专利名称：：一种依达拉奉脂微球制剂及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种脂微球制剂，具体涉及一种依达拉奉脂微球制剂及其制备方法，属于医药
技术领域：
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背景技术：
：依达拉奉是由苯肼和丁酮酰胺合成的吡唑啉酮类化合物，具有强大的自由基清除作用，可有效减轻脑梗塞后脑组织损伤造成的神经症状和功能障碍，已于2001年在日本上市，临床上通过抑制脑水肿、脑梗塞、神经症状、迟发性神经细胞死亡等缺血性脑血管障碍的产生及进程恶化，从而发挥其脑保护作用，主要用于治疗急性脑梗塞，可减轻神经功能损害，降低病残率，促进康复，具有疗效高和副作用小的特点，依达拉奉是一种脑保护剂(自由基清除剂)。临床研究提示N-乙酰门冬氨酸(NAA)是特异性的存活神经细胞的标志，脑梗塞发病初期含量急剧减少。脑梗塞急性期患者给予依达拉奉，可抑制梗塞周围局部脑血流量的减少，使发病后第28天脑中NAA含量较甘油对照组明显升高。临床前研究提示，大鼠在缺血/缺血再灌注后静脉给予依达拉奉，可阻止脑水肿和脑梗塞的进展，并缓解所伴随的神经症状，抑制迟发性神经元死亡。机理研究提示，依达拉奉可清除自由基，抑制脂质过氧化，从而抑制脑细胞、血管内皮细胞、神经细胞的氧化损伤固体状态的依达拉奉比较稳定，但其水溶液易发生氧化还原反应而降解，目前，临床应用的依达拉奉制剂为水针剂，处方中加入了L-半胱氨酸和亚硫酸氢钠作为抗氧剂，制备过程中充入氮气，有效地提高了稳定性，但长期放置质量不能保证，仍然会发生降解。中国专利CN1241565C、CN100358520C和CN101288650A分别描述了依达拉奉冻干粉针剂的制备方法，主要在溶解性上进行了改进，而且加入了一些稳定剂，但其稳定性仍然不能得到保证，很难达到有效期的质量要求。
发明内容针对现有技术中依达拉奉注射剂存在的缺陷，本发明的目的在于提供一种新的依达拉奉注射剂，以解决现有的依达拉奉注射剂稳定性差的问题。本发明解决的技术方案如下本发明提供一种依达拉奉脂微球制剂，其以依达拉奉为活性成分，包含乳化剂、抗氧剂、注射用大豆油、注射用水制备而成的脂微球注射制剂，其特征在于所述的乳化剂为大豆磷脂和泊洛沙姆188，且大豆磷脂:泊洛沙姆188重量比为(15):1，优选(1.53):1。其中，上述所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于按重量百分比，依达拉奉0.5%-5%，乳化剂1%-20%，抗氧剂0.5%-3%，注射用大豆油1%-50%，注射用水20%-80%。优选地，上述所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于按重量百分比，依达拉奉1%-3%，乳化剂5%-15%,抗氧剂1%-2%，注射用大豆油5%-40%，注射用水25%-70%。本发明上述所述的依达拉奉脂微球制剂，其中根据需要还可以含有助乳化剂，例如还可以包含重量百分比为0.1%-10%的助乳化剂。所述的助乳化剂没有特别限制，可以是本领域中常规的助乳化剂，例如优选助乳化剂为C1Q-C2Q的脂肪酸或其生理上可接受盐中的一种或一种以上，其中所述脂肪酸优选为硬脂酸、油酸、亚油酸、棕榈酸、亚油精酸或十四垸酸。所述的盐，例如可以为碱金属盐，如钠盐、钾盐等，或者为碱土金属盐，例如钙盐、镁盐等。本发明上述所述的依达拉奉脂微球制剂，其中所述的抗氧剂，没有特别限制，可以为本领域中常规的抗氧剂，例如可以为亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、甲醛合亚硫酸氢钠、抗坏血酸、硫脲、硫代硫酸钠、维生素E、没食子酸丙酯、特丁基对苯二酚、抗坏血酸棕榈酸酯或叔丁基对羟基茴香醚中的一种或一种以上。作为本发明一个最优选的实施方式，其中所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于按重量份，依达拉奉10份，大豆磷脂50份，泊洛沙姆18820份，亚油酸8份，亚硫酸氢钠15份，注射用大豆油180份，注射用水1500份。作为本发明另一个最优选的实施方式，其中所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于按重量份，依达拉奉15份，大豆磷脂120份，泊洛沙姆18850份，棕榈酸20份，抗坏血酸棕榈酸酯60份，注射用大豆油400份，注射用水2500份。作为本发明第三个最优选的实施方式，其中所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于按重量份，依达拉奉30份，大豆磷脂100份，泊洛沙姆18860份，油酸35份，甲醛合亚硫酸氢钠40份，注射用大豆油600份，注射用水5000份。本发明上述所述的依达拉奉脂微球制剂，优选其通过包含如下步骤的方法制备而成脂微球注射制剂(1)将依达拉奉，或者将依达拉奉和抗氧剂，溶于乙醇后，加入注射用大豆油中，得油相；(2)将乳化剂、助乳化剂和抗氧剂，或者将乳化剂和助乳化剂，溶于注射用水中，得水相；(3)将油相和水相混合，搅拌乳匀成脂微球。作为本发明另一发明目的，还提供一种上述所述依达拉奉脂微球制剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤(1)将依达拉奉，或者将依达拉奉和抗氧剂，溶于乙醇后，加入注射用大豆油中，得油相；(2)将乳化剂、助乳化剂和抗氧剂，或者将乳化剂和助乳化剂，溶于注射用水中，得水相；(3)将油相和水相混合，搅拌乳匀成脂微球，过滤，充氮，灌封，灭菌，即得依达拉奉脂微球注射制剂。本发明令人意外地发现，以特定的大豆磷脂和泊洛沙姆188混合乳化剂作为乳化剂，以注射用大豆油作为油相溶剂，包含药剂上常规的抗氧剂，制备而成的依达拉奉脂微球注射制剂，不仅工艺简单、成本低、易于工业化生产，而且所得注射剂相对于现有的依达拉奉注射剂，具有明显改善的稳定性。本发明提供的依达拉奉脂微球制剂，进行稳定性试验考察，在高温6(TC、光照4500Lx条件下放置10天，各项检测指标均无明显变化；在高温40。C、相对湿度75%±5%条件下加速试验6个月，各项检测指标没有明显变化；在高温25°C、相对湿度60°/。±10°/。条件下长期试验18个月，各项检测指标没有明显变化。本发明提供的依达拉奉脂微球制剂，进行急性毒性试验、异常毒性试验和热源检査，均符合规定，安全性得到证明。本发明提供的依达拉奉脂微球制剂及其制备方法，突出的优点表现在(1)依达拉奉被包裹于脂微球内，大大提高了制剂的稳定性，保证了产品质量；(2)药物载体脂微球体内降解、无毒性和无免疫原性，而且可以提高药物治疗指数、降低药物毒性和减少药物副作用；(3)采用常规的工艺设备，可工业规模、高效率生产，产品质量稳定，是一种独特和普遍适用的，低成本的工业化制备方法。具体实施例方式以下通过实施例进一步说明本发明，但不应理解为对本发明的限制。实施例1依达拉奉脂微球制剂的制备处方(1000瓶)依达拉奉10g大豆磷脂50泊洛沙姆18820g亚油酸8g亚硫酸氢钠15g注射用大豆油180g注射用水1500g制备工艺(1)将10g依达拉奉溶于30ml乙醇，加入180g大豆油中，得油相；(2)将50g大豆磷脂、20g泊洛沙姆188、8g亚油酸、15g亚硫酸氢钠溶于水中，得水相；(3)将油相和水相混合，转移至组织捣碎机中，转速10000r/min，高速搅拌10分钟，微孔滤膜过滤，充氮，灌封，115'C高压灭菌，即得。实施例2依达拉奉脂微球制剂的制备处方(IOOO瓶)依达拉奉!5g大豆磷脂120g泊洛沙姆18850g棕榈酸20g抗坏血酸棕榈酸酯60g注射用大豆油400g注射用水2500g制备工艺(1)将15g依达拉奉和60g抗坏血酸棕榈酸酯溶于100ml乙醇，加入400g大豆油中，得油相；(2)将120g大豆磷脂、50g泊洛沙姆188、20g棕榈酸溶于水中，得水相；(3)将油相和水相混合，转移至组织捣碎机中，转速12000r/min，高速搅拌30分钟，微孔滤膜过滤，充氮，灌封，115'C高压灭菌，即得。实施例3依达拉奉脂微球制剂的制备处方(IOOO瓶)依达拉奉30g大豆磷脂100g泊洛沙姆18860g油酸35g甲醛合亚硫酸氢钠40g注射用大豆油600g注射用水5000g制备工艺(1)将30g依达拉奉溶于100ml乙醇，加入600g大豆油中，得油相；(2)将100g大豆磷脂、60g泊洛沙姆188、35g油酸、40g甲醛合亚硫酸氢钠溶于水中，得水相；(3)将油相和水相混合，转移至组织捣碎机中，转速8000r/min，高速搅拌20分钟，微孔滤膜过滤，充氮，灌封，115。C高压灭菌，即得。试验例l粒径的测定对实施例l-3制备的脂微球制剂的粒径进行检测，具体方法为取本发明制备的脂微球注射液5ml，加入至300ml水中，用H3LA920激光散射粒度仪进行检测。结果，70%的粒径小于150nm，90%的粒径小于200nm，符合静脉注射用脂微球制剂的相关要求。试验例2包封率的测定将实施例1-3制备的脂微球制剂高速离心，5000r/min，离心30min，取清液lml，用乙醇溶解，以高效液相色谱法测定马来酸桂哌齐特含量，确定被包封的含量M,，脂微球制剂中马来酸桂哌齐特总量为M。，包封率N为N:M,/M()X1000/0结果，本发明制备的脂微球制剂包封率均大于98%。试验例3安全性试验取实施例1-3制备的脂微球制剂，分别按中国药典2005版方法进行无菌和热源检査，结果均符合规定。取本发明制备的脂微球制剂，分别进行过敏性和溶血性试验，结果无过敏性，无溶血性，安全性得到保障。试验例4稳定性研究将以上实施例1-3制备的样品与上市的依达拉奉注射液(南京先声东元药业有限公司生产，批号20081009)在高温60'C、光照4500Lx条件下放置10天进行影响因素试验考察，结果见表l;在高温4(TC、相对湿度75%±5%条件下6个月，进行加速试验考察，结果见表2;在高温25。C、相对湿度60%±10%条件下18个月，进行长期试验考察，检测各项质量指标的变化，结果见表3。表l影响因素结果时间样品性状酸度澄明度有关物质(%)(%)0天实施例1实施例2实施例3上市制剂乳白色澄明溶液乳白色澄明溶液乳白色澄明溶液无色澄明溶液5.3符合规定0.05100.25.4符合规定0.04100.95.2符合规定0.0599.95.3符合规定0.0898.7实施例110天实施例2高温60'C实施例3上市制剂乳白色澄明溶液乳白色澄明溶液乳白色澄明溶液无色澄明溶液2符合规定0.05100.0.3符合规定0.05100,8.2符合规定0.0699.8.0符合规定0.11服3实施例1IO天实施例2光照4500Lx实施例3上市制剂乳白色澄明溶液乳白色澄明溶液乳白色澄明溶液无色澄明溶液符合规定符合规定符合规定4.9符合规定0.060.060.050.1299.9100.799.898.2表2加速试验结果时间样品性状酸度澄明度有关物质(%)(%)1月实施例1乳白色澄明溶液.3符合规定0.05100.1实施例2乳白色澄明溶5,3符合规定0.05100.8液实施例3乳白色澄明溶、)汰5.2符合规定0.0699.9上市制剂欣无色澄明溶液5.1符合规定0.1098.5实施例1乳白色澄明溶5.2符合规定0.06100.1液实施例2乳白色澄明溶5.3符合规定0.05100.72月液实施例3乳白色澄明溶5.1符合规定0.0699.8液上市制剂无色澄明溶液4,9符合规定0.1298.33月实施例1实施例2实施例3上市制剂乳白色澄明溶液乳白色澄明溶液乳白色澄明溶液无色澄明溶液5.2符合规定0.07100.05.2符合规定0.06100.65.1符合规定0.0799.64.7不符合规0.1598.0实施例1乳白色澄明溶、)杰5.2符合规定0.0899.9实施例26，实施例3放乳白色澄明溶液乳白色澄明溶5.35.2符合规定符合规定0.060.08100.599.4上市制剂欣无色澄明溶液4.5不符合规定0.1897.4表3长期试验结果时间样品性状酸度澄明度有关物质(%)含量(%)3月实施例1实施例2实施例3上市制剂乳白色澄明溶液乳白色澄明溶液乳白色澄明溶液无色澄明溶液5.35.35.25.1符合规定符合规定符合规定符合规定0.050.050.060.10100.1100.899.998.46月实施例1实施例2实施例3上市制剂乳白色澄明溶液乳白色澄明溶液乳白色澄明溶液无色澄明溶液5.25.14.9符合规定符合规定符合规定符合规定0.060.050.060.12100.1100.799.898.19月实施例1实施例2乳白色澄明溶液乳白色澄明溶液5.25.2符合规定符合规定0.060.06100.0100.5<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>由以上结果发现加速3月、6月，长期12月、18月时上市的依达拉奉注射液澄明度不符合规定，pH值下降较大，含量降低明显，有关物质升高；而本发明制备的样品外观性状没有明显变化，为乳白色澄明溶液，澄明度、pH值、含量和有关物质也没有明显的变化。说明本发明制备的样品长期贮存质量稳定性更好。对比例1依达拉奉脂微球制剂的制备处方(1000瓶)依达拉奉10g蛋黄磷脂250g亚油酸8g亚硫酸氢钠15g注射用大豆油180g注射用水1500g制备工艺同实施例1,结果制得的脂微球制剂包封率较低，按试验例2方法检测，仅为75%;脂微球粒径按试验例1方法进行检测，粒径为600-1000nm，分布不均匀，不符合静脉注射的相关要求。对比例2依达拉奉脂微球制剂的制备处方(1000瓶):依达拉奉氢化蛋黄磷月1吐温80棕榈酸抗坏血酸棕榈酸酯15g120g50g20g60g400g2500g注射用大豆油注射用水制备工艺同实施例2，结果制得的脂微球制剂包封率较低，按试验例2方法检测，仅为68%;进行试验例4稳定性试验，含量明显降低，有关物质升高，pH值变化较大，澄明度不符合规定；脂微球粒径按试验例1方法进行检测，粒径为400-800nm，分布不均匀，不符合静脉注射的相关要求。对比例3依达拉奉脂微球制剂的制备处方(1000瓶)依达拉奉30g大豆磷脂160g油酸35g甲醛合亚硫酸氢钠40g注射用大豆油600g注射用水5000g制备工艺同实施例3，结果制得的脂微球制剂包封率较低，按试验例2方法检测，仅为73%;进行试验例4稳定性试验，含量明显降低，有关物质升高，pH值变化较大，澄明度不符合规定。已经根据优选实施例对本发明作了描述。应当理解的是前面的描述和实施例仅仅为了举例说明本发明而已。在不偏离本发明的精神和范围的前提下，本领域技术人员可以设计出本发明的多种替换方案和改进方案，其均应被理解为在本发明的保护范围之内。权利要求1、一种依达拉奉脂微球制剂，其以依达拉奉为活性成分，包含乳化剂、抗氧剂、注射用大豆油、注射用水制备而成的脂微球注射制剂，其特征在于所述的乳化剂为大豆磷脂和泊洛沙姆188，且大豆磷脂∶泊洛沙姆188重量比为(1～5)∶1，优选(1.5～3)∶1。2、根据权利要求l所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于按重量百分比，依达拉奉0.5%-5%，乳化剂1°/。-20%，抗氧剂0.5%-3%，注射用大豆油1%-50%，注射用水20%-80%。3、根据权利要求l-2所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于按重量百分比，依达拉奉1%-3%，乳化剂5%-15%，抗氧剂1%-2%，注射用大豆油5%-40%，注射用水25%-70%。4、根据权利要求l-3所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于还包含重量百分比为0.1%-10%的助乳化剂，优选助乳化剂为C,o-C2o的脂肪酸或其生理上可接受盐中的一种或几种，所述脂肪酸优选为硬脂酸、油酸、亚油酸、棕榈酸、亚油精酸或十四烷酸。5、根据权利要求l-4所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于所述的抗氧剂为亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、甲醛合亚硫酸氢钠、抗坏血酸、硫脲、硫代硫酸钠、维生素E、没食子酸丙酯、特丁基对苯二酚、抗坏血酸棕榈酸酯或叔丁基对羟基茴香醚中的一种或多种。6、根据权利要求l-5所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于按重量份，依达拉奉10份，大豆磷脂50份，泊洛沙姆18820份，亚油酸8份，亚硫酸氢钠15份，注射用大豆油180份，注射用水1500份。7、根据权利要求l-5所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于按重量份，依达拉奉15份，大豆磷脂120份，泊洛沙姆18850份，棕榈酸20份，抗坏血酸棕榈酸酯60份，注射用大豆油400份，注射用水2500份。8、根据权利要求l-5所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于按重量份，依达拉奉30份，大豆磷脂100份，泊洛沙姆18860份，油酸35份，甲醛合亚硫酸氢钠40份，注射用大豆油600份，注射用水5000份。9、根据权利要求l-8所述的依达拉奉脂微球制剂，其特征在于通过包含如下步骤的方法制备而成脂微球注射制剂(1)将依达拉奉，或者将依达拉奉和抗氧剂，溶于乙醇后，加入注射用大豆油中，得油相；(2)将乳化剂、助乳化剂和抗氧剂，或者将乳化剂和助乳化剂，溶于注射用水中，得水相；(3)将油相和水相混合，搅拌乳匀成脂微球。10、一种权利要求l-9所述依达拉奉脂微球制剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤(1)将依达拉奉，或者将依达拉奉和抗氧剂，溶于乙醇后，加入注射用大豆油中，得油相；(2)将乳化剂、助乳化剂和抗氧剂，或者将乳化剂和助乳化剂，溶于注射用水中，得水相；(3)将油相和水相混合，搅拌乳匀成脂微球，过滤，充氮，灌封，灭菌，即得依达拉奉脂微球注射制剂。全文摘要本发明涉及一种依达拉奉脂微球制剂及其制备方法。所述的依达拉奉脂微球制剂，以特定比例的大豆磷脂和泊洛沙姆188混合乳化剂作为乳化剂，以注射用大豆油作为油相溶剂，包含药剂上常规的抗氧剂，制备而成的依达拉奉脂微球注射制剂，不仅工艺简单、成本低、易于工业化生产，而且所得注射剂相对于现有的依达拉奉注射剂，具有明显改善的稳定性。文档编号A61K47/44GK101536979SQ200910131200公开日2009年9月23日申请日期2009年4月8日优先权日2009年4月8日发明者邓菊娟申请人:邓菊娟