巯基氮杂环烷酰胺醇取代的培南衍生物的制作方法

专利名称：：巯基氮杂环烷酰胺醇取代的培南衍生物的制作方法
技术领域：
：本发明属于医药
技术领域：
，具体涉及巯基氮杂环烷酰胺醇取代的培南衍生物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯或其异构体，这些化合物的制备方法，含有这些化合物的药物组合物，以及这些化合物在用于制备治疗和/或预防感染性疾病的药物中的用途。2
背景技术：
：培南类抗菌素是七十年代发展起来的一类P-内酰胺类抗生素。因其抗菌谱广，抗菌活性强，并对卩-内酰胺酶稳定，而备受关注。其结构特点是，青霉烷母核1位的硫被碳取代，2位具有双键，复合了青霉素的五元环和头孢菌素的共轭双键的结构。目前上市的该类药品有亚胺培南、帕尼培南、美罗培南、厄他培南、比阿培南、多尼培南等。亚胺培南是由Merck开发的，单独用药时，在体内易受肾脱氢肽酶(DHP-I)的降解而失去抗菌活性，需和DHP-I抑制剂西司他丁联用，对革兰氏阳性菌有较好的抗菌活性；帕尼培南是第二个上市的培南类抗生素，对DHP-I亦不稳定，需联用倍他米隆；美罗培南是第一个可单独用药的1|3-甲基培南类抗生素，对革兰氏阴性菌具有较好的抗菌活性；厄他培南钠是由Merck开发的长效注射用培南类抗生素，对青霉素结合蛋白(PBP-2和PBP-3)具有高亲和力，抗革兰氏阳性菌的活性略低于亚胺培南，抗革兰阴性菌的活性强于亚胺培南；比阿培南是由惠氏开发的1P-甲基培南类抗生素，对P-内酰胺酶稳定，对革兰阳性菌的活性与亚胺培南相似，对革兰阴性菌的活性强于亚胺培南；多尼培南对革兰阳性菌的抑菌作用高于美罗培南，对革兰阴性菌的作用优于亚胺培南，对亚胺培南耐药菌也有效，对含丝氨酸位点的DHP-I稳定，主要用于泌尿系统和呼吸系统严重感染。培南类抗生素由于临床应用的增加，其细菌耐药性不断增加，且目前上市的培南类抗生素临床上只能注射给药，不能满足临床需要。因此，急需研发具有较好的抗菌活性，并且具有良好的化学稳定性和DHP-I稳定性的培南类抗生素。3
发明内容本发明人对培南类抗生素进行大量的研究发现，与以往的抗生素相比，本发明化合物抗菌活性更强，用于治疗和/或预防感染性疾病十分有效。本发明提供了通式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯或其异构体<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中，W代表氢原子或低级烷基；W代表羧基，一COOW或易水解的酯，所述的RJ代表羧基保护基;R3、R4、RS分别独立的代表氢原子或低级烷基；RM戈表氢原子或羟基保护基；n代表O、1或2。优选的化合物为其中，R'代表氢原子，甲基或乙基；f代表羧基，一COO^或易水解的酯，所述的W代表羧基保护基;R3、R4、RS分别独立的代表氢原子，甲基，乙基或丙基；R6代表氢原子或羟基保护基；n代表0或1。进一步优选的化合物为其中，111代表氢原子或甲基；W代表羧基，一COOI^或易水解的酯，所述的W代表羧基保护基;R3、R4、RS分别独立的代表氢原子，甲基或乙基；RS代表氢原子或羟基保护基；n代表0或1。更进一步优选的化合物为其中，W代表甲基；W代表羧基，一COOW或易水解的酯，所述的W代表羧基保护基;R3、R4、RS分别独立的代表氢原子或甲基；RS代表氢原子或羟基保护基；n代表0或1。表l本发明的部分化合物<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>更进一步优选的化合物化学名称(4i,5&65)-3-[l-[N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基]-氮杂环丁烷-3-基]硫基-6-[(li)-l-羟乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮杂双环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸，简称化合物1，结构式如下化学名称(4凡5&65)-3-[(35)-l-[N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基]-吡咯烷-3-基]硫基-6-[(liH-羟乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮杂双环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸，简称化合物2，结构式如下本发明所述"低级垸基"为CL6直链或支链的烷基，如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、新戊基、己基等。本发明所述"羧基保护基"指常规用于取代羧酸酸性质子的保护基团。此基团的实例包括甲基、甲氧基甲基、甲硫甲基、四氢吡喃基、四氢呋喃基、甲氧乙基甲基、烯丙基、节氧甲基、苯甲酰甲基、对溴苯甲酰甲基、a-甲基苯甲酰甲基、对甲氧基苯甲酰甲基、二酰基甲基、N-邻苯二甲酰亚胺基甲基、乙基、2,2,2-三氯乙基、2-卤代乙基、①-氯代烷基、2-(三甲基甲硅烷基)乙基、2-甲硫基乙基、2-(对硝基苯硫基)乙基、2-(对甲苯硫基)乙基、l-甲基-l-苯乙基、叔丁基、环戊基、环己基、二(邻硝基苯基)甲基、9-芴基甲基、2-(9,10-二氧代)芴基甲基、5-二苯硫基、苄基、2,4,6-三甲基苄基、对溴苄基、邻硝基苄基、对硝基苄基、对甲氧基苄基、胡椒基、4-吡啶甲基、三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、异丙基二甲基甲硅烷基、二苯基甲基、苯基二甲基甲硅烷基、S-叔丁基、S-苯基、S-2-吡據基、N-羟基哌啶基、N-琥珀酰亚胺基、N-邻苯二甲酰亚胺基、N-苯并三唑基、O-酰基肟、2,4-二硝基苯硫基、2-烷基-l,3-噁唑啉、4-烷基-5-氧代-l,3-噁哇烷、5-垸基-4-氧代-l,3-二噁烷、三乙基锡垸基、三正丁基锡烷基；N,N'-二异丙基酰肼等。本发明所述"羟基保护基"选自酰基、酯类、醚类等。酰基特别选自低级烷酰基，如甲酰基、乙酰基、异丁酰基、苯甲酰基甲酰基、氯乙酰基、二氯乙酰基、三氯乙酰基、三氟乙酰基、甲氧基乙酰基、苯氧基乙酰基、苯基乙酰基、对苯基乙酰基、二苯基乙酰基、4-戊烯酰基、4-氧代戊酰基、新戊酰基、丁烯酰基、单琥珀酰基、苯甲酰基、对苯基苯甲酰基等；酯类即垸氧基羰基，如甲氧基羰基、乙氧基羰基、异丁氧基羰基、甲氧基甲基羰基、9-芴基甲氧基羰基、乙烯氧基羰基、烯丙氧基羰基、对硝基苯氧基羰基、苄氧基羰基、对甲氧基苄氧基羰基、对硝基苄氧基羰基、磺酰基、甲磺酰基、苯磺酰基、甲苯磺酰基等；醚类保护基，如甲基、取代甲基，优选为低级烷氧基甲基、特别是甲氧基甲基(MOM)、甲硫基甲基、对硝基苄氧基甲基、愈创木酚甲基，低级垸氧基-低级烷氧基甲基，特别优选为2-甲氧基乙氧基甲基(MEM)、2,2,2-三氟乙氧基甲基、四氢吡喃类、3-溴四氢吡喃类，取代乙基，如1-乙氧基乙基、l-(2-氯乙氧基)乙基、l-[2-(三甲基甲硅垸基)乙氧基]乙基，取代苯基醚类，如对氯苯基、对甲氧基苯基、对硝基苯基等，甲硅烷基醚类，如三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅垸基、三异丙基甲硅垸基、二甲基异丙基甲硅烷基等。本发明还提供了上述化合物的制备方法，但不仅限于以下方法，反应方程式如下AcS式5化合物反应步骤步骤l式l化合物的制备于干燥的反应瓶中，加入原料1，二氯甲烷，然后滴加三乙胺，搅拌溶解后，加氯乙酰氯的二氯甲垸溶液，搅拌反应，反应毕，停止反应，过滤除掉固体，滤液分别用稀碱液、稀酸液、水洗涤，干燥后减压浓縮，得式1化合物。步骤2式2化合物的制备于干燥反应瓶中将式1化合物溶于干燥DMF(二甲基甲酰胺)中，然后加入原料2，加毕，低温加入氢化钠，保温反应，然后升温搅拌反应，停止反应，冷至室温后加入乙酸乙酯和水萃取，水层用乙酸乙酯提取两次，合并有机层，用饱和的NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠7干燥，减压回收溶剂，得式2化合物。步骤3式3化合物的制备于干燥的反应瓶中加入式2化合物，用四氢呋喃溶解，加入甲醇钠/甲醇溶液，升温，搅拌反应，分出有机相，经水洗、干燥、浓缩，剩余物用乙酸乙酯-乙醇重结晶，得式3化合物。步骤4式4化合物的制备于干燥反应瓶中，加入原料3的乙腈溶液冷却，加入二异丙基乙胺和式3化合物的乙腈溶液，低温搅拌，反应完毕后，加乙酸乙酯稀释，依次用水、饱和盐水洗，有机层干燥、浓縮，得式4化合物。步骤5式5化合物的制备将式4化合物溶于THF和水的混合液中，加入钯-炭(Pd-C)，升温氢压下搅拌反应，滤除钯炭，滤液中加入THF(四氢呋喃)，分层，收集水层，再向THF中加入水溶液，静置，分出水层，重复操作，水相合并，低温慢慢滴入乙醇，降温搅拌，过滤，滤饼用水-乙醇重结晶，得白色晶体，即式5化合物。以上反应方程式中的R1、R3、R4、R5、R6、R7、n如前文所述。本发明上述任一化合物药学上可接受的盐包括乙酸盐、甲磺酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐，盐酸盐、氢溴酸盐、硝酸盐、硫酸盐、磷酸盐，钠盐、钾盐、钙盐、镁盐、锌盐；优选甲磺酸盐、盐酸盐和钠盐。本发明要求保护的化合物易水解的酯，包括垸酰氧垸基酯，例如乙酰氧甲酯、丙酰氧甲酯、丁酰氧甲酯、异丙基甲酰氧甲酯、叔丁基甲酰氧甲酯、新戊基甲酰氧甲酯、异丁基甲酰氧甲酯、新戊乙酰氧甲酯、辛酰氧甲酯、癸酰氧甲酯等；垸氧羰氧基烷基酯，例如甲氧基甲酰氧甲酯、乙氧基甲酰氧甲酯、异丙氧基甲酰氧-l-乙酯、己氧基甲酰氧-l-乙酯、辛氧基甲酰氧-l-乙酯、癸氧基甲酰氧-l-乙酯、十二垸氧基甲酰氧-卜乙酯等；垸氧基甲酯，例如甲氧甲酯、l-异丙氧甲酯等；烷酰氨基甲酯，例如甲酰氨基甲酯、乙酰氨基甲酯等；环烷酰氧烷基酯，例如环己垸基甲酰氧甲酯、环己垸基甲酰氧-l-乙酯、l-甲基-环己垸基甲酰氧-l-乙酯、4-甲基-环己垸基甲酰氧甲酯等；环垸氧基酰氧烷基酯，例如环戊烷氧基甲酰氧-l-乙酯、环己垸氧基甲酰氧-1-乙酯等;(5-甲基-2-氧代-1,3-间二氧杂环戊烯-4-萄甲基酯，2-[(2-甲基丙氧基滞基]-2-戊烯酯等。优选为新戊基甲酰氧甲酯、丙酰氧甲基酯、丁酰氧甲基酯、叔丁基甲酰氧甲基酯、异丙氧甲酰氧甲基酯、异丙氧甲酰氧-l-乙基酯、环己垸氧甲酰氧-1-乙基酯、(5-甲基-2-氧代-1，3-间二氧杂环戊烯-4-基)甲基酯等。本发明所述异构体是指其所有差向立体异构、非对映异构。当一个键用一个楔表示时，这表明在三维上该键将从纸面出来，而当一个键是阴影时，这表明在三维上该键将返入纸面中。式(I)化合物具有许多立体中心，例如在4-位上、在5-位上、在6-位上等。本发明进一歩要求保护包括上面所述的任一化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯或其异构体与其它药用活性成分的药物组合物，如西司他丁及其钠盐、倍他米隆等。本发明进一步要求保护包括上面所述的任一化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯或其异构体与一种或多种药用载体和/或稀释剂的药物组合物，为临床上或药学上可接受的任一剂型，优选为口服制剂或注射剂。其中含有生理有效量的通式(I)所示的化合物0.05g5g，可以为0.05g、0.1g、0.125g、0.2g、0.25g、0.3g、0.4g、0.5g、0.6g、0.75g、1g、1.25g、1.5g、1.75g、2g、2.5g、3g、4g、5g等。本发明任一化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯或其异构体，可以口服或肠胃外给药等方式施用于需要这种治疗的患者。用于肠胃外给药时，可制成注射剂。注射剂系指药物制成的供注入体内的溶液、乳液或混悬液及供临用前配制或稀释成溶液或混悬液的粉末或浓溶液的无菌制剂，注射剂可分为注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液。注射液系指药物制成的供注射入体内用的无菌溶液型注射液、乳液型注射液或混悬型注射液，可用于肌内注射、静脉注射、静脉滴注等；其规格有lmL、2mL、5mL、10mL、20mL、50mL、脂mL、200mL、250mL、500mL等，其中供静脉滴注用的大体积(一般不小于100mL)注射液也称静脉输液。注射用无菌粉末系指药物制成的供临用前用适宜的无菌溶液配制成澄清溶液或均匀混悬液的无菌粉末或无菌块状物，可用适宜的注射用溶剂配制后注射，也可用静脉输液配制后静脉滴注；无菌粉末用溶媒结晶法、喷雾干燥法或冷冻干燥法等制得。注射用浓溶液系指药物制成的供临用前稀释供静脉滴注用的无菌浓溶液。制成注射剂时，可采用现有制药领域中的常规方法生产，可选用水性溶剂或非水性溶剂。最常用的水性溶剂为注射用水，也可用0.9%氯化钠溶液或其他适宜的水溶液；常用的非水性溶剂为植物油，主要为供注射用大豆油，其他还有乙醇、丙二醇、聚乙二醇等的水溶液。配制注射剂时，可以不加入附加剂，也可根据药物的性质加入适宜的附加剂，如渗透压调节剂、pH值调节剂、增溶剂、填充剂、抗氧剂、抑菌剂、乳化剂、助悬剂等。常用的渗透压调节剂包括氯化钠、葡萄糖、氯化钾、氯化镁、氯化钙、山梨醇等，优选氯化钠或葡萄糖；常用的pH值调节剂包括醋酸-醋酸钠、乳酸、枸橼酸-枸橼酸钠、碳酸氢钠-碳酸钠等；常用的增溶剂包括聚山梨酯80、丙二醇、卵磷脂、聚氧乙烯蓖麻油等；常用的填充剂包括乳糖、甘露醇、山梨醇、右旋糖酐等；常用的抗氧剂有亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠等；常用抑菌剂为苯酚、甲酚、三氯叔丁醇等。注射剂常用容器有玻璃安瓿、玻璃瓶、塑料安瓿、塑料瓶等。用于口服时，可制成常规的固体制剂，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂等；也可制成口服液体制剂，如口服溶液剂、口服混悬剂、糖浆剂等。片剂系指药物与适宜的辅料混匀压制而成的圆片状或异形片状的固体制剂，以口服普通片为主，另有含片、舌下片、口腔贴片、咀嚼片、分散片、可溶片、泡腾片、缓释片、控释片与肠溶片等。胶囊剂系指药物或加有辅料充填于空心胶囊或密封于软质囊材中的固体制剂，依据其溶解与释放特性，可分为硬胶囊(通称为胶囊)、软胶囊(胶丸)、缓释胶囊、控释胶囊和肠溶胶囊等。丸剂系指药物与适宜的辅料均匀混合，以适当方法制成的球状或类球状固体制剂，包括滴丸、糖丸、小丸等。颗粒剂系指药物与适宜的辅料制成具有一定粒度的干燥颗粒状制剂，可分为可溶颗粒(通称为颗粒)、混悬颗粒、泡腾颗粒、肠溶颗粒、缓释颗粒和控释颗粒等。口服溶液剂系指药物溶解于适宜溶剂中制成供口服的澄清液体制剂。口服混悬剂系指难溶性固体药物，分散在液体介质中，制成供口服的混悬液体制剂，也包括干混悬剂或浓混悬液。糖浆剂系指含有药物的浓蔗糖水溶液。制成口服制剂时，可以加入适宜的填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。常用填充剂包括淀粉、糖粉、磷酸钙、硫酸钙二水物、糊精、微晶纤维素、乳糖、预胶化淀粉、甘露醇等；常用粘合剂包括羧甲基纤维素钠、PVP-K30、羟丙基纤维素、淀粉浆、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙甲纤维素、胶化淀粉等；常用崩解剂包括干淀粉、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素等；常用润滑剂包括硬脂酸镁、滑石粉、十二烷基硫酸钠、微粉硅胶等。本发明还提供了巯基氮杂环烷酰胺醇取代的培南衍生物在制备用于治疗和/或预防感染性疾病的药物中的用途。本发明培南类抗菌素对革兰阳性和阴性、需氧和厌氧菌以及医院临床病原菌均有较好的抗菌活性，可用于治疗和/或预防由病原微生物引起的各种疾病。通常，已经发现培南类抗菌素对温血动物来说是无毒的，而这个通则也适用于本发明化合物。将本发明的优选化合物以能预防细菌感染所需要的过量剂量对小鼠给药，未观察到由本发明化合物所引起的明显的中毒病兆或副作用。本发明的巯基氮杂环烷酰胺醇取代的培南衍生物与最接近的现有技术相比，具有以下优点(1)本发明化合物对PBPS亲和力强，抗菌谱广，抗菌活性高，对革兰阳性和阴性、需氧和厌氧菌以及医院临床病原菌均有较好的抗菌活性；(2)本发明化合物低毒性，能被安全的用于治疗和/或预防各种哺乳动物(包括人类)由敏感菌所引起的各种疾病；(3)本发明化合物对P-内酰胺酶和人肾DHP-I稳定，可以单药给药；(4)本发明化合物制备工艺简单，药品纯度高、收率高、质量稳定，易于进行大规模工业生产。以下通过体外抗菌实验进一步阐述本发明的巯基氮杂环烷酰胺醇取代的培南衍生物的有益效果，但不应将此理解为本发明的培南类抗菌素仅具有下列有益效果。实验例本发明化合物的体外抗菌活性供试菌种以下均为临床分离菌株，购于公众机构。革兰阳性菌甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、甲氧西林敏感表皮葡萄球菌(MSSE)、耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)、青霉素敏感肿炎链球菌(PSSP)、青霉素耐药肺炎链球菌(PRSP)、化脓链球菌、粪肠球菌;革兰阴性菌流感嗜血杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯氏杆菌、奇异变形杆菌、阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌；革兰阴性厌氧菌脆弱拟杆菌。供试品本发明优选化合物1和化合物2，自制，其化学名称和结构式如前文所述；亚胺培南、注射用美罗培南市购。实验方法琼脂稀释法，参考《药理试验方法学》P1659-1660，人民卫生出版社，主编徐叔云等，版次1982年8月第1版2002年1月第3版第5次印刷。实验结果和结论表2本发明化合物对临床分离革兰阳性菌的抗菌活性苗性_抗菌活性MIC90(吗/mL)_B*亚胺培南美罗培南化合物l化合物2~~MSSA0.0630.1250,063MRSA646488MSSE0.0310.250扁0.063MRSE12864168PSSP0.0160.0310.0080.008PRSP0.510扁0.063化脓链球菌0.0160.0630.0160.016粪肠球菌41622由表2实验结果可见，与亚胺培南和美罗培南相比，本发明优选化合物1和化合物2对临床分离的供试革兰阳性菌均有很好的抗菌活性。_表3本发明化合物对临床分离革兰阴性菌的抗菌活性_^抗菌活性MIC卯(吗/mL),_亚胺培南美罗培南化合物l化合物2流感嗜血杆菌§^^T^0.25大肠埃希菌0.250.0310.0160.016肺炎克雷伯氏杆菌10.0630.0310.031奇异变形杆菌40.250.250.125阴沟肠杆菌10.0630.0630.031铜绿假单胞菌8424脆弱拟杆菌8421由表3实验结果可见，与亚胺培南和美罗培南相比，本发明优选化合物1和化合物2对临床分离的供试革兰阴性菌，包括革兰阴性厌氧菌具有很好的抗菌活性。上述实验结果表明，本发明化合物对革兰阳性菌、阴性菌及其耐药菌和厌氧菌均具有强效抗菌作用，同最接近的现有技术相比，抗菌活性相当或更好，且抗菌谱广，具有很好的临床应用潜力。具体实施例方式以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。以下实施例中各剂型的辅料可以用药学上可接受的辅料替换，或者减少、增加。实施例12-氯-N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺的制备于干燥的反应瓶中，加入l,3-二氨基-2-丙醇9.1g(lOOmmol)，二氯甲垸100mL，然后滴加三乙胺10mL，搅拌5min溶解后，加5.6g(50mmol)氯乙酰氯的50mL二氯甲垸溶液，搅拌反应1h，反应毕，停止反应，过滤除掉固体，滤液分别用稀碱液、稀酸液、水洗涤，干燥后减压浓缩，得产物6.9g，收率83.1%。实施例2(^-3-乙酰硫基-l-N-G-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基卜吡咯烷的制备于干燥反应瓶中将8.3g(50mmol)2-氯-N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺溶于100mL干燥DMF中，然后加入(5>3-乙酰硫基-吡咯烷7.3g(50mmol)，加毕，再于0。C下加入氢化钠1.5g(60mmol)，保温反应2h，然后升温至40'C搅拌反应1h，停止反应，冷至室温后加入100mL乙酸乙酯和100mL水萃取，水层用乙酸乙酯提取两次(50mLx2),合并有机层，用饱和的NaCl水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，减压回收溶剂，得产物9.0g，收率65.6%。实施例33-乙酰硫基-l-N"3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基l-氮杂环丁烷的制备制备方法参考实施例2，投3-乙酰硫基-氮杂环丁垸6.6g(50mmo1)，8.3g(5Ommo1)2-氯-N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺，得产物8.2§，收率62.4°/0。实施例4(5)-3-巯基-l-N-(3-氨基-2-丙醇-l-基、-乙酰胺-l-基1-吡咯烷的制备于干燥的反应瓶中加入(5)-3-乙酰硫基-l-[N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基]-吡咯烷ll.Og(40mmo1)，用200mL四氢呋喃溶解，加入30%的甲醇钠/甲醇溶液8.0g，升温至40'C，搅拌反应2h，分出有机相，经水洗、干燥、浓縮，剩余物用乙酸乙酯-乙醇重结晶，得产物7.4g，收率78.9%。实施例53-巯基-l-N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基卜氮杂环丁烷的制备制备方法参考实施例4，投3-乙酰硫基-l-[N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基]-氮杂环丁烷10.5g(40mmo1)，得产物6.5g，收率74.3%。实施例6(4及,5&65V3-qy)-l-nV-G-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基l-吡咯烷-3-基l硫基-6-(1/)-1-羟乙基1-4-甲基-7-氧-1-氮杂双环3.2.01庚-2-烯-2-羧酸对硝基苄酯的制备于干燥反应瓶中，加入(4凡5&65)-3-二苯氧磷酰氧基-6-[(li)-l-羟乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮杂双环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸对硝基苄酯11.9§(20mmo1)的乙腈120mL溶液冷至-lO。C以下，加入二异丙基乙胺5mL和(5)-3-巯基-l-[N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基]-吡咯烷5.1g(22mmol)的乙腈80mL溶液，0"C搅拌15h，反应完毕后，加乙酸乙酯300mL稀释，依次用水、12饱和盐水洗，有机层干燥、浓缩，得产物7.0g，收率60.4%。实施例7(4R,5&6S)-3-14N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基l-氮杂环丁烷-3-基l硫基-6-『(11)-1-羟乙基1-4-甲基-7-氧-1-氮杂双环3.2.01庚-2-烯-2-羧酸对硝基苄酯的制备制备方法参考实施例6，投(4i,5&65)-3-二苯氧磷酰氧基-6-[(l及)-l-羟乙基]-4-甲基-7-氧-1-氮杂双环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸对硝基苄酯11.9g(20mmo1)，3-巯基-l-[N-(3-氨基-2-丙醇小基)-乙酰胺-l-基]-氮杂环丁垸4.8g(22mmo1)，得产物6.4g，收率56.5%。实施例8(4J,5&6^-3-aSM-N-G-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基l-吡咯烷-3-基l硫基-6-1(1及)-1-羟乙基1-4-甲基-7-氧-1-氮杂双环3.2.01庚-2-烯-2-羧酸(化合物2)的制备将5.8g(10mmol)的(4/,5&65)-3-[(35)-l-[N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基]-吡咯烷-3-基]硫基-6-[(1^)-1-羟乙基]-4-甲基-7-氧小氮杂双环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸对硝基苄酯溶于100mLTHF和水50mL的混合液中，加入10%钯-炭2g，于40°C、3MPa氢压下搅拌反应2h，滤除钯炭，滤液中加入THF150mL，分层，收集水层，再向THF中加入水溶液20mL，静置，分出水层，重复操作1次，水相合并，0。C慢慢滴入乙醇300mL，-l(TC搅拌lh，过滤，滤饼用水-乙醇重结晶，得白色晶体2.2g，收率48.7%。分子式C19H3QN406S分子量442.53元素分析实测值C,51.33%;H,7.09%;N，12.35%;S,7.67%理论值C,51.57%;H，6.83%;N，12,66%;S，7.25%氢谱(S/ppm，DMSO-d6):S11.25(lH，brs),8.14(1H，brs),5.24(2H,brs),4.11(1H,m),3.70(1H,m),3.60陽3.52(4H,m),3.41(1H,t),3.26(2H,m),3.12(1H,t),3.00-2.92(3H,m),2.75-2.60(3H,m),2.35-2.10(4H,m),1.24(3H，d),U3(3H,d)实施例9f4及,5&65)-3-fl-N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基l-氮杂环丁烷-3-基l硫基-6^1及)-1-羟乙基1-4-甲基-7-氧-1-氮杂双环3.2.01庚-2-烯-2-羧酸(化合物l)的制备制备方法参考实施例8，投(4凡5&65)-3-[l-[N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基]-氮杂环丁垸-3-基]硫基-6-[(1及)-1-羟乙基]-4-甲基-7-氧-1-氮杂双环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸对硝基苄酯5.6g(lOmmol)。得产物1.9g，收率44.5%。分子式C1SH28N406S分子量428.5元素分析实测值C，50.12%;H,6.90%;N，12.79%;S，7.71%理论值C,50.45%;H,6.59%;N,13.08°/。；S，7.48%氢谱(S/ppm，DMSOd6):SlU2(lH,bre),8.09(1H,brs),5.25(2H，brs),4.07(3H,m),3.79(2H,q)，3.62隱3.50(4H^m),3.41(1H,t)，326(4H,m),3.16(1H,t),2邻-2.90(2H^),2.69(1H,q)，1.21(3H,d)，U2(3H，d)实施例10f4及,5S，65V3-ayM-N-f3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基l-吡咯烷-3-基l硫基-6-(1们-1-羟乙基1-4-甲基-7-氧-1-氮杂双环3.2.01庚-2-烯-2-羧酸钠(化合物2钠盐)的制备将(4/,5&65)-3-[(35)-1-|^-(3-氨基-2-丙醇-1-基)-乙酰胺-1-基]-吡咯垸-3-基]硫基-6-[(17)-1-羟乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮杂双环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸0.88g(2mmo1)，碳酸氢钠0.25g(2.4mmol)和水5mL，加热到50。C，依次加入碘化钠、吡啶，调pH6.5-7.5，搅拌加热到80。C,冷却至室温，再加入适量的丙酮，析出固体，过滤洗涤得白色晶体0.63g，收率67.5%。实施例11(4及,5&65V3-f(3^-14N-(3-氨基-2-丙醇-l-基V乙酰胺-l-基卜吡咯烷-3-基l硫基-6-[(110-1-羟乙基1-4-甲基-7-氧-1-氮杂双环[3.2.01庚-2-烯-2-羧酸新戊酰氧甲酯(化合物2新戊酰氧甲酯)的制备将(4/，5&6S)-3-[(3S)-l-[N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基]-吡咯烷-3-基]硫基-6-[(li)-l-羟乙基]-4-甲基-7-氧-1-氮杂双环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸4.42g(lOmmol)加入60mLN,N-二甲基甲酰胺中，降温至O'C，加入三乙胺lg，搅拌溶解后，加入碘代甲基新戊酸酯2.6g(11mmol)，搅拌lh，反应毕，将反应液倒入150mL水和150mL乙酸乙酯的混合液中，加入碳酸氢钠调节pH至7.5，过滤，分离有机层，用无水硫酸镁干燥，旋干后溶于乙酸乙酯，冰浴下滴加入含有氯化氢的乙醚溶于，析晶过滤，用氯仿重结晶，得产物3.28g，收率58.9%。本发明要求保护的其他化合物参照上述制备方法制备。实施例12本发明化合物无菌粉针的制备处方处方1:化合物1500g右旋糖酐500g_共制备1000支处方2:化合物2钠盐1000g(以化合物2计)共制备薩支制备工艺将制备所用的抗生素玻璃瓶、胶塞等进行无菌处理；按处方称取原料，将无菌粉末置于分装机中分装，随时检测装量；加塞，压盖，成品全检，包装入库。实施例13本发明化合物冻干剂的制备处方化合物2钠盐500g(以化合物2计)甘露醇300g注射用水2000mL_共制备1000支制备工艺将原料与辅料加处方量90%注射用水溶解，调节pH值，补加注射用水至全量，加入配液量0.02%针用活性炭吸附30分钟，过滤脱炭，精滤，半成品化验，灌装，冻干、压塞轧盖。冻干步骤为-35至-45。C预冻5小时，平均每小时1.5。C升温至0'C低温真空干燥，快速升温到30'C高温真空干燥，真空度控制在0.1mm汞柱以下。实施例14本发明化合物片剂的制备处方化合物1500g预胶化淀粉50g低取代羟丙基纤维素40g微晶纤维素40g2%HPMC水溶液适量微粉硅胶4.0g硬脂酸镁4.0g羧甲淀粉钠__共制备画片制备工艺将原料粉碎过100目筛，其余辅料分别过100目筛，备用；按照处方量称取原料和辅料；将羟丙甲纤维素溶于水中制成2%的水溶液备用；将化合物l、预胶化淀粉、低取代羟丙基纤维素、微晶纤维素混合均匀，加入2%HPMC水溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材；过20目筛制颗粒；颗粒在60'C的条件下烘干；干燥好的颗粒加入硬脂酸镁、微粉硅胶和羧甲淀粉钠，过18目筛整粒，混合均匀；取样，半成品化验；按照化验确定的片重压片；成品全检，包装入库。实施例15本发明化合物肠溶片的制备处方1)片芯化合物2新戊酰氧甲酯预胶化淀粉微晶纤维素1%HPMC的50%乙醇水溶液微粉硅胶硬脂酸镁250g(以化合物2计)80g50g4.0g4.0g1000片20g2g4g4g350g共制备2)肠溶层羟丙甲纤维素酞酸酯邻苯二甲酸二丁酯二氧化钛滑石粉80%乙醇水溶液制备方法1)片芯的制备按片芯处方称取原料和辅料，将原料、辅料分别粉碎过IOO目筛将原料、预胶化淀粉、微晶纤维素混合均匀，加入混合制粒机，加入1%HPMC的50°/。乙醇水溶液适量，搅拌15min，制粒；颗粒在低于6(TC的条件下烘干；干燥好的颗粒加入微粉硅胶和硬脂酸镁，整粒，混合均匀；取样，半成品化验；按照化验确定的片重压片；2)肠溶层的制备将羟丙甲纤维素酞酸酯加入搅拌中的80%乙醇水溶液中，搅拌至溶解，在搅拌状态下加入邻苯二甲酸二丁酯、二氧化钛、滑石粉，搅拌15min，匀浆20分钟，过尼龙筛，得肠溶包衣液；3)包衣用配制的肠溶包衣液在连续搅拌下对片芯进行喷雾包衣，包衣增重为片芯的8-10%，包衣时进风温度控制在45°C，片床温度控制在3(TC，雾化压力为0.2MPa。实施例16本发明化合物凝胶剂的制备<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>制备工艺在搅拌下，向水中搅拌加入卡波普940，向甘油和吐温80中加入化合物1，搅拌溶解，加入上述分散体系中；将尼泊金乙酯用乙醇溶解，加入上述溶液中，搅匀，即成水溶性基质的凝胶剂。权利要求1、通式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯或其异构体其中，R1代表氢原子或低级烷基；R2代表羧基，-COOR7或易水解的酯，所述的R7代表羧基保护基；R3、R4、R5分别独立的代表氢原子或低级烷基；R6代表氢原子或羟基保护基；n代表0、1或2。2、如权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯或其异构体其中，RM戈表氢原子，甲基或乙基；W代表羧基，一COOR或易水解的酯，所述的W代表羧基保护基；R3、R4、RS分别独立的代表氢原子，甲基，乙基或丙基；116代表氢原子或羟基保护基；n代表O或1。3、如权利要求2所述的化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯或其异构体其中，W代表氢原子或甲基；f代表羧基，一COOR卩或易水解的酯，所述的117代表羧基保护基；R3、R4、RS分别独立的代表氢原子，甲基或乙基；116代表氢原子或羟基保护基；n代表O或1。4、如权利要求3所述的化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯或其异构体其中，Ri代表甲基；f代表羧基，一COOW或易水解的酯，所述的W代表羧基保护基；R3、R4、RS分别独立的代表氢原子或甲基；R6代表氢原子或羟基保护基；n代表O或1。5、如权利要求4所述的化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯或其异构体，所述化合物选自(4i，5&65>3-[l-[N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺-l-基]-氮杂环丁垸-3-基]硫基-6-[(l及)-l-羟乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮杂双环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸，和(4i,5&6S)-3-[(35)-l-[N-(3-氨基-2-丙醇-l-基)-乙酰胺小基]-吡咯烷-3-基]硫基-6-[(li)-l-羟乙蜀-4-甲基-7-氧-l-氮杂双环[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸。6、如权利要求15任一权利要求所述的化合物，其药学上可接受的盐包括乙酸盐、甲磺酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、硝酸盐、硫酸盐、磷酸盐、钠盐、钾盐、钙盐、镁盐、锌盐。7、如权利要求15任一权利要求所述的化合物，其易水解的酯包括烷酰氧烷基酯，烷氧羰氧基烷基酯，垸氧基甲酯，垸酰氨基甲酯，环烷酰氧垸基酯，环垸氧基酰氧烷基酯，(5-甲基-2-氧代-l,3-间二氧杂环戊烯-4-基)甲基酯，或2-[(2-甲基丙氧基)羰基]-2-戊烯酯。8、包括权利要求15任一权利要求所述的化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯或其异构体与一种或多种药用载体和/或稀释剂的药物组合物。9、如权利要求8所述的药物组合物，为药学上可接受的任一剂型。10、如权利要求15任一权利要求所述的化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯或其异构体，在用于制备治疗和/或预防感染性疾病的药物中的应用。全文摘要本发明属于医药
技术领域：
，具体涉及通式(I)所示的巯基氮杂环烷酰胺醇取代的培南衍生物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯、其异构体，其中R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、n如说明书中所定义；本发明还涉及这些化合物的制备方法，含有这些化合物的药物组合物，以及这些化合物在用于制备治疗和/或预防感染性疾病的药物中的用途。文档编号A61P31/04GK101550138SQ20091013409公开日2009年10月7日申请日期2009年4月2日优先权日2008年4月3日发明者黄振华申请人:山东轩竹医药科技有限公司