专利名称：一种抗肿瘤药物及其提取方法
技术领域：
本发明涉及一种抗肿瘤药物及其提取方法，属于生物制药技术领域。
背景技术：
缬草为败酱科缬草属(Valeriana. L)野生多年生草本植物，全世界约有200种，大多数分布于温带地区，中国约有28种，产于西南、东北、西北，东北约有7种，取材广泛。缬草具有广泛的药理活性及悠久的用药历史，在镇静、抗抑郁等方面都具有很好的效果。癌症是人类面对的一种严重疾病，同时，癌症的治疗是医疗领域的难题，寻找新的抗肿瘤药物是解决这一难题的重要途径。然而，缬草在癌症治疗方面的作用尚无确定的方案。
乙醇提取以及有机溶剂萃取是现有自植物中获取药物活性成分的方法，因植物的不同，提取环节、步骤、工艺参数均不同。如何有效地自缬草中提取抗肿瘤活性成分，尚无有针对性的方案。
发明内容
本发明的目的在于确定一种新的抗肿瘤药物，以及如何自缬草中有效地提取该抗
肿瘤药物。为此，我们发明了一种抗肿瘤药物及其提取方法。 本发明之抗肿瘤药物其特征在于，抗肿瘤活性成分为环烯醚萜。 本发明之抗肿瘤药物提取方法其特征在于，在密闭容器内、在90 IO(TC温度下，
将粗碎缬草用缬草重量5 15倍的乙醇渗漉提取，收集渗漉液；将所述渗漉液在30 78t:
温度下减压去除乙醇得乙醇提取浓縮液；用乙酸乙酯对所述乙醇提取浓縮液进行萃取，得
萃取液；在40 5(TC温度下蒸发去除乙酸乙酯，得抗肿瘤药物环烯醚萜。 在所述方法中，经质谱检测证明产物重量的95%以上为环烯醚萜。 采用MTT法进行环烯醚萜的抗肿瘤活性实验，以Hella细胞、骨髓瘤细胞(SP20)
为例 1、收集对数期癌细胞，调整细胞悬浮液浓度，在96孔板上每孔加入100iil细胞悬
浮液铺板，细胞量至1. OX 103 1. OX 104/孔，用无菌PBS设阴性对照。 2、在5% C02中、在37t:温度下，培养癌细胞16 48小时，用显微镜观察，细胞
量增至1. 0 X 107孔，至癌细胞单层铺满孔底，待癌细胞贴壁后加入环烯醚萜，药物浓度设
5 7个梯度，每孔lOOiU，设5个复孔，同时设置调零孔，对照孔。4、每孔加入20iU 0. 5X的MTT溶液，继续培养4小时，出现结晶物。 5、终止培养，吸去孔内培养液。 6、每孔加入150 iU 二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10分钟，使结晶物充分溶解，在酶联免疫检测仪0D570nm(630nm校准)处测量各孔的吸光值。 从以上实验可知，加入MTT溶液后，通过酶联免疫检测发现，对照组镜下可见大量放射丛状结晶，结晶随药物浓度加大而明显稀少，吸光值显著低于阴性对照蒸馏水组。证明本发明之抗肿瘤药物效果，即抑制癌细胞增殖、诱导细胞凋亡，并且，对Hella细胞的效果明显优于骨髓瘤细胞。 这种效果更直观通过显微镜观察表现出来。试样中癌细胞活跃增殖，全视野密集均匀分布。分两组分别加入现有典型抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶、环烯醚萜，前者作为阳性对照，两组均出现癌细胞明显稀疏减少、部分细胞破碎坏死的现象，并且，随着剂量的增加，细胞死亡数增加。
具体实施例方式
本发明之抗肿瘤药物其特征在于，抗肿瘤活性成分为环烯醚萜，并且尤其是指其中的环烯醚萜酯。 本发明之抗肿瘤药物提取方法其特征在于，在密闭容器内、在90 IO(TC温度下，
将粗碎缬草用缬草重量5 15倍的乙醇渗漉提取，收集渗漉液。缬草选用毛节缬草。所用乙醇浓度为90%以上。将所述渗漉液在30 78t:温度下减压去除乙醇得乙醇提取浓縮液。所得乙醇提取浓縮液过滤后用乙酸乙酯进行萃取，得萃取液；在40 5(TC温度下蒸发去除乙酸乙酯，得抗肿瘤药物环烯醚萜。
权利要求
一种抗肿瘤药物，其特征在于，抗肿瘤活性成分为环烯醚萜。
2. 根据权利要求1所述的抗肿瘤药物，其特征在于，尤其是指其中的环烯醚萜酯。
3. —种用于权利要求1所述抗肿瘤药物提取方法，其特征在于，在密闭容器内、在90 IO(TC温度下，将粗碎缬草用缬草重量5 15倍的乙醇渗漉提取，收集渗漉液；将所述渗漉 液在30 78t:温度下减压去除乙醇得乙醇提取浓縮液；用乙酸乙酯对所述乙醇提取浓縮 液进行萃取，得萃取液；在40 5(TC温度下蒸发去除乙酸乙酯，得抗肿瘤药物环烯醚萜。
4. 根据权利要求3所述的抗肿瘤药物提取方法，其特征在于，缬草选用毛节缬草。
5. 根据权利要求3所述的抗肿瘤药物提取方法，其特征在于，所用乙醇浓度为90%以上。
全文摘要
一种抗肿瘤药物及其提取方法，属于生物制药技术领域。在现有技术中，缬草在癌症治疗方面的作用尚无确定的方案；如何有效地自缬草中提取抗肿瘤活性成分，尚无有针对性的方案。本发明之抗肿瘤药物其活性成分为环烯醚萜。本发明之抗肿瘤药物提取方法为，在密闭容器内、在90～100℃温度下，将粗碎缬草用缬草重量5～15倍的乙醇渗漉提取，收集渗漉液；将所述渗漉液在30～78℃温度下减压去除乙醇得乙醇提取浓缩液；用乙酸乙酯对所述乙醇提取浓缩液进行萃取，得萃取液；在40～50℃温度下蒸发去除乙酸乙酯，得抗肿瘤药物环烯醚萜。本发明应用于抗肿瘤药物的制造和肿瘤疾病的治疗。
文档编号A61P35/00GK101703538SQ200910217948
公开日2010年5月12日 申请日期2009年12月3日 优先权日2009年12月3日
发明者于丽, 李明堂, 王会堂, 王巍, 田坚, 赵丽辉 申请人:长春理工大学