位的反应。
实验结果试验过程中，肉眼观察两耳静脉注射部位处，未见红肿、热等刺激表现。表明给药组切片部位组织形态无明显差异，未见本品毒性所致的病理形态学改变(血管结构正常，无内皮细胞损伤，无血栓形成及其他病理性变化)。
实验2溶血毒性考察实验药物本发明各组纳米艾迪注射制剂(广东天之骄药物开发有限公司实验室提供)实验方法2％红细胞混悬液的制备取兔耳缘静脉取血10-20ml，放入盛有玻璃珠的锥形瓶中，振摇10分钟，除去纤维蛋白原，使成脱纤血。加10倍量的生理盐水溶液，摇匀，离心，除去上清液，沉淀的红细胞再用生理盐水溶液洗涤2-3次，至上清液不呈红色时为止。将所得的红细胞用用生理盐水配成浓度为2％的混悬液，即得。
试验方法取试管6支，按表3中的配比量依次加入2％红细胞混悬液和生理盐水溶液，混匀，于37℃恒温箱中放置30分钟，分别加入不同量的本发明纳米艾迪注射制剂(以第6管为空白对照)，摇匀后，置37℃恒温箱中，开始每隔15分钟观察1次，1小时后，每隔1小时观察1次，共观察2小时。
表3各组别配比量
实验结果以第3试管为准，各管均未染有红色，显微镜下观察未见有红细胞破裂，说明本专利纳米艾迪注射制剂不溶血，安全性好。
实验3急性毒性实验实验药物本发明各组纳米艾迪注射制剂(广东天之骄药物开发有限公司实验室提供)艾迪注射液(贵州益佰制药股份有限公司)实验动物健康小鼠18-22g，，雌雄各半。
实验方法取小鼠，分为市售艾迪注射液组、本专利纳米艾迪水针剂组、输液剂组、粉针剂组，腹腔给药，按照体表面积换算成小鼠给药剂量，每天给药3次，连续7天，观察小鼠死亡情况，记录数据，按改良寇氏法计算艾迪注射制剂的LD50值实验结果见表4表4小鼠用药LD50值比较
结论通过上述实验表明，本专利纳米艾迪注射制剂与市售艾迪注射液具有相同的安全性六.药理实验实验1靶向组织中药物含量的测定实验药物本发明各组纳米艾迪注射制剂(广东天之骄药物开发有限公司实验室提供)；艾迪注射液(贵州益佰制药股份有限公司)实验动物大鼠，体重约180-220g，雌雄不限。
实验方法取大鼠，分为市售艾迪注射液组、本专利纳米艾迪水针剂组、输液剂组、粉针剂组，大鼠腹腔给药，给药量为5ml/kg(输液制剂与粉针剂处理成与水针剂相同密度的溶液)，30min后立即断头处死，取血浆和肝、肺、淋巴组织，取血浆离心10min(2000rpm)，取血清分析测定含量。取出的大鼠组织用生理盐水轻轻冲洗，用滤纸吸干，组织膜血管剥离干净后取组织，称重。然后按组织∶生理盐水＝1∶1.5(W/V)的比例匀浆，离心10min(2000rpm)，取上清液分析测定含量(测定斑蝥素含量)，见表5表5同组织药物浓度含量测定
结论通过上述实验表明，本发明纳米艾迪注射制剂具有很好的组织器官靶向性。
实验2对大鼠肝肿瘤抑制的比较实验动物大鼠，150g-180g，雌雄不分。
实验药物生理盐水；本发明各组纳米艾迪注射制剂(广东天之骄药物开发有限公司实验室提供)；艾迪注射液(贵州益佰制药股份有限公司)实验方法取大鼠分为生理盐水组、市售艾迪注射液组、本专利纳米艾迪水针剂组、输液剂组、粉针剂组，作W256的肝内接种，接种7天后，用戊巴比妥钠按35mg/kg的剂量腹腔注射麻醉，固定，剖腹暴露肝，测量肝上肿瘤表面最大径(a)和最小径(b)，按(a*b2)/2＝V(肿瘤体积)。分离胃、十二指肠动脉、肝总动脉和肝固有动脉，结扎胃、十二指肠动脉远端，以银夹阻断肝总动脉，于手术放大镜下在胃十二指肠动脉上切口并插入外径0.3mm导管后再送入肝固有动脉，然后按实验分组分别注入受试药物，术后拔管结扎胃十二指肠动脉，放开肝总动脉银夹，再缝合切口，将大鼠置于动物室待苏醒，继续饲养观察，手术后8天，按上法检测肿瘤体积，实验结果见表6表6各组制剂对肿瘤的抑制比较
注与生理盐水组比较组比较**P＜0.01；与阳性对照组比较*P＜0.05实验3物理、化学和生物因素均能诱发癌症，但人癌发病原因的80％-90％认为是环境化学物质引起的。
对二乙基亚硝胺(DENA)诱发大鼠肝癌的抑制实验动物大鼠，120g左右，雌雄不分，。
实验药物生理盐水；本发明各组纳米艾迪注射制剂(广东天之骄药物开发有限公司实验室提供)；艾迪注射液(贵州益佰制药股份有限公司)实验方法用含二乙基亚硝胺(DENA)的饮水喂养大鼠，36周得原发性肝癌，按照实验2的方法进行实验，记录大鼠存活天数，实验结果见表7表7大鼠存活天数比较
注与生理盐水组比较**P＜0.01；与阳性对照组比较*P＜0.05结论通过以上药理实验表明，本发明的纳米艾迪注射制剂比市售艾迪注射液的药理作用更好，有利于癌症的治疗。
七.制备实施例根据WS3-B-3809-98标准中艾迪注射液的制法得到人参、黄芪、刺五加、斑蝥有效部位；实施例1处方为有效部位150克，药用载体880克，其中脂质体中脂质352克、乳化剂528克；艾迪纳米技术方法一取有效部位150克、乳化剂大豆卵磷脂528克和脂质三硬脂酸甘油酯352克，在通氮气条件下加热至80±5℃，在搅拌条件下加入相同温度甘油和poloxamer188的水溶液，制成粗乳，在80±5℃通氮气条件下用高压乳匀机载41.4MPa压力下乳匀5次，充氮气分装后，迅速冷却形成主药混悬液。
方法二取有效部位150克、卵磷脂、泊络沙姆F-68、土温80共528克，在高速搅拌条件加入70±5℃的蒸馏水中，待完全熔融作为水相，再称取单硬脂酸甘油酯352克加热熔融作为油相，将油相缓慢加入水相中，持续搅拌1h后超声分散室温，频率45-50Hz，超声时间5-8分钟，即得澄明的混悬液。
方法三取有效部位150克，脂质三棕榈酸甘油酯352克和丙酮加入容器中，超声使充分溶解，加入乳化剂蛋黄卵磷脂528克，微热使溶成有机相，另取助乳化剂泊络沙姆F-68溶于水中，构成水相，将有机相在(1000r/min)搅拌下注入75±2℃水相中，继续加热搅拌4h，使有机融媒完全蒸发并使体系浓缩，将所得的半透明体系搅拌下(1000r/min)快速溶解于0-2℃的水相，继续搅拌2h，即得混悬液方法四取有效部位150克，溶于30％乙醇中；将脂质中三月桂酸甘油酯352克溶于正己烷中，混合搅拌均匀；将乙醇溶解物和烷烃溶解物混合，放入旋转刮膜蒸发仪，控制压力0.1个大气压，去除有机溶剂至尽，将蒸馏物放入密闭容器中进行超声处理，得到混悬液。
方法五油相将有效部位150克与聚氰基丙烯酸烷酯880克混合成油溶液，同无水乙醇混合，摇匀，得透明溶液；水相为0.5％非离子型表面活性剂PluronicF68的水溶液(pH值约6)，两相均为20℃，将油相通过硅胶管或细针头射入电磁搅拌的水相中，立即形成纳米囊，将溶液真空蒸发至原体积的1/5左右，用玻砂漏斗(9-15μm)过滤，即得混悬液。
制剂制备水针剂制备取上述混悬液，加注射用水溶解完全，加入稳定剂PVP，调节PH值，过滤，灭菌，灌装，得到水针剂1000瓶；输液剂制备取上述混悬液加入药用辅料氯化钠，加注射用水溶解完全，加入稳定剂PVP，调节PH值，过滤，灭菌，灌装，得到输液剂1000瓶；粉针剂制备取上述混悬液加入药用辅料蔗糖，加注射用水溶解完全，调节PH值，过滤，灭菌，冷冻干燥，得到粉针剂1000瓶；将上述纳米制剂进行检测，其纳米粒径为10-60纳米实施例2艾迪纳米技术
处方为有效部位450克，药用载体5630克，其中脂质体制备中乳化剂为2956克、脂质2674克；方法一取有效部位450克、乳化剂蛋黄卵磷脂2956克和脂质三肉豆蔻酸甘油酯2674克，在通氮气条件下加热至80±5℃，在搅拌条件下加入相同温度甘油和poloxamer188的水溶液，制成粗乳，在80±5℃通氮气条件下用高压乳匀机载41.4MPa压力下乳匀5次，充氮气分装后，迅速冷却形成主药混悬液。
方法二取有效部位450克、卵磷脂、泊络沙姆F-68、土温80共2956克，在高速搅拌条件加入70±5℃的蒸馏水中，待完全熔融作为水相，再称取单硬脂酸甘油酯2674克加热熔融作为油相，将油相缓慢加入水相中，持续搅拌1h后超声分散室温，频率45-50Hz，超声时间5-8分钟，即得澄明的混悬液。
方法三取有效部位450克，脂质三月桂酸甘油酯2674克和丙酮加入容器中，超声使充分溶解，加入乳化剂磷脂酰胆碱2956克，微热使溶成有机相，另取助乳化剂泊络沙姆F-68溶于水中，构成水相，将有机相在(1000r/min)搅拌下注入75±2℃水相中，继续加热搅拌4h，使有机融媒完全蒸发并使体系浓缩，将所得的半透明体系搅拌下(1000r/min)快速溶解于0-2℃的水相，继续搅拌2h，即得混悬液。
方法四取有效部位450克，溶于70％乙醇中；将脂质Witepsol W352674克溶于丙烷中，混合搅拌均匀；将乙醇溶解物和烷烃溶解物混合，放入旋转刮膜蒸发仪，控制压力0.2个大气压，去除有机溶剂至尽，将蒸馏物放入密闭容器中进行超声处理，得到混悬液。
方法五油相将有效部位450克和聚乳酸5630克形成油溶液，同无水乙醇混合，摇匀，得透明溶液；水相为0.5％非离子型表面活性剂Pluronic F68的水溶液(pH值约6)，两相均为20℃，将油相通过硅胶管或细针头射入电磁搅拌的水相中，立即形成纳米囊，将溶液真空蒸发至原体积的1/5左右，用玻砂漏斗(9-15μm)过滤，即得混悬液。
制剂制备水针剂制备取上述混悬液，加注射用水溶解完全，加入稳定剂PVP，调节PH值，过滤，灭菌，灌装，得到水针剂1000瓶；输液剂制备取上述混悬液加入药用辅料葡萄糖，加注射用水溶解完全，加入稳定剂PVP，调节PH值，过滤，灭菌，灌装，得到输液剂1000瓶；粉针剂制备取上述混悬液加入药用辅料乳糖，加注射用水溶解完全，调节PH值，过滤，灭菌，冷冻干燥，得到粉针剂1000瓶；将上述纳米制剂进行检测，其纳米粒径为10-60纳米实施例3艾迪纳米技术处方为有效部位200克，药用载体1333克，其中脂质体制备中乳化剂为906克、脂质427克；方法一取有效部位200克、乳化剂泊洛沙姆906克和脂质单硬脂酸甘油酯427克，在通氮气条件下加热至80±5℃，在搅拌条件下加入相同温度甘油和poloxamer188的水溶液，制成粗乳，在80±5℃通氮气条件下用高压乳匀机载41.4MPa压力下乳匀5次，充氮气分装后，迅速冷却形成主药混悬液。
方法二取有效部位200克、卵磷脂、泊络沙姆F-68、土温80共906克，在高速搅拌条件加入70±5℃的蒸馏水中，待完全熔融作为水相，再称取单硬脂酸甘油酯427克加热熔融作为油相，将油相缓慢加入水相中，持续搅拌1h后超声分散室温，频率45-50Hz，超声时间5-8分钟，即得澄明的混悬液。
方法三取有效部位200克，脂质硬脂酸、棕榈酸427克和丙酮加入容器中，超声使充分溶解，加入乳化剂聚山梨醇906克，微热使溶成有机相，另取助乳化剂泊络沙姆F-68溶于水中，构成水相，将有机相在(1000r/min)搅拌下注入75±2℃水相中，继续加热搅拌4h，使有机融媒完全蒸发并使体系浓缩，将所得的半透明体系搅拌下(1000r/min)快速溶解于0-2℃的水相，继续搅拌2h，即得混悬液。
方法四取有效部位200克，溶于35％乙醇中；将脂质三硬脂酸甘油酯、三棕榈酸甘油酯427克溶于正己烷中，混合搅拌均匀；将乙醇溶解物和烷烃溶解物混合，放入旋转刮膜蒸发仪，控制压力0.12个大气压，去除有机溶剂至尽，将蒸馏物放入密闭容器中进行超声处理，得到混悬液。
方法五油相将有效部位200克和聚丙交酯-乙交酯、壳聚糖共1333克形成油溶液，同无水乙醇混合，摇匀，得透明溶液；水相为0.5％非离子型表面活性剂Pluronic F68的水溶液(pH值约6)，两相均为20℃，将油相通过硅胶管或细针头射入电磁搅拌的水相中，立即形成纳米囊，将溶液真空蒸发至原体积的1/5左右，用玻砂漏斗(9-15μm)过滤，即得混悬液。
制剂制备水针剂制备取上述混悬液，加注射用水溶解完全，加入稳定剂PVP，调节PH值，过滤，灭菌，灌装，得到水针剂1000瓶；输液剂制备取上述混悬液加入药用辅料葡萄糖，加注射用水溶解完全，加入稳定剂PVP，调节PH值，过滤，灭菌，灌装，得到输液剂1000瓶；粉针剂制备取上述混悬液加入药用辅料蔗糖，加注射用水溶解完全，调节PH值，过滤，灭菌，冷冻干燥，得到粉针剂；将上述纳米制剂进行检测，其纳米粒径为10-60纳米实施例4艾迪纳米技术
处方为有效部位300克，药用载体2500克，其中脂质体制备中乳化剂为1426克、脂质1074克；方法一取有效部位300克、乳化剂胆酸盐、四丁酚醛1426克和脂质WitepsolH35、Witepsol H42、单硬脂酸甘油酯1074克，在通氮气条件下加热至80±5℃，在搅拌条件下加入相同温度甘油和poloxamer188的水溶液，制成粗乳，在80±5℃通氮气条件下用高压乳匀机载41.4MPa压力下乳匀5次，充氮气分装后，迅速冷却形成主药混悬液。
方法二取有效部位300克、卵磷脂、泊络沙姆F-68、土温80共1426克，在高速搅拌条件加入70±5℃的蒸馏水中，待完全熔融作为水相，再称取单硬脂酸甘油酯1074克加热熔融作为油相，将油相缓慢加入水相中，持续搅拌1h后超声分散室温，频率45-50Hz，超声时间5-8分钟，即得澄明的混悬液。
方法三取有效部位300克，脂质单硬脂酸甘油酯、棕榈酸1426克和丙酮加入容器中，超声使充分溶解，加入乳化剂胆酸盐1074克，微热使溶成有机相，另取助乳化剂泊络沙姆F-68溶于水中，构成水相，将有机相在(1000r/min)搅拌下注入75±2℃水相中，继续加热搅拌4h，使有机融媒完全蒸发并使体系浓缩，将所得的半透明体系搅拌下(1000r/min)快速溶解于0-2℃的水相，继续搅拌2h，即得混悬液。
方法四取有效部位300克，溶于50％乙醇中；将脂质三月桂酸甘油酯、三窬酸甘油酯、Witepsol W35共1426克液体烷烃中，混合搅拌均匀；将乙醇溶解物和烷烃溶解物混合，放入旋转刮膜蒸发仪，控制压力0.16个大气压，去除有机溶剂至尽，将蒸馏物放入密闭容器中进行超声处理，得到混悬液。
方法五油相将有效部位300克和聚丙交酯-乙交酯、壳聚糖、明胶油2500克形成溶液，同无水乙醇混合，摇匀，得透明溶液；水相为0.5％非离子型表面活性剂Pluronic F68的水溶液(pH值约6)，两相均为20℃，将油相通过硅胶管或细针头射入电磁搅拌的水相中，立即形成纳米囊，将溶液真空蒸发至原体积的1/5左右，用玻砂漏斗(9-15μm)过滤，即得混悬液。
制剂制备水针剂制备取上述混悬液，加注射用水溶解完全，加入稳定剂PVP，调节PH值，过滤，灭菌，灌装，得到水针剂1000瓶；输液剂制备取上述混悬液加入药用辅料葡萄糖，加注射用水溶解完全，加入稳定剂PVP，调节PH值，过滤，灭菌，灌装，得到输液剂1000瓶；粉针剂制备取上述混悬液加入药用辅料蔗糖，加注射用水溶解完全，调节PH值，过滤，灭菌，冷冻干燥，得到粉针剂1000瓶；将上述纳米制剂进行检测，其纳米粒径为10-60纳米实施例5艾迪纳米技术处方为有效部位400克，药用载体4445克，其中脂质体制备中乳化剂为2685克、脂质1760克，方法一取有效部位400克、乳化剂山梨醇2685克和脂质硬脂酸、棕榈酸1760克，在通氮气条件下加热至80±5℃，在搅拌条件下加入相同温度甘油和poloxamer188的水溶液，制成粗乳，在80±5℃通氮气条件下用高压乳匀机载41.4MPa压力下乳匀5次，充氮气分装后，迅速冷却形成主药混悬液。
方法二取有效部位400克、卵磷脂、泊络沙姆F-68、土温80共2685克，在高速搅拌条件加入70±5℃的蒸馏水中，待完全熔融作为水相，再称取单硬脂酸甘油酯1760克加热熔融作为油相，将油相缓慢加入水相中，持续搅拌1h后超声分散室温，频率45-50Hz，超声时间5-8分钟，即得澄明的混悬液。
方法三取有效部位400克，脂质Witepsol W35、Witepsol H35、三硬脂酸甘油酯共1760克和丙酮加入容器中，超声使充分溶解，加入乳化剂大豆卵磷脂2685克，微热使溶成有机相，另取助乳化剂泊络沙姆F-68溶于水中，构成水相，将有机相在(1000r/min)搅拌下注入75±2℃水相中，继续加热搅拌4h，使有机融媒完全蒸发并使体系浓缩，将所得的半透明体系搅拌下(1000r/min)快速溶解于0-2℃的水相，继续搅拌2h，即得混悬液。
方法四取有效部位400克，溶于65％乙醇中；将脂质三月桂酸甘油酯、三窬酸甘油酯、Witepsol W35共1760克溶于正丁烷，混合搅拌均匀；将乙醇溶解物和烷烃溶解物混合，放入旋转刮膜蒸发仪，控制压力0.18个大气压，去除有机溶剂至尽，将蒸馏物放入密闭容器中进行超声处理，得到混悬液。
方法五油相将有效部位400克和聚丙交酯-乙交酯4445克形成油溶液，同无水乙醇混合，摇匀，得透明溶液；水相为0.5％非离子型表面活性剂PluronicF68的水溶液(pH值约6)，两相均为20℃，将油相通过硅胶管或细针头射入电磁搅拌的水相中，立即形成纳米囊，将溶液真空蒸发至原体积的1/5左右，用玻砂漏斗(9-15μm)过滤，即得混悬液。
制剂制备水针剂制备取上述混悬液，加注射用水溶解完全，加入稳定剂PVP，调节PH值，过滤，灭菌，灌装，得到水针剂1000瓶；输液剂制备取上述混悬液加入药用辅料氯化钠，加注射用水溶解完全，加入稳定剂PVP，调节PH值，过滤，灭菌，灌装，得到输液剂1000瓶；粉针剂制备取上述混悬液加入药用辅料甘露醇，加注射用水溶解完全，调节PH值，过滤，灭菌，冷冻干燥，得到粉针剂1000瓶。
将上述纳米制剂进行检测，其纳米粒径为10-60纳米
权利要求
1.一种纳米艾迪注射制剂，其特征在于其组成包括人参、黄芪、刺五加、斑蝥有效部位1.5-4.5重量份，药用载体8.8-56.3重量份；其特征还在于纳米艾迪注射制剂中纳米粒径为10-60纳米。
2.根据权利要求1所述的一种纳米艾迪注射制剂的制备方法，其特征包括以下步骤提取纯化方法根据WS3-B-3809-98标准中艾迪注射液的制法得到人参、黄芪、刺五加、斑蝥有效部位；艾迪注射制剂纳米技术方法一取上述有效部位、乳化剂和脂质，在通氮气条件下加热至80±5℃，在搅拌条件下加入相同温度甘油和poloxamer188的水溶液，制成粗乳，在80±5℃通氮气条件下用高压乳匀机载41.4MPa压力下乳匀5次，充氮气分装后，迅速冷却形成主药混悬液。方法二取上述有效部位、卵磷脂、泊络沙姆F-68、土温80，在高速搅拌条件加入70±5℃的蒸馏水中，待完全熔融作为水相，再称取单硬脂酸甘油酯加热熔融作为油相，将油相缓慢加入水相中，持续搅拌1h后超声分散室温，频率45-50Hz，超声时间5-8分钟，即得澄明的混悬液。方法三取上述有效部位，脂质和丙酮加入容器中，超声使充分溶解，加入乳化剂，微热使溶成有机相，另取助乳化剂泊络沙姆F-68溶于水中，构成水相，将有机相在1000r/min搅拌下注入75±2℃水相中，继续加热搅拌4h，使有机融媒完全蒸发并使体系浓缩，将所得的半透明体系搅拌下在1000r/min快速溶解于0-2℃的水相，继续搅拌2h，即得混悬液。方法四取上述有效部位，溶于30％-70％乙醇中；将脂质中一种或多种溶于烷烃，混合搅拌均匀；将乙醇溶解物和烷烃溶解物混合，放入旋转刮膜蒸发仪，控制压力0.1-0.2个大气压，去除有机溶剂至尽，将蒸馏物放入密闭容器中进行超声处理，得到混悬液。方法五油相将上述有效部位油溶液(聚氰基丙烯酸烷酯、聚乳酸、聚丙交酯-乙交酯、壳聚糖、明胶中的一种或几种)，同无水乙醇混合，摇匀，得透明溶液；水相为0.5％非离子型表面活性剂Pluronic F68的水溶液(pH值约6)，两相均为20℃，将油相通过硅胶管或细针头射入电磁搅拌的水相中，立即形成纳米囊，将溶液真空蒸发至原体积的1/5左右，用玻砂漏斗(9-15μm)过滤，即得混悬液。制剂制备水针剂制备取上述混悬液，加注射用水溶解完全，加入稳定剂PVP，调节PH值，过滤，灭菌，灌装，得到水针剂；输液剂制备取上述混悬液加入药用辅料，加注射用水溶解完全，加入稳定剂PVP，调节PH值，过滤，灭菌，灌装，得到输液剂；粉针剂制备取上述混悬液加入药用辅料，加注射用水溶解完全，调节PH值，过滤，灭菌，冷冻干燥，得到粉针剂。
3.根据权利要求1和2所述的纳米艾迪注射制剂具有清热解毒，消瘀散结的功用，在制备治疗原发性肝癌，肺癌，直肠癌，恶性淋巴瘤，妇科恶性肿瘤药物中的应用。
4.根据权利要求1和2所述的纳米艾迪注射制剂在制备治疗癌症药物中的靶向作用。
全文摘要
本发明公开了一种纳米艾迪注射制剂及其制备方法，其特征在于将人参、黄芪、刺五加、斑蝥有效部位与药用载体组合，制备成纳米艾迪水针剂、输液剂、粉针剂；其特征还在于本发明注射制剂中有效部位1.5－4.5重量份、药用载体8.8－56.3重量份，其中纳米粒径为10－60纳米；药理实验结果表明，本发明纳米注射制剂应用安全，与市售艾迪注射液比较具有更好的药理作用。
文档编号A61K35/56GK1883538SQ20051007749
公开日2006年12月27日 申请日期2005年6月24日 优先权日2005年6月24日
发明者张晴龙 申请人:张晴龙